一种西红花组培球茎壮球生根培养基及组培方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物组织培养领域，具体涉及一种西红花组培球茎壮球生根培养基及 组培方法。
【背景技术】
[0002] 西红花（CrocussativusL.)别名藏红花、番红花，是鸾尾科番红花属的多年生植 物，也是一种常见的香料。主要分布在欧洲、地中海及中亚等地，中国北京、山东、浙江及四 川等地有栽培。西红花是一种名贵中药材，以雌蕊上部具有三根红色柱头入药，柱头含有西 红花苷、西红花醛和西红花苦素三种类胡萝卜素衍生物，具有抗癌、抗氧化及降血脂等多种 功效，还具有很好的增强免疫力和抗肿瘤活性。
[0003] 西红花在我国多采用"二段式"栽培方法，即当年5月份将种球从地里挖起，进行 室内培育及采花，11月份将采花后的种球种植到地里。西红花通过分球繁殖，繁殖系数低， 在1. 5左右。西红花球茎一般在8g以上才能开花，球茎越大，开花越多，球茎越小，开花越 少，甚至不开花，但小球茎通过种植技术逐年种植可使之变成能开花的大球茎。据统计lg 以下小球茎经3年逐年种植才能达到6g重种球茎标准；lg重的小球茎要两年；3-5年重的 要1年达此标准。另外，我国种植藏红花面积仅5000亩左右，占市场需求量的20%左右，大 部分还是依赖进口。因此，采用组培快繁的方式繁殖西红花球茎，进而生产高品质西红花花 丝可解决国内市场需求量供应不足的问题。
[0004] 通过组培快繁繁殖西红花球茎还可以结合脱毒技术，解决西红花种植过程中病毒 积累造成的产量及品质下降问题。国内外关于西红花组培快繁的研究已有部分报道，但是 组培球茎的壮球生根培养一直是制约组培球茎质量及移栽成活率的关键。现有的西红花组 培快繁体系通过芽诱导、继代、壮苗、小球茎诱导、生根培养体系获得的组培球茎直径往往 不到0. 5cm;另外，获得的组培球茎根系易发生翘根现象，影响根系吸收培养基养分。这些 情况导致组培球茎移栽成活率低，炼苗期长，大田生长周期长。
[0005] 申请公布号为CN103733994A的专利文献公开了一种东方百合组培苗壮苗的方 法，包括：取东方百合无菌苗的鳞茎，将鳞片置于诱导培养基中进行芽诱导培养；诱导出芽 后，将芽接至生根壮球培养基中进行培养，获得组培苗；其中，所述生根壮球培养基的组成 为：MS粉，4-6g/L;鹿糖，60-70g/L;琼脂，6-8g/L;多效唑，5X10 4-5X10 3mm〇 1/L。该发明 方法能够促进组培苗鳞茎的膨大或/和增重，从而可获得健壮的组培苗，缩短生产周期，节 约成本。
[0006] 西红花组培工厂化生产中，如何通过优化培养基配方，培养膨大的球茎，从而改善 组培球茎质量、提高移栽成活率、缩短组培球茎在大田生长周期，是亟待解决的技术问题。
【发明内容】
[0007] 本发明提供一种西红花组培球茎壮球生根培养基，能促进西红花组培球茎膨大和 生根，改善组培球茎的质量，提高移栽成活率，满足市场需要。
[0008] 为解决上述技术问题，本发明提供了一种西红花组培球茎壮球生根培养基，所述 培养基以LS培养基为基础培养基，每升培养基中含有：卡拉胶6_8g、白糖40_60g、活性 炭0. 1-0. 5g、香蕉肉20_40g、马铃薯泥10_30g、萘乙酸0. 1-lmg、吲噪丁酸l_5mg、多效挫 l-5mg，pH值 5. 8-6. 0。
[0009] 本发明的西红花组培球茎壮球生根培养基采用LS(Linsmaier&Skoog)培养基作 为基础培养基，与组培生产中使用最普遍的培养基MS(Murshig e&Sk〇〇g)培养基基本成分 相比，LS培养基去掉了甘氨酸、盐酸吡哆醇和烟酸，适合于草本植物的组织培养。
[0010] 所述香蕉肉的制备方法为香蕉剥皮取其果肉，加水用搅拌机搅成糊状。
[0011] 所述马铃薯泥的制备方法为把马铃薯洗净去皮，按质量比1 :5的比例加水，煮沸 后用搅拌机搅成糊状。
[0012] 萘乙酸（1-Naphthaleneacetic acid，NAA)是一种易溶于有机溶剂的无色固体，是 一种植物生长素类激素，常用于商用的发根粉或发根剂中。
[0013] 吲噪丁酸（3-Indolybutyric acid，IBA)是一种白色结晶固体，易溶于乙醇等有机 溶剂，是一种植物生长素类激素，促进植物根系发育。
[0014] 多效挫（Paclobutrazol)是一种高效低毒的植物生长延缓剂，抑制生物体内赤霉 素的合成，可用于培养健壮的组培苗。在百合、马蹄莲及唐菖蒲的组培中已被证实可促进球 茎膨大。
[0015] 活性炭（AC)对酚类及其氧化物具有很强的吸附性，已被广泛应用于植物组织培 养中，在植物组织培养生根过程中可提供生根的暗环境，防止褐变，提高培养体内可溶性蛋 白和总糖的含量。
[0016] 卡拉胶（Carrageenan)是从麒麟菜、石花菜、鹿角菜等红藻类海草中提炼出来的 亲水性胶体，为白色或浅褐色颗粒或粉末，与琼脂粉（Agar)作用相同，常被用于植物组培 固体培养基中作为支持物。
[0017] 白糖能支持绝大多数植物离体培养物的旺盛生长，因此被作为植物组织培养的标 准碳源而广泛应用，可在一定程度上减少微生物的污染。
[0018] 优选的方案，每升培养基中含有：萘乙酸0. 4-0. 6mg、吲哚丁酸2-3mg、多效唑 2_3mg〇
[0019] 更为优选的方案，每升培养基中含有：卡拉胶7g、白糖50g、活性炭0. 2g、香蕉肉 30g、马铃薯泥20g、萘乙酸0. 5mg、吲噪丁酸3mg、多效唑2mg，pH值为5. 8。
[0020] 本发明提供了一种西红花的组培方法，包括以下步骤：
[0021] (1)取西红花丛生芽，接种至诱导培养基中，诱导培养获得球茎；
[0022] (2)将所述球茎接种至所述的培养基中，培养至球茎直径不小于10_。
[0023] 所述诱导培养基以LS培养基为基础培养基，每升诱导培养基含有：萘乙酸 0? 1-lmg、白糖 40-60g、琼脂粉 6-8g，pH值为 5. 8。
[0024] 优选的方案，每升诱导培养基含有：萘乙酸0. 5mg、白糖50g、琼脂粉7g。
[0025] 步骤⑴中，诱导培养的条件为：温度20±2°C，每天12h光照，光照强度15001ux。
[0026] 步骤⑵中，培养条件为：温度20±2°C，每天12h光照，光照强度15001ux。
[0027] 步骤（1)中，诱导培养至球莖不大于5mm。
[0028] 与现有技术相比，本发明的有益效果为：
[0029] (1)本发明培养基配方中添加了促进生根的香蕉肉和促进壮苗的马铃薯，获得的 组培球茎生根效果好、球茎生长健壮，而且根系发达，不易翘根，提高了移栽成活率。
[0030] (2)本发明培养基中添加了促进球茎膨大的多效唑，获得的组培球茎直径可达 10. 5_，约为不使用壮球培养基的2. 2倍，提高了组培球茎的质量，缩短了球茎的大田生长 周期。
[0031] (3)本发明培养基中采用卡拉胶作为固体培养基支持物，与常用的琼脂粉相比，不 仅生根效果好，而且价格便宜。
【具体实施方式】
[0032] 下面结合具体实施例进一步阐释本发明。
[0033] 实施例1
[0034] (1)配培养基：
[0035] 每升