一种通过组织培养繁育树莓苗的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种种子育苗方法，特别涉及一种通过组织培养高质量繁育树莓苗的方法。
【背景技术】
[0002]树莓，又称覆盆子，属蔷薇科悬钩子属，是一种多年生小灌木类落叶果树。树莓的适应性广，长势强。在我国北方地区分布广泛，树莓是当今世界发展最为迅速、集营养与保健于一身的第三代黄金水果。目前对树莓的研究和开发主要集中于树莓引种和果实的加工利用。树莓的繁殖方法分有性繁殖和无性繁殖两种。有性繁殖变异性大，一般用于培育新品种，无性繁殖以组织培养最为常用。
[0003]常规培养基内容物培养出的苗木，繁育能力差，且果实小，易脱落，产量低。通过对接种培养基、增殖培养基及生根培养基配方的调整，可以较好的提高种苗的繁育能力，且种苗栽种后，成果率高，质量好。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种成活率高的通过组织培养繁育树莓苗的方法。
[0005]本发明采用的技术方案是:一种通过组织培养繁育树莓苗的方法，步骤如下:
[0006]1)取带芽的树莓苗茎尖，去掉叶片后，用流水冲洗40min ;若材料表面带有绒毛，用皂液或吐温洗涤后再用流水冲洗40min ；
[0007]2)消毒处理:消毒处理可以采用三种方法:①将清洗后的材料用70 %的酒精灭菌10-30s,再用无菌水冲洗5-8次；或，②用70 %酒精灭菌10s左右，向其中倒入无菌水，使酒精浓度降低至30-40%，灭菌5-lOs，再用9-10 %的次氯酸钙溶液灭菌5_20min，最后用无菌水冲洗5-8次；或，③用70 %酒精灭菌10s左右，再用0.1-1 %的氯化汞溶液灭菌2-10min，最后用无菌水冲洗5-8次。
[0008]3)接种培养:经消毒后的材料，在无菌的条件下接种于接种培养基中，于25?30°C下，每天光照约12h，培养20?40天；
[0009]优选的，接种培养基是:以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入6-苄基嘌呤0.5mg、白砂糖30g和琼脂粉4g。
[0010]4)增殖培养:然后于增殖培养基中，于25?30°C下，每天光照约12h，培养40_50天;
[0011]优选的，增殖培养基是:以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入6-苄基嘿呤1.0mg和卩引哚乙酸0.lmgo
[0012]5)生根培养:转入生根培养基中诱导生根，培养20-30天至每株生根4?6条，根长2?3cm ；
[0013]优选的，生根培养基是:以1/2MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入吲哚丁酸0.2mg、康基腺嘌呤0.lmg、白砂糖20g和琼脂粉4g。
[0014]6)炼苗与移栽:将生根苗移到大棚，7天后，用温水洗干净琼脂；
[0015]炼苗与移栽根据生根苗的生长势可以选择:①对于根系发达、植株健壮、生长势强的生根苗:将生根苗直接移栽到由栽培土与腐殖土按重量比1:0.5 - 1:2组成的基质中，上覆盖塑料拱棚，温度保持在25°C左右，湿度80 %?90 % ;②对于生长势弱的生根苗，将生根苗直接移栽到由细河沙和腐殖土按重量比1:1组成的苗床中，上覆盖塑料拱棚，温度保持在25 °C左右，湿度80 %?90 %。
[0016]本发明的有益效果是:本发明通过增殖繁殖进行继代培养，增殖系数为10?15，可获得大量无性繁殖的组培苗。通过生根培养，10天后切口处出现明显的白色根状突起，20天后，根长2?3cm,每株生根4?6条,生根率闻达98 %。通过炼苗与移栽，米用特殊的基质及合理的栽培条件，移栽成活率可达95 %以上。
【具体实施方式】
[0017]一种通过组织培养繁育树莓苗的方法
[0018]步骤如下:
[0019]1)田间取材:在生长季节，选择生长健壮、无病虫害、生长旺盛的带芽的树莓苗茎尖，去掉叶片后，分成若干20-30mm的小段,用流水冲洗约40min至干净,如材料表面带有绒毛，加入适量阜液或吐温洗涤，再用流水冲洗40min。
[0020]2)消毒处理:消毒处理可以采用三种方法:①将清洗后的材料用70 %的酒精灭菌10-30s，再用无菌水冲洗5-8次；或，②用70 %酒精灭菌10s左右，向其中倒入无菌水，使酒精浓度降低至30-40%，灭菌5-lOs，然后用9-10 %的次氯酸钙溶液灭菌5_20min，最后用无菌水冲洗5-8次；或，③用70 %酒精灭菌10s左右，再用0.1-1 %的氯化汞溶液灭菌2-10min，最后用无菌水冲洗5_8次。
[0021]3)接种培养:经消毒后的材料，在无菌的条件下剥离出小茎尖，接种于接种培养基中，于25?30°C下，每天光照约12h，培养20?40天；当培养至15?20天时，即可看到开始萌芽，40天左右即可分化出丛生芽；
[0022]接种培养基是:以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入6-苄基嘌呤
0.5mg、白砂糖30g和琼脂粉4g。
[0023]4)增殖培养:40天后将分化的丛生芽切成1.5cm左右的带芽茎段再转入增殖培养基中，于25?30°C下，每天光照约12h，进行继代培养40-50天，增殖系数为10?15，可获得大量无性繁殖的组培苗。
[0024]增殖培养基是:以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入6-苄基嘌呤
1.0mg和卩引哚乙酸0.lmgo
[0025]5)生根培养:转入生根培养基中诱导生根,培养20-30天至每株生根4?6条，根长2?3cm,生根率闻达98 %。
[0026]生根培养基是:以1/2MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入吲哚丁酸0.2mg、康基腺嘌呤0.lmg、白砂糖20g和琼脂粉4g。
[0027]6)炼苗与移栽:将生根苗移到大棚，①对于根系发达、植株健壮、生长势强的生根苗:将生根苗直接移栽到由栽培土与腐殖土按重量比1:1的基质中，上覆盖塑料拱棚，温度保持在25°C左右，湿度80 %?90 % ;②对于生长势弱的生根苗，将生根苗直接移栽到由细河沙和腐殖土按重量比1:1组成的苗床中，上覆盖塑料拱棚，温度保持在25 °C左右，湿度80%?90 %。7天后,用温水洗干净琼脂。
[0028]按照上述方法培育，树莓苗的移栽成活率可达95 %以上。
【主权项】
1.一种通过组织培养繁育树莓苗的方法，其特征在于步骤如下: 1)取带芽的树莓苗茎尖，去掉叶片后，用流水冲洗40min;若材料表面带有绒毛，用皂液或吐温洗涤后再用流水冲洗40min ； 2)消毒处理: 3)接种培养:经消毒后的材料，在无菌的条件下接种于接种培养基中，于25?30°C下，每天光照约12h，培养20?40天； 4)增殖培养:然后于增殖培养基中，于25?30°C下，每天光照约12h，培养40-50天； 5)生根培养:转入生根培养基中诱导生根，培养20-30天至每株生根4?6条，根长2 ?3cm ； 6)炼苗与移栽:将生根苗移到大棚，7天后，用温水洗干净琼脂。2.如权利要求1所述的一种通过组织培养繁育树莓苗的方法，其特征在于:所述的消毒处理是:将清洗后的材料用70 %的酒精灭菌10-30s，再用无菌水冲洗5-8次；或用70 %酒精灭菌10s左右，向其中倒入无菌水，使酒精浓度降低至30-40%，灭菌5-lOs，再用9_10%的次氯酸钙溶液灭菌5-20min，最后用无菌水冲洗5_8次；或用70 %酒精灭菌10s左右，再用0.1-1 %的氯化汞溶液灭菌2-10min，最后用无菌水冲洗5_8次。3.如权利要求1所述的一种通过组织培养繁育树莓苗的方法，其特征在于:所述的接种培养基是:以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入6-苄基嘌呤0.5mg、白砂糖30g和琼脂粉4g。4.如权利要求1所述的一种通过组织培养繁育树莓苗的方法，其特征在于:所述的增殖培养基是:以MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入6-苄基嘌呤1.0mg和吲哚乙酸0.lmgo5.如权利要求1所述的一种通过组织培养繁育树莓苗的方法，其特征在于:所述的生根培养基是:以1/2MS培养基为基本培养基，每升基本培养基中加入吲哚丁酸0.2mg、康基腺嘌呤0.lmg、白砂糖20g和琼脂粉4g。6.如权利要求1所述的一种通过组织培养繁育树莓苗的方法，其特征在于:所述的炼苗与移栽是:将生根苗直接移栽到由栽培土与腐殖土按重量比1:0.5 - 1:2组成的基质中，上覆盖塑料拱棚，温度保持在25°C左右，湿度80 %?90 % ;或者将生根苗直接移栽到由细河沙和腐殖土按重量比1:1组成的苗床中，上覆盖塑料拱棚，温度保持在25 °C左右，湿度80% ?90 %。
【专利摘要】本发明涉及一种通过组织培养繁育树莓苗的方法。采用的技术方案是：将树莓苗茎尖消毒；然后依次于接种培养基、增殖繁育培养基和生根培养基中培养，将生根苗移到大棚，7天后，用温水洗干净琼脂，上覆盖塑料拱棚，温度保持在25℃左右，湿度80﹪～90﹪。本发明通过增殖繁殖进行继代培养，增殖系数为10～15，可获得大量无性繁殖的组培苗。通过生根培养，10天后切口处出现明显的白色根状突起，20天后，根长2～3cm，每株生根4～6条，生根率高达98﹪。通过炼苗与移栽，采用特殊的基质及合理的栽培条件，移栽成活率可达95﹪以上。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105265310
【申请号】CN201410250093
【发明人】王贵虹, 刘富红, 王贵兴
【申请人】王贵虹
【公开日】2016年1月27日
【申请日】2014年6月6日