培养基，移栽到准备好的介质中，移栽完毕后浇足水，然后用薄膜覆盖保湿保温，基质以湿润、不积水为宜，一周后揭膜，适当遮荫和通风换气，每周喷一次稀释10倍的MS大量元素的营养液。
[0029]实施例:
[0030]第一步、种子选取:采收猫屎瓜植株上成熟并且自然开裂的果实，挤出种子，进行清洗后瞭干，剥去外种皮；
[0031]第二步、种子处理:将剥皮后的种子放入温水，进行温水处理，温度为40°C，时间为25小时，温水处理后使用消毒液浸泡，消毒液为0.1 %氯化汞，浸泡时间为4分钟，再用无菌水漂洗8次；
[0032]第三步、培养基处理:诱导种子萌芽培养基为1/2MS培养基附加赤霉素1.0mg/L,增殖培养基为1/2MS培养基附加萘乙酸NAA 0.2mg/L、细胞分裂素6_BA 1.0mg/L、活性炭0.2g/L，生根培养基为1/2MS培养基附加萘乙酸NAA 0.lmg/L、活性炭0.2g/L，调整PH值5.8，培养基配制分装后，进行灭菌处理，灭菌处理条件温度为120°C、压力为1.lkg/cm2，灭菌处理的时间灭菌20min ；
[0033]第四步、接种:将处理后的种子接种到萌芽培养基上，在诱导种子萌发阶段，先在培养室中暗培养，待幼苗形成后再转入光下培养，光照度为20001x，光照时间为12h/d，温度为25°C，当无菌苗高4cm时，将无菌苗分割成含顶芽多个节间的上部茎段和下部茎段，按原生长极性方向分别转接到增殖培养基，选择最适合的外植体材料，在增殖培养基中进行不定芽的诱导，增殖后的不定芽，40%接入新鲜的增殖培养基中进行扩繁，剩余的不定芽接入生根培养基；
[0034]第五步、诱导生根:在不定芽开始展叶时，将其及时分割成单苗转入生根培养基中诱导生根，待单苗生根并形成完整的再生植株；
[0035]第六步、移栽:再生植株需要进行炼苗，炼苗在定植前7天进行，接受散射光，放风降温，减少浇水量，炼苗后进行移栽，洗去基部的培养基，移栽到准备好的介质中，移栽介质选择腐殖质土和河沙混合介质，腐殖质土和河沙的比例为1: 1，移栽完毕后浇足水，然后用薄膜覆盖保湿保温，移栽后薄膜保持湿度90%左右，温度控制在25°C，基质以湿润、不积水为宜，一周后揭膜，适当遮荫和通风换气，每周喷一次稀释10倍的MS大量元素的营养液。猫屎瓜再生苗的移栽基质适应性比较广，但以疏松透气，有机质含量高的基质为佳。
[0036]移栽I个月后观察，植株叶色浓绿，生长健壮，长势良好，再生苗的成活率达到96.
[0037]本发明，以猫屎瓜的种子萌发的无菌苗为外植体，无菌苗上部粗壮茎段是诱导丛生芽的最佳外植体，细胞分裂素和生长素对丛生芽的诱导及生长起着重要的作用。采用猫屎瓜无菌苗茎段诱导丛生芽可提高繁殖系数，选择培养基，调整激素配比，最适宜丛生芽增殖，最适宜芽和根的分化作用，芽生长健壮且高，生长快，产生较多的丛芽，根系很发达，再生苗成活率高，为大量种植提供种苗。
[0038]上述实施例是对本发明的说明，不是对本发明的限定，任何对本发明简单变换后的方案均属于本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种猫屎瓜的组织培养快速育苗方法，包括种子选取、种子处理、培养基处理、接种、诱导生根和移栽，具体步骤如下: (a)种子选取:采收猫屎瓜植株上成熟并且自然开裂的果实，挤出种子，进行清洗后晾干，剥去外种皮； (b)种子处理:将剥皮后的种子放入温水，进行温水处理，温水处理后使用消毒液浸泡，再用无菌水漂洗6?8次； (c)培养基处理:诱导种子萌芽培养基为1/2MS培养基附加赤霉素1.0mg/L，增殖培养基为1/2MS培养基附加萘乙酸NAA 0.2mg/L、细胞分裂素6-BA1.0mg/L、活性炭0.2g/L，生根培养基为1/2MS培养基附加萘乙酸NAA0.lmg/L、活性炭0.2g/L，调整PH值5.8?6.0，培养基配制分装后，进行灭菌处理； (d)接种:将处理后的种子接种到萌芽培养基上，在诱导种子萌发阶段，先在培养室中暗培养，待幼苗形成后再转入光下培养，当无菌苗高3?4cm时，将无菌苗分割成含顶芽多个节间的上部茎段和下部茎段，按原生长极性方向分别转接到增殖培养基，选择最适合的外植体材料，在增殖培养基中进行不定芽的诱导，增殖后的不定芽，20%?40%接入新鲜的增殖培养基中进行扩繁，剩余的不定芽接入生根培养基； (e)诱导生根:在不定芽开始展叶时，将其及时分割成单苗转入生根培养基中诱导生根，待单苗生根并形成完整的再生植株； (f)移栽:再生植株需要进行炼苗，炼苗在定植前5?7天进行，接受散射光，放风降温，减少浇水量，炼苗后进行移栽，洗去基部的培养基，移栽到准备好的介质中，移栽完毕后浇足水，然后用薄膜覆盖保湿保温，基质以湿润、不积水为宜，一周后揭膜，适当遮荫和通风换气，每周喷一次稀释10倍的MS大量元素的营养液。2.如权利要求1所述的一种猫屎瓜的组织培养快速育苗方法，其特征在于:所述步骤(b)中，温水处理的温度为35?45°C，时间为20?30小时；消毒液为0.1 %氯化汞，浸泡时间为3?5分钟。3.如权利要求1所述的一种猫屎瓜的组织培养快速育苗方法，其特征在于:所述步骤(c)中，灭菌处理条件温度为120°C、压力为1.lkg/cm2，灭菌处理的时间灭菌18?25min。4.如权利要求1所述的一种猫屎瓜的组织培养快速育苗方法，其特征在于:所述步骤(d)中，幼苗的光下培养，光照度为20001x，光照时间为10?12h/d，温度为22?26°C。5.如权利要求1所述的一种猫屎瓜的组织培养快速育苗方法，其特征在于:所述步骤(f)中，移栽介质选择腐殖质土和河沙混合介质，腐殖质土和河沙的比例为1:1。6.如权利要求1所述的一种猫屎瓜的组织培养快速育苗方法，其特征在于:所述步骤(f)中，移栽后薄膜保持湿度90%左右，温度控制在25?27°C。
【专利摘要】本发明公开了一种猫屎瓜的组织培养快速育苗方法，包括种子选取、种子处理、培养基处理、接种、诱导生根和移栽，具体步骤如下：(a)种子选取：种子清洗晾干，剥去外种皮；(b)种子处理：温水处理，消毒液浸泡，无菌水漂洗；(c)培养基处理：萌芽培养基，增殖培养基，生根培养基，调整PH值，灭菌处理；(d)接种；(e)诱导生根；(f)移栽：炼苗，移栽到介质中，浇足水。本发明以猫屎瓜的种子萌发的无菌苗为外植体，无菌苗茎段诱导丛生芽可提高繁殖系数，选择培养基，调整激素配比，芽生长健壮且高，生长快，产生较多的丛芽，根系很发达，再生苗成活率高，为大量种植提供种苗。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105028196
【申请号】CN201510361990
【发明人】杨海霞, 吕碧升
【申请人】潘秀娟
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年6月24日