一种哲罗鲑精子激活液及制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及哲罗鲑品种的精子技术领域，具体涉及哲罗鲑精子激活液，同时还涉 及一种哲罗鲑精子激活液的制备方法。
【背景技术】
[0002] 哲罗鲑（Hucho taimen)又称大红鱼，为鲑形目，鲑科，哲罗鱼属，是我国著名的大 型凶猛食肉类冷水性淡水鱼，营养价值高，生长速度快，有较高的经济价值。因生存环境破 坏及大量滥捕，目前我国仅存少量分布于新疆喀纳斯湖和乌苏里江上游及黑龙江呼玛河 段，现为国家二级保护动物，名列《中国濒危动物红皮书》。
[0003] 为了保护哲罗鲑的种质资源，需要对哲罗鲑开展人工驯化繁殖。然而，在人工繁 殖过程中发现哲罗鲑普遍存在雄鱼精液量少，受精率低的问题，直接导致了出苗率低，人繁 效率低下，不利于其种质保护。在鱼类受精过程中，精液从雄鱼性腺排出进入水体中时，即 激活获得运动能力，并游向卵与之结合完成受精；在正常水体中精子激活后运动时间仅为 60s左右，然而在对哲罗鲑精液检测中发现其精子运动时间仅为22s左右。大量研究表明淡 水鱼类精子运动主要由其线粒体呼吸作用产生能量提供，但产生的能量只有少部分用在鞭 毛运动中，大部分能量消耗于精子对外界渗透压的调节当中，不难发现在精子本身原质极 少的情况下，如何减少其在渗透压调节消耗的能量，为精子鞭毛运动提供充足的能量，延长 哲罗娃精子的运动时间，将大大提尚其精子与卵的结合机会，从而提尚受精率。
【发明内容】
[0004] 本发明提供一种哲罗鲑精子激活液及制备方法，本发明解决了如何减少其在渗透 压调节消耗的能量，为精子鞭毛运动提供充足的能量，延长哲罗鲑精子的运动时间，大大提 高其精子与卵的结合机会，提高受精率的问题。
[0005] 对于这一问题，本发明的解决的方法是使用具有一定渗透压的溶液代替原水体对 哲罗鲑精子进行激活，以减少精子内外渗透压差异所带来的能量损耗，延长精子的运动时 间，提升其受精率。
[0006] 为解决上述问题，本发明采用如下技术方案：一种哲罗鲑精子激活液，包含如下原 料：葡萄糖 40. 64-81. 27mmol/L，氯化钠 10. 12-20. 24mmol/L，其中水温：8-ll°C，渗透压： 142.41kpa-284. 81kpa〇
[0007] 优选的是：哲罗鲑精子激活液，包含如下原料：葡萄糖46. 1-75. 85mmol/L，氯化钠 11. 51-18. 96mmol/L，其中水温：8-ll°C，渗透压：161. 5kpa-265. 82kpa。
[0008] 更优选的是：哲罗鲑精子激活液，包含如下原料：葡萄糖54. 18-70. 43mmol/L，氯 化钠 13. 54-17. 60mmol/L，其中水温：8-ll°C，渗透压：189. 87kpa-246. 82kpa。
[0009] 最优的是：哲罗鲑精子激活液，包含如下原料：葡萄糖67. 72mmol/L，氯化钠 16. 93mmol/L，其中水温：8-ll°C，渗透压：237. 31kpa。
[0010] -种哲罗鲑精子激活液的制备方法，该激活液应随配随用，配制方法如下：
[0011] 激活液为如下原料：葡萄糖40. 64-81. 27mmol/L，氯化钠10. 12-20. 24mmol/L，其 中水温：8-11 °C，渗透压：142. 41kpa-284. 81kpa ;配制激活液的溶剂为去离子水或蒸馏水；
[0012] 溶质质量计算公式：溶质质量=溶质量浓度X激活液体积X溶质分子 量 +1000 ;
[0013] 配制步骤：
[0014] (1)根据溶质质量计算公式计算出所配激活液体积所需的葡萄糖质量，称量出该 质量的分析纯葡萄糖放入烧杯中；
[0015] (2)根据溶质质量计算公式计算出所配激活液体积所需的葡萄糖质量，称量出该 质量的分析纯氯化钠与所称量的葡萄糖放入同一烧杯中；
[0016] (3)在烧杯中加入二分之一的激活液体积的去离子水或蒸馏水并搅拌，使烧杯中 的葡萄糖和氯化钠充分溶解，将溶解后的溶解移入与所配激活液体积相同的容量瓶中，需 用少量去离子水或蒸馏水洗涤烧杯两次至三次，将洗涤后溶液并也一同倒入容量瓶中，最 后用去离子水或蒸馏水定容至刻度线处，晃匀。
[0017] 本发明在该激活液中，除了能减少渗透压差带来能量损耗外，还能起到提高精子 活力的作用。因为激活液中含有的大分子与离子物质对精子活力有着一定作用。例如：有 报道表明葡萄糖可以参与精子的三羧酸循环，为精子提供能量同时也起到调节渗透压的作 用；Na+主要对精子的运动有着促进作用。哲罗鲑激活液由葡萄糖、氯化钠组成，这两种物质 使精子生物学特性产生了变化，在对哲罗鲑精液进行镜检中发现，不使用激活液激活的精 液，其精子快速运动激活比例为80%，精子快速运动时间持续22s左右；使用激活液激活的 精液，其精子快速运动激活比例为95%以上，快速运动持续时间最高达到45s。因此，哲罗 鲑精子激活液对提高哲罗鲑精子运动时间有显著的效果。
【具体实施方式】
[0018] 下面用最佳的实施例对本发明做详细的说明。
[0019] 实施例一
[0020] -种哲罗鲑精子激活液的制备方法，该激活液应随配随用，配制方法如下：
[0021] 激活液为如下原料：葡萄糖40. 64-81. 27mmol/L，氯化钠10. 12-20. 24mmol/L，其 中水温：8-11 °C，渗透压：142. 41kpa-284. 81kpa ;配制激活液的溶剂为去离子水或蒸馏水；
[0022] 溶质质量计算公式：溶质质量=溶质量浓度X激活液体积X溶质分子 量 +1000 ;
[0023] 配制步骤：
[0024] (1)根据溶质质量计算公式计算出所配激活液体积所需的葡萄糖质量，使用精度 〇. Olg的电子天平精确称量出该质量的分析纯葡萄糖放入烧杯中；
[0025] (2)根据溶质质量计算公式计算出所配激活液体积所需的葡萄糖质量，使用精度 〇. Olg的电子天平精确称量出该质量的分析纯氯化钠与所称量的葡萄糖放入同一烧杯中；
[0026] (3)在烧杯中加入大致二分之一的激活