一种油菜优异种质资源的培育方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种油菜优异种质资源的培育方法，具体设及一种利用甘蓝型油菜与 甘蓝稼接技术结合小抱子培养培育油菜优异种质资源的方法。
【背景技术】
[0002] 油菜是我国重要的油料和经济作物之一，在国民经济尤其是在食用油的供给方 面，地位显著，目前我国食用植物油需求量大，自给不足，供需矛盾十分突出，因此培育高 产、优质、抗病适宜机械化生产的新品种是油菜育种的主要目标。而收集和创造具有广泛遗 传基础的油菜种质资源材料是油菜新品种选育的前提和基础，可在育种实践中现有可W利 用的优异种质资源十分有限。
[0003] 为了拓展油菜种质资源的遗传基础，创造新的优异种质，通常采用常规种间杂交、 物理诱变、化学诱变、太空诱变、基因转化等技术，尽管人们利用运些技术也已取得了不菲 的业绩，创造出了不少可供利用的优异种质和品种。但常规种间杂交选育技术的杂交结实 率低，甚至亲缘关系较远时往往不能正常结实，且后代优良变异基因难W固定；而物理、化 学和太空诱变不但成本高，诱变因子与剂量难W控制，且后代群体会出现疯狂不定向分离， 后代选育难度大，费工费时；而转基因技术尽管目标性强，但需要开展基因克隆、转化、筛 选、鉴定等大量工作，不但成本高难度大，并且创造的资源难W释放。因此，研究一种简单易 行，优良变异基因可W较快固定，且效率高、成本低的新技术，对广泛开展油菜种质的创新 十分必要。
[0004] 嫁接作为一种植物繁殖的方法，已被广泛应用，但嫁接能使植物种子后代产生变 异的事实，虽在达尔文和米丘林的著作中有过许多描述，但至今却仍未引起人们的重视， 早在达尔文之前的中国古代北魏时期《齐民要术》和明代《本草纲目》就有大量嫁接引起 植物种子后代变异的记载。但到目前为止，对于稼接变异的产生和维持机制的研究还不够 完善，特别是对于稼接变异遗传规律的分析甚少，至今仍未引起人们的重视，而且传统的劈 接、靠接等稼接方法诱导遗传变异的频率较低，化穗物种细胞和组织间的交流有限。
【发明内容】
阳〇化]本发明所要解决的技术问题是，提供一种利用甘蓝型油菜与甘蓝稼接引起的油菜 种子后代变异，并结合利用小抱子培养技术快速纯合稳定变异目标性状，小抱子培养获得 DH分离群体，W农艺性状特征、抗病抗逆性、生育期和含油量等主要性状经多点田间表型特 征鉴定筛选培育油菜新种质的新方法。
[0006] 本发明解决其技术问题采用的技术方案是，一种油菜优异种质资源的培育方法， 包括W下步骤：
[0007] (1)F1群体变异种群的获得甘蓝为化木，W甘蓝型油菜为接穗，通过斜面插接 的稼接方法稼接，接穗成活后开花前套袋自交，获得F1群体变异种群；
[0008] (2)F2群体子代变异源的获得：从F1的子代分离群体中筛选变异植株，自交获得 F2群体种子；
[0009] (3)目标性状特异种质资源的获得：从F2的子代分离群体中筛选目标性状优良的 单株，再经小抱子培养获得DH分离群体后代中筛选农艺性状特征、抗病抗逆性、生育期和 含油量目标性状优良及特殊性状突出的材料。
[0010] 进一步，步骤（1)中，所述稼接方法为在3~4月份，选择与甘蓝型油菜抽臺期相 近的甘蓝，在臺高20~30cm时期稼接；选择与臺直径相近的甘蓝和甘蓝型油菜，W甘蓝为 化木，甘蓝型油菜为稼接接穗，采用消毒的刀具把化木甘蓝和接穗甘蓝型油菜臺茎在距下 部10~15cm处平切掉，采用斜面插接的方法，将接穗和化木的稼接面切成长2~3cm，斜度 为45~50度的平滑斜面，在平行于斜面沿臺茎中线劈开长1.8~2. 2cm，将接穗的内切斜 面体插入化木的内切中线中，对齐斜面，使两斜面充分紧密接触，然后用无菌封口膜封缠。
[0011] 本发明W甘蓝为化木，W甘蓝型油菜为接穗，通过稼接的方法获得接穗子代变异 的群体，变异群体中目标性状优良单株用小抱子培养的方法获得的DH分离群体，并在后代 中筛选农艺、抗逆性及含油量等目标性状优良及特殊性状突出的材料，最终获得纯合稳定 油菜优异种质资源。该方法操作简便、取材广泛、无风险、成本低、不需要有性杂交和其他一 些特殊处理，获得纯合稳定材料的时间短，且变异类型极其丰富等优势。
【附图说明】
[0012] 图1为甘蓝做化木，甘蓝型油菜为接穗的稼接体田间长势图。
[001引图2用本方法获得的矮杆、多分支、抗倒性好的材料单株图。
[0014] 图3用本方法获得的无花瓣材料花序图。
[0015] 图4用本方法获得的深缺刻花叶单株图。
[0016] 图5用本方法获得的白花性状植株花序图。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例对本发明进一步加W说明。 阳〇1引 实施例1
[0019] 1、F1群体变异种群的获得：结球甘蓝自交系MP02yyz-l在8月20号播种，甘蓝型 油菜自交纯合系K407、加219和青油14在9月15号播种，并按相应的试验密度水平定植； 次年3~4月份，选择和甘蓝型油菜抽臺期相近的甘蓝单株，在臺高20~30cm时期稼接，稼 接时选取臺直径相近的甘蓝和甘蓝型油菜，W甘蓝为化木，甘蓝型油菜为稼接接穗，用75% 的酒精消毒处理刀具和手，把化木甘蓝和接穗甘蓝型油菜臺茎在距下部10~15cm处平切 掉，采用斜面插接的方法，将接穗和化木的稼接面切成2cm长的斜度为45度的平滑斜面，在 平行于斜面沿臺茎中线劈开2cm长，将接穗的内切斜面体插入化木的内切中线中，对齐斜 面，使两斜面充分紧密接触，然后用封口膜封缠；稼接完成后遮阴5~7天，并每天喷水保 持一定的湿度，减少接穗因蒸腾作用失去的水分，利用该方法稼接成活率均在98%W上，稼 接成活后加强后期管理，及时去除掉化木甘蓝发的侧芽，W保障接穗充足的营养供给，为接 穗获得变异种子提供充足的能量，接穗成活后形成新的花蕾，开花前套袋自交，见图1，获得 F1种子在第二年播种。
[0020] 2、F2群体子代变异源的获得：在F1代群体中出现变异，有两种表现型，一种为与 接穗的表现型一致，另一种则与化木相似的偏甘蓝类型，表现为叶色深蓝、叶子直立上挺， 分枝多，角粒数少但角果数多，长势强，见表1，运一类型为后代群体主要的变异源，W此为 标准3种甘蓝型油菜和甘蓝稼接变异率分别为10%、3. 125%和20%。选择变异株自交，次 年播种。
[0021] 表1-稼接F1代变异株考种结果
[0022]
[0023] 3、目标性状特异种质资源的获得：F2群体子代中，变异类型则非常丰富，根据农 艺性状大多数变异可分为3种类型