马铃薯脱毒苗液体培养装置及液体培养快繁方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及马铃薯的繁殖技术，属于农业种植技术领域，具体涉及马铃薯脱毒苗液体培养装置及其液体培养快繁方法。
【背景技术】
[0002]目前，马铃薯脱毒苗的培养，主要包括固体、半固体或液体培养基的形式，常用的组培苗固体及半固体培养存在劳动力密集、成本高、自动化程度低等缺点。自20世纪80年代中期开始，西方国家开始尝试着采用液体培养基的形式对马铃薯脱毒苗进行液体培养。目前，马铃薯液体培养一般采用静置式液体培养基进行，其具有适应大规模生产、降低成本及减少劳动力成本等优势。但是由于液体培养基为静置式，导致液体培养中随着时间的增长，液体培养基有效成分被苗吸收完后难以及时有效补充新鲜养分，常造成畸形苗及试管苗发育不良等问题，严重影响试管苗的培养，增加了培育成本。
[0003]此外，目前的马铃薯试管苗液体培养一般采用玻璃瓶单独静置式培养的方式，而对玻璃瓶内培养基的操作会存在人工及时间成本高昂的问题，造成效率低及成本高。因此，设计一套适合马铃薯液体培养的培养装置，建立新的培养方法体系，对于减少人力成本耗费，实现自动化培养，降低大规模商业化运营成本，均具显著的社会效益和经济效益。
【发明内容】
[0004]为了解决上述马铃薯试管苗静置式液体培养时易造成试管苗发育不良及人工培养成本高的技术问题，本发明提供一种试管苗良苗率高、自动化程度高且人工培养成本低的马铃薯脱毒苗液体培养装置及其液体培养快繁方法。
[0005]本发明提供一种马铃薯脱毒苗液体培养装置，包括营养池、苗床及培养瓶；所述营养池包括池体及保护膜，所述池体一端开口且具收容空间，所述保护膜覆设于所述池体的开口端，所述池体包括进液口、排液口和控制阀，所述进液口和所述排液口分别设于所述池体两端并与其内部连通，所述控制阀分别设于所述进液口和所述排液口 ；所述苗床设于所营养池内，所述苗床包括床本体及调节所述床本体在所述营养池内上升或下降的升降调节装置，所述床本体包括定植面板和多个均匀间隔排列设置的定植孔，所述定植孔贯穿所述定植面板；所述培养瓶通过所述定植孔设于所述苗床，所述培养瓶包括多个气孔和过滤纸，所述气孔贯穿设于所述培养瓶的侧壁和瓶底，所述过滤纸设于所述培养瓶内并铺设于瓶底。
[0006]在本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养装置的一种较佳实施例中，所述保护膜为PVC 膜。
[0007]在本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养装置的一种较佳实施例中，所述升降调节装置为滑轨式升降调节装置。
[0008]在本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养装置的一种较佳实施例中，所述培养瓶数量为多个，分别可拆卸式设于所述苗床的定植孔。
[0009]本发明提供了一种马铃薯脱毒苗液体培养快繁方法，包括如下步骤:
[0010]步骤一、提供马铃薯脱毒苗液体培养装置、液体培养基及脱毒马铃薯试管苗；
[0011]所述马铃薯脱毒苗液体培养装置包括营养池、苗床以及培养瓶；
[0012]所述营养池包括池体及保护膜，所述池体一端开口且具收容空间，所述保护膜覆设于所述池体的开口端，所述池体包括进液口、排液口和控制阀，所述进液口和所述排液口分别设于所述池体两端并与其内部连通，所述控制阀分别设于所述进液口和所述排液口 ；
[0013]所述苗床包括床本体及调节所述床本体在所述营养池内上升或下降的升降调节装置，所述床本体包括定植面板和多个均匀间隔排列设置的定植孔，所述定值孔贯穿所述定植面板；
[0014]所述培养瓶包括多个气孔和过滤纸，所述气孔贯穿设于所述培养瓶的侧壁和瓶底，所述过滤纸设于所述培养瓶内并铺设于瓶底；
[0015]所述液体培养基的配制:以MS培养基为基础培养基，并在IL MS培养基中添加如下组分，并使各组分的终浓度如下:NAA0.05-0.lmg/L、6-BAl.0-1.5mg/L、蔗糖30_40g/l，并调节PH值至5.6-5.8 ；
[0016]步骤二、将所述脱毒马铃薯试管苗剪切和消毒灭菌处理后进行接种；
[0017]具体地，将所述脱毒马铃薯试管苗按芽点剪切为长度为l_3cm的的芽段，置于滤纸吸干水分，用HgCl2、NaC10及70-75%的酒精进行消毒灭菌处理，再用无菌水冲洗4-5次，并用滤纸吸干水分，最后接种至所述培养瓶内的过滤纸上；
[0018]步骤三、将步骤一配制好的所述液体培养基通过所述进液口输送至所述池体内，并维持一定高度；
[0019]步骤四、将所述培养瓶设于所述苗床的定植孔，并通过所述升降调节装置调整所述苗床的垂直高度，使得所述池体内的液体培养基刚好没过所述培养瓶内的过滤纸；
[0020]步骤五、首先采用静置液体培养2-3d至牙段开始生根后，然后再采用液体间歇培养 5-10do
[0021]在本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养快繁方法的一种较佳实施例中，在步骤一中，所述马铃薯脱毒苗液体培养装置及所述液体培养基在使用前进行真空灭菌15_20min，真空度为0.1-0.15Mpa，灭菌的温度为121。。-128。。。
[0022]在本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养快繁方法的一种较佳实施例中，在步骤五中，所述静置液体培养为通过调节所述苗床的高度，使得所述池体内的液体培养基没过所述滤纸上的芽段0.2-0.5mm，并在25±2°C，光照时间12_16h/d，光照强度2000-3000LUX条件下对所述培养瓶内的芽段进行光照培养；
[0023]所述液体间歇培养为通过所述升降调节装置间歇式调节所述苗床的高度，使得所述池体内的液体培养基没过所述过滤纸上的芽段0.2-0.5mm，或者处于没有没过所述培养瓶内的过滤纸的状态，间歇式的调节频率为3-5次/天，每次没过滤纸的时间维持在5-10分钟，在自然光条件下进行光照培养。
[0024]在本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养快繁方法的一种较佳实施例中，在步骤五中，还包括定期对所述液体培养基进行成份检测。
[0025]相较于现有技术，本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养装置及其液体培养快繁方法具有以下有益效果:
[0026]—、通过马铃薯脱毒苗液体培养装置的设计，简化了马铃薯脱毒苗液体培养的步骤，减少了人力成本耗费，降低了运营成本，实现了显著的社会效益和经济效益；通过马铃薯脱毒苗液体培养装置的进液口和排液口的设计，使得营养池内的液体培养基有效成本能够得到有效及时的补充，避免试管苗的营养不良而出现畸形苗的情况，提高了试管苗的成活率及良苗率；
[0027]二、通过针对性设计的基于马铃薯脱毒苗液体培养装置的快繁方法，采用静置液体培养和液体间歇培养，配合针对性设计的液体培养基及培养条件，使得培养周期缩短22% -30%，且培养出来的试管苗具有长势良好(如茎粗、株高、叶面积、干重等指标均有显著提升)、病毒感染率低及易于后需进一步培养的优势；
[0028]三、通过利用马铃薯脱毒苗液体培养装置对试管苗进行间歇式浸没培养，液体培养基由原有的可继代两次增加至三次，大大降低了成本，同时在液体间歇培养阶段为在自然光照条件下培养，可以减少电耗。
【附图说明】
[0029]为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图，其中:
[0030]图1是本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养装置的结构示意图；
[0031]图2是图1所示马铃薯脱毒苗液体培养装置的苗床结构示意图；
[0032]图3是图1所示马铃薯脱毒苗液体培养装置的培养瓶结构示意图；
[0033]图4是本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养快繁方法的步骤流程图。
【具体实施方式】
[0034]下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0035]本试验以甬薯3号马铃薯的脱毒试管苗为供试材料，由浙江宁波农业科学院研究院开发中心提供。
[0036]本试验在浙江省宁波市农科院组织培养中心内进行。
[0037]请参阅图1，是本发明提供的马铃薯脱毒苗液体培养装置的结构示意图。所述马铃薯脱毒苗液体培养装置I包括营养池11、供给系统13、苗床15以及培养瓶17，所述供给系统13与所述营养池11相连通，用于向所述营养池11供给液体培养基，所述苗床15呈水平方向设于所营养池11内，所述培养瓶17可拆卸式设于所述苗床15。
[0038]所述营养池11用于盛放液体培养基，其包括池体111及覆设于所述池体111的保护膜113。
[0039]所述池体111 一端开口且具收容空间，所述池体111包括进液口 1111、排液口1113和控制阀1115，所述进液口 1111和所述排液口 1113分别设于所述池体111的两端并与其内部连通，所述控制阀1115分别设于所述进液口 1111和所述排液口 1113，所述进液口1111用于所述营养池11内液体培养基输入及更换液体培养基，所述排液口 1113用于所述营养池11内液体培养基排出及更换液体培养基，所述控制阀1115的数量为两个，用于所述营养池11内液体培养基总容量控制。
[0040]所述保护膜113覆设于所述池体111的开口端，用于所述营养池11内部与外界环境的隔离，所述保护膜113为PVC膜。
[0041]所述供给系统13 —方面可为所述营养池11提供液体培养基，另一方面可回收液体培养基并用于其他作物，减少环境污染。所述供给系统13包括循环罐131、循环进液管133、循环栗135及循环出液管137。
[0042]所述循环罐131用于储存液体培养基，所述循环进液管133 —端连接所述循环罐131，另一端连接所述进液口 1111，所述循环进液管133的管道上安装有所述循环栗135，所述循环栗135与所述进液口 1111之间安装有所述控制阀1115 ;所述循环出液管137 —端连接所述循环罐131，另一端连接所述出液口 1113，所述循环出液管137上也安装有所述控制阀1115。
[0043]请再结合参阅图2，图2为图1所示马铃薯脱毒苗液体培养装置的苗床结构示意图。所述苗床15包括床本体151及调节所述床本体151在所述营养池11内上升或下降的升降调节装置153，所述床本体151包括定植面板1511及定植孔1513，所述定植孔1513为多个，均匀间隔排列且贯穿所述定