辣椒中抗鞑靼内丝白粉菌的抗性的制作方法
【专利说明】辣椒中抗飽鞋内丝白粉菌的抗性
[0001] 本发明设及表达抗病原体抗性的植物。更特别地，本发明设及辣椒（pepper)植 物，其对鞍醒内丝白粉菌化eveillula taurica)有抗性。进一步，本发明设及来源于抗性 辣椒植物的种子、后代和繁殖材料，W及抗性植物作为种质在育种程序中的应用。
[0002]甜椒植物属于辣椒属（Capsicum)，其是茄科（Solanaceae)的一部分。辣椒属 (Capsicum)物种原产于南美洲、中美洲和北美洲的一部分，在那里它们已被种植了数千年， 并且现在在全球种植。辣椒述（Capsicum)的一些成员被用作调料、蔬菜、和药物。
[0003] 辣椒属（Capsicum)植物的果实有许多不同的名称，取决于地点和类型。种 Capsicum 曰nnuum 是五种马川养的卖束椒属（Capsicum)的种（Capsicum 曰nnuum, Capsicum b曰cc曰turn, Capsicum ch曰coense, Capsicum chinense, Capsicum frutescens)中最常见 的并被广泛种植的。它包含几个品种群，其中在北欧和美国最常种植的是灯笼椒化ell P巧per)(也被称为红辣椒（paprika)或甜椒（sweet P巧per))。灯笼椒可W生吃、烹调、不 成熟的或成熟的，并且可W加工成粉、酱、和萨尔萨辣调味汁（salsas)。其果实开始多数是 绿色的，但在成熟的过程中变成红色、黄色、澄色、紫色、白色或褐色。
[0004] 可W在敞田、溫室或遮荫棚中，在大范围的不同的气候条件下种植辣椒，但是在溫 暖干燥的条件下将最成功。
[0005] 辣椒中由鞍醒内丝白粉菌引起的白粉病（powdery mildew)感染在辣椒生产区域 成为日渐增长的问题。鞍醒内丝白粉菌引起多种作物如辣椒、番茄、洋劑、黄瓜、洋葱和马铃 馨的白粉病。
[0006] 内丝白粉菌属化eveillula)的地理分布W中亚和西亚为中心分布在地中海区 域。运种疾病的第一症状是在最老的叶片上出现黄色的坏死斑，然后在较新的叶片上也出 现。在感染叶片的下表面上可W看到具有丰富分生抱子的白色产抱区域。运种疾病最终导 致落叶。辣椒田中白粉病感染可W导致严重的减产。白粉病流行的预报和管理十分困难， 后者是由于真菌在细胞间生长。因此化学控制不成功，所W在基因控制领域寻找解决方案。
[0007] 在辣椒（Capsicum spec. L.)中鉴别的抗性来源稀少并且不令人满意。有几种辣 椒资源在天然感染条件下表现出不同水平的抗性，不过它们大部分是非-annuum种的，或 者它们的抗性水平很低。仅能找到很少的关于辣椒对鞍醒内丝白粉菌的文章或报道。
[000引最有希望的抗性来源是在来自东非的C. annuum资源"册"中发现的值aubeze et al, 1989)。由 Daubeze et al. (1995) (Plant Breeding 114, 327-329)和 Lefebvre et al. (2003) (Theoretical and Applied Genetics, 107:661-66)进行的对于基本抗性因子 的遗传性质的研究显示负责鞍醒内丝白粉菌抗性的遗传基础是复杂的。在"册"和易感的 灯笼椒Vania杂交制备的群体中，发现五个基因区域，P5、P6、P9、P10、和P12 W及另外的 QTL' S，它们对所发现的抗性有贡献。对于两种评估方法来说，有两个基因区域是共同的，而 其他QTLs是方法特异性的，反映了白粉病流行的环境依赖性。能够解释大部分所发现变异 (variance) (26% )的单个0化位于 P6 上（Xefebvre et al. 2003,同上）。
[0009]由于根据本领域目前的技术，还未知有辣椒品种对鞍醒内丝白粉菌具有高度抗 性，本发明的目的是提供对鞍醒内丝白粉菌具有抗性的辣椒植物。
[0010] 在获得本发明的研究中，培育对鞍醒内丝白粉菌具有高度抗性的辣椒植物。本发 明所述的抗性由遗传决定子控制，其遗传与多基因隐性性状的遗传一致。本文中"隐性性 状"指仅在W纯合状态包含所述遗传决定子的植物中能观察到可实现的抗性，而W杂合状 态包含所述遗传决定子的植物不表现出抗性。
[0011] 在本发明中，发现由的'L组成的遗传决定子单独解释56. 8%的所发现的抗性变 异，如实验（实施例2)中所述，并且该遗传决定子位于LG1/8上。
[0012] LG1/8是染色体1和染色体8的额外连锁群。使用特别的注释，因为在该区域存在 已知的相互易位，将C. annuum的基因组与其它辣椒种区分开。
[0013] 到目前为止，还没有已知的出版物是关于辣椒中LG1/8上的giL赋予对鞍醒内丝 白粉菌抗性的。也没有任何已知的数据是关于QTL's W解释变异的水平赋予对鞍醒内丝白 粉菌的抗性。Daubeze et al. (1995.同上)表明感染越严重，赋予抗性所需的基因或基因 组合越多。
[0014] 与该现有技术相比，本发明设及解释了几乎57%的所发现变异的Q化，运必定具 有增加的价值。当在育种程序中使用植物材料时，使用能够解释大部分在抗鞍醒内丝白粉 菌抗性中发现的变异的的'L比组合使用几个能解释较少的所发现变异的QTL' S提供了更有 效的方法。在植物生长的早期阶段，强的'L能够提供对表型性状的更好指示，而无需进行花 费更多时间和成本的PM测试。所需要的不同QTL's越少，测试实施的效率越高。giL能解 释的变异越多，其预测能力越强，并且由此的'L具有更多的价值。
[0015] 本发明因此设及表现出抗鞍醒内丝白粉菌化eveillula taurica)抗性的辣椒植 物（辣椒种（Capsicum spec.))，其中辣椒植物包含LG1/8上的QTL，其中当giL纯合地存 在时，导致抗鞍醒内丝白粉菌抗性，并且其中所述的'L存在于其代表性种子W保藏号NCIMB 42136保藏的辣椒植物中或者可从该辣椒植物获得。在优选的实施方案中，辣椒植物是 C曰PS i cum曰nnuum种的样本。
[0016] 在保藏物的种子中，该的'L与根据SEQ ID NO. 1的分子标记连锁。本发明的植物 可W具有或者可W不具有该分子标记。如果该植物不具有该分子标记，但是存在该Q化，运 种植物仍然是本发明的辣椒植物。
[0017] 在优选的实施方案中，该的'L纯合地存在，并且辣椒植物显示出抗鞍醒内丝白粉 菌的抗性。其中该的'L杂合地存在的植物也是本发明的一部分，因为虽然它们可能不表现 出抗性表型，运些植物仍然是该QTL的来源，并可用于鞍醒内丝白粉菌抗性辣椒的育种。
[0018] 本发明的辣椒植物可通过下述步骤获得：
[0019] a)将第一种辣椒植物和第二种辣椒植物杂交，其中至少一种所述植物是由其代表 性样品W保藏号NCIMB 42136进行保藏的种子生长而成的，或者是其后代植物，
[0020] b)将得到的F1植物自交，获得F2群体，W及
[0021] C)从F2群体鉴别并选择在LG1/8上具有导致抗鞍醒内丝白粉菌抗性的QTL的植 物。
[0022] 本发明进一步提供辣椒植物，其纯合地包含该Q化，并且其白粉病抗性得分与不包 含该QTL的辣椒植物的白粉病抗性得分相比，按0-5的量度，按增加的优先级，平均低至少 1. 5,低至少1. 7,低至少1. 9,低至少2. 1，低至少2. 3,低至少2. 5,低至少2. 6。
[0023] 根据其进一步的方面，本发明提供包含如本文所定义的QTL的辣椒种子。由该种 子可生长而成的植物包含位于LGl/8上的Q化，并且当其纯合地存在时，所述植物表现出抗 鞍醒内丝白粉菌的抗性。
[0024] 本发明还设及如本文所述的辣椒植物的，或辣椒种子的后代，其中后代包含如本 文所定义的LG1/8上的Q化，并且其中当该giL纯合地存在时，后代植物具有对鞍醒内丝白 粉菌的抗性。
[0025] 本发明进一步提供来源于本发明植物的繁殖材料或本发明的辣椒种子的繁殖材 料，其中所述繁殖材料包含LG1/8上的Q化，并且其中当该的1纯合地存在时，由所述繁殖材 料生长而成的植物对鞍醒内丝白粉菌具有抗性。
[002引繁殖材料适宜地选自由愈伤组织、小抱子、花粉、子房、胚珠、胚胎、胚囊、卵细胞、 杆插条、根、茎、细胞、原生质体、叶片、子叶、下胚轴、分生细胞、