一种克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种柴胡种内或种间杂交技术，特别涉及一种克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术。柴胡为异花授粉植物，不规范的繁种容易导致严重的种质混杂及品种退化现象，同时因长期的系统选育，柴胡高产高效和高适应性选育也面临瓶颈。而在降雨较多地区，常规田间去雄、套袋及授粉技术无法正常实现柴胡杂交及收种。本技术包括以下步骤，步骤1)——柴胡育苗、步骤2)——植株管理、步骤3)——去雄、步骤4)——授粉、步骤5)——收种。本发明不仅极大缩短育种年限，而且解决了高雨量地区的柴胡制种困难问题，另外本技术不会因为套袋过重造成枝条折断，广泛适用于包括北柴胡、狭叶柴胡、竹叶柴胡、及三岛柴胡等柴胡种的种内杂交及种间杂交。
【专利说明】
一种克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术
技术领域
[0001]本发明涉及一种柴胡种内或种间杂交技术，特别涉及一种克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术。
【背景技术】
[0002]柴胡(Radix Bupleuri)为我国常用大宗药材，《神农本草经》列为上品，已有2000多年药用历史，是疏散退热、疏肝解郁、升举阳气之要药，用于感冒发热，寒热往来，肝气不疏、胸胁胀痛，月经不调、子宫脱垂等症，是70余个经典名方和中成药的主药、辅药。其药材用量位全国前五，年需求缺口达6000吨以上，是国家战略性新兴产业和四川省“7+3”重点支持发展产业及产品。我国野生柴胡种类较多，加之柴胡的异花授粉习性和不同地区间的种子流通，导致种植柴胡种质混乱、产量和质量参差不齐、药材稳定性差。通过长期的柴胡遗传育种研究，我国育种工作者们已通过系统选育成功选育出中柴1-3号及川北柴I号4个北柴胡新品种。与地方栽培种及野生种相比，这些品种都表现出较高的品种一致性及产量和药效稳定性，解决了柴胡种子发芽慢，出苗不整齐问题。新品种大量繁育和示范推广将在很大程度上解决柴胡生产问题，带来显著经济效益和社会效益。但因柴胡栽培育种历史短，在柴胡新品种推广过程中也出现了弊端。目前所有北柴胡新品种皆为系统选育，在生产上药农皆偏向于自己留种。而柴胡为异花授粉植物，不规范的繁种容易导致严重的种质混杂及品种退化现象，这严重阻碍了栽培柴胡的产业化推广。同时因长期的系统选育，柴胡高产高效和高适应性选育也面临瓶颈。目前四川地区柴胡开花时间为5-8月，期间降雨较多，常规田间去雄、套袋及授粉技术无法正常实现柴胡杂交及收种。因此探索适宜四川地区的柴胡制种技术及育种方法对突破性柴胡新品种选育及配套种源技术制定尤为重要。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题是如何克服现有技术的上述缺陷，提供一种克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术。
[0004]为解决上述技术问题，本克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术包括以下步骤，
[0005]步骤I)一一柴胡育苗:以泥炭土和沙壤土1:1混合配置营养基质，将种子去杂去劣后用1cm X 1cmX 1cm规格营养钵播种育苗；
[0006]步骤2)——植株管理:将移植的幼苗放入人工气候室进行培养，气候室采用飞利浦植物补光钠灯(S0N-TAGR0 400W)，补光钠灯安置密度为到达叶面时光子密度达500umolm—2s—1最佳，每日光照时间为16h，温度为光照时25 °C，黑暗时22 °C ;
[0007]步骤3)——去雄:待柴胡花序完全展开，小花长至最大，小花花盘变黄而花药尚未伸出时，用手术剪刀去掉短伞幅花序及中伞幅花序，留3?4个长伞幅花序；
[0008]步骤4)一一授粉:待去雄的小花花盘中间雌蕊柱头伸出时，取刚伸出花盘且花药未散开时的雄蕊，用镊子夹住对已去雄的小花柱头进行授粉；
[0009]步骤5)——收种:种子授粉结实后30天左右，柴胡授粉成功的种子较未成功的膨大，种皮颜色较瘪粒提前变为棕色;去除套袋，收货膨大饱满的种子。
[0010]作为进一步完善，步骤2)所述柴胡育苗中营养钵处理为，将带种子的营养钵置于托盘中，利用渗透浇水的方式进行土壤水份调控;待幼苗长至3叶期时移栽到直径16cm的I加仑培养盆中，每盆种植一颗幼苗。
[0011]作为进一步完善，步骤2)所述植株管理中幼苗的后续处理为，待植株成活后，进行干旱处理，其具体技术为，待土壤干至柴胡植株萎嫣时方浇透水;干旱处理一直持续到植株抽薹后进行常规肥水管理。
[0012]作为进一步完善，步骤3)所述去雄过程中，同时去掉长伞幅花序上幼嫩的小花，保留4?5朵生长发育一致的小花;用Pro’skit特细镊子(1PK-101T)去掉保留小花所有的花瓣和花药;利用玻璃纸制成的袋子将去雄完毕的花序进行套袋隔离;玻璃纸为0.023mm厚的超薄玻璃纸;在已去雄枝条上用挂牌标注好材料名称及去雄时间。
[0013]作为进一步完善，步骤4)所述授粉过程中，一个雄蕊对应一朵小花;授粉完成后进行套袋，并在挂牌上做好亲本记录。
[0014]如此设计，田间常规柴胡育种生育期多为2年，其2年才会完成一个世代繁育，本发明采用飞利浦植物补光钠灯光进行长日照培养并结合干旱刺激使得柴胡提前开花，本发明处理下每年可完成2.46代世代繁殖，较大田育种极大缩短育种年限。四川等高雨量地区进行柴胡去雄套袋时，隔离袋内容易积水且滋生菌类。同时柴胡田间最佳去雄授粉时间5-8月多为雨季，采集花粉也极为困难，本发明所有环节都在室内进行，且室内光温条件都极宜控制，可一年四季进行杂交制种。柴胡植株花序较多，每个单株即可收获上万粒种子，因此进行柴胡室内杂交制种技术以解决高雨量柴胡制种困难的问题极为可行。柴胡小花很小，用常规作物的杂交工具去雄极为不便，且容易顺畅柱头，本发明采用用Pro’skit特细镊子(1PK-101T)操作方便，很容易去掉柴胡小花的雄蕊及花瓣。柴胡授粉后其种子生长主要依赖于果皮本身的光合作用，因此用常规的套袋容易使种子发育不良形成瘪粒，本发明采用的透明玻璃纸袋子不会影响果皮光合作用，且质量很轻，不会因为套袋过重造成枝条折断。
[0015]本发明一种克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术不仅极大缩短育种年限，而且其所有环节都在室内进行，光温条件便于控制，可一年四季进行杂交制种，解决了高雨量柴胡制种困难的问题，另外本技术不会因为套袋过重造成枝条折断，广泛适用于包括北柴胡(Bupleurum chinense DC.)、狭叶柴胡(B.scorzonerifol ium Willd.)、竹叶柴胡(B.marginatum Wall.ex DC.)、及三岛柴胡(B.falcatum L.)等柴胡种的种内杂交及种间杂交。
【具体实施方式】
[0016]本克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术包括以下步骤，
[0017]步骤I)一一柴胡育苗:以泥炭土和沙壤土1:1混合配置营养基质，将种子去杂去劣后用1cmX 1cmX 1cm规格营养钵播种育苗;将带种子的营养钵置于托盘中，利用渗透浇水的方式进行土壤水份调控;待幼苗长至3叶期时移栽到直径16cm的I加仑培养盆中，每盆种植一颗幼苗。
[0018]步骤2)——植株管理:将移植的幼苗放入人工气候室进行培养，气候室采用飞利浦植物补光钠灯(SON-TAGRO 400W)，补光钠灯安置密度为到达叶面时光子密度达500umolHf2iT1最佳，每日光照时间为16h，温度为光照时25°C，黑暗时22°C;待植株成活后，进行干旱处理，其具体技术为，待土壤干至柴胡植株萎嫣时方浇透水;干旱处理一直持续到植株抽薹后进行常规肥水管理。
[0019]步骤3)—一去雄:待柴胡花序完全展开，小花长至最大，小花花盘变黄而花药尚未伸出时，用手术剪刀去掉短伞幅花序及中伞幅花序，留3?4个长伞幅花序；同时去掉长伞幅花序上幼嫩的小花，保留4?5朵生长发育一致的小花；用Pro’skit特细镊子(IPK-1OlT)S掉保留小花所有的花瓣和花药;利用玻璃纸制成的袋子将去雄完毕的花序进行套袋隔离；玻璃纸为0.023mm厚的超薄玻璃纸;在已去雄枝条上用挂牌标注好材料名称及去雄时间。
[0020]步骤4)一一授粉:待去雄的小花花盘中间雌蕊柱头伸出时，取刚伸出花盘且花药未散开时的雄蕊，用镊子夹住对已去雄的小花柱头进行授粉;一个雄蕊对应一朵小花;授粉完成后进行套袋，并在挂牌上做好亲本记录。
[0021]步骤5)——收种:种子授粉结实后30天左右，柴胡授粉成功的种子较未成功的膨大，种皮颜色较瘪粒提前变为棕色;去除套袋，收货膨大饱满的种子。
[0022]上述实施方式旨在举例说明本发明可为本领域专业技术人员实现或使用，对上述实施方式进行修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，故本发明包括但不限于上述实施方式，任何符合本权利要求书或说明书描述，符合与本文所公开的原理和新颖性、创造性特点的方法、工艺、技术，均落入本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术，其特征是:该柴胡杂交技术包括以下步骤， 步骤I)一一柴胡育苗:以泥炭土和沙壤土I: I混合配置营养基质，将种子去杂去劣后用1cmX 1cmX 1cm规格营养钵播种育苗； 步骤2)——植株管理:将移植的幼苗放入人工气候室进行培养，气候室采用飞利浦植物补光钠灯(SON-TAGRO 400W)，补光钠灯安置密度为到达叶面时光子密度达500umol nf2s—1最佳，每日光照时间为16h，温度为光照时250C，黑暗时220C ； 步骤3) —一去雄:待柴胡花序完全展开，小花长至最大，小花花盘变黄而花药尚未伸出时，用手术剪刀去掉短伞幅花序及中伞幅花序，留3?4个长伞幅花序； 步骤4)一一授粉:待去雄的小花花盘中间雌蕊柱头伸出时，取刚伸出花盘且花药未散开时的雄蕊，用镊子夹住对已去雄的小花柱头进行授粉； 步骤5)—一收种:种子授粉结实后30天左右，柴胡授粉成功的种子较未成功的膨大，种皮颜色较瘪粒提前变为棕色;去除套袋，收货膨大饱满的种子。2.根据权利要求1所述的克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术，其特征是:步骤2)所述柴胡育苗中营养钵处理为，将带种子的营养钵置于托盘中，利用渗透浇水的方式进行土壤水份调控;待幼苗长至3叶期时移栽到直径16cm的I加仑培养盆中，每盆种植一颗幼苗。3.根据权利要求1所述的克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术，其特征是:步骤2)所述植株管理中幼苗的后续处理为，待植株成活后，进行干旱处理，其具体技术为，待土壤干至柴胡植株萎嫣时方浇透水;干旱处理一直持续到植株抽薹后进行常规肥水管理。4.根据权利要求1所述的克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术，其特征是:步骤3)所述去雄过程中，同时去掉长伞幅花序上幼嫩的小花，保留4?5朵生长发育一致的小花;用Pro’skit特细镊子(1PK-101T)去掉保留小花所有的花瓣和花药;利用玻璃纸制成的袋子将去雄完毕的花序进行套袋隔离;玻璃纸为0.023mm厚的超薄玻璃纸;在已去雄枝条上用挂牌标注好材料名称及去雄时间。5.根据权利要求1所述的克服高雨量地区制种困难的柴胡杂交技术，其特征是:步骤4)所述授粉过程中，一个雄蕊对应一朵小花;授粉完成后进行套袋，并在挂牌上做好亲本记录。
【文档编号】A01G9/10GK106069105SQ201610498460
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月28日
【发明人】余马, 侯大斌, 刘静波, 舒晓燕, 黄晶, 刘丹, 刘宏伟, 段莎莎
【申请人】西南科技大学