一种干细胞营养剂的制作方法

专利名称：一种干细胞营养剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及营养保健品领域，更具体地说，是涉及一种以干细胞为主 要成分的营养剂。
背景技术：
人类在发展中要经历生老病死的生命代谢规律。人类要改变这一规律， 做到永生不死是不可能，但经过多方努力延长自身生命过程，改善生活质 量是可以达到的。这种努力可以追溯到几千年前的前人，秦始皇为了长生 不老，曾三次想到东瀛去寻求仙丹(派人去炼仙丹)。历朝历代都有类似的 事件发生，皇族达贵为了长生不老，多方寻求仙丹妙药来达到上述目的， 但神话般的故事没有实现过。人类的文明发展至今，人类从贫穷走向富有， 生活水准越来越高，生活质量越来越好，大家都想长寿健康，这是人类的 希望和要求。为了实现这个希望和要求，人们经过漫长的研究和开发，现 在摆在世界各地销售的保健品和营养品是琳琅满目，但是真正称得上能起 延年益寿作用的产品是零。
干细胞是动物或人类在发育生长中的原始细胞，从胚胎的发育过程中 我们可以了解到，卵细胞和精原细胞结合，形成胚胎细胞，经过十个月的 孕育，最后形成完整健康胎儿。胎儿的孕育过程中，我们看到卵细胞和精 原细胞结合形成受精卵细胞。这个受精卵细胞已包含人体发育生长的所有 信息和物质(功能和疾病基因、生长发育因子、细胞因子、组织因子、分 化因子等形成人体器官的各种生命物质及生命运动的各种物质)。至今，我 们都无法知道到底携带了多少人体的发育、生长、生活过程的生命信息。 由此可见，胚胎细胞是全营养的细胞，其它细胞和物质是无法比拟的。目 前，我们发现除了胚胎细胞外，间质干细胞，造血干细胞的前体细胞，成 体干细胞，精原干细胞培养的干细胞，也有人称之全能或多能细胞，可以分化成其它各种组织细胞。上述干细胞也包含了人体发育、生长的所有生 命物质，同属于全能营养物质。作为一种人体的营养物质来说，有一般性 营养和特殊性营养物质之分，特殊性营养物质是人体所必需和所缺少，特 别是特殊性营养物质人体吸收后能对生命起到有意义的改善。
这种营养物质是日常生活无法吸收到的物质，也就是说日常人们生活 的饮食中无法得到的物质。人们不仅要问，人体的许多生命物质不是靠自 己体内合成的吗？回答是尽然，也不尽然。由于人体在胚胎发育期和少年 发育生长期，以及青年、中年、老年期生命周期中，人体不同发育生长时 期，生命物质吸纳及合成代谢，都不相同，除了生命过程中基本的三羧酸 循环代谢，当然三羧酸循环代谢在少年期和老年期的功能也不尽相同，例
如人体的基因约30万之多，但在不同时期，诸多基因在不时的发挥自己的 功能， 一旦完成任务后，许多基因不再起作用。可能一生只开启一次作用， 而有些基因是相当长时间均在工作，基因的开放和关闭同样受一些特殊生 命物质的调控，当某些特殊生命物质的缺少或改变，基因的工作就会失去 调控，导致疾病发生。当人体缺少特殊营养物质，可能开始出现老化或疾 病发生，也可能是人体老化，机体吸收特殊营养物降低，体内的代谢降低， 合成功能下降，使人体进一步老化或疾病加剧。因此，需要一种特殊营养 物质来补充不同时期的需求，及早吸收补充预防疾病的发生。从人体生理 学角度来说非常重要，换句话说，研究清楚青年时期生命物质的吸纳补充 及体内代谢合成与老年时期的生命物质吸纳补充及体内代谢合成的功能 上、量上及吸取能力的不同之处，是我们如何能延长生命的目标。在无法 清楚之前，只好以外源性补充方法，增加特殊性营养物质的人体吸收。
二十世纪的末期，生命科学技术的交叉发展，对干细胞的研究和应用 做出了巨大的贡献。干细胞技术被誉为十大科学发展的首位，干细胞在医 学上应用受到很大的瞩目，因为很多种干细胞具有多分化潜能，带给现代 医学一项无穷的新契机，也给现在无法治愈的病人一线希望，同样，对缺 少特殊营养物质的人们来说是福音。
干细胞的"干"字译自英文"STEM"，意为主干或起源。干细胞能够自我 更新并同时能产生分化的细胞。例如转变成脑，内脏，骨，肌肉或其它类型的细胞。依干细胞分化能力，可分为全能干细胞(Totipotent stem cell)， 多能性干细胞(Pulripotent stem cell)，多潜能性干细胞(Multipotent stem cell)及专能性干细胞(Unipotent stem cell)。若依照来源不同，又可以分 为胚胎干细胞、成体干细胞、造血干细胞、间充质干细胞和生殖干细胞(精 原干细胞)。
全能性干细胞的每一个细胞，均有能力可发育成一个完整的生物个体。 在生物发育学里，当精子和卵子结合成受精卵后， 一个受精卵分裂成2个完 全相同的细胞，2个细胞分裂成4个细胞，而后分裂成为8个细胞，在此时期 的8个细胞中，任何一个细胞单独放入成熟女性子宫内，均可发育成一个完 整的个体。目前的研究结果证明，除了胚胎干细胞外，其他好多种干细胞 都具有胚胎干细胞功能。因此，干细胞是所含有的营养物质比其他细胞或 蛋白、脂类、糖、维生素、氨基酸、碳水化合物的营养都丰富，它可能是 人们日常生活中无法吸收到的一种没有被人类发现的特殊营养物质，它包 含人类生长、发育、生命所需的所有信息物质，此类物质对人体的健康长 寿和疾病预防和治疗有着革命性的意义。
当然有人会问，外来物质通过胃肠道的消化，分解会变成普通的小分 子物质，失去其生物活性， 一旦机体再合成也不一定是同一物质。回答既 是肯定又是否定。人体的以下几种生理现象可能会帮我们理解上述问题。 l.bodycall，称之为机体呼叫，当人体需要或缺少某种物质时，潜意识会呼 叫人体饮食某种物质，当人体食用物质时，味觉和胃口都很好；2.疾病患 者在康复后，就有想吃某些特殊物质，且有帮助机体康复作用，同时也有 厌食某些物质，可能是机体不宜消化此类物质，或者消化功能下降，或此 类物质对机体不利；3.胖子大都喜欢吃肉，且是肥肉为主，因为，胖子需 要大量脂肪补充；4.居住自然环境好，饮食清淡者会长寿；5.偏食者，缺 少某些必需物质吸收，往往体质弱，易患病；6.常吃海鲜或居住海岛的人 比较聪明，且患高血压、冠心病、中风病人少之又少;7.如四川和湖南等地 的居民，居住在比较潮湿的山村，吃些辣菜，预防风湿病等；8.北美的居民 喜爱吃烧烤的肉食品，为防止口腔和上呼吸道染，会喝冰水加柠檬；9.蒙 古包的人大量吃牛羊烤肉后，需要饮茶降火；IO.法国和其他产葡萄酒国家的人很少患心脏疾病且长寿，因为红酒是由连皮带籽的葡萄发酵酿制而成， 可以最大限度地保留葡萄的营养价值，其中含有大量有益于人体的保健因 子，可以使血中低密度脂蛋白降低，高密度脂蛋白升高，对心血管疾病大 有好处。此外，酒内含有丰富的褪黑激素，这种激素通过清除体内自由基、
抗氧化和抑制脂质过氧化反应，从而保护细胞结构、防止DNA损伤、降低 体内过氧化物的含量，同时，褪黑激素还有能延缓神经细胞衰退的作用。 另外有很多类似现象，这些充分说明人体的健康和长寿常需要补充一些特 殊营养物质，这一些特殊的营养物质可能会影响人体细胞的凋亡和抗凋亡， 也可能影响细胞内端粒酶的活性功能，防止和改善端粒酶缩短的现象，而 起到延年益寿和健康的作用。
在中国的民间,很多病人和体弱多病者，吃生母的胎盘(主要是胎盘干 细胞和脐血干细胞物质)来补充营养,对机体的恢复会有很大的帮助，而且 食用有瘾，其它补品不能代替
综上所述，本发明的目的是提供一种干细胞口服剂或注射剂，以期达 到保健和延年益寿的作用。

发明内容
为实现本发明的目的，本发明的技术方案如下
本发明提供一种干细胞营养剂，其为1 3ml保存液中含有500万干细 胞的口服剂或注射剂。
本发明所述的干细胞营养剂中，其中，保存液选自5%山梨醇或5%甘 露醇。
本发明所述的干细胞营养剂中的干细胞来自人类或动物。
本发明所述的干细胞营养剂，其中，所述的人类干细胞选自间质干细 胞、成体干细胞、造血干细胞、精原干细胞及上述除人类胚胎干细胞外的 祖细胞的同体或异体。
本发明所述的干细胞营养剂，其中，所述的动物干细胞选自间质干细 胞、成体干细胞、精原干细胞、造血干细胞、胚胎干细胞中的一种或几种。
本发明所述的干细胞营养剂，其中，所述的动物选自牛、羊、猪、猴、鹿、狗、兔。
本发明所述的干细胞营养剂，其中一个优选的方案是，所述的口服剂 还含有牛血清。
本发明所述的干细胞营养剂，其中一个优选方案是，所述的口服剂还 含有中药成份物质，中药选自有活血补气的人参、当归、红花等浸泡液。 本发明所述的干细胞营养剂，其中一个优选方案是，所述的口服剂储
存温度是-8(TC、 -20匸或41:。 口服液的包装容器是玻璃或中性塑料材料。 本发明的干细胞营养剂适用对象为中老年人群、慢性疾病患者或健康 人群。
本发明的干细胞(以间质干细胞为例)大规模制备可采用如下方法
1、 基本制备过程为
间质干细胞的生物反应器(加自组装的多肽)中大规模培养—细胞的 收集和纯化—生物活性、质量、安全性检测后包装储存。
2、 具体生产工艺步骤如下(以间质干细胞为例)
(1) 人间质干细胞种子的来源
取引产胎儿的骨髓间质干细胞或胎盘、组织、脐血、脐带组织、胚胎 组织、脂肪组织、成体骨髓间质干细胞。种子细胞进行传代培养至5-8代
左右，收集细胞，存入种子工作库，备作大规模生产培养的工作种子。
(2) 人间质干细胞的放大
将人异体间质干细胞工作细胞库中的种子细胞复苏、传代，按20L和 好50L的培养用量，接种1.5xl05/mL的接种量，接种人间质干细胞入生 物反应器，接种前先预热生物反应器至37。C,用C02校正和平衡培养基pH 值。按间质干细胞的培养生长条件，采用无血清或血清的培养介质，生物 反应器培养过程中的各项间质干细胞培养生长条件的参数，由生物反应器 的计算机程控自控检测。定时取样在镜下观察细胞生长情况，当细胞增殖 至生物反应器内有效培养面积的80%时，在微支架表面充分长满时，收获细 胞。
(3)人间质干细胞的收集、纯化
反应器中的间质干细胞，利用反应器的滤膜的细胞混合液，在洗脱液的洗脱下，将细胞和洗脱液一起，加5%的山梨醇进行多次稀释冲洗后，再
进行分离纯化。纯化后的初产品细胞流试仪的质量测试及用分子生物学方 法检测产品的安全性和细胞生物活性后，合格产品分别罐装入西林瓶中， 贴上标签，再存入液氮中保存。
分装时的细胞加入适量的冰冻保护液5%的山梨醇或5%甘露醇(注射 剂)，以保证细胞在冰冻中不易破坏；口服剂是干细胞加保护液和中药浸泡
液，保持细胞的生物活性。在整个过程应做到液氮低温运送条件，使产品 始终保持最佳的生物活性。 本发明具有如下有益效果-
本发明的营养剂生产制备过程简单、便于操作，同时该口服剂或注射 剂使用方便、没有毒副作用，适用人群具有广谱性。经验证，本发明的产 品能起到一定的保健作用。
具体实施例方式
下面结合实施例，更具体地说明本发明内容。应当理解，下面的实施 例用于说明本发明的内容，而非限定本发明的内容，任何形式上的变动和/ 或变通，将落入本发明的保护范围。 实施例1 间质干细胞大规模制备
(1) .人间质干细胞种子的来源和建立 取自引产胎儿的骨髓间质干细胞(选择前应对抽取者母体做安全性要
求的检测如HIV、乙肝、丙肝、梅毒、衣支原体、遗传病，以及详细地采 集病史，排除不健康的诸多因素，证明键康和安全的引产儿)或胎盘、组 织、脐血、脐带组织、胚胎组织、脂肪组织、成体骨髓间质干细胞。种子 细胞进行传代培养至5-8代左右细胞(细胞传代培养中观察到，第10代的 细胞增殖能力最强，细胞繁殖最旺盛)，达到可生产培养量后，收集细胞, 存入种子工作库，备作大规模生产培养的工作种子。
(2) .人间质干细胞的放大(生产化)
培养用20L或50L以上的特殊专用生物反应器加自组装多肽培养支架 物，将人异体间质干细胞工作细胞库中的种子细胞复苏、传代，按20L和好50L的培养用量，接种1.5xl05/mL的接种量，接种人间质干细胞入生 物反应器，接种前先预热生物反应器至37°(3,用C02校正和平衡培养基pH 值。按间质干细胞的培养生长条件，采用无血清或血清的培养介质，间质 干细胞在生物反应器中，加入使细胞保持在未分化状态增殖的细胞因子和 细胞生长因子。生物反应器培养过程中的各项间质干细胞培养生长条件的 参数，由生物反应器的计算机程控自控检测。培养过程中程控所显示的培 养参数变化，应立即予以补充，特别是细胞培养生长过程中对介质的要求 和代谢产物清除，必须及时给予满足，使生物反应器内的细胞生长在最佳 状况。细胞在半悬浮半贴壁培养过程中可进行水平的转动，保持生物反应 器内立面的细胞均能得到所需的代谢物(如氧，氨基酸，糖原，核酸等) 和排除代谢的废物，同时进行定时的取样在镜下观察细胞生长情况，使细 胞保持三维空间最佳生长状态。当细胞增殖至生物反应器内有效培养面积 的80%时，在微支架表面充分长满时，收获细胞。 (3).人间质干细胞的收集、纯化
反应器中的间质干细胞，利用反应器的滤膜的细胞混合液，在洗脱液 的洗脱下，将细胞和洗脱液一起，加5%的山梨醇进行多次稀释冲洗后， 再进行分离纯化。纯化后的初产品细胞流试仪的质量测试及用分子生物学 方法检测产品的安全性和细胞生物活性后，合格产品分别罐装入西林瓶中， 贴上标签，再存入液氮中保存。
实施例2 口服剂制备
按常规口服剂的制备方法制备，原料配比如下
干细胞数500万加5%山梨醇1毫升，牛血清8毫升，当归浸泡液1 毫升，总量IO毫升瓶装。
实施例3 口服剂制备
按常规口服剂的制备方法制备，原料配比如下
干细胞数500万加5%甘露醇1毫升，牛血清8毫升，红花浸泡液1 毫升，总量10毫升瓶装。实施例4 口服剂制备
按常规口服剂的制备方法制备，原料配比如下
干细胞数500万加5%山梨醇1毫升，牛血清8毫升，人参浸泡液1 毫升，总量IO毫升瓶装。
实施例5 注射剂制备
按常规注射剂的制备方法制备，原料配比如下干细胞数500万加5% 的山梨醇3毫升。
实施例6 注射剂制备
按常规注射剂的制备方法制备，原料配比如下干细胞数500万加5% 甘露醇3毫升。
实施例7 口服剂的效果
十名自愿受试者(年龄45-68岁，全部男性)，口服干细胞营养剂三次 后(三天服一次)，自觉精神状态非常好，胃口很好，性功能增强，血压、 心跳、呼吸正常，血常规检査有六人白细胞升高。全部受试者均未见毒副 反应的发生。
10
权利要求
1、一种干细胞营养剂，其特征在于，所述的干细胞营养剂为1～3毫升保存液中含有500万干细胞的口服剂或注射剂。
2、 如权利要求1所述的干细胞营养剂，其特征在于，所述的保存液选 自5%山梨醇或5°/。甘露醇。
3、 如权利要求1所述的干细胞营养剂，其特征在于，所述的干细胞来 自人类或动物。
4、 如权利要求3所述的干细胞营养剂，其特征在于，所述的来自人类 的干细胞选自间质干细胞、成体干细胞、造血干细胞、精原干细胞及上述 除人类胚胎干细胞外的祖细胞的同体或异体。
5、 如权利要求3所述的干细胞营养剂，其特征在于，所述的来自动物 的干细胞选自间质干细胞、成体干细胞、精原干细胞、造血干细胞、胚胎 干细胞中的一种或几种。
6、 如权利要求3所述的干细胞营养剂，其特征在于，所述的动物选自 牛、羊、猪、猴、鹿、狗、兔中的一种或几种。
7、 如权利要求1所述的干细胞营养剂，其特征在于，所述的口服剂还 含有牛血清。
8、 如权利要求1或7所述的干细胞营养剂，其特征在于，所述的口服 剂还含有人参、当归或红花浸泡液。
9、 如权利要求1所述的干细胞营养剂，其特征在于，所述的口服剂储 存温度是-8(TC、 -2(TC或4。C。
10、 如权利要求1所述的干细胞营养剂，其特征在于，其适用对象为 中老年人群、慢性疾病患者或健康人群。
全文摘要
本发明公开一种干细胞营养剂，所述的干细胞营养剂为干细胞和保存液组成的口服剂或注射剂。本发明的干细胞营养剂能补充人体所需的特殊营养物质，达到保健和延年益寿的目的，同时，本发明的产品使用方便，未发现毒副作用。
文档编号A23L1/29GK101444298SQ20081017747
公开日2009年6月3日 申请日期2008年11月28日 优先权日2007年11月30日
发明者张云福, 裘建英 申请人:芮屈生物技术(上海)有限公司