用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种能够提高花粉萌发率的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基。该用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，所述培养基为水溶液，所述水溶液由溶剂和溶质构成，所述溶剂为水，所述溶质包括蔗糖、硼酸、维生素B1，所述水溶液中蔗糖的浓度为135g/L～215g/L，所述水溶液中硼酸的浓度为10mg/L～50mg/L，所述水溶液中维生素B1的浓度为0mg/L～20mg/L。采用本发明所述的培养基对四倍体扁穗牛鞭草花粉进行萌发时，可以大大提高花粉的萌发率，进而提高花粉的授粉率以及自然结实率。适合在植物培植领域推广运用。
【专利说明】用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基
【技术领域】
[0001]本发明属于植物培植领域，具体涉及一种用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基。
【背景技术】
[0002]扁穗牛鞭草(Hemarthriacompressa)作为一种优质的禾本科牧草,属于牛鞭草属根茎型植物，由于其为草本C4植物，多分布在积温较高的地区，如热带和亚热带地区，只有少数分布于积温稍低的温带湿润地区。其有众多优良的特性，但因其自然结实率低，给育种研究者带来不小的困扰。花粉的质量和数量是决定扁穗牛鞭草授粉和结实的重要内在条件。从花粉萌发的角度对其进行研究对克服其“花而不实”有重大意义，目前，对于扁穗牛鞭草花粉萌发的培 养基研究较少，还没有相应的适用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种能够提高花粉萌发率的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基。
[0004]本发明解决其技术问题所采用的技术方案为:该用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，所述培养基为水溶液，所述水溶液由溶剂和溶质构成，所述溶剂为水，所述溶质包括蔗糖、硼酸、维生素B1，所述水溶液中蔗糖的浓度为135g/L~215g/L，所述水溶液中硼酸的浓度为10mg/L~50mg/L,所述水溶液中维生素B1的浓度为Omg/L~20mg/L。
[0005]进一步的是，所述水溶液中蔗糖的浓度为195g/L。
[0006]进一步的是，所述水溶液中硼酸的浓度为40mg/L。
[0007]进一步的是，所述水溶液中维生素B1的浓度为10mg/L。
[0008]进一步的是，所述溶质还包括CaCl2,所述水溶液中Ca2+浓度为10_5mol/L~10 1IiioVLtj
[0009]进一步的是，所述水溶液中Ca2+浓度为l(T4mol/L。
[0010]本发明的有益效果在于:本发明所述的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基由水、蔗糖、硼酸、维生素B1组成，其中，蔗糖在花粉萌发和花粉管生长的过程中对花粉管细胞壁合成提供能量物质的供应并维持花粉和培养液之间渗透平衡的作用，硼酸有助于促进蔗糖通过质膜并利于在组织中传输，从而促进了蔗糖的吸收和代谢，进而间接地对花粉萌发和花粉管生长发挥作用，而且硼酸还有助于细胞壁果胶物质的形成，维生素B1可以促进碳水化合物和脂肪的代谢，在能量代谢中起辅酶作用，采用本发明所述的培养基对四倍体扁糖牛鞭草花粉进行明发时，可以大大提闻花粉的明发率，进而提闻花粉的授粉率以及自然结实率。
【专利附图】
【附图说明】[0011]图1为本发明实施例1所述的花粉萌发率的测定结果图；
[0012]图2为本发明实施例1所述的花粉管长度的测定结果图；
[0013]图3为本发明实施例2所述的花粉萌发率的测定结果图；
[0014]图4为本发明实施例2所述的花粉管长度的测定结果图；
[0015]图5为本发明实施例3所述的花粉萌发率的测定结果图；
[0016]图6为本发明实施例3所述的花粉管长度的测定结果图；
[0017]图7为本发明实施例5所述的花粉萌发率的测定结果图；
[0018]图8为本发明实施例5所述的花粉管长度的测定结果图；
【具体实施方式】
[0019]本发明所述的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基由水、蔗糖、硼酸、维生素B1组成，其中，蔗糖在花粉萌发和花粉管生长的过程中对花粉管细胞壁合成提供能量物质的供应并维持花粉和培养液之间渗透平衡的作用，硼酸有助于促进蔗糖通过质膜并利于在组织中传输，从而促进了蔗糖的吸收和代谢，进而间接地对花粉萌发和花粉管生长发挥作用，而且硼酸还有助于细胞壁果胶物质的形成，维生素B1可以促进碳水化合物和脂肪的代谢，在能量代谢中起辅 酶作用，采用本发明所述的培养基对四倍体扁穗牛鞭草花粉进行明发时，可以大大提闻花粉的明发率，进而提闻花粉的授粉率以及自然结实率。具体的，该用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，所述培养基为水溶液，所述水溶液由溶剂和溶质构成，所述溶剂为水，所述溶质包括蔗糖、硼酸、维生素B1，所述水溶液中蔗糖的浓度为135g/L~215g/L,所述水溶液中硼酸的浓度为10mg/L~50mg/L,所述水溶液中维生素B1的浓度为Omg/L~20mg/L。
[0020]花粉萌发率测定采用体外离体萌发法，将配置好的培养基加入I %的琼脂，煮沸后倒入培养皿中备用，然后在扁穗牛鞭草开花时，倾斜培养皿，将目标植株的花粉抖入培养皿中，将培养皿放入暗处于25°C下进行萌发，2h后取出培养皿，将培养皿放在显微镜下进行观察统计。每个处理随机选取5个视野进行观察，每个视野的花粉数需在20粒以上。每一处理的培养基做3个重复，观察记录数据，花粉萌发的标准定为花粉管长度大于或等于萌发孔为准。
[0021]实施例1
[0022]配制五组培养基，该五组培养基的硼酸浓度均为30mg/L、维生素B1浓度均为I Omg/L,蔗糖浓度分别为135g/L、155g/L、175g/L、195g/L、215g/L，将上述五组培养基分别对四倍体扁穗牛鞭草花粉进行萌发，然后进行花粉萌发率测定，测定结果如图1、图2所示，其中图1为花粉萌发率的测定结果图，图2为花粉管长度的测定结果图；
[0023]由图1、2可知，随着蔗糖浓度的增加，扁穗牛鞭草花粉萌发率逐渐提高，花粉管生长长度也有所提高，当蔗糖浓度为195g/L时，花粉萌发率达到最高，最高为72.81 %，同时花粉管长度也最长，其平均长度高达205.58 μ m,当蔗糖浓度高于195g/L时，花粉萌发率和花粉管长度均显著下降，说明高浓度的蔗糖会对花粉萌发和花粉管生长有抑制作用，蔗糖浓度的变化会对花粉萌发率有显著影响，而在蔗糖浓度到达195g/L之前，蔗糖浓度的变化对花粉管生长长度的影响并不显著。分析表明，在蔗糖浓度为195g/L，花粉萌发率和花粉管生长长度均显著高于其他处理组，即最佳蔗糖浓度为195g/L。[0024]实施例2
[0025]配制五组培养基，该五组培养基的蔗糖浓度均为175g/L、维生素B1浓度均为
IOmg/L,硼酸浓度分别为10mg/L、20mg/L、30mg/L、40mg/L、50mg/L,将上述五组培养基分别对四倍体扁穗牛鞭草花粉进行萌发，然后进行花粉萌发率测定，测定结果如图3、图4所示，其中图3为花粉萌发率的测定结果图，图4为花粉管长度的测定结果图；
[0026]由图3、4可知，一定浓度的硼酸对花粉萌发率以及花粉管生长长度有促进作用，当硼酸浓度高过40mg/L时，花粉萌发率以及花粉管生长的长度均得到显著抑制，当硼酸浓度为40mg/L时，花粉萌发率最高，为58.87 %，花粉管生长长度最长，为188.52 μ m,硼酸浓度为30mg/L和40mg/L时，花粉萌发率无显著差异，但花粉管生长长度差异显著，当硼酸浓度为30mg/L和40mg/L，花粉萌发率显著高于其他处理；当浓度为40mg/L时，花粉管生长长度显著高于其他处理组，故最适硼酸浓度为40mg/L。
[0027]实施例3
[0028]配制五组培养基，该五组培养基的蔗糖浓度均为175g/L、硼酸浓度均为30mg/L，维生素B1浓度分别为Omg/L、5mg/L、I Omg/L > 15mg/L、20mg/L,将上述五组培养基分别对四倍体扁穗牛鞭草花粉进行萌发，然后进行花粉萌发率测定，测定结果如图5、图6所示，其中图5为花粉萌发率的测定 结果图，图6为花粉管长度的测定结果图；
[0029]由图5、6可知，伴随着维生素B1浓度的增加，花粉萌发率以及花粉管生长长度有一定的变化，但是变化并不剧烈，当维生素B1的浓度为10mg/L时，花粉萌发率最高为56.57 %，花粉管生长长度最长为183.33 μ m，此时，花粉管长度显著高于其他处理组，而花粉萌发率在维生素BI浓度为5mg/L、10mg/L以及15mg/L时差异不显著,但当维生素B1浓度为10mg/L，花粉萌发率显著高于浓度为Omg/L和20mg/L时的萌发率，故最适宜的维生素B1浓度为10mg/L。
[0030]实施例4
[0031]配制九组培养基，该九组培养基的蔗糖浓度、硼酸浓度、维生素B1浓度以及将该九组培养基分别对四倍体扁穗牛鞭草花粉进行萌发，然后进行花粉萌发率测定的结果如下表所示:[0032]
【权利要求】
1.用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，其特征在于:所述培养基为水溶液，所述水溶液由溶剂和溶质构成，所述溶剂为水，所述溶质包括蔗糖、硼酸、维生素B1，所述水溶液中蔗糖的浓度为135g/L~215g/L，所述水溶液中硼酸的浓度为10mg/L~50mg/L，所述水溶液中维生素B1的浓度为Omg/L~20mg/L。
2.如权利要求1所述的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，其特征在于:所述水溶液中蔗糖的浓度为195g/L。
3.如权利要求1所述的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，其特征在于:所述水溶液中硼酸的浓度为40mg/L。
4.如权利要求1所述的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，其特征在于:所述水溶液中维生素B1的浓度为10mg/L。
5.如权利要求1所述的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，其特征在于:所述溶质还包括CaCl2，所述水溶液中Ca2+浓度为10_5mol/L~liTmol/L。
6.如权利要求5所述的用于四倍体扁穗牛鞭草花粉萌发的培养基，其特征在于:所述水溶液中Ca2 +浓度为10_4mOl/L。
【文档编号】C12N5/04GK104004702SQ201410213548
【公开日】2014年8月27日 申请日期:2014年5月20日 优先权日:2014年5月20日
【发明者】杨春华, 刘刚, 澹台国银, 李达旭, 刘琳, 孙飞达, 刘伟, 余克非, 杨勇 申请人:四川农业大学