一种粘虫幼虫饲养饲料及其制备方法与流程

文档序号:14757506发布日期:2018-06-22 22:49阅读:530来源:国知局

本发明属于动物饲料技术领域,尤其涉及一种粘虫幼虫饲养饲料及其制备方法。



背景技术:

目前,业内常用的现有技术是这样的:粘虫Mythimna separata(Walker)属于鳞翅目(Lepidoptera)夜蛾科(Noctuidae),为杂食性害虫,以幼虫咬食植物叶片,成群迁徙为害,主要为害玉米、小麦、水稻、高粱、甘蔗等禾本科作物及狗尾草、马唐草、稗草等禾本科杂草,大面积发生时也为害果树、油料、蔬菜等植物,给农作物生产带来极大威胁。我国粘虫危害在很大程度上得到了控制,但是近年来,随着全球气候变化、三大主粮作物种植结构调整、粘虫种群遗传变异、杀虫剂的不合理使用等复杂性原因,粘虫在我国发生危害呈现出上升趋势,若防治不及时,会使农作物大幅度减产。长期以来由于杀虫剂的大量使用,引起了粘虫抗药性的不断发展。近年来国内外都展开了对粘虫的药效实验、昆虫病毒增殖实验、昆虫抗性机理和治理研究及昆虫营养代谢实验等工作,而这些实验的前提都需要供试粘虫尽可能在虫态、龄期、个体大小、健康状况和敏感性等方面达到一致,这样才能获得准确的研究结果。所以对现有的粘虫人工饲料进行筛选、改进或设计,显得尤为重要。昆虫营养代谢对于昆虫饲料的要求更高,不仅需要饲料能够正常维持昆虫的生活状态,还需要对饲料的具体成分有一个定量定性的要求。所以,开发一种新的能够灵活调节其中相关物质的高质量饲料,是提供给昆虫营养研究工作者的重要基础。对于绝大多数生物,蛋白质和碳水化合物是主要的也是基本的两种营养元素。其中,碳水化合物特别是脂类营养物质是鳞翅目昆虫活动的能量物质。粘虫幼虫体内这类营养物质的储存决定了粘虫成虫的迁飞能力,而食物中的营养成分组成又与昆虫营养密切相关。限制食物中蛋白质和碳水化合物的比例,能够确定粘虫如何通过自身的生理代谢机制,调节自身营养物质的吸收,优化体内碳氮组合。实验通过测定粘虫体内的营养组成和虫体发育指标,确定当粘虫在取食营养不平衡的食物时,是如何通过自身的生理代谢调节来对营养成分进行再平衡的。并且预测营养组成对粘虫迁飞行为的可能影响机制,为粘虫的预测预报和防治工作提供重要的理论支持。现有技术对粘虫人工饲料的研究虽已取得了很大进展,有一些能够满足粘虫正常生存的合适的人工饲料,但同时存在一些问题,这些饲料大多都加入了很多非人工成分,如麦麸粉、大豆粉和菜豆粉等,这些成分不像化学纯品一样能够精确地提供一定量的相关大量营养元素物质和一些微量元素物质,故对于一部分昆虫营养代谢的研究不能起到精确的效果。综上所述,现有的饲料存在大多数的非人工成分,不能够灵活调节其中想要改变的一些营养物质,不能准确实现一些因昆虫营养比例不同而造成影响的相关研究。

综上所述,现有技术存在的问题是:现有的粘虫饲料存在大多数的非人工成分,不能够灵活调节其中想要改变的一些营养物质。例如,不能随意调节饲料中蛋白质和碳水化合物的比例,来考察这两种主要的营养物质成分的改变对粘虫幼虫生长发育的影响。

解决上述技术问题的难度和意义:本饲料所需试剂大部分为分析纯试剂,能够精确地量化里面各成分的量,部分试剂需要国外购买,成本会有所提高。本粘虫幼虫饲养饲料能够精确调节里面蛋白质和碳水化合物的比例,可以根据现在流行的GF(Geometric Framework)模型来考察食物中蛋白质和碳水化合物比例的改变,对粘虫生长发育的影响,同时研究粘虫在自然界取食特定的食物,然后如何通过生理代谢机制来达到自身蛋白质和碳水化合物的平衡。因此,本饲料对研究粘虫的营养代谢有特定的价值,并且对粘虫的预测预报有重要意义。



技术实现要素:

针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种粘虫幼虫饲养饲料及其制备方法。

本发明是这样实现的,一种粘虫幼虫饲养饲料,所述粘虫幼虫饲养饲料按照质量组份由干酪素3.4份、蛋白胨1.1份、蛋白粉1.1份、韦氏盐2份、玉米叶子粉10份、蔗糖5.6份、纤维素9.7份、半胱氨酸0.2份、氯化胆碱0.2份、肌醇0.08份、维生素mix 0.3份、醇相溶液2份、水相溶液12份、抗菌试剂1.5份、胆固醇0.04份和琼脂3份组成。其中,干酪素、蛋白胨和蛋白粉为粘虫幼虫提供蛋白质类物质;蔗糖提供碳水化合物;玉米叶子粉也提供一定量的蛋白质和碳水化合物;韦氏盐、半胱氨酸、氯化胆碱、肌醇、醇相溶液和水相溶液提供生长必需的微量元素;维生素mix提供一些生长发育所需的纤维素类物质;抗菌试剂能够保证饲料不被微生物污染;胆固醇是昆虫合成蜕皮激素的前体,而昆虫自身又不能合成只能从食物中获取;琼脂能够使饲料成型,便于饲喂粘虫幼虫。

本发明的另一目的在于提供一种所述粘虫幼虫饲养饲料的制备方法,所述粘虫幼虫饲养饲料的制备方法包括以下步骤:

步骤一,称量相应量的干酪素、蛋白胨、蛋白粉和纤维素混合均匀;称取0.04份胆固醇用14份氯仿溶解,加入到混合物中搅拌均匀,放到通风厨中;

步骤二,制备醇相溶液:称取DL-α-生育酚醋酸酯0.02份、胆钙化醇0.001份、甲萘醌0.001份、亚油酸0.11份和亚麻酸0.054份,最后溶于2份100%乙醇溶液;制备水相溶液:称取烟酰胺0.002份、D-泛酸钙0.002份、盐酸硫胺素0.0005份、核黄素0.001份、吡哆醇0.0005份、叶酸0.0005份、生物素0.00004份、维生素B120.000004份、醋酸锌0.001份、氯化钴0.0005份和类酸钠0.0005份,加入12份的蒸馏水,在磁力搅拌器上搅拌10min;

步骤三,将制备好的醇相溶液2份、水相溶液12份、韦氏盐2份、玉米叶子粉10份、蔗糖5.7份、纤维素9.7份、半胱氨酸0.2份、氯化胆碱0.2份、肌醇0.08份、维生素mix 0.3份和抗菌试剂:抗坏血酸0.8份、尼泊金甲酯0.39份、盐酸氯四环素0.007份、链霉素0.007份、37%甲醛0.15份混合均匀,然后加入到步骤一中的混合物中混匀;

步骤四,称取3份琼脂,加入150份蒸馏水,微波炉加热溶解,最后将琼脂溶液倒入步骤三中的混合物,用搅拌机搅拌均匀;

步骤五,将获得的人工饲料分装到9cm一次性培养皿中。

进一步,所述步骤一中放到通风厨中12h,55℃烘箱12h。

进一步,所述步骤五中当温度达到70℃左右时将获得的人工饲料分装到9cm一次性培养皿中。

综上所述,本发明的优点及积极效果为:饲料包含粘虫幼虫所需要的主要营养物质,营养丰富,成分搭配合理。干酪素,蛋白胨,蛋白粉和蔗糖为粘虫幼虫提供生长发育所需的大量营养元素物质:蛋白质和碳水化合物;半胱氨酸,氯化胆碱,肌醇,维生素mix,醇相溶液和水相溶液为幼虫生长发育提供一些氨基酸,维生素及微量元素物质;胆固醇是幼虫蜕皮所必需的前提物质,能够保证幼虫的顺利生长;抗菌类物质,如抗坏血酸,尼泊金甲酯,盐酸氯四环素,链霉素和37%甲醛作为重要的防腐剂可以极大地延长饲料的保质期,同时能够提供粘虫生长发育所必需的微量元素。

本发明的饲料,粘虫幼虫喜好取食,饲料保质期长(低温贮藏2-3个月或室温放置6-7天,饲料不会变质),可用于实验室内粘虫的种群保持(从1龄至6龄的存活率大于90%);成虫取食蔗糖水后具有较高的繁殖力(产卵前期、产卵量与卵孵化率与对照用玉米叶子饲养的成虫差异不大)。因此,本发明饲料饲养的幼虫可直接用于各类研究方向的实验。本发明饲料所需原料大部分为精制纯品或分析纯,可用于一些要求较为严格的实验;饲料制备时将各组分混合均匀即可,方法简单,无需复杂程序及大量仪器设备。

附图说明

图1是本发明实施例提供的粘虫幼虫饲养饲料的制备方法流程图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。

粘虫幼虫体内这类营养物质的储存决定了粘虫成虫的迁飞能力,而食物中的营养成分组成又与昆虫营养密切相关。限制食物中蛋白质和碳水化合物的比例,能够确定粘虫如何通过自身的生理代谢机制,调节自身营养物质的吸收,从而优化体内碳氮组合。开发新的饲料配方及其能够灵活调节营养物质对于昆虫营养代谢研究具有重要作用。此外,人工饲料饲养的粘虫幼虫并不能完全和自然条件下的粘虫相同,因此合理评估人工饲料的应用潜能,对于提高饲养效率具有重要价值。

本发明实施例提供的粘虫幼虫饲养饲料按照质量组份由干酪素3.4份、蛋白胨1.1份、蛋白粉1.1份、韦氏盐2份、玉米叶子粉10份、蔗糖5.6份、纤维素9.7份、半胱氨酸0.2份、氯化胆碱0.2份、肌醇0.08份、维生素mix 0.3份、醇相溶液2份、水相溶液12份、抗菌试剂1.5份、胆固醇0.04份和琼脂3份组成。

如图1所示,本发明实施例提供的粘虫幼虫饲养饲料的制备方法包括以下步骤:

S101:称量相应量的干酪素、蛋白胨、蛋白粉和纤维素混合均匀;称取0.04份胆固醇用14份氯仿溶解,加入到混合物中搅拌均匀,放到通风厨中12h,55℃烘箱12h;

S102:制备醇相溶液:称取DL-α-生育酚醋酸酯0.02份、胆钙化醇0.001份、甲萘醌0.001份、亚油酸0.11份和亚麻酸0.054份,最后溶于2份100%乙醇溶液;制备水相溶液:称取烟酰胺0.002份、D-泛酸钙0.002份、盐酸硫胺素0.0005份、核黄素0.001份、吡哆醇0.0005份、叶酸0.0005份、生物素0.00004份、维生素B120.000004份、醋酸锌0.001份、氯化钴0.0005份和类酸钠0.0005份,加入12份的蒸馏水,在磁力搅拌器上搅拌10min;

S103:将制备好的醇相溶液2份、水相溶液12份、韦氏盐2份、玉米叶子粉10份、蔗糖5.7份、纤维素9.7份、半胱氨酸0.2份、氯化胆碱0.2份、肌醇0.08份、维生素mix 0.3份和抗菌试剂:抗坏血酸0.8份、尼泊金甲酯0.39份、盐酸氯四环素0.007份、链霉素0.007份、37%甲醛0.15份混合均匀,然后加入到S101中的混合物中混匀;

S104:称取3份琼脂,加入150份蒸馏水,微波炉加热溶解,最后将琼脂溶液倒入S103中的混合物,用搅拌机搅拌均匀;

S105:当温度达到70℃左右时立即将获得的人工饲料分装到9cm一次性培养皿中。

本发明实施例提供的粘虫幼虫饲养饲料每2天更换一次。

下面结合具体实施例对本发明的应用原理作进一步的描述。

实施例1:

(1)将胆固醇充分与饲料物质混匀:饲料中胆固醇为大颗粒物质且不能溶于水,为了能使胆固醇充分混于饲料,先称取0.04g的胆固醇,用14ml氯仿溶解,然后倒入事先混好的7.5g干酪素和16.1g纤维素中,55℃烘干。

(2)醇相溶液和水相溶液的准备:醇相,称取DL-α-生育酚醋酸酯0.02ml、胆钙化醇0.001g、甲萘醌0.001g、亚油酸0.11ml和亚麻酸0.054ml,最后溶于2ml 100%乙醇溶液;水相,称取烟酰胺0.002g、D-泛酸钙0.002g、盐酸硫胺素0.0005g、核黄素0.001g、吡哆醇0.0005g、叶酸0.0005g、生物素0.00004g、维生素B120.000004g、醋酸锌0.001g、氯化钴0.0005g和类酸钠0.0005g,加入12ml的蒸馏水,在磁力搅拌器上搅拌10min。

(3)将制备好的醇相溶液2ml、水相溶液12ml、韦氏盐2g、蔗糖7.5g、纤维素16.1g、半胱氨酸0.2g、氯化胆碱0.2g、肌醇0.08g、维生素mix 0.3g和抗菌试剂:抗坏血酸0.8g、尼泊金甲酯0.39g、盐酸氯四环素0.007g、链霉素0.007g、37%甲醛0.15ml混合均匀,然后加入到(1)中的混合物中混匀。

(4)称取3g琼脂,加入150ml蒸馏水,微波炉加热溶解,最后将琼脂溶液倒入(3)中的混合物,用搅拌机搅拌均匀。

(5)当温度达到70℃左右时立即将获得的人工饲料分装到9cm一次性培养皿中。水汽完全排完后放入4℃冰箱保存。

实施例2:

(1)玉米叶子粉的准备:温室内种植玉米,当玉米幼苗长至30cm左右时剪取叶片,冻干机冻干之后用打浆机打成粉末状备用。

(2)将胆固醇充分与饲料物质混匀:饲料中胆固醇为大颗粒物质且不能溶于水,为了能使胆固醇充分混于饲料,先称取0.04g的胆固醇,用14ml氯仿溶解,然后倒入事先混好的3.4g干酪素、1.1g蛋白胨、1.1g蛋白粉和9.7g纤维素中,55℃烘干。

(3)醇相溶液和水相溶液的准备:醇相,称取DL-α-生育酚醋酸酯0.02ml、胆钙化醇0.001g、甲萘醌0.001g、亚油酸0.11ml和亚麻酸0.054ml,最后溶于2ml 100%乙醇溶液;水相,称取烟酰胺0.002g、D-泛酸钙0.002g、盐酸硫胺素0.0005g、核黄素0.001g、吡哆醇0.0005g、叶酸0.0005g、生物素0.00004g、维生素B120.000004g、醋酸锌0.001g、氯化钴0.0005g和类酸钠0.0005g,加入12ml的蒸馏水,在磁力搅拌器上搅拌10min。

(4)将制备好的醇相溶液2ml、水相溶液12ml、玉米叶子粉10g、韦氏盐2g、蔗糖5.6g、纤维素9.7g、半胱氨酸0.2g、氯化胆碱0.2g、肌醇0.08g、维生素mix 0.3g和抗菌试剂:抗坏血酸0.8g、尼泊金甲酯0.39g、盐酸氯四环素0.007g、链霉素0.007g、37%甲醛0.15ml混合均匀,然后加入到(2)中的混合物中混匀。

(5)称取3g琼脂,加入150ml蒸馏水,微波炉加热溶解,最后将琼脂溶液倒入(4)中的混合物,用搅拌机搅拌均匀。

(6)当温度达到70℃左右时立即将获得的人工饲料分装到9cm一次性培养皿中。水汽完全排完后放入4℃冰箱保存。

对比例:

温室内种植玉米幼苗,取用长度为30cm左右的玉米叶子直接饲喂粘虫幼虫。

下面结合实验对本发明的应用效果作详细的描述。

实施例1人工饲料效果测定:(1)粘虫幼虫的获得:从河南济源白云科技有限公司购买粘虫卵,之后在实验室人工培养箱25℃,L:D=14:10光周期培养,孵化出的一龄幼虫用于人工饲料测定。

(2)20头一龄幼虫单头饲喂实施例1人工饲料,每天记录粘虫龄期计算发育历期,结果见表1。

(3)记录每个龄期的存活率,化蛹率及羽化率,结果见表2。

实施例2人工饲料效果测定:(1)粘虫幼虫的获得:从河南济源白云科技有限公司购买粘虫卵,之后在实验室人工培养箱25℃,L:D=14:10光周期培养,孵化出的一龄幼虫用于人工饲料测定。

(2)20头一龄幼虫单头饲喂实施例2人工饲料,每天记录粘虫龄期计算发育历期,结果见表1。

(3)记录每个龄期的存活率,化蛹率及羽化率,结果见表2。

对比例效果测定:用新鲜玉米叶子饲喂粘虫,具体实验结果见表1、表2。

由表1可见,粘虫幼虫取食人工饲料后,三龄、四龄、五龄、六龄都和对比例中的发育历期无显著差异,而蛹期有差异,但不是很显著;实施例1的结果就明显不如实施例2的结果。由表二可见,同样是实施例2和对比例不存在显著差异,而实施例1差异显著,效果最差。综合上述结果表明,本发明饲料可用于饲养粘虫幼虫,用于实验室试虫种群维持和扩大。

表1

表2

表1中所列数据为平均值±标准误,同列相同字母表示差异不显著,同列不同字母表示差异显著。表2中所列数据为各龄期存活率、化蛹率及羽化率。

由表1和表2中数据可知,本粘虫幼虫饲养饲料(实施例2)基本上和对比例没有显著差异,可以证明本饲料对粘虫幼虫不存在毒理作用,能够使粘虫顺利完成生活史,各龄期存活率均大于90%,适合做为粘虫幼虫的人工饲料。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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