一种抗氧化抗衰老sod纳米硒肽组合物及其制备方法

一种抗氧化抗衰老sod纳米硒肽组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物，每100克组合物中各组分含量为：SOD150?650万活力单位、血红蛋白肽35?70g、低聚糖15?50g、纳米硒4?8mg、葡萄糖酸锌5000?7200mg、葡萄糖酸锰1000?2200mg、葡萄糖酸铜600?1200mg。其制备方法是：先以猪血红细胞为原料制备SOD和血红蛋白肽，以低聚糖为介质模板制备纳米硒，再以血红蛋白肽与纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰以及葡萄糖酸铜进行螯合反应，制备血红蛋白肽螯合粉，然后将SOD、低聚糖与血红蛋白肽螯合粉混合即得SOD纳米硒肽组合物，根据需要可制成粉剂、片剂或胶囊剂等常规内服制剂。本发明科学遣药组方，从调、养、补三个方面来增强和提高机体SOD活性与含量，能显著清除体内自由基，降低丙二醛（MDA）含量，从而实现抗氧化、抗衰老、增强免疫力的功效。
【专利说明】
一种抗氧化抗衰老SOD纳米砸肽组合物及其制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种保健食品，尤其涉及一种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物及其 制备方法。
【背景技术】
[0002] 人体因增龄、疾病、创伤、环境污染、不良生活方式以及化学药物等因素会产生过 多的活性自由基，过多的自由基会引起膜损伤和交联键的形成，使机体内蛋白质变性，核酸 代谢紊乱，生物酶破坏，激素被氧化，并导致膜功能损失，溶酶体内衰老色素大量堆积，产生 大量脂质过氧化物(LP0)和丙二醛(MDA)，使机体各脏器损伤和功能丧失，从而导致机体衰 老与多种疾病。大量的科学研究表明，自由基引起的一系列氧化和过氧化反应是人类衰老 和患病的根源，人体的衰老及90%以上的疾病与自由基有关。
[0003] 超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，简称S0D)是一类含金属的酶，按金属辅 基成分的不同可分为三种类型，即含有铜锌辅基的Cu，Zn-SOD，含有锰辅基的Mn-SOD，以及 含有铁辅基的Fe-S0D，高等动物细胞内只有两种S0D，即Cu，Ζη-SOD和Μη-SOD。S0D是国际上 公认的超氧阴离子氧自由基（〇厂·）的专一清除剂，其作用机理是S0D特异性地将机体产生 的超氧阴离子氧自由基（〇2~）歧化为过氧化氢(H2O2)和分子氧(〇2)，由此生成的过氧化氢 (H 202)再经过氧化氢酶(CAT)或谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的作用进一步分解为无毒的 水(H2〇)。因此，S0D是构成机体防御氧自由基损伤的第一道防线。S0D催化〇2_?歧化反应式 如下：
国内外大量的实验和临床研究都一一证实，无论青年还是老年正常人，其血液中S0D和 淋巴细胞中S0D的活性和含量均随年龄的增长而呈现明显的渐进性降低趋势，尤其是45岁 以后以及老年期人体红细胞内的S0D活性的下降更为显著。进一步的研究发现，导致S0D活 性或含量随增龄而降低的主要因素有:第一，随着年龄递增，机体调节酶生成的内分泌系统 功能也随之减退，使抗氧化酶系统合成减少，S0D的合成减少;第二，随着年龄的增长，人体 内活性氧自由基生成增加，活性氧包括超氧阴离子自由基(〇2~）、羟自由基(·〇Η)、过氧化氢 (Η 202)、单线态氧(42)以及脂质过氧化氢等，它们都是性质极为活泼、破坏性很大的生物毒 性物质，这些物质的堆积给S0D造成毒害作用，使S0D性质改变，结构破坏，酶活性下降甚至 灭活，导致机体内无活性S0D增多;第三，在机体衰老过程中其它抗氧化剂和抗氧化酶类，如 过氧化氢酶(CAT)、谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和维生素 C含量与抗氧化能力下降。这一 方面增加了SOD的消耗，另一方面也加快了SOD的失活，因而造成SOD活性的降低;第四，随着 年龄的增长，与SOD密切相关的微量元素如Cu、Zn、Mn等在体内的含量降低(过多丧失或摄入 不足），也是造成SOD活性和含量进一步降低的重要原因。因为在机体Cu、Zn-S0D和Mn-SOD的 分子结构中，Cu、Zn、Mn三种微量元素对维持SOD活性和正常结构及分子构象具有重要作用， 如果这些元素减少或丢失过多，将会影响SOD的合成，或使SOD活性下降甚至失活。
[0004] 因此，从衰老的自由基学说出发，通过补充外源性抗氧化酶类(如S0D、CAT、GSH-Px 等)和抗氧化剂(如维生素 C、维生素 E、辅酶Q、谷胱甘肽等）以及与抗氧化酶活性中心密切相 关的矿物元素(如〇!、211、111、56等），以增强和提高机体500活性与含量，无疑是实现清除自 由基对机体的氧化作用，延缓机体衰老进程的重要途径。
[0005] 目前市场上出现了一些含有S0D的药物和保健食品，其中有不少已申报了发明专 利，如专利号ZL200610044379.1公开了一种S0D保健组合物，该专利是利用S0D与VC、VE、花 粉以及何首乌与黄精提取物混合复配，得到具有抗氧化、抗衰老、抗疲劳、增强免疫、降脂等 功能的保健组合物;专利号ZL200810112887.8公开了一种S0D复合胶囊及其制备方法，该专 利采用从蝌蚪中提取的S0D酶制剂，与白藜芦醇、辅酶Q10、鹅肝提取物、小麦胚芽提取物、红 花提取物、苦荞提取物混合后，分装胶囊，产品具有抗氧化功能，但工艺流程繁琐；专利号 ZL201010604957.9公开了一种抗衰老、降压、降脂S0D药物组合物及其制备方法，该专利主 要取人参粉、田七粉、红花粉、银杏粉与松树皮提取物混合烘干灭菌后，加入S0D混匀，制成 胶囊制剂;专利号ZL201110197534.4公开了 S0D胶原蛋白肽美颜抗衰老剂，该专利选用天然 植物S0D与胶原蛋白多肽、透明质酸、珍珠粉以及人参皂苷提取物的合理组配，具有活化细 胞机能，提高免疫力和美容抗衰老的功效;专利号ZL201110254795.5公开了一种S0D复合胶 囊及其制备方法，该专利选取S0D、人参提取物、珍珠粉、党参提取物、红花提取物、绞股蓝提 取物、螺旋藻、松树皮提取物与枸杞多糖组合，制成肠溶性胶囊，产品具有延缓衰老，增强机 体免疫力的效果；专利号ZL201210179382.X公开了一种治疗化疗、放疗综合症口服生物药 及其制备方法，该专利主要以重组人源超氧化物歧化酶(rhSOD)、甘露糖、海藻糖、金属硫蛋 白、维生素 C和维生素 E为原料，通过分步溶解、过滤、冷冻干燥等步骤加工而成的粉状口服 生物新药，产品在治疗癌症病人放、化疗综合症，保护白细胞、淋巴细胞不受损失以及抗氧 化方面具有较好的功效。这些专利申请所涉及的产品配方各不相同，但制作工艺大同小异， 其中绝大多数是以S0D添加中草药提取物的方式补充和调节人体的S0D活性，也有一些是通 过以S0D组合其他抗氧化剂(如维生素 C和维生素 E)协同作用的方式来清除体内氧自由基， 没有涉及到整合外源性S0D、酶活性中心元素、活性小肽与功能性低聚糖的功效，并通过科 学组方，协同增效来全面提高和增强机体的S0D活性。因此，现有技术方案在产品组方和疗 效方面存在不足之处。

【发明内容】

[0006] 本发明的目的就是为了克服现有技术的不足，提供一种全面整合外源性S0D、酶活 性中心元素、活性小肽与功能性低聚糖的功效，使S0D在矿物元素、小分子肽和抗氧化低聚 糖的共同保护与促进下吸收更好、功效更强的抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物，所述的组 合物含有S0D、血红蛋白肽、低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，可以抗 氧化，抗衰老，增强人体免疫力。
[0007] 本发明的目的是通过下述技术方案实现的： 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物，其特征在于:所述组合物中含有S0D、血红蛋 白肽、低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，每l〇〇g组合物中各个组分含 量为： S0D150-650万活力单位， 血红蛋白肽35-70g， 低聚糖15-50g， 纳米硒4_8mg， 葡萄糖酸锌5000-7200mg， 葡萄糖酸猛1000-2200 mg， 葡萄糖酸铜600-1200 mg。
[0008] 所述的SOD是猪血红细胞提取物。
[0009] 所述的血红蛋白肽是猪血红蛋白酶解物，含有60%以上的活性小分子肽，所述活性 小分子肽的相对分子量为180-1000Da。
[0010] 所述的纳米硒包括低聚糖纳米微球模板和富集在其上的纳米硒。
[0011] 所述的低聚糖为低聚果糖、异麦芽低聚糖、低聚半乳糖或低聚木糖中的任一种。
[0012] 本发明的另一个目的是提供一种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法， 其特征在于:所述组合物中含有S0D、血红蛋白肽、低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸 锰、葡萄糖酸铜，每l〇〇g组合物中各个组分含量为:S0D150-650万活力单位，血红蛋白肽35-70g，低聚糖15-50g，纳米硒4-8mg，葡萄糖酸锌5000-7200mg，葡萄糖酸猛1000-2200 mg，葡 萄糖酸铜600-1200 mg，包括如下工艺步骤： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血，加入柠檬酸钠做抗凝处理， 离心收集血红细胞，然后加入血红细胞体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白 溶液； B. 通过热变性反应收集上清液、血渣： 即在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至5.2-5.5,然后升温至60°C，保温30-50min，快速降温至45°C以下，以转速>10000r/min进行离心分离，分别收集上清液I和血渣 I;用氢氧化钠调节上清液I pH值至6.2~6.5，快速升温至70°C，保温10_20min后，快速降温 至45°C以下，以转速> 10000r/min进行离心分离，分别收集上清液Π 和血渣Π ; C. 通过超滤浓缩获取S0D酶液： 即将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至 原体积的1/10，得到蓝绿色的S0D酶液； D. 通过冷冻干燥获取S0D冻干粉： 即将S0D酶液进行冷冻干燥，得S0D冻干粉，检测S0D酶活力，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液： 将步骤B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，加入两血渣重量3-5倍的去离子水溶解并搅 拌均匀，调节pH值至6.0~6.5，按每公斤血渣加入蛋白酶3.0-6.0克，加热至50-55°C，搅拌 下保温酶解4-8h，将酶解液升温至85 °C灭酶20分钟，即得到血红蛋白酶解液； F. 离心分离获得上清液m:将血红蛋白酶解液进行高速离心，离心转速>10000r/ min，收集上清液ΙΠ ，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液： 即将上清液m经截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液;将收集的 超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，收集浓缩液，得到血红蛋白肽溶液； H. 喷雾干燥获得血红蛋白肽粉： 即将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 称取亚硒酸钠溶于去离子水中，搅拌下依次加入低聚糖和维生素 C，50°C搅拌反应lh， 即制得纳米硒溶液； (3) 螯合配制： 取步骤（1)所制备的血红蛋白肽粉，加去离子水溶解搅拌均匀，配制成质量浓度为10-20%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅拌反应1小时，然后 依次加入葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰和葡萄糖酸铜，在60°C下继续搅拌反应1小时，得到血红 蛋白肽螯合溶液;其中血红蛋白肽粉、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰和葡萄糖酸铜的添加量均为 配比的重量； (4) 喷雾干燥： 即将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5 )混配得到SOD纳米硒肽组合物： 即按配比称取低聚糖和步骤（1)D中所制备的SOD冻干粉，加入到步骤(4)所制备的血红 蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得SOD纳米硒肽组合物。
[0013] 在制作方法的步骤(1 )A中所述柠檬酸钠为食品级柠檬酸钠，添加量为新鲜猪血重 量的0.5%。
[0014] 在制作方法的步骤(1)E中所述的蛋白酶为来源于米曲霉的弱酸性蛋白酶，酶活力 为390000-430000HU/g。
[0015] 在制作方法的步骤(2)所述的亚硒酸钠的使用量为配比中硒的量换算成相应的亚 硒酸钠(硒含量为45.65%)的重量，低聚糖、亚硒酸钠和维生素 C的混合质量比为100:1:10。
[0016] 在制作方法的步骤(5)所述低聚糖的添加量为配比中低聚糖总量减去步骤(2)所 添加的低聚糖量之后的余量。
[0017] 本发明组合物可采用药物制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂。例如，将本 发明组合物研磨成粉制成粉剂;加入制备不同剂型所需的各种常规辅料制备成片剂、胶囊 剂等。
[0018] 根据以上技术方案提出的这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物，具有以下优点： (1)本发明基于衰老的自由基学说，科学遣药组方，从调、养、补三个方面来增强和提高 机体S0D活性与含量，最终达到清除机体自由基，实现抗氧化、抗衰老、增强免疫力的效果。 一方面，通过补充吸收外源性抗氧化酶S0D，来提高机体内S0D总体水平（8卩"补"）；另一方 面，又添加了与S0D及GSH-Px活性中心密切相关的矿物元素(金属离子），通过激活机体本身 内在(存量)抗氧化酶S0D活性，使其活性得到提升与增强，或使其不再下降失活（8卩"调"）； 再者，通过添加了功能性低聚糖和活性肽，从改善人体内微生态环境，调节胃肠功能，促进 营养吸收率，特别是硒、锌、锰、铜等矿物离子的吸收以及增强机体免疫力方面，间接提升机 体的SOD和GSH-Px的抗氧化活性（8卩"养"）。
[0019] (2)本发明产品中各功效成份巧妙组合，有机结合，相互补充，协同增效。例如，将 活性小分子肽与矿物(金属)离子Se、Zn、Mn、Cu结合在一起，形成稳定的可溶性的蛋白肽复 合物，从而提高了这些矿物(金属)离子的吸收利用率;再如，利用低聚糖对纳米硒的均匀分 散和稳定作用，以低聚糖为微球模板富集、稳定纳米硒，同时低聚糖还是一个缓冲载体，可 以逐步将硒释放出来，起到持久补硒和抗氧化的作用，另外，低聚糖在产品中也发挥润肠通 便排毒以及增甜矫味的功效;又如，利用Cu、Zn和Μη三种金属离子是S0D酶活性中心元素， 对S0D有一定的保护和稳定作用的特性，将Cu、Zn和Μη与S0D混配在一起，在一定程度上起到 保护S0D酶蛋白免遭胃酸破坏，稳定和提高S0D酶活性的作用。
[0020] (3)本发明以猪血红细胞为原料，采用联产制取工艺，同步制备S0D和血红蛋白肽 原料，工艺简单，生产周期短，成本低，易于实施。
[0021] (4)本发明在制备S0D原料的过程中，采用等电点沉淀和热变性方法分离去除杂蛋 白，用超滤技术浓缩和纯化S0D，不添加任何化学试剂和有机溶剂，避免了外源有毒物质的 引入，提尚了广品的安全性。
[0022] (5)本发明产品中矿物元素或金属离子的使用均按GB14880和GB2760的规定或中 国营养学会制定的DRIs值(每日参考摄入量)执行，保证了绝对的安全性。
【具体实施方式】
[0023]下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的说明，但是本发明的实施方式并 不局限于此实施例表示的范围。
[0024] 本发明涉及的这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物，其特征在于:所述组合物中 含有S0D、血红蛋白肽、低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，每100g组合 物中各个组分含量为： S0D150-650万活力单位， 血红蛋白肽35-70g， 低聚糖15-50g， 纳米硒4_8mg， 葡萄糖酸锌5000-7200mg， 葡萄糖酸猛1000-2200 mg， 葡萄糖酸铜600-1200 mg。
[0025] 所述的SOD是猪血红细胞提取物。
[0026] 所述的血红蛋白肽是猪血红蛋白酶解物，含有60%以上的活性小分子肽，所述活性 小分子肽的相对分子量为180-1000Da。
[0027] 所述的纳米硒包括低聚糖纳米微球模板和富集在其上的纳米硒。
[0028] 所述的低聚糖为低聚果糖、异麦芽低聚糖、低聚半乳糖或低聚木糖中的任一种。 [0029]本发明的另一个目的是提供一种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法， 其特征在于:所述组合物中含有S0D、血红蛋白肽、低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸 锰、葡萄糖酸铜，每lOOg组合物中各个组分含量为:S0D150-650万活力单位，血红蛋白肽35-70g，低聚糖15-50g，纳米硒4-8mg，葡萄糖酸锌5000-7200mg，葡萄糖酸猛1000-2200 mg，葡 萄糖酸铜600-1200 mg，包括如下工艺步骤： (1) SOD和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血，加入柠檬酸钠做抗凝处理， 离心收集血红细胞，然后加入血红细胞体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白 溶液； B. 通过热变性反应收集上清液、血渣： 即在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至5.2-5.5,然后升温至60°C，保温30-50min，快速降温至45°C以下，以转速>10000r/min进行离心分离，分别收集上清液I和血渣 I;用氢氧化钠调节上清液I pH值至6.2~6.5，快速升温至70°C，保温10_20min后，快速降温 至45°C以下，以转速> 10000r/min进行离心分离，分别收集上清液Π 和血渣Π ; C. 通过超滤浓缩获取SOD酶液： 即将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至 原体积的1/10，得到蓝绿色的SOD酶液； D. 通过冷冻干燥获取SOD冻干粉： 即将SOD酶液进行冷冻干燥，得SOD冻干粉，检测SOD酶活力，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液： 将步骤B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，加入两血渣重量3-5倍的去离子水溶解并搅 拌均匀，调节pH值至6.0~6.5，按每公斤血渣加入蛋白酶3.0-6.0克，加热至50-55°C，搅拌 下保温酶解4-8h，将酶解液升温至85 °C灭酶20分钟，即得到血红蛋白酶解液； F. 离心分离获得上清液ΙΠ :将血红蛋白酶解液进行高速离心，离心转速>10000r/ min，收集上清液ΙΠ ，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液： 即将上清液m经截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液;将收集的 超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，收集浓缩液，得到血红蛋白肽溶液； H. 喷雾干燥获得血红蛋白肽粉： 即将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 称取亚硒酸钠溶于去离子水中，搅拌下依次加入低聚糖和维生素 C，50°C搅拌反应lh， 即制得纳米硒溶液； (3) 螯合配制： 取步骤（1)所制备的血红蛋白肽粉，加去离子水溶解搅拌均匀，配制成质量浓度为10-20%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅拌反应1小时，然后 依次加入葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰和葡萄糖酸铜，在60°C下继续搅拌反应1小时，得到血红 蛋白肽螯合溶液;其中血红蛋白肽粉、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰和葡萄糖酸铜的添加量均为 配比的重量； (4) 喷雾干燥： 即将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5 )混配得到SOD纳米硒肽组合物： 即按配比称取低聚糖和步骤（1)D中所制备的SOD冻干粉，加入到步骤(4)所制备的血红 蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得SOD纳米硒肽组合物。
[0030] 在制作方法的步骤(1)A中所述柠檬酸钠为食品级柠檬酸钠，添加量为新鲜猪血重 量的0.5%。
[0031] 在制作方法的步骤(1)E中所述的蛋白酶为来源于米曲霉的弱酸性蛋白酶，酶活力 为390000-430000HU/g。
[0032] 在制作方法的步骤(2)所述的亚硒酸钠的使用量为配比中硒的量换算成相应的亚 硒酸钠(硒含量为45.65%)的重量，低聚糖、亚硒酸钠和维生素 C的混合质量比为100:1:10。
[0033] 在制作方法的步骤(5)所述低聚糖的添加量为配比中低聚糖总量减去步骤(2)所 添加的低聚糖量之后的余量。
[0034] 本发明组合物可采用药物制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂。例如，将本 发明组合物研磨成粉制成粉剂;加入制备不同剂型所需的各种常规辅料制备成片剂、胶囊 剂等。
[0035] 下面结合本发明主要功效成分的性能，对本发明做进一步说明： (1)S0D SOD是国际上公认的超氧阴离子氧自由基（Of )的专一清除剂，是生物体内的一种抗 氧化酶，它对平衡机体氧化与抗氧化系统，免除自由基损伤起着至关重要的作用。S0D对人 体的功效可归之为"一清四抗"："一清"即有效清除机体内的超氧阴离子氧自由基，保护人 体细胞免遭氧自由基的毒害；"四抗"即抗衰老、抗疾病、抗辐射和抗疲劳。S0D因清除机体内 产生的过量的超氧阴离子自由基（〇厂·），保护DNA、蛋白质和细胞膜免遭超氧阴离子（0 2 _·)的破坏作用，进而延缓因自由基损害生命大分子而引起的衰老现象，如延缓皮肤衰老和 老年斑的形成;S0D可增强人体自身的免疫力，提高人体对自由基引发的一系列疾病的抵抗 力，如炎症、肿瘤、白内障、肺气肿、肾脏病、心脑血管疾病等，治疗由于免疫功能下降引发的 疾病;S0D可清除放、化疗所诱发的大量自由基，从而减少放射对人体正常组织的损伤，减轻 癌症等肿瘤患者放化疗时的痛苦及副作用；S0D可消除疲劳，增强人体对剧烈运动的适应 力。
[0036] (2)硒 硒是生物体中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHG-Px) 的活性中心组成元素，在体内通过谷胱甘肽过氧化物酶特异性地催化还原型谷胱甘肽与过 氧化物的氧化还原反应，将有毒的氧自由基一一过氧化氢(H 2〇2)还原成无毒的水，以保护生 物膜免受损害。此外，硒还能与脂蛋白发生作用，含硒的蛋白质具有很强的抗氧化活性，并 且硒还参与辅酶Q的合成，辅酶Q是氧化-还原反应的载氢体，在单电子运转过程中通过醌 型-半醌型转换，捕获自由基中的未配对电子，从而起到清除自由基的作用。因此，硒与过氧 化氢酶(CAT)和谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)共同构成机体防御氧自由基损伤的第二道防 线。
[0037] 近年来研究发现，与无机硒及有机硒相比，纳米硒具有高安全性、高生物活性的特 点，其体外清除自由基是有机硒的2.5倍，无机硒的5倍，是一类很好的抗氧化剂和自由基清 除剂。关于硒的日摄入量，我国科技工作者杨光圻教授和陈孝曙教授经过多年的研究分析， 得出结论:人体对硒的生理需要量为40yg/日，界限中毒剂量为800yg/日，建议膳食硒补充 量为50-250yg/日，最高安全摄入量为400yg/日，此数据为FDA/WHO/IAEA三个国际组织所采 用。1998年中国营养学会已将人体必需的微量元素硒列为15种每日膳食营养素之一，并推 荐成年人每日膳食硒补充量为50微克。
[0038] (3)活性小肽 活性小肽是指相对分子量介于180~lOOODa之间的一类寡肽(一般包括二肽和三肽）。 小肽的功能主要体现在以下几个方面：（1)促进氨基酸吸收，提高蛋白质合成速度。小肽不 仅能被小肠粘膜吸收利用，其合成蛋白质的速度也远远高于氨基酸。（2)提高矿物质的吸收 利用率。在动物体(包括人体）内，大多数的矿物元素吸收都要以蛋白质特别是小肽为载体， 小肽能与多种矿物元素如钙、镁、铁、锌、铜、硒等结合形成可溶性的小肽络合物或螯合物， 小肽可充当许多矿物元素体内运输的载体，从而提高矿物元素的吸收利用。（3)提高机体免 疫力。小肽能够通过诱导小肠绒毛刷状缘膜酶活性上升和刺激消化酶分泌，抑制大肠杆菌 的繁殖，来提高机体的免疫力。
[0039] (4)低聚糖 低聚糖又名寡糖，是由2-10个糖基通过糖苷键连接而成的小聚合体。低聚糖能改善人 体内微生态环境，有利于双歧杆菌和其它有益菌的增殖，抑制肠内沙门氏菌和腐败菌的生 长，调节胃肠功能，长期食用可减缓衰老、通便、抑菌、防癌、抗癌、减轻肝脏负担、提高营养 吸收率，特别是促进钙、铁、锌等矿物离子的吸收;低聚糖类似水溶性植物纤维，能改善血脂 代谢，降低血液中胆固醇和甘油三酯的含量。近年来，一些研究表明，某些低聚糖如低聚果 糖、异麦芽低聚糖、低聚半乳糖等不仅具有增强免疫和调节肠道菌群的功能，还具有增强机 体抗氧化的作用。低聚糖通过直接消除超氧负离子，或通过体内代谢途径，激活机体内在的 S0D和GSH-Px，使其抗氧化活性提高，达到抗氧化作用。
[0040] (5)抗氧化酶活性中心金属元素 铜:铜是人体必需的微量矿物元素。铜是机体内蛋白质和酶的重要组成部分，许多重要 的酶需要微量铜的参与和活化。例如，铜是Cu，Zn-S0D酶分子的活性中心元素，研究证实，当 用络合剂将Cu，Zn-S0D中的Cu透析掉后，S0D就失去原来的生物活性，而当重新加入Cu后， S0D的活性又恢复到原来的水平。另外，研究还发现，在一定浓度范围内，增加环境中游离的 铜离子浓度可显著提高S0D活性。因此，Cu与S0D酶活性直接相关，起着传递电子的作用。
[0041] 成年人每天需要铜0.05~2毫克，孕、产妇和青、少年的需要量还要多些。中国营养 学会没有制定每日膳食中铜的需要量，但制定了每日铜的"安全和适宜的摄入量"：半岁前 婴儿每天需0.5~0.7毫克，半岁至1岁每天0.7~1.0毫克，1岁以上每天1.0~1.5毫克，4岁 以上每天1.5~2.0毫克，7岁以上每天2.0~2.5毫克，11岁以上至青年、成年，均为每天2.0 ~3.0毫克。这个摄入量与美国科学研究委员会制定的"估计每日饮食中安全充足的铜摄取 量"相当。
[0042]锌:锌是人体必需的微量兀素之一，在人体生长发育、生殖遗传、免疫、内分泌等重 要生理过程中起着极其重要的作用。锌是Cu，Zn-S0D酶分子的活性中心元素，研究表明，锌 的作用一是调节咪唑基与Cu的相互作用，二是稳定活性中心的结构，锌包埋于S0D酶的疏 水基团中参与维持和稳定酶的结构，若除去酶分子中Zn而保留原有环境中Cu，S0D仍有相 当尚的活性。
[0043] 锰:锰是人体必需的微量元素之一，在维持人体健康方面发挥重要作用： (1) 促进骨骼的生长发育。锰参与活化硫酸软骨素合成的酶系统，促进骨质的合成； (2) 维持正常的糖代谢和脂肪代谢； (3) 锰在维持正常脑功能中必不可缺，与智力发展、思维、情感、行为均有关系，锰对阿 尔茨海默症(老年痴呆)具有疗效； (4) 锰有抗衰老、抗氧化的作用。锰是Mn-SOD活性中心的组成元素，S0D必须在锰离子的 催化下才能发挥作用。
[0044] 此外，锰还能刺激免疫细胞增殖，增强人体的免疫力。成年人通常锰摄入量为每天 2~5mg，吸收率为5%~10%，如果少于这个量，就有可能出现锰缺乏症状。 铁:铁是血红蛋白的组成成份，参与氧的运输和存储。铁元素在人体内参与造血，并形 成血红蛋白、肌红蛋白，参与氧的携带和运输的整个过程。铁结合多种酶分解氧化物，解毒 抑制细菌，释放能量。铁是Fe-SOD的活性中心元素，对S0D活性的影响至关重要。值得一提的 是，血红素铁(也称有机卟啉铁)在肠道可以不受食物其他因素的影响进入肠黏膜，较其他 植物性铁或动物性非血红素型铁吸收率高，是无机铁的三倍。本发明中添加的血红蛋白肽 富含血红素铁，是优良的补铁剂。
[0045] 以下给出本发明的实施例，并结合实施例进一步阐述本发明。
[0046] 以制备1000g S0D纳米硒肽组合物粉剂为例： 实施例1: 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 S0D、血红蛋白肽、低聚果糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中各个 组分含量为:S0D2000万活力单位，血红蛋白肽500g低聚果糖400g，纳米硒70mg，葡萄糖酸锌 50g，葡萄糖酸锰12g、葡萄糖酸铜7g。
[0047] 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血100L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心分离，收集血红细胞46L，然后加入血红 细胞体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液92L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣:在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.5，然后升温至60°C，保温40min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液I61L和血渣122公斤；调节上清液I pH值至6.3，快速升温至70°C，保温20min 后，快速降温至45°C以下，经用管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液Π 45L和血渣 Π 4.2公斤； C. 通过超滤浓缩获取S0D酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的S0D酶液4.5L; D. 通过冷冻干燥获取S0D干冻粉:将S0D酶液进行冷冻干燥，得S0D冻干粉4.8g，检测酶 活力为4260U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:将步骤（1 )B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，共计 26.2公斤，加入血渣重量3倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.3，按每公斤血渣加 入弱酸性蛋白水解酶4.0克，加热至55°C，搅拌下保温酶解8h，将酶解液升温至85°C灭酶 20min，即得到血红蛋白酶解液93L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液II187.6L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液I Π 经截留分子量为5000Da的超滤 膜装置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行 纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液56L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉：即将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉10.6 公斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠153mg(即硒含量70mg)，溶于1500mL去离子水中，搅拌下依次加 入低聚果糖15.3g和维生素 C1.53g，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉500g，加去离子水3L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为14.3%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌50g、葡萄糖酸锰12g和葡萄糖酸铜7g， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥：即将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取低聚果糖385g(配方中低聚果糖总量 减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤(1)D所制备的SOD冻干粉2000万活力单位，加入到步 骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得1000g SOD纳米硒肽组合物。
[0048] 将上述所得的S0D纳米硒肽组合物经研磨过100目筛，再经辐照灭菌，按照需要量 包装，可制成粉剂。
[0049 ]服用方法与用量:温水冲服，成年人每日服用3次，每次0.5g。
[0050] 实施例2: 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 S0D、血红蛋白肽、异麦芽低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中 各个组分含量为：S0D4000万活力单位，血红蛋白肽680g，异麦芽低聚糖200g，纳米硒60mg， 葡萄糖酸锌60g，葡萄糖酸锰15g、葡萄糖酸铜9g。
[0051 ] 这种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血200L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心收集血红细胞89L，然后加入血红细胞体 积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液178L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣：在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.2，然后升温至60°C，保温50min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液1115L和血渣148公斤；调节上清液I pH值至6.3，快速升温至70 °C，保温 20min后，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液II85L和血 渣Π 6.8公斤； C. 通过超滤浓缩获取SOD酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的SOD酶液8.2L; D. 通过冷冻干燥获取SOD冻干粉:将SOD酶液进行冷冻干燥，得SOD冻干粉10.3g，检测酶 单位活力为3890U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:收集步骤（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共计 54.8公斤，加入血渣重量4倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.2，按每公斤血渣加 入蛋白水解酶5.0克，加热至55°C，搅拌下保温酶解6h，将酶解液升温至85°C灭酶20min，即 得到血红蛋白酶解液239L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液III228L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液I Π 经截留分子量为5〇〇〇Da的超滤 膜装置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行 纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液125L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉:将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉19.6公 斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠131mg(即硒含量60mg)，溶于1500mL去离子水中，搅拌下依次加 入异麦芽低聚糖13.1g和维生素 C1.31g，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉680g，加去离子水5L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为12.0%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌60g、葡萄糖酸锰15g和葡萄糖酸铜9g， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥:将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取异麦芽低聚糖186.9g(配方中异麦芽 低聚糖总量减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤（1)D所制备的SOD冻干粉4000万活力单 位，加入到步骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得1000gS0D纳米硒肽组合 物。
[0052] 将上述所得的S0D纳米硒肽组合物经研磨过100目筛，再经辐照灭菌，按照需要量 包装，可制成粉剂。
[0053 ]服用方法与用量:温水冲服，成年人每日服用3次，每次0.5g。
[0054] 实施例3: 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 S0D、血红蛋白肽、异麦芽低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中 各个组分含量为：S0D6000万活力单位，血红蛋白肽380g，低聚木糖480g，纳米硒50mg，葡萄 糖酸锌71g，葡萄糖酸锰20g、葡萄糖酸铜1 lg。
[0055] 这种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A.血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血300L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心收集血红细胞130L，然后加入血红细胞 体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液260L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣：在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.2，然后升温至60°C，保温50min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液1175L和血渣162公斤；调节上清液I pH值至6.3，快速升温至70 °C，保温 20min后，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液Π 127L和 血渣Π 11.4公斤； C. 通过超滤浓缩获取SOD酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的SOD酶液12.5L; D. 通过冷冻干燥获得SOD冻干粉:将SOD酶液进行冷冻干燥，得SOD冻干粉14.6g，检测酶 活力为4130U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:收集步骤（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共计 73.4公斤，加入血渣重量5倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.2，按每公斤血渣加 入弱酸性蛋白水解酶6克，加热至55°C，搅拌下保温酶解4h，将酶解液升温至85°C灭酶 20min，即得到血红蛋白酶解液382L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液III355L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液经截留分子量为5000Da的超滤膜装 置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行纳滤 浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液185L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉:将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉32.7公 斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠109mg(即硒含量50mg)，溶于1000mL去离子水中，搅拌下依次加 入低聚木糖llg和维生素 Cl.lg，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉380g，加去离子水3L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为11.2%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌71g、葡萄糖酸锰20g和葡萄糖酸铜llg， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥:将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取低聚木糖469g(配方中低聚木糖总量 减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤（1)D所制备的SOD冻干粉SOD 6000万活力单位，加入 到步骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得1000g SOD纳米硒肽组合物。 [0056] 将上述所得的S0D纳米硒肽组合物经研磨过100目筛，再经辐照灭菌，按照需要量 包装，可制成粉剂。
[0057]服用方法与用量:温水冲服，成年人每日服用3次，每次0.5g。
[0058] 以制备1000g S0D纳米硒肽组合物含片为例： 实施例4: 这种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 SOD、血红蛋白肽、低聚果糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中各个 组分含量为:S0D2000万活力单位，血红蛋白肽550g低聚果糖350g，纳米硒80mg，葡萄糖酸锌 70g，葡萄糖酸锰21g、葡萄糖酸铜1 lg。
[0059] 这种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) SOD和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血100L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心分离，收集血红细胞42L，然后加入血红 细胞体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液84L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣:在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.5，然后升温至60°C，保温40min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液I66L和血渣120公斤；调节上清液I pH值至6.2，快速升温至70°C，保温20min 后，快速降温至45°C以下，经用管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液Π 47L和血渣 Π 5.8公斤； C. 通过超滤浓缩获取SOD酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的SOD酶液4.8L; D. 通过冷冻干燥获取SOD干冻粉:将SOD酶液进行冷冻干燥，得SOD冻干粉5.5g，检测酶 活力为4306U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:将步骤（1 )B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，共计 25.8公斤，加入血渣重量3倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.5，按每公斤血渣加 入弱酸性蛋白水解酶4.0克，加热至55°C，搅拌下保温酶解8h，将酶解液升温至85°C灭酶 20min，即得到血红蛋白酶解液87L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液II180L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液Π I：经截留分子量为5000Da的超滤 膜装置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行 纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液47L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉：即将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉9.1 公斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠175mg(即硒含量80mg)，溶于2000mL去离子水中，搅拌下依次加 入低聚果糖17.5g和维生素 C1.75g，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉550g，加去离子水4L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为12.1%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌70g、葡萄糖酸锰21g和葡萄糖酸铜llg， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥：即将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取低聚果糖332.5g(配方中低聚果糖总 量减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤（1)D所制备的SOD冻干粉2000万活力单位，加入到 步骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得1000g SOD纳米硒肽组合物。
[0060] 采用常规的压片工艺，将上述所得的S0D纳米硒肽组合物进行压片成型，制成片 剂，平均每片500mg。
[0061] 服用方法与用量:含服，成年人每日服用3次，每次1片。
[0062] 实施例5: 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 S0D、血红蛋白肽、异麦芽低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中 各个组分含量为：S0D4000万活力单位，血红蛋白肽600g，低聚半乳糖300g，纳米硒60mg，葡 萄糖酸锌65g，葡萄糖酸锰18g、葡萄糖酸铜10g。
[0063] 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血200L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心收集血红细胞92L，然后加入血红细胞体 积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液184L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣：在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.2，然后升温至60°C，保温50min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液1111L和血渣147公斤；调节上清液I pH值至6.2，快速升温至70 °C，保温 20min后，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液II87L和血 渣Π 7.5公斤； C. 通过超滤浓缩获取S0D酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的S0D酶液9L; D. 通过冷冻干燥获取S0D冻干粉:将S0D酶液进行冷冻干燥，得S0D冻干粉12.4g，检测酶 单位活力为3620U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:收集步骤（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共计 54.5公斤，加入血渣重量4倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.2，按每公斤血渣加 入蛋白水解酶5.0克，加热至55°C，搅拌下保温酶解6h，将酶解液升温至85°C灭酶20min，即 得到血红蛋白酶解液257L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液m246L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液111经截留分子量为5000Da的超滤 膜装置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行 纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液120L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉:将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉21.2公 斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠131mg(即硒含量60mg)，溶于1500mL去离子水中，搅拌下依次加 入低聚半乳糖13.1g和维生素 C1.31g，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉600g，加去离子水4L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为13.0%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌65g、葡萄糖酸锰18g和葡萄糖酸铜10g， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥:将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取低聚半乳糖286.9g(配方中低聚半乳 糖总量减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤（1)D所制备的SOD冻干粉4000万活力单位，加 入到步骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得lOOOgSOD纳米硒肽组合物； 采用常规的压片工艺，将上述所得的SOD纳米硒肽组合物进行压片成型，制成片剂，平 均每片500mg。
[0064] 服用方法与用量:含服，成年人每日服用3次，每次1片。
[0065] 实施例6: 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 S0D、血红蛋白肽、异麦芽低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中 各个组分含量为：S0D6000万活力单位，血红蛋白肽400g，低聚木糖500g，纳米硒50mg，葡萄 糖酸锌50g，葡萄糖酸锰10g、葡萄糖酸铜8g。
[0066] 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血300L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心收集血红细胞125L，然后加入血红细胞 体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液250L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣：在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.2，然后升温至60°C，保温50min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液1179L和血渣160公斤；调节上清液I pH值至6.2，快速升温至70 °C，保温 20min后，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液Π 121L和 血渣Π 13公斤； C. 通过超滤浓缩获取S0D酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的S0D酶液12L; D. 通过冷冻干燥获得S0D冻干粉:将S0D酶液进行冷冻干燥，得S0D冻干粉20.2g，检测酶 活力为3806U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:收集步骤（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共计 73公斤，加入血渣重量5倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.2，按每公斤血渣加入 弱酸性蛋白水解酶5.5克，加热至53°C，搅拌下保温酶解5h，将酶解液升温至85°C灭酶 20min，即得到血红蛋白酶解液364L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液II1340L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液经截留分子量为5000Da的超滤膜装 置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行纳滤 浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液200L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉:将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉34.5公 斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠109mg(即硒含量50mg)，溶于lOOOmL去离子水中，搅拌下依次加 入低聚木糖llg和维生素 Cl.lg，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉400g，加去离子水3L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为11.8%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌50g、葡萄糖酸锰10g和葡萄糖酸铜8g， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥:将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取低聚木糖489g(配方中低聚木糖总量 减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤（1)D所制备的SOD冻干粉SOD 6000万活力单位，加入 到步骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得1000g SOD纳米硒肽组合物。 [0067]采用常规的压片工艺，将上述所得的S0D纳米硒肽组合物进行压片成型，制成片 剂，平均每片500mg。
[0068]服用方法与用量:含服，成年人每日服用3次，每次1片。
[0069] 以制备1000g S0D纳米硒肽组合物胶囊为例： 实施例7: 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 S0D、血红蛋白肽、低聚果糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中各个 组分含量为:S0D2000万活力单位，血红蛋白肽700g异麦芽低聚糖200g，纳米硒40mg，葡萄糖 酸锌60g，葡萄糖酸锰18g、葡萄糖酸铜10g。
[0070] 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血100L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心分离，收集血红细胞43L，然后加入血红 细胞体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液96L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣:在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.3，然后升温至60°C，保温40min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液165L和血渣121.8公斤；调节上清液I pH值至6.2，快速升温至70 °C，保温 20min后，快速降温至45°C以下，经用管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液Π 48L和 血渣Π 4公斤； C. 通过超滤浓缩获取S0D酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的S0D酶液4L; D. 通过冷冻干燥获取S0D干冻粉:将S0D酶液进行冷冻干燥，得S0D冻干粉6.2g，检测酶 活力为3660U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:将步骤（1 )B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，共计 25.8公斤，加入血渣重量3倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.2，按每公斤血渣加 入弱酸性蛋白水解酶5.0克，加热至55°C，搅拌下保温酶解6h，将酶解液升温至85°C灭酶 20min，即得到血红蛋白酶解液82L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液III78L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液Η I：经截留分子量为5000Da的超滤 膜装置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行 纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液51L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉：即将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉9.2 公斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠88mg(即硒含量40mg)，溶于lOOOmL去离子水中，搅拌下依次加 入异麦芽低聚糖8.8g和维生素 CO. 88g，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉700g，加去离子水4L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为14.9%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌60g、葡萄糖酸锰18g和葡萄糖酸铜10g， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥：即将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取异麦芽低聚糖191g(配方中异麦芽低 聚糖总量减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤（1)D所制备的SOD冻干粉2000万活力单位， 加入到步骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得1000g SOD纳米硒肽组合物。
[0071] 采用常规的胶囊填充工艺，将上述所得的S0D纳米硒肽组合物进行胶囊填充，制成 胶囊制剂，平均每粒500mg。
[0072] 服用方法与用量：口服，成年人每日服用3次，每次1粒。
[0073] 实施例8: 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 S0D、血红蛋白肽、异麦芽低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中 各个组分含量为：S0D4000万活力单位，血红蛋白肽480g，低聚木糖400g，纳米硒50mg，葡萄 糖酸锌70g，葡萄糖酸锰20g、葡萄糖酸铜1 lg。
[0074] 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血200L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心收集血红细胞94L，然后加入血红细胞体 积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液188L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣：在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.2，然后升温至60°C，保温50min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液1120L和血渣147公斤；调节上清液I pH值至6.2，快速升温至70 °C，保温 20min后，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液II92L和血 渣Π 6.5公斤； C. 通过超滤浓缩获取SOD酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的SOD酶液9L; D. 通过冷冻干燥获取SOD冻干粉:将SOD酶液进行冷冻干燥，得SOD冻干粉11.9g，检测酶 单位活力为4050U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:收集步骤（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共计 53.5公斤，加入血渣重量4倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.2，按每公斤血渣加 入蛋白水解酶4.0克，加热至55°C，搅拌下保温酶解8h，将酶解液升温至85°C灭酶20min，即 得到血红蛋白酶解液239L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液III233L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液i |、〖经截留分子量为5000Da的超滤 膜装置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行 纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液120L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉:将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉18.9公 斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠109mg(即硒含量50mg)，溶于1000mL去离子水中，搅拌下依次加 入低聚木糖llg和维生素 Cl.lg，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉480g，加去离子水3L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为13.8%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌70g、葡萄糖酸锰20g和葡萄糖酸铜llg， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥:将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取低聚木糖389g(配方中低聚木糖总量 减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤(1)D所制备的SOD冻干粉4000万活力单位，加入到步 骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得1000gS0D纳米硒肽组合物。
[0075]采用常规的胶囊填充工艺，将上述所得的S0D纳米硒肽组合物进行胶囊填充，制成 胶囊制剂，平均每粒500mg。
[0076] 服用方法与用量：口服，成年人每日服用3次，每次1粒。
[0077] 实施例9: 这种抗氧化抗衰老S0D纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在于:所述组合物中含有 S0D、血红蛋白肽、异麦芽低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，组合物中 各个组分含量为：S0D6000万活力单位，血红蛋白肽400g，低聚果糖500g，纳米硒60mg，葡萄 糖酸锌62g，葡萄糖酸锰15g、葡萄糖酸铜9g。
[0078] 这种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的具体制备工艺步骤如下： (1) S0D和血红蛋白粉的制备： A.血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血300L，加入新鲜猪血重量0.5% 的柠檬酸钠做抗凝，经管式离心机16300r/mim离心收集血红细胞138L，然后加入血红细胞 体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白溶液276L; B. 通过热变性反应收集上清液、血渣：在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至 5.2，然后升温至60°C，保温50min，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分 离，得到上清液1180L和血渣160公斤；调节上清液I pH值至6.5，快速升温至70 °C，保温 20min后，快速降温至45°C以下，经管式离心机16300r/mim离心分离，得到上清液Π 132L和 血渣Π 11公斤； C. 通过超滤浓缩获取SOD酶液:将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行 超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至原体积的1/10,得到蓝绿色的SOD酶液13L; D. 通过冷冻干燥获得SOD冻干粉:将SOD酶液进行冷冻干燥，得SOD冻干粉16. lg，检测酶 活力为4080U/mg，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液:收集步骤（1)B所得到的血渣I和血渣Π ，合并共计 71公斤，加入血渣重量4倍的去离子水溶解并搅拌均匀，调节pH值至6.2，按每公斤血渣加入 弱酸性蛋白水解酶5克，加热至55°C，搅拌下保温酶解6h，将酶解液升温至85°C灭酶20min， 即得到血红蛋白酶解液405L; F. 离心分离获得上清液III:血红蛋白酶解液经管式离心机16300r/mim离心分离，得 到上清液II1370L，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液:将上清液经截留分子量为5000Da的超滤膜装 置进行超滤，收集透过液，将收集的超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行纳滤 浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，停止浓缩，得到血红蛋白肽溶液172L; Η.喷雾干燥获得血红蛋白肽粉:将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉29.6公 斤，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 按照配比称取亚硒酸钠131mg(即硒含量60mg)，溶于1500mL去离子水中，搅拌下依次加 入低聚果糖13.1g和维生素 C1.3g，50°C搅拌反应lh，即制得纳米硒溶液，备用； (3) 螯合配制： 按照配比称取步骤（1)H所制备的血红蛋白肽粉400g，加去离子水3L溶解搅拌均匀，配 制成质量浓度为11.8%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅 拌反应1小时，然后按照配比量依次加入葡萄糖酸锌62g、葡萄糖酸锰15g和葡萄糖酸铜9g， 不断搅拌下60°C下保温反应1小时，得到血红蛋白肽螯合溶液； (4) 喷雾干燥:将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物:按照配比称取低聚果糖486.9g(配方中低聚果糖总 量减去步骤(2)已使用量的余量)和步骤（1)D所制备的SOD冻干粉SOD 6000万活力单位，加 入到步骤(4)所制备的血红蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得1000g SOD纳米硒肽组合物。
[0079] 采用常规的胶囊填充工艺，将上述所得的S0D纳米硒肽组合物进行胶囊填充，制成 胶囊制剂，平均每粒500mg。
[0080] 服用方法与用量：口服，成年人每日服用3次，每次1粒。
[0081] 对上述实施例1、2、3得到的成品进行寡肽含量、肽分子量大小以及功效检测： 寡肽含量及肽分子量大小检测:寡肽含量检测采用日立L-8800型氨基酸自动分析仪， 肽的分子大小采用高效凝胶过滤色谱(HPLC)法测定，以已知分子量蛋白质做参照，结果如 表1:
从表1中可以看出，产品中分子量小于2000Da的寡肽占蛋白肽总量的比例在90%以上， 其中相对分子量在180-1 OOODa的小分子肽组分占蛋白肽总量的比例在65%以上。
[0082]产品抗氧化抗衰老的功效检测： 小鼠口服本发明SOD纳米硒肽组合物对体内抗氧化指标影响的试验： 以实施例1、2、3所得的SOD纳米硒肽组合物为试验样品A、B、C。
[0083]选用雌性昆明小鼠55只，体重18-22克，随机分为正常对照组、衰老模型组、A试剂 组、B试剂组和C试剂组，每组11只。小鼠每天皮下注射D-半乳糖1次，剂量120mg/kg.bw，连续 8周，造成小鼠衰老模型。注射D-半乳糖2周后开始给予受试药物，试剂组每日灌胃200mg/ kg. bw试验样品，正常对照组每日灌胃给予等重量蒸馏水，衰老模型组每日注射D-半乳糖 120mg/kg.bw，直至实验结束后，采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒并按照试剂盒 说明书介绍的方法进行相关生化指标的检测。
[0084] 结果如表2、表3、表4:
从表2中可以看出，各试剂组小鼠血清总S0D酶活力水平明显高于正常对照组和模型对 照组，即本发明S0D纳米硒肽组合物能显著提高造模小鼠血清总S0D酶活力(P<0.05SP< 0.0!.)〇
从表3中可以看出，试剂组小鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力明显高于正常 对照组和模型对照组，即本发明SOD纳米硒肽组合物能显著提高造模小鼠血清GSH-Px活力 (P<0.05)〇
[0085]
从表4中可以看出，试剂组小鼠血清丙二醛(MDA)含量与模型对照组比较有明显差异， 即本发明S0D纳米硒肽组合物能显著降低小鼠血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。
[0086] 人体口服本发明SOD纳米硒肽组合物对降低体内丙二醛(MDA)含量的试验： 丙二醛(MDA)是氧自由基(Of)攻击细胞质膜，生成脂质过氧化物并进一步分解的最终 代谢产物，丙二醛(MDA)具有很强的生物毒性，是人体衰老的主要指标，MDA的含量与氧自由 基(〇2 ·)浓度呈正相关的关系。
[0087] 试验方案：以年龄在40岁以上的88人为临床试验对象，试验组1、试验组2、试验组3 和对照组各22人。其中试验组1服用实施例1得到的S0D纳米硒肽组合物，试验组2服用实施 例2得到的S0D纳米硒肽组合物，试验组3服用实施例3得到的S0D纳米硒肽组合物，对照组不 服用任何产品。
[0088] 服用方法和剂量:餐后1小时温水送服，服用0.5g。
[0089]检测方法:采用日本LP0 Kit氧化值速测液进行快速检测，取人体口服S0D纳米硒 肽组合物前的尿液lml滴入装有测试剂的安瓶中，5min后观察尿液反应液的颜色，同样方法 取人体服用S0D纳米硒肽组合物2h后的尿液lml滴入装有测试剂的安瓶中，5min后观察尿液 反应液的颜色，比较口服组合物前、后尿液反应液颜色的差异。尿液反应液的颜色越深越 红，说明丙二醛含量越多，机体内的自由基含量亦越高。
[0090] 评判标准:根据显效、有效和无效三个标准来评判。显效为口服S0D纳米硒肽组合 物后尿液反应液的颜色比服用前的颜色明显变淡，二者有肉眼可区分的显著差异，例如服 用前为红色或深红色，服用后为白色或浅白色;有效为服用后的颜色比服用前的颜色稍许 变浅变淡，二者有肉眼可辨别的差异;无效为服用前、后尿液反应液的颜色基本上无差异或 者无肉眼可辨别的差异或者服用后的颜色比服用前的颜色变得更深。
[0091]试验结果:所有临床试验对象在服用S0D纳米硒肽组合物之前的尿液反应液颜色 均呈现出红色至深红色，表明体内丙二醛(MDA)含量高，自由基含量多。服用S0D纳米硒肽组 合物2小时之后，绝大多数试验对象的尿液反应液颜色变成浅白色，表明体内自由基已大量 地被清除，体内丙二醛(MDA)含量减少，比如临床试验对象陈先生在服用之前尿液反应液的 颜色为深红色，服用2小时后尿液反应液为浅白色，试验对象王先生在服用之前尿液反应液 的颜色为粉红色，服用2小时后尿液反应液呈白色，试验对象郭先生在服用之前尿液反应液 的颜色为红色，服用2小时后尿液反应液为淡红色。本次临床试验总有效率达到90%以上， 结果见表5:
通过人体临床试验可知，本发明S0D纳米硒肽组合物具有良好的体内清除自由基、抗氧 化、抗衰老的功效。
【主权项】
1. 一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物，其特征在于：所述组合物中含有SOD、血红 蛋白肽、低聚糖、纳米硒、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰、葡萄糖酸铜，每l〇〇g组合物中各个组分 含量为： S0D150-650万活力单位， 血红蛋白肽35-70g， 低聚糖15-50g， 纳米硒4_8mg， 葡萄糖酸锌5000-7200mg， 葡萄糖酸猛l〇〇〇_2200mg， 葡萄糖酸铜600_1200mg。2. 根据权利要求1所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物，其特征在于:所述的 SOD是猪血红细胞提取物。3. 根据权利要求1所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物，其特征在于:所述的 血红蛋白肽是猪血红蛋白酶解物，含有60%以上的活性小分子肽，所述活性小分子肽的相对 分子量为180-1000Da。4. 根据权利要求1所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物，其特征在于:所述的 低聚糖为低聚果糖、异麦芽低聚糖、低聚半乳糖或低聚木糖中的任一种。5. 根据权利要求1所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物，其特征在于:所述的 纳米硒包括低聚糖纳米微球模板和富集在其上的纳米硒。6. 根据权利要求5所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物，其特征在于:所述的 低聚糖为低聚果糖、异麦芽低聚糖、低聚半乳糖或低聚木糖中的任一种。7. -种权利要求1-6任一项所述的抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的制备方法，其特 征在于:主要包括有以下工艺步骤： (1) SOD和血红蛋白粉的制备： A. 血红蛋白溶液的制备:采集经过检验合格的新鲜猪血，加入柠檬酸钠做抗凝处理， 离心收集血红细胞，然后加入血红细胞体积1倍的去离子水，不断搅拌溶血lh，得血红蛋白 溶液； B. 通过热变性反应收集上清液、血渣： 即在搅拌下用柠檬酸调节血红蛋白溶液PH值至5.2-5.5,然后升温至60°C，保温30-50min，快速降温至45°C以下，以转速>10000r/min进行离心分离，分别收集上清液I和血渣 I;用氢氧化钠调节上清液I pH值至6.2~6.5，快速升温至70°C，保温10_20min后，快速降温 至45°C以下，以转速> 10000r/min进行离心分离，分别收集上清液Π 和血渣Π ; C. 通过超滤浓缩获取SOD酶液： 即将上清液Π 用截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行超滤浓缩，脱除盐分，浓缩至 原体积的1/10，得到蓝绿色的SOD酶液； D. 通过冷冻干燥获取SOD冻干粉： 即将SOD酶液进行冷冻干燥，得SOD冻干粉，检测SOD酶活力，备用； E. 通过酶解制得血红蛋白酶解液： 将步骤B所收集到的血渣I和血渣Π 合并，加入两血渣重量3-5倍的去离子水溶解并搅 拌均匀，调节pH值至6.0~6.5，按每公斤血渣加入蛋白水解酶3.0-6.0克，加热至50-55 °C， 搅拌下保温酶解4_8h，将酶解液升温至85 °C灭酶20分钟，即得到血红蛋白酶解液； F. 离心分离获得上清液m: 将血红蛋白酶解液进行高速离心，离心转速> 10000r/min，收集上清液ΙΠ ，去除沉淀； G. 通过纳滤浓缩获得血红蛋白肽溶液： 即将上清液m经截留分子量为5000Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液;将收集的 超滤透过液，用截留分子量为200Da的纳滤膜进行纳滤浓缩，当浓缩液固形物含量达到15-20%时，收集浓缩液，得到血红蛋白肽溶液； H. 喷雾干燥获得血红蛋白肽粉： 即将血红蛋白肽溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽粉，备用； (2) 纳米硒溶液的制备： 称取亚硒酸钠溶于去离子水中，搅拌下依次加入低聚糖和维生素 C，50°C搅拌反应lh， 即制得纳米硒溶液； (3) 螯合配制： 取步骤（1)所制备的血红蛋白肽粉，加去离子水溶解搅拌均匀，配制成质量浓度为10-20%的血红蛋白肽溶液，加入步骤(2)所制备的纳米硒溶液，在50 °C下搅拌反应1小时，然后 依次加入葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰和葡萄糖酸铜，在60°C下继续搅拌反应1小时，得到血红 蛋白肽螯合溶液;其中血红蛋白肽、葡萄糖酸锌、葡萄糖酸锰和葡萄糖酸铜的添加量均为配 比的重量； (4) 喷雾干燥： 即将血红蛋白肽螯合溶液喷雾干燥，得血红蛋白肽螯合粉，备用； (5) 混配得到SOD纳米硒肽组合物： 即按配比称取低聚糖和步骤（1)D中所制备的SOD冻干粉，加入到步骤(4)所制备的血红 蛋白肽螯合粉中，混合均匀，即得SOD纳米硒肽组合物。8. 根据权利要求7所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在 于:步骤(1 )A中所述柠檬酸钠为食品级柠檬酸钠，添加量为新鲜猪血重量的0.5%。9. 根据权利要求7所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的制备方法，其特征在 于：步骤（1)E中所述的蛋白酶为来源于米曲霉的弱酸性蛋白酶，酶活力为390000-430000HU/g〇10. 根据权利要求7所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的制备方法，其特征 在于：步骤（2)所述亚硒酸钠的使用量为配比中硒的量换算成相应的亚硒酸钠（硒含量为 45.65%)的重量，低聚糖、亚硒酸钠和维生素 C的混合质量比为100:1:10。11. 根据权利要求7所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的制备方法，其特征 在于:步骤(5)所述低聚糖的添加量为配比中低聚糖总量减去步骤(2)所添加的低聚糖量之 后的余量。12. 根据权利要求1所述的一种抗氧化抗衰老SOD纳米硒肽组合物的应用，其特征在于： 该组合物可制成药剂学上的常规内服制剂:如粉剂、片剂或胶囊剂。
【文档编号】A23L33/10GK105996009SQ201610484776
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月29日
【发明人】陈石良
【申请人】陈石良