专利名称：一种水产动物寄生虫防治剂的制作方法
一、所属领域本发明属于水产养殖业中的一种杀虫、防虫剂，涉及一种防治剂，特别涉及一种水产动物寄生虫防治剂。
二、发明背景水产动物寄生虫防治，是水产养殖业经济效益的重要保障措施。水产动物寄生虫病发生率高、流行广泛，其中危害性最大的体外寄生虫有原虫类如车轮虫、小瓜虫；蠕虫类如指环虫、三代虫；甲壳动物如猫头鲺等。当前，国内外防治水产动物寄生虫病多采用化学药剂，如敌百虫、敌敌畏、乙酰甲胺磷、拟除虫菊酯、染料亚甲基蓝、氧化剂高锰酸钾和重金属盐等物质。从使用角度，这些物质一般均有强烈的刺激性或腐蚀性，使用后对水产动物的进食、生长有很大的影响。再有，这些物质在环境中不易降解，容易造成水源污染，其中一些物质还会造成生物富集，直接危及人类的食品安全和身体健康。随着水产养殖业的发展，养殖集约化程度越来越高，水产养殖中的病虫害发生呈严重趋势，而对常用的药剂已产生了很高的抗药性，有些药剂由于安全原因被禁用，开发出对病虫害高效、对环境无污染的无公害水产动物寄生虫防治剂就迫在眉睫。
我国有利用中草药的悠久历史，在水产动物病虫害防治中也有使用中草药的传统。利用中草药防治水产动物病虫害与化学药剂相比，有不影响水产品质量、无残留、无污染、对其不易产生抗药性、不影响水产动物的进食和生长、对水产动物安全等优点。本发明在大量筛选的基础上，研制出纯植物源的水产动物寄生虫防治剂，试验表明，该防治剂对寄生虫高效、对水产动物及环境安全，可以替代化学药剂，用于水产动物寄生虫防治。
申请人在大量筛选的基础上，筛选出烟草(Nicotiana rustica)、苦豆子(Sophora alopecuroides linn.)、鸦胆子(Brucea javanica(L)Merr)果实三种植物对水产动物寄生虫有很高的防效。
本发明采取的技术方案是以烟草(Nicotiana rustica)、苦豆子(Sophoraalopecuroides linn.)、鸦胆子(Brucea javanica(L)Merr)果实为原料，将粉碎的烟草在60℃～70℃温度下，用水浸提，浸提液浓缩至烟草干重的三分之一至四分之一，得烟草提取物；将粉碎的苦豆子或鸦胆子果实，在40℃～60℃温度下，用乙醇浸提，浸提液浓缩至植物干重的三分之一至四分之一，得苦豆子或鸦胆子提取物。该防治剂的制剂形态可以是水乳剂，其中各成分的重量百分比例为烟草提取物40％～70％苦豆子提取物 10％～50％鸦胆子提取物 10％～50％水5.0％～30％表面活性剂 5.0％～10％该水乳剂的加工过程是先将表面活性剂、苦豆子提取物、鸦胆子提取物于匀质机中混合，在30℃～50℃温度下，搅拌下将烟草提取物和水加入匀质机中，再搅拌30min，冷却至常温，即得水产动物寄生虫防治水乳剂。使用时将其用水稀释，泼洒于水面即可。
该防治剂的制剂形态可以由A剂和B剂组成，其中A剂为烟草提取物，B剂由苦豆子和鸦胆子提取物按1∶1混合而成。使用时A剂和B剂按2∶1的比例混合后，用水稀释，泼洒于水面即可。
经试验证实，这两种制剂形态的水产动物寄生虫防治剂均有很高的防效，且对环境及水产动物安全。
具体实施例方式
为了更清楚的理解本发明以及本发明药剂的药效，以下通过发明人给出的依本发明技术方案所完成的具体的实施例对本发明作进一步的详细描述，这些仅是本发明较好的实施例，但不限于这些实施例。
实施例1称取粉碎的烟草100kg，在66℃温度下，用水浸提，浸提液浓缩至30kg，得烟草提取物，即A剂；分别称粉碎的苦豆子和鸦胆子果实100kg，在52℃温度下，用乙醇浸提，将苦豆子和鸦胆子果实浸提液分别浓缩至30kg，分别得苦豆子和鸦胆子提取物；分别称取苦豆子及鸦胆子果实浸提浓缩液15kg，混合，即得B剂。
实施例2将10kg鸦胆子果实浸提浓缩液和20kg苦豆子浸提浓缩液置于匀质机中，加热至46℃，加入适宜的表面活性剂5kg，溶解后，再缓慢加入烟草提取物50kg，水15kg，搅拌30min，冷却至常温，即得寄生虫防治水乳剂。
上述实施例可以列举很多，再此不一一列举，从申请人所做的大量实验得到的数据证明，只要是按照本发明的技术方案的参数范围内选择，即烟草提取物40％～70％；苦豆子提取物10％～50％；鸦胆子提取物10％～50％；水5.0％～30％；表面活性剂5.0％～10％，再按其水乳剂的加工工艺制备，即可制备出达到本发明目的的水产动物寄生虫防治剂。
以下是本发明的药效的具体试验实例。试验实施例11.1材料预试验用健康金鱼苗购于咸阳某渔场，体重在0.8～2g/尾；鳗鱼由福建省福清市某鳗场提供。试验用药为实施例1中的A剂、B剂和实施例2的寄生虫防治水乳剂。1.2方法1.2.1指环虫的感染由渔场运回后的金鱼苗，首先用2mg/L盐酸环丙沙星进行细菌性疾病预防，通过3d～5d养殖正常后，在水族箱中，采用一定的方法将保存有指环虫的鱼鳃上的指环虫感染到健康鱼鳃上，并控制水温25℃左右，每天加一定量的新水，大约经过4d～6d培养，对感染鱼随机抽样捞取镜检，如果感染率为100％、在10×4倍镜下观察，每个视野内有6条以上指环虫时便进行药效试验。
鳗鱼由福建省福清市某鳗场空运到试验室，平均体重4.5g/尾，经检查感染率为100％、在10×4倍镜下观察，每个视野内有10条以上拟指环虫。1.2.2药效试验试验条件预试验在实验室进行，采用直径36cm、高11cm的白色搪瓷盆，试验用水为充分暴气的自来水5000ml、PH值为7.0-7.5，试验期水温变化为25±2℃。用多个相同的水族箱加充分暴气的自来水1L，控制水温25±2℃，PH值为7.0～7.5，放养鱼后，含氧需在5mg/L以上。
试验药物浓度的确定和试验分组首先通过梯度递增法进行预试验，再在最小有效浓度、完全杀灭寄生虫有效浓度和最高有效剂量浓度范围附近按梯度递增的原则设立试验组，并设对照组。每个水族箱内，放养随机捞取感染的鱼20尾，在加药后24h、48h、72h、96h时抽样解剖，取鳃制片，镜下观察寄生虫消失情况，并记录。各试验组重复3次。1.3试验结果1.3.1 A剂和B剂按1∶1混合使用，依照1.2.2的方法，进行药效试验，试验结果见表1。药液浓度以烟草提取物的浓度计。
表1A剂和B剂混合使用防治水产动物寄生虫药效
1.3.2寄生虫防治水乳剂防治水产动物寄生虫药效试验结果见表2。
表2寄生虫防治水乳剂防治水产动物寄生虫药效试验结果
试验实施例2实施例2中寄生虫防治水乳剂剂田间药效实验。2.1时间与试验场状况2001年5月～2002年7月，在福建省福清市3个养鳗场，为流水养殖方式和大池塘精养方式(见表1)。
表1.三个养鳗场鳗拟指环虫病治疗试验场状况场名试验面积 规格及数 发病种类养殖方式(亩) 量A 30黑仔鳗共1 主要拟指环 流水养殖B 1800万尾，幼 虫病；三代 流水养殖C 256 鳗90万尾， 虫、车轮虫 大池塘精养成鳗70万兼有。
尾。2.2发病临床症状发生拟指环虫病严重的鱼，出现摄食迟钝，摄食量减少，鳃丝粘液增多，呼吸困难，在池塘中出现狂游等症状。随即抽样检查，在4×10倍低倍镜检查，拟指环虫存活10～15个，为该病发病严重时期，时为用药治疗标准。2.3材料与方法2.3.1.供试鱼黑仔鳗共100万尾，幼鳗90万尾，成鳗70万尾。2.3.2.试验药物无公害植物性杀灭鱼类寄生虫水乳剂，规格1000ml/瓶。2.3.3.方法每立方米水用药量为25克，量取药物后，用水进行稀释，泼洒于水面即可。在用药后48h，流水养殖池采用初步换水的方式换完池水，而大池塘精养采取直接加注新水的方式。发病时用药1次即可。2.3.4.安全性评定按使用说明，在用药后48h，观察鳗鱼精神状态、摄食等有无异常。2.3.5.药效评定在投药后24h、48h，随机捞取治疗鱼进行显微镜镜检，观察鳗拟指环虫有无或存活情况。2.4结果2.4.1.安全性评定在用药后48h，鳗鱼精神状态正常，摄食量略有减少，无其它异常发生。说明该药物对鳗鱼是安全的。2.4.2.药效评定在投药后24h、48h，每个养殖池随机捞取治疗过的各种规格的鳗鱼5尾，取鱼鳃制片用显微镜镜检观察，观察的鳗拟指环虫存活结果见表2所示。
表2.投药后24h、48h，三个养鳗场鳗拟指环虫病治疗试验结果
2.5讨论“无公害植物性杀灭鱼类寄生虫水乳剂”是一种对鳗鱼拟指环虫病非常安全有效的药物，具有很高的推广价值。在试验过程中，每次用药，基本上能够完全杀灭鳗鱼拟指环虫，因药物使用过程中，由于水体量计算有差异，用药量时有不足，出现极少数鱼体有极个别寄生虫存活，但不影响总治疗效果。由于水源为河流，养殖水体必定受到外来拟指环虫的感染，所以，一般每间隔40～50天，用药1次，以确保养殖成功。试验实施例3将“无公害植物性杀灭鱼类寄生虫AB剂”在陕西、江苏、宁夏、广东等省的部分渔场进行的杀灭鲤鱼、草鱼、鲢鱼、鳙鱼、团头鲂、胡子鲶、罗非鱼等车轮虫、指环虫、三代虫等寄生虫治疗试验，现将治疗与安全结果总结如下3.1第一期临床试验小范围防治试验主要在陕西的宝鸡、咸阳、西安的渔场进行，试验面积达9.27hm2，有夏花鱼苗、鱼种和成鱼，另外还有甲鱼、美国青蛙等。试验从2000年4月～2001年11月，主要防治了车轮虫、指环虫、三代虫等鱼类体外寄生虫，初步得出该制剂在使用剂量范围内是安全的，其预防保护率在98％以上，对寄生虫的杀灭率在93～98.6％。试验结果如下试验实例11地点宝鸡市柔谷渔场。
2试验面积养殖池塘4个，为2.7hm2。
3试验鱼种类鲤、草、鳊、鲢鱼、鳙鱼、鲫鱼。
4试验技术人员蒋科省，场长，工程师。
5方法在鱼塘养殖鱼类凭经验判断发生寄生虫病时，通过镜检确诊后，将A剂和B剂按1∶1混合后，每立方米水用药量为30克，加水稀释直接泼洒于池塘中，48小时每个池塘再随即捕捞10尾，镜检寄生虫存活情况。
6.发生病种类车轮虫、指环虫、三代虫。7.试验结果安全性评定在用药后48h，鲤、草、鳊、鲢鱼、鳙鱼、鲫鱼精神状态、摄食正常，无其它异常发生，说明该制剂对以上鱼类是安全的。
药效评定在投药后24h、48h，每个养殖池随机捞取10尾鱼镜检观察，各种寄生虫杀灭率平均在96％以上。试验实例21.地点咸阳祝尔富美国青蛙养殖场。
2.试验面积养殖池塘10个，为0.7hm2。
3.试验动物种类美国青蛙蝌蚪。
4.试验技术人员祝晓仁，场长。
5方法发生寄生虫病时，通过镜检确诊后，将A剂和B剂按1∶1混合后，每立方米用药量20克，加水稀释直接泼洒于池塘中，48小时每个池塘再随即捕捞10尾，镜检寄生虫存活情况。
6.发生病种类车轮虫。
7.试验结果安全性评定在用药后48h，美国青蛙蝌蚪精神状态、摄食正常，无其它异常发生，说明该制剂对以上美国青蛙蝌蚪是安全的。
药效评定在投药后24h、48h，每个养殖池随机捞取10尾美国青蛙蝌蚪镜检观察，车轮虫杀灭率平均在95％以上。试验实例31.地点西安长安县东大渔场。
2.试验面积养殖池塘8个，为0.8hm2。
3.试验鱼种类罗非鱼。
4.试验技术人员李积社工程师。
5.方法在发生寄生虫病时，通过镜检确诊后，将A剂和B剂按1∶1混合后，每立方米用药量35克，加水稀释直接泼洒于池塘中，48小时每个池塘再随即捕捞10尾，镜检寄生虫存活情况。
6.发生病种类车轮虫、指环虫。
7.试验结果
1)安全性评定在用药后48h，罗非鱼精神状态、摄食正常，无其它异常发生，说明该防治剂对以上罗非鱼是安全的。
2)药效评定在投药后24h、48h，每个养殖池随机捞取10尾鱼镜检观察，车轮虫杀灭率平均在95％以上，指环虫杀灭率平均在98％以上。3.2第二期临床疗效评价试验该试验主要在陕西、江苏、宁夏、广东等地的部分渔场进行。试验从2001年2月～2002年6月，主要防治了车轮虫、指环虫、三代虫等鱼类体外寄生虫，初步得出该制剂在使用剂量范围内是安全的，其预防保护率在95％以上，对寄生虫的杀灭率在95～97％。试验结果如下1.陕西试验点1)陕西水产总站华县莲花寺渔场2)试验技术人员李海建 助理工程师养殖面积以鲤鱼为主的鱼种池为0.5hm2，成鱼池4hm2试验效果用药后48h，鱼精神状态、摄食正常，养殖池随机捞取10尾鱼镜检观察，车轮虫、指环虫、三代虫杀灭率平均在96％以上。3)宝鸡市眉县渔场试验技术人员高军 技术员养殖面积以鲤鱼为主的鱼种池为1.2hm2，成鱼池8.9hm2试验效果鱼种、成鱼用药后48h，鱼精神状态、摄食正常，养殖池随机捞取10尾鱼镜检观察，车轮虫、指环虫、三代虫杀灭率平均在98％以上。2.江苏试验点中国水产科学研究院淡水渔业研究中心苗种实验基地试验技术人员陆仁俊 场长 副研究员养殖面积以鳊鱼为主的鱼种池为0.32hm2，成鱼池2.2hm2试验效果鱼种、成鱼用药后48h，鱼精神状态、摄食正常，养殖池随机捞取10尾鱼镜检观察，车轮虫、指环虫、三代虫杀灭率平均在97％以上。3.宁夏试验点宁夏回族自治区农业学校试验渔场试验技术人员陈国平 副教授养殖面积以黄河鲤鱼为主的鱼种池为0.54hm2，成鱼池2.5hm2试验效果鱼种、成鱼鱼种、成鱼用药后48h，鱼精神状态、摄食正常，养殖池随机捞取10尾鱼镜检观察，车轮虫、指环虫、三代虫杀灭率平均在98％以上。4.广东试验点广东肇庆西江大学试验渔场试验技术人员陈学年 场长 副教授养殖面积以加州鲈鱼、鲮鱼为主的鱼种池为0.26hm2，成鱼池3.87hm2，美国青蛙蝌蚪池0.21hm2。
试验效果加州鲈鱼、鲮鱼鱼种、成鱼用药后48h，鱼精神状态、摄食正常，养殖池随机捞取10尾鱼镜检观察，车轮虫、指环虫、三代虫杀灭率平均在95％以上。美国青蛙蝌蚪用药后48h，精神状态、摄食正常，随机捞取10尾鱼镜检观察，车轮虫杀灭率平均在96％以上。
权利要求
1.一种水产动物寄生虫防治剂，其特征在于，该防治剂是由烟草(Nicotianarustica)、苦豆子(Sophora alopecuroides linn.)、鸦胆子(Brucea javanica(L)Merr)果实经提取加工而成；该防治剂的加工过程是(1)将粉碎的烟草在60℃～70℃温度下，用水浸提，浸提液浓缩至烟草干重的三分之一至四分之一，得烟草提取物；(2)将粉碎的苦豆子或鸦胆子果实，在40℃～60℃温度下，用乙醇浸提，浸提液浓缩至植物干重的三分之一至四分之一，得苦豆子或鸦胆子提取物。
2.如权利要求1所述的水产动物寄生虫防治剂，其特征在于，该防治剂的制剂形态可以是水乳剂，其中各成分的重量百分比例为烟草提取物 40％～70％苦豆子提取物 10％～50％鸦胆子提取物 10％～50％水 5.0％～30％表面活性剂 5.0％～10％
3.如权利要求2所述的水产动物寄生虫防治水乳剂，其特征在于，该水乳剂的加工过是先将表面活性剂、苦豆子提取物、鸦胆子提取物于匀质机中混合，在30℃～50℃温度下，搅拌下将烟草提取物加入匀质机中，再搅拌30min，冷却至常温，即得水产动物寄生虫防治水乳剂。使用时将其用水稀释，泼洒于水面即可。
4.如权利要求1所述的水产动物寄生虫防治剂，其特征在于，该防治剂的制剂形态可以由A剂和B.剂组成，其中A剂为烟草提取物，B剂由苦豆子和鸦胆子提取物按1∶1混合而成；使用时A剂和B剂按2∶1的比例混合后，用水稀释，泼洒于水面即可。
全文摘要
本发明公开了一种水产动物寄生虫防治剂，由烟草(Nicotiana rustica)、苦豆子(Sophora alopecuroides linn.)、鸦胆子(Brucea javanica(L)Merr)果实经提取加工而成；将粉碎的烟草在用水浸提，浸提液浓缩至烟草干重的三分之一至四分之一，得烟草提取物；将粉碎的苦豆子或鸦胆子果实，用乙醇浸提，浸提液浓缩至植物干重的三分之一至四分之一，得苦豆子或鸦胆子提取物。该防治剂的制剂形态可以制备成水乳剂或由A剂和B剂组成，其中A剂为烟草提取物，B剂由苦豆子和鸦胆子提取物按1∶1混合而成；使用时水乳剂用水稀释后，用于水面泼洒，而A剂和B剂按2∶1的比例混合后，用水稀释，泼洒于水面即可。经试验证实，这两种制剂形态的水产动物寄生虫防治剂对水产动物寄生虫均有很高的防效，且对环境及水产动物安全。
文档编号A61P33/00GK1410104SQ02139390
公开日2003年4月16日 申请日期2002年8月29日 优先权日2002年8月29日
发明者张兴, 王高学, 祝木金, 李广泽, 马志卿 申请人:西北农林科技大学无公害农药研究服务中心