专利名称：藿香油的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及藿香油的新的制药用途，具体说是藿香油在制备治疗脑血管病药物中的应用，以及藿香油在制备治疗血管痉挛所引起的多种疾病药物中的应用。
藿香用于治疗疾病已有2000多年的历史，但主要用于治疗消化系统的疾病，如呕吐，腹泻，感冒，食欲下降等。具有芳香化浊，开胃止呕，发表解暑的功效(《中华人民共和国药典》2000年版)。《药品化义)》记载“藿香，其气芳香，善行胃气，以此调中，治呕吐霍乱。且香能和合五脏，若脾胃不和，用之助胃而进饮食，有醒脾开胃之功”。《本草图经》记载藿香“治脾胃吐逆，为最要之药”。《本草再新》记载藿香“解表散邪，利湿除风，清热止渴”。
尽管藿香作为药用已有悠久历史，但未见报道藿香或藿香油及其主要成分藿香醇、藿香酮治疗脑血管痉挛，以及血管痉挛所引起的头痛，偏头痛，脑缺血，痴呆，脑疲劳，脑缺氧，冠状动脉痉挛，心肌供血不足等疾病的作用。
在多年的研究中，本发明人发现了藿香油具有扩张脑血管，改善血管痉挛的作用，可以用来治疗由于血管收缩障碍所致的脑血管痉挛，头痛，偏头痛，脑缺血，血管性痴呆，脑疲劳，脑缺氧，冠状动脉痉挛，心肌供血不足等病症，发现了藿香油的一些新的可靠的用途。
本发明提供的藿香油是在制备治疗血管痉挛及其由此引起的疾病的药物中的应用。
具体的说，本发明所述的藿香油是在制备治疗头痛的药物中的应用；是在制备治疗偏头痛的药物中的应用；是在制备治疗脑缺血的药物中的应用；是在制备治疗血管性神经精神障碍的药物中的应用；是在制备治疗脑缺氧疲劳的药物中的应用；是在制备治疗心肌供血不足的药物中的应用。
在治疗血管痉挛及其由此引起的疾病时，以藿香油为活性成分，以常规的制剂工艺，单独使用或与其他药物配合制备成在临床上可以使用的各种不同剂型的药物。如滴鼻剂，滴眼剂，及其它五官科药剂，散剂，丸剂，胶囊剂，片剂，微囊剂，软胶囊剂，膜剂，栓剂，注射剂，膏剂，酊剂，散剂，冲剂，气雾剂以及各种外用制剂等。
本发明的实验结果表明，藿香油对小鼠脑膜血流量有明显增加的作用。一般在给药后1分钟即有脑血流升高，并表现出一定的量效关系。如大剂量(25mg/kg)给药后与对照组相比，可使脑膜血流量增加15-20％。表明藿香油对脑血管有直接地扩张作用，对于血管性痉挛所引起的疾病有较好的缓解作用。藿香油给药后5分钟对小鼠大脑皮质一氧化氮(NO)含量有明显增加的作用。这一现象与小鼠脑膜血流量的结果有一定的吻合度。由于NO对血管平滑肌的收缩有一定的抑制作用，能扩张血管，抑制血管平滑肌痉挛，故藿香油对于血管性痉挛所引起的疾病有较好的。体外试验结果表明，藿香油有较强地抑制ADP诱导血小板聚集的作用，最低有效浓度为3.31×10-6g/ml，由于血小板的聚集提高直接导致凝血过程加剧和血栓形成，所以本实验结果提示藿香油具有一定的抗凝血或抑制血栓形成的作用。
在药剂应用上就是将藿香油单独地或者加入复方中以常规的制剂工艺制备成药剂。其药剂可以是临床上能够使用的各种不同剂型。
下述药物实验资料使本发明所说的藿香油新的用途得以证实。
动物实验例1对小鼠脑膜血流量的作用观察本发明藿香油对小鼠脑膜血流量的作用。藿香油，批号990418。用时以生理盐水配制成所需浓度。试验动物为雄性昆明种小鼠，非近交系封闭群，体重18-22g，合格证号医动字01-3001，由中国医学科学院实验动物中心提供。实验室室温20-22℃，相对湿度40％～60％，换气扇通气，自然光源12h/日，笼养，每笼8只，每三日清扫笼舍一次。
取小鼠乌拉坦(1.0g/kg)麻醉后，固定头部，切开皮肤，于大脑皮质运动区(AP-1，L2)安置激光探头(JI-200激光微循环仪，天津南开大学生产)，待稳定5-10分钟后开始测试脑血流，记录给药前后脑膜血流量的变化。
本试验观察指标及指标表达所测结果直接经JI-200软件处理，脑膜血流量以KHz(千赫兹)表示，脑膜血流量增加百分值[＝(给药后血流量-给药前血流量)/给药前血流量]。
本试验给药剂量分别为25mg/kg，12.5mg/kg和6.25mg/kg；给药途径为尾静脉给药；给药体积为0.05ml/10g小鼠。
本试验空白对照为等体积生理盐水，阳性药对照为川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康制药厂生产，批号9811191，京卫药准字(1996)第157008号，小鼠用量为25mg/kg。
本试验数据均以Excel软件处理。
表1 藿香油对正常大鼠脑血流量的作用(x±s)分组剂量 脑血流量(KHz)(mg/kg) 0 1 3 5 10 15(分钟)对照组 31.32 ± 31.67 ± 31.59 ± 31.45 ± 31.51 ± 31.53±2.71 2.02 2.58 2.69 2.63 2.27川芎嗪 25 30.91 ± 32.66 ± 33.52 ± 33.96 ± 33.32 ± 33.2 ±2.24 2.69 1.84 1.69* 1.99 1.95藿香油 25 31.02 ± 35.44 ± 37.02 ± 37.48 ± 37.38 ± 36.91±2.51 4.67 5.13* 4.08* 3.14* 3.02藿香油 12.5 31.64 ± 34.14 ± 37.44 ± 37.46 ± 36.55 ± 36.32±3.39 3.73 1.98* 2.46* 2.41 1.77藿香油 6.25 33.73 ± 35.31 38.05 38.45 38.4 36.8710.25 ±9.79±9.95±9.10*6±9.51±9.49与同时间对照组相比，P＜0.05。n＝8表2 藿香油对正常大鼠脑血流量增加百分比值(x±s)分组 剂量 脑血流量增加百分比值(％)(mg/kg) 0 135 10 15(分钟)对照组 0 1.45±0.96±0.45± 0.65±0.78±6.04 2.95 3.00 3.07 1.73川芎嗪 25 0 5.75±8.64± 10.08± 7.93±7.56±2.67 4.20*4.41*3.22*3.89*藿香油 25 0 14.16± 19.34± 20.96± 20.61± 19.09±10.53* 12.78** 10.04** 5.42** 5.56**藿香油 12.5 0 7.98± 19.35± 19.09± 16.12± 15.61±4.80*12.38* 8.95** 7.40*9.36*藿香油 6.25 0 5.31± 13.74± 15.48± 15.18± 10.28±4.74 4.76*7.36** 6.98 5.61*与同时间对照组相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝8实验结果显示，藿香油对小鼠脑膜血流量有明显增加的作用。一般在给药后1分钟即有脑血流升高，并表现出一定的量效关系；表明藿香油对脑血管有直接地扩张作用，对于血管性痉挛所引起的疾病有较好的缓解作用。
动物实验例2对小鼠脑内NO(一氧化氮)含量的作用观察本发明藿香油对小鼠脑内NO含量的作用。本发明所用藿香油，批号990418。用时以生理盐水配制成所需浓度。试验动物为雄性昆明种小鼠，非近交系封闭群，体重18-22g；合格证号医动字01-3001，由中国医学科学院实验动物中心提供。实验室室温20-22℃，相对湿度40％～60％，换气扇通气，自然光源12h/日，笼养，每笼8只，每三日清扫笼舍一次。
取小鼠随机分为5组，每组8只，尾静脉给与不同药物。给药后5分钟脱颈处死小鼠，迅速取出全脑，分离大脑皮质部分，迅速投入液氮中固定。然后转入-70℃冰箱保存，备测NO。测试时取小鼠大脑皮质，加入生理盐水冰水浴制备成20％匀浆液(w/v)，12000转/分钟离心30分，取上清液0.3ml，分别加入1×10-6mol/L的硫酸奎宁(购自Sigma公司)液3ml，混匀。再加入1mol/L HCl 0.1ml，1.6×10-2mol/L N-乙酰半胱氨酸(购自Sigma公司)0.3ml，摇匀后于850荧光分光光度计测试并记录荧光强度(激发波长为334nm，发射波长为445nm)。
本试验NO测试方法为硫酸奎宁法，脑组织蛋白定量方法为双缩脲法。
观察指标及指标表达荧光值(f)/g蛋白。
所测结果经Excel软件处理。
本试验给药剂量分别为25mg/kg，12.5mg/kg和6.25mg/kg；给药途径为尾静脉给药；给药体积为0.05ml/10g小鼠。
本试验空白对照为等体积生理盐水，阳性药对照为川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康制药厂生产，批号9811191。京卫药准字(1996)第157008号，小鼠用量为25mg/kg。
表3 藿香油对小鼠大脑皮质NO含量的影响(x±s)分组 给药剂量(mg/kg) NO(f/g蛋白)生理盐水3.94±1.38川芎嗪255.81±2.01*藿香油258.98±3.04**藿香油12.5 7.27±2.58**藿香油6.25 6.45±2.83**与生理盐水组相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝8实验结果显示，藿香油给药后5分钟对小鼠大脑皮质NO含量有明显增加的作用.这一现象与小鼠脑膜血流量的结果有一定的吻合度。由于NO对血管平滑肌收缩有一定的抑制作用，能扩张血管，抑制血管平滑肌痉挛。故本实验表明藿香油对于血管性痉挛所引起的疾病有较好的缓解作用。
动物实验例3对大鼠血小板聚集的抑制作用观察本发明藿香油对大鼠血小板聚集的抑制作用。本发明所用藿香油，批号990418。用时以生理盐水配制成所需浓度。实验所用动物为二级Wistar大鼠，雌雄各半，非近交系封闭群，医动字(95)01-3008，中国医学科学院实验动物研究所提供，体重为230-260g。实验室室温20-22℃，相对湿度40％～60％，换气扇通气，自然光源12h/日，笼养，每笼5只，每三日清扫笼舍一次。
取大鼠10％乌拉坦(1g/kg)麻醉，腹主动脉采血(3.8％枸橼酸钠抗凝)，每分钟1000转离心3-5分钟，分离富含血小板血浆，取富含血小板血浆0.15ml，置B1202血小板聚集仪(北京生化仪器厂生产)的比色池中，分别加入不同浓度的藿香油20ul，1mmol/L ADP(血小板聚集诱导剂，Sigma产品)20ul。观察并记录5分钟内吸光值最大变化数值，以反映血小板聚集程度。每个浓度做3个平行管。
本试验观察指标及指标表达所测结果直接经B1202软件处理，血小板聚集程度以血小板聚集百分率表示。
本试验藿香油给药终浓度分别为3.31×10-6g/ml，3.31×10-5g/ml，3.31×10-4g/ml，3.31×10-3g/ml，3.31×10-2g/ml。
本试验为体外实验。本试验空白对照为等体积生理盐水.阳性药对照为川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康制药厂生产，批号9811191，京卫药准字(1996)第157008号。川芎嗪终浓度为3.31×10-2g/ml。
本试验数据均以Excel软件处理。
表4 藿香油体外对ADP诱导血小板聚集作用的影响(x±s)分组 药物终浓度 血小板聚集百分率(g/ml)(％)生理盐水 70.11±2.06川芎嗪 3.31×10-227.26±3.66**藿香油 3.31×10-231.26±2.70**藿香油 3.31×10-337.92±2.53**藿香油 3.31×10-445.68±2.53**藿香油 3.31×10-557.33±4.08*藿香油 3.31×10-662.49±2.07*与生理盐水组相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝3本实验结果显示，藿香油体外有较强地抑制ADP诱导血小板聚集的作用，最低有效浓度为3.31×10-6g/ml，提示藿香油具有一定的抗凝血或抑制血栓形成的作用。
权利要求
1.藿香油在制备治疗血管痉挛及其由此引起的疾病的药物中的用途。
2.按照权利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制备治疗头痛的药物中的应用。
3.按照权利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制备治疗偏头痛的药物中的应用。
4.按照权利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制备治疗脑缺血的药物中的应用。
5.按照权利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制备治疗血管性神经精神障碍的药物中的应用。
6.按照权利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制备治疗脑缺氧疲劳的药物中的应用。
7.按照权利要求1所述的藿香油的用途，其特征在于所述的用途是在制备治疗心肌供血不足的药物中的应用。
8.以藿香油为活性成分治疗血管痉挛及其由此引起的疾病的药物。
9.按照权利要求8所述的药物，其特征在于所述的药物是以常规的制剂工艺制备的，在临床上可以使用的各种不同剂型。
全文摘要
藿香油的新用途，涉及藿香油在制备治疗血管痉挛及由此所引起的多种疾病的药物中的应用。具体的说，本发明所述的藿香油是在制备治疗头痛的药物中的应用、制备治疗偏头痛的药物中的应用、制备治疗脑缺血的药物中的应用、制备治疗血管性神经精神障碍的药物中的应用、制备治疗脑缺氧疲劳的药物中的应用以及在制备治疗心肌供血不足的药物中的应用。在治疗上述疾病时，以藿香油为活性成分，单独使用或与其他药物配合制备成在临床上可以使用的各种不同剂型的药物。经药理研究表明，藿香油对实验动物脑膜血流量有明显升高作用，有升高实验动物脑一氧化氮含量的作用，体外有抑制ADP诱导的血小板聚集活性的作用。
文档编号A61P9/00GK1442197SQ0312114
公开日2003年9月17日 申请日期2003年3月28日 优先权日2003年3月28日
发明者邢东明, 杜力军, 丁怡, 王雪莉, 王伟 申请人:清华大学