专利名称：一种治疗心脑血管疾病的颗粒剂及其质量控制方法
〔技术领域〕本发明涉及一种中药“心脑舒颗粒”及其质量控制方法，该颗粒是一种具有补气养阴功效，用于治疗气阴两虚而致的头晕目眩，失眠健忘，心悸怔忡，短气肢倦，自汗盗汗，不耐烦劳的药物制剂，属中药领域。
〔背景技术〕生脉散，是祖国医学“益心复脉”效验的代表古方之一，历代医家沿用不衰。“生脉散”之方名首载于《医学启源》，定型于《内外伤辨惑论》，完善于《医方考》。
生脉散原方为暑伤元气病症而设，由人参、麦冬、五味子组成，解其方义为“益气脉复，故名生脉”。方中人参性温，味甘，微苦，入肺、脾、心三经，具有大补元气，补脾益肺、生津，安神的作用，主治劳伤虚损、久虚不复及一切气血津液不足之证，麦冬味甘，微苦，性微寒，入肺、胃、心三经，具有养阴益胃、润肺清心的功效，主治肺燥干渴、热病津伤、口燥咽干之证。五味子性温，味酸甘，入肺、心、肾三经，具有益气生津、补肾养心、收敛固津之功效，主治肺虚咳喘，口干作渴、自汗、劳损之证。三药合用，人参甘平益气复脉、生津止渴、振兴元气为君，麦冬甘寒润肺、养阴、清心除烦、益胃生津为臣药。五味子酸温、固表止汗、生津止渴、敛肺益气为佐使药。生脉散组方巧妙，一补一润一敛，配伍严谨，疗效显著，是益气养阴、生津敛汗的代表古方，历代广为传用，以往多用来治疗暑热汗多，耗气伤阴及久咳肺虚、气阴两伤之证。
在治疗慢性病、老年病时，针对气阴易虚、阴阳失衡的特点，对生脉散加减化裁，从而衍化出许多类方，用于治疗多种病证。其中一种是益气生脉散，由黄芪、党参、人参、麦冬、五味子组成。生脉散本身具有益气养阴作用，在此基础上，重用黄芪，党参旨在加强益气效果。用于老年人气阴两虚，偏气虚明显者，主治心功能不全，临床表现以气短、喘促、不能平卧、乏力、下肢水肿等为主症的各种心脏疾患。程奎林在《加味生脉散治疗老年病窦综合征17例》(《辽宁中医杂志》，1994年8月，第21卷第8期，第367页，程奎林.周玉兰)一文中报道对于临床主证是头晕乏力、气短、心悸、晕厥的患者，由于其病机是心气虚，肾阴血不足，血不养心，肺气不足，不能朝百脉而致病，治当益气养阴，补阴壮阳，补血养心，益气通脉，故予以加味生脉散治疗，具体的治疗方法是党参、麦冬、五味子、黄芪、甘草各30g，每日煎服1剂，人参4g每日4次嚼服，两个月为一疗程治疗。药效资料显示本组17例中，男10例，女7例；平均年龄65.4±3.5岁；全部为冠心病，其中窦缓13例、p窦房阻滞3例、慢一快综合征1例；本文以用药前后进行运动试验、阿托品试验、固有心率测定、心脏电生理检查SNRT、SNRTc、SACTAP测定作为疗效观察，前后出现显著性差异，证明加味生脉散有提高心律，恢复窦房结功能的作用。
加味生脉散的剂型是口服液，申请号为CN93110216.2的专利申请公开了“改善机体功能的中药及其制备方法”，以人参5％～25％，麦冬15％～50％，五味子15％～35％，党参10％～30％，黄芪5％～20％的提取物为有效成分，通过中药提取，提纯净化，配料灭菌、包装等步骤制成合剂。该中药的制备工艺包括如下步骤提取人参浸膏，提取麦冬、党参、黄芪浸膏，提取五味子浸膏，浸膏通过活性炭煮沸净化脱色，配制合剂。
《中华人民共和国卫生部中药成方制剂药品标准》第十七册(
公开日1998年12月31日)公开了一种“中药心脑舒口服液”，该口服液是一种用于治疗头晕，失眠，健忘，心悸的中药成药制剂，由主原料药人参、黄芪、麦冬、五味子、党参制成，具有补气养阴，增强心、脑力作用。其制备工艺包括提取人参浸膏，提取麦冬、党参、黄芪浸膏，提取五味子浸膏，人参浸膏和麦冬、党参、黄芪浸膏混合，混合浸膏和五味子浸膏分别加入活性炭煮沸净化脱色，五味子脱色后的滤液调pH值至4.5～5.0，与混合浸膏脱色后的滤液合并，合并液呈弱酸性状态，在此状态下煮沸30分钟。
现有技术中对于人参浸膏，麦冬、党参和黄芪浸膏、五味子浸膏都采用了加入活性炭煮沸净化脱色处理以减少沉淀获得口服液的良好外观。
虽然活性炭常用于大多数中药口服液和合剂的净化脱色，但活性炭的吸附作用会使部分有效成分含量降低，而且活性炭的残留问题也不可避免地对人体产生了一定的毒性。试验显示加入的活性炭对人参皂苷Re、人参皂苷Rg1和总黄酮均有明显的吸附作用(见表1)，过滤后导致有效组分含量降低。即使采用了这些方法，由于液体制剂的稳定性差，长时间放置易有沉淀产生，仍然导致有效成分的损失。因此，“心脑舒口服液”的剂型及其制备工艺都难以达到现代药物的技术要求。
表1活性炭加入量对吸附影响活性炭加入量(g)0 0.010.050.100.501.001.50人参皂苷Re含量(mg) 0.5216 0.5056 0.4716 0.4452 0.3850 0.3255 0.2275降低标示量(％) 0 3.079.5914.65 26.19 37.60 56.38人参皂苷Rg1含量(mg) 0.2713 0.2635 0.2519 0.2309 0.1977 0.1836 0.1386降低标示量(％) 0 2.887.1514.89 27.13 32.33 48.91总黄酮含量(mg) 2.4326 2.2087 1.7901 1.5776 1.0958 0.6859 0.0256降低标示量(％) 0 9.2026.41 35.15 54.95 71.80 98.95可见，活性炭对人参皂苷Re、人参皂苷Rg1和总黄酮有较强的吸附作用，炭量增加，吸附量明显增多。
现代科学研究表明，人参皂苷Rg1可改善软脑膜微循环，直接增加脑血流量[李冬梅，许逸，傅万玉等.人参皂苷Rg1对脑缺血大鼠软脑膜微循环的影响.微循环杂志，1999，9(1)8～10]，还可提高机体防御功能的作用[任杰红，陈林芳，张路晗等.人参皂苷Rg1的免疫促进作用.中药新药与临床药理，2002，13(2)92～93]，人参皂苷Re治疗可以抑制急性缺血再灌流诱导的心肌细胞凋亡[刘正湘，刘晓春，李志刚.人参皂苷Re抗大鼠急性缺血-再灌流心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达.中华急诊医学杂志，2003，12(3)158～159]，黄芪皂苷具有强心作用[王奇玲，李云义，齐辉等.黄芪皂苷对离体工作心脏的肌力作用及其可能机制.中国中药杂志，1992，17(9)557～559]。
由于“心脑舒口服液”中无严格的质量控制方法，无法保证制剂的确切疗效，不符合现代药物质量可控的要求。“心脑舒口服液”为液体制剂，其制剂工艺落后，有效成分含量低。所以，本发明的内容就是提供一种“心脑舒口服液”的新剂型及其质控方法和制备方法。
本发明的目的之一是提供一种中药“心脑舒颗粒剂”的制备方法，该方法克服了原工艺的不足，尽可能的保留了有效成分；本发明目的之二是提供中药“心脑舒颗粒”制剂的质量控制方法，包括麦冬、黄芪的薄层鉴别和具有重要疗效的人参皂苷Rg1和人参皂苷Re两种有效成分的含量测定，提高了药物的质量，保证了制剂的药效。
〔发明内容〕。
本发明以116.7重量份人参、229.2重量份麦冬、154.2重量份五味子、154.2重量份党参、79.2重量份黄芪为原料药，通过改进现有技术中的“浸膏都采用了加入活性炭煮沸净化脱色的处理工艺”，采用湿法制粒的方式，使用成型剂糊精921.7重量份，制备得到颗粒剂。
本发明“心脑舒颗粒剂”的制备方法按如下步骤称取116.7重量份人参、229.2重量份麦冬、154.2重量份五味子、154.2重量份党参、79.2重量份黄芪，备用；以上五味，人参加85％乙醇，回流提取4次，每次3小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至适量；麦冬、党参、黄芪加水煎煮三次，第一次3小时，第二、三次分别为2小时和1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.20(50℃)，加乙醇至含醇量达70％，搅匀，放置12小时以上，取上清液回收乙醇并浓缩至适量五味子加水煎煮三次，每次煎煮3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.20(50℃)，加乙醇至含醇量达70％，搅匀，放置12小时以上，取上清液回收乙醇并浓缩至适量。合并上述三种清膏，继续浓缩至相对密度为1.35(60℃)的稠膏，加成型剂糊精921.7重量份，加矫味剂甜菊糖苷5重量份，搅匀，以适量95％乙醇制成颗粒，干燥，整粒，每袋6g，即得。
针对原制备方法的不足原口服液中有效组分因被少量沉淀包结、活性炭吸附时造成的损失影响了其含量，本发明有针对性的对提取工艺进行了如下改进1.本发明是将三种浸膏混合后采用了湿法制粒工艺制得的混悬型颗粒。
2.由于中药浸膏具有粘性强，吸水性强的特点，通过如下比较试验，优选了成型剂辅料以1倍处方量药材制成的浸膏(原料116.7重量份人参、229.2重量份麦冬、154.2重量份五味子、154.2重量份党参、79.2重量份黄芪制成的稠膏)与一定量成型剂辅料混合后制粒，结果见下表。
表2成型辅料对制粒的影响结果辅料类型 辅料量颗粒性质 水分(％)软材较粘，不易通过筛网，得颗蔗糖 900重量份 7.0粒量少软材硬度适宜，均匀通过筛网，糊精 900重量份 3.5湿法制粒时成型性好软材硬度较适宜，大部分可通过聚乳糖 900重量份 3.8筛网，湿法制粒时成型性较差软材稍粘，部分可通过筛网，湿淀粉 900重量份 3.9法制粒时成型性差软材硬度适宜，较为均匀地通过低聚乳糖 900重量份 3.3筛网，湿法制粒时成型性较好由上表可见，采用糊精作为成型辅料，湿法制粒时成型颗粒的成品率最高，其次是低聚乳糖。
另以1倍处方量药材制成的浸膏(原料116.7重量份人参、229.2重量份麦冬、154.2重量份五味子、154.2重量份党参、79.2重量份黄芪制成的稠膏)与不同重量份成型剂辅料低聚乳糖或糊精混合后制粒，结果见表3。
表3辅料用量对成型的影响结果辅料量颗粒性质 水分(％)720重量份 软材粘性强，无法制粒 22.4软材粘性较强，勉强可用于制粒，850重量份 10.7但成型性差软材硬度较适宜，可均匀通过筛925重量份 3.8网，湿法制粒时成型性较好1000重量份 软材粉性较大，过筛网后粉末多 2.3由上表可见，辅料用量为925重量份时，使用糊精或低聚乳糖均可达到制粒的技术要求。
本发明心脑舒颗粒剂的鉴别方法，具体步骤是(1)麦冬的鉴别取本品6g，加水40ml，加热使溶解，加盐酸3ml，回流水解1小时，趁热过滤便于过滤操作，滤液放冷，加乙醚30ml萃取，分取乙醚层，蒸干，残渣加氯仿1m1使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材2g，加水200ml，煮沸30分钟，注意随时添加适量水，防止煮干，趁热滤过，滤液浓缩至40ml，加盐酸3ml，同上制成对照药材溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮(8∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)黄芪的鉴别制剂中黄芪含量低，故取样量较大。取本品60g，加水150ml，加热使溶解，加乙醇使含醇量达70％，取上清液，蒸干，残渣加水110ml使溶解，置分液漏斗中，为防止薄层色谱中脂溶性杂质的干扰，用乙醚萃取脱脂三次，每次50ml，弃去乙醚液，再用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次60ml，合并正丁醇液，用1％氢氧化钾液代替氨试液洗涤2次既可除去黄酮、酚类等大部分酸性杂质，又可避免氨试液的强烈刺激气味，弃去洗液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，又可除去部分残留的碱性杂质，由于正丁醇提取液量较大，需先回收溶剂，再蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品液15μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明心脑舒颗粒剂的含量测定方法，具体是含量测定指标及方法的选择我们最初采用蒸发光散射检测器检测黄芪甲苷的含量，发现黄芪甲苷的含量过低，杂质干扰较为严重，同时加之基线不易稳定，故放弃黄芪甲苷的含量测定。人参为本方君药，含30多种人参皂苷，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re为其主要的有效成分，性质稳定，可以准确定量，故将其定为本制剂含量测定的指标成分。为方便提及，将“人参皂苷Rg1和人参皂苷Re”称为“人参总皂苷”。文献报道的人参总皂苷含量测定方法有薄层扫描法、高效液相色谱法等。
我们采用了HPLC法测定制剂中人参总皂苷的含量，建立了制剂质量控制方法。
Agilent 1100高效液相色谱仪，QuatPump泵，VWD紫外-可见检测器。
色谱柱淮阴汉邦科技公司，反相C18柱Kromasil C18(4.6×250mm，5μm)；淮阴汉邦科技公司，反相C18柱Lichrospher C18(4.6×250mm，5μm)。结果显示，Lichrospher C18色谱柱不能达到分离，但Kromasil C18色谱柱分离效果较好，故选用Kromasil C18(4.6×250mm，5μm)。
流动相根据《古方生脉散制剂中人参皂甙的反相高效液相色谱分离和含量测定》(马鹏.林涛.黄静.《华西药学杂志》，1995，121-23)记载的乙腈-0.05％磷酸水(19∶81)系统，我们为尽量使用国产色谱柱和避免磷酸水溶液损害色谱柱而采用乙腈∶0.05％三氟乙酸水溶液恒度洗脱，并由19∶81、20∶80、21∶79逐个试验到28∶72，但人参皂苷Rg1保留时间均不稳定，均易与人参皂苷Re重叠而产生干扰，导致人参皂苷Rg1峰与人参皂苷Re峰不能达到基线分离；Rg1峰与Re峰不能达到基线分离的原因还可能是由于提取心脑舒颗粒样品人参皂苷的过程中，带入了黄芪、党参中的四环三萜类的皂苷而产生了干扰。经过反复试验，我们通过先用恒流再用梯度洗脱的方法固定了人参皂苷Rg1的出峰时间，方法为在(21∶79)左右设计小梯度，使该法稳定、可靠。因而尝试多种线性梯度洗脱方法(1)A为乙腈，B为0.05％三氟乙酸水。
表4线性梯度洗脱表时间(min) A B0→17 19→1981→8117→45 19→2081→80(2)A为乙腈，B为0.05％三氟乙酸水。
表5线性梯度洗脱表时间(min) A B0→17 19→1981→8117→45 19→2381→77(3)A为乙腈，B为0.05％三氟乙酸水。
表6线性梯度洗脱表时间(min) A B0→17 19→1981→8117→45 19→2181→79(4)A为乙腈，B为0.05％三氟乙酸水。
表7线性梯度洗脱表时间(min) A B0→17 19→1981→8117→45 19→2281→78(5)A为乙腈，B为0.05％三氟乙酸水。
表8线性梯度洗脱表时间(min) A B0→10 19→1981→8110→45 19→2281→78(6)A为乙腈，B为0.05％三氟乙酸水。
表9线性梯度洗脱表时间(min) A B0→519→1981→815→27 19→2281→78(7)A为乙腈，B为二次重蒸馏水。
表10线性梯度洗脱表时间(min) A B0→10 19→1981→8110→45 19→2281→78最终确定梯度洗脱方法为(7)法。
在表10线性梯度洗脱条件下，人参皂苷Rg1峰与人参皂苷Re峰可基本达到分离，但基线不稳，呈锯齿状，说明乙腈与水混合时产生了气泡，故通过折算，将A改为乙腈-水(19∶81)，B改为乙腈，梯度洗脱，见表11。
表11线性梯度洗脱表时间(min) A B0→10 100→1000→010→45100→96.3 0→3.7测定波长据人参皂苷Rg1和人参皂苷Re峰的紫外光谱，其最大吸收波长为203nm，故将其测定波长确定在203nm。
柱温35℃。
流速1.0ml/min。
在上述条件下，人参皂苷Rg1与人参皂苷Re峰呈良好分离。为了确保定量分析的准确，在系统实验中人参皂苷Re理论塔板数不得低于2500。重复二支Kromasil C18色谱柱，均能达到上述分离指标，符合要求。需注意的是若连续进供试品溶液3针以上，应先用乙腈清洗色谱柱30分钟，再用流动相平衡30分钟后进样，否则峰分离度下降。
本发明测定了君药人参中补气养阴的有效成分皂苷类化合物人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总含量以及麦冬、黄芪的薄层鉴别。
我们提供的制剂含测方法，目前未见相关文献报道，不仅适用于“心脑舒颗粒剂”，而且适用于大多含人参的复方制剂和人参药材。
〔具体实施方式
〕实施例一 心脑舒颗粒剂的制备称取原料人参116.7g、麦冬229.2g、五味子154.2g、党参154.2g、黄芪79.2g。
以上五味，人参加85％乙醇，回流提取4次，每次3小时，第一次加醇量为药材的4倍量，第二、三、四次各加3倍量，合并滤液，回收乙醇并浓缩成清膏；麦冬、党参、黄芪加水煎煮三次，第一次3小时，加水量为三种药材总和的8倍量，第二、三次分别为2小时和1小时，加水量均为6倍量，合并滤液，浓缩至相对密度1.20(50℃)，加乙醇至含醇量达70％，搅匀，放置12小时以上，取上清液回收乙醇并浓缩成清膏；五味子加水煎煮三次，每次煎煮3小时，第一次加水量为药材的8倍量，第二、三次加水量均为6倍量，合并滤液，浓缩至相对密度1.20(50℃)，加乙醇至含醇量达70％，搅匀，放置12小时以上，取上清液回收乙醇并浓缩成清膏。合并上述三种清膏，继续浓缩至相对密度为1.35(60℃)的稠膏。加5g甜菊糖苷及921.7g糊精，搅匀，加适量95％乙醇制成颗粒，干燥，整粒，分装(6g/袋)，即得。
实施例二 心脑舒口服液、心脑舒颗粒剂中主要有效成分含量比较对“心脑舒口服液”及“心脑舒颗粒剂”进行了含量测定比较试验，以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、黄芪甲苷和总黄酮的含量为指标，实验结果如表12。
表12“心脑舒口服液”与“心脑舒颗粒剂”的含量测定比较试验指标成分项目 人参皂苷 人参皂苷黄芪甲苷总黄酮Rg1Re心脑舒口服0.2850.5690.321 2.587液(mg/10ml)心脑舒颗粒0.3490.7120.366 5.254剂(mg/袋)颗粒比原口服液的提高 22.4625.1314.02 103.09率(％)对心脑舒制剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和黄芪甲苷三种有效成分的含量测定表明，心脑舒颗粒剂中上述三种有效成分的含量与心脑舒口服液(每10ml心脑舒口服液中所含生药量与每袋心脑舒颗粒剂所含生药量相当)相比有明显的提高，而颗粒中总黄酮的含量比口服液提高了一倍。
实施例三 心脑舒颗粒剂麦冬的薄层鉴别取本品6g，加水40ml，加热使溶解，加盐酸3ml，回流水解1小时，趁热过滤，滤液放冷，加乙醚30ml萃取，分取乙醚层，蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材2g，加水200ml，煮沸30分钟，趁热滤过，滤液浓缩至40ml，加盐酸3ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮(8∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例四 心脑舒颗粒剂黄芪的薄层鉴别取本品60g，加水150ml，加热使溶解，加乙醇使含醇量达70％，取上清液，蒸干，残渣加水110ml使溶解，置分液漏斗中，用乙醚萃取三次，每次50ml，弃去乙醚液，再用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次60ml，合并正丁醇液，用1％氢氧化钾液洗涤2次，每次150ml，弃去洗液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，正丁醇提取液回收溶剂，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品液15μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例五 心脑舒颗粒剂人参皂苷Rg1和人参皂苷Re总含量测定照高效液相色谱法(中国药典2000版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适应性试验 Agilent 1100高效液相色谱仪，QuatPump泵，VWD紫外-可见检测器，Agilent全自动进样器，Agilent色谱工作站；用十八烷基硅胶为填充剂；先以A溶剂系统[乙腈-水(19∶81)](体积比)为流动相，保持10分钟，再在随后的35分钟内(10～45min)，流动相由A溶剂系统逐渐改变至A溶剂系统-B溶剂[乙腈](96.3∶3.7)(体积比)，线性梯度洗脱(见表13)；检测波长为203nm；流速1.0ml/min；柱温35℃。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于2500。
表13线性梯度洗脱表时间(min) A B0→10 100→1000→010→45 100→96.3 0→3.7对照品溶液的制备 精密称取于60℃干燥至恒重的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品适量，用流动相A分别制成每1ml含人参皂苷Rg10.291mg、人参皂苷Re0.313mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物，研细，取约6g，精密称定，置索式提取器中，加氯仿70ml，加热回流3小时，弃去氯仿液，药渣挥去氯仿，转移入烧杯中，加20ml水，加热使溶解，加95％乙醇56ml使含醇量达70％，静置2小时，倒出上清液，沉淀用70％乙醇5ml洗涤，洗涤液过滤，滤液与上述上清液合并，蒸干，残渣加水20ml分次超声溶解，转移置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取6次，每次20ml，合并正丁醇液，用1％氢氧化钾液洗涤2次(50ml、40ml)，弃去碱液，再用正丁醇饱和水洗涤2次，每次50ml，弃去水液，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇分次溶解并转移至2ml容量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，取样，离心(转速10000转/分钟)10分钟，取上清液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定，即得。
本品每袋含人参以人参总皂苷[人参皂苷Rg1(C42H72O14)和人参皂苷Re(C48H82O18)]计，不得少于0.8mg。
图1缺人参阴性样品HPLC2人参皂苷Rg1HPLC3人参皂苷Re HPLC4心脑舒颗粒样品HPLC图
权利要求
1.一种治疗心脑血管疾病的颗粒剂的制备工艺，其特征在于称取原料人参116.7g、麦冬229.2g、五味子154.2g、党参154.2g、黄芪79.2g，人参加85％乙醇，回流提取4次，每次3小时，第一次加醇量为药材的4倍量，第二、三、四次各加3倍量，合并滤液，回收乙醇并浓缩成清膏；麦冬、党参、黄芪加水煎煮三次，第一次3小时，加水量为三种药材总和的8倍量，第二、三次分别为2小时和1小时，加水量均为6倍量，合并滤液，浓缩至50℃测定相对密度1.20，加乙醇至含醇量达70％，搅匀，放置12小时以上，取上清液回收乙醇并浓缩成清膏；五味子加水煎煮三次，每次煎煮3小时，第一次加水量为药材的8倍量，第二、三次加水量均为6倍量，合并滤液，浓缩至50℃测定相对密度1.20，加乙醇至含醇量达70％，搅匀，放置12小时以上，取上清液回收乙醇并浓缩成清膏，合并上述三种清膏，继续浓缩至60℃测定相对密度为1.35的稠膏，加5g甜菊糖苷及921.7g糊精，搅匀，加适量95％乙醇制成颗粒，干燥，整粒，即得。
2.根据权利要求1所述的治疗心脑血管疾病的颗粒的薄层鉴别方法a.麦冬的鉴别取颗粒剂6g，加水40ml，加热使溶解，加盐酸3ml，回流水解1小时，趁热过滤，滤液放冷，加乙醚30ml萃取，分取乙醚层，蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材2g，加水200ml，煮沸30分钟，趁热滤过，滤液浓缩至40ml，加盐酸3ml，同法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8∶2的氯仿-丙酮体系为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，在105℃烘5分钟；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.黄芪的鉴别取颗粒剂60g，加水150ml，加热使溶解，加乙醇使含醇量达70％，取上清液，蒸干，残渣加水110ml使溶解，置分液漏斗中，用乙醚萃取三次，每次50ml，弃去乙醚液，再用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次60ml，合并正丁醇液，用1％氢氧化钾液洗涤2次，每次150ml，弃去洗液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，正丁醇提取液回收溶剂，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液；吸取上述供试品液15μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为65∶35∶10的氯仿-甲醇-水体系在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展干，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，在105℃烘5分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1所述的治疗心脑血管疾病的颗粒的含量测定方法取颗粒，研细，取约6g，精密称定，置索式提取器中，加氯仿70ml，加热回流3小时，弃去氯仿液，药渣挥去氯仿，转移入烧杯中，加20ml水，加热使溶解，加95％乙醇56ml使含醇量达70％，静置2小时，倒出上清液，沉淀用70％乙醇5ml洗涤，洗涤液过滤，滤液与上述上清液合并，蒸干，残渣加水20ml分次超声溶解，转移置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取6次，每次20ml，合并正丁醇液，用50ml、40ml 1％氢氧化钾液分别洗涤2次，弃去碱液，再用正丁醇饱和水洗涤2次，每次50ml，弃去水液，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇分次溶解并转移至2ml容量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，取样，以10000转/分钟的转速离心10分钟，取上清液，为供试品液；以流动相A配制的人参皂苷Rg1液和流动相A配制的人参皂苷Re液为对照；色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；洗脱方式是线性梯度洗脱；流动相为A溶剂系统乙腈 19体积水 81体积和B溶剂乙腈 100体积先以A溶剂系统为流动相，保持10分钟，再在随后的35分钟内，流动相由A溶剂系统逐渐改变至A溶剂系统∶B溶剂为96.3∶3.7(V/V)；检测波长为203nm；流速1.0ml/min，柱温35℃。
全文摘要
本发明涉及一种主要用于气阴两虚而致的头晕目眩，失眠健忘，心悸怔忡，短气肢倦，自汗盗汗，不耐烦劳的中药颗粒剂的质量控制方法。该制剂由人参等5味中药为原料药制成，制备工艺中采用湿法制粒的方法，制成混悬型颗粒，尽可能地保留了有效成分，提高了药物的稳定性，便于连续性GMP条件下大型生产。该制剂的质量控制方法包括肉桂的薄层鉴别、延胡索乙素的含量的测定[用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇∶水∶三乙胺－(60∶40∶0.5)为流动相；检测波长为280nm；流速1.0ml/min]。
文档编号A61J3/06GK1586455SQ20041007827
公开日2005年3月2日 申请日期2004年9月23日 优先权日2004年9月23日
发明者濮桂宝 申请人:内蒙古伊泰医药科技开发有限责任公司