采用高剂量硫酸软骨素的膀胱炎疗法的制作方法

专利名称：采用高剂量硫酸软骨素的膀胱炎疗法的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于治疗膀胱炎，包括间质性膀胱炎和有关的膀胱病症的治疗剂和方法。
背景技术：
间质性膀胱炎是一种与泌尿刺激物引起的不适和疼痛有关的膀胱病症，导致排尿紧急和次数增多。由于其病因还不清楚，对有效疗法的开发是遵循大量经验获得的途径。这些途径无法比少数治疗剂和治疗方法获得的更多。Sant和La Rock在Interstitial Cystitis，Vol.21(1)，2月1994的第73页中指出，现有疗法包括药物疗法，而膀胱内使用二甲基亚砜是FDA唯一批准的疗法。然而，多种其他药物用于治疗间质性膀胱炎的症状，这些药物单独使用或者与DMSO联合使用。此类药物包括氧氯苯磺酸钠(Clorpactin)、肝素、透明质酸、甾族化合物、碳酸氢钠、硝酸银、戊聚糖多硫酸钠、色甘酸钠、利多卡因和阿霉素。这些药物中的许多可以口服给药，但通过滴注法给药或者作为单一疗法、联合疗法或顺序疗法时在urethelium的GAG表面层上最为有效。这些药物和疗法以膀胱粘膜衬层为靶向，并且使疼痛、尿频和尿急得到症状性缓解。然而，在这些疗法中，很少能够在持续时间内产生缓解作用。
最近，我们已经公开了硫酸软骨素作为滴注制剂在间质性膀胱炎和有关膀胱病症的治疗中的应用(参见授权给Stellar InternationalInc.的US6,083,933和CA2269260)。在这些专利的内容中，含有80mg，并且至多200mg硫酸软骨素的制剂作为40mL的滴注剂，该滴注剂对被诊断为膀胱炎的患者中包括尿频、疼痛和尿急在内的至少一种症状产生缓解作用。此外，还公开了一种诊断方法，该方法用于鉴定硫酸软骨素疗法或采用其他膀胱炎治疗的疗法的效应器。在这种途径中，患者候选者首先接受滴注剂量的刺激物例如氯化钾，此后根据患者在滴注硫酸软骨素或其他治疗剂后从刺激物引发的症状缓解经历来确定效应器。对于在此类疗法中的应用，伦敦，Ontario，加拿大的Stellar International Inc.上市产品Uracyst-STM，它是一种含有在49mL水载体中含80mg硫酸软骨素(0.2％)的治疗药盒，并且产品Uracyst-STM-浓缩物提供一种在10mL载体中含200mg软骨素(2.0％)的瓶装剂。使用UracystTM-S的研究结构由Steinhoff等人报告在Can.J.Urol.，2002Feb 9(1)1454-58中。
在成本有效的基础上，始终需要提供有效治疗膀胱炎，包括间质性膀胱炎和有关由侵蚀粘膜衬层导致的膀胱和尿道病症的药物和疗法。所以本发明的目的在于提供这样的疗法。
发明概述现在发现患有膀胱炎以及膀胱和尿道有关病症的患者在硫酸软骨素的滴注剂量升高至200mg以上时能够对硫酸软骨素的治疗更快速反应。已经推定接近200mg的剂量足以饱和膀胱衬层并由此沉积或吸附足够的硫酸软骨素以保护膀胱衬层侵蚀的所有可利用位置。然而，已经令人惊奇地发现，当硫酸软骨素的滴注剂量升高至超过200mg时可以实现膀胱炎症状的更加快速的缓解。此外，业已发现，施用较高剂量的硫酸软骨素能够使那些其膀胱炎极其严重以至于事实上其他常规形式的膀胱炎疗法难以治疗的患者得到缓解。
所以，根据本发明的一个方面，提供一种治疗患有膀胱炎或膀胱或尿道有关病症的患者的方法，该方法包括给患者滴注含有单位剂量为至少250mg，优选至少300mg，更优选至少350mg和最优选至少400mg的硫酸软骨素的药物组合物的给药步骤。同样地，本发明提供硫酸软骨素在制备含有至少250mg硫酸软骨素的用于治疗膀胱炎和膀胱和尿道有关病症的药物中的应用。
在本发明的其它方面中，提供一种适合通过滴注向患者给药的药物组合物，该组合物含有单位剂量至少为250mg的硫酸软骨素以及含水载体。在本发明的实施方式中，有效治疗膀胱炎的组合物包括灭菌、含水组合物，该组合物含有(1)至少250mg例如在250mg-饱和度范围内的单位剂量的高纯级硫酸软骨素，和(2)药物可接受含水载体，其体积为患者可耐受的且足以与被治疗膀胱表面区域接触。
在本发明的一个具体实施方式
中，提供一种适合滴注的药物组合物，该组合物含有单位剂量为250-1200mg的硫酸软骨素和10-100mL含水载体。
在更特定的实施方式中，所述的组合物在20mL含水载体，优选磷酸盐缓冲盐水中含有400mg硫酸软骨素。在非常特定的实施方式中，提供一种适合滴注的灭菌硫酸软骨素溶液，该溶液基本上是由，并且优选只由400mg硫酸软骨素和20mL含水缓冲液，优选磷酸盐缓冲盐水组成。
本发明的其他方面及其实施方式在下文中详细描述，参考所附的附图，其中附图简述

图1利用Oleary Sant指标，对比了从接受高剂量硫酸软骨素的膀胱炎患者获得的结果，与从接受80mg剂量的硫酸软骨素的患者获得的结果。
详述和优选实施方式本发明的组合物和方法适用于治疗和评估不同形式的膀胱炎，所述的膀胱炎尤其在膀胱中出现，但也出现在尿道中，包括尿道和其他粘膜表面，它们通过囊滴注给药途径暴露于治疗下。通过这种途径，将灭菌导管经尿道置于膀胱内，并且将治疗溶液通入导管。该溶液随后在膀胱内滞留至少30分钟或更长时间，随后排出。可被治疗的膀胱炎的形式包括特定间质性膀胱炎和那些其他形式的对粘膜完整性和屏障功能的增强有反应的膀胱炎和有关膀胱病症，这被确信是采用现有硫酸软骨素治疗的结果。这些包括辐射引起的膀胱炎，化学物质引起的膀胱炎，例如化疗导致的膀胱炎和出血性膀胱炎，并且，更一般地，膀胱炎的GAG缺乏形式和慢性尿道感染导致的GAG-缺乏。
利用建成的钾试验揭示膀胱炎相关病症，该试验中将3.0％KCl溶液滴注到候选患者的膀胱内。对该钾溶液的反应以及膀胱炎的症状特征显示膀胱衬层中的GAG缺乏，提示了患者存在膀胱炎或者GAG-缺乏有关的病症，并且确定该患者作为硫酸软骨素疗法的候选者。
为了用于治疗间质性膀胱炎和这些相关病症，本发明采用硫酸软骨素，它是酸性粘多糖并且是糖胺聚糖(GAG)之一。其重复二糖单元是由葡糖醛酸和在B(1-3′)键带有一个硫酸根的半乳糖胺，即N-乙酰基半乳糖胺硫酸盐组成。这种二糖单元在B(1-4′)键聚合。
硫酸软骨素(CS)可以多种一硫酸化形式使用，根据常与提取来源有关的具体化学组成、常与处理技术有关的链长、硫酸化的程度等而变化。在本发明的应用中，希望CS是无热原形式并且是高纯的，由此通过不同控制环节得到″可注射级″的具有人体使用所需的质量的原料。这样的原料款得自多种市售来源，并且现有文献充分说明了适合制备这样的原料的方法。在本发明的实施方式中，所述的CS的分子量范围为约1,000道尔顿-约75,000道尔顿，例如约10,000道尔顿-约40,000道尔顿。在此大小范围内的CS的适当天然来源是软结缔组织，例如软骨。在一具体实施方式
中，CS起始原料得自猪或牛软骨，此后通过确定的方法精制得到所需可注射等级和分子量分级的CS。或者，应理解CS可得自其他来源，包括合成途径，或者混合并与合成和天然CS形式结合成为所需组合物。理想地，但不是必须的，所述的CS含有A型和C型的CS，呈3∶1-1∶3(以摩尔计)例如约1∶1的混合物形式。
应懂得CS通常是盐形式，并且根据本发明的实施方式，是钠盐形式。
在使用时，所述的CS被配制为灭菌水溶液。希望该制剂适合单剂量给药，虽然应理解多剂量制剂可以用来治疗多个患者。
按照本发明，施用给患者的CS单位剂量是至少250mg。更优选，CS的单位剂量至少300mg。优选地，该单位剂量为至少350mg。更优选，单位剂量为至少400mg。在理论上，可接受单位剂量的上限仅仅由于给定类型的CS在所选含水载体中的溶解度，和疗法中所用载体的体积而达到顶点。在室温和灭菌蒸馏水中，CS的溶解度约为50％。所以，CS单位剂量的上限可以是500mg/mL载体。根据本发明，希望将单位剂量的CS配制在足够使膀胱表面暴露在治疗下的溶液体积内，并且至少是耐受的，更希望使患者感到舒适。所述体积的上限处于引起尿胀的体积以下，在某些患者中它是约250mL。对于成年患者，溶液体积适宜为约5mL或10mL至约100mL，例如最多为约75mL，和优选最多为约50mL。在本发明的具体实施方式
中，采用约40mL的溶液体积。所以，在上述体积下，可施用给患者的CS的单位剂量的上限可以为约20,000mg。
在本发明的实施方式中，施用给患者的CS的单位剂量适合处于250-1,200mg的范围内，理想地在300-800mg的范围内，优选在350-600mg的范围内，并且更优选在375-500mg的范围内。在一具体实施方式
中，CS被配制为400mg的单位剂量。
作为此类溶液的载体，可以使用灭菌水、盐水或缓冲盐水。盐水载体特别适用，并且在本发明的实施方式中，载体为0.9％盐水。或者，可以使用磷酸盐缓冲的盐水载体。在一具体实施方式
中，含水载体是简单的注射用灭菌水。
CS在溶液中的浓度显然应根据CS的配制用量和所用的溶液体积而变化。CS较易溶于水载体中，因此可以配制宽范围的浓度。在本发明的实施方式中，CS浓度在0.1mg/mL-100mg/mL，优选1.0mg/mL-50mg/mL的范围内。在本发明的一个具体实施方式
中，该制剂具有约15-25mg/mL，例如20mg/mL的CS浓度。在本发明的一个特定具体实施方式
中，该制剂达到这种浓度，提供在20mL体积的磷酸盐缓冲盐水中含有400mg CS的制剂。
在本发明的一个具体实施方式
中，灭菌硫酸软骨素溶液由400mg硫酸软骨素和20mL含水载体，例如灭菌水、盐水或磷酸盐缓冲盐水组成。
显然，CS的配制应以制药领域中确立的方式进行。单位或单一剂量可以通过简单地在无菌填充条件下将单位剂量(即400mg)的CS计量加入到含20mL载体或稀释剂的瓶中来制成。或者，通过合并商购制剂如Uracyst-S-浓缩物来制成，例如通过混合两个200mg/10mL溶液。
在使用中，CS组合物通过滴注或类似方法给药，这样使该组合物定向到达感染膀胱的腔(粘膜)表面或患有膀胱炎且特别是GAG缺乏性膀胱炎的症状的患者的有关表面，包括化学-和辐射-引起的膀胱炎，出血性膀胱炎，和根据本发明的优选实施方式，间质性膀胱炎。除IC患者以外，这种治疗可用于“有关的膀胱病症”，即，用于存在膀胱衬层或者尿道和输尿管衬层侵蚀的患者，这种侵蚀在尿中存在化学刺激物时严重到足以引起疼痛或不适。此类有关的病症包括慢性尿道感染导致的尿道GAG-缺乏。对于各种治疗，所述的组合物是在排出残余尿液后进行滴注，例如在20mL缓冲液体积中以20mg/mL剂量的CS进行滴注。此后患者在不少于30分钟的所需时间内保留该溶液。在典型治疗方案中，每周1次或两周1次的治疗进行约6周，并且随后每月1次的治疗进行直至症状减轻。一些患者可能在最大每周6次的滴注后受益，此后滴注每月1次或两月1次，这取决于其症状的反应。维持性给药可以采用减少到例如200mg的CS剂量来完成，如果患者症状这样指示的话。
如实施例所示，以上述方式治疗的患者反应良好，疼痛、尿急和/或尿频的症状均已降低。采用″高剂量″硫酸软骨素的成功是令人惊奇和显著的结果，一方面，硫酸软骨素是可商购和较低廉的药物，另一方面，为IC尝试的药物很少发现能够在患者中获得快速效益。用高剂量硫酸软骨素治疗的患者对该治疗反应非常迅速。此外，本发明提供的实施例中的成功已经在患有严重膀胱炎症状的患者取得，这些患者是采用其他现有疗法难以治愈的。
应理解，本发明的高剂量CS疗法可以用作单一疗法或者与其他可利用膀胱炎治疗联合应用。已知的膀胱炎疗法包括通过滴注例如DMSO，肝素，戊聚糖多磷酸酯和透明质酸来施用。如下所述，此类药物应该以其中该药物适于研究治疗效果的测定量足够浸浴膀胱衬层的体积给药。
在应用本发明治疗方法时，本发明进一步提供一种药盒，该药盒组合含有(1)含有单位剂量为至少250mg的硫酸软骨素和含水载体的第一灭菌溶液；和(2)印刷的说明书，其中教导按照本发明的治疗方法使用。
该药盒采用盒子或其他包装的形式，其中该灭菌溶液提供为具备上述浓度和单位剂量的备用溶液。印刷的说明书可向最终的使用者转达本发明的方法。该方法举例如下。
实施例下面描述临床环境中间质性膀胱炎患者的治疗。
在用于治疗时，购买呈钠盐的硫酸软骨素，其无热原且是高纯级别。CS得自牛软骨以控制其纯度和硫酸软骨素的异构体A/C(60∶40)组成和羧基/O-硫酸的比例(约0.95)，同时其他说明如下所述外观白色至浅米色高吸湿性固体粉末纯度(无水基础)＞98.0％在1％水中的pH5.5-7.5比旋度(4％水)-20至-30度氮(无水基础)2.5-3.5％硫(无水基础)5.0-7.0％硫酸灰(无水基础)21-29％重金属＜20ppm氯＜0.1％蛋白质(无水基础)＜1.0％热原无热原平均分子量10,000-40,000道尔顿通过于下列组分混合，将这种CS配制为20.0mg/mL溶液

为了混合，取20mL的注射用水，USP，并且加入所需量(配方中上述量20倍量/mL以制备2％溶液)的氯化钠和混合直至完全溶解(最少15分钟)。加入所需量的磷酸二氢钠和磷酸氢二钠并混合直至完全溶解(最少15分钟)。此后，加入所需量的硫酸软骨素钠，并混合直至完全溶解(水合在于最少4小时)。如果必要用在WFI，USP中的1N氢氧化钠或在WFI，USP中的1N磷酸将pH调整至7.2±0.1。此后，加入足够量注射用灭菌水，USP至终体积且彻底混合。应理解该方法还适合制备不同单位剂量的CS，只需通过改变缓冲液的体积和/和通过改变CS和其他所述组分的量即可。所以，利用这种方法，提供10-40mL的CS制剂，例如，20mL，该制剂含有250、300、350、400、600、800、1,000和1,200mg CS。
该制剂可以进一步含有防腐剂。在一具体实施方式
中，防腐剂是苄醇或对羟基苯甲酸酯类，例如，对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯及其混合物。例如，防腐剂可以是1.5％w/v的苄醇。在一优选实施方式中，该制剂采取单位剂量，并且因此防腐剂不是必需的。所以，在一具体实施方式
中，该制剂基本上无防腐剂和其他添加剂，并且由含水载体如20mL和硫酸软骨素如400mg组成。
混合的溶液(2％或者其他)随后在无菌条件下以10-40mL，例如20mL等份试样填充到50mL模制的I型火石瓶内，该瓶预先在250℃下灭菌180分钟，并且用20mm型的100％合成橡胶塞封闭。该瓶随后被标记为灭菌硫酸软骨素钠溶液。下文中，400mg/20mL制剂，2.0％称作“Uracyst-S-400”制剂。
另外，患者每次滴注接受两个剂量的Uracyst-S-浓缩物(200mg/10mL，购自伦敦，Ontario，加拿大的Stellar InternationalInc.)，以施用存在于20mL缓冲液中的400mg CS。
在初步研究中利用6名被诊断患有间质性膀胱炎的患者来评估如此配制的CS(400mg/20mL[2.0％w/v]，Uracyst-S-400)。所有患者钾试验呈阳性，膀胱镜检查呈阴性和+8日间频数和/或膀胱疼痛的症状。所有患者每周完成1次Oleary Sant调查。三名每周接受治疗2次的患者也每周完成1次Oleary Sant调查。采用Stellar InternationalInc.，London，Ontario出售的产品“溶液K”，即按照供应商的说明方式滴注3.0％KCl溶液来进行钾试验。
#1患者是由另一寻找有关胆囊切除术的第二次意见的泌尿科医生推荐的。她抱怨不间断和严重的膀胱疼痛。已经发现她已无法用任何治疗获得成功。她接受膀胱内注射Uracyst-S-400的6周每周1次的治疗。她的症状/问题评分没有改进，并且她被指定回到泌尿科医生接受胆囊切除术。
#2患者患有长期间质性膀胱炎(IC)并用在先治疗取得一些成功。她加入本初步研究是因为其IC的长时间的和疼痛性突然发作。她在周一和周4接受Uracyst-S-400的膀胱内滴注共连续6周。其症状和问题评分每周在改进。在第6周疼痛消失。
#3患者也患有长期的IC。她抱怨频繁、疼痛性的突然发作，这包括严重的尿频和夜尿症。该患者还被诊断为应激性肠道综合征(IBS)。她用Uracyst-S-400每周治疗2次(周一和周四)共7周。虽然错过两个给药间隔，但该患者的问题和症状评分分别在治疗的末期降低5点。该患者继续Uracyst-S-200mg疗法2周并且随后以此剂量每月滴注1次。其症状持续得到改善。
#4患者由于存在IC的突然发作而加入。她已经口服治疗达10年并经历频繁的突然发作。她每周用Uracyst-S-400治疗2次共6周。其问题和疼痛评分分别降低/改进10点。该患者连续采用每月1次滴注Uracyst-S-200。
#5患者由于患有膀胱疼痛和尿频而加入，并且还患有纤维肌痛和骨关节炎，处于这些病症的药疗中。她采用每周滴注1次Uracyst-S400治疗连续6周。症状评分改进5点且问题评分改进1点。该治疗改善了她的膀胱疼痛，但没有改进其尿频，因此该问题评分未反应出改进作用。
#6患者患有长期的IC，纤维肌痛，情绪应激，骨盆疼痛，这些可有可无地由其IC上调。她处于许多药疗法中，包括用吗啡治疗疼痛。她首先自每周滴注1次开始且随后在第一周之后转换为每周2次。她每周接受2次的Uracyst-S400共6周，治疗全程为7周。尽管症状和问题评分略为模棱两可，这在很大程度上归因于由其他病症导致的应激，但可注意到某些改进。治疗持续每2周1次使用Uracyst-S200，并且随后减少为每月给药1次。
所以，6名已知患有间质性膀胱炎的患者每周1次或每周2次膀胱内滴注Uracyst-S400(400mg在20mL磷酸盐缓冲盐水中)共6周。患者中的四人用其他形式的治疗难以治愈，1名患者在使用Elmiront时突然发作，并且1人是新接受治疗。4名顽固性患者中的三人每周用URACYST-S400mg滴注2次。
没发现与所述溶液的滴注有关的副作用。1名患者抱怨在第一次滴注后感觉变糟，但在关闭自润滑导管后不愿意停止治疗；此后没有抱怨感觉到变糟。1名患者声称在首先2次滴注时滴注后1小时出现10分钟的全身潮红，但在随后的滴注中没有出现。使用400mgUracyst-S时在更短时间达到改善，由此证实IC患者的问题和症状得到更迅速的缓解。3名顽固性患者出现从轻度到明显的改善。2名非顽固性患者被证实在滴注6周时有所改善。
上述患者群中排泄和疼痛的改善在图1中图示，根据用为间质性膀胱炎建立的Oleary Sant评分体系记录的评分。应注意，作为一种趋势，该患者群总体上报告在治疗的过程中症状得到显著改善(″400症状，400问题″)。为了比较，图1还图示了患者群中症状评分的改进，它是用配制为80mg/40mL(″80症状，80问题″)的硫酸软骨素治疗的不同间质性膀胱炎患者群。如图所示，400mg给药疗法在其中症状和问题比那些用80mg剂量治疗的患者更加严重的患者中产生显著的改进作用。例如，与80mg患者群中12或更低的评分相比，400mg患者群在两类评估中评分均高于12。此外，使用400mg剂量改善症状的速度远远快于接受80mg剂量的患者。
所以应理解，高剂量硫酸软骨素提供一种用于治疗患有膀胱炎的患者的疗法，并且特别适用于治疗患有严重或长期间质性膀胱炎和有关形式的GAG-缺乏性膀胱炎的患者。
权利要求
1.一种适合滴注到患者膀胱的药物组合物，该组合物含有含量为250mg-1200mg的硫酸软骨素和体积为10mL-100mL的含水载体。
2.权利要求2的药物组合物，其中该含水载体以10mL-40mL的体积存在。
3.权利要求3的药物组合物，其中该硫酸软骨素以350mg-600mg的量存在。
4.权利要求1的药物组合物，其中所述组合物在20mL含水载体中含有400mg硫酸软骨素。
5.一种灭菌硫酸软骨素溶液形式的药物组合物，所述组合物由400mg硫酸软骨素和20mL含水载体组成。
6.权利要求1-5任一项的药物组合物，其中该含水载体为磷酸盐缓冲的盐水。
7.硫酸软骨素在制备权利要求1-6任一项的药物组合物中的应用，所述药物组合物是用于治疗患有选自膀胱炎和有关病症的膀胱或尿道病症的患者，其中在患病患者中一种或多种膀胱炎症状是由氯化钾溶液的滴注引起的。
8.硫酸软骨素在制备权利要求1-6任一项的药物组合物中的应用，所述药物组合物是用于治疗膀胱炎。
9.权利要求8的硫酸软骨素的应用，所述药物组合物是用于治疗间质性膀胱炎。
全文摘要
通过滴注高剂量例如400mg/20mL硫酸软骨素治疗膀胱和尿道的间质性膀胱炎和有关GAG－缺乏性病症。较高剂量的软骨素有效快速减轻症状，特别是患有严重和顽固性膀胱炎的患者的症状。
文档编号A61K9/08GK1758920SQ200480006467
公开日2006年4月12日 申请日期2004年2月18日 优先权日2003年2月19日
发明者P·R·里尔, S·S·哈恩 申请人:斯特拉国际有限公司