专利名称：治疗性脂质体的制作方法
技术领域：
本发明涉及脂质体，该脂质体能够矫正动物中的一种或多种实体的失调。
背景技术：
许多疾病和病况是由动物中的一种或多种实体的失调引起的，或导致动物中的一种或多种实体的失调。例如，高钙血症是常见的临床代谢问题。其可作为很多障碍的表现而出现，所述障碍包括甲状旁腺功能亢进症、佩吉特病、维生素A和维生素D毒性、结核病、结节病，恶性肿瘤例如乳腺癌、小细胞肺癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤和其它疾病。
高钙血症在10％-20％的患癌症的人中出现，使其成为医生面对的最常见医学处理问题之一。此外，高钙血症是最常见的危及生命的代谢障碍，其与恶性肿瘤相关。治疗与恶性肿瘤有关的急性高钙血症的最有效疗法是除去或治疗潜在的癌症。在其完成以前，或如果其没有被完成，抗高钙血症药的使用可能是必需的。治疗急性高钙血症的疗法应该谨慎地选择，对特定患者的目的是通过减少血清钙浓度防止急性高钙血症的后果并防止抗高钙血症药物治疗的不良经历。二膦酸盐、降钙素、呋塞米、硝酸镓、糖皮质激素类，生理盐水和普卡霉素已经用于治疗恶性肿瘤的处理并取得一些成功，并在急性高钙血症的治疗方面提供给临床医生一定范围的治疗选择。然而，这些选择都受限制。
治疗高钙血症的一种方法包括与静脉内生理盐水(0.9％NaCl)水合作用，作为治疗急性高钙血症的第一步。因为大多数患有急性高钙血症的患者是体积缩小的，所以给药0.9％的NaCl是很重要的，因为其除了增加肾脏的钙清除率之外，还扩展了细胞内体积。0.9％NaCl的最佳给药速率由高钙血症的严重性、体积缩小的程度、患者耐受流体的能力以及患者的全部临床状态来决定。促进水合作用和利尿的0.9％NaCl的通常输注速率是200-300mL/hr。
呋塞米，一种高上限(high-ceiling)的利尿剂，可以用于治疗高钙血症，增加钙排泄。呋塞米在治疗急性高钙血症方面是重要的，因为它抑制肾的钙重吸收而且保护不发生生理给予盐水引起的体积过载。然而，呋塞米疗法也有局限。在缺乏足够的体积扩张时，呋塞米治疗可以引起肾小球过滤率和钙清除率的减小。因此，应仅在适当的水合作用后才施用这种治疗。可以给予每1-4小时至多100mg的静脉内剂量。
NaCl 0.9％和呋塞米的方案使血清钙浓度适度地降低。临床试验建议，生理盐水和呋塞米的联用在最初48小时内通常降低钙浓度仅0.20-0.30mmol。因此，通过仅给药NaCl 0.9％和呋塞米实现的水合和利尿的有效性，对于轻度至中度高钙血症的处理来说可能是足够的，对重度高钙血症来说通常是不足够的。在重度高钙血症的患者中，其他抗高钙血症药的使用可能是有保证的。
鲑降钙素主要抑制破骨细胞的骨吸收，并增加钙的肾排泄。快速起作用和镇痛的性质有助于降钙素在治疗急性高钙血症方面的成功。通常，血清钙浓度在几个小时内降低了1-3mg/dL。在降钙素给药后24小时内通常达到最大的功效。
很多临床试验已证明与降钙素有关的快速减敏。临床研究也证明，降钙素有短暂的作用持续时间，仅持续24小时。尽管有快速减敏和短暂的作用持续时间的报道，降钙素是早期治疗重度高钙血症的重要药物。推荐的治疗急性高钙血症的降钙素的皮下或肌肉内起始剂量是每12小时给药4lU/kg。降钙素的重要副作用是面红、胃肠紊乱和皮疹，其使降钙素不受动物欢迎且导致差的患者顺从性。
二膦酸盐对破骨细胞有毒性，抑制破骨细胞前体，因此减少了破骨细胞功能。目前，口服和静脉内剂型的依替膦酸盐可从商业上购得，静脉内剂型的帕米膦酸盐可得到。
在急性高钙血症的情况下，静脉内(IV)给予依替膦酸盐。推荐的剂量是每日IV 7.5mg/kg，持续3-7天；每次剂量应该在2-4小时内输注。通常，血清钙浓度在两天内开始下降。在开始治疗后7天内出现最大功效。临床试验已证明大约40％-90％的患者在其接受依替膦酸盐后，恢复正常血清钙浓度。与依替膦酸盐有关的不良反应包括血清磷浓度升高和肾机能不全。其他不良反应包括暂时发热、皮疹、恶心和肾中毒性。在血清肌酐水平低于2.5mg/dL的患者中，肾中毒性的可能减少。
帕米膦酸盐治疗急性高钙血症的推荐剂量是静脉内给药60-90mg，2-24小时内输注。虽然单次帕米膦酸盐剂量在急性高钙血症的治疗中可能有效，但在给予最后的剂量后7天，可以给予后续的剂量。血清钙浓度可在三天内降低，直到给药后7天也没有记录下最大效应。临床试验证明帕米膦酸盐通常在约60％-100％的患者中使血清钙浓度达到正常。与帕米膦酸盐有关的一些不良事件包括暂时发热、恶心、皮疹、肾中毒性、低血钙症和血栓性静脉炎。
与依替膦酸盐相似，在肾功能不全的患者或具有大于2.5mg/dL的升高的血清肌酐水平的患者中，不推荐使用帕米膦酸盐。
Zolendranate作用更强，需要更少的IV输注时间。对于转移性的骨病的典型治疗时间是每3-4周一次15分钟的IV输注。然而，因为zolendranate在肾功能不全中是禁忌的，所以其不是合适的替代药。尽管据声称，二膦酸盐减少转移性疾病中的骨疼痛，但是在急性疗法中对于这种作用没有证据。
已经将糖皮质激素类与其他抗高钙血症药如降钙素联合用于降低血清钙浓度。当每日给予相当于氢化可的松200-300mg IV的剂量持续3-5天时，糖皮质激素类通过增加尿钙排出和减少肠内钙吸收来对抗高钙血症。通常，由淋巴瘤、多发性骨髓瘤和肉芽肿瘤引起的高钙血症对糖皮质激素治疗最有利地应答。常见的可能与糖皮质激素有关的不良反应包括高血糖症和电解质紊乱如低钾血。不常见的影响包括胃肠道出血、糖尿病和精神状态的改变。
硝酸镓通过抑制PTH-rp诱导的从骨中的钙吸收，抑制骨吸收。硝酸镓的推荐剂量是每日100-200mg/m2，连续5天或直到获得期望钙浓度。硝酸镓应该以24小时连续输注的方式被输注。血清钙浓度在48小时内降低。在首次硝酸镓剂量后的10天内达到最大效应。已证明在使用硝酸镓的8％-15％的患者中有肾中毒性。为了降低肾并发症的危险，推荐所有的患者在接受该药前充分地水合。此外，硝酸镓应当避免用于肾功能不全的患者或血清肌酐量度大于2.5mg/dL的患者。此外，在使用该药的患者中应当避免同时使用肾脏中害的药。与硝酸镓有关的其他不良反应包括低磷酸盐血症、胃肠不适、视觉和听力损伤和心动过速。
普卡霉素通过抑制破骨细胞中的RNA合成而减少血清钙浓度。普卡霉素静脉内给药，可以一次性推注或缓慢输注。通过缓慢输注给予普卡霉素时，可以减少局部刺激和其他不良反应的出现。推荐的剂量是4-6小时内25mcg/kg。普卡霉素开始后的12小时内血清钙浓度降低。最大效应通常在96小时内出现。临床试验已证明给药后48小时内，血清钙浓度中值降低了1.4mg/dL。当必需时，在等待至少24小时后，可以给予普卡霉素的后续剂量。普卡霉素主要的副作用包括肝毒性、肾中毒性、血小板减少、骨髓抑制、恶心、呕吐、低血钙症和凝固因子水平降低。
普卡霉素应当避免用于严重的肝或肾功能不全、血小板减少或任何的cagulopathy的患者，同时接受骨髓毒性的化学疗法的患者和脱水的患者。普卡霉素通常留给对其他治疗没有反应的患者。
如上讨论的，当前治疗高钙血症的方法产生了很多不希望的副作用，所述副作用使治疗变得困难，不受患者欢迎。此外，所述方法中的很多还需要相当长的时间周期(24-28小时或更长)来产生有益的效果。另外，所述方法必需选择性地选择用于治疗，因为很多方法与其它药物、疾病或动物的状况不兼容。因此，目前需要可以用于从活系统中除去钙的方法。
糖尿病是一种以绝对或相对胰岛素缺乏为特征的病况，在更严重的情况中，它导致慢性高血糖症。糖尿病的长期并发症包括神经病、视网膜病变、肾病的发生，以及增加对传染的易感性(Stedman′sMedical Dictionary，26 ed.，Williamw & Wilkins，Baltimore，Md.，1995)。目前需要另外的治疗高血糖症，包括由糖尿病产生的高血糖症的方法。对于对含胰岛素的方案不应答的高血糖症来说，这是一种特殊情况。
过量的金属离子也与多种疾病和病况有关。例如，过量的锰、铁、汞、铝和铜都与帕金森氏病有关。帕金森病涉及脑中特殊的神经中枢的衰退。据认为，这些过量的矿物质增加了自由基病状并加速了细胞死亡。这些衰退改变了神经信号传递必需的两个神经递质的化学平衡。最后的结果是失去身体运动的控制。
另一种与血液中金属的高水平有关的疾病是阿尔茨海默氏病。阿尔茨海默氏病是一种进行性的病况，其破坏脑细胞和结构。研究人员认为该疾病与血液和/或脑中过量的锌、铜、铝和/或铁有关。患有阿尔茨海默氏病的人缓慢地丧失他们的学习、记忆和活动的能力。
另一种与体内过量的金属离子有关的疾病是威尔逊氏病。威尔逊氏病是由肝、脑和肾内过量铜的累积引起的。该疾病特征在于肝的发炎和硬化，及脑损伤。如果不治疗，威尔逊氏病是致命的。脑内铜的蓄积也与包括克-雅病(CJD)在内的多种形式的传染性海绵状脑病(TSE)有关。
此外，对重金属的暴露与发育迟缓、多种癌症、肾损伤有联系。例如，对汞、金和铅的暴露与自身免疫的发生有关，自身免疫是一种免疫系统攻击其自身细胞，把它们认为是外来入侵者的状况。对重金属如汞、铅、镉和铝的暴露也认为与增加的对中枢神经系统的自由基损伤和多发性硬化有关。
当前需要适用于从动物系统和生物样品中除去不需要的或有害的实体的方法。
发明概述本发明提供了脂质体，其能够矫正动物中的一种或多种实体的失调。相应地，本发明提供一种从动物中将实体结合到脂质体中的方法，该方法包括对需要这样治疗的动物给予能够结合所述实体的脂质体。
本发明还提供了一种从生物样品中将实体结合到脂质体中的方法，该方法包括使生物样品与能够结合所述实体的一种或多种脂质体接触。
本发明还提供一种从动物血清中除去所述实体的方法，该方法包括将血清与能够从血清中除去所述实体的一种或多种脂质体接触。
本发明还提供一种用于从需要这样治疗的动物的脑脊髓液中除去所述实体的方法，该方法包括对所述动物给予(例如，鞘间)能够结合所述实体的脂质体。
本发明还提供一种治疗动物中阿尔茨海默氏病的方法，该方法包括对所述动物给予适量的脂质体，所述量有效降低所述动物中Zn、Al、Fe或Cu，或它们的离子的浓度。
本发明还提供一种治疗动物中帕金森氏病的方法，该方法包括对所述动物给予适量的脂质体，所述量有效降低所述动物中Mn、Fe、Hg、Al或Cu，或它们的离子的浓度。
本发明还提供一种治疗动物中糖尿病(例如，高血糖症)的方法，该方法包括对所述动物给予适量的脂质体，所述量有效降所述低动物中葡萄糖的水平。
本发明还提供一种减少需要这样治疗的动物中血清钙负荷的方法，该方法包括给予有效的钙减少量的一种或多种脂质体。
本发明还提供一种从活系统中除去钙的方法和治疗与高钙离子浓度有关的疾病的方法。相应地，本发明提供一种从动物血清中除去钙的方法，该方法包括将血清与从血清中除去钙的脂质体接触(体外或体内)。
本发明还提供能够螯合钙离子的脂质体以及治疗由高钙离子浓度引起的疾病的方法，该方法包括对需要这样治疗的动物给予治疗有效量的含钙离子接受体或螯合剂的脂质体。
本发明还提供如在本申请中所述的用于医学治疗中的脂质体。
本发明还提供如在本申请中描述的脂质体制备对治疗动物中阿尔茨海默氏病有益的药剂的用途。
本发明还提供如在本申请中描述的脂质体制备适用于治疗动物中帕金森氏病的药剂的用途。
本发明还提供如在本申请中描述的脂质体制备适用于治疗动物中糖尿病(例如，高血糖症)的药剂的用途。
本发明还提供如在本申请中描述的脂质体制备适用于降低动物中血钙负荷的药剂的用途。
本发明还提供药物组合物，它包含如在本申请中描述的脂质体和药物可接受的赋形剂或载体。
本发明还提供如在本申请中描述的新脂质体以及如在本申请中描述的制备本发明的脂质体的合成方法。
附图简述附
图1说明了不同制剂的钙负荷的类脂转变温度依赖性。
附图2说明了采用不同方法制备的三种制剂的钙负荷。
附图3说明了pH和NaCl对钙负荷效率的影响。
附图4说明了HSPC胆固醇制剂的钙负荷。
附图5说明了HSPC胆固醇制剂的负荷效率。
附图6说明了DOPC胆固醇制剂的钙负荷。
附图7说明了DOPC胆固醇制剂的负荷效率。
附图8说明了DEPC胆固醇制剂的钙负荷。
附图9说明了DEPC胆固醇制剂的负荷效率。
附图10说明了DPPC胆固醇制剂的钙负荷。
附图11说明了DPPC胆固醇制剂的负荷效率。
本发明详述定义如在本申请中所用的，术语“动物”是指哺乳类动物、鸟类、爬行类和鱼类。
如在本申请中所用的术语“生物样品”包括取自动物的组织、血清、血液、血浆、脑脊髓液、唾液、尿等样品如在本申请中所用的术语“钙”包括钙和钙离子。
如在本申请中所用的术语“通道/转运蛋白”包括任何分子或分子组，其允许实体(例如，钙)进入脂质体(例如，其可以有效地运送实体进入脂质体的内部)。
如在本申请中所用的术语“不溶”或“微溶”是指具有允许有效地从血清中除去实体(例如，钙)的范围中的溶解度常数(Ksp)的无机盐(例如，钙盐)。
如在本申请中所用，术语“主要结合”是指螯合剂，其与实体(例如，钙)共价或离子键合，优选相对于环境内的一种或多种其他的离子。
如在本申请中所用，术语“螯合剂”或“接受体”是指能够结合实体，从而从直接环境中除去该实体的化合物复合物、分子或原子。
实体本发明提供从动物或生物样品中除去不需要的实体的方法。脂质体可以配制成结合广泛多样的实体。相应地，本发明的方法通常适用于从动物或生物样品中除去广泛多样的物质。例如，本发明的方法可用于除去金属或金属离子例如碱金属、碱土金属、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn或Pb，或其离子。特别地，本发明的方法适用于从动物中除去Zn、Al、Fe或Cu，或它们的离子。在优选的实施例中，所述方法适用于从动物中除去钙。
所述方法还适用于从动物中除去不需要的分子(例如，肽、有机分子、治疗剂、氧化亚氮或葡萄糖)。相应地，所述方法适用于治疗(即，除去与病理状态有关的肽或化合物)。所述方法还适用于治疗与治疗药过度接触(即，过剂量)或与毒性物质的过度接触(即，中毒)。如在本申请中所用，术语有机化合物包括包含一个或多个碳原子任何化合物。通常，有机化合物具有小于约450原子质量单位(amu)的分子量。在一个优选的实施方式中，有机化合物具有小于300amu的分子量。
与脂质体的接触本发明的方法可以在体内或体外实现。例如，通过对动物给予脂质体，可以通常实现所述方法。在一些情况出，将生物样品(例如，血清、脑脊髓液或组织)从动物体中取出，再在动物体外使样品和脂质体接触可能更方便。紧接着除去不需要的实体后，该样品可以被返回进动物体内。本发明的方法适用于治疗应用和诊断应用。
结合到脂质体中当用于结合金属或金属离子时，本发明方法中使用的脂质体通常包括离子通或穿梭(shuttle)，以促进金属或离子的实体进入脂质体。例如，从CalBiochem(La Jolla，CA)或Fermentek Ltd(Jerusalem，Israel)购得的A23187可以用于转运Ca+2或其他二价阳离子。然而，并不总是需要这样的通道或穿梭。例如，两亲的实体可以负荷以响应化学势梯度(例如，对抗pH梯度)。此外，当用于结合疏水性实体时，促进疏水性实体进入的通道可能是必需的或可能是非必需的。一些疏水性实体可以透过脂质体，但是进入后实体在脂质体内被捕获或改性，以致其不能立刻穿出脂质体。
一旦结合到脂质体中，实体可以只是停留在脂质体内部的亲水环境中和疏水双分子层中，或者脂质体可以包括螯合剂，其与实体结合在一起(例如，通过氢键合或离子相互作用)并降低其穿出脂质体的能力。例如，脂质体可以包括螯合剂如多胺，多齿羧酸(例如，EDTA)、冠醚、内酰胺、无机化合物或其他产生化学梯度把实体吸引进脂质体的物质。脂质体还可以包括能够与实体反应，使得减少实体穿出脂质体的能力的试剂或酶。例如，葡萄糖可以在脂质体内利用己糖激酶转变为葡萄糖-6-磷酸。如果在脂质体内的反应需要能量源(例如，ATP)、辅因子、特定的pH值或特定的离子平衡才能进行，该脂质体可以制备使得包括这些特征。就体外应用而言，这样的特征也可以从外源供给。
脂质体作用机制根据本发明的方法，脂质体可以多种方式减少动物中实体的适用浓度。例如，1)脂质体可以可逆的方式结合实体，然后随时间释放实体，使得在动物中适用的实体的最大量或浓度随时间降低；2)脂质体可以结合实体，然后从动物体除去，借此从动物血清中除去实体；3)脂质体可以结合实体，在脂质体内可以掩蔽或改性实体，使其不能穿出脂质体；或4)结合实体后，脂质体可以再指向体内的其它定位(例如，被载入巨噬细胞中)，其中可以释放实体或含实体的脂质体可以从体内被清除。上述1-4中一项或多项的组合也可以发生。
治疗高钙血症的方法本发明包括治疗患有高钙血症的动物的方法。所述方法包括给予需要这样治疗的动物以治疗有效量的至少一种钙螯合性脂质体，从而降低动物中的钙离子浓度。通过对动物给予有效钙减少量的至少一种含钙螯合剂的脂质体，所述方法通常降低血清钙浓度。
在一个实施方式中，所述方法包括对处于血钙过高状态的动物以有效降低动物中血清胆固醇水平的量给予至少一种钙螯合性脂质体。此后，可以大约每4-6小时监测动物的钙离子血清浓度，持续几天。一旦达到期望的钙离子血清浓度即正常血钙，就可以停止治疗。任选地，与钙离子浓度同时或连续地，可以监测镁离子、PTH和磷酸盐的水平。
联合治疗脂质体的用途还可以与其他疗法联合用于治疗特定的病况(例如，高血糖症、阿尔茨海默氏病、威尔逊氏病、重金属中毒或高钙血症)。例如，当本发明的方法用于治疗高钙血症时，脂质体的给药可以和适用于减少动物中钙负荷的一种或多种治疗药的给药联用。另外的治疗药可以在本发明的脂质体给药前、给药期间或给药后给药。
在本发明的一个实施方式中，该脂质体可在其内部包含一个或多个另外的治疗药用于治疗特定的病况(例如，高血糖症、阿尔茨海默氏病、威尔逊氏病、重金属中毒或高钙血症)。在治疗高钙血症中预期使用的治疗药包括，但不限于呋塞米、降钙素、二膦酸盐、依替膦酸盐、帕米膦酸盐、zolendranate、糖皮质激素类、硝酸镓、普卡霉素、光辉霉素(mithromycin)。
形成脂质体的类脂脂质体包含一些形成脂质体的类脂(例如，磷脂酰胆碱或鞘磷脂)。通常，所述类脂包括至少一种磷脂酰胆碱，其提供脂质体的主要包封/包埋/结构要素。通常，磷脂酰胆碱主要包含C16或更长的脂肪酸链。链长度既供给脂质体结构、完整性又供给其稳定性。任选地，脂肪酸链之一具有至少一个双键。
如在本申请中所用的，术语“磷脂酰胆碱”包括大豆磷脂酰胆碱、卵磷脂酰胆碱、二反油酰磷脂酰胆碱(DEPC)、二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、1-棕榈酰基-2-油酰磷脂酰胆碱(POPC)、二(山萮酰)磷脂酰胆碱(DBPC)和二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)。
如在此所用的术语“大豆磷脂酰胆碱”是指包含多种的单-、双-、三-不饱和和饱和的脂肪酸的磷脂酰胆碱组合物。通常，大豆磷脂酰胆碱包括以约12％-约33％重量的量存在的棕榈酸；以约3％-约8％重量的量存在的硬脂酸；以约4％-约22％重量的量存在的油酸；以约60％-约66％重量的量存在的亚油酸；以约5％-约8％重量的量存在的亚麻酸。
如在本申请中所用的术语“卵磷脂酰胆碱”是指一种磷脂酰胆碱组合物，其包括，但不限于多种不饱和与饱和的脂肪酸。通常，卵磷脂酰胆碱包含以约34％重量的量存在的棕榈酸；以约10％重量的量存在的硬脂酸；以约31％重量的量存在的油酸；以约18％重量的量存在的亚油酸。
胆固醇胆固醇通常提供给脂质体稳定性。磷脂酰胆碱与胆固醇的比以摩尔比计通常是约5∶1至约4∶1。优选地，磷脂酰胆碱与胆固醇的比以摩尔比计是约1∶1至约2∶1。更优选地，磷脂酰胆碱与胆固醇的比以摩尔比计是约2∶1。
钙螯合剂适合与本发明的脂质体使用的钙螯合剂包括，但不限于，能够成功地结合钙离子足以从直接环境中除去钙离子的化合物、复合物、离子、分子、试剂或其组合。钙除去包括，但不限于在脂质体内形成钙复合物或不溶或微溶的无机化合物，然后从血清中除去该脂质体。在本发明的一个实施方式中，钙螯合剂优选与钙离子结合，然而钙螯合剂可能结合其他离子。例如，钙螯合剂可主要地结合钙离子和/或除去其他离子如其他离子中的镁离子。
通常的钙螯合剂包括多胺、聚碳酸酯、多齿羧酸、冠醚、内酰胺、无机化合物、聚阴离子、蛋白质碎片和肽。特别地，钙螯合剂包括，但不限于乙二胺四乙酸(EDTA)、亚乙基双(氧乙烯基次氮基)四乙酸(EGTA)和降钙素。
脂质体中钙螯合剂的量可以根据期望的钙螯合剂的类型、减少高血钙的时间，以及动物的状况而变化。通常，钙螯合剂的量应该在给药脂质体起数分钟和几小时内足够引起钙离子浓度的减少。选择性地，如果不想得到高血钙的快速减少，可以选择钙螯合剂提供钙离子随时间稳定和延长的减少，例如一天或几天。通常，与动物血清接触前，钙螯合剂的浓度是约至少50mM。优选地，与动物血清接触前，钙螯合剂的浓度是约至少100mM，更优选地是约至少200mM。在一个实施方式中，钙螯合剂能够除去动物血清中钙离子浓度的约10％-约30％，其还可以使动物EKG正常化。
脂质体的制备脂质体通常包含磷脂的类脂层和胆固醇。通常，磷脂和胆固醇的比足够形成脂质体，一旦对动物给药后，脂质体将不会溶解或崩解。类脂和胆固醇溶解于适宜的溶剂或含适合量实电解质的溶剂混合物。在适合量的时间之后，用真空干燥或喷雾干燥除去溶剂。所得的固体物质可以储藏或立即使用。
随后，在合适的温度下，所得的固体物质在水溶液中水合得到多室囊泡(MLV)，所述水溶液任选地含螯合剂(例如，钙螯合剂如EDTA)或任选地含另一种治疗药。含MLV的溶液通过均化作用减少尺寸形成小单室囊泡(SUV)。在过程中，钙螯合剂的一部分包封在SUV的水性隔室里。未包封的螯合剂通过适合的方法如透析、脱盐柱和交叉过滤除去。过滤所得的脂质体溶液，备用。
缓冲剂中负荷的钙螯合剂是制剂依赖性的。在有关的因素中是类脂成份的相转变温度(Tm)。附图1说明了不同制剂的钙负荷的类脂转变温度的依赖性。缓冲液中的负荷可能直接或可能不直接地与体外(血清、血浆或血液)或体外的负荷有关。血清蛋白质或其它元素可以影响(正面或负面)转运蛋白通道的功能。总的脂质体性能将部分由体内负荷以及脂质体的生物分布、药物动力学和/或药效学得到。
制剂本发明的基于类脂的分散体还可以配制成胃肠外给药。而且，基于类脂的分散体可以配制成通过输注或注射用于皮下、肌内、静脉内、腹膜内给药。这些制剂还可以适合的量包含预防微生物的生长的防腐剂，缓冲剂或抗氧剂。
组合物和制剂通常将含至少0.1％的螯合剂。当然，组合物和制剂的百分比可以是变化的，并且可以便利地介于特定的单位剂型重量的约2％-约60％之间。在这样治疗适用的组合物中有效的螯合剂的量是将得到有效剂量水平的量。
脂质体还可以包含生理学上可接受的盐以维持与动物血清的等渗性。实现与动物等渗性的任何药学上可接受的盐是可接受的，例如NaCl。
治疗中使用所需制剂的量将不但随特定的药剂而变化，而且随给药的途径、要治疗的病况的性质和动物的年龄和状态而变化；所需的量将最终由主治医生或临床医生决定。
期望的制剂的量可方便地以单次剂量或以合适的间隔给予的分剂量存在，例如，以每天2、3、4或更多的亚剂量形式。亚剂量本身可以进一步被分成，例如多个分离的松散间隔的给药。任选地，脂质体和/或制剂可以包含至少一种抗氧剂、缓冲剂、稳定剂或药物可接受的赋形剂。
具体和优选的实施方式具体和优选的值如下所示；它们不排除其它定义的值或其它在定义范围的值。
在本发明的一个具体的实施方式中，接触在体内发生。
在本发明的另一个具体实施方式
中，接触在体外发生。
在本发明的另一个具体实施方式
中，实体是金属或金属离子。在本发明的另一个具体实施方式
中，实体是碱性金属、碱土金属、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn或Pb，或它们的离子。
在本发明的另一个具体实施方式
中，实体是Zn、Al、Fe或Cu，或其离子。
在本发明的另一个具体实施方式
中，实体是钙或钙离子。
在本发明的另一个具体实施方式
中，实体是肽。
在本发明的另一个具体实施方式
中，实体有机分子。
在本发明的另一个具体实施方式
中，实体是治疗药。
在本发明的另一个具体实施方式
中，实体葡萄糖。
在本发明的另一个具体实施方式
中，动物是哺乳动物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，动物是人。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含一种或多种形成脂质体的类脂和胆固醇，其中类脂和胆固醇的摩尔比是约0.5∶1至约4∶1。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含磷脂酰胆碱和胆固醇。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体中磷脂酰胆碱与胆固醇的摩尔比是约0.5∶1至约4∶1。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体中磷脂酰胆碱与胆固醇的摩尔比是约1∶1至约2∶1。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体中磷脂酰胆碱与胆固醇的摩尔比是约2∶1。
在本发明的另一个具体实施方式
中，磷脂酰胆碱选自大豆磷脂酰胆、卵磷脂酰胆碱、DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、DPPC和其混合物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，磷脂酰胆碱选自DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、POPC、DBPC、DPPC和其混合物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，磷脂酰胆碱选自DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、DPPC和其混合物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，磷脂酰胆碱选自DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、DPPC和其混合物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，磷脂酰胆碱选自DOPC、DSPC、HSPC、DPPC和其混合物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，磷脂酰胆碱是DPPC。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含促进实体结合脂质体中的通道和穿梭。
在本发明的另一个具体实施方式
中，通道是离子通道。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体内部的pH值在给药之前或与生物样品或血清接触之前是小于约8。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体是SUV或MLV。
在本发明的另一个具体实施方式
中，实体在脂质体内部和螯合剂结合形成不能穿出脂质体的复合物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，钙在脂质体内部和螯合剂结合形成不能穿出脂质体的钙复合物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含一种或多种钙螯合剂。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含形成脂质体的类脂和允许钙进入脂质体的转运蛋白/通道。
在本发明的另一个具体实施方式
中，螯合剂是多胺、多齿羧酸、冠醚、内酰胺或无机化合物。
在本发明的另一个具体实施方式
中，螯合剂是EDTA。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在给药或接触之前脂质体中的EDTA的浓度是至少约10mM。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在给药或接触之前脂质体中的EDTA的浓度是至少约20mM。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在给药或接触之前脂质体中的EDTA的浓度是至少约25mM。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在给药或接触之前脂质体中的EDTA的浓度是至少约50mM。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在给药或接触之前脂质体中的EDTA的浓度是至少约80mM。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在给药或接触之前脂质体中的EDTA的浓度是至少约100mM。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在给药或接触之前脂质体中的EDTA的浓度是至少约200mM。
在本发明的另一个具体实施方式
中，与锌、硒或铜相比螯合剂至少是两倍选择钙结合。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在脂质体内部实体和试剂反应形成反应的实体。在本发明的另一个具体实施方式
中，反应的实体不能够穿出脂质体。
在本发明的另一个具体实施方式
中，在脂质体内部实体和酶反应。在本发明的另一个具体实施方式
中，实体和酶的反应需要ATP。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含离子通道A23187。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含离子通道，与锌、硒或铜相比该离子通道至少是两倍选择钙进入脂质体。
在另一个具体实施方式
中，本发明的方法利用脂质体，该脂质体能够从动物的循环中除去钙。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含能与钙离子结合的钙螯合剂或接受体。
在本发明的另一个具体实施方式
中，脂质体包含一类脂层，该类脂层含有形成脂质体的类脂、胆固醇和通道/转运蛋白，以及能够和一个或多个钙离子结合的钙螯合剂或接受体。
附图附图1说明了不同脂质体制剂在缓冲液中的钙负荷的类脂转变温度的依赖性。显示了五种不同的2∶1的磷脂-胆固醇制剂的配方。五种磷脂是HSPC(55℃)、DPPC(41℃)、DMPC(23℃)、DEPC(12℃)和DOPC(-20℃)。所有样品在pH4.5用200mM的EDTA配制。在DSPC-胆固醇制剂中，两种另外的制剂用包封或未包封的和在外部缓冲液中的硫酸铵制得。
附图2说明了用四种不同方式制备的三种制剂的钙负荷。所述制剂在pH4.5下有或没有140mM的NaCl或在pH7.5下有或没有140mM的NaCl条件下，用2∶1的HSPC∶胆固醇制得(制剂2A)；用1∶1.25∶1.5的HSPC∶胆固醇∶DOPC制得(制剂2B)；以及用2∶1的DPPC∶胆固醇制得(制剂2C)。平均以四个不同制备方式制得的各个磷脂∶胆固醇制剂以得到呈现的负荷曲线附图3说明了钙负荷效率的体外的pH和NaCl依赖性。制备了四种制剂。2∶1的DPPC∶胆固醇制剂用140mM的NaCl和200 EDTA在pH4.5下制得(制剂3A)和第二个在pH7.5下制得(制剂3B)。然后，2∶1的DPPC∶胆固醇制剂用200 EDTA在pH4.5下制得(制剂3C)和第二个在pH7.5下制得(制剂3D)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。曲线图表明在pH4.5下制备的制剂含有最高的EDTA％饱和度。
附图4说明了四种HSPC∶胆固醇制剂的钙负荷。特别地，2∶1的HSPC∶胆固醇制剂用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH4.5下制得(制剂4A)和第二个在pH7.5下制得(制剂4B)。然后，2∶1的HSPC∶胆固醇制剂用200mM的EDTA在pH4.5下制得(制剂4D)和第二个在pH7.5下制得(制剂4D)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。曲线图表明用140mM的NaCl和200EDTA在pH4.5下制得的制剂含有最高的血清饱和度。
附图5说明了四种HSPC∶胆固醇制剂的负荷效率。2∶1的HSPC∶胆固醇制剂用140mM的NaC和200mM的EDTA在pH4.5下制得(制剂5A)和第二个在pH7.5下制得(制剂5B)。然后，2∶1的DPPC∶胆固醇制剂用200mM的EDTA在pH4.5下制得(制剂5D)和第二个在pH7.5下制得(制剂5C)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。曲线图表明由200mM的EDTA在pH4.5下并未加入NaCl制得的制剂含有最高的钙离子浓度。
附图6说明了七种HSPC∶胆固醇∶DOPC制剂的钙负荷。四种1∶1.25∶1.5的HSPC∶胆固醇∶DOPC制剂用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH4.5下制得(制剂6B)，第二个在pH7.5下制得(制剂6C)，第三个不加NaCl在pH7.5下制得(制剂6A)，第四个不加NaCl在pH4.5下制得(制剂6D)。制得三种HSPC∶胆固醇∶DOPC制剂。第一个是1∶0.14∶0.25的HSPC∶胆固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂6E)，第二个是1∶0.12∶0.05的HSPC∶胆固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂6F)，第三个是1∶0.17∶0.5的HSPC∶胆固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂6G)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。
附图7说明了七种HSPC∶胆固醇∶DOPC制剂的负荷效率。制备了四种1∶1.25∶1.5的HSPC∶胆固醇∶DOPC制剂，一种用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH4.5下制得(制剂7B)，第二个在pH7.5下制得(制剂7C)，第三个不加NaCl在pH7.5下制得(制剂7A)，第四个不加NaCl在pH4.5下制得(制剂7D)。制得三种HSPC∶胆固醇∶DOPC制剂。第一个是1∶0.17∶0.5的HSPC∶胆固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂7E)，第二个是1∶0.14∶0.25的HSPC∶胆固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂7F)，第三个是1∶0.12∶0.05的HSPC∶胆固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂7G)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。
附图8说明了三种HSPC∶胆固醇∶DEPC制剂的钙负荷。制备三种HSPC∶胆固醇∶DEPC的制剂。第一个是1∶0.14∶0.25的HSPC∶胆固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5时制得(制剂8A)，第二个是1∶0.12∶0.05的HSPC∶胆固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂8B)，第三个是1∶0.17∶0.5的HSPC∶胆固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂8C)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。
附图9说明了三种HSPC∶胆固醇∶DEPC制剂的负荷效率。制备三种HSPC∶胆固醇∶DEPC的制剂。第一个是1∶0.17∶0.5的HSPC∶胆固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂9A)，第二个是1∶0.14∶0.25的HSPC∶胆固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂9B)，第三个是1∶0.12∶0.05的HSPC∶胆固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制剂9C)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。
附图10说明了四种DPPC∶胆固醇制剂的钙负荷。特别地，2∶1的DPPC∶胆固醇制剂用140mM的NaCl和200EDTA在pH4.5下制得(制剂10D)，第二个在pH7.5下制得(制剂10C)。然后，2∶1的DPPC∶胆固醇制剂用200EDTA在pH4.5下制得(制剂10B)，第二个在pH7.5下制得(制剂10A)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。曲线图表明用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH7.5时制得的制剂含有最高的钙离子浓度。
附图11说明了四种DPPC∶胆固醇制剂的负荷效率。2∶1的DPPC∶胆固醇制剂用140mM的NaCl和200的EDTA在pH4.5下制得(制剂11D)，第二个在pH7.5下制得(制剂11C)。然后，2∶1的DPPC∶胆固醇制剂用200mM的EDTA在pH4.5下制得(制剂11B)，第二个在pH7.5下制得(制剂11A)。在0分、30分、60分、120分和240分时进行测量。曲线图表明用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH4.5下制得的制剂含有最高的钙离子浓度。
通过参考以下的实施例进一步定义了本发明，所述实施例描述了脂质体的制备和应用该脂质体治疗高钙血症的方法。在未脱离本发明的目的和利益下，可以对材料和方法进行许多修饰，这对本领域技术人员来讲是显而易见的。
通过在缓冲液和生物媒介(例如，血清)中稀释脂质体并培养(例如，在37℃)，在体外研究钙的负荷。在培养结束后，用小直径的截止(＜100kDa)微孔过滤装置微孔过滤样品。用高效液相色谱法测定滤液的总钙浓度。这些滤液浓度表示了媒介中发现的游离钙的量。因此，滤液中钙的减少被认为是脂质体从媒介中摄取钙的结果。
实施例实施例1一般的脂质体制备将磷脂和胆固醇以约2∶1的比例，分别溶解于合适的溶剂中或含适合量的实电解度的溶剂混合物中。随后通过真空干燥或喷雾干燥除去溶剂。得到的固体物质可以储藏或立即使用。
随后，在合适的温度下，将所得的固体物质在含EDTA的水性溶液中水合得到多室囊泡(MLV)。含MLV的溶液通过均化作用减少尺寸形成小单室囊泡(SUV)。在制备过程中，将EDTA的一部分包封在SUV的水性隔室内。用适合的方法如透析、脱盐柱或交叉过滤除去未包封的EDTA。过滤所得的脂质体溶液，备用。
所有的公开物、专利和专利文献在此引入作为参考，如同每件独自地引入作为参考。
权利要求
1.一种从动物中将实体结合到脂质体中的方法，该方法包括对需要这样治疗的动物给予能够结合该实体的脂质体。
2.一种从生物样品中将实体结合到脂质体中的方法，该方法包括将所述生物样品和一种或多种能够结合该实体的脂质体接触。
3.一种从动物血清中除去实体的方法，该方法包括将所述血清和一种或多种能够从血清中除去该实体的脂质体接触。
4.权利要求3所述的方法，它进一步包括从血清中分离所述脂质体。
5.权利要求2-4任一项所述的方法，其中所述接触发生在体内。
6.权利要求2-4任一项所述的方法，其中所述接触发生在体外。
7.权利要求1-6任一项所述的方法，其中所述实体是金属或金属离子。
8.权利要求1-6任一项所述的方法，其中所述实体是碱金属、碱土金属、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn或Pb，或它们的离子。
9.权利要求1-6任一项所述的方法，其中所述实体是Zn、Al、Fe或Cu，或它们的离子。
10.权利要求1-6任一项所述的方法，其中所述实体是钙或钙离子。
11.权利要求1-6任一项所述的方法，其中所述实体是肽。
12.权利要求1-6任一项所述的方法，其中所述实体是有机分子。
13.权利要求1-6任一项所述的方法，其中所述实体是治疗药。
14.权利要求1-6任一项所述的方法，其中所述实体是葡萄糖。
15.一种治疗动物中帕金森氏病的方法，该方法包括对所述动物给予适量的脂质体，所述量有效降低所述动物脑内Mn、Fe、Hg、Al或Cu，或它们的离子的水平。
16.一种治疗动物中阿尔茨海默氏病的方法，该方法包括对所述动物给予适量的脂质体，所述量有效降低所述动物脑内Zn、Al、Fe或Cu，或它们的离子的水平。
17.一种治疗动物中糖尿病的方法，该方法包括对所述动物给予适量的脂质体，所述量有效降低所述动物血清中葡萄糖的水平。
18.一种从需要这样治疗的动物的脑脊髓液中除去实体的方法，该方法包括对所述动物鞘间给予能够结合该实体的脂质体。
19.权利要求18所述的方法，其中实体是金属或金属离子。
20.一种减少需要所述治疗的动物中血清钙载荷的方法，该方法包括对所述动物给予有效钙减少量的一种或多种脂质体。
21.权利要求1和3-20任一项所述的方法，其中所述动物是哺乳动物。
22.权利要求1和3-20任一项所述的方法，其中所述动物是人。
23.权利要求1-22任一项所述的方法，其中所述脂质体包含一种或多种形成脂质体的类脂和胆固醇，其中类脂和胆固醇的摩尔比是约0.5∶1至约4∶1。
24.权利要求1-22任一项所述的方法，其中所述脂质体包含磷脂酰胆碱和胆固醇。
25.权利要求24所述的方法，其中磷脂酰胆碱和胆固醇的摩尔比是约0.5∶1至约4∶1。
26.权利要求24所述的方法，其中磷脂酰胆碱和胆固醇的摩尔比是约1∶1至约2∶1。
27.权利要求24所述的方法，其中磷脂酰胆碱和胆固醇的摩尔比是约2∶1。
28.权利要求24-27任一项所述的方法，其中磷脂酰胆碱选自大豆磷脂酰胆碱、卵磷脂酰胆碱、DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC和DPPC及其混合物。
29.权利要求24-27任一项所述的方法，其中磷脂酰胆碱选自DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、POPC、DBPC和DPPC及其混合物。
30.权利要求24-27任一项所述的方法，其中磷脂酰胆碱选自DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC和DPPC及其混合物。
31.权利要求24-27任一项所述的方法，其中磷脂酰胆碱选自DOPC、DSPC、HSPC、DMPC和DPPC及其混合物。
32.权利要求24-27任一项所述的方法，其中磷脂酰胆碱选自DOPC、DSPC、HSPC和DPPC及其混合物。
33.权利要求24-27任一项所述的方法，其中磷脂酰胆碱是DPPC。
34.权利要求1-33任一项所述的方法，其中所述脂质体包含促进实体结合到脂质体中的通道或穿梭。
35.权利要求34所述的方法，其中所述通道是离子通道。
36.权利要求1-35任一项所述的方法，其中所述脂质体内部的pH在给予之前或接触生物样品之前小于约8。
37.权利要求1-35任一项所述的方法，其中所述脂质体是SUV或MLV。
38.权利要求1-35任一项所述的方法，其中所述实体在脂质体内部和螯合剂结合形成不能穿出脂质体的复合物。
39.权利要求10或20所述的方法，其中钙在脂质体内部和螯合剂结合形成不能穿出脂质体的钙复合物。
40.权利要求10或20所述的方法，其中所述脂质体包含一种或多种钙螯合剂。
41.权利要求10或20所述的方法，其中所述脂质体包含形成脂质体的类脂和允许钙进入脂质体的转运蛋白/通道。
42.权利要求38-40任一项所述的方法，其中所述螯合剂是多胺、多齿羧酸、冠醚、内酰胺或无机化合物。
43.权利要求42所述的方法，其中所述螯合剂是EDTA。
44.权利要求43所述的方法，其中在给予或接触之前脂质体中的EDTA的浓度为至少约10mM。
45.权利要求43所述的方法，其中在给予或接触之前脂质体中的EDTA的浓度为至少约20mM。
46.权利要求43所述的方法，其中在给予或接触之前脂质体中的EDTA的浓度为至少约50mM。
47.权利要求43所述的方法，其中在给予或接触之前脂质体中的EDTA的浓度为至少约100mM。
48.权利要求40所述的方法，其中与锌、硒或铜相比螯合剂至少是两倍选择和钙结合。
49.权利要求1-37任一项所述的方法，其中在脂质体内部实体和试剂反应形成已反应的实体。
50.权利要求49所述的方法，其中已反应的实体不能穿出脂质体。
51.权利要求1-37任一项所述的方法，其中在脂质体内部实体和酶反应。
52.权利要求51所述的方法，其中所述实体和酶之间的反应需要ATP。
53.权利要求41所述的方法，其中所述脂质体包含离子通道A23187。
54.权利要求40或48所述的方法，其中所述脂质体包含离子通道，与锌、硒或铜相比该离子通道至少是两倍选择钙进入脂质体。
55.权利要求1和15-20任一项所述的方法，它进一步包括对动物给予另一种治疗药。
56.权利要求10或20所述的方法，它进一步包括对动物给予适用于减少钙载荷的治疗药。
57.权利要求56所述的方法，其中所述治疗药是帕米膦酸盐、呋塞米、二磷酸化合物、硝酸镓、糖皮质激素类、zolendranate、依替膦酸盐或降钙素。
58.权利要求56或57所述的方法，其中所述脂质体包含治疗药。
59.能够结合实体的脂质体在医学治疗中的用途。
60.能够结合钙或钙离子的脂质体在制备适用于减少动物中血清钙载荷的药物中的用途。
61.能够结合Zn、Al、Fe、Cu或其离子的脂质体在制备适用于治疗动物中阿尔茨海默氏病的药物中的用途。
62.能够结合葡萄糖的脂质体在制备适用于治疗动物中糖尿病的药物中的用途。
63.能够结合Mn、Fe、Hg、Al、Cu或它们的离子的脂质体在制备适用于治疗动物中帕金森氏病的药物中的用途。
64.能够结合实体的脂质体在制备适用于从动物的脑脊髓液中除去实体的药物中的用途。
65.权利要求64所述的用途，其中所述实体是金属或金属离子。
66.如本申请中所述的脂质体。
67.一种药物组合物，其包含药物可接受的赋形剂或载体，以及如在本申请中所述的能够结合实体的脂质体。
68.权利要求59所述的脂质体，其中所述实体是金属、金属离子、肽、有机分子、毒性物质、氧化亚氮或葡萄糖。
69.权利要求59所述的脂质体，其中所述实体是Ca、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn、Pb，或它们的离子。
70.权利要求67所述的组合物，其中所述实体是金属、金属离子、肽、有机分子、毒性物质、氧化亚氮或葡萄糖。
71.权利要求67所述的组合物，其中所述实体是Ca、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn、Pb，或它们的离子。
全文摘要
本发明提供矫正哺乳动物中的一种或多种实体失调的方法，以及与该类方法使用的治疗性脂质体和组合物。
文档编号A61K33/30GK1849112SQ200480025886
公开日2006年10月18日 申请日期2004年9月9日 优先权日2003年9月9日
发明者G·M·詹森, 胡宁, D·派特拉塞克 申请人:吉里德科学公司