8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶及其制备方法，配方按重量比为大豆磷脂:胆固醇:MOP:胆酸钠=20:10:3:10，制备方法为:按处方量将不同药物溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液，用旋转蒸发器减压旋转去除有机溶剂，形成均匀薄膜(A)；取5mlPBS(10mmol/L)加热至55℃，倾入(A)中，并浸入55℃水浴中搅拌30min，即得透明的均匀乳白色液体。发明利用柔性纳米脂质体作为补骨脂素的药物载体，可以使补骨脂素具有更好的穿透性，滞留表皮和真皮的时间更长，进入血液循环的药物更少，从而可以减少药物使用量和使用次数，降低药物不良反应的发生率，增加患者对治疗的依从性。
【专利说明】8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种医药领域，尤其涉及8-甲氧基补骨脂素(MOP)柔性纳米脂质体凝胶及其制备方法。
【背景技术】
[0002]白癜风是一种获得性的皮肤色素异常性疾病，表现为局限性或泛发性色素脱失斑。白癜风的病因和发病机制尚不是十分明确，所以易诊难治，有效率低、复发率高。局部或全身使用补骨脂素治疗白癜风有着数百年的历史，是目前白癜风治疗最常用且疗效肯定的治疗方法。补骨脂素酊剂可导致局部皮肤出现红斑、水疱、大疱，患者瘙痒疼痛明显，且需多次给药。
[0003]8-甲氧基补骨脂素(MOP)为一光敏剂，内服或外用治疗白癜风，疗效确切，为国家基本药物。临床上应用的片剂、胶囊、酊剂、软膏等传统剂型在长期应用时，易产生较为严重的不良反应，如恶心、呕吐、皮炎、白细胞减少、中毒性肝炎等。
【发明内容】
[0004]为解决上述问题，本发明的目的是提供8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶。
[0005]本发明的另一个目的是通过上述8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶的制备方法。
[0006]本发明的目的是这样实现的:一种8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶，其特征是将柔性材料与纳米材料结合，成为一种新型的凝胶。
[0007]所述的8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶，其特征在于将柔性材料与纳米材料结合，制备出一种新的8-甲氧基补骨脂素凝胶制剂。
[0008]所述的8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶，其特征在于:按重量比其配方为:大豆磷脂:胆固醇:Μ0Ρ:胆酸钠=20:10:3:10。
[0009]所述的8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶的制备方法为:按大豆磷脂20g、胆固醇10g、M0P3g、胆酸钠10g，溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液，用旋转蒸发器减压旋转去除有机溶剂，形成均匀薄膜(A);取51111 PBS(IOmmoI/L)加热至55°C，倾入(A)中，并浸入55°C水浴中搅拌30min，即得透明的均匀乳白色液体。
[0010]本发明利用柔性纳米脂质体技术研制了补骨脂素(MOP)柔性纳米脂质体凝胶，可以使补骨脂素具有更好的穿透性，滞留表皮和真皮的时间更长。柔性纳米脂质体又称传递体或变形脂质体，是将表面活性剂(如胆酸钠、去氧胆酸钠等)加入到制备脂质体的类脂材料中制成的具有高度自身形变、可高效地穿过比其自身小数倍的皮肤孔道的类脂质体，具有高效渗透性、高度柔韧性和高亲水性。柔性纳米脂质体的结构类似生物膜，是一种多功能的定向药物载体，能使更多的药物保留在皮肤中，减少药物进入血循环，在表皮和真皮内形成药物贮库，形成一个缓释模型，使药物持久地对病变局部起治疗作用。该技术在抗菌药物]、抗肿瘤药物、非留体类消炎药均得到成功应用，为近年来药剂学研究的重点。本发明利用柔性纳米脂质体作为补骨脂素的药物载体，可以使补骨脂素具有更好的穿透性，滞留表皮和真皮的时间更长，进入血液循环的药物更少，从而可以减少药物使用量和使用次数，降低药物不良反应的发生率，增加患者对治疗的依从性。
[0011]柔性纳米脂质体粒径小，高度自身形变、可高效地穿过比其自身小数倍的皮肤孔道，使一些难以透皮的大分子药物成功地进入皮肤组织，对药物的皮肤渗透有显著的促进作用。同时柔性纳米脂质体能改变原型药物的理化性质，增强药物的药理作用及疗效，减少刺激性，降低药物不良反应，提高生物利用度，是一种新型的经皮给药载体。本本发明通过对MOP柔性纳米脂质体凝胶制备工艺，旨在制备具有良好皮肤靶向性的MOP柔性纳米脂质体凝胶，提高MOP局部外用治疗白癜风的效果，减少毒副作用，为开发高效、低毒、方便的白癜风治疗药物打下基础。
[0012]具体实施例方式
[0013]下面结合数据和实施例对本发明进一步说明。
[0014]本发明根据正交实验设计及预试验，确定按重量比基本配方为:大豆磷脂:胆固醇:Μ0Ρ:胆酸钠=20:10:3:10。分别采用逆相蒸发法、乙醚注入法、薄膜法、薄膜-超声法等方法制备MOP柔性纳米脂质体，比较脂质体包封率、平均粒径和Zeta电位。
[0015]1.逆相蒸发法、乙醚注入法、薄膜法、薄膜-超声法制备MOP柔性纳米脂质体。
[0016]基本配方:大豆磷脂:胆固醇:Μ0Ρ:胆酸钠=20g: 10g:3g:1Og,分别采用逆相蒸发法、乙醚注入法、薄膜法、薄膜-超声法等方法制备MOP柔性纳米脂质体。普通脂质体的制备配方中不含胆酸钠 。
[0017]I)逆相蒸发法制备大单层脂质体:按处方量将不同药物溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液，然后加入PBS15mL，再用水浴式超声仪超声30min，倒入500ml烧瓶中，置于40°C水浴，减压除去有机溶剂，达胶态后滴加PBS (IOmmoI/L) 5ml，旋转使壁上的凝胶脱落，继续减压蒸发即可制得透明的均匀乳白色液体。
[0018]2)乙醚注入法:水相:磷酸盐缓冲液((0.05mol/L，pH7.3)4mL放入试管中，置于55°C至60°C水浴中；有机相:乙醚2ml溶解总脂及MOP ;用带5号针头的注射器以0.25mL/min速度将有机相注入水相中，不断搅拌至有机溶剂除尽，即可得到透明的均匀乳白色液体。
[0019]3)薄膜法制备多室脂质体:按处方量将不同药物溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液，置于500ml圆底烧瓶中，用旋转蒸发器减压旋转去除有机溶剂，形成均匀薄膜(A)。取5mlPBS(10mmol/L)加热至55°C，倾入(A)中，并浸入55°C水浴中搅拌30min，即得透明的均匀乳白色液体。
[0020]4)薄膜-超声法制备小单层脂质体:将3)制得的脂质体再经超声即得。用水浴式超声处理机处理30min，再在探头式超声仪上超声粉碎5次，每次3min，直至形成均匀的上清液。4000\8离心101^11，收集上清液。
[0021]2.纳米脂质体质量评价:高效液相色谱(HPLC)测定MOP柔性纳米脂质体含量；凝胶柱法测定包封率；负染-电镜法测定粒径。
[0022]I)高效液相色谱(HPLC)测定MOP柔性纳米脂质体含量:取ImL脂质体以PBS稀释至100ml,取5ml置于25ml量瓶中，加甲醇定容,超声5min,0.45um微孔滤膜过滤后,精密进样2ul。另取MOP对照品溶液(10ug/mL)20ul进样，外标法计算含量。[0023]2)凝胶柱法测定包封率:取MOP柔性纳米脂质体lg，用PBS20mL混悬均匀，上葡Sephadex G-25柱，用PBS洗脱，接取流分IOOmL,流速3mL/min，取含药脂质体流分5mL置于25mL量瓶中，加甲醇定容,超声处理5min, 0.45mm微孔滤膜过滤,取20 μ L进样,计算包封于脂质体中的药物Wl。同时，取柔性纳米脂质体lg，用PBSlOOmL混悬均匀，然后取5mL用甲醇稀释至25mL,超声处理5min,0.45um微孔滤膜过滤,进样20ul。计算得总药物量W2,按下式计算包封率EE:EE = W1/W2X 100%。
[0024]3)负染-电镜法测定粒径:取柔性纳米脂质体样品适量，用PBS稀释200倍，滴于铜网上，2%磷钨酸负染，自然晾干，5000-20000倍电镜下观察并拍照。随机测定5个视区，每个视区测定50个柔性纳米脂质体的粒径，以照片粒径除以放大倍数即得柔性纳米脂质体的粒径大小与分布。
[0025]4) Zeta电位测定:取MOP柔性纳米脂质体Iml,PBSlml稀释，检测。测定条件:电流 0.43mv、电场 16.24V/cm、波长 660nm。
[0026]表1制备MOP脂质体含量、包封率、平均粒径、Zeta电位的测定
[0027]
【权利要求】
1.一种8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶，其特征是将柔性材料与纳米材料结合，成为一种新型的凝胶。
2.根据权利要求1中所述的8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶，其特征在于将柔性材料与纳米材料结合，制备出一种新的8-甲氧基补骨脂素凝胶制剂。
3.根据权利要求1和2中所述的8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶，其特征在于:按重量比其配方为:大豆磷脂:胆固醇:Μ0Ρ:胆酸钠=20:10:3:10。
4.权利要求3所述的8-甲氧基补骨脂素柔性纳米脂质体凝胶的制备方法，其特征在于:按大豆磷脂20g、胆固醇10g、M0P3g、胆酸钠IOg,溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液,用旋转蒸发器减压旋转去除有机溶剂，形成均匀薄膜(A);取51111?83(101111]101/1)加热至55°C,倾入(A)中，并浸入55°C水浴`中搅拌30min，即得透明的均匀乳白色液体。
【文档编号】A61K9/127GK103599065SQ201310636916
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年12月2日 优先权日:2013年12月2日
【发明者】温炬 申请人:温炬