专利名称：一种控制家畜性别及防治其子宫炎的制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种控制家畜性别及防治其子宫炎的制剂配方。
背景技术：
控制家畜的遗传和表型性别可增加选育强度，获得最大的遗传进展，提高母畜的繁殖效率，增加畜牧业的经济效益，再者，性别控制还可防止牛的异性孪生不育症，它的应用必将促进畜牧业的发展。当前，控制性别的方法主要有三类受精前X、Y精子分离技术，附植前胚胎的性别鉴定技术，妊娠早期胎儿性别诊断技术。
受精前X、Y精子分离技术主要包括精子的核型分析法、免疫学方法、沉降法、流式细胞仪法。精子的核型分析法是用Quinaerine对精子染色后，根据Y染色体是否产生荧光来区别X、Y精子，有39-47％Y染色体显示出荧光点(F-小体)；免疫学方法是用H-Y抗血清免疫亲和柱层析方法对小鼠的精液进行分离，H-Y阳性的小鼠精z液授精后得到了90％的雄性后代；沉降法是根据非平衡沉降或密度梯度的平衡沉降原理进行的，离心富集X精子，其富集率为94％，尽管这一结果非常理想，但是后来没有人能重复这些数据；流式细胞仪法分离X、Y精子是根据X、Y精子的密度大小(因X染色体带有更多的DNA)进行的，用这项技术生产的所有后代的形态都很正常，猪和兔的后代经两代繁殖表现出了正常的繁殖性能(Johnson，1994)。然而，当前用流式细胞仪分离精子这项技术的主要缺陷是分离精子的效率太低，每小时只能分离3.5×105个精子，就很难在人工授精技术的常规使用中被接受。受精前X、Y精子分离技术是利用X、Y精子之间在物理和化学方面存在差异为出发点，如精子的大小、形状、重量、密度、活力(含运动类型和速度)、表面电荷、DNA含量以及酶活性等，这些差异为X、Y精子的分离提供了理论依据，然而，这些方法分离后的X、Y精子的比例的改变不太稳定，同时精子活力受到影响导致人工受精难度加大，换句话说，这些技术日前还不能真正地应用于畜牧生产。(GREENFIELD A.Gene，celland organsrecent developments in the molecular genetics of mammaliansex determination[J].Mammalian Genome，1998，9683-687；葛宝生，李善如，张忠诚，陈永福，哺乳动物的性别控制，内蒙古畜牧科学，1998，2期P16-17)附植前胚胎的性别鉴定技术主要是指免疫学方法、X染色体连锁酶定量法、细胞遗传学方法(核型分析)、分子生物学方法、胚胎克隆法。免疫学方法又包括间接免疫荧光法、囊胚形成抑制法、细胞毒法。间接免疫荧光法是将胚胎在含有H-Y抗血清或单克隆抗体的培养液中培养，然后再加入荧光素标记的第一抗体，在荧光显微镜下观察是否呈现特异荧光，White等(1987)用染色体分析法对间接免疫荧光法鉴别的牛、猪和绵羊胚胎的结果进行了验证，在牛胚胎中雄性符合率为85％，雌性为97％；绵羊胚胎雄性符合率为84％，雌性为85％，猪胚胎雄性符合率为77％，雌性为86％(Wbite，1987；Wach-tel，1988)，然而，该法鉴定准确率不是很高，主要是因为H-Y抗原是一个弱抗原，H-Y抗血清的特异性较差，判断荧光胚或无荧光胚参与了较多的人为主观因素；囊胚形成抑制法是利用H-Y抗体和胚胎发育的差异来可逆地抑制雄性桑堪胚向囊胚的发育，从而达到性别鉴定的目的；细胞毒法鉴定胚胎性别是用含有H-Y抗血清及补体的培养液培养胚胎，表达H-Y抗原的雄性胚胎有一定程度的细胞裂解或发育受阻不能形成正常的囊胚，此类胚胎判为雄性，因这种方法对雄性胚胎有损伤性，故日前已很少使用。X染色体连锁酶定量法是根据X染色体编码的酶的活性雌性是雄性的两倍这一事实，用此法鉴定胚胎性别的准确率为64％，但是，鉴于X染色体失活机理和失活时间还不很清楚，加之酶活性差异甚微，故本法难以应用。细胞遗传学方法(核型分析)是经典的胚胎性别鉴定法，在胚胎发育早期，雌性胚胎中的一条X染色体处于暂时失活状态，在雌性胚胎细胞的核膜附近会出现一个着色较深的异染色质小块，称为Barr氏小体，这种方法虽然准确率达100％，但属损伤法，再者得到中期分裂相的难度很大，也相当费时，不适用于生产实际，只可用来验证其它性别鉴定技术。分子生物学方法是从胚胎取10-20个细胞做原位杂交(Leonard等)，其胚胎性别鉴定准确率为95％(81/85)，用PCR技术检测SRY基因的有无即可判定胚胎的性别，1992年，曾溢涛和胡明信等参照人和小鼠的SRY基因序列设计了一对引物，对17枚胚胎样本(其中4枚整胚，11枚切割胚，2枚二分胚)进行PCR体外扩增作对照验证，其性别鉴定结果准确率达100％，这种方法准确度较高，只需取2-3个卵裂球细胞，且3h内可完成，但是PCR扩增SRY法的操作过程极易污染，且对胚胎有一定损伤，选出的胚胎妊娠率达到45％左右，经济效益不可观。胚胎克隆法(核移植法)是将分离的卵裂球或成体细胞(核供体)与成熟并去核的卵母细胞(核受体)融合，不经有性繁殖过程连续地复制遗传相同的胚胎，并经胚胎移植获得大量性别一致的复制后代，用胚胎克隆方法来实现性别控制，具有诱人的前景，但日前该项技术在生产上还不成熟。(Johnson L A.Isolation of X-and Y-bearingspermatozoa preseletion[J].Therionenolony，1994(41)51-56；葛宝生，李善如，张忠诚，陈永福，哺乳动物的性别控制，内蒙古畜牧科学，1998，2期P16-17)妊娠早期胎儿性别诊断技术是用核型分析、H-Y抗原、DNA探针鉴定经羊膜穿刺得到的细胞，或者是直肠超声波诊断法鉴定胎儿性别。这种方法只在农场条件下鉴定牛(Curran，1992)和马(Curran等，1989)胎儿的性别，是通过鉴别和确定生殖结节与周围结肠的相对位置来鉴定胎儿的性别的。(聂光军，奶牛的性别控制，中国奶牛，2002，539-41；陈从英，黄路生，陈静波等，牛早期胚胎性别鉴定PCR反应体系的优化研究[J]，畜牧兽医学报2003，34(3)，209-212；朱晓华，赵力里，王志跃，家畜性别决定的机制及其控制的研究进展[J]，动物科学与动物医学，2001，18(1)22-24)控制外环境方法是通过调整家畜的营养、控制授精时间和子宫pH值等手段来实现对家畜性别比例的控制。母牛在饲料不足或饲喂酸性饲料类型后多产雄犊，反之饲料丰富或饲喂碱性饲料多产雌犊。排卵前一定时间输精多产雌犊，控制授精时间的方法较简便，但对掌握适时输精的技术要求较高。Y精子对酸性环境的耐受力比X精子差，而碱性环境则相反，当解冻液或母牛生殆道的pH值低于6.8时，Y精子的活力减弱，运动缓慢，失去了较多与卵子结合的机会故后代雄性牛犊数少，当pH值大于7.0时，则Y精子的活力增强，有较多的与卵子结合的机会故后代雄性牛犊多。(姜忠玲，王国志，奶牛性别控制的研究途径与现状，黑龙江动物繁殖，第13卷第2期2004年P10-12；李馨，杨隽，郭志光，家畜性别控制研究现状与展望，内蒙古畜牧科学，1997，(2)15-18)控制外环境方法是难以稳定其控制条件的，从而使家畜后代比例难以得到理想的控制，这种方式在生产上也只是辅助手段。(陈元明，蔡正华，刘殿奎等，不同授精时间对仔猪性比影响的研究，畜牧与兽医，1996，26(3)，P251-254)子宫内膜炎是家畜子宫粘膜的粘液性或化脓性炎症，子宫感染是导致本病的主要原因。子宫内膜炎多继发于家畜难产处理、胎衣不下及子宫脱垂的治疗处理过程中；家畜配种消毒不严格、生殖器官传染病也是引起子宫内膜炎的常见原因。子宫内膜炎是引起家畜难配、难产的一种既常见又麻烦的不孕症。家畜子宫内膜炎隐性、急性、慢性病之分隐性子宫内膜炎指家畜生殖器官无明显异常，发情周期正常，但屡配不孕，只在发情时，从阴道流出的粘液带有浑浊状；急性子宫内膜炎一般发生于流产后或产后胎衣不下时，体温升高，食欲减退，精神沉郁，严重时拱背，努责，常做排尿姿势，从阴道流出粘性或粘脓性分泌物，直肠检查，发现子宫角粗大而肥厚，下沉，子宫收缩反应微弱，触摸时有波动感。慢性子宫内膜炎是由急性子宫内膜炎继发而来，发情周期不正常，当发情时，从阴道中可排出浑浊带有絮状物或脓汁的分泌物，外阴部常略带肿胀、外翻。直肠检查发现子宫角变粗、增大，收缩反映微弱，如有分泌物积聚，则感觉有轻微波动感。(北京农业大学主编，家畜繁殖学(第二版)，农业出版社，1988；张彦明，牛子宫内膜炎的研究与临床进展，黄牛杂志，1998，24(1)，P34-37)目前治疗家畜子宫内膜炎的总体原则是消除炎症，防止扩散，促进子宫机能恢复。利用抗生素、中药或西药清洗子宫及子宫内用药是当前治疗家畜子宫内膜炎的常用方法，慢性卡他性和慢性卡他脓性子宫内膜炎一般先用消毒性冲洗液(0.5％的来苏儿或0.1％高锰酸钾液)冲洗，再用5％热盐水冲洗，洗后灌注抗生素，待子宫病变明显消失后，再用1％的生理盐水或1-2％的小苏打水冲洗，洗后灌注抗生素；慢性脓性子宫内膜炎则先用0.1％碘溶液冲洗，再用0.1％雷佛奴儿或0.1％高锰酸钾溶液冲洗，然后用5％的热盐水冲洗。当子宫病变消失后，再用糖、小苏打、盐溶液(糖90克、小苏打0.5-3克、食盐1克、蒸馏水加至1000毫升)冲洗，然后向子宫内灌注青霉素、链霉素；子宫积液、积脓及胎儿干尸化经常先肌注苯甲酸雌二醇或己烯雌酚，待子宫颈口开张后，再肌注脑垂体后叶素或催产素，然后清除子宫内容物，按卡他性或脓性子宫内膜炎的冲洗灌注程序进行处理，待治愈后，配种前4-8小时再向家畜子宫灌注抗生素；隐性子宫内膜炎因病变较轻，在家畜发情当天用1％小苏打水或生理盐水冲洗子宫，冲洗后导出洗液，再向子宫内注入青霉素，链霉素或10％磺胺嘧啶钠。在配种前4-8小时，再向子宫注入青霉素、链霉素；目前家畜子宫内膜炎常用的灌注子宫的西药有各种抗生素，如青霉素、链霉素、土霉素、四环素、金霉素、红霉素等和磺胺类药物；中药有苦参、当归、益母草、黄芩。以上各种方剂用量按家畜的体重定量。(Paisley L G，Mickelsen W D，Anderson P B.Mechanismsand therapy for retained fetal membrans and uterine infections ofcowsareview[J]，Theriogenology，1986，25353-381；王志荣，母牛隐性子宫炎的诊断治疗，中国兽医杂志，1995，21(10)，P43；王祖昆，黄胜，黄金禄等，新奶牛子宫炎防止药物的研究，黑龙江动物繁殖，2003，11(4)，P7-8)利用抗生素类药物治疗子宫内膜炎易产生残留，而且过度使用抗生素，会使家畜子宫与阴道内的有害菌群产生抗药性；上述中药复方制剂对子宫内膜炎的治疗较慢，而且难以治疗中、重度子宫内膜炎。
发明内容
本发明利用下述方案实现了解决目前家畜性别控制繁育和其子宫内膜炎治疗中存在的问题。
本发明做成的制剂的主要成份和配比如下碘酊(5％)15-25ml(内蒙古蒙东动物药品厂)；甘油(分析纯)5-20ml(天津大学化学试剂厂)；维生素B115-20ml(上海申广动物保健品有限公司)；维生素A、D、E合剂5-10ml(中国农业科学院畜牧研究所)；氯化钠(1％)15-25ml；(内蒙古向阳赤峰兽药厂)；硫酸盐类(15-25％硫酸铜)15-25ml。(徐州摩尔医药试剂厂)。
将上述配伍成份按氯化钠、硫酸盐类、维生素B1、维生素A、D、E合剂、甘油、碘酊顺序混合，在常温下搅拌均匀。
本发明做成的制剂呈棕红色液体，无沉淀，无悬浮颗粒。本发明做成的制剂注入家畜子宫体后约10-15小时，会随着家畜子宫平滑肌的收缩而排出体外，制剂不会残留在家畜子宫体内。
本发明配方中的碘能氧化病原体胞浆蛋白的活性基因，并能与蛋白质氨基结合使其变性，对细菌、芽胞、病毒、阿米巴原虫都有很强的杀灭作用；甘油为润滑性泻药，能润滑并刺激肠壁，作用温和。而本发明配方中的硫酸盐类(硫酸铜)药品性味酸疼，解毒杀虫，止痒燥湿，止血止泻、清热消炎、收敛湿疮等功效(《本草纲目》记载)，再者，硫酸盐类(硫酸铜)易溶于水，水溶液呈弱酸性，水解的铜离子(Cu2+)能与蛋白质结合成蛋白盐；维生素E又叫生育酚，能维持生殖器官的正常机能，可提高子宫内膜对雌激素的感受性作用；维生素A是维持生长，生殖和视觉功能的必需物质，具有促进胎儿、幼儿生长发育，增强人体免疫抗病的能力。
本发明做成的制剂注入家畜子宫体时，由于制剂的作用会使宫颈粘液变得粘稠浓厚，精子在里面游动受到限制，尤其是Y精子比X精子更难以穿过粘稠的宫颈粘液而与卵子结合，起到隔离一部分Y精子的作用。在用本发明做成的制剂治疗家畜子宫疾病的同时，制剂中的碘、钾、氯、钠、碳、氢、铜和硫等离子，在丙三醇渗透压的作用下，参与子宫内膜组织、细胞原浆蛋白质的结合使宫颈粘液变得粘稠浓厚，精子在里面游动受到限制，尤其是纤弱的Y精子比起魁梧强健的X精子更显得元气不足，无力穿过粘调的宫颈粘液去同卵子会见，从而影响了正常的性控比例。再者，本发明做成的制剂呈酸性，改变了家畜子宫局部环境的PH值，抑制了Y精子的活力，从而也影响了正常的性控比例，在适应环境能力方面，X精子比Y精子强得多，一般来说，精子都是嗜碱而厌酸，尤以Y精子更为明显，如果雌性家畜生殖道酸性偏高时，行动敏捷的Y精子很快变得迟钝起来，但X精子对酸性耐受能力较强，受酸性环境影响不太大。
利用本发明做成的制剂改变家畜子宫内的生理生化环境，抑制Y精子的活力，增强X精子授精机率，不会降低超排家畜胚胎的数量和质量，雌性率可达80-90％。另外，由于操作简便，成本低，比日前人工授精母牛的产母犊率48％提高了32％-42％，故可以在家畜生产中推广应用。
具体实施例方式
本发明具体实施方式
如下在常温下，将氯化钠(1％)，15-25ml；硫酸盐类(15-25％硫酸铜)，15-25ml；维生素B1，15-20ml；维生素A、D、E合剂，5-10ml；甘油(分析纯)，5-20ml；碘酊(5％)，15-25ml依次混合，搅拌均匀。
家畜发情前2-4天，将本发明做成的制剂40-50ml注入其子宫内，正常授精，产母率可达80-90％。
对家畜轻、中度子宫内膜炎，将本发明做成的制剂40-50ml注入其子宫内，间隔5-7天，连用2-3次，对家畜重子宫内膜炎用药3-5次，治愈率达98％以上。
实施例1配方(100ml毫升)主要成份与配比如下碘酊(5％)20ml；甘油(分析纯) 10ml；维生素B1 20ml；维生素A、D、E合剂10ml；氯化钠(1％) 20ml；硫酸铜(15-25％) 20ml。
将上述配伍成份按氯化钠、硫酸盐类、维生素B1、维生素A、D、E合剂、甘油、碘酊顺序混合，在常温下搅拌均匀。
在奶牛性周期12-16天内，将本发明做成的制剂40-50ml注入其子宫内，正常人工授精，产母率可达80-90％。
对奶牛轻、中度子宫内膜炎，将本发明做成的制剂40-50ml注入其子宫内，间隔5-7天，连用2-3次，对奶牛重子宫内膜炎用药3-5次，治愈率达98％以上。
实施例2配方(100ml毫升)主要成份如下碘酊(5％)25ml；甘油(分析纯) 15ml；维生素B1 15ml；维生素A、D、E合剂5ml；氯化钠(1％) 15ml；硫酸铜(15-25％) 25ml。
将上述配伍成份按氯化钠、硫酸盐类、维生素B1、维生素A、D、E合剂、甘油、碘酊顺序混合，在常温下搅拌均匀。
在母猪性周期15-18天内，将本发明做成的制剂25-30ml注入其子宫内，正常授精，产母率可达80-85％。
对母猪轻、中度子宫内膜炎，将本发明做成的制剂25-30ml注入其子宫内，间隔5-7天，连用2-3次，对母猪重子宫内膜炎用药3-5次，治愈率达98％以上。
权利要求
1.一种控制家畜性别及防治其子宫炎的制剂配方。其特征是该制剂影响家畜性别比例，并可治疗家畜子宫内膜炎等不孕症。
2.根据权利要求1的方法，本发明做成的制剂的主要成份和配比如下碘酊(5％)，15-25ml；甘油(分析纯)，5-20ml；维生素B1，15-20ml；维生素A、D、E合剂，5-10ml；氯化钠(1％)，15-25ml；硫酸盐类(15-25％硫酸铜)，15-25ml。
3.根据权利要求1-2的方法，其特征在于将权利要求2中所述的成份按氯化钠、硫酸盐类、维生素B1、维生素A、D、E合剂、甘油、碘酊顺序混合，在常温下搅拌均匀。
4.根据权利要求1-3中之一所述的方法，其特征在于本发明做成的制剂呈棕红色液体，无沉淀，无悬浮颗粒。
5.根据权利要求1-4中之一所述的方法，其特征在于家畜发情前2-4天，将本发明做成的制剂40-50ml注入其子宫内，正常授精，产母率可达80-90％。
6.根据权利要求1-4中之一所述的方法，其特征在于对家畜轻、中度子宫内膜炎，将本发明做成的制剂40-50ml注入其子宫内，间隔5-7天，连用2-3次，对家畜重子宫内膜炎用药3-5次，治愈率达98％以上。
全文摘要
本发明涉及一种控制家畜性别及防治其子宫炎的制剂配方。本发明做成的制剂的主要成份和配比碘酊(5％)，15－25ml；甘油(分析纯)，5－20ml；维生素B1，15－20ml；维生素A、D、E合剂，5－10ml；氯化钠(1％)，15－25ml；硫酸盐类(15－25％硫酸铜)，15－25ml。家畜发情前2－4天，将本发明做成的制剂40－50ml注入其子宫内，正常授精，产母率可达80－90％。对家畜轻、中度子宫内膜炎，将本发明做成的制剂40－50ml注入其子宫内，间隔5－7天，连用2－3次，对家畜重子宫内膜炎用药3－5次，治愈率达98％以上。
文档编号A61K31/07GK1931185SQ20051010276
公开日2007年3月21日 申请日期2005年9月15日 优先权日2005年9月15日
发明者白俊品, 童志清 申请人:白俊品, 北京颐和天韵新技术研究所