改善微动脉的结构和功能的方法

专利名称：：改善微动脉的结构和功能的方法
技术领域：
：本发明属于血管医学领域。具体地，本发明提供了改善微动脉结构和功能、并从而减轻与受损的循环有关的病理学的新方法。
背景技术：
：本文所述的微动脉是动脉循环(相对于静脉循环)中直径(灌注固定后或体内)小于200pM的血管。关于与高血压、衰老、蛛网膜下腔出血、多发性脑梗死性痴呆、阿尔茨海默病和慢性肾病以及其它状况有关的微动脉变化，存在许多文献。似乎许多种病理学状况都可导致这些微动脉的加厚，并伴有正常血管反应性(vasoreactioity)的损失。对血压降低的正常反应是血管舒张，以允许抵抗降低和维持正向流(forwardflow)。面对血压降低不能使-微动脉血管舒张，可能导致向目标器官的血流的下降。如果目标器官是脑，则正向血流的降低会导致涉及的纟鼓动脉区域的梗死。由于孩i动脉很小，所以它们通常供应脑中的小区域，且因此梗死较小，并可能仅仅被感知为"SeniorMoment"。但是，我们认为，这样一系列损伤随着时间推移的积累，可能导致重大的终末器官损害。预防这样的终末器官损害的主要治疗包括血压控制和血浆葡萄糖和脂质水平的控制。已知可以使用某些试剂(例如，抑制素)来改善小至大动脉的结构和功能，并假设所述使用与这些试剂降低胆固醇和减少炎症细胞浸润进动脉中的能力有关(^JS，例如，Schonbeck爭(2004)C/簡/加.ow109(21Suppl1):1118-26)。发明4既述本发明涉及意外发现，即比甚至最小动脉更小的血管(即微动脉)加厚，变得功能异常，并造成对如脑和肾的不同组织的终末器官损害。本发明提供了改善微动脉的结构和功能、并保持诸如脑和肾的终末器官的功能的方法。因而，在某些实施方案中，本发明提供了改善微动脉结构和/或功能的方法。该方法通常包含，给需要的哺乳动物施用一种或多种本文所述活性剂，通常以足以改善微动脉结构或功能的剂量。在各种实施方案中，所述微动脉是肾和/或脑和/或泡中的微动脉。所述哺乳动物可以是人，例如，需要这样的治疗性或预防性处理的患者，或非人。因而，考虑医学和兽医学应用。在各种实施方案中，所述哺乳动物是被诊断为具有记忆丧失或受损的学习和/或受损的肾功能和/或受损的泡(肺)功能的人。在某些实施方案中，所述哺乳动物是未被诊断为具有动脉粥样硬化和/或相关病理学或具有该危险、和/或未经针对动脉粥样硬化和/或相关病理学的治疗的人。在各种实施方案中，所述活性剂(例如，肽和/或肽模拟物(peptidemimetic)和/或脂质)是在单位剂量制剂中的。在各种实施方案中，所述活性剂配制成用于通过选自下述的途径施用经口施用、经鼻施用、直肠施用、腹膜内注射、和血管内注射、皮下注射、经皮施用和肌内注射。在各种实施方案中，施用方法是通过选自下述的途径经口施用、经鼻施用、直肠施用、腹膜内注射、和血管内注射、皮下注射、经皮施用和肌内注射。在某些实施方案中，所述活性剂选自D4F、L4F、反向D4F、反向L4F、环状变换(circularlypermuted)D4F、环状变换L4F、环状变换反向L4F、环状变换反向D4F和DMPC。在各种实施方案中，与可药用赋形剂相组合地提供所述活性剂。在某些实施方案中，本发明还提供了用于预防或治疗具有受损的结构或功能的微动脉的本文所述活性剂。还提供了本文所述活性剂在生产药物中的应用，所述药物用于预防或治疗具有受损的结构或功能的^敬动月永。还提供了用于治疗特征在于异常微动脉结构或功能的状况的试剂盒。所述试剂盒通常包含一个或多个容器，该容器含有本文所述活性剂，和教导使用所述活性剂治疗特征在于异常微动脉结构或功能的状况的指导材料。在各种实施方案中，所述活性剂(例如，肽和/或肽模拟物和/或脂质)是在单位剂量制剂中的。在各种实施方案中，所述活性剂配制成用于通过选自下述的途径施用经口施用、经鼻施用、直肠施用、腹膜内注射、和血管内注射、皮下注射、经皮施用和肌内注射。在某些实施方案中，所述活性剂选自D4F、L4F、反向D4F、反向L4F、环状变换D4F、环状变换L4F、环状变换反向L4F、环状变换反向D4F和DMPC。在各种实施方案中，与可药用赋形剂相组合地提供所述活性剂。定义当提及分离的多肽时，术语"分离的"、"纯化的"或"生物纯常伴随它的组分。关于核酸和/或多肽，该术语可以指不再侧接通常天然侧接它们的序列的核酸或多肽。化学合成的多肽是"分离的"，因为在天然状态不会发现它们(例如，在血液、血清等中)。在某些实施方案中，术语"分离的"指未在自然界中发现该多肽。术语"多肽"、"肽"和"蛋白"在本文可互换地使用，指氨基酸残基的聚合物。该术语应用于这样的氨基酸聚合物，其中一个或多个氨基酸残基是相应的天然存在的氨基酸的人工化学类似物，还应用于天然存在的氨基酸聚合物。术语"两亲性螺旋肽"指包含至少一个两亲性螺旋(两亲性螺旋结构域)的肽。本发明的某些两亲性螺旋肽可以包含2个或更多个(例如3、4、5等)两亲性螺旋。术语"A类两亲性螺旋"指形成a-螺旋的蛋白结构，其产生极性和非极性面的分离，在极性-非极性界面处存在带正电荷的残基，而在极性面的中心处存在带负电荷的残基(參JE,例如，Segrest爭(l"0)/Voto'似；》w"wre，Fwwc"ow,Gewe//cs703-"7」。"载脂蛋白J"(apoJ)有许多名称，包括丛生蛋白、TRPM入GP80和SP40,40(Fritz(1995)Pp112In:C/w倉/"..Wo/eDeve/o/me械Fw""/o",朋d^4&p加/o"(HarmonyJAKEd.)，R.G.Landes,Georgetown,TX，)。它首先被描述为异源二聚体糖蛋白和培养的大鼠支持细胞的分泌蛋白的组分(Kissinger爭(1982)i^jwo《27:233240)。翻译产物是单链前体蛋白，其经历细胞内切割形成二硫键连接的34kDaa亚基和47kDaP亚基(Collard和Griswold(187)5/oc/z^2.，26:3297-3303)。已经将它与细胞损伤、脂质运输、细胞凋亡相关联，它可以参与细胞损伤或死亡造成的细胞碎片的清除。已经表明，丛生蛋白以高亲和力结合许多种分子，包括脂质、肽和蛋白和疏水探针l-苯胺基-8-萘磺酸盐(Bailey爭(2001)40:11828-11840)。G类两亲性螺旋见于球状蛋白中，并因而得名G类。该类两亲性螺旋的特征是，它在极性面上具有随机分布的带正电荷的和带负电荷的残基，并具有狭窄的非极性面。因为狭窄的非极性面，该类不能容易地与磷月旨结合(参X,Segrest爭(1990)iV她/》w"匿，F露细，amiGWze"".8:103-117;Erratum(1991)/Voto7w.'57rw由re,Fw"c"ow，^^Ge"W/cj，9:79)。几种可交换的载脂蛋白具有与G两亲性螺旋类似、但是不同的特征。与G类两亲性螺旋类似，该其它类在极性面上具有随机分布的带正电荷的和带负电荷的残基。但是，与具有狭窄非极性面的G类两亲性螺旋不同，该类具有宽非极性面，这允许该类容易地结合磷脂，且该类得名G*，以将它与G类两亲性螺旋区分开(參^CSegrest爭(1992)Z^/cf33:141-166;也参见Anantharamaiah爭(1993)Pp.109-142In:77ze当ci/e/z'x,Epand，R.M.EdCRCPress,BocaRaton,Florida)。Jones爭(1992)/.L/pzWi^.33:287-296)已经描述了鉴别和分类两亲性螺旋结构域的计算机程序，且包括但不限于螺旋轮(wheel)程序(WHEEL或WHEEL/SNORKEL)、螺旋网(net)程序(HELNET、HELNET/SNORKEL、HELNET/Angle)、用于添加螺旋轮的程序(COMBO或COMBO/SNORKEL)、用于添加螺旋网的程序(COMNET、COMNET/SNORKEL、COMBO/SELECT、COMBO/NET)、一致轮程序(CONSENSUS、CONSENSUS/SNORKEL)等。关于"改善动脉粥样硬化的一种或多种症状"使用时的术语"改善"是指减少、预防或消除以动脉粥样硬化和/或相关病理学为特征的一种或多种症状。这种降低包括但不限于，氧化的磷脂的减少或消除，动脉粥样硬化斑块形成和破裂的减少，临床事件例如心脏病发作、心绞痛或中风的减少，高血压的下降，炎性蛋白生物合成的下降，血浆胆固醇的减少，等。术语"对映体氨基酸"是指以互为不能重叠的镜像的至少两种形式存在的氨基酸。大多数氨基酸(除甘氨酸外)是对映体的，以所谓的L-型(L氨基酸)或D-型(D氨基酸)存在。大多数天然存在的氨基酸是"L"氨基酸。术语"D氨基酸"和"L氨基酸"用于指氨基酸的绝对构型，而不是指平面偏振光的特定旋转方向。在本文的用法与本领域的技术人员的标准用法相一致。在本文中使用标准的单字母或三字母密石马指定氨基酸，3口例如HandbookOnIndustrialPropertyInformationandDocumentation中的才示准ST.25所指定的。术语"保护基"指一种化学基团，当其附着于氨基酸中的官能团时(例如，侧链、a氨基、a羧基，等)，封闭或掩盖该官能团的性质。优选的氨基末端保护基包括，但不限于乙酰基或氨基。其它氨基末端保护基包括，但不限于如在脂肪酸中的烷基链、propeonyl、曱酰基，等。优选的羧基末端保护基包括，但不限于形成酰胺或酯的基团。短语"保护磷脂免于氧化剂的氧化"是指，当磷脂与氧化剂(例如，过氧化氬、13-(S)-HPODE、15陽(S)-HPETE、HPODE、HPETE、HODE、HETE，等)接触时，化合物降低磷脂的氧化速率(或产生的氧化磷脂的量)的能力。术语"低密度脂蛋白，，或"LDL"是根据本领域技术人员的通用用法定义的。通常，LDL是指当通过超速离心分离时以密度范围d=1.019到d=1.063发现的脂质-蛋白复合物。术语"高密度脂蛋白"或"HDL"是根据本领域技术人员的通用用法定义的。通常，"HDL"是指当通过超速离心分离时以密度范围d=1.063到d=1.21发现的脂质-蛋白复合物。术语"I组HDL"是指减少氧化的脂质(例如，低密度脂蛋白中的)或保护氧化的脂质免于被氧化剂氧化的高密度脂蛋白或其组分(例如，apoA-I、对氧磷酶、血小板活化因子乙酰基水解酶，等)。术语"II组HDL"是指在保护脂质免于氧化方面或在修复(例如，减少)氧化的脂质方面提供减少的活性或没有活性的HDL。术语"HDL组分"是指包含高密度脂蛋白(HDL)的组分(例如，分子)。保护脂质免于氧化或修复(例如，减少氧化的脂质)的HDL的测定，还包括显示这种活性的HDL组分(例如，apoA-I、对氧磷酶、血小板活化因子乙酰基水解酶，等)的测定。术语"人apoA-I肽"是指全长人apoA-I肽，或其包含A类两亲性螺旋的片段或结构域。在本文使用的"单核细胞反应"是指有与动脉粥样硬化斑块形成相关的"炎性反应"特征的单核细胞活性。单核细胞反应的特征是，单核细胞附着到血管壁细胞(例如血管内皮细胞)，和/或趋化进入内皮下间隙，和/或单核细胞分化成巨噬细胞。当涉及氧化的磷脂量时，术语"没有变化"是指没有可检测的变化，更优选地指没有统计学上显著的变化(例如，在至少85%,优选至少90%，更优选至少95%,和最优选至少98%或99%的置信水平)。没有可检测的变化也可以指测定，其中氧化的磷脂水平发生变化，但不如不存在此处描述的蛋白时、或参考其它阳性或阴性对照时那么多。在本文使用以下缩写PAPC:L-ot-l-棕榈酰基-2-花生四烯酰基(arachidonoy1)-甘油基-3-磷酸胆碱；POVPC:l-棕榈酰基-2-(5-氧代戊酰基)-甘油基-3-磷酸胆碱；PGPC:1-棕榈酰基-2-戊二酰基-m-甘油基-3-磷酸胆碱；PEIPC:l-棕榈酰基-2-(5,6-环氧异前列腺烷E2)-甘油基-3-磷酸胆碱；ChC18:2:亚油酸胆甾醇酯；ChC18:2-OOH:亚油酸胆甾醇酯氢过氧化物；DMPC:1，2-双十四烷酰基-rac-甘油基-3-磷酸胆碱；PON:对氧磷酶；HPF:标准化的高倍视野；PAPC:L-a-l-棕榈酰基-2-花生四烯酰基^"-甘油基-3-磷酸胆碱；BL/6:C57BL/6J;C3H:C3H/HeJ。关于蛋白或肽使用的术语"保守置换"是反映基本上不改变分子的活性(特异性(例如，对于脂蛋白))或结合亲和力(例如，对于脂质或脂蛋白)的氨基酸置换。通常，保守氨基酸置换包括将一个氨基酸置换为具有类似化学性质(例如，电荷或疏水性)的另一个氨基酸。以下的六组各自包含相互是一般的保守置换的氨基酸l)丙氨酸(A)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T);2)天冬氨酸(D)、谷氨酸(E);3)天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q);4)精氨酸(R)、赖氨酸(K):5)异亮氨酸(1)、亮氨酸(L)、甲硫氨酸(M)、缬氨酸(V);和6)苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)、色氨酸(W)。在两个或更多个核酸或多肽序列的上下文中，术语"同一的"或百分比"同一性"指，当进行最大对应性比较或比对时，如使用以下序列比较算法之一测量或通过目测检查测得的，两个或更多个序列或子序列是相同的，或具有特定百分比的相同氨基酸残基或核苷酸。对于本发明的肽，在全长肽上测定序列同一性。对于序列比较，通常一个序列作为参考序列，测试序列与其进行比较。当使用序列比较算法时，将测试序列和参考序列输入到计算机中，如有必要，指定子序列坐标，且指定序列算法程序参数。然后序列比较算法根据指定的程序参数，计算测试序列相对于参考序列的百分比序列同一性。可以通过，例如，Smith&Waterman,爿6/v.4pp/.^"仇2:482(1981)的局部同源性算法，Needleman&Wimsch,,Mo/.48:443(1970)的同源'性比7寸算法，Pearson&Lipman(1988)尸nc.A^f/.Jcad"&485:2444的相似性搜索法，这些算法的计算机化实现(WisconsinGeneticsSoftwarePackage,GeneticsComputerGroup,575ScienceDr.,Madison,WI中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA)，或通过目测检查(一般参见Ausubel爭，同上)，来进行用于比较的最佳序列比对。有用算法的一个实例是PILEUP。PILEUP使用渐进的、成对的比对来生成来自一组有关序列的多个序列比对，以显示相互关系和百分比序列同一性。它还标绘出树或树形图来显示用于产生比对的聚类相互关系。PILEUP寸吏用Feng&Doolittle(1987)丄Mo/.五vo/.35:351-360的渐进比对方法的简化形式。使用的该方法类似于Higgins&Sharp(1989)CABIOS5:151-153描述的方法。该程序可以比对最多达300个序列，每个的最大长度为5,000核苷酸或氨基酸。多重比对程序开始于两个最相似序列的成对比对，从而产生两个被比对序列的聚簇。然后将这个聚簇与下一个最相关的序列或被比对序列的聚簇进行比对。通过两个独立序列的成对比对的简单扩展，来比对两个序列聚簇。通过一系列渐进的、成对的比对，完成最终的比对。通过指定具体序列和它们用于序列比较的区域的氨基酸或核苷酸坐标，和通过指定程序参数来运行程序。例如，可以将参考序列与其它测试序列比较，以确定百分比序列同一性相互关系，其中使用以下参数默认的缺口权重(3.00)、默认缺口长度权重(0.10)和加权的末端缺口。适合于确定百分比序列同一性和序列相似性的算法的另一个实例是BLAST算法，其描述在Altschul爭(1990)Mo/.編.215:403-410中。用于执行BLAST分析的软件在国家生物技术信息中心(NationalCentreforBiotechnologyInformation)(http:〃www.ncbi.nlm.nih.gov/)是公众可获得的。这个算法包括，首先通过在查询序列中鉴定长度W的短字来鉴定高得分序列对(HSP),当与数据库序列中相同长度的字比对时，所述高得分序列对匹配或满足某些正评估的阈值分数T。T被称为邻近字分数阈值(Altschul等，同上)。这些最初的邻近字命中值(hit)充当了开始搜索以发现含有它们的更长的HSP的种子。然后沿着每个序列的两个方向延伸所述字命中值，直到累积的比对得分可提高。对于核苷酸序列，使用参数M(—对匹配残基的奖励分；总是〉0)和N(错配残基的罚分；总是O)来计算累积的得分。对于氨基酸序列，使用评分矩阵来计算累积的得分。在下述情况时停止在每个方向上字命中值的延伸累积的比对得分从其达到的最大值下降了量X;由于一个或多个负得分残基比对的积累，累积的得分达到零或低于零；或到达任何一个序列的结尾。BLAST算法的参数W、T和X决定了比对的灵敏性和速度。BLASTN程序(对于核苷酸序列)默认使用的是字长(W)ll,期望(E)IO，M=5,N=-4，比较两个链。对于氨基酸序列，BLASTP程序默认使用的是，字长(W)3，期望(E)IO，和BLOSUM62评分矩阵(,XHenikoff&Henikoff(1989)iVoc.7Va//.89:10915)。除了计算百分比序列同一性之外，BLAST算法还进行两个序列之间的相似性统计学分析(参见，例如，Karlin&Altschul(1993)iVoc.iVa".爿c^/.90:5873-5787)。BLAST算法提供的一种相似性测量是最小求和概率(P(N)),其提供了在两个核苷酸或氨基酸序列之间可能偶然存在匹配的概率指示。例如，如果在测试核酸与参考核酸比较时最小求和概率低于约0.1,更优选低于约0.01，和最优选低于约0.001时，认为核酸与参考序列相似。"环状变换蛋白"是这样的，在蛋白的天然/原始末端相连接，且得到的环状蛋白在另一个点处打开，以生成新的C-和N-末端。环状变换蛋白不需要通过实际连接末端并在另一个点处打开来生成，但是可以从头合成/表达，具有与环状变换变体相同的序列。当在第一种蛋白的C-末端部分的片段与在第二种蛋白的N-末端部分的片段相匹配，且在第一种蛋白的N-末端部分的片段与在第二种蛋白的C-末端部分的片段相匹配时，两种蛋白通过环状变换(CP)相关联。鉴别环状变换的方法是本领域技术人员已知的(麥^，例如，Uliel爭(1999)B/o/"/o歷to，15(11):930-936)。附图简述图1A、1B和1C显示，与野生型小鼠(WT)相比，不存在LDL受体(0)01-/-)的小鼠具有加厚的脑微动脉。图1A:小的微动脉的壁厚度(15-40pm直径)；图1B:中等微动脉的壁厚度(41-80|nm直径)；图1C:大的微动脉的壁厚度(81-160|am直径)。图2显示了用D4F和"杂乱的"D4F处理的喂饲西方饮食的LDR-/-小鼠的T字型迷宫连续改变任务(T-CAT)的结果。图3显示了用D4F和杂乱的(scD-4F)处理的喂饲西方饮食的LDR-/-小鼠的T字型迷宫连续改变任务(T-CAT)的结果，表达为百分比改变。图4解释了由D4F处理在T字型迷宫试验中的提高。图5显示，经口DMPC提高喂饲西方饮食的LDL受体无效小鼠的血管反应性。图6A-6C显示，与喂饲食物(chow)的野生型小鼠(i^4)相比，喂饲食物的LDL受体无效小鼠(11=4)的脑微动脉壁厚度(在H&E切片上测量)增加，并在添加西方々大食后进一步增加(11=4)。图6A显示了腔直径为15-40nm的微动脉的血管壁厚度。图6B显示了腔直径为41-80|am的微动脉的血管壁厚度。图6C显示了腔直径为81-160pm的微动脉的血管壁厚度。条线图显示了平均值士SEM。WT,野生型小鼠；LDL-/-食物，喂饲食物饮食的LDL受体无效小鼠；LDL-/-西方饮食，喂伺西方饮食6周的LDL受体无效小鼠。图7A-7G显示，用D-4F而不是杂乱的D-4F处理的喂饲西方饮食的LDL受体无效小鼠的脑微动脉壁厚度(在H&E切片上测量)减少。给LDL受体无效小鼠喂饲西方饮食6周，且使其接受溶于它们的饮用水中的300pg/mL的D-4F(n=15)，或溶于它们的饮用水中的300pig/mL的杂乱的D-4F(ScD-4F)(n=15)。图7A显示了腔直径为10-20pm的微动脉的血管壁厚度。图7B显示了腔直径为21-50pm的微动脉的血管壁厚度。图7C显示了腔直径为51-100pm的微动脉的血管壁厚度。图7D显示了小鼠的微动脉腔直径。图7E显示了直径为10-20|Lim的微动脉的壁厚度除以腔的直径。图7F显示了直径为21-50pm的微动脉的壁厚度除以腔的直径。图7G显示了直径为51-100|im的樣￡动脉的壁厚度除以腔的直径。条线图显示了每组15只小鼠的平均值土SEM。图8A-8E显示，通过给LDL受体无效小鼠喂饲西方饮食，增加脑微动脉平滑肌a-肌动蛋白，且其通过用D-4F而不是杂乱的D-4F减少。图8A:给LDL受体无效小鼠喂祠食物(11=IO)或西方饮食(WD)(11=10)6周，将它们的脑微动脉进行对平滑肌a-肌动蛋白的染色，计算每个微动脉的壁腔比。显示的值是每组IO只小鼠的平均值士SEM。图8B-8E.图7和该图的图A所述的小鼠脑微动脉对平滑肌a-肌动蛋白进行染色。图8B:对平滑肌oc-肌动蛋白染色的脑微动脉实例。图8C:图7小鼠的腔直径为10-20iim的微动脉的壁腔比。图8D:图7小鼠的腔直径为21-50pm的微动脉的壁腔比。图8E:图7小鼠的腔直径为51-100pm的微动脉的壁腔比。条线图显示了每组15只小鼠的平均值±SEM。图9A-9G显示了T字型迷宫连续改变任务(T-CAT)中LDL受体无效小鼠随着饮食和治疗而变化的表现。图9A-9D:通过T-CAT测试图8A所述小鼠的空间记忆表现。图9A:测定自发变化的数目。数据是每组IO只小鼠的15个试验的平均值士SEM。图9B:测定自发变化百分比。数据是每组IO只小鼠的15个试验的平均值士SEM。图9C:测定与50%随机选择不同的自发变化比率。数据是每组IO只小鼠的15个试验的平均值士SEM。图9D:测定完成试验所需的时间。数据是每组10只小鼠的15个试验的平均值士SEM。图9E-9G:如上所述，通过T-CAT测试图7和8B-8E所述小鼠的空间记忆表现。图9E:测定自发变化的数目。数据是每组15只小鼠的15个试验的平均值士SEM。图9F:测定百分比自发变化。数据是每组15只小鼠的15个试验的平均值土SEM。图9G:测定与50%随机选择不同的自发变化比率。数据是每组15只小鼠的15个试验的平均值士SEM。详述本发明涉及令人惊奇的发现，即比甚至最小动脉更小的血管(即微动脉)加厚，变得功能异常，并造成对如脑和肾的不同组织的终末器官损害。本发明提供了改善微动脉的结构和功能、并保持诸如脑和肾的终末器官的功能的方法。我们推理，我们在大动脉中已经研究的异常是否能扩展到小动脉，甚至到更小的血管，即微动脉。微动脉是直径小于约200pm、更一般地小于约100|um的血管。我们还假设，如果在大动脉(Navab爭(2002)C7腦/a"ow,105:290-292;VanLenten爭(2002)C/ra/a"ow，106:1127國1132)和小动脉(Ou爭(2003)C/rc由/ow,107:2337-2341)中观察到apoA-I模拟肽(D-4F)的有益作用，则在微动脉中可能也会观察到有益作用。我们在此报道，与野生型相比，LDL受体无效小鼠的直径范围为10-100|um的脑孩i动脉壁加厚，且该加厚会纟皮西方饮食恶化，并与在T字型迷宫连续改变任务中降低的表现有关。脑微动脉壁厚度的增加，部分地归因于脑微动脉平滑肌a-肌动蛋白含量的增加，且被D-4F治疗显著改善。用D-4F治疗喂饲西方饮食的LDL-受体无效小鼠，似乎独立于血浆脂质和微动脉腔直径地降低脑微动脉壁厚度，并提高空间记忆。因此，i人为使用本文所述D-4F、L-4F和其它活性剂肽有效地改善微动脉的结构和/或功能，从而改善特征在于受损的微动脉结构和/或功能的状况的一种或多种症状。这样的状况包括，例如，受损的神经学功能(例如，与阿尔茨海默病、帕金森病、衰老有关的记忆丧失、中风有关的记忆丧失、Benswanger氏病等相关)、受损的肾功能、受损的泡功能等。在某些实施方案中，本发明因而提供了通过施用一种或多种试剂来改善微动脉的结构和功能的新方法，所述试剂隔离和/或去除和/或破坏炎症性脂质，并将促炎高密度脂蛋白(HDL)转化成抗炎的，或使抗炎的HDL更抗炎。这些活性剂包括某些含有A类两亲性螺旋的肽(參jE，例如，美国专利6,664,230,PCT公开WO2002/15923，和WO2004/034977，和共同未决申请USSN:09/896,841、10/187,215、10/273,386和10/423,830,其在此引作参考)，含有G*两亲性螺旋的肽(參A,例如，PCT公开WO03/086,326和共同未决美国申请USSN10/120,508，其在此引作参考)，分子量小于900道尔顿的短肽和非肽，它们在乙酸乙酯中的溶解度是至少4mg/mL,且可溶于pH7.0的含水緩冲液，当在含水环境中接触磷脂时，形成直径约7.5nm的颗粒，并形成堆积的双分子层，该双分子层的尺寸量级是3.4-4.1nm，堆积中的双分子层之间的间隔是约2nm(分别#^￡，例如，PCT/US2004/026288、共同未决美国申请USSN10/649,378和10/913,800和共同未决美国申请USSN60/600,925,其在此引作参考)；和经口合成磷脂，其中sn-l和sn-2位置相同，且含有至少3个碳(參！，例如，共同未决美国申请09/539,569和09/994,227,和PCT公开WO01/75168，其在此引作参考)。在某些实施方案中，本发明通过给哺乳动物(例如，人)施用一种或多种本文所述活性剂(肽、肽模拟物、脂质、小有机分子等)来实现。试剂优选地在足以改善微动脉的结构和/或功能的剂量或剂量方案中施用，优选地微动脉具有小于约200jLim的直径，更优选地具有小于约160|im的直径，更优选地具有小于约80pm的直径，且最优选地具有小于约50nm或40pm的直径。I.活性剂许多种活性剂适用于治疗一种或多种上述适应症。这些试剂包括但不限于A类两亲性螺旋肽，在非极性面上具有芳族或脂族残基的apoA-I的A类两亲性螺旋肽模拟物，小肽，包括五肽、四肽、三肽、二肽和氨基酸对，八？0-(0*肽)，和肽一莫拟物，例如，如下所述。A)A类两亲性螺旋肽在某些实施方案中，在本发明的方法中使用的活性剂包括A类两亲性螺;旋肽，例如如美国专利6,664,230和PCT^>开WO02/15923和WO2004/034977所述。已经发现，包含A类两亲性螺旋的肽("A类肽")，除了能减轻动脉粥样硬化的一种或多种症状外，也可以用于治疗一种或多种本文所述的其它适应症。A类肽的特征在于a-螺旋的形成，这造成极性和非极性残基的分离，从而形成极性和非极性面，在极性-非极性界面处存在带正电荷的残基，而在极性面的中心处存在带负电荷的残基(參^，例如，Anantharamaiah(1986)Af"Zz.五w^mo/，128:626-668)。应当指出，apoA-I的第四个外显子，当折叠为3.667残基/转角时，生成A类两亲性螺旋结构。一个A类肽称为18A(參^S,例如，Anantharamaiah(1986)Me仇五wzywo/，128:626-668)，如本文描述进行修饰，以产生经口施用且在状方^高度有:的肽。不限^特定的理论,、据信:本发明的i可通过获得种子分子以体内方式起作用，所述种子分子减轻LDL的氧化。我们确定，在18A的疏水面上提高Phe残基的数目，理论上会提高月旨质亲和力,如通过Palgunachari爭(1996)y^/en,osc/erow、，T7^ow6a^，&^xscw/wAo/ogy16:328-338描述的计算测定的。理论上，在18A的非极性面上用Phe进行系统性的残基置换，将产生六种肽。具有另外的2、3和4个Phe的肽，将分别具有理论上的脂质亲和力(人)值13、14和15个单位。然而，如果另外的Phe从4个提高到5个，M直将跃升四个单位(到19X单位)。增加到6或7个Phe将产生不太显著的提高(分别到20和21X单位)。生产了许多这样的A类肽，其包括称作4F、D4F、5F和D5F的肽等。各种A类肽抑制动脉粥样硬化-易感小鼠中的损害发展。另夕卜，这些肽在减轻本文所述各种病理学的一种或多种症状方面，显示出变化的、但是显著程度的功效。在表1中例举了许多这样的肽。表l.用于本发明的解释性A类两亲性螺旋肽。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>Ac-E-W-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-NH220ac_a_f-Y-D-K-V-A-E-K-Ij-K-E-a-F-nh221Ac-A-F丽Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-nh222Ac-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-:NH223Ac-A-F-Y-D-K-F-F-E-K-F-K-E-F-F-NH224Ac-A-F-Y-D-K-F-F-E-K-F-K-E-F-F-nh225Ac-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-nh226Ac-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-I)-K-E-F-F-nh227Ac-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-A-F-nh228AC-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-L-K-E-F-F-鹏29AC-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-F-F-nh230Ac-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-NH231Ac-L_F-Y-E_K-V-L-E-K-F-K_E_A-F-nh232Ac_A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-NH233AC-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-F-F-nh234Ac-A-F-Y-D-K-V-F_E_K_F-K_E_A_F-NH235Ac-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-Ii-K-E-F-F-:NH236Ac-A-F-Y-D-K-V-A-E_K_F_K-E_F-F_NH237Ac-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-:NH238Ac-D-W-L-K-A-L-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E_A-L-NH239Ac_D_W_F_K-A-F-Y-E-K'-V-A-E-K-L-K_E-F_F-NH240Ac-D-W-F-K-A-F-Y-E-K-F-F-E-K-F-K-E-F-F-nh2"Ac-E-W-Ij-K-A-L-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-A-L-nh242Ac-E-W-L-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-A-F-NH243AC-E-W-F-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-Ij-K-E-F-F-NH244AC-E-W-L-K-A-F-Y-E-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F_NH245Ac-E-W-L-K-A-F-Y-E-K-F-F-E-K-F-K-E-F-F-nh246Ac-E-W-F-K-A-F-Y-E-K_F-F_E_K-F_K_E-F-F_NH247Ac-D-F-L-K-A-W-Y-D-K-V-A-E-K-L-K-E-A-W-nh248AC-E-F-L-K-A-W-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-A-W-NH249AC-D-F-W-K-A-W-Y-D-K-V-A-E-K-Ij-K-E-W-W-NH250Ac-E-F-W-K-A-W-Y-E-K-V-A-E-K-L-K-E-W-W-nh251Ac-D-K-L-K-A-F-Y-D-K-V-F_E_W_A-K_E-A-F_NH252Ac-D-K-W-K-A-V-Y-D-K-F-A-E-A-F-K-E-F-L-,53AC-E-K-L-K-A-F-Y-E-K-V-F-E-W-A-K_E_A_F-NH254Ac-E-K-W-K-A-V-Y-E-K-F-A-E-A_F_K-E-F_L-NH255Ac-D-W-Li-K-A-F-V_D-K_F_A-E_K-F-K_E_A-Y-NH256Ac-E-K-W-K-A-V-Y-E-K-F-A-E-A-F-K-E-F-L-nh2"Ac-D-W-Li-K-A-F-V-Y-D-K-V-F-K-Ij-K-E-F-F-NH258ac-e-w-l-k-a-f-v-y-e-k-v-f-k-l-k-e-f-f-nh259ac-d-w-l-r-a-f-y-d-k-v-a-e-k-l-k-e-a-f-nh260ac-e-w-l-r-a-f-y-e-k-v-a-e-k-l-k-e-a-f-nh261ac-d-w-l-k-a-f-y-d-r-v-a-e-k-l-k-e-a-f-nh262ac-e-w-l_k-a_f_y_e_r-v_a-e_k_l-k_e-a-f-nh263ac-d-w-l-k-a-f-y-d-k-v-a-e-r-l-k-e-a-f_nh264ac-e-w-:l-k-a-f-y-e-k-v-a-e-r-:l-k-e-a-f-朋265Ac-D-W-L-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-Ii-R-E_A-F_NH266ac-e-w-l-k-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-R-E-A-F-NH267ac-d-w-l-k-a-f-y-d-r-v-a-e-r-l-k-e_a-f_nh268Ac-E-W-!L-K-A-F-Y-E-R-V-A-E-R-L-K-E-A-F-細2的Ac-D-W-L-R-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-Ii-R-E-A-F-NH270AC-EHR-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-L-R-E-A-F-NH;371Ac-D-W-L-R-A-F-Y-D-R-V-A-E-K-L-K-E-A-F-NH272Ac-E-W-L-R-A-F-Y-E-R-V-A-E-K-L-K-E-A-F-NH273Ac-D-W-L-K-A-F-Y-D-K_V-A_E-R-L-R-E-A-F-鹏74Ac-E-W-L_K-A_F-Y-E-K-V-A-E-R-L-R-E-A-F-NH275ac-d-w-l-r-A-F-Y-f)-K-V-a-e-r-l-k-e-a-f-,76ac-e-w-l-r-a_f_y_e-k_v-a_e-r-l-k-e-a-f-NH277d-w-l-k-a-f-y-d-k-v-a-e-k-l-k-e-a-f-p-d-w-78l-k-a-f-y-d-k-v-a-e-k-l-k-e-a-fd-w-l-k-a-f-y-d-k-v-a-e-k-l-k-e-f-f-p-d-w-79l-k-a-f-y-d-k-v-a-e-k-l-k-e-f-fD-W-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-Ij-K-E-A-F-p-D-W-80F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-Ii-K-E-A-Fd-k-l-k-a-f-y-d-k-v-f-e-w-a-k-e-a-f-p-d-k-81l-k-a-f-y-d-k-v-f-e-w-l-k-e-a-fd-k_w-k_a-v-y-d-k_f-a-e-a-f-k-e-f-l-p-d-k-82w-k-a-v-y-d誦k-f-a-e-a-f-k-e-f-ld-w-f-k-a-f-y-d-k-v-a-e-k-f-k-e-a-f-p-d-w-83f-k-a-f-y-d-k-v-a-e-k-f-k-e-a-fd-w-l-k-a-f-v-y-d-k-v-f-k-l-k-e-p-f-p-d-w-84L-K-A-F-V-Y-D-K-V-F-K-Li-K-E-F-FD-W-Ij-K-A-F-Y-D-K-F-A-E-K-F-K-E-F-F-p-D-W-85Ij-K-A-F-Y-D-K-f-A-e-K-f-K-e-f-fAc-E-w-F-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-朋286Ac-D-W-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-朋28<7Ac-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-NH288Ac-F-K-A-F-Y-E-K-V-A-E-K-F-K-E-MH289nma-f-k-a-f-y-D-k-v-a-e-k-f-k-e-nh290nma-f-k-a-f-y-e-k-v-a-e-k-f-k-e-!nh291NMA-D-W-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E'-A-F'-NH292NMA-E-W-F-K_A-F-Y-E-K-V-A-E-K-F-K-E'陽A-F'國細293NMA-A-F-Y-D_K_V_A-E_K-F-K_E_A-F_NH294NMA_D-W-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-鹏95Ac-D-W-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-NH296NMA-D-W-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E--F-F--NH2Ac-E_W_Ij-K_A-F-Y_E-K-v-F_E-K_F-K-E--F-f--则297NMA-E-W-L-K-A-F-Y-E-K-V-F-E-K-F-K-E--F-F--NH2Ac-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-NH298NMA-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-NH2Ac-A-F-Y-E-K-V-F-E-K-F-K-E-F-F-NH299NMA_A_F-Y_E_K_V-F-E-K-F-K-E-F-F-:NH2AC-D-W-Li-K-A-F-Y-D-K-V-F-E_K-F_NH2100NMA-D-W-Ij-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-f-NH2AC-E-W-L-K-A-F-Y-E誦K-V_F-E-K-F-NH2101NMA-E-W-L-K-A-F-Y-E-K-V-F-E-K-F-NH2Ac-L-K-A-F-Y-D-K-V-F-E-K-F_K_E-NH2102NMA-L-K-A-F-Y-D-K-V-F_E-K-F-K-E_NH2Ac-L-K-A-F-Y-E-K-V-F-E-K-F-K-E-鹏103NMA-L-K一A-F-Y-E-K-V-F-E—K-F-K-E-NH2i接头标有下划线。NMA是N-曱基邻氨基苯曱酰(Anthranilyl)。在某些优选的实施方案中，所述肽包括4F((表1中的SEQIDNO:1,也称作L-4F，其中所有残基都是L型氨基酸)或D-4F(其中一个或多个残基是D型氨基酸))的变异。在任一种本文所述的肽中，C-末端和/或N-末端和/或内部残基可以净皮一个或多个本文所述封闭基团封闭。尽管解释了表l中的各种肽用乙酰基或N-曱基邻氨基苯曱酰保护氨基末端，且用酰胺基保护羧基末端，但可以去除任一个这样的保护基，和/或用另一个本文所述保护基替代。在特别优选的实施方案中，所述肽包含一个或多个本文所述D-型氨基酸。在某些实施方案中，表1肽的每个氨基酸(例如，每个对映体氨基酸)都是D-型氨基酸。还应当指出，表l不是完全地包含的。使用本文提供的教导，可以常规地生产其它适合的A类两亲性螺旋肽(例如，通过保守性或半保守性置换(例如，D被E置换)、延伸、缺失等)。因而，例如，一个实施方案利用了本文所述任何一种或多种肽(例如，由表1中SEQIDNo:2-20和39确定的肽)的截短体。因而，例如，SEQIDNO:21说明了包含来自18A的C-末端的14个氨基酸的肽，其包含一个或多个D氨基酸，而SEQIDNO:22-38说明了其它截短体。更长的肽也是适合的。这种更长的肽可能完全地形成A类两亲性螺旋，或者A类两亲性螺旋(螺旋)可以形成所述肽的一个或多个结构域。此外，本发明预期所述肽的多聚体形式(例如，多联体)。因而，例如，本文说明的肽可以被偶联在一起(直接地或经由具有一个或多个间插氨基酸的接头(例如，碳接头，或一个或多个氨基酸))。说明性的聚合肽包括18A-Pro-18A和SEQIDNO:78-85的肽，在某些实施方案中，包含一个或多个D氨基酸，更优选地每个氨基酸都是本文描述的D氨基酸，和/或具有一个或两个末端被保护。还应当明白，除了本文特别解释的肽序列以外，本发明也预见到每种这样的肽的反向-和反向-反转形式。在反向形式中，序列的方向是相反的。在反转形式中，组成氨基酸的手性是相反的(即，L型氨基酸变成D型氨基酸，且D型氨基酸变成L型氨基酸)。在反向-反转形式中，氨基酸的次序和手性都是相反的。因而，例如，D4F肽(DWFKAFYDKVAEKFKEAF,SEQIDNO:5，其中氨基末端是在天冬氨酸(D)处，且羧基末端是在苯丙氨酸(F)处)的反向形式具有相同的序列，但是氨基末端是在苯丙氨酸处，而羧基末端是在天冬氨酸处(即，FAEKFKEAVKDYFAKFWD,SEQIDNO:444)。当D4F肽包含所有D氨基酸时，反向-反转形式具有上述的序列(SEQIDNO:444)，且包含所有L型氨基酸。因而，例如，4F和Rev-4F是彼此的镜像，具有相同的极性和非极面分离，在极性-非极性界面处存在带正电荷的残基，且在极性面的中心处存在带负电荷的残基。相同氨基酸聚合物的这些镜像在极性和非极性面的分离方面是相同的，在极性-非极性界面处存在带正电荷的残基，而在极性面的中心处存在带负电荷的残基。关于反向和反向-反转肽的讨i仑，(参见，例如，Chorev和Goodman,(1995)776rec/2，13:439-445)。当提及序列且没有特别指出方向时，该序列可以视作代表氨基至羧基方向的氨基酸序列，反向形式(即，羧基至氨基方向的氨基酸序列)，其中L氨基酸被D氨基酸置换或D氨基酸被L氨基酸置换的反向形式，和其中次序相反且氨基酸手性相反的反向-反转形式。还应当明白，除了本文特别解释肽序列以外，本发明也预见到这些肽的环状变换(CP),和/或这些肽的反向-、反转-或反向-反转形式的环状变换。肽的环状变换是这样的肽，它具有与通过下述方式产生的肽相同的氨基酸序列连接原始肽的氨基和羧基末端，打开这样形成的环状肽，从而形成新的氨基和羧基末端。B)在非极性面具有芳族或脂族残基的apoA-I的其它A类两亲性螺旋肽模拟物。在某些实施方案中，本发明还提供了修饰的A类两亲性螺旋肽。某些优选的肽在非极性面的中心掺入一个或多个芳族残基，例如3F"(如在4F中存在的)，或在非极性面的中心掺入一个或多个脂族残基，例如3F、参见，例如，,2。不限于特定的理论，我们相信在肽3F"的非极性面上的中心芳族残基，由于在非极性面的中心处兀电子的存在，允许水分子穿透接近肽-脂质复合物的疏水脂质烷基链，其反过来使氧种类(例如脂质氢过氧化物)能够进入，保护它们避开细胞表面。类似地，我们还相信在非极性面的中心带有脂族残基的肽，例如，3F171,将类似但不完全如3F"—样有效地起作用。优选的肽将促炎HDL转化成抗炎HDL,或使抗炎HDL抗炎性更强，和/或降低LDL诱导的动脉壁细胞产生的单核细胞趋化活性，所述作用等于或大于D4F或表1所示的其它肽。表2.某些优选肽的实例<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>还有一个令人惊讶的发现是，由最少三个氨基酸组成的某些小肽，优选地(但不是必要地)一个或多个所述氨基酸是氨基酸的D-立体异构体，且具有疏水结构域以允许脂质蛋白相互作用，和亲水结构域以允许一定程度的水溶性，也具有显著的抗炎性质，且用于治疗一种或多种本文所述病理学。"小肽"的长度范围通常是2个氨基酸至约15个氨基酸，更优选地约3个氨基酸至约10或11个氨基酸，且最优选地约4至约8或IO个氨基酸。在各种实施方案中，肽的一般特征是，具有疏水末端氨基酸，或通过附着一个或多个疏水"保护"基团被疏水化处理的末端氨基酸。各种"小肽"记载在2003年8月26日提交的共同未决申请USSN10/649,378中，2004年8月6日提交的USSN10/913,800中，和PCT申请PCT/US2004/026288中。在某些实施方案中，肽可以以下式I为特征X^X2画X3n-X4I其中，n是0或l，Xi是疏水氨基酸和/或带有疏水保护基，乂4是疏水氨基酸和/或带有疏水保护基；且当n是0时，X"是酸性或碱性氨基酸；当n是1时X2和X3独立地是酸性氨基酸、碱性氨基酸、脂族氨基酸或芳族氨基酸，从而当X"是酸性氨基酸时，乂3是碱性氨基酸、脂族氨基酸或芳族氨基酸；当xz是碱性氨基酸时，乂3是酸性氨基酸、脂族氨基酸或芳族氨基酸；和当X"是脂族或芳族氨基酸时，X3是酸性氨基酸或碱性氨基酸。更长的肽(例如，最多达10、11或15个氨基酸)也是本发明的范围内预期的。通常，所述更短的肽(例如，根据式I的肽)的特征是酸性的、碱性的、脂族的、或芳族的氨基酸，所述更长的肽的特征是包含两个或更多个这种类型的氨基酸的酸性的、碱性的、脂族的或芳族的结构域。l)活性小肽的功能特性本发明的一个令人惊讶的发现是，许多物理性质预测本发明的小肽(例如，少于10个氨基酸，优选的少于8个氨基酸，更优选的为约3个到约5或6个氨基酸)使HDL抗炎性更强和减轻哺乳动物的动脉粥样硬化和/或以炎性反应为特征的其它病理学的能力。所述物理性质包括在乙酸乙酯中的高溶解度(例如，大于约4mg/mL),和在pH7.0的水性緩沖液中的溶解度。在接触磷脂例如1，2-双十四烷酰基-sn-甘油基—3-磷酸胆碱(DMPC)后，在水性环境中，特别有效的小肽诱导或参与直径约7.5nm(±0.1nm)的颗粒的形成，和/或诱导或参与堆积的双分子层的形成，所述双分子层尺寸量级为3.4到4.1nm，堆积中的双分子层之间的间隙大约2nm,和/或还诱导或参与约38nm的泡状结构的形成)。在某些优选的实施方案中，所述小肽具有低于约900Da的分子量。因而，在某些实施方案中，本发明预期改善本文所述适应症/病理学(例如，炎性状况)的一种或多种症状的小肽，其中所述肽长度范围为约3个到约8个氨基酸，优选地为约3个到约6个或7个氨基酸，且更优选地为约3个到约5个氨基酸，可以以大于约4mg/mL的浓度溶于乙酸乙酯；可溶于pH7.0的水性緩冲液当在水性环境中与磷脂接触时，形成直径约7.5nm的颗粒，和/或形成堆积的双分子层，双分子层尺寸量级为3.4到4.1nm,堆积中双分子层之间的间隔大约2nm;具有低于约900道尔顿的分子量；将促炎HDL转化为抗炎HDL,或使抗炎HDL抗炎性更强；和不具有氨基酸序列Lys-Arg-Asp-Ser(SEQIDNO:235),尤其其中Lys-Arg-Asp和Ser都是L氨基酸。在某些实施方案中，这些小肽保护磷脂免于氧化剂的氧化。虽然这些小肽不必被这样限制，但在某些实施方案中，这些小肽可以包4舌如下所述的小肽。2)三肽。已经发现，可以合成某些三肽(3个氨基酸的肽)，其显示出本文描述的期望的性质(例如，将促炎HDL转化成抗炎HDL的能力，降低LDL诱导的动脉壁细胞产生的单核细胞趋化活性的能力，提高前-|3HDL的能力，等)。在某些实施方案中，所述肽的特征是其中N是零的式I,下面显示为式IIX、X2-X4II其中末端氨基酸(乂1和X"是疏水的，这是因为疏水侧链，或是因为侧链或C和/或N末端被一个或多个疏水保护基封闭(例如，N-末端被Boc-、Fmoc-、烟酰(nicotinyl)國等封闭，而C-末端被0Bu)画OfBu等封闭)。在某些实施方案中，乂2氨基酸是酸性的(例如，天冬氨酸、谷氨酸，等)或碱性的(例如，组氨酸、精氨酸、赖氨酸，等)。所述肽可以全部是L氨基酸，或包括一个或多个或全部的D氨基酸。本发明的某些优选的三肽包括但不限于表3中所示的肽。表3.带有疏水封闭基团和酸性、碱性或组氨酸中心氨基酸的某些优选的三肽的实例。X1X2XJX4SEQIDNOBoc-Lys(eBoc)ArgSer(出u)-O氾u106Boc-Lys(eBoc)ArgThr(fBu)-O迅u107Boc-TrpArgDe-O出u108Boc-TipArgLeu-O氾u109Boc-PheArglie—O氾u110Boc-PheArgLeu-O出umBoc-Lys(eBoc)GluSer(出u)-O出u112Boc-Lys(eBoc)GluThr(舰)-Offiu113Boc-Lys(eBoc)AspSer(fBu)-O出u114Boc-Lys(sBoc)AspThr(fBu)-O出u115Boc-Lys(sBoc)ArgSe柳u)-O出u116Boc-Lys(eBoc)ArgThr(出u)-0/BumBoc-LeuGluSer(出u)-O氾u118Boc-LeuGluThr(出u)-Offiu119Fmoc-TrpArgSer(出u)-O出u120Fmoc-TrpAspSer(Bu)-O出u121Fmoc-TrpGluSer(出u)-OriBu122Fmoc-TrpArgSer(出u)-O出u123Boc-Lys(eBoc)GluLeu-O出u124Pmoc-LeuArgSer(出u)-O出u125Fmoc-LeuAspSer(出u)-O氾u126Fmoc-LeuGluSer(出u)-O出u127Fmoc-LeuArgSer(出u)-O出u128Fmoc-LeuArgThr(出u)-O氾u129Boc-GluAspTyr(fBu)-O迅u130Fmoc-Lys(eFmoc)ArgSer(出u)-O出u131Fmoc-TrpArgIle-OrfBu132Fmoc-TrpArgLeu-O出u133Fmoc-PheArgIle-OfBu134Fmoc-PheArgLeu-O出u135Boc-TrpArgPhe-O出u136Boc-TrpArgTyr-Offiu137Fmoc-TrpArgPhe-O出u138Fmoc-TrpArgTyr-O氾u139Boc-Orn(油oc)ArgSer(出u)-O出u140烟酰Lys(eBoc)ArgSer(出u)-Offiu141烟酰Lys(sBoc)ArgThr(出u)-O出u142Fmoc-LeuAspThrOBu)-OtBu143Fmoc-LeuGluThr(fflu)-OtBu144Fmoc-LeuArgThr(出u)-OtBu145<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>Fmoc-TrpArgThr(出u)-OtBu187Fmoc-TrpAspThr(出u)-OtBu188Fmoc-TrpGluThr(出u)-OtBu189Boc-PheArg加rLeu-OtBu190Boc-PheGlunorLeu-OtBu191Fmoc-PheAspnorLeu-OtBu192Boc-GluHisTyr(出u)-O出u193Boc-LsuHisSer(出u)-O出u194Boc-LeuHisThr(出u)-O氾u195Boc-Lys(eBoc)HisSer(出u)-O氾u196Boc-Lys(sBoc)HisThr(出u)-O出u197Boc丄ys(eBoc)HisLeu-O氾u198Boc-Lys(sFmoc)HisSer(出u)-OtBu199Boc-Lys(sFmoc)HisThr(出u)-OtBu200Boc-Lys(eFmoc)His201Boc-Orn(3Boc)HisSer(出u)-O出u202Boc-Om(5Fmoc)HisThr(fBu)-OtBu203Boc-PheHislb-OfBu204Boc-PheHisLeu-O氾u205Boc-PheHisnorLeu-OtBu206Boc-PheLysLeu-Offiu207Boc-TrpHisDe-O岀u208Boc-TrpHisLeu-O出u209Boc-TrpHisPhe-O氾u210Boc-TrpHisTyr-OfBu211Boc-PheLysLeu-O氾u212Fmoc-Lys(EFmoc)HisSer(氾u)-OtBu213F咖c-Lys(eFmoc)HisThr(出u)-OtBu214Fmoc-Lys(eFmoc)HisLeu-O出u215Fmoc-LeuHisSer(氾u)-OfBu216Fmoc-LeuHisThr(出u)-OtBu217Fmoc丄ys(eBoc)HisSer(riBu)-OtBu218Fmoc-Lys(sBoc)HisThr(出u)-OtBu219Fmoc-Lys(eBoc)His220Fmoc-Lys(eFmoc)HisSer(fBu)-O迅u221Fmoc-Lys(eF咖c)HisThr(迅u)-OtBu222Fmoc-norLeuHisSer(出u)-OtBu223Fmoc-PheHisIle-O氾u224Fmoc-PheHisLeu-O出u225Fmoc-PheHisnorLeu-OtBu226Fmoc-TrpHisSer(fBu)-O出u227Fmoc-TrpHisUe-O出u228Fmoc-TrpHisLeu陽O氾u229Fmoc-TrpHisPhe-O出u230Fmoc-TrpHisTyr-O出u231Fmoc-TrpHisThr(出u)-OtBu232烟酰Lys(eBoc)HisSer(fBu)-O出u233烟酰Lys(eBoc)HisThr(出u)-O出u234虽然表3的肽是用特定的保护基来说明的，但应当指出，这些基团可以被本文描述的其它保护基置换，和/或一个或多个示出的保护基可—皮除去。3)具有中心酸性和碱性氨基酸的小肽。在某些实施方案中，本发明的肽为四个氨基酸到约十个氨基酸。末端氨基酸通常是疏水的，这是因为疏水侧链，或是因为末端氨基酸带有一个或多个疏水保护基，末端氨基酸(Xi和X"是疏水的，这是因为疏水侧链，或是因为侧链或C和/或N末端被一个或多个疏水保护基封闭(例如，N-末端被Boc-、Fmoc-、烟酰-等封闭，且C-末端被0Bu)-O出u等封闭)。通常，所述肽的中心部分包含碱性氨基酸和酸性氨基酸(例如，在4聚体中)，或在更长的分子中包含碱性结构域和/或酸性结构域。这些四聚体可以由式I代表，其中Xi和乂4是疏水的和/或带有本文描述的疏水保护基，且当乂3是碱性的时X"是酸性的，或当乂3是酸性的时XS是碱性的。所述肽可以全部是L氨基酸，或包括一个或多个或全部的D氨基酸。本发明的某些优选的四肽包括但不限于表4中所示的肽。<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>Fmoc-TrpArgGluSer(出u)-OfBu262Boc-Lys(eBoc)GluArgLeu-O出u263F迈oc-LeuArgAspSer(氾u)-O出u264Fmoc-LeuAspArgSer(迅u)-O迅u265Fmoc-LeuGluArgSe柳u)-OfBu266Fmoc-LeuArgGluSer(fBu)-O出u267Fmoc-LeuArgAspThr(ffiu)-O出u268Boc-GluAspArgTyr(出u)-O出u269Fmoc-Lys(eFmoc)ArgAspSer,)-OfBu、270Fmoc-TrpArgAspIle-O出u、271Fmoc-TrpArgAspLeu-Offlu272Fmoc曙PheArgAspDe-OfBu273F咖c-PheArgAspLeu-O出u274Boc-TrpArgAspPhe-O出u275Boc-TrpArgAspTyr-O岀u276Fmoc-TrpArgAspPhe-O出u277Fmoc-TrpArgAspTyr-O出u278Boc-Orn(SBoc)ArgGluSer(出u)-O出u279烟酰Lys(eBoc)ArgAspSer(氾u)-O出u280烟酰Lys(eBoc)ArgAspThr(出u)-O出u281Fmoc-LeuAspArgThr(出u)-OtBu282Fmoc-LeuGluArgThr(出u)-OtBu283Fmoc-LeuArgGluThr(fBu)-OtBu284Fmoc-norLeuArgAspSer(氾u)-OtBu285Fmoc-norLeuAspArgSer(出u)-OtBu286Fmoc-norLeuGluArgSer(出u)-OtBu287Fmoc-norLeuArgGluSer(迅u)-OtBu288Fmoc-Lys(eBoc)ArgAspSer(出u)-OtBu289Fmoc-Lys(eBoc)ArgAspTh柳u)-OtBu290Fmoc-Lys(eBoc)GluArgSer(出u)-Otfiu291Rmoc-Lys(sBoc)GluArgTh柳u)-QtBu292Fmoc-Lys(eBoc)AspArgSer(Bu)-OtBu293Fmoc-Lys(sBoc)AspArgThr(出u;)-OtBu294Fmoc丄ys(EBoc)ArgGluSer(出u)-OtBu295Fmoc-:Lys(eBoc)ArgGluThr(氾u)-OtBu296Fmoc-Lys(sBoc)GluArg297Fmoc-Lys(eBoc)ArgGlu298F咖c-Lys(eFmoc)ArgAspThr(出u)-OtBu299Fmoc-Lys(eFmoc)GluArgSer(出u)-OtBu300Fraoc-Lys(sPmoc)GluArgThr(沼u)-OtBu301Fmoc-Lys(ePmoc)AspArgSer(fBu)-Offlu302F咖c-Lys(eFmoc)AspArgThr(氾u)-OtBu303Fmoc-Lys(ePmoc)ArgGluSer(氾u)-OtBu304Fmoc-Lys(sFmoc)ArgGluThr(出u)-OtBu305Fmoc-Lys(eFmoc))GluArg306Boc-Lys(eFmoc)ArgAspSer(氾u)-OtBu307Boc-Lys(sFmoc)ArgAspThr(出u)-OtBu308Boc-Lys(EFmoc)GluArgSer(出u)-OtBu309Boc-Lys(eFmoc)GluArgThr(出u)-OtBu310Boc-Lys(EFmoc)AspArgSer(出u)-OtBu311Boc-Lys(sFmoc)AspArgThr(氾u)-OtBu312Boc隱Lys(sFmoc)ArgGluSer(氾u)-OtBu313Boc-Lys(eRnoc)ArgGluTh柳u)掘u314Boc-Lys(eFmoc)GluArg315Boc-Om(5Fmoc)ArgGluSer(出u)-OtBu316Boc-Orn(5Fmoc)GluArgSer(氾u)-OtBu317Boc-Orn(5Fmoc)ArgAspSer(出u)-OtBu318Boc-Orn(SFmoc)AspArgSer(出u)-Offlu319Boc-Om(SFmoc)AspArgThr(迅u)-OtBu320Boc-Orn(5Fmoc)AigAspThr(氾u)-OtBu321Boc-Orn(5Fmoc)GluArgThr(出u)-OtBu322Boc-Orn(5Fmoc)ArgGluThr(出u)-OtBu323Fmoc-TrpAspArgIIe-OtBu324Fmoc-TrpArgGluIle^OtBu325Fmoc-TrpGluArgHe-OtBu326Fmoc-TrpAspArgLeu-OtBu327Fmoc-TrpArgGluLeu-OtBu328Fmoc-TrpGluArgLeu-OtBu329Fmoc-PheAspArgHe-OtBu330Fmoc-PheArgGluIle-OtBu331Fmoc-PheGluArgUe-OtBu332Fmoc-PheAspArgLeu-OtBu333Fmoc-PheArgGluLeu-OtBu334Fmoc-PheGluArgLeu-OtBu335Fmoc-TrpArgAspPhe-OtBu336Rnoc-TrpArgGluPhe-OtBu337Fmoc-TrpGluArgPhe-OtBu338Fmoc-TipAspArgTyr曙OtBu339F咖c-TrpArgGluTyr-OtBu340Fmoc-TrpGluArgTyr-OtBu341F迈oc-TrpArgAspThr(出u)-OtBu342Fmoc-TrpAspArgThr(fBu)-OtBu343Fmoc-TrpArgGluThr,)-OtBu344Fmoc-TrpGluAxgThr(出u)-OtBu345Fmoc陽PheArgAspnorLsu-OtBu346Fmoc-PheArgGlunorLeu-OtBu347Boc-PheLysAspLeu-OtBu348Boc-PheAspLysLeu-Offiu349Boc-PheLysGluLeu-OtBu350Boc-PheGluLysLeu-OtBu351Boc-PheLysAspIle-OtBu352Boc-PheAspLysHe-OtBu353Boc-PheLysGluIle-O但u354Boc-PheGluLysHe-OtBu355Boc-PheLysAspnorLeu-OtBu356Boc-PheAspLysnorLeu-OtBu357Boc-PheLysGlunorLeu-OtBu358Boc-PheGluLysnorLeu-OtBu359Boc-PheHisAspLeu-OtBu360Boc-PheAspHisLeu-OtBu361Boc-PheHisGluLeu-OtBu362Boc-PheGluHisLeu-OtBu363Boc-PheHisAspHe-OtBu364Boc-PheAspHisDe-OtBu365'Boc-PheHisGluIle-OtBu366Boc-PheGluHisHe-Offiu367Boc-PheHisAspnorLeu-OtBu368Boc-PheAspHisnorLeu-OtBu369Boc-PheHisGlunorLeu-OtBu370Boc-PheGluHisnorLeu-OtBu371Boc丄ys(eBoc)LysAspSer(出u)-OtBu372Boc-Lys(eBoc)AspLysSer(出u)-OtBu373Boc-!Lys(eBoc)LysGluSer(出u)-OtBu374Boc-Lys(eBoc)GluLysSer(/Bu)-OtBu375Boc-Lys(eBoc)HisAspSer(出u)-OtBu376Boc-Lys(sBoc)Boc-Lys(eBoc)Boc-Lys(eBoc)AspHisSer(氾u)-OtBu377HisGluSer(氾u)-OtBu378GluHisSer(ffiu)-OtBu379虽然表4的肽是用特定的保护基来说明的，但应当指出，这些基团可以被本文描述的其它保护基置换，和/或一个或多个示出的保护基可净皮除去。4)具有中心酸性或碱性氨基酸以及中心脂族氨基酸的小肽。在某些实施方案中，本发明的肽为四个氨基酸到约十个氨基酸。末端氨基酸通常是疏水的，这是因为疏水侧链，或是因为末端氨基酸带有一个或多个疏水保护基。末端氨基酸(乂1和乂4)是疏水的，这是因为疏水侧链，或是因为侧链或C和/或N末端被一个或多个疏水保护基封闭(例如，N-末端被Boc-、Fmoc-、烟酰-等封闭，且C-末端被0Bu)-O/Bu等封闭)。通常，所述肽的中心部分包含碱性或酸性氨基酸和脂族氨基酸(例如，在4聚体中)，或在更长的分子中包含碱性结构域或酸性结构域和脂族结构域。这些四聚体可以由式I代表，其中Xt和X"是疏水的和/或带有本文描述的疏水保护基，且当乂3是脂族的时XZ是酸性的或碱性的，或当乂3是酸性或碱性的时X"是脂族的。所述肽可以全部是L氨基酸，或包4舌一个或多个或全部的D氨基酸。本发明的某些优选的肽包括但不限于表5中所示的肽。表5.具有中心酸性或碱性氨基酸以及中心脂族氨基酸的某些优选肽的实例。<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>虽然表5的肽是用特定的保护基来说明的，但应当指出，这些基团可以被本文描述的其它保护基置换，和/或一个或多个示出的保护基可被除去。5)具有中心酸性或碱性氨基酸以及中心芳族氨基酸的小肽。在某些实施方案中，本发明的"小，，肽为四个氨基酸到约十个氨基酸。末端氨基酸通常是疏水的，这是因为疏水侧链，或是因为末端氨基酸带有一个或多个疏水保护基，末端氨基酸(X和X"是疏水的，这是因为疏水侧链，或是因为侧链或C和/或N末端被一个或多个疏水保护基封闭(例如，N-末端被Boc-、Fmoc-、烟酰-等封闭，且C-末端被(出u)-0出u等封闭)。通常，所述肽的中心部分包含碱性或酸性氨基酸和芳族氨基酸(例如，在4聚体中)，或在更长的分子中包含碱性结构域或酸'性结构域和芳族结构域。这些四聚体可以由式I代表，其中乂1和乂4是疏水的和/或带有本文描述的疏水保护基，且当乂3是芳族的时X"是酸性的或碱性的，或当乂3是酸性或>5威性的时乂2是芳族的。所述肽可以全部是L氨基酸，或包括一个或多个或全部的D氨基酸。五聚体可以由式I的微小修饰代表，其中如表6所示插入X5,且其中XS通常是芳族氨基酸。本发明的某些优选的肽包括但不限于表6所示的肽。表6.具有中心酸性或碱性氨基酸以及中心芳族氨基酸的某些优选肽的实例。<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>Boc-Lys(eBoc)ArgTipTyr(Bu)-OtBu423BoG-Lys(eBoc)ArgTyrTrp-OtBu424Boc-:Lys(EBoc)ArgTyrTrpThr(rBiO-OtBu425Boc-Lys(eBoc)ArgTyrThr(fBu)-OtBu426Boc七ys(eBoc)ArgPheThr(出u)-Offiu427Boc-Lys(eBoc)ArgTipThr(出u)-OtBu428虽然表6的肽是用特定的保护基来说明的，但应当指出，这些基团可以被本文描述的其它保护基置换，和/或一个或多个示出的保护基可4皮除去。6)在中心具有芳族氨基酸或被组氨酸隔开的芳族氨基酸的小肽。在某些实施方案中，本发明的肽的特征在于暴露于分子中心的7T电子，它允许颗粒的水合，并允许肽颗粒捕获促炎的氧化的脂质，例如脂肪酸氢过氧化物，和在sn-2位置含有花生四烯酸的氧化产物的磷脂。在某些实施方案中，这些肽由最少四个氨基酸且最多约十个氨基酸组成，优选地(但不是必要地)一个或多个所述氨基酸是氨基酸的D-立体异构体，且末端氨基酸是疏水的，这是因为疏水侧链，或是因为末端氨基酸带有一个或多个疏水封闭基团(例如，N-末端被Boc-、Fmoc-、烟酰-等封闭，且C-末端被(/Bu)-0/Bu等封闭)。不是在中心具有酸性或碱性氨基酸，这些肽通常在中心具有芳族氨基酸，或在肽的中心具有被组氨酸隔开的芳族氨基酸。本发明的某些优选的肽包括但不限于表7中所示的肽。表7.在中心具有芳族氨基酸或被一个或多个组氨酸隔开的芳族氨基酸或芳族结构域的肽的实例。<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>虽然表7的肽是用特定的保护基来说明的，但应当指出，这些基团可以被本文描述的其它保护基置换，和/或一个或多个示出的保护基可4皮除去。7)三肽和四肽的总结为了清楚，在下面的表8中概括地总结了许多本发明的三肽和四肽。表8.本发明的某些肽的一般结构。<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>护基保护基疏水侧链或疏水保脂族酸性或碱性疏水侧链或疏水护基保护基疏水侧链或疏水保酸性或碱性芳族疏水侧链或疏水护基保护基疏水侧链或疏水保芳族酸性或碱性發u水侧4连或疏7jC护基保护基疏水侧链或疏水保芳族His芳族疏水侧链或疏水护基保护基当需要更长的肽时，X和X3可以代表结构域(例如，2个或更多个指定类型的氨基酸的区域)而不是单个氨基酸。表8是解释性的，而不是限制性的。使用本文提供的教导，可以容易地鉴别其它合适的肽。8)成对的氨基酸和二肽。在某些实施方案中，本发明涉及下述发现，即某些氨基酸对，相互联合施用或连接以形成二肽，具有本文描述的一种或多种性质。因而，不限于特定的理论，据信，当所述氨基酸对相互联合施用时，如本文描述的，它们能够在体内参与或诱导微团(micelles)的形成。类似于本文描述的其它小肽，据信，肽对将在体内结合，并表现出包括在乙酸乙酯中的高溶解度(例如，大于约4mg/mL)、在pH7.0的水性緩冲液中的溶解度的物理性质。在接触磷脂例如1，2-双十四烷酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱(DMPC)后，在水性环境中，据信，所述氨基酸对诱导或参与直径约7.5nm(士0.1nm)的颗粒的形成，和/或诱导或参与堆积的双分子层的形成，双分子层尺寸量级为3.4到4.1nm,堆积中的双分子层之间的间距约2nm,和/或还i秀导或参与约38nm的泡状结构的形成)。另外，进一步相信，所述氨基酸对可以显示出一种或多种以下的生理相关的性质1.它们将促炎HDL转化成抗炎HDL，或4吏抗炎HDL抗炎性更强；2.它们降低LDL诱导的动脉壁细胞产生的单核细胞趋化活性；3.它们刺〗敫前-(3HDL的形成和循环；4.它们提高HDL胆固醇；和/或5.它们提高HDL对氧磷酶活性。所述氨基酸对可以作为独立的氨基酸施用(先后地或同时地施用，例如，在组合的制剂中)，或它们可以直接地或经由接头(例如，PEG接头、碳接头、分支的接头、直链接头、杂环接头、衍生的脂质形成的接头，等)共价地偶联。在某些实施方案中，所述氨基酸对经由肽键共价地连接以形成二肽。在各种实施方案中，虽然所述二肽通常包含各自带有附着的保护基的两个氨基酸，但本发明还预期这样的二肽，其中仅一个氨基酸带有一个或多个保护基。所述氨基酸对通常包含氨基酸，其中每个氨基酸被附着到至少一个保护基(例如，本文描述的疏水保护基)。所述氨基酸可以是D或L型。在某些实施方案中，其中所述氨基酸包含没有相互附着的对，每个氨基酸带有两个保护基(例如，表9中的分子1和2)。表9.本发明的示例氨基酸对。氨基酸对/二月太_1.Boc-Arg-OtBu*2.Boc-Glu-OtBu*3.Boc-Phe-Arg-OtBu**斗.Boc-Glu-Leu-OtBu"5.Boc-Arg-Glu-OtBu***_*这个通常联合第二氨基酸施用。**在某些实施方案中，这些二肽相互联合施用。***在某些实施方案中，这个肽单独地、或者与本文描述的其它肽之一组合施用。通过提供受保护的氨基酸对和/或二肽，然后篩选所述氨基酸对/二肽的如上所述一种或多种物理的和/或生理的性质，可以容易地鉴定出适合的氨基酸对。在某些实施方案中，本发明排除了包含天冬氨酸和苯丙氨酸的氨基酸对和/或二肽。在某些实施方案中，本发明排除了这样的氨基酸对和/或二肽，其中一个氨基酸是(-)-N-[(反-4-异丙基环己烷)羰基]-D-苯丙氨酸(纳格列奈)。在某些实施方案中，所述构成对的氨基酸独立地选自酸性氨基酸(例如，天冬氨酸、谷氨酸，等)、碱性氨基酸(例如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸，等)和非极性氨基酸(例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、曱硫氨酸，等)。在某些实施方案中，当所述第一氨基酸是酸性或碱性的时，第二氨基酸是非极性的，和当所述第二氨基酸是酸性或碱性的时，第一氨基酸是非极性的。在某些实施方案中，当第一氨基酸是酸性的时，第二氨基酸是碱性的，反之亦然(参见，例如，表10)。类似的组合可以通过施用二肽的对来获得。因而，例如在某些实施方案中，表9中的分子3和4可相互联合施用。表10.某些通常的氨基酸对/二肽。第一氨基酸第二氨基酸1，酸性碱性2.碱性酸性3.酸性非极性4.非极性酸性5.碱性非极性6.非极性碱性应当指出，这些氨基酸对/二肽是说明性的而不是限制性的。使用本文提供的教导，可以容易地确定其它适合的氨基酸对/二肽。D)Apo-J(G伞肽).在某些实施方案中，本发明发现，模仿apoJ的两亲性螺旋结构域的肽能减轻动脉粥样^哽化和/或本文所述其它病理学的一种或多种症状。载脂蛋白J具有称作球状蛋白-样的宽非极性面，或G*两亲性螺旋结构域。G类两亲性螺旋存在于球状蛋白中，并因而，得名G类。该类两亲性螺旋的特征是，它在极性面上具有随机分布的带正电荷的和带负电荷的残基，并具有狭窄的非极性面。因为狭窄的非极性面，该类不容易与磷脂结合。G+两亲性螺旋具有与G两亲性螺旋类似、但是不同的特征。与G类两亲性螺旋类似，G+类肽在极性面上具有随机分布的带正电荷的和带负电荷的残基。但是，与具有狭窄非极性面的G类两亲性螺旋不同，该类具有宽非极性面，这允许该类容易结合磷脂，且该类得名G*，以将它与G类两亲性螺旋区分开。许多合适的G+两亲性肽记载在，2002年4月5日提交的共同未决申请USSN10/120,508,2003年4月1日提交的USSN10/520,207,和2003年4月1日提交的PCT申请PCT/US03/09988中。另外，在表11中描述了本发明的许多种合适的肽，它们与3卩01的0*两亲性螺旋结构域相关。表11.用于本发明的与apoJ的G*两亲性螺旋结构域相关的优选肽。<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>但是，本发明的肽不限于apoJ的G+变体。一般而言，来自基本上任何其它蛋白(优选地，apo蛋白)的G"吉构域也是合适的。使用保护活性(例如，保护LDL免受氧化等)的测定，例如如实施例所述的，可以容易地确定这样的蛋白的具体适宜性。一些特別优选的蛋白包括蛋白的G*两亲性螺旋结构域或其变体(例如，保守置换等)，包才舌^旦不限于apoAI、apoAIV、apoE、apoCII、apoCIII等。在表12中描述了某些与G*两亲性螺旋结构域有关的优选肽，所述G*两亲性螺旋结构域与除apoJ以外的载脂蛋白有关。表12.用于本发明的与G*两亲性螺旋结构域有关的肽，所述G*两亲性螺旋结构域与除apoJ以外的载脂蛋白有关。<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>其它合适的肽包括但不限于表14的肽。表14.具有提高的疏水相的示例肽。<table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>V2W3F10-D4FAc-Asp-Val-Trp-Lys-Ala-Phe-Tyr-Asp-Lys-Phe-Ala-Glu-Lys-Phe~Lys-Glu-Ala-Phe-NH2602W3-D-4FAc-Asp-Phe-Trp-Lys-Ala-Phe-Tyr-Asp-Lys-Val-Ala-Glu-Lys-Phe-Lys-Glu-Ala-Phe-NH2603这里所述肽(V2W3A5F10，17-D-4F;V2W3F10-D-4F;W3曙D画4F)可能比原始D-4F更有效。其它合适的肽包括但不限于pL二甲基酪氨酸-D-Arg-Phe-Lys-P2(SEQIDNO:604)和P^二甲基酪氨酸-Arg-Glu-Leu-P2,其中P1和P2是本文所述的保护基。在某些实施方案中，这些肽包括但不限于Boc二甲基酪氨酸-D-Arg-Phe-Lys(OtBu)和Boc二曱基酪氨酸-Arg-Glu-Leu(OtBu)。在某些实施方案中，本发明的肽包括下述肽，其包含氨基酸序列LAEYHAK(SEQIDNO:605)或由其组成，包含至少一个D氨基酸和/或至少一个或两个末端保护基。在某些实施方案中，本发明包括改善炎性状况的一种或多种症状的A肽，其中所述肽长度范围为约3至约10个氨基酸；包含下述氨基酸序列，其序列包含与芳族或疏水氨基酸交替的酸性或碱性氨基酸；包含疏水末端氨基酸或带有疏水保护基的末端氨基酸；不是包含所有L氛基酸的序列LAEYHAK(SEQIDNO:606);其中所述肽将促炎HDL转化成抗炎HDL,和/或使抗炎HDL的抗炎性更高。还应当指出，在本文表中列出的肽不是完全包含性的。使用本文提供的教导，可以常规地生产其它适合的肽(例如，通过保守性或半保守性置换(例如，D被E置换)、延伸、缺失等)。因而，例如，一个实施方案利用了SEQIDNo:444-472鉴别出的任何一种或多种肽的截短体。更长的肽也是适合的。这种更长的肽可能完全地形成G或。*类两亲性螺旋，或者G类两亲性螺旋(螺旋)可以形成所述肽的一个或多个结构域。此外，本发明预期所述肽的多聚体型式。因而，例如，本文表中说明的肽可以被偶联在一起(直接地或经由具有一个或多个间插氨基酸的接头(例如，碳接头，或一个或多个氨基酸))。合适的接头包括但不限于脯氨酸(-Pro-)、Gly4Ser3(SEQIDNO:607)、(Gly4Ser)3(SEQIDNO:608)等。因而，根据本发明的一种示例多聚肽是(D-J336)-P-(D-J336)(即Ac-L-L-E画Q-L國N-E-Q-F-N國W-V-S-R画L-A-N-L國T-Q画G-EiL画L國E-Q-L-N-E-Q-F-N-W隱V-S-R國L國A-N-L-T-Q-G-E-NH2,SEQIDNO:609)。本发明也预见到使用"杂种"肽，其包含一个或多个G或G伞两亲性螺旋结构域和一个或多个A类两亲性螺旋。合适的A类两亲性螺旋肽记载在PCT公开WO02/15923中。因而，作为解释，一种这样的"杂种，，肽是(D-JB6)-Pro-(^F)(即Ac-L-L-E-Q-L-N-E-Q-F-N-W-V画S-R-L-A-N-L-T-Q-G-EzEzD-W-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F-NH2,SEQIDNO:610)等。使用本文提供的教导，技术人员可以常规地修饰解释的两亲性螺旋肽，以生产其它合适的apoJ变体和/或本发明的两亲性G和/或A螺旋肽。例如，可以对现有氨基酸进行常规的保守性或半保守性置换(例如，D被E置换)。使用Palgunachari爭(1996)」他"'o"/em^，77zrom6o5&,c&^xscw/"r万/o/ogy16:328-338所述的计算方法，可以预测各种置换对得到的肽的脂质亲和力的作用。可以延长或缩短所述肽，只要能保持此类螺旋结构。另外，可以进行置换，以使得到的肽与受试者物种内源生产的肽更类似。尽管在优选的实施方案中，本发明的肽使用天然存在的氨基酸或D型天然存在的氨基酸，但也预见到用非天然存在的氨基酸(例如，曱硫氨酸亚砜、曱硫氨酸曱基锍、正亮氨酸、s-氨基己酸、4-氨基丁酸、四氢异喹啉-3-羧酸、8-氨基辛酸、4-氨基丁酸、Lys(N(s)-三氟乙酰基)、a-氨基异丁酸，等)进行置换。使用计算方法，可以设计和/或评价新肽。用于鉴别和分类两亲性螺旋结构域的计算机程序是本领域技术人员众所周知的，且许多已经记载在Jones夢(1992)乂33:287-296)。这样的程序包括但不限于螺旋轮程序(WHEEL或WHEEL/SNORKEL)、螺旋网程序(HELNET、HELNET/SNORKEL、HELNET/Angle)、用于添加螺S走4仑的程序(COMBO或COMBO/SNORKEL)、用于添加螺4t网的程序(COMNET、COMNET/SNORKEL、COMBO/SELECT、COMBO/NET)、一致轮程序(CONSENSUS,CONSENSUS/SNORKEL)等。E)保护基和D残基尽管本文所述各种肽和/或氨基酸对可以没有保护基，但在某些实施方案中(例如特别对于经口施用)，它们可以带有l、2、3、4或更多个保护基。保护基可以偶联到肽的C-和/或N-末端，和/或偶联到构成肽的一个或多个内部残基上(例如，可以封闭组成氨基酸上的一个或多个R-基团)。因而，例如，在某些实施方案中，本文所述任意肽可以带有例如保护氨基末端的乙酰基和/或保护羧基末端的酰胺基。这样的"双保护的肽的一个实例是Ac-L-L-E-Q-L-N-E-Q-F-N-W-V-S-R-L-A-N-L-T-Q-G-E-NH2(具有保护基的SEQIDNO:444)，任一个或两个这样的保护基可以被消除，和/或被本文所述另一种保护基置换。不限于特定的理论，本发明发现，封闭，特别是本发明的主题肽的氨基和/或羧基末端的封闭，大大地改善了经口递送和显著地提高了血清半衰期。许多保护基适合于这种目的。这种基团包括但不限于乙酰基、酰胺和烷基基团，其中乙酰基和烷基基团对于N-末端保护是特别优选的，而酰胺基团对于羧基末端保护是优选的。在某些特别优选的实施方案中，所述保护基包括但不限于如在脂肪酸中的烷基链、propeonyl、曱酰基等。特别优选的羧基保护基包括酰胺、酯和醚形成保护基。在一个优选的实施方案中，使用乙酰基来保护氨基末端，而使用酰胺基来保护羧基末端。这些保护基增强肽的螺旋形成趋势。某些特别优选的封闭基团包括各种长度的烷基，例如，具有式CH3-(CH2)n-CO-的基团，其中n为约l到约20，优选为约l到约16或18，更优选为约3到约13，且最优选为约3到约10。在某些特别优选的实施方案中，保护基包括但不限于如在脂肪酸中的烷基链、propeonyl、曱酰基等。特别优选的羧基保护基包括酰胺、酯和醚形成保护基。在一个优选的实施方案中，使用乙酰基来保护氨基末端，而使用酰胺基来保护羧基末端。这些保护基增强肽的螺旋形成趋势。某些特别优选的保护基包括各种长度的烷基，例如，具有式CH3-(CH2)n-CO-的基团，其中n为约3到约20，优选为约3到约16,更优选为约3到约13，且最优选为约3到约10。其它保护基包括但不限于Fmoc、叔丁氧基羰基OBOC)、9-芴乙酰基基团、1-芴羧基基团、9-芴羧基基团、9-芴酮-l-羧基基团、千氧基羰基、0占吨基(Xan)、三苯曱基(Trt)、4-曱基三苯曱基(Mtt)、4-曱氧基三苯曱基(Mmt)、4-曱氧基-2,3，6-三曱基-苯磺酰基(Mtr)、茶-2-磺酰基(Mts)、4，4-二甲氧基二苯甲基(Mbh)、曱苯磺酰基(Tos)、2，2，5，7,8-五曱基苯并二氢吡喃-6-磺酰基(Pmc)、4-曱基苄基(MeBzl)、4-甲氧基千基(MeOBzl)、千氧基(BzlO)、苄基(Bzl)、苯曱酰基(Bz)、3-硝基-2-吡夂亚磺酰基(Npys)、1-(4，4-二曱基-2,6-二氧代亚环己基)乙基(Dde)、2,6-二氯节基(2，6-DiCl-Bzl)、2-氯苄氧基羰基(2-Cl-Z)、2-溴苄氧基羰基(2-Br-Z)、苄氧基甲基(Bom)、环己氧基(cHxO)、叔丁氧基曱基(Bum)、叔丁氧基(tBuO)、叔丁基(tBu)、乙酰基(Ac)和三氟乙酰基(TFA)。保护基/封闭基对于本领域技术人员是公知的，将这样的基团偶联到构成本发明肽的合适残基的方法，也是本领域技术人员公知的(参见,例i口，Greene爭，(1991)尸rafec"veGraw/w/"Orgam'c5^"/7zes/s'2"ded，JohnWiley&Sons,Inc.Somerset,N丄)。在一个优选的实施方案中，例如，当肽在树脂上时，在合成期间使用乙酸酐实现乙酰化。酰胺保护可以通过选择用于合成的适当树脂来实现。在实施例中合成本文描述的肽期间，使用rink酰胺树脂。在完成合成之后，在酸性双功能氨基酸(例如Asp和Glu)和碱性氨基酸Lys上的半永久性保护基、Tyr的羟基全部被同时除去。使用酸性处理从这种树脂释放的肽，显现出n-末端被保护为乙酰基，羧基被保护为NH2，且同时除去所有其它的保护基。在某些特别优选的实施方案中，所述肽包含一个或多个本文所述D-型(右旋而不是左旋)氨基酸。在某些实施方案中，至少2个对映体氨基酸，更优选地至少4个对映体氨基酸，且最优选地至少8或10个对映体氨基酸是"D"型氨基酸。在某些实施方案中，本文所述肽每隔一个、或甚至每个氨基酸(例如每个对映体氨基酸)都是D-型氨基酸o，在某些实施方案中，至少50%的对映体氨基酸是"D"型，更优选至少80%的对映体氨基酸是"D"型，且最优选至少90%或甚至所有对映体氨基酸是"D"型氨基酸。F)肽模拟物除了本文描述的肽之外，也预见到肽模拟物。肽类似物通常用于制药工业，作为具有类似于模板肽的性质的非肽药物。这些类型的非肽化合物被称为"肽模拟物"或"肽的模拟物"(Fauchere(1986)庙.D，紋15:29;Veber和Freidinger(1985)T露p.392;和Evans爭(1987)丄C7zem.30:1229),且通常借助于计算机化的分子建模来开发。结构上类似于治疗上有用的肽的肽模拟物，可被用于产生相等的治疗或预防效果。通常，肽模拟物在结构上类似于范例多肽(例如表1所示的SEQIDNO:5)，但是具有一个或多个任选地被选自下述的键置换的肽键-CH2NH-、-CH2S-、-CH2-CH2-、-CH=CH-(顺式和反式)、-COCH2-、國CH(OH)CH2-、-CH2SO-等，这可以通过本领域已知和另外记载在下述参考文献中的方法来实J见Spatola(1983)p.267inCTzem/^o7B/oc/zem^s/y^o/Jm^o^c油，尸ep",(ie^am//Voto>w，B.Weinstein,eds.,MarcelDekker,NewYork,;Spatola(1983)Keg"Dato1(3)尸一zWe^cMoweModzyca"o肌(综述)；Morley(1980)7>em/>5尸/wmSWpp.463-468(综述)；Hudson爭(1979)J尸epfA"14:177-185(-CH2NH-，CH2CH2-);Spatola等(1986)h>Sc/38:1243-1249(誦CH2-S);Hann，(1982)JC/z^zSoc尸wh."rm"sI307-314(國CH國CH-,顺式和反式)；Almquist爭(1980)/CTzem.23:1392-1398(画COCH2-);Jennings-White爭(1982)T"raW腦23:2533(-COCH2-);Szelke等，EuropeanAppln.EP45665(1982)CA:97:39405(1982)(-CH(OH)CH2國);Holladay爭(1983)r"raW腦丄e"24:4401-4404(-C(OH)CH2-);和Hruby(1982)Zj/e31:189-199(CH2-S-))。一个特别优选的非肽^:是-CH2NH-。这样的肽模拟物可以具有比多肽实施方案更显著的优点，包括，例如更经济的生产，更高的化学稳定性，增强的药理学性质(半衰期、吸收、效力、功效等)，减少的抗原性，等。另夕卜，通过本领域已知的方法(Rizo和Gierasch(1992)iev.61:387)，例如，通过添加能形成4吏肽环4匕的分子内二碌i^建的内部半胱氨酸残基，来产生包含共有序列或基本上相同的共有序列G)小有机分子在某些实施方案中，本发明的活性剂包括小有机分子，例如如2004年8月11日提交的共同未决申请USSN60/600,925所述。在各种实施方案中，所述小有机分子类似于，且在某些情况下是2003年8月26日提交的共同未决申请USSN10/649,378和8月11日提交的USSN60/494,449所述的四肽和五肽的才莫拟物。本发明的小有机分子通常具有小于约900道尔顿的分子量。通常，所述分子在乙酸乙酯中的溶解度较高(例如，在等于或大于4mg/mL的浓度)，且也溶于pH7.0水性緩冲液。使磷脂例如1，2-双十四烷酰基^"-甘油基-3-磷酸胆碱(DMPC)在水性环境中接触本发明的小有机分子，通常导致直径约7.5nm(±0.1nm)的颗粒的形成。另外，经常形成堆积的双分子层，该双分子层的尺寸量级是3.4-4.1nm,堆积中的双分子层之间的间隔是约2nm。也经常形成约38nm的泡状结构。另外，当将本发明的分子施用给哺乳动物时，它们使HDL的抗炎性更高，并减轻动脉粥样硬化和/或特征在于炎症反应的其它状况的一种或多种症状。因而，在某些实施方案中，小有机分子是这样的，它改善特征在于哺乳动物的炎症反应的病理学(例如动脉粥样硬化)的一种或多种症状，其中所述小分子能以大于4mg/mL的浓度溶于乙酸乙酯，溶于pH7.0水性緩沖液；而且，当在水性环境中接触磷脂时，形成直径约7.5nm的颗粒，并形成堆积的双分子层，该双分子层的尺寸量级是3.4-4.1nm,堆积中的双分子层之间的间隔是约2nm，且具有小于900道尔顿的分子量。在某些实施方案中，所述分子具有下式其中P1、P2、pS和P4是独立选择的疏水保护基；W和I^是独立选择的氨基酸R基团；n、i、x、y和z是独立的O或l，从而使得当n和x都是0时，R1是疏水基团，且当y和i都是0时，R4是疏水基团；W和R3在pH7.0时是酸性或碱性基团，从而使得当W是酸性时，113是碱性的，且当R2是碱性时，R3是酸性的；且W当存在时，选自芳族基团、脂族基团、带正电荷的基团或带负电荷的基团。在某些实施方案中，112或R3是-(CH2)j-COOH,其中j-l、2、3或4，和/或-(CH2)j画NH2，其中』=1、2、3、4或5,或画(CH2)j-NH画C(-NH)國NH2,其中11=1、2、3或4。在某些实施方案中，R2、R3和R5当存在时，是氨基酸R基团。因而，例如，在各种实施方案中，W和R3独立地是天冬氨酸R基团、谷氨酸R基团、赖氨酸R基团、组氨酸R基团或精氨酸R基团(例如，如表1所述)。在某些实施方案中，R1选自LysR基团、TrpR基团、PheR基团、LeuR基团、OrnR基团、或norLeuR基团。在某些实施方案中，R4选自SerR基团、ThrR基团、IleR基团、LeuR基团、norLeuR基团、PheR基团或TyrR基团。在各种实施方案中，x是l,且RS是芳族基团(例如，TrpR基团)。在各种实施方案中,n、x、y和i中的至少一个是l,且P1、P2、pS和P4当存在时，独立地选自聚乙二醇(PEG)、乙酰基、酰胺、3-20碳烷基基团、fmoc、9-芴乙酰基基团、1-芴羧基基团、9-芴羧基、9-芴酮-l-羧基基团、苄氧基羰基、口占吨基(Xan)、三苯曱基(Trt)、4-甲基三苯甲基(Mtt)、4-曱氧基三苯曱基(Mmt)、4-曱氧基-2，3，6-三甲基-苯磺酰基(Mtr)、茶-2-磺酰基(Mts)、4,4-二曱氧基二苯曱基(Mbh)、甲苯磺酰基(Tos)、2，2,5,7,8-五曱基苯并二氢吡喃-6-磺酰基(Pmc)、4-甲基千基(MeBzl)、4-曱氧基千基(MeOBzl)、卡氧基(BzlO)、千基(Bzl)、苯甲酰基(Bz)、3-硝基-2-吡啶亚磺酰基(Npys)、l-(4,4-二甲基-2，6-二氧代亚环己基)乙基(Dde)、2，6-二氯千基(2，6-DiCl-Bzl)、2-氯千氧基羰基(2-Cl-Z)、2-溴苄氧基羰基(2-Br-Z)、苄氧基曱基(Bom)、叔丁氧基羰基(Boc)、环己氧基(cHxO)、叔丁氧基曱基(Bum)、叔丁氧基(tBuO)、叔丁基(tBu)、丙基、丁基、戊基、己基和三氟乙酰基(TFA)。在某些实施方案中，P1(当存在时)和/或P2(当存在时)独立地选自Boc-、Fmoc-和烟酰-，和/或P3(当存在时)和/或P4(当存在时)独立地选自和OfBu。尽管上面解释了许多保护基(P1、P2、P3、P4),但该列表是解释性的，而不是限制性的。考虑本文提供的教导，许多其它的保护基/封闭基团也是本领域技术人员已知的。可以选择这样的保护基，以使消化最小化(例如，对于经口的药物递送)，和/或增加摄入/生物利用率(例如，在经鼻递送、吸入治疗、直肠施用中，经粘膜表面)，和/或增加血清/血浆半衰期。在某些实施方案中，可以将保护基作为赋形剂或赋形剂的组分提供。在某些实施方案中，z是0，且所述分子具有下式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage55</formula>其中pl、p2、p3、p4、r1、r2、r3、r4、『x、y和i与上面描述相同。在某些实施方案中，z是O,且所述分子具有下式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage55</formula>其中r1、r2、113和114与上面描述相同。在一个实施方案中，所述分子具有下式:在某些实施方案中，本发明预见到小分子，其具有一种或多种本文所述的物理和/或功能性质，且具有下式其中P1、P2、pS和P4是独立选择的上述疏水保护基，n、x和y独立地是0或1;j、k和1独立地是0、1、2、3、4或5;112和R3在pH7.0是酸性或碱性基团，从而使得当112是酸性时，R3是碱性的，且当R2是碱性时，R3是酸性的。在某些优选的实施方案中，所述小分子溶于水；且所述小分子具有小于约900道尔顿的分子量。在某些实施方案中，n、x、y、j和l是l;且k是4。在某些实施方案中，pi和/或P"是芳族保护基。在某些实施方案中，112和尺3是氨基酸R基团，例如，如上所述的。在各种实施方案中，n、x和y中至少一个是l，且P1、P2、p3和P4当存在时，独立地是保护基，例如如上所述的，其选自聚乙二醇(PEG)、乙酰基、酰胺、3-20碳烷基、Fmoc、9-药乙酰基基团、1-药羧基基团、9-药羧<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>基、9-药酮-l-羧基基团、卡氧基羰基、0占吨基(Xan)、三苯甲基(Trt)、4-甲基三苯曱基(Mtt)、4-曱氧基三苯曱基(Mmt)、4-曱氧基-2，3,6-三曱基-苯磺酰基(Mtr)、莱-2-磺酰基(Mts)、4,4-二曱氧基二苯曱基(Mbh)、曱苯磺酰基(Tos)、2，2，5,7,8-五II.活性剂的功能测定用于本发明的方法中的某些活性剂，在本文中通过各个式(例如，上面的式1)和/或通过特定序列予以描述。在某些实施方案中，本发明的优选活性剂的特征在于一种或多种下述的功能性质1.它们将促炎HDL转化成抗炎HDL,或使抗炎HDL抗炎性更强；2.它们降低LDL诱导的动脉壁细胞产生的单核细胞趋化活性；3.它们刺激前-(3HDL的形成和循环；4.它们提高HDL胆固醇；和/或5.它们提高HDL对氧磷酶活性。本文7>开的特定试剂，和/或与本文描述的各式相应的试剂，可以容易地按需要测试一种或多种这些活性。筛选这些功能性质中的每一种的方法对于本领域技术人员是公知的。具体地，应当指出，在PCT/US01/26497(WO2002/15923)中说明了单核细胞趋化活性、HDL胆固醇和HDLHDL对氧磷酶活性的测定。III.肽制备成，或者，特别当所述肽不包含"D，，氨基酸残基时，所述肽可以重组表达。在某些实施方案中，甚至可以重组表达包含"D"氨基酸残基的肽。当重组表达多肽时，宿主生物(例如，细菌、植物、真菌细胞，等)可以被培养在一种环境中，其中专门地向所述生物提供一种或多种D型氨基酸。这样，在这种系统中重组表达的肽掺入了那些D氨基酸。在优选的实施方案中，通过本领域技术人员已知的许多液相或固相肽合成技术的任一种，化学合成所述肽。固相合成是化学合成本发明的多肽的一种优选方法，其中将序列的C-末端氨基酸附着到不溶支持物上，随后依次添加序列的剩余氨基酸。固相合成技术是本领域技术人员众所周知的，且记载在例如，Barany和Merrifield(1963)5b/Z(i-尸/z(Xse5y"^zes&，'pp.3-28477^尸e/fz'cfes..^"a/j^/s,A;Merrifield爭(1963)C7zemU5:2149-2156，和Stewart等(1984)5W/d尸/zase尸一/c/e5y"f/ze减,2應。PierceChem.Co.，Rockford，111。在某些实施方案中，使用二苯甲基胺(benzhyderylamine)树脂(BeckmanBioproducts,0.59mmolNH2/g树脂)作为固体支持物，通过固相肽合成方法合成所述肽。COOH末端氨基酸(例如，叔丁基羰基-Phe)通过4-(羟曱基)苯乙酰基基团附着到固体支持物上。这是比常规的节基酯键更稳定的键，而产生的肽仍然可以通过氢化切割。使用甲酸作为氢供体的转移氢化，用于该目的。用于肽合成和分析合成的肽的详细规程，记载在Anantharamaiah爭(1985)/.5/。/.C7zem.,260(16):10248-10255的附带缩印增刊中。应当指出，在肽(特别是包含D氨基酸的肽)的化学合成中，除了所需全长产物以外，该合成通常生成许多截短的肽。纯化方法(例如HPLC)通常导致相当大量全长产物的损失。本发明发现，在D肽(例如D-4)的合成中，为了预防纯化最长形式过程中的损失，人们可以透析和使用混合物，并从而排除最后的HPLC纯化。这样的混合物损失高度纯化产物的约50%效力(例如根据蛋白产物的重量)，但是该混合物含有约6倍肽，并因而具有更大的总活性。IV.药物制剂为了实施本发明的方法，向例如被诊断为具有受损的微动脉功能、或存在受损的微动脉功能(例如在脑或肾中)的风险的个体，施用本发明的一种或多种试剂(例如肽、肽模拟物、脂质)。所述试剂(例如肽、肽模拟物、脂质)可以以"天然"形式施用，或如果需要，以盐、酯、酰胺、前体药物、衍生物等形式施用，前提是所述盐、酯、酰胺、前体药物或衍生物是药理学上适合的，即，在本发明方法中是有效的。可以使用合成有机化学领域的技术人员已知的标准方法，以及例^口由March(1992)JdvawcedO"gam'cC7zem,Wov/eac"o"s,Mec/zam.smsS化m"w^，4thEd.N.Y.Wiley-Interscience所述的方法，来制备所述活性剂的盐、酯、酰胺、前体药物及其它衍生物。例如，可以使用常规方法从游离碱制备酸加成盐，其通常涉及与适合的酸反应。通常，将药物的碱形式溶解在极性有机溶剂，例如曱醇或乙醇中，并向其中添加酸。产生的盐沉淀出来，或通过添加更4氐极性的溶剂从溶液中产生。用于制备酸加成盐的适合的酸包括有机酸，例如，乙酸、丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、丁二酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、苯曱酸、肉桂酸、苯乙醇酸、曱磺酸、乙烷磺酸、对曱苯磺酸、水杨酸等，以及无机酸，例如，盐酸、氬溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。可以通过用适合的碱处理，将酸加成盐转化成游离碱。本文所述活性剂的特别优选的酸加成盐是卣化物盐，例如，可以使用盐酸或氢溴酸制备。相反地，可以按类似方式，使用药学上可接受的碱，例如，氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙、三甲胺等，制备所述试剂(例如肽、肽模拟物)的碱式盐的制品。特别优选的碱式盐包括碱金属盐，例如，钠盐和铜盐。酯的制备通常涉及羟基和/或羧基基团的官能化，其可以存在于药物的分子结构内。所述酯通常是游离醇基的酰基取代的衍生物，即，来源于式RCOOH的羧酸的部分，其中R是烷基，且优选是低级烷基。如果需要，可以通过常规的氢解或水解方法，将酯再转化成游离酸。酰胺和前体药物也可以使用本领域技术人员公知的技术或在相关文献中描述的技术制备。例如，可以使用适合的胺反应剂，从酯制备酰胺，或通过与氨或低级烷基胺反应，从酐或酰基氯制备它们。前体药物通常通过部分的共价附着来制备，这产生一种化合物，该化合物直到被个体的代谢系统修饰前是治疗上无活性的。本文确定的试剂(例如肽、肽模拟物、脂质)可以用于肠胃外的、局部的、经口的、经鼻的(或以其他方式吸入)、直肠的、或局部施用，例如通过气溶胶或经皮地，用于预防性和/或治疗性治疗动脉粥样硬化和/或其症状。取决于施用方法，药物组合物可以以许多单位剂量形式施用。适合的单位剂量形式包括但不限于粉未、片剂、丸剂、胶嚢、糖锭、栓剂、贴剂、鼻喷雾剂、注射剂、可植入的持续释放制剂、脂质复合物等。本发明的试剂(例如肽、肽模拟物和/或脂质)通常与药学上可接受的载体(赋形剂)组合，以形成药理学组合物。药学上可接受的载体可以含有一种或多种生理学上可接受的化合物，其起作用，例如，以稳定组合物，或提高或降低活性剂的吸收。生理学上可接受的化合物包括，例如，碳水化合物，例如葡萄糖、蔗糖或葡聚糖，抗氧化剂，例如抗坏血酸或谷胱甘肽，螯合剂，低分子量蛋白，保护和摄入增强剂例如脂质，降低活性剂的清除或水解作用的组合物，或赋形剂或其它稳定剂和/或緩冲液。其它生理学上可接受的化合物包括湿润剂、乳化剂、分散剂或对于预防微生物的生长或作用特别有用的防腐剂。各种防腐剂是公知的，且包括，例如苯酚和抗坏血酸。本领域的技术人员会理解，药学上可接受的载体、包括生理学上可接受的化合物的选择，取决于，例如，活性剂的施用途径，和活性剂的特定生理化学特性。赋形剂优选地是无菌的，且通常不含有不合需要的物质。这些组合物可以通过常规的、公知的灭菌技术来灭菌。在治疗性应用中，以足够治愈或至少部分地预防或停滞疾病和/或它的并发症的量，向患者施用本发明的组合物，所述患者有动脉粥样硬化的一种或多种症状，或存在动脉粥样硬化的风险。足够实现这个目的的量被定义为"治疗有效剂量"。对于这种用途有效的量将取决于疾病的严重程度和患者健康的一般状态。组合物的单次或多次施用:f又决于所需的以及患者耐受的剂量和频率施用。无论如^f可，所述组合物应当提供足够量的本发明的制剂的活性剂，来有效地治疗(改善一种或多种症状)患者。试剂的浓度可以广泛地变化，且主要基于流体体积、粘度、体重等，根据选定的特定施用形式和患者的需求来进行选择。然而，通常选择浓度，以提供范围约0.1或lmg/kg/天到约50mg/kg/天和有时更高的剂量。一般的剂量范围为约3mg/kg/天到约3.5mg/kg/天，优选为约3.5mg/kg/天到约7.2mg/kg/天，更优选为约7.2mg/kg/天到约ll.Omg/kg/天，且最优选为约ll.Omg/kg/天到约15.0mg/kg/天。在某些优选的实施方案中，剂量范围为约10mg/kg/天到约50mg/kg/天。在某些实施方案中，剂量范围为每日两次经口给予的约20mg到约50mg。应当理解的是，这种剂量可以变化，以在特定受试者或受试者组中最优化治疗方案。在某些优选的实施方案中，根据本领域技术人员公知的标准方法经口(例如，通过片剂)或作为注射剂施用本发明的(例如肽、肽模拟物和/或脂质)。在其它优选的实施方案中，所述试剂也可以使用常规的经皮药物递送系统来通过皮肤递送，即经皮"贴剂"，其中所述活性剂一般包含在层状结构内部，所述层状结构充当附着到皮肤的药物递送装置。在这种结构中，药物组合物通常包含在层、或位于上部衬里层之下的"储库(reservoir)"中。应当理解，在上下文中术语"储库"是指最终可以递送到皮肤表面的一定量的"活性成分"。因而，例如，在i领域k术人员公知的多种不同基一质制剂中的任一种中的活性i分。所述贴剂可以含有单个储库，或可以含有多个储库。在一个实施方案中，所述储库包括药学上可接受的压合式粘合剂材料的聚合基质，其用来在药物递送期间将该系统附着在皮肤上。适烷、、聚异丁烯r聚丙烯酸酯、、^k基曱酸醋:等。做-选择，i药二的储库和皮肤压合式粘合剂作为独立且分离的层存在，粘合剂在储库之下，在这种情况下，可以是如上所述的聚合基质，或可以是液体或水凝胶的储库，或可以采用其它形式。在这些叠层中的衬里层，起到了装置的上表面的作用，优选地起到所述"贴剂"的基础结构元件的作用，并向所述装置提供了其极大的柔性。为所述衬里层选择的材料优选地对于所述活性剂和存在的任何其它材料是基本上不可渗透的。用于局部药物递送的其它优选的制剂包括但不限于软膏和乳膏。软膏是半固体制品，其一般基于矿脂或其它石油衍生物。含有选定的活性剂的乳膏一般是粘性液体或半固体乳剂，常常是水包油或油包水的。乳膏基质一般是可水洗涤的，并含有油相、乳化剂和水相。所述油相，有时也称为"内部"相，一般由矿脂和脂肪醇例如十六烷醇或十八烷醇组成；而水相通常(尽管不一定)在体积上超过油相，并通常含有湿润剂。在乳膏制剂中的乳化剂通常是非离子的、阴离子的、阳离子的或兼性的表面活性剂。如本领域技术人员将理解的，要使用的具体软膏或乳膏基质是将提供最优化药物递送的。与其它载体或媒介物一样，软膏基质应当是惰性的、稳定的、非刺激性和非致敏的。不同于一般的肽制剂，包含D—型氨基酸的本发明的肽可以甚至经口地施用，而不需要针对胃酸的蛋白水解作用等进行保护。不过，在某些实施方案中，肽递送可以通过使用保护性赋形剂来增强。通常通过将多肽与组合物复合，以使其对酸和酶水解作用有抗性，或通过将多肽封装到适当的抗性载体例如脂质体中，来实现这一点。用于经口递送保护多肽的方法是本领域公知的(参见，例如，美国专利5,391,377，其描述了用于经口递送治疗剂的脂质组合物)。可以通过使用持续释放的蛋白"包装，，系统来维持升高的血清半衰期。这种持续释放系统是本领域技术人员公知的。在一个优选的实施方案中，用于蛋白和肽的ProLease生物可降解的小J求体递送系统(Tracy(1998)iVog.14:108;Johnson爭(1996)，A^^reMet/.2:795;Herbert爭(1998)，尸/wrmacew/.15,357)，一种由含有在聚合物基质中的蛋白的生物可降解聚合物小球体组成的干燥粉末，可以化合成含有或不含其它试剂的干燥制剂。特别地设计ProLease小球体制造方法，来达到高度的蛋白被嚢化效率，同时维持蛋白的完整性。所述方法由以下组成(i)通过喷雾冷冻干燥含有稳定赋形剂的药物溶液，从散装(bulk)蛋白制备冷冻干燥的蛋白颗粒，(ii)制备药物一聚合物悬浮液，随后通过超声处理或匀浆来降低药物粒度，(iii)通过喷雾到液氮中，生产冷冻的药物一聚合物小球体，(iv)用乙醇提取聚合物溶剂，和(v)过滤和真空干燥，以产生最后的干燥粉末产物。产生的粉未含有固体形式的蛋白，其被均匀地和严格地分散到多孔聚合物颗粒内。最常用于该方法的聚合物，丙交酯一乙交酯共聚物(PLG)，是生物相容的和生物可降解的。被嚢化可以在低温实现(例如，-40°C)。在被嚢化期间，蛋白被维持在没有水存在的固体状态，因而使水诱导的蛋白构象活动性最小化，从而防止包括水作为反应剂的降解反应，并避开在其中蛋白可能经历变性的有机-水界面。优选的方法使用大多数蛋白不能溶解在其中的溶剂，因而产生高被嚢化效率(例如，大于95%)。在另一个实施方案中，可以作为"浓缩物"提供溶液的一种或多种组分，例如，在准备用于稀释的保存容器(例如，按预先测量的体积)中，或在准备向一定体积的水中添加的可溶胶嚢中。前述试剂和施用方法是解释性的，而不是限制性的。应当理解，使用本文提供的教导，可以容易地设计其它合适的制剂和施用方式。V.用于治疗特征在于受损的微动脉结构和/或功能的状况的试剂合在另一个实施方案中，本发明提供7用f改善特征在于受损的微动脉结构和/或功能的病理学的一种或多种症状，或用于预防性治疗有这种状况风险的受试者(人或动物)的试剂盒。所述试剂盒优选地包含，含有一种或多种本文所述活性剂的容器。所述活性剂可以以单位剂量制剂(例如，栓剂、片剂、嚢片、贴剂等)提供，和/或可以任选地与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合。任选地，所述试剂盒可以另外包含用于治疗目标状况/病理学的一种或多种其它试剂。这种试剂包括但不限于，例如如上所述的，|3封闭剂、血管舒张剂、阿司匹林、抑制素、ace抑制剂或ace受体抑制剂(ARB)等。另外，所述试剂盒任选地包括标签和/或指导材料，其提供了实施本发明的方法或使用本发明的"治疗"或"预防"的指导(即，规程)。优选的指导材料描述了使用本发明的一种或多种活性剂来减轻特征在于受损的微动脉结构和/或功能的状况的一种或多种有关症状，和/;才料也可以，任选;也，i导优选的剂量;治疗方案、^禁忌症等。、虽然这些指导材料通常包含书面的或印刷的材料，但它们并不限于此。本发明预见到能够存储这种说明和将它们传达到终端用户的任何介质。这种介质包括、但不限于电子存储媒介(例如，磁盘、磁带、盒式磁带、芯片)、光学介质(例如，CDROM)等。这种介质可以包括提供这种指导材料的因特网站点地址。实施例提供以下实施例来说明、而不是限制所要求保护的发明。实施例1如图1A、1B和1C所示，与野生型小鼠(WT)相比，没有LDL受体的小鼠(LDLR-/-)具有加厚的脑微动脉。喂饲低脂肪食物饮食时，LDL受体无效小鼠的血浆LDL水平是野生型小鼠的2倍。但是，它们在喂饲食物饮食时具有非常小的动脉粥样硬化，但是如下图所示，甚至尽管它们具有最小的动脉粥样硬化，但它们的脑微动脉显著加厚。也如下图所示，当喂伺高脂肪、高胆固醇(西方)饮食时，这些小鼠的脑微动脉会额外加厚。喂铜西方饮食时，这些小鼠也发展广泛的动脉粥样硬化。最近报道，LDLRV-小鼠具有受损的空间记忆，后者与海马中降低的突触密度有关(Mulder爭(2004)脸,6油gyo/D/固"16:212-219，参见，例如，其中的图2)。如图2所示，用D-4F(以300pg/mL加入饮用水中)治疗喂饲西方饮食的LDLR-A小鼠6周，显著提高T字型迷宫试验中自发变化的数目，而加入相同浓度的对照肽(杂乱的D-4F)则不会。图2显示的接受D-4F(与对照肽相比)的小鼠的结果，显著类似于来自Mulder等(/Ci:)的图2显示的结果，其中对比了LDLRV-小鼠和野生型小鼠(LDLR+Z+)，从而表明经口D-4F逆转LDLR-A小鼠的异常。来自Mulder爭的图的数据显示为"百分比变化"。本文图2中的数据显示为"自发变化的数目"。如下面图3所示，当表达为"百分比变化"时，D-4F的数据与杂乱的D-4F相比类似。与对照肽杂乱的D-4F(ScD-4F)相比，用D-4F治疗的T字型迷宫试验的提高的其它证据来自图4的数据。以前已经报道，注射D-4F提高面动脉的血管反应性(OuZ,OuJ，AckermanAW等L-4F,anapolipoproteinA-Imimetic,restoresnitricoxideandsuperoxideanionbalanceinlow-densitylipoprotein-treatedendothelialcells.Ou爭(2003)CV腦/",/ow;107:1520-1524;Ou爭(2003)Cz>cw/a"ow107:2337-2341)。在这些公开的研究中，使用小鼠面动脉。该动脉具有约250(iM的内径。本发明的应用的另一个实例来自下面图5所示的数据，其显示，给喂祠西方饮食的LDL受体无效小鼠经口施用DMPC提高了它们的面动脉的血管反应性，这明显优于施用大豆卵磷脂。将8周龄雌性LDL受体无效小鼠维持在西方々欠食，并供给仅仅^:用水(对照，n=6),或维持在西方饮食，并供给补加了lmg/mL大豆卵磷脂(n^6)或DMPC(11=6)的饮用水。6周后，切下面动脉的颌下段，测定加入浓度范围为0.01-10|aM的乙酰胆碱(一种内皮依赖性的弛H剂)引起的预收缩的2mm动脉环的百分比舒张。通过加入300L-NAME(—种氧化氮合酶抑制剂)和硝普钠(一种不依赖内皮的氧化氮供体)，证实舒张的特异性。加入L-NAME(它抑制乙酰胆碱引起的血管舒张)和硝普钠或罂粟碱(它最大舒张)的组之间没有差异。在无这些加入的情况下，对照组的乙酰胆碱血管舒张存在显著抑制。在大豆卵磷脂组中存在向提高的舒张的趋向，但是这没有达到统计学显著性。接受DMPC的小鼠的血管舒张存在显著l^高(在1|aM乙酰胆碱时，pO.01;在10|iM乙酰胆石威时，pO.OOl)。对于对照组，生成50%血管舒张的乙酰胆碱浓度的Log(LogEC50,单位mM)是0.473,接受大豆卵磷脂的组是0.057，接受DMPC的组是0.006。我们以前已经公开，施用DMPC给apoE无效小鼠造成血浆apoA-I水平和HDL-胆固醇的增加，从而导致炎性脂质的隔离/去除/破坏，和HDL从促炎向抗炎的转变，二者都预防和消退该小鼠模型中的动脉粥样石更化(NavabM，HamaS，HoughG等Oralsyntheticphospholipids(DMPC)raiseshigh-densitylipoproteincholesterollevels,improveshigh-densitylipoproteinfunction,andmarkedlyreducesatherosclerosisinapolipoproteinE-nullmice.Circulation2003;108:1735-1739)。因而，我们已经显示了2种隔离/去除/破坏炎性脂质的不同试剂(D-4F和DMPC),—种经口肽和一种增加apoA-I和HDL胆固醇的经口磷脂，二者都改善动脉功能，如在小动脉、面动脉中测得的，本发明的该新发现涉及改善比甚至小动脉更小的血管(即微动脉)的结构和功能的方法。这些微动脉最终负责如脑和肾的不同组织的灌注。基于本文所示的数据和未公开的数据，我们认为本发明提供了通过施用试剂来改善微动脉的结构和功能的一般方法，所述试剂隔离/去除/破坏炎性脂质和将促炎的高密度脂蛋白(HDL)转化成抗炎的，或使抗炎HDL更抗炎。这些试剂包括，含有A类两亲性螺旋的肽，含有G*两亲性螺旋的肽，分子量小于900道尔顿的短肽和非肽，它们具有在乙酸乙酯中至少4mg/mL的溶解度，且它们溶于pH7.0的水性緩沖液，当在水性环境中接触磷脂时，形成直径约7.5nm的颗粒，并形成堆积的双分子层，该双分子层的尺寸量级是3.4-4.1nm,堆积中的双分子层之间的间隔是约2nm;和经口合成磷脂，其中sn-l和sn-2位置是相同的，且含有至少3个碳。实施例2ApoA-I模拟肽D-4F减少脑微动脉壁加厚，并提高喂伺西方饮食的LDL受体无效小鼠的空间记忆概要在喂铜单独施用的或含有D-4F或杂乱的D-4F的食物或西方々欠食的野生型和LDL-受体无效C57BL/6小鼠中，测定直径10-100fim的脑微动脉的壁厚度。使用T字型迷宫连续改变任务，测定空间记忆。在喂饲食物时，与野生型相比，LDL受体无效小鼠的脑微动脉壁厚度增加，且在喂饲西方饮食时进一步增加(pO.OOl)。增加的脑微动脉壁厚度部分地归因于平滑肌a-肌动蛋白含量的增加，且会被D-4F治疗降低，但是杂乱的D-4F不能。加入西方饮食显著破坏在T字型迷宫中的表现(p0.05),并与杂乱的D-4F相比，受到D-4F的改善(p<0.05)。表现和微动脉壁厚度的变化，不依赖于血浆脂质和微动脉腔直径。用D-4F治疗喂饲西方饮食的LDL-受体无效小鼠减少了不依赖于血浆脂质和微动脉腔直径的脑微动脉壁厚度，并改善空间记忆。材冲十和方法材料如以前所述(Navab爭(2002)Ocw/a"o",105:290-292;Navab爭(2004)C7腦/a"o",109:rl20画rl25),合成D-4F和杂乱的D-4F(该肽具有与D-4F相同的D-氨基酸，但是其序列排列阻止肽达到脂质结合所需的螺旋构象)。所有其它试剂都来自以前报道的来源(Navab爭(2005)^4故n'osc/erT7zram625:1-7》小鼠和组织病理学J难性野生型和LDL受体无效C57BL/6小鼠购自JacksonLaboratories(BarHarbour,ME)。在施用西方々大食(Teklad/Harlan,MadisonWI，饮食编号88137;42%脂肪，0.15%胆固醇，w/w)之前，将小鼠维持在食物饮食(RalstonPurina)。为了脑微动脉研究，用肌内氯胺酮(100mg/kg)和乙酰丙。秦(2.5mg/kg)麻醉小鼠，通过左心室给心脏灌注25mL含有肝素(IOU/mL)的磷酸緩冲盐水(PBS)，随后灌注100mL溶于pH7.4的PBS中的4。/。低聚曱醛(PFA)，如Fernagut等(Fernagut爭(2002)A^wmyc/ewce，114:1005-1017;Fernagut爭(2004)￡xpA^wra/.,185:47-62)所述。迅速取出脑，并在4。C在4%PFA中保藏24小时，然后转移至溶于PBS(pH7.4)中的10%蔗糖，；故置至它们沉到溶液底部。将右半脑包埋入OCT(Tissue-Tek;MilesLaboratoriesLtd,ElkhartIN)，并在-40。C异戊烷中冷冻，保藏在-80。C,直到在-20。C恒冷切片机中切片。将冷冻的脑切成8pm冠状切片，以包含下面的白质，并用苏木精-伊红(H&E)并对平滑肌a-肌动蛋白染色(Serotec,Raleigh，NC)。将左半部各脑包埋入石蜡，切成6^im厚冠状切片，并用H&E染色。UCLA动物研究委员会(AnimalResearchCommittee)批准了所有研究。形态计量法和相关的统计学方法进行形态计量法来测定张的且垂直横切的所有微动脉的血管壁厚度。使用40x显微镜物镜，使用SPOTImage软件，将切片的血管照相，对每个进行内径和外径的3次测量，并取平均值。血管大小范围是10-160pm，并分别对比内径值为10-20pm、21-50pm、51-100pm和〉100pm的动脉的壁腔比。在来自每个脑的皮质区和深白质区中，检查每个直径组的最少10个动脉，并确定壁厚度和壁腔比。评价对平滑肌a-肌动蛋白免疫染色的切片中每个血管免疫反应介质厚度与内径的比。由一位研究人员使用装配40x透镜的OlympusBH-2显微镜，在单个焦平面上进行所有测量，并由对处理不知情的两位观察者重复。通过让三位研究人员测量相同的20个微动脉的壁厚度和腔直径，并计算壁腔比，确定观察者之间的变化。发现变化系数是14±1%。使用InStat和Prism软件(Graphpad，SanDiego，CA,U.S.A.),计算机处理所有数据。使用不配对的斯氏f-检验或单向ANOVA,分析不同组的平均值之间的差异的统计学显著性。使用Tukey-Kramer多重比较检验，进行不同组的多重比较。认为5。/。的概率水平(pO.05)是显著的。4亍为研究和相关的统计学方法每天在上午9点至下午4点进行T字型迷宫连续改变任务(T-CAT)测试，并由对治疗组不知情的一位研究人员进行。在行为研究之前2小时，将小鼠输送到测试室，以允许熟悉房间的迷宫外可视计号。在我们的研究中使用的T字型迷宫装置与Gerlai等(Gerlai(1998)5e/wv/owra/5ra/w/e"arc/z,95:91-101)所述的装置相同，且由透明丙烯酸壁和黑色丙烯酸底制成。起始和目的臂的尺寸是长度75cm、宽度12cm和高度20cm。迷宫装配有3个可拆卸的闸刀式门，它们能通过手工遥控来操作。用顶蓬灯和落地灯给测试室照明，且风扇提供恒定的背景噪音。用黑帘将T字型迷宫和研究人员隔开，且在TV监视器上观察小鼠在迷宫中的运动，并录像。在每个单独的小鼠之后，用Windex喷雾仔细地清洁T字型迷宫，并用纸巾干燥。T字型迷宫连续改变任务(T-CAT)限制小鼠的处理，并允许它们不受干扰地进行探究行为。在本研究中使用的方法与Gerlai等(/^i:)所述的方法相同，且由1个强迫的和14个自由的选择试验组成。测量小鼠进行的连续选择，并计算14个自由的选择试验过程中的变化率(0%-无变化，100%-在每个试验中变化，50%-随机选择)。记录并分析完成15个试马全所需的时间(4安秒计)。通过一见频3艮踪系统(SDInstrumentsInc.,SanDiego,CA)，连续记录T-CAT试验，并储藏在计算机中。使用StatView软件(SASInstitute,Cary,NC.)进行统计学分析。其它方法如以前所述(Navab爭(2004)C7腦/a"ow,109:rl20-rl25;Navab爭(2005)」"en'osc/w77zrawZJ^5cj5/o/"25:1-7),测定血浆脂蛋白和脂质水平。结果LDL受体无效小鼠的脑微动脉壁厚度增加，且在添加西方饮食后进一步增力口。如图6所示，在喂饲食物时，LDL受体无效小鼠的微动脉壁厚度大于野生型小鼠，且在喂饲西方饮食6周后，LDL受体无效小鼠的微动脉壁厚度进一步增加。D-4F治疗减小脑微动脉壁厚度，但是杂乱的D-4F不会。图7A-7C证实，将300(xg/mL的D-4F加入喂饲西方饮食6周的LDL受体无效小鼠的饮用水中，导致与将相同浓度的杂乱的D-4F加入饮用水相比，减少的脑微动脉壁厚度。图7D证实，接受D-4F或杂乱的D-4F的小鼠之间的脑微动脉腔直径没有差异。有些研究人员已经证实，大多数可靠的微动脉壁厚度测量是如下得到的将每个微动月永的壁厚度除以该孩i动月永的腔直径(Mulvany(1999)Oraf/owwcw/arie"arc/7,41:9-13)。图7E—7G证实，接受D-4F的小鼠的壁腔直径比显著小于接受杂乱的D-4F的小鼠。与杂乱的D-4F相比，当给小鼠施用D-4F时，血浆总胆固醇、LDL-胆固醇、HDL-胆固醇或甘油三酯的浓度没有显著变化。接受D-4F的小鼠的总胆固醇浓度是1,076±75(平均值士SEM),与此相比，接受杂乱的D-4F的小鼠是970±61mg/dL。接受D-4F的小鼠的LDL和HDL胆固醇浓度分别是924±76和86土6mg/dL,与此相比，接受杂乱的D-4F的小鼠分别是834±63和79士5mg/dL。接受D-4F或杂乱的D-4F的小鼠的甘油三酯分别是330±25或288±25mg/dL。脑微动脉壁加厚部分地是由于平滑肌oc-肌动蛋白含量的增加。如图8A所示，给LDL受体无效小鼠施用西方饮食，导致喂饲西方饮食的LDL受体无效小鼠的脑微动脉壁中平滑肌oc-肌动蛋白量的显著增加。图8B显示了来自用D-4F或杂乱的D-4F治疗的小鼠的对平滑肌细胞oc-肌动蛋白染色的代表性脑微动脉。图8C-8E定量地证实，与用杂乱的D-4F治疗的小鼠相比，用D-4F治疗小鼠显著减少脑^[效动脉壁平滑肌a-肌动蛋白含量。给LDL受体无效小鼠喂伺西方饮食，导致受损的空间记忆，它会得到D-4F治疗的显著改善，但是杂乱的D-4F不会。图9A-9D证实，当将图3A所述的LDL受体无效小鼠置于西方饮食下时，它们具有受损的空间记忆，如用T-CAT测得的。图9E-9G证实，用经口D-4F(而不是杂乱的D-4F)治疗图7和8B-8E所述小鼠，显著改善表现，如用T-CAT测得的。尽管接受杂乱的D-4F的小鼠需要比接受D-4F的小鼠更多的时间来完成15个试验(分别是579±23秒和548±37秒)，但该差异没有达到统计学显著性。不过，图9E-9G中的数据清楚地证实了D-4F治疗的改善。讨论本实施例所示的数据和以前公开的数据8-1G表明，LDL水平影响小鼠动脉树的所有分支。在喂饲食物时，LDL受体无效小鼠的腔直径为15-40pm的脑微动脉的微动脉壁厚度显著增加(图6A)。在喂伺西方饮食仅6周后，与野生型小鼠相比，这些LDL受体无效小鼠中的脑微动脉壁厚度显著增加(图6A-6C)。Heistad及其同事(Heistad爭(1995)外戸te腦'ow，26:509-513)强调了动脉粥样硬化和高血压血管之间的差异和相似性。这些作者观察到，"动脉粥样硬化和高血压中血管结构的变化的特征在于，血管壁的加厚和血管'重建，。重建倾向于保持动脉粥样硬化血管的腔大小，并导致高血压血管的更小的腔"。如图7D所示，西方饮食(喂饲6周)诱发的LDL受体无效小鼠的脑微动脉加厚，似乎独立于腔直径的变化。我们没有测量这些小鼠的血压，且我们不知道更长时间段的暴露是否改变腔直径。但是，在仅6周的时间段内，通过平滑肌细胞a-肌动蛋白含量确定的脑微动脉的壁腔比显然受到喂饲西方饮食的显著增加(图8A)。长期已经知道，活性氧种类中富集的LDL可以刺激血管平滑肌细胞生长(Gorog(1997)Atheroscherosis,129:1-7)。还已经报道，因为缺失胱硫醚a-合酶，具有增加的氧化应激的小鼠具有脑血管肥大，在它们的脑微动脉中具有增加的平滑肌含量(Baumbach等(2002)OcAw,91:931-937)。正在尝试推测，经口D-4F(已知它降低小鼠的LDL脂质氢过氧化物，而不改变血浆脂质水平(Navab爭(2004)Ocw/加'ow,109:rl20-rl25)1)的治疗，可能已经通过减少脂蛋白脂质氢过氧化物，而不改变血浆脂质，改善了脑微动脉平滑肌oc-肌动蛋白的增力口(图8B-8E)。Mulder等(Mulder爭(2004)脸腳6油gy16:212-219)首先报道，与喂饲食物饮食的野生型小鼠相比，喂饲食物饮食的LDL受体无效小鼠具有受损的空间记忆。这些作者的结论是，该异常类似于在apoE无效小鼠中的报道(Krugers爭(1997)iVerwo8:2505-2510;Oitzl爭(1997)Bra/wA".，752:189-196;Zhou爭(1998)^ra^zi".，788:151-159;Veinbergs爭(1999)A^wra"/e"ce91:401-403;Krzywkowski爭(1999)脸w腦c/e,92:1273-1286;Raber爭(2000)A^i/m404:352-354),且是由于不能提供脂蛋白组分给脑细胞诱发的脑细胞原发异常。本文图9以及图6-8中报道的数据表明了备择假设。原发异常可能部分地或完全由于Heistad爭(1995)/^/^Wew/ow,26:509-513所述的"患病血管综合征"，且不是由于不能递送脂蛋白组分到脑细胞。支持该假说的是，随着高脂血症的恶化，功能缺陷也恶化(图9A-9D)。如果该原发缺陷是由于缺乏递送到脑细胞的脂蛋白组分(因为不存在LDL受体)，则可以预见到提高的血浆脂蛋白水平对功能的改善，因为通过非受体-介导的途径将脂蛋白递送到脑细胞，可能会随着高脂血症的增加而增加。图9所示的功能异常的血管基础的其它支持是，微动脉的功能异常和结构变化之间的关联，它会受到西方々大食的恶化(图6和8A),并被经口D4F改善(而不是杂乱的D-4F)(图7和8B-8E)。我们没有测量这些小鼠的脑微动脉血管反应性。但是，Pritchard及其同事发现，LDL受体无效小鼠的面动脉(直径约240ium)的血管反应性受到西方饮食的严重破坏，并且被4F治疗显著改善(Ou爭(2003)C/腦/a"o",107:2337-2341;Ou爭(2005)Ocw/""o"7e化an^97:1190-1197。Heistad及其同事(Heistad爭(1980)爿肌P/z>w.o/.239(HeartCirc.Physiol.8):H539國H544)报道，在通过喂飼致动脉粥样化饮食造成高胆固醇血的猴中，对高碳酸血症的最大脑血管舒张剂反应受损，但是在不太显著的血管舒张剂刺激期间，保持了对低血压的自身调节反应。令人感兴趣地，当给猴喂饲消退饮食并进行最大血管舒张时，脑动脉床的反应性得到显著改善(Armstrong爭(1983)JC7/"./"ve"，71:104-113)。令人感兴趣地指出，已经观察到在患有皮层下动脉硬化性脑病(Binswanger氏病)的血管病的人中，存在直径小于100的脑血管的平滑肌a-肌动蛋白的增加(Lin爭(2000)5Vra&，31:1838-1842)。还尝试推测，"患病血管综合征"可能在人痴呆中起比以前已经认识到的范围更大的作用，且使用apoA-I模拟肽例如D-4F可以在这样的疾病中具有有益效果。可以理解，本文描述的实施例和实施方案仅用于说明性的目的，括在本申请的精^和范围,以及附随的权利^要求的范围^)。本文引用的所有出版物、专利和专利申请为了所有目的，以它们的整体引入本文作为参考。权利要求1.改善微动脉结构和/或功能的方法，所述方法包含给需要的哺乳动物施用一种或多种表1-14所述活性剂和/或本文所述小有机分子，其剂量足以改善微动脉结构或功能。2.权利要求l的方法，其中所述微动脉是肾中的微动脉。其中所述^(数动脉是脑中的樣i动脉。其中所述哺乳动物是人。其中所述哺乳动物是诊断具有记忆丧失其中所述哺乳动物是诊断具有受损的背3.权利要求1的方法，4.外又利要求1的方法，5.权利要求1的方法或受损的学习的人。6.纟又利要求1的方法功能的人。7.权利要求1的方法，其中所述哺乳动物是诊断具有受损的泡功能的人。8.权利要求1的方法，其中所述哺乳动物是没有诊断出患有动脉粥样硬化或具有该风险的人。9.权利要求1的方法，其中所述肽和/或肽模拟物和/或脂质是在单位剂量制剂中。10.权利要求1的方法，其中所述活性剂配制成用于通过选自下述的途径施用经口施用、经鼻施用、直肠施用、腹膜内注射、和血管内注射、皮下注射、经皮施用和肌内注射。11.权利要求1的方法，其中所述施用是通过选自下述的途径经口施用、经鼻施用、直肠施用、腹膜内注射、和血管内注射、皮下注射、经皮施用和月几内注射。12.权利要求l的方法，其中所述活性剂选自D4F、L4F、反向D4F、反向L4F和DMPC。13.权利要求1的方法，其中所述活性剂与可药用赋形剂组合提供。14.权利要求1的方法，其中所述活性剂在单位剂量制剂中提供。15.表1-14所述活性剂和/或本文所述小有机分子，其用于预防或治疗具有受损的结构或功能的微动脉。16.表l-14所述活性剂和/或本文所述小有机分子在生产药物中的用途，所述药物用于预防或治疗具有受损的结构或功能的微动脉。17.用于治疗特征在于异常微动脉结构或功能的状况的试剂盒，所述试剂盒包含容器，它含有一种或多种表1-14所述活性剂和/或本文所述小有机分子，和指导材料，它教导使用所述活性剂治疗特征在于异常微动脉结构或功能的状况。18.权利要求17的试剂盒，其中所述肽和/或肽模拟物和/或脂质是在单位剂量制剂中。19.权利要求17的试剂盒，其中所述活性剂配制成用于通过选自下述的途径施用经口施用、经鼻施用、直肠施用、腹膜内注射、和血管内注射、皮下注射、经皮施用和肌内注射。20.权利要求17的试剂盒，其中所述施用是通过选自下述的途径经口施用、经鼻施用、直肠施用、腹膜内注射、和血管内注射、皮下注射、经皮施用和月几内注射。21.权利要求17的试剂盒，其中所述活性剂选自D4F、L4F、反向D4F、反向L4F和DMPC。22.权利要求17的试剂盒，其中所述活性剂与可药用赋形剂组合提供。23.权利要求17的试剂盒，其中所述活性剂在单位剂量制剂中提供。全文摘要本发明涉及意外发现，即比甚至最小动脉更小的血管(即微动脉)加厚，变得功能异常，并造成对如脑和肾的不同组织的终末器官损害。本发明提供了改善微动脉的结构和功能、并保持诸如脑和肾的终末器官的功能的方法。文档编号A61K38/00GK101115496SQ200580047756公开日2008年1月30日申请日期2005年12月6日优先权日2004年12月6日发明者A·M·福格尔曼申请人:加州大学评议会