专利名称：海狗油在制备促智药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及海狗油在制备促智药物中的应用，尤指海狗油在制备一种具有增强脑功能、提高脑活力、补充脑营养、改善智力及记忆力的药物中的应用，属于保健食品以及相关领域。
背景技术：
促进智力是现代医学所关注的问题，与老年痴呆由病态因素所导致不同的是，智力改善有着各种复杂的机理。
智力水平的个体差异强大，与各人的神经活动强度、灵活性、均衡性等特征有关，与巴甫洛夫分析的高级神经活动类型有关。智慧是人脑的产物，涉及脑内的信息加工处理及神经整合过程。所谓促智就是通过各种途径使大脑具备意识的过程或使潜意识转变为显意识的过程。人脑蕴藏着巨大的智力潜能或潜在的超常思维能力，促进超常思维或创造性思维能力的发展，对提高人类的智力水平具有深远的意义。促智研究的途径很多，例如，可以从中枢神经可塑性的角度研究促智；也可以从中枢突触动力学的角度研究促智；还可以从生物信息流的观点研究促智。中枢神经可塑性是终生存在的特性，是一种潜在的适应能力，充分发掘这种能力对智力开发和延缓衰老都有意义。
促智药物(nootropic drug)的研究相当活跃。一些促智药物既可增强正常脑功能，又能改善多种原因如脑缺血、脑损伤、脑疾病等引起的认知功能障碍，也就是不仅具有正面效应，同时也具有抑制或缓解负面影响的作用。
目前国内外市场上已经有很多健脑补脑的保健品和药品，但是绝大多数存在疗效不可靠或者作用单一的缺陷。目前市场上的补脑保健品主要成分可以分为几大类1)维生素、微量元素类，如黄金搭档，尽管此类产品能够在一定程度上补充人体需要，但不能起到真正的健脑补脑作用；2)补充大脑营养类，如卵磷脂、脑磷脂、深海鱼油，如各种鱼油制品等，作用单一，效果不大；3)纯中成药类，如银杏叶制剂、丹参制剂，如安神补脑液、健脑胶囊、健脑丸等，成分单一，效果有限；4)褪黑素类，其化学名称为美乐通宁，如脑白金，目前的医学研究对于其健脑补脑的作用有很大争议；5)甚至有的产品中含有促进中枢神经兴奋的成分，吃完感到很兴奋，一时出现大脑很清新的感觉，但是并不是真正意义上的“补脑”。因此，这类产品普遍有一定的夸大、不实之词，存在科学性不强，持续发展性差。
DHA属于人体必需脂肪酸之一。人体必需脂肪酸对维持各种组织的功能必不可少，缺乏时可引发一系列症状，包括生长发育迟缓、皮肤异常鳞屑、不育、智力障碍等。DHA作为一种必需脂肪酸，其增强记忆与思维提高、促进智力发育等作用更为显著。如人群流行病学研究发现，体内DHA含量高者的心理承受能力强，智力发育指数高。
在人的大脑中，DHA也是主要的构成物质，大量存在于大脑的磷脂中，约占10％。儿童在发育时吸收DHA，能够补进脑部所需的营养，增加头脑的敏锐度和应变能力，同时也能协助建构一个更健康的神经系统。假如人体缺少了DHA时，记忆功能和集中能力会减退。DHA缺乏可导致学习困难、注意力不集中、记忆力下降等表现。因此，DHA作为功能性的健康食品，虽然不是立即见效，但有着全面、长远、稳定的效果，为人体必需的营养素。目前市场上有鱼油微胶囊原料出售，可配制成胶囊、口服液、粉剂等剂型。
鱼油中只含有EPA和DHA，几乎不含DPA，而DPA具有更重要的生理活性，日本学者研究认为EPA只有转化为DPA才可发挥作用，DPA比EPA功效高出10-20倍，而且DPA和DHA一样，也是脑神经细胞膜磷脂的主要成分，作用和DHA相似，具有营养大脑，促进胎儿和儿童大脑发育，增强记忆力的作用。海狗系深海哺乳动物，生活在北极圈以内-50℃的高寒水域中，以名贵的鳕鱼为食，皮下有厚厚的脂肪层，体内富含ω-3多烯脂肪酸。以加拿大北部无污染海域海狗脂肪为原料提炼出的海狗油中除发现鱼油中常含有的EPA和DHA外，还有含量可观的DPA。
中国专利CN1203867C公开了一种精制海狗油用于治疗老年痴呆、中风和中风后遗症的作用，但老年痴呆是老年人脑功能失调、脑神经机能衰退的一种表现，是一种病症，与智力不佳是完全不同的，而且促智有着更复杂的机理。
随着生活质量的改善，人类越来越关注自身智能的发展，千方百计寻求对智能有利的因素进行利用，因而促智药物和保健品成为人类研究的重点。
发明内容
本发明的目的是提供海狗油在制备促智药物中的应用，尤指海狗油在制备一种具有增强脑功能、提高脑活力、补充脑营养、改善智力及提高记忆力的药物中的应用。
本发明所述海狗油中三种ω-3多烯不饱和脂肪酸的重量百分比含量分别为
EPA6.5-9.0％DHA10.5-12.5％DPA4.0-8.0％。
本发明所述海狗油是通过将原料海狗油粗品进行酯化、分子蒸馏得到的精品。包括如下步骤1)海狗油的酯化取原料海狗油，与海狗油等体积的0.2-0.8mol/L的醇的碱金属盐混合，充氮、并调节pH值到6.8-7.2，减压蒸发除掉醇，并分离除掉其中的固体，得到酯化海狗油；2)分子蒸馏a)脱气取上步酯化海狗油置于原料罐中，由进料泵送入脱气罐中，在20-30℃、系统压力1-2mbar的条件下脱气，得到脱除极轻组分的原料液；b)预热蒸馏将上步原料液以5.0-20.0kg/h的进料速度送入到预热级蒸馏器中，在170-200℃、系统压力0.001-0.1mbar、刮膜转子速度150-250rpm的条件下蒸馏，收集重组分；c)蒸馏取上步重组分以5.0-20.0kg/h的进料速度送入到蒸馏器中，在250-350℃、系统压力0.001-0.1mbar、刮膜转子速度150-250rpm的条件下蒸馏，收集290-310℃时的馏分，即得到主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油。
本发明中收集290-310℃时的馏分，优选的，收集300℃时的馏分。因为该温度下所收集的馏分中三种主要成分EPA、DPA和DHA的含量能够充分发挥其活性，营养大脑，促进胎儿和儿童的智力发育，增强记忆力。
所述酯化处理中，所用到的醇优选为乙醇或甲醇，所述的碱金属盐优选为钠盐或钾盐，最优选为钠盐；醇的碱金属盐浓度优选为0.5-0.8mol/L，更优选0.5mol/L。
调节pH值优选采用冰醋酸，pH值优选为7.1。
上述醇的碱金属盐中还可以含有0.001％-0.005％的抗氧化剂，所述的抗氧化剂为2，6-二叔丁基对甲酚或对羟基叔丁基茴香醚，优选对羟基叔丁基茴香醚。
上述的抗氧化剂含量优选为0.003％-0.005％。
上述分子蒸馏步骤中，对酯化海狗油进行脱气是为了使物料中溶解性气体或极易挥发性组分在进入分子蒸馏器之前尽量排出，从而脱除酯化海狗油中的极轻组分；否则高真空下溶解性气体从液体中急骤析出，不仅破坏系统真空度，产生飞沫现象，玷污冷凝表面，还容易缩短真空泵的使用寿命。
本发明中的分子蒸馏设备优选应用德国VTA公司制造的刮膜式分子蒸馏中试设备。
采用上述海狗油产品制备促智药物，尤其是制备一种具有增强脑功能、提高脑活力、补充脑营养、改善智力及提高记忆力的药物，安全有效，效果确切、显著，无任何毒副作用；可提高儿童智商，促进大脑发育，增强学习记忆力，延缓大脑细胞老化；可开发智力，提高学习和工作效率，预防老年记忆力衰退。
具体实施例方式
以下为本发明的具体实施方式
，所述的实施例是为了进一步描述本发明，而不是限制本发明。
取原料海狗油，与海狗油等体积的0.2mol/L乙醇钠混合，乙醇钠中含有0.005％的2，6-二叔丁基对甲酚，室温条件下充氮搅拌10分钟后，加入冰醋酸，调节pH值到7.1，减压条件下，旋转蒸发除掉乙醇，并分离除掉其中的固体，得到乙酯化海狗油。
应用德国VTA公司制造的刮膜式分子蒸馏中试设备对乙酯化海狗油进行分子蒸馏，包括如下步骤a)脱气取上步酯化海狗油置于原料罐中，由进料泵送入脱气罐，在25℃、系统压力1mbar的条件下脱气，得到脱除极轻组分的原料液；b)预热蒸馏取上步原料液以5.0kg/h的进料速度送入预热级蒸馏器中，在200℃、系统压力0.001mbar、刮膜转子速度150rpm的条件下蒸馏，收集重组分；c)蒸馏取上步重组分以5.0kg/h的进料速度送入蒸馏器中，在250℃、系统压力0.001mbar、刮膜转子速度150rpm的条件下蒸馏，收集290℃时的馏分，即得到主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油。
取原料海狗油，与海狗油等体积的0.3mol/L甲醇钠混合，甲醇钠中含有0.003％的对羟基叔丁基茴香醚，室温条件下充氮搅拌10分钟后，调节pH值到7.2，减压条件下，旋转蒸发除掉甲醇，并分离除掉其中的固体，得到甲酯化海狗油。
应用德国VTA公司制造的刮膜式分子蒸馏中试设备对甲酯化海狗油进行分子蒸馏，包括如下步骤a)脱气取上步酯化海狗油置于原料罐中，由进料泵送入脱气罐，在温度30℃、系统压力2mbar的条件下脱气，得到脱除极轻组分的原料液；b)预热蒸馏取上步原料液以20.0kg/h的进料速度送入预热级蒸馏器中，在190℃、系统压力0.01mbar、刮膜转子速度250rpm的条件下蒸馏，收集重组分；c)蒸馏取上步重组分以20.0kg/h的进料速度送入蒸馏器中，在350℃、系统压力0.01mbar、刮膜转子速度250rpm的条件下蒸馏，收集310℃时的馏分，即得到主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油。
取原料海狗油，与海狗油等体积的0.4mol/L甲醇钾混合，甲醇钾中含有0.001％的对羟基叔丁基茴香醚，室温条件下充氮搅拌10分钟后，调节pH值到7.0，减压条件下，旋转蒸发除掉甲醇，并分离除掉其中的固体，得到甲酯化海狗油。
应用德国VTA公司制造的刮膜式分子蒸馏中试设备对甲酯化海狗油进行分子蒸馏，包括如下步骤a)脱气取上步酯化海狗油置于原料罐中，由进料泵送入脱气罐中，在20℃、系统压力2mbar的条件下脱气，得到脱除极轻组分的原料液；b)预热蒸馏取上步原料液以20.0kg/h的进料速度送入预热级蒸馏器中，在180℃、系统压力0.01mbar、刮膜转子速度250rpm的条件下蒸馏，收集重组分；c)蒸馏取上步重组分以20.0kg/h的进料速度送入蒸馏器中，在300℃、系统压力0.01mbar、刮膜转子速度160rpm的条件下蒸馏，收集305℃时的馏分，即得到主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油。
取原料海狗油，与海狗油等体积的0.5mol/L乙醇钾混合，室温条件下充氮搅拌10分钟后，调节pH值到6.8，减压条件下，旋转蒸发除掉乙醇，并分离除掉其中的固体，得到乙酯化海狗油。
应用德国VTA公司制造的刮膜式分子蒸馏中试设备对甲酯化海狗油进行分子蒸馏，包括如下步骤a)脱气取上步酯化海狗油置于原料罐中，由进料泵送入脱气罐中，在25℃、系统压力2mbar的条件下脱气，得到脱除极轻组分的原料液；b)预热蒸馏取上步原料液以15.0kg/h的进料速度送入预热级蒸馏器中，在170℃、系统压力0.005mbar、刮膜转子速度180rpm的条件下蒸馏，收集重组分；c)蒸馏取上步重组分以15.0kg/h的进料速度送入蒸馏器中，在260℃、系统压力0.005mbar、刮膜转子速度180rpm的条件下蒸馏，收集300℃时的馏分，即得到主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油。
取原料海狗油，与海狗油等体积的0.8mol/L乙醇钠混合，室温条件下充氮搅拌10分钟后，调节pH值到6.9，减压条件下，旋转蒸发除掉乙醇，并分离除掉其中的固体，得到乙酯化海狗油。
应用德国VTA公司制造的刮膜式分子蒸馏中试设备对乙酯化海狗油进行分子蒸馏，包括如下步骤a)脱气取上步酯化海狗油置于原料罐中，由进料泵送入脱气罐中，在28℃、系统压力1.5mbar的条件下脱气，得到脱除极轻组分的原料液；b)预热蒸馏取上步原料液以10.0kg/h的进料速度送入预热级蒸馏器中，在200℃、系统压力0.005mbar、刮膜转子速度200rpm的条件下蒸馏，收集重组分；c)蒸馏取上步重组分以10.0kg/h的进料速度送入蒸馏器中，在280℃、系统压力0.005mbar、刮膜转子速度200rpm的条件下蒸馏，收集300℃时的馏分，即得到主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油。
本实施例对实施例1-5所得到的产品进行色谱含量分析，其中，EPA、DHA、DPA在最终产品中的含量见下表(单位重量百分比％)
本发明产品对记忆获得障碍模型小鼠的影响本实施例应用实施例1的产品，对记忆获得障碍模型小鼠进行实验，以说明本发明所述的海狗油产品对记忆获得障碍模型小鼠的记忆有一定改善作用。
本实施例选择ICR品系小鼠，以樟柳碱造成小鼠记忆获得障碍模型，选用水迷宫自动控制仪、跳台仪观察ω-3多不饱和脂肪酸海狗油对记忆获得障碍模型小鼠的影响。
剂量设置小鼠大剂量组，灌服1.5g/Kg(相当拟定临床人等效剂量2倍)中剂量组，灌服0.75g/Kg(相当拟定临床人等效剂量)小剂量组，灌服0.37g/Kg(相当拟定临床人等效剂量0.5倍)配置方法临用时用橄榄油配成所需浓度，按0.1ml/10g体重灌胃。
阳性对照药物
名称安神健脑液提供单位北京同仁堂科技发展股份有限公司批号5150578批准文号国药准字Z11020290功能主治益气养血，养心安神。用于气血两亏，阴津不足所致的失眠多梦，神疲健忘，头晕头痛，心悸乏力，口干津少等症。
用法用量口服，一次10ml。一日三次。
规格每支10ml剂量设置小鼠灌服9ml原液/Kg(相当临床人等效剂量2倍)。
配置方法临用时用注射用水配成所需浓度，按0.1ml/10g体重灌胃。
动物小鼠种属ICR来源北京维通利华实验动物技术有限公司许可证号SCXK(京)2002-0003性别雌雄各半体重18-20g试剂①樟柳碱批号3947280 德国MERCK公司生产②橄榄油 埃莱姆豪有限公司制造(市售)仪器①跳台仪BHF-1I型 中国医学科学院药物研究所生产②水迷宫自动控制仪 LW-I型 中国医学科学院药物研究所生产给药方法动物灌胃给药，与临床口服用药途径一致。
试验对照空白对照组正常动物灌胃等体积橄榄油。
模型对照组造模动物灌胃等体积橄榄油。
试验方法1、对樟柳碱所致小鼠记忆获得障碍的改善作用(跳台试验)选健康ICR品系小鼠，雌雄各半。按体重随机分为6组(分组及给药剂量见表1)。每只小鼠灌胃相应药物0.1ml/10g体重，模型对照组、空白对照组灌胃同体积橄榄油，连续16天。于末次给药后50分钟除空白对照组外将每只小鼠腹腔注射樟柳碱5mg/Kg，并于注射后10分钟各组小鼠用跳台仪进行试验训练。将小鼠放入反应箱内(台上、台下)适应环境3分钟，然后将其放置反应箱内的铜栅上，立即通以36V的交流电。训练一次后，将动物放在反应箱内的平台上，记录3分钟内的各鼠跳下平台的错误次数和第一次跳下平台的潜伏期。与模型对照组比较，用SPSS软件进行统计学计算。
2、对樟柳碱所致小鼠记忆获得障碍的改善作用(小鼠水迷宫法)选健康ICR品系小鼠，雌雄各半。按体重随机分为6组(分组及给药剂量见表2)。每只小鼠灌胃相应药物0.1ml/10g体重，模型对照组、空白对照组灌胃同体积橄榄油溶液，连续16天。然后对小鼠进行水迷宫游泳训练。训练合格小鼠除空白对照组外，于末次给药后50分钟将每只小鼠腹腔注射樟柳碱5mg/Kg，并于注射后10分钟将各组小鼠放入水迷宫自动记录仪内，记录小鼠从起点至终点登台的时间、在盲端处的错误次数及在2分钟内上岸的动物数，重复2次，每次间隔20秒，取平均值用SPSS软件进行统计学计算。
实验结果1、对樟柳碱所致小鼠记忆获得障碍的改善作用(跳台试验)试验结果表明小鼠灌胃1.5g/Kg、0.75g/Kg，连续16天，对注射樟柳碱造成记忆获得障碍模型小鼠的学习记忆能力有一定的改善，减少跳下平台的错误次数；与模型组比较差异有显著性意义(P＜0.01)，对第一次跳下平台的潜伏期末见明显改善，与模型组比较差异未见显著性意义(P＞0.05)。结果见表1。
表1对记忆获得障碍模型小鼠的改善作用(X±SD)
与模型对照组比较*P＜0.05**P＜0.012、对小鼠记忆获得障碍的改善作用(小鼠水迷宫法)试验结果表明小鼠因腹腔注射樟柳碱造成记忆获得障碍，连续16天灌胃ω-3多不饱和脂肪酸海狗油，在1.50g/kg剂量下缩短小鼠登台时间，在1.50g/Kg和0.37g/Kg剂量下减少在盲端的错误总次数，与模型组比较差异有显著性意义(p＜0.05)。结果见表2。
表2对小鼠记忆获得障碍的改善作用(X±SD)
与模型对照组比较*P＜0.05试验结果小鼠灌胃给药海狗油产品16天，在1.5g/Kg剂量下对因注射樟柳碱造成的记忆获得障碍模型小鼠有一定的改善作用，减少小鼠在盲端处的错误次数，缩短小鼠从起点至终点游泳的时间。在1.5g/Kg、0.75g/Kg剂量下减少小鼠跳下平台错误次数，与模型组比较差异有显著性意义(P＜0.05)。其它实施例产品也均具有相同相近效果。
小结以上试验结果表明，小鼠灌胃本发明海狗油产品，连续16天，对腹腔注射樟柳碱造成的记忆获得障碍模型小鼠的学习记忆能力有一定的改善。
本发明产品对颅脑损伤患者的记忆功能影响的临床疗效观察1、研究对象病例为2004年3月-2005年7月康复科住院患者，共40例，其中男性28例，女性12例；年龄21-48岁，平均年龄35.6岁。入选病例均在1个月内有明确头部外伤史，并排除以下情况①既往有颅脑损伤史及脑血管意外史或其他颅内占位病史、脑炎史等②外伤前有精神病史或吸毒、长期嗜酒史③外伤时年龄＜10岁或＞60岁④外伤后昏迷时间超过6小时或格拉斯哥评分(GCS评分)≤8分。
受伤原因车祸致伤35例，打击伤5例。入院诊断脑挫裂伤24例，脑震荡13例，单纯性硬膜外血肿3例。伤后入院时间6-16天，平均7.4天。患者按GCS评分为轻型颅脑损伤组13例，中型颅脑损伤组27例。
40例患者随机分为电针治疗组20例，其中男性14例，女性6例，平均年龄35.8岁；常规治疗组20例，其中男性14例，女性6例，平均年龄35.4岁。两组患者一般情况具有可比性。
2、治疗方法
常规治疗组(简称常规组)给予口服脑复康0.8g，每日3次，尼莫地平20mg，每日3次。视具体情况酌情脱水治疗，防治各种并发症，同时根据患者的功能情况进行康复功能训练，主要是运动治疗和作业治疗，如肢体关节被动运动、神经肌肉促通技术、体位转移训练、物理治疗等，存在语言障碍则进行语言训练。
本发明组服用海狗油产品，服用量为0.06g/Kg体重，每日1次，15天为1疗程，共2个疗程。
3、评估方法康复治疗前后检测记忆及认知功能。记忆功能检测采用韦氏记忆量表(Wechsler memory scale，WMS)测定记忆商(memory quotient，MQ)(初次用甲式，末次用乙式)，认知功能评估采用简明智力状态检查(mini mental status examination，MMSE)。
4、统计方法计量资料采用t检验或配对t检验，P值＜0.05认为有显著性意义。
5、结果本发明组和常规组治疗后记忆商(MQ)均有明显改善，本发明组MQ评分高于常规组(t＝3.216，P＜0.05)(表1)表1治疗前后MQ评分结果
治疗组和常规组治疗后MMSE评分均高于治疗前(t＝3.026，2.937，P＜0.05)，本发明组效果优于常规组(表2)。
表2治疗前后MMSE评分结果
6、结论本发明产品可改善颅脑损伤患者的记忆功能，增强患者的记忆力。
权利要求
1.一种主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油在制备促智药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的海狗油中三种ω-3多烯不饱和脂肪酸的质量百分含量分别为EPA6.5-9.0％DHA10.5-12.5％DPA4.0-8.0％。
3.一种如权利要求1所述的主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤1)海狗油的酯化取原料海狗油，与海狗油等体积的0.2-0.8mol/L的醇的碱金属盐混合，充氮、并调节pH值到6.8-7.2，减压蒸发除掉醇，并分离除掉其中的固体，得到酯化海狗油；2)分子蒸馏a)脱气取上步酯化海狗油置于原料罐中，由进料泵送入脱气罐中，在20-30℃、系统压力1-2mbar的条件下脱气，得到脱除极轻组分的原料液；b)预热蒸馏将上步原料液以5.0-20.0kg/h的进料速度送入到预热级蒸馏器中，在170-200℃、系统压力0.001-0.1mbar、刮膜转子速度150-250rpm的条件下蒸馏，收集重组分；c)蒸馏取上步重组分以5.0-20.0kg/h的进料速度送入到蒸馏器中，在250-350℃、系统压力0.001-0.1mbar、刮膜转子速度150-250rpm的条件下蒸馏，收集290-310℃时的馏分，即得到主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油。
全文摘要
本发明涉及主要成分为EPA、DHA以及DPA的海狗油在制备促智药物中的应用，属于药物制剂领域。该海狗油是通过将海狗油粗品酯化、分子蒸馏得到的精品，其中三种ω－3多烯不饱和脂肪酸的质量百分含量分别为6.5－9.0％的EPA、10.5－12.5％的DHA、4.0－8.0％的DPA。该海狗油可用于制备促智药物，特别是在制备一种具有增强脑功能、提高脑活力、补充脑营养、改善智力及记忆力的药物中的应用。本发明中所述的海狗油以增智健脑为主，用于少年儿童促进大脑发育，用于青、中年增强记忆力，提高学习和工作效率，用于老年人延缓大脑神经细胞的老化。安全有效，无任何毒、副作用。
文档编号A61K31/202GK101032521SQ200710086570
公开日2007年9月12日 申请日期2007年3月15日 优先权日2007年3月15日
发明者张义兴, 张智凯 申请人:张义兴, 张智凯