专利名称：：一种体外培育牛黄及含有它的固体口服制剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种体外培育牛黄及含有它的固体口服制剂。
背景技术：
：牛黄是中医学常用珍贵药，其作用为清热解毒、镇惊消肿、强心利胆等。天然牛黄的自然发生率仅为0.921%，药源匮乏。自1972年国家药品监督管理部门陆续批准了3个牛黄代用品，即人工牛黄、培植牛黄和体外培育牛黄。国家药品监督管理部门规定对于国家药品标准处方中含牛黄的临床急重病症用药品种和国家药品监督管理部门批准的含牛黄的新药，可以将处方中的牛黄以培植牛黄、体外培育牛黄替代牛黄等量投料使用，但不得以人工牛黄替代。其他含牛黄的品种可以将处方中的牛黄以培植牛黄、体外培育牛黄或人工牛黄替代牛黄等量投料使用。
发明内容本发明的目的在于提供一种体外培育牛黄，使所得体外培育牛黄在药学应用上能够与天然牛黄接近并替代部分天然牛黄的使用，缓解天然牛黄资源的匮乏。本发明另一个的目的在于提供一种含有该体外培育牛黄的口服固体制剂。一种体外培育牛黄，其特征在于利用天然牛胆汁，加入特定组分，在体外模拟牛胆结石的形成方式培育牛黄；其中，特定组分为胆红素、胆酸、去氧胆酸、胆固醇、硫酸镁、硫酸亚铁、磷酸氢钙和牛磺酸；所得到的体外培育牛黄中胆酸不低于6%,胆红素不低于35%。上述体外培育牛黄具体是通过以下方法制备的(1)取新鲜的牛胆汁，按照以下比例加入胆红素3040%、胆酸814%、去氧胆酸36%、胆固醇12%、硫酸镁O.51.5%、硫酸亚铁0.20.8%、磷酸氢钙12%、牛磺酸13%(所述的百分比为各组分占新鲜的牛胆汁重量体积百分比(g/ml));(2)经过(1)步得到的牛胆汁混合物中按新鲜牛胆汁葡萄糖醛酸酶为510:l的体积比例加入e-葡萄糖醛酸酶，混合均匀，密封，37土rc振荡水浴中保持4io小时，之后每隔l小时测定牛胆汁混合物的pH值，当pH在34时，停止振荡水浴；(3)将上述混合物用离心机分离出沉淀，用蒸馏水洗净，测定混合物胆红素和胆酸含量，使混合物中胆红素重量百分含量不低于40%，胆酸的重量百分含量不低于10%;(4)将第(3)步所得混合物按每100mg固体加入50150ml水的比例加入蒸馏水得到混悬液，搅拌均匀，用牛磺酸调节混悬液pH值至56之间，按每100ml混悬液加入510ml的比例加入多糖粘蛋白，混合均匀；(5)将第(4)步骤所得的混合物超声1530分钟，温度控制在2030'C之间，然后转入低速离心机，转速为15002500r/分钟，待发现有球状固体形成时，转入摇床，以100200转/分钟的速率保持2小时，停机，静止26小时，取出球状固体；(6)将球状固体在305(TC温度下减压干燥后即得体外培育牛黄，水分含量不高于体外培育牛黄重量的9%。上述体外培育牛黄的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)取新鲜的牛胆汁，按照以下比例(g/ml)加入胆红素3040%、胆酸814%、去氧胆酸36%、胆固醇12%、硫酸镁O.51.5%、硫酸亚铁O.20.8%、磷酸氢钙l2%、牛磺酸13%;(2)经过(1)步得到的牛胆汁混合物中按新鲜牛胆汁3-葡萄糖醛酸酶为510:l的体积比例加入e-葡萄糖醛酸酶，混合均匀，密封，37土rc振荡水浴中保持4io小时，之后每隔1小时测定牛胆汁混合物的pH值，当pH在34时，停止振荡水浴；(3)将上述混合物用离心机分离出沉淀，用蒸馏水洗净，测定混合物胆红素和胆酸含量，使混合物中胆红素含量不低于40%，胆酸的含量不低于10%;(4)将第(3)步所得混合物按每100mg固体加入50150ml水的比例加入蒸馏水得到混悬液，搅拌均匀，用牛磺酸调节混悬液pH值至5~6之间，按每100ml混悬液加入510ml的比例加入多糖粘蛋白，混合均匀；(5)将第(4)步骤所得的混合物超声1530分钟，温度控制在2030。C之间，然后转入低速离心机，转速为15002500r/分钟，待发现有球状固体形成时，转入摇床，以100200转/分钟的速率保持2小时，停机，静止26小时，取出球状固体；(6)将球状固体在305(TC温度下减压干燥后即得体外培育牛黄，水分含量不高于体外培育牛黄重量的9%。本发明体外培育牛黄在制备治疗感冒药物中应用，特别是指固体口服制剂中用体外培育牛黄替代人工牛黄。一种治疗感冒的口服固体制剂，其特征在于包括上述本发明体外培育牛黄。该口服固体制剂还可以含有对乙酰氨基酚、咖啡因和马来酸氯苯那敏中的一种或几种，优选为对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏三种组合。本发明优选的对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏和体外培育牛黄的重量比为250:15:1:10。本发明所述的口服固体制剂优选片剂或胶囊剂，四味主药可以混匀后灌胶囊或压片，也可以加入适量药剂学上可接受的辅料后再灌胶囊或压片。本发明的含有体外培育牛黄的治疗感冒用固体口服制剂的具体制法有两种1、将按配方取所有原辅料混合均匀后制粒、干燥、整粒，加入适量药学可接受的润滑剂，混合均匀后制成所需剂型。2、或者按重量比例取对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、咖啡因及其他口服固体制剂的填充剂混合均匀制得混合物，取1/3混合物与体外培育牛黄混合均匀后制粒；剩下的混合物用口服固体制剂粘合剂制粒，分开干燥、整粒后合并，加入药学可接受的润滑剂，混合均匀后制成所需剂型。本发明所用的原料均可市售获得。本发明的有益效果本发明中的体外培育牛黄是根据牛胆结石形成机理结合现代生物学原理，在仿生学技术基础上模仿牛胆内的生物环境研究而成，成分和结构均与天然牛黄非常接近。我们对其剖面和结构进行了光镜及电镜分析，结果与天然牛黄十分相似。本发明体外培育牛黄在重金属含量方面比天然牛黄更容易控制，各项质量指标符合国家标准。同时药理药效方面的各项指标与天然牛黄的对比分析和实验研究，结果均无显著性差异。在此基础上，在全国多家医院进行的临床试验表明，其临床疗效优于目前的人工牛黄。试验例本发明临床观察试验1、本发明单味体外培育牛黄胶囊治疗乙脑风痰闭窍症和中风痰热闭穷症的临床观察。一般资料病例120例。治疗方法每日口服2次，每次2粒，疗程为1周。结果表明单味体外培育牛黄胶囊对乙脑风痰闭窍症和中风痰热闭穷症有显著的治疗作用。观察结果见表l表1单味体外培育牛黄胶囊对乙脑风痰闭窍症和中风痰热闭穷症的治疗作用<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>2、含本发明体外培育牛黄的牛黄上清丸治疗牙龈肿痛和咽喉肿痛的临床观察。一般资料病例120例。治疗方法每日口服2次，每次2粒，疗程为1周。结果表明含本发明体外培育牛黄的牛黄上清丸对牙龈肿痛和咽喉肿痛有显著的治疗作用。结果见表2。表2含本发明体外培育牛黄的牛黄上清丸治疗牙龈肿痛和咽喉肿痛的治疗作用<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>具体实施方法实施例1(1)取新鲜牛胆汁1000ral。(2)加入下列组分胆红素300g胆酸100g去氧胆酸50g胆固醇10硫酸镁10g硫酸亚铁5g磷酸氢钙10g牛磺酸15g(3)将上述组分与e-葡萄糖醛酸酶混悬液100ml混合均匀，密封，37土1'C振荡水浴中保持5小时，之后每隔1小时测定牛胆汁的pH值，当pH在34时，停止振荡水浴。(4)将上述混合物用离心机分离出沉淀，用蒸馏水洗净，测定胆红素和胆酸含量，补加胆红素和胆酸，使混合物中胆红素含量41%，胆酸的含量12.6%。(5)将第(4)步所得混合物加入适量蒸馏水(按每100mg固体加入150ml水的比例添加)得到混悬液，搅拌均匀，用牛磺酸调节混悬液pH值至5.5，加入适量多糖粘蛋白(每100ml混悬液加入5nil)，混合均匀。(6)将第(5)步骤所得的混合物超声20分钟，温度控制在2030'C之间，然后转入低速离心机，转速为2000r/分钟，待发现有球状固体形成时，转入摇床，以200转/分钟的速率保持保持2小时，停机，静止6小时，取出球状固体。(7)将球状固体在3(TC温度下减压干燥，即得药用体外培育牛黄607.5g，其中胆酸含量为16°/。，胆红素含量为49%，水分7%。实施例2(1)取新鲜牛胆汁1000ml。(2)加入下列组分胆红素310g胆酸80g去氧胆酸40g胆固醇15硫酸镁15g硫酸亚铁8g磷酸氢钙10g牛磺酸25g(3)将上述组分与P-葡萄糖醛酸酶混悬液100ml混合均匀，密封，37土rC振荡水浴中保持5小时，之后每隔l小时测定牛胆汁的pH值，当pH在34时，停止振荡水浴。(4)将上述混合物用离心机分离出沉淀，用蒸馏水洗净，测定胆红素和胆酸含量，补加胆红素和胆酸，使混合物中胆红素含量为43%，胆酸的含量为11.3%。(5)将第(4)步所得混合物加入适量蒸馏水(按每100mg固体加入50ml水的比例)，搅拌均匀，用牛磺酸调节混悬液pH值至5.5，加入适量多糖粘蛋白(每100ml混悬液加入10ml多糖粘蛋白)，混合均匀。(6)将第(5)步骤所得的混合物超声20分钟，温度控制在2030'C之间，然后转入低速离心机，转速为1500r/分钟。待发现有球状固体形成时，转入摇床，以100转/分钟的速率保持2小时，停机，静止6小时，取出球状固体。(7)将球状固体在5(TC温度下减压干燥，测定水分为6.2%，即得药用体外培育牛黄，共589g，所得体外培育牛黄中胆酸含量为14%，胆红素含量为54%。实施例3对乙酰氨基酚250g马来酸氯苯那敏lg咖啡因15g体外培育牛黄10g乙醇(40%)适量硬脂酸镁0.4g1000粒将称量好马来酸氯苯那敏、咖啡因、体外培育牛黄(按实施例1方法制备得到)加入高效湿法混合机混合10分钟后，再和对乙酰氨基酚按等量递增法混合均匀。加入配制好的重量百分比为40%的乙醇，调节好高效湿法混合制粒机的转速，制成颗粒，干燥，整粒。称取处方量的硬脂酸镁与颗粒混合均匀后，l号胶囊充填，即得。实施例4对乙酰氨基酚250g马来酸氯苯那敏lg咖啡因15g体外培育牛黄10g微晶纤维素50g乙醇(40%)适量硬脂酸镁0.4glil1000片将称量好马来酸氯苯那敏、咖啡因、体外培育牛黄(按实施例l方法制备得到)和微晶纤维素加入高效湿法混合机混合IO分钟后，再和对乙酰氨基酚按等量递增法混合均匀。加入配制好的40%乙醇，调节好高效湿法混合制粒机的转速，制成颗粒，干燥，整粒。称取处方量的硬脂酸镁与颗粒混合均匀后，测定中间体含量，压片，即得实施例5对乙酰氨基酚250g马来酸氯苯那敏lg咖啡因15g体外培育牛黄10g糊精2.5g20%淀粉浆适量乙醇(40%)适量硬脂酸镁0.4g制成1000粒将称量好马来酸氯苯那敏、咖啡因和糊精加入高效湿法混合机混合10分钟后，再和对乙酰氨基酚按等量递增法混合均匀。将混合好的料粉取出1/3，余下的料粉用20%淀粉浆制成颗粒①；将取出的1/3料粉加入称量好的体外培育牛黄(按实施例1方法制备得到)用高效湿法混合机混合10分钟，用40%乙醇制成颗粒@;颗粒①和②分别干燥后，整粒合并。称取处方量的硬脂酸镁与颗粒混合均匀后，1号胶囊充填，即得。权利要求1、一种体外培育牛黄，其特征在于利用天然牛胆汁，加入特定组分，在体外模拟牛胆结石的形成方式培育牛黄；其中，特定组分为胆红素、胆酸、去氧胆酸、胆固醇、硫酸镁、硫酸亚铁、磷酸氢钙和牛磺酸；所得体外培育牛黄中胆酸不低于6％，胆红素不低于35％。2、根据权利要求1所述的体外培育牛黄，其特征在于该体外培育牛黄是通过以下方法制备得到的(1)取新鲜的牛胆汁，按照以下比例加入胆红素3040%、胆酸814%、去氧胆酸36%、胆固醇12%、硫酸镁0.51.5%、硫酸亚铁0.20.8%、磷酸氢钙12%、牛磺酸13%;(2)经过(1)步得到的牛胆汁混合物中按新鲜牛胆汁e-葡萄糖醛酸酶为510:l的比例加入e-葡萄糖醛酸酶，混合均匀，密封，37土rC振荡水浴中保持410小时，之后每隔1小时测定牛胆汁混合物的pH值，当pH在34时，停止振荡水浴；(3)将上述混合物用离心机分离出沉淀，用蒸馏水洗净，测定混合物胆红素和胆酸含量，使混合物中胆红素含量不低于40%，胆酸的含量不低于10%;(4)将第(3)步所得混合物按每100mg固体加入50150ml水的比例加入蒸馏水得到混悬液，搅拌均匀，用牛磺酸调节混悬液pH值至56之间，按每100ml混悬液加入510ml的比例加入多糖粘蛋白，混合均匀；(5)将第(4)步骤所得的混合物超声1530分钟，温度控制在2030'C之间，然后转入低速离心机，转速为15002500r/分钟，待发现有球状固体形成时，转入摇床，以100200转/分钟的速率保持2小时，停机，静止26小时，取出球状固体；(6)将球状固体在305(TC温度下减压干燥后即得体外培育牛黄。3、一种权利要求1所述的体外培育牛黄的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)取新鲜的牛胆汁，按照以下比例加入胆红素3040%、胆酸814%、去氧胆酸36%、胆固醇12%、硫酸镁0.51.5%、硫酸亚铁0.20.8%、磷酸氢钙12%、牛磺酸13%;(2)经过(1)步得到的牛胆汁混合物中按新鲜牛胆汁8-葡萄糖醛酸酶为510:l的比例加入e-葡萄糖醛酸酶，混合均匀，密封，37土rC振荡水浴中保持410小时，之后每隔1小时测定牛胆汁混合物的pH值，当pH在34时，停止振荡水浴；(3)将上述混合物用离心机分离出沉淀，用蒸馏水洗净，测定混合物胆红素和胆酸含量，使混合物中胆红素含量不低于40%，胆酸的含量不低于10%;(4)将第(3)步所得混合物按每100mg固体加入50150ml水的比例加入蒸馏水得到混悬液，搅拌均匀，用牛磺酸调节混悬液pH值至56之间，按每100ml混悬液加入510ml的比例加入多糖粘蛋白，混合均匀；(5)将第(4)步骤所得的混合物超声1530分钟，温度控制在2030'C之间，然后转入低速离心机，转速为15002500r/分钟，待发现有球状固体形成时，转入摇床，以100200转/分钟的速率保持2小时，停机，静止26小时，取出球状固体；(6)将球状固体在3050'C温度下减压干燥后即得体外培育牛黄。4、权利要求1所述的体外培育牛黄在制备治疗感冒药物中的应用。5、一种治疗感冒的口服固体制剂，其特征在于包括权利要求1-2任意一项所述的体外培育牛黄。6、根据权利要求5所述的一种治疗感冒的口服固体制剂，还含有对乙酰氨基酚、咖啡因和马来酸氯苯那敏中的一种或几种。7、根据权利要求6所述的一种治疗感冒的口服固体制剂，其特征在于对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏和体外培育牛黄的重量比为250:15:1:10。8、根据权利要求5、6或7所述的一种治疗感冒的口服固体制剂，其特征在于所述的口服固体制剂为片剂或胶囊剂。9、一种权利要求7所述的治疗感冒的口服固体制剂的制备方法，其特征在于按重量比例取对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏与其他常用口服固体制剂填充剂混合均匀，取1/3混合物与体外培育牛黄混合均匀后制粒，剩下的混合物用常用口服固体制剂粘合剂制粒，分开干燥、整粒后合并，加入适量药学可接受的润滑剂，混合均匀后制剂；或者按重量比取对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏和体外培育牛黄与药学可接受的口服固体制剂辅料混合均匀后制粒、干燥、整粒，加入适量药学可接受的润滑剂，混合均匀后制剂。全文摘要本发明提供了一种体外培育牛黄及含有它的固体口服制剂，利用天然牛胆汁，加入特定组分，在体外模拟牛胆结石的形成方式培育牛黄；其中，特定组分为胆红素、胆酸、去氧胆酸、胆固醇、硫酸镁、硫酸亚铁、磷酸氢钙和牛磺酸，所得体外培育牛黄中胆酸不低于6％，胆红素不低于35％。本发明体外培育牛黄用于制备治疗感冒的固体口服制剂。本发明体外培育牛黄各项质量指标符合国家标准，临床试验表明，其临床疗效优于人工牛黄。文档编号A61P29/00GK101284016SQ20081012377公开日2008年10月15日申请日期2008年6月4日优先权日2008年6月4日发明者冯井胜,吴永亮申请人:江苏华阳制药有限公司