抑制瘢痕形成的方法

专利名称：抑制瘢痕形成的方法
抑制瘢疱形成的方法本发明涉及提供用于抑制在伤口愈合时瘢痕形成的新方法。本发明还提供抗瘢痕 形成剂的新应用；选择用于抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的适当治疗方案的新方法；和 用于抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的试剂盒。所述抗瘢痕形成剂优选不是TGF-β 3。对伤口愈合的瘢痕形成反应通常遍及所有成年哺乳动物。瘢痕形成反应在大部分 组织类型之间是保守的，并且在每种情形中导致相同的结果，即形成纤维化组织，称为“瘢 痕”。瘢痕可以定义为“在身体任何组织中的损伤或疾病部位处形成的纤维结缔组织”。在瘢痕是由伤口愈合导致的情形中，瘢痕构成作为修复反应的结果而产生的结 构。该修复过程作为生物必需的进化方案出现以防止受伤动物死亡。为了克服由于感染或 失血导致死亡的风险，身体快速反应来修复损伤区域，而不是尝试再生损伤组织。由于损伤 组织不是再生以获得与受伤前存在的相同组织构造，所以通过其与未受伤组织相比的异常 形态学可以鉴定瘢痕。宏观上看，瘢痕可以沉降到周围组织表面之下，或者升高到它们未受伤的周围组 织表面之上。瘢痕可能比正常组织颜色上相对更暗(色素沉着过度)，或者可能比它们周围 具有更淡的颜色(色素沉着不足)。在皮肤瘢痕的情形中，色素沉着过度的或色素沉着不足 的瘢痕构成明显的妆容缺陷。还已知皮肤瘢痕可以比未受伤皮肤更红，使得它们成为显眼 的和妆容上难以接受的。已经表明，瘢痕的妆容外观是构成瘢痕对受害者的心理影响的主 要因素之一，并且这些影响在导致瘢痕的伤口已经愈合之后可能保持很久。除了它们的心理影响，瘢痕还可能对受害者具有有害的身体影响。这些影响典型 地作为瘢痕和正常皮肤之间的机械差异的结果而出现。瘢痕的异常结构和组成意味着它 们典型地比它们的正常组织对应物具有更少的柔韧性。结果，瘢痕可能是正常功能的损害 (诸如在瘢痕覆盖关节可以限制可能运动范围的情形中)的原因，并且如果从年幼时就存 在的话，可能阻碍正常的生长。尽管本领域技术人员公知与瘢痕形成相关的缺点的事实，仍然存在对新的和改进 的可以用于抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的治疗方法的需要。本发明一些方面的一个目的是提供改进的抑制在伤口愈合时瘢痕形成的方法。本 发明其它方面的一个目的是提供抗瘢痕形成剂的新应用。这些抗瘢痕形成剂的新应用可以 构成现有技术已知的那些的备选应用，但是它可以是优选的，因为它们构成与已经已知的 那些相比改进的应用。本发明某些方面的一个目的是提供选择用于抑制与伤口愈合相关的 瘢痕形成的适当治疗方案的新方法。本发明的其它方面的一个目的是提供用于抑制与伤口 愈合相关的瘢痕形成的试剂盒。这些试剂盒可以用于治疗方法中，所述治疗方法提供与现 有技术已知的那些相比增加的对瘢痕形成的抑制。在本发明的第一方面，提供一种抑制在伤口愈合时瘢痕形成的方法，所述方法包 括治疗其中瘢痕形成有待抑制的身体部位在第一次进行的治疗中，提供第一治疗有效量的抗瘢痕形成剂至每厘米创缘，或 每厘米待形成伤口的部位；和在伤口形成后和在第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生的第二次进行的治疗中，为所述伤口提供治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂，所述治疗有效量大于在所述 第一次进行的治疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量。在第二方面，本发明提供一种抑制在伤口愈合时形成的瘢痕形成的方法，所述方 法包括治疗其中瘢痕形成有待抑制的身体部位在第一次进行的治疗中，提供第一治疗有效量的抗瘢痕形成剂至每厘米待形成伤 口的部位；和在伤口形成后和在第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生的第二次进行 的治疗中，为所述伤口提供治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂，所述治疗有效量大于在所述 第一次进行的治疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量。在第三方面，本发明提供一种抑制在伤口愈合时形成的瘢痕形成的方法，所述方 法包括治疗其中瘢痕形成有待抑制的身体部位在第一次进行的治疗中，提供第一治疗有效量的抗瘢痕形成剂至每厘米创缘或每 厘米将来的创缘；和在伤口形成后和在第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生的第二次进行 的治疗中，为所述伤口提供治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂，所述治疗有效量大于在所述 第一次进行的治疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量。本发明是基于本发明人的以下发现通过使用一种治疗方案可以出人意料地有效 抑制瘢痕形成，否则所述瘢痕形成预期将会在伤口愈合时存在，所述治疗方案包括至少两 次进行的治疗，其中在第二次(和任何随后)进行的治疗中用比第一次更大的治疗有效量 的抗瘢痕形成剂治疗有待减少瘢痕形成的部位。第一次进行的治疗可以在接近伤害或伤口 闭合的时间发生，然后每一次进一步进行的治疗可以在前一次进行的治疗后8小时至48小 时之间发生。在本发明公开内容中首次描述的这些治疗方案，产生的瘢痕要比使用已知治 疗方法可获得的瘢痕少得多。本发明的任一方面或实施方案，包括描述药物、方法或试剂盒的那些，可以优选 使用不同于TGF-β 3的抗瘢痕形成剂。可以优选本发明的所述方面或实施方案利用白介 素-10 (IL-10)，或其片段或衍生物作为抗瘢痕形成剂。不希望受任何假说约束，本发明人认为将伤口处或将形成伤口的部位处的细胞暴 露于在第一次进行的治疗中提供的治疗有效量的抗瘢痕形成剂，能够减少在伤口愈合较早 阶段期间的瘢痕形成反应。在第二次(和任何进一步)进行的治疗中提供的抗瘢痕形成剂 可用来抵抗生物学过程的促_瘢痕形成“级联”，否则所述促_瘢痕形成“级联”将在伤口部 位产生。该级联典型地是自我放大的，各种促纤维化因子能够导致它们自己的诱导或另外 的诱导瘢痕形成的因子的诱导。在第二次进行治疗中更大剂量的抗瘢痕形成剂的使用似乎 抵抗该放大作用，并因此与使用现有技术方法可以获得的相比更有效地抑制瘢痕形成。在 以下实验结果部分陈述本发明人的发现，表明抗瘢痕形成剂如IL-10按照本发明的使用可 以能够减少在治疗的伤口中存在的炎症细胞的数量和/或比例。由于炎症细胞经常涉及生 成可促进该“级联”的因子，所以这可能代表本发明药物、方法和试剂盒实现它们的效果的 一种可能作用模式。重要的是注意到该治疗模式在之前还未提示过，这可能是由于以下讨论的现有技 术的教导导致的。然而，本发明人已经发现该新方法在抑制瘢痕形成方面具有出人意料的有益效果，这显著大于使用迄今为止已知的其它抗-瘢痕形成治疗方案可以实现的效果。本发明涉及的发现是非常出人意料的，因为不仅获得的抗-瘢痕形成结果特别有 效，而且现有技术导致本领域技术人员相信使用增加剂量的抗瘢痕形成剂的该治疗方案将 不会具有与使用较小剂量的已知方案同样多的益处。之前本领域技术人员已经理解响应于抗瘢痕形成剂引发的抗_瘢痕形成反应采 取“钟形”剂量反应曲线形式。这例举为在不同单剂量的公知抗瘢痕形成剂TGF-β 3的给 药时所看到的反应。在TGF-β 3的剂量反应曲线的上端或下端的剂量不如位于剂量反应中 间的那些有效。基于这些发现，已经确定每厘米其中瘢痕形成有待抑制的部位作为单剂量 提供的TGF- β 3的优选治疗有效量是约200ng。单次给药更低剂量(约IOOng)或更高剂量 (如500ng)不产生如200ng所导致的瘢痕形成的有效减少。本发明人和本领域其它工作人 员的研究已经确定当在受伤之前或在伤口形成后对创缘施用时200ng剂量的TGF- β 3是有 效的。产生钟形剂量反应曲线的该反应模式在许多其它抗瘢痕形成剂和特别是具有抗-瘢 痕形成活性的其它生物分子(如生长因子，生长因子中和剂，受体配体等)中观察到。一旦对药剂如TGF-β 3的抗-瘢痕形成有效性的研究已经鉴定到使用的最佳剂量 (例如，在TGF-β 3的情形中200ng)，进一步的研究考虑通过重复施用该剂量至待减少瘢痕 形成的部位是否赋予任何优势。这些结果显示就观察到的抗_瘢痕形成效果而言许多抗瘢 痕形成剂，如TGF-β 3，至伤口的重复给药通常不提供任何益处。假设剂量反应曲线已经鉴定(在单剂量治疗方案中)增加施用于伤口抗瘢痕形 成剂(如TGF_i3 3)的剂量将降低治疗效果，则任何使用逐步升高剂量的抗瘢痕形成剂作为 治疗方案的一部分的建议将被视为起相反作用的。基于(本发明人和其它组)已经进行的 实验，预期使用多次进行的治疗不仅不会比单次治疗方案更有效，而且更复杂和昂贵。此 外，预期其中提供给伤口的抗瘢痕形成剂的量随时间增加的方案将实际上降低治疗的有效 性，因为它将导致提供的抗瘢痕形成剂的量升至钟形曲线的上部，在该上部积极地增加剂 量降低抗_瘢痕形成的有效性。鉴于上述情况，可以看到本领域技术人员没有动机考虑本文所述的这种治疗，其 中利用重复进行的治疗，并且提供给瘢痕形成有待抑制的身体部位的抗瘢痕形成剂的量在 第一次和第二次治疗之间增加。因此，应当理解本公开内容阐述的发现提供了出人意料的 但是有价值的对治疗范围的补充，其可以用来临床抑制伤口的瘢痕形成。由于本文公开的治疗方法要求彼此相隔至少8-48小时之间发生的至少两次进行 的治疗，所以它们不适合用于将不能够完成第二次或进一步进行的治疗的患者。该观察获 得了本发明的另一方面，其中提供了一种选择用于抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的适当 治疗方案的方法，所述方法包括确定需要该瘢痕形成的抑制的个体是否能够完成第二次进行的治疗，所述第二次 进行的治疗在第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生；和如果所述个体将能够完成第二次进行的治疗，所述第二次进行的治疗在第一次进 行的治疗后8小时至48小时之间发生，则选择以下治疗方案，所述治疗方案包括按照本发 明最先的三方面的任一种治疗方法，或如果所述个体将不能够完成第二次进行的治疗，所述第二次进行的治疗在第一次 进行的治疗后8小时至48小时之间发生，则选择以下治疗方案，所述治疗方案包括
在单次进行的治疗中，向其中瘢痕形成有待抑制的每厘米创缘或每厘米待形成伤 口的部位提供一定量的所述抗瘢痕形成剂，所述量的抗瘢痕形成剂当在单次进行的治疗中 提供时已经显示是治疗有效的。可以用于包括单次进行的治疗的治疗方案中的抗瘢痕形成剂的治疗有效量可以 由本领域技术人员参照现有技术鉴定。仅作为举例，许多特别感兴趣的抗瘢痕形成剂的治 疗有效量在本说明书内其它部分描述。在本发明的各个方面和实施方案中，本公开内容关于每厘米身体部位(例如，每 厘米待受创伤的部位，或每厘米创缘或未来创缘)提供的量定义了提供给该部位的抗瘢痕 形成剂的量。应当理解，尽管这些段落定义了提供给该部位的抗瘢痕形成剂的量，但是它们 不限制提供该量的方式。特别是，这些段落不应理解为要求抗瘢痕形成剂至每厘米待治疗 的部位的给药(尽管这可以是优选实施方案)。所需量的抗瘢痕形成剂可以通过在任何部 位进行的任何数量的给药提供，这允许将特定量的抗瘢痕形成剂提供给瘢痕形成有待抑制 的部位。在本发明的另一方面，提供一种抗瘢痕形成剂，其用作治疗伤口或待形成伤口的 部位以抑制瘢痕形成的药物，其中在第一次进行的治疗中，提供所述药物以使第一治疗有 效量的所述抗瘢痕形成剂被提供至每厘米创缘或每厘米待形成伤口的部位；并且其中在先 前进行的治疗后8小时至48小时之间在随后进行的治疗中，提供所述药物以使更大治疗有 效量的所述抗瘢痕形成剂被提供至每厘米创缘。在本发明的另一方面，提供一种抗瘢痕形成剂，其用作治疗伤口或待形成伤口的 部位以抑制瘢痕形成的药物，其中在第一次进行的治疗中，提供所述药物以使第一治疗有 效量的所述抗瘢痕形成剂被提供至每厘米创缘或每厘米待形成伤口的部位；并且其中在先 前进行的治疗后8小时至48小时之间在随后进行的治疗中，提供所述药物以使更大治疗有 效量的所述抗瘢痕形成剂被提供至每厘米创缘。在本发明的还有的另一方面，提供白介素-IO(IL-IO)或其治疗有效片段或衍生 物，其用作治疗伤口或待形成伤口的部位以抑制瘢痕形成的药物，其中在第一次进行的治 疗中，提供所述药物以使第一治疗有效量的IL-10或其治疗有效片段或衍生物被提供至每 厘米创缘或每厘米待形成伤口的部位；并且其中在先前进行的治疗后8小时至48小时之间 在随后进行的治疗中，提供所述药物以使更大治疗有效量的IL-10或其治疗有效片段或衍 生物被提供至每厘米创缘。当按照本发明的这方面期望使用IL-10或其治疗有效片段或衍生物时，可以优选 第一治疗有效量是在人受试者中每厘米约Ing和IOOOng IL-10 (或其治疗有效片段或衍生 物)。第一次进行的治疗可以适当地使用每厘米约Ing至lOOng、约2ng至50ng或约5ng至 25ng的治疗有效量。在第二次进行的治疗中提供的适当的治疗有效剂量可以因此按照本说 明书其它部分提供的指导来确定(例如，是第一治疗有效量的大小的至多2，3，4，5，10，20 或更多倍)。按照本发明这方面的药物可以是可重配的药物，如冻干的注射剂组合物。本发明还提供抗瘢痕形成剂作为药物在治疗伤口或待形成伤口的部位以抑制瘢 痕形成的应用，其中在第一次进行的治疗中，提供所述药物以使第一治疗有效量的所述抗 瘢痕形成剂被提供至每厘米创缘或每厘米待形成伤口的部位；并且其中在先前进行的治疗后8小时至48小时之间在随后进行的治疗中，提供所述药物以使更大治疗有效量的所述抗 瘢痕形成剂被提供至每厘米创缘。当按照本发明的这方面使用抗瘢痕形成剂时，可优选所述药物是注射剂药物，并 且特别优选所述药物是用于皮内注射。配制用于本发明任一方面的适当的药物可以是这样的，即使在100 μ 1体积的药 物中提供必需量的抗瘢痕形成剂。另外，本发明人已经发现实施本发明方法的方式，包括按照本发明制造的药物，可 以以用于抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的试剂盒形式提供；所述试剂盒包括至少第一和 第二小瓶，所述小瓶包括用于对伤口或待形成伤口的部位以彼此间隔8至48小时多次给药 的抗瘢痕形成剂。在本发明的另一方面，提供用于抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的试剂盒，所述 试剂盒包括第一个量的组合物，所述组合物含有抗瘢痕形成剂，该第一个量用于在第一次进 行的治疗中施用于伤口或待形成伤口的部位；第二个量的组合物，所述组合物含有所述抗瘢痕形成剂，该第二个量用于在第二 次进行的治疗中施用于伤口；关于以彼此间隔8至48小时多次施用所述第一个和第二个量的所述组合物的使 用说明，所述施用的方式是使得在所述第二次进行的治疗中施用于伤口的所述抗瘢痕形成 剂的治疗有效剂量要大于在所述第一次进行的治疗中施用的治疗有效剂量。在此试剂盒中提供的组合物可以以适合于在使用前重配的形式提供(例如冻干 的注射剂组合物)。可优选所述第一个量和第二个量的组合物分别包括不同的第一和第二组合物，其 中所述第二组合物含有浓度大于所述第一组合物的所述抗瘢痕形成剂。在这种情形中，使 用说明可能指示在第一次和第二次进行的治疗中基本上类似体积的第一和第二组合物应 当施用给所述部位。仅举例而言，第二组合物可以包括浓度比第一组合物的浓度超过约 10%，20%，30%或40% ；或甚至比第一组合物的浓度超过约50%，60%，70% 80%或90% 的抗瘢痕形成剂。第二组合物中的抗瘢痕形成剂的浓度可以比在第一组合物中提供的药剂 的浓度大100%或更多。备选地，所述第一和第二组合物可以含有基本上相同浓度的抗瘢痕形成剂，并且 使用说明可以指示在所述第二次进行的治疗中施用的所述第二组合物的体积应当大于在 所述第一次进行的治疗中施用的所述第一组合物的体积。本发明认为可以源自本发明的益处可以应用于整个身体的部位处的伤口。然而， 可优选伤口是皮肤伤口，待抑制的瘢痕形成与所述伤口相关。为了举例说明的目的，本发明 的实施方案将一般地参照皮肤伤口来描述，尽管它们仍然适用于其它组织和器官。仅作为 举例而言，在另一优选实施方案中，伤口可以是循环系统伤口，特别是血管伤口(在该情形 中治疗可以抑制再狭窄)。在本说明书其它部分考虑其中瘢痕形成可以按照本发明抑制的 其它伤口，并且包括周围神经系统的那些。该伤口可以是外科手术(例如择期外科手术) 的结果，并且这构成本发明的一个优选实施方案。本发明人认为本说明书公开的方法，应用和试剂盒可以用于抑制所有动物中的瘢痕形成，所述动物包括人或非人动物，如家养动物，体育动物(如马)或农业动物。其中瘢 痕形成有待抑制的伤口将优选是人受试者的那些。本发明的方法可任选地包括第三次或进一步进行的治疗。可以根据需要继续该进 一步进行的治疗直至负责护理患者的临床医师确定已经获得了所需的瘢痕形成的抑制。每 次进行的治疗应当在前一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生。关于第三次或进一 步进行治疗的时机的更多指导可以获自本文关于第一次和第二次进行治疗的相对时机的 公开内容。在第三次进行的治疗(和任何进一步进行的治疗)中提供给身体的所选抗瘢痕形 成剂的量可以基本上与在第二次进行的治疗中提供的量相同(因此在第二次进行的治疗 后该剂量有效地提供“平台期”)。备选地，在第三次(或随后)进行的治疗中提供给该身 体部位的抗瘢痕形成剂的量可以大于在先前进行的治疗中提供的量(以使提供的抗瘢痕 形成剂的量随着每次治疗的进行而逐步上升)。存在许多可以将本发明的治疗方法投入实践的方式，并且这些对于本领域技术人 员是明显的。现在将在下面通过非限制性的实例描述某些优选实施方案。应当理解这些实 施方案适用于本发明最先三个方面中的每一个中。在一个实施方案中，第一次和第二次进行的治疗(和当合适时其它进行的治疗) 可以都使用包含基本上相同浓度的给定抗瘢痕形成剂的组合物。在该实施方案中，在第二 次进行的治疗中施用于身体部位的组合物的量将大于在第一次进行的治疗中施用的量，并 且该区别提供在不同次进行的治疗之间剂量的增加。可优选所述第一次和第二次进行的治疗(和如果合适，任何进一步进行的治疗) 使用不同组合物，其中在第二次进行的治疗中使用的所述组合物含有的抗瘢痕形成剂的浓 度大于在第一次进行的治疗中使用的组合物的浓度。在该情形中，在第一次和第二次进行 的治疗中基本上类似体积的含有抗瘢痕形成剂的组合物可以施用于该部位(或在第二次 进行治疗中施用甚至更小的体积)，因为组合物中抗瘢痕形成剂浓度增加而导致发生治疗 之间剂量的增加。仅作为举例，第二次(和进一步)进行的治疗可以使用包含抗瘢痕形成剂 的组合物，所述抗瘢痕形成剂的浓度比第一组合物中的浓度高约10%，20%，30%或40% ； 或甚至比第一组合物中的浓度高约50%，60%，70% 80%或90%。第二组合物中抗瘢痕形 成剂的浓度可以甚至比第一组合物中提供的药剂的浓度高100%或更多。在第一次进行的治疗中每厘米身体部位(其为待形成伤口的部位，创缘或未来创 缘)提供的治疗有效剂量可以根据使用的具体抗瘢痕形成剂来选择。适当的治疗有效量可 以获自现有技术，并且关于特别感兴趣的各种抗瘢痕形成剂的某些说明性实例在本说明书 的其它部分描述。第二次进行的治疗中每厘米身体部位提供的抗瘢痕形成剂的治疗有效剂量可以 比在第一次进行的治疗中提供的治疗有效量高大约10%，20%，30%或40%。在第二次进 行的治疗中提供的抗瘢痕形成剂的治疗有效剂量可以比在第一次进行治疗中施用的治疗 有效量高50%，60%，70% 80%或90%。在第二次进行的治疗中提供的抗瘢痕形成剂的治 疗有效剂量可以比在第一次进行治疗中提供的药剂的治疗有效量高100%或更多。应当理解，尽管在每次进行的治疗中提供的抗瘢痕形成剂的量经常在本公开内容 中基于每厘米提供的量而提及，但是本公开内容不限于此，并且这些提及可以用于确定可以应用于伤口(或未来伤口)的适当剂量，如通过任何适当装置所测量。可优选第一次进行的治疗发生在受伤之前，在该情形中可以将抗瘢痕形成剂提供 给待形成伤口的部位。在抗瘢痕形成剂通过局部注射施用于皮肤的情形中(如皮内注射)， 这可导致大疱凸起，其是由于将含有抗瘢痕形成剂的溶液输入皮肤而导致。在一个优选实 施方案中，大疱可以在待形成伤口的部位凸起，并且实际上该伤口可以通过切开大疱来形 成。在该情形中，在第一次进行的治疗中提供的抗瘢痕形成剂的量可以参照待形成伤口的 部位的长度来确定。备选地，可以在待形成伤口的部位的任一侧凸起两个大疱。这些大疱可以优选位 于待形成创缘处的半厘米范围内。在该情形中，在第一次进行的治疗中提供的抗瘢痕形成 剂的量可以参照待形成伤口的长度来确定，所述长度是以未来创缘的厘米来测量(定义如 下)。优选用于在受伤前提供抗瘢痕形成剂至一个部位的大疱可以覆盖基本上待形成 伤口的部位的全长。更优选大疱可以延伸超出待形成伤口的部位的长度。适当地，该大疱 可以延伸超出待形成伤口的各端约半厘米(或更多)。按照本发明这些实施方案的皮内注射可以通过皮下注射器针头来施用，所述针头 与待形成的伤口的中线或待形成伤口的边缘基本上平行地插入。注射部位可以沿着将提供 抗瘢痕形成剂的区域的长度彼此间隔约1厘米而分隔开。在备选实施方案中，可优选第一次进行的治疗包括提供抗瘢痕形成剂于现有伤 口。本发明人认为无论细胞在受伤之前或之后暴露于抗瘢痕形成剂，与抗_瘢痕形成活性 相关的生物学机制是相同的。在任一种情形中，可以获得所需的生物学活性，只要在受伤之 前或之后其中瘢痕形成有待抑制的部位处的细胞被暴露于治疗有效量的抗瘢痕形成剂。在其中将抗瘢痕形成剂提供给现有伤口的本发明的实施方案中，所需量的抗瘢痕 形成剂可以参照伤口长度来确定，所述长度以创缘的厘米来测量(如下讨论)。抗瘢痕形成 剂应当优选沿着每个创缘的整个长度来提供，并且可以甚至提供超出受伤区域之外。在一 个优选实施方案中，抗瘢痕形成剂可以沿着延伸超出创缘各端约半厘米(或更多)的长度 来提供。皮内注射还代表了可以将抗瘢痕形成剂施用于现有伤口的优选途径。按照该实施 方案施用的皮内注射应当施用于伤口的每个边缘。注射部位应当优选在创缘半厘米范围 内。注射可以通过皮下注射器针头来施用，所述针头与伤口边缘基本上平行地插入。注射 部位可以沿着待治疗区域长度彼此间隔约一厘米而隔开。在前面段落中阐述的关于在第一次进行的治疗中提供抗瘢痕形成剂给伤口的考 虑因素也适用于在第二次(或进一步)进行的治疗中抗瘢痕形成剂的提供。由于第二次进 行的治疗发生在受伤已经出现之后，因此这始终涉及提供抗瘢痕形成剂至现有伤口。该伤 口可以是开口或闭合的，这取决于应用的伤口管理策略。当第一次进行的治疗涉及提供抗瘢痕形成剂至待形成伤口的部位时，可优选该提 供发生在受伤开始之前1小时或更短，优选在受伤开始之前半小时或更短，还更优选在受 伤开始之前四分之一小时后更短，和最优选在受伤开始之前十分钟或更短。如果第一次进行的治疗涉及提供抗瘢痕形成剂至现有伤口，则提供该治疗的时间 可以根据在伤口已经形成之后经过的时间来选择。在该情形中，可优选按照本发明的第一次进行的治疗在受伤两小时内开始，优选在受伤一个半小时内开始，更优选在受伤一小时 内开始，还更优选在受伤半小时内开始，和最优选在受伤四分之一小时内开始。备选地或附加地，第一次进行的治疗的时机可以根据在待处理的伤口闭合后经过 的时间来选择。在该情形中，可优选根据本发明的第一次进行的治疗在完成伤口闭合两小 时内开始，优选在完成伤口闭合一个半小时内开始，更优选在完成伤口闭合一小时内开始， 还更优选在完成伤口闭合半小时内开始，并且最优选在完成伤口闭合四分之一小时内开 始。在由于临床原因伤口未完全闭合的情况下(例如如果需要保持与伤口内部位的接触)， 一旦伤口被闭合至作为所采取的操作的一部分而将被闭合的最完全程度，伤口闭合可以仍 然被考虑是已经完成的。应当理解，在延期外科手术操作的情形中，根据伤口闭合后经过时间的第一次进 行的治疗的时机选择可以是特别相关的，在所述延期外科手术操作中伤口必须以延长的时 间保持开放以便允许接触进行外科手术的部位。在治疗进行之间经过的时间将是8至48小时。更优选经过的时间应当是至少10 小时，甚至更优选至少12小时，还更优选至少14小时，还更优选至少16小时，仍然还更优 选至少18小时，仍还更优选至少20小时，甚至还更优选至少22小时，和最优选约24小时。在治疗进行之间经过的时间可以至多48小时，但优选可至多约44小时，更优选可 至多约40小时，还更优选可至多约36小时，还更优选可至多约32小时，还更优选可至多约 28小时，和最优选约24小时。在实施本发明方法中，其中瘢痕形成有待抑制的区域的细胞应当“沐浴”在包含治 疗有效量的抗瘢痕形成剂的药用溶液中。这将产生一个其中细胞暴露于足够的抗瘢痕形成 剂以抑制瘢痕形成的局部环境。细胞将接受治疗有效量的所选抗瘢痕形成剂，无论所述抗 瘢痕形成剂是通过在创缘(或沿着未来伤口边缘-在

图16的图片B中显示的技术)处注 射还是通过直接注射到待形成伤口的部位中(例如，通过凸起大疱，所述大疱覆盖待受伤 部位-在图16的图片A中显示的技术)来施用，否则所述细胞将参与瘢痕形成。这些给药 途径的任一个能够在细胞周围区域中建立抗-瘢痕形成浓度的所选药剂。当第一次进行的治疗利用直接向待受伤部位注射时，通过沿着未来伤口线施用并 且覆盖待受伤区域的单次注射(或一系列“单次”注射)的给药，可以在细胞周围建立所需 量的抗瘢痕形成剂(在图16的图片A中图示的技术)。当第一次进行的治疗利用向伤口每 个边缘的“成对”注射(或沿每个未来伤口边缘向下的“成对”注射-在图16的图片B中 图示的技术)时，应当理解，待施用的抗瘢痕形成剂的总量将大于经(上述)单次注射途径 提供的总量，因为要求每个边缘上的注射以便治疗相同区域。优选在本发明的方法中通过适当药物组合物的给药来将抗瘢痕形成剂提供到所 需身体部位。优选的组合物可以是适于注射的那些，并且特别是适于皮内注射的那些。许 多组合物制剂可以用于将抗瘢痕形成剂通过皮内注射给药，其对于本领域技术人员是已知 的，并且这些可以参照具体的感兴趣的抗瘢痕形成剂来选择。现在将进一步描述用于本公开内容的各种术语，以避免疑问。应当理解，为了简洁 的目的，这些术语中的一些可能仅参照本发明的某些方面描述。然而，除了上下文另外要求 以外，这些术语的下列描述将适用于本发明的所有方面。待形成伤口的部位的厘米
为了易于参考，待形成伤口的部位的长度可以以厘米测量，以便确定按照本发明 需要提供以便减少瘢痕形成的抗瘢痕形成剂的量。可优选待治疗的长度被计算为延伸超出 待形成的伤口的预期长度，以便确保将治疗有效量的抗瘢痕形成剂提供给伤口的各端。因 此，可优选待形成伤口的部位的计算长度(和因此待处理的部位的长度)延伸超出目标伤 口的各端以外约半厘米(或更多)的距离。未来创缘的厘米数为了本公开内容的目的，待形成伤口的部位的长度，如以未来创缘的厘米数所测 量的，应当计算为待形成伤口的各个边缘的长度和(以厘米计)。可优选待处理的长度计算 为延伸超出待形成伤口边缘的各端，并且这可以帮助确保治疗有效量的抗瘢痕形成剂被提 供到伤口的各端。因此，可优选计算的未来创缘的长度(和因此待处理的部位的长度)延 伸超出待形成的伤口的各端约半厘米(或更多)的距离。抗瘢痕形成剂本发明人相信本发明的各个方面和实施方案可以结合现有技术中鉴定的几乎任 何抗瘢痕形成剂而具有有益作用。“生物”抗瘢痕形成剂(即天然存在的抗瘢痕形成剂或基 于这些药剂的那些，如生长因子，生长因子受体等)可以特别适于按照本发明使用。抗-瘢痕形成生长因子代表优选的按照本发明使用的抗瘢痕形成剂。这些药剂 以这种方式抑制瘢痕形成的能力是特别出人意料的，因为抗-瘢痕形成生长因子经常具有 “钟形”剂量反应曲线(在说明书其它部分描述的种类)，提示增加剂量的该药剂将具有很 小的抗-瘢痕形成活性。要按照本发明使用的选择的抗瘢痕形成剂(无论在本发明的方法，应用还是在试 剂盒中)优选不是TGF-β 3。仅作为非限制性实例，本发明人认为本公开内容描述的方法、应用和试剂盒可以 有利地与至少一些在下列段落中考虑的抗瘢痕形成剂一起使用。按照本发明使用的适当抗瘢痕形成剂(无论在药物、方法、应用还是试剂盒中)可 以从下组选择能够中和促-纤维化生长因子的药剂，所述促-纤维化生长因子独立地选自 由以下组成的组PDGF，TGF-β 1和TGF-β 2 ；甘露糖_6_磷酸，和涉及该药剂的化合物；可 溶性TGF-β受体，或其片段，如可溶性β聚糖；白介素-10 (IL-10)，其片段和衍生物；干扰 素-Y的抑制剂；能够影响性激素系统而以此方式抑制瘢痕形成的药剂；能够切断胞外活 化素的药剂；能够中和雌激素活性和/或促进孕酮活性的药剂TGF-β隐性相关肽(LAP)； 转化酶抑制剂，如弗林蛋白酶(furin) ；CXCL13或CXCR5活性拮抗剂；WNT5A，或其治疗有效 片段或衍生物；LXR拮抗剂；FXR拮抗剂；WNT3A或其治疗有效片段或衍生物；sFRP3，或其治 疗有效片段或衍生物；和核激素受体NR4A亚类的成员的激动剂。能够中和PDGF，TGF- β 1和/或TGF- β 2的药剂能够中和促-纤维化生长因子的药剂代表适当的可以以本公开内容描述的方 式使用的抗瘢痕形成剂，所述促_纤维化生长因子独立地选自由以下组成的组PDGF， TGF-β 1和TGF-β 2。仅作为实例，这些药剂可以包括具有所需特异性的中和抗体，能够干 扰这些生长因子与它们的受体结合的药剂，或能够抑制这些生长因子表达的药剂(包括反 义寡核苷酸，SiRNA等)。能够中和PDGF，TGF- β 1和/或TGF- β 2的药剂在抑制瘢痕形成 中的使用的进一步细节可以在本发明人的较早专利US 5662904(其公开内容通过引用并
14入本文，只要它涉及鉴定有效的抗瘢痕形成剂或这些药剂的治疗有效量)中找到。仅作为 实例，本发明人认为施用于其中瘢痕形成有待抑制的身体部位每厘米处的治疗有效量的这 些药剂可以包括足够的药剂来中和Ipg至1 μ g的量的(多种)促_纤维化生长因子。甘露糖6-磷酸和相关化合物本发明人认为甘露糖6-磷酸和与该药剂相关的化合物可以代表适当的可以以本 公开内容描述的方式使用的抗瘢痕形成剂。在本发明人的美国专利US 6，140，307，US 6，566，339和US 6，900，181公开的化 合物代表与甘露糖6-磷酸相关的具体化合物，其可以是按照本发明的优选抗瘢痕形成剂。 这些文献的公开内容通过引用结合于此，只要它涉及鉴定有效的抗瘢痕形成剂或这些药剂 的治疗有效量。关于指导，本发明人认为在这些专利中公开的治疗有效量的化合物可以如 下提供每厘米其中瘢痕形成有待抑制的部位施用约100 μ 1的10mM，20mM，或优选40mM溶 液。可溶性TGF-β受体可溶性TGF-β受体，或其片段，如可溶性β聚糖可以代表可以按照本发明所有方 面使用的优选抗瘢痕形成剂。使用可溶性TGF-β受体作为抗瘢痕形成剂的更多细节可以 在本发明人的较早专利如US 6060460 (其公开内容通过引用并入本文，只要它涉及鉴定有 效的抗瘢痕形成剂或这些药剂的治疗有效量)中找到。仅作为实例，本发明人认为用作抗 瘢痕形成剂的治疗有效量的可溶性β聚糖可以包括每厘米其中瘢痕形成有待抑制的身体 部位约1 μ g和10 μ g的可溶性β聚糖。白介素-10和相关肽本发明人认为白介素-10 (IL-10)，它的片段和衍生物构成优选的抗瘢痕形成剂， 其可以按照本发明用于其各个方面和实施方案中。优选IL-10，或其片段或衍生物，是人 IL-10，或由其衍生。人IL-10的氨基酸序列在SEQ ID No. 3中显示，并且编码人IL-10的 DNA序列在SEQ ID No. 4中显示。可以按照本发明各个方面或实施方案使用的IL-10的片段 和衍生物包括治疗有效的任何一种(其为了本公开内容的目的，包括能够抑制瘢痕形成的 IL-10的任何片段或衍生物)。例如，IL-10的部分修饰形式，其与IL-10区别在于增加、替 换或缺失至少一个氨基酸并且与IL-10具有至少95%同源性，可以用作优选的抗瘢痕形成 剂。IL-10的适当片段或衍生物可以优选保留IL-10的抗炎愈合功能。可以构成特别感兴 趣的抗瘢痕形成剂的IL-10的片段和衍生物在本发明人的早期专利(例如US 6，387，364， US7，052，684或W02006/075138)中公开。这些专利的公开内容通过引用结合于此，只要它 涉及鉴定有效的抗瘢痕形成剂或这些药剂的治疗有效量。仅作为实例，本发明人认为治疗有效量的在这些专利中公开的化合物可以如下提 供每厘米其中瘢痕形成有待抑制的部位施用约100 μ 1的1 μ M至10 μ M溶液。在瘢痕形成的动物模型中，本发明人已经鉴定了 IL-10 (或其片段或衍生物)的适 当的第一治疗有效量可以在约IOOng和5000ng之间，并且第二治疗有效量可以在约200ng 和IOOOOng之间(应当注意第二治疗有效量必须始终大于第一治疗有效量)。例如，第一治 疗有效量可以在约250和2500ng之间，而第二治疗有效量可以在约750和7500ng之间。本发明人已经发现在人中即使更低剂量的IL-10，或其治疗有效片段或衍生物可 以是治疗有效的。仅作为实例，可能希望在人中第一次进行的治疗中使用每厘米Ing和
15IOOOng之间剂量的IL-10 (或其治疗有效片段或衍生物)，因此在第二次进行的治疗中提供 更大的治疗有效剂量。第一次进行的治疗可以适当地使用约Ing和IOOng之间，约2ng和 50ng之间或约5ng和25ng之间的治疗有效量。干扰素-Y抑制剂本发明人先前已经显示干扰素-Y的抑制剂代表可以用于抑制瘢痕形成的药剂。 本发明人认为该抑制剂(特别是中和抗体，反义寡核苷酸，SiRNA等)可以代表适合于以本 公开内容考虑的方式使用的抗瘢痕形成剂。这些药剂的细节在本发明人自己的在先专利如 US 7，220，413(其公开内容通过引用结合于此，只要它涉及鉴定有效的抗瘢痕形成剂或这 些药剂的治疗有效量)中考虑。仅作为指导，本发明人认为治疗有效量的此类抑制剂(适合 于提供给一厘米身体部位以便抑制瘢痕形成)可以是能够抑制300和30000IU干扰素-γ 活性的量。活化素和抑制素TGF- β超家族成员活化素和抑制素代表抗瘢痕形成剂，并且本发明人认为这些蛋 白(或它们的治疗有效片段或衍生物)可以代表可以有效用于本文公开的本发明的各个方 面的抗瘢痕形成剂。关于活化素或抑制素的抗瘢痕形成用途的进一步的细节可以在本发明 人的较早专利如EP 0855916中发现(其公开内容通过引用结合于此，只要它涉及鉴定有效 的抗瘢痕形成剂或这些药剂的治疗有效量)。影响性激素系统的药剂本发明人的早期专利和申请(如WO 98/03180 ；其公开内容通过引用结合于此，只 要它涉及鉴定有效的抗瘢痕形成剂或这些药剂的治疗有效量)公开了各种能够影响性激 素系统而以此方式抑制瘢痕形成的药剂。本发明人认为任何这些药剂可适合于以本说明书 描述的方式使用，并且能够中和雌激素活性和/或促进孕酮活性的药剂是特别适合的用于 本发明各个方面和实施方案的抗瘢痕形成剂。能够切断胞外活化素的药剂已经显示各种肌动蛋白(actin)-切断蛋白能够作为抗瘢痕形成剂起作用(特别 是当在胞外作用时)，如本发明人的早期专利如EP 0941108 (其公开内容通过引用结合于 此，只要它涉及鉴定有效的抗瘢痕形成剂或这些药剂的治疗有效量)中所描述。凝溶胶蛋 白代表可以用作该抗瘢痕形成剂的肌动蛋白-切断蛋白的优选实例。本发明人认为以本公 开内容考虑的方式使用增加剂量的凝溶胶蛋白(或其它肌动蛋白-切断蛋白)治疗就使用 此药剂可以获得的抗瘢痕形成活性而言，可以提供显著的益处。仅作为实例，本发明人认为 治疗有效量的在这些专利中公开的化合物可以如下提供每厘米其中瘢痕形成有待抑制的 部位，施用约100 μ 1的50ηΜ至IOOOnM溶液。LAPTGF-β隐性相关肽(latency associated peptide,LAP)可代表可以有利地用于 本发明方法、应用和试剂盒中的适当的抗瘢痕形成剂。LAP作为抗瘢痕形成剂的应用的细节 在本申请人自己的专利申请如US 6319907 (其公开内容通过引用结合于此，只要它涉及鉴 定有效的抗瘢痕形成剂或这些药剂的治疗有效量)中公开。本发明人认为在1厘米要提供 LAP的身体部位处能够抑制瘢痕形成的治疗有效量的LAP可以在Ing至IOmg范围内。转化酶抑制剂
本发明人先前(例如在WO 2004009113中)已经描述转化酶抑制剂(如弗林蛋白 酶)如何可以用作具有抗-瘢痕形成活性的药剂。认为在该申请中公开的具体药剂(如异 癸酰基(isdecanoyD-RVKR-cmk和六-精氨酸)和选择转化酶抑制剂所用的标准代表了当 以本公开内容描述的方式使用时可以提供出人意料的增加的抗-瘢痕形成活性的抗瘢痕 形成剂。该较早申请的内容通过引用结合于此，只要它们涉及适当的药剂或适当药剂的选 择。纯粹为了指导，本发明人认为治疗有效量的转化酶抑制剂如癸酰基-RVKR-cmk可以如 下提供每厘米其中瘢痕形成有待抑制的部位施用约100 μ 1的0. 1 μ M和IOmM溶液。CXCL13或CXCR5活性拮抗剂本发明人已经发现，能够拮抗CXCL13或CXCR5活性的药剂能够抑制瘢痕形成，如 WO 2007/122402中所述。该早期专利申请提供了可以用于减少瘢痕形成的剂量和特别优选 的拮抗剂的细节。因此，CXCL13或CXCR5活性的拮抗剂(和特别是在WO 2007/122402中 公开的那些)被认为是可以按照本发明使用的抗瘢痕形成剂。WO 2007/122402 (特别是当 它涉及优选的抗瘢痕形成剂和这些药剂的治疗有效量时)的公开内容通过引用结合于此。WNT5A本发明人认为WNT5A(或其治疗有效片段或衍生物)构成通过按照本发明各方面 或实施方案(无论是方法，应用或试剂盒)使用可以获得附加的抗-瘢痕形成活性的抗瘢 痕形成剂。WNT5A可以优选以每厘米希望抑制瘢痕形成的身体部位少于2000ng提供，以便提 供治疗有效量的选择的抗瘢痕形成剂。本发明人自己的早期专利申请(作为PCT/GB2007/002445提交，并通过引用结合 于此)的公开内容可以用于提供关于可以按照该实施方案使用的优选抗瘢痕形成剂，以及 这些药剂的治疗有效量的指导。LXR拮抗剂本发明人已经鉴定了可以用于抑制瘢痕形成的LXR拮抗剂。这更充分地描述在本 发明人的早期专利申请GB 0625965. 9中。本发明人认为LXR拮抗剂可以按照本发明使用， 并且他们的早期专利申请的内容通过引用结合于此，只要它们涉及适当抗瘢痕形成剂的选 择和这些药剂的治疗有效量。按照本发明的该实施方案的适当抗瘢痕形成剂包括贝特酯；焦磷酸香叶基香叶 酯，Riccardin F，自氧化胆固醇硫酸酯，Wy-14643，7_酮胆固醇_3_硫酸酯，和5 α，6 α -环 氧胆固醇-3-硫酸酯。治疗有效量的LXR拮抗剂可以是每厘米期望抑制瘢痕形成的身体部 位约13pmol至约2nmol拮抗剂(优选在24小时时段内提供)。FXR活性拮抗剂本发明人已经确定FXR拮抗剂可以用于抑制瘢痕形成。这在本发明人的早期专利 申请GB 0625966. 7中更充分地描述。本发明人认为FXR的拮抗剂可以按照本发明使用，并 且他们的早期专利申请的内容通过引用结合于此，只要它们涉及适当抗瘢痕形成剂的选择 和这些药剂的治疗有效量。按照本发明这个优选实施方案的优选抗瘢痕形成剂包括选自以下组成的组的那 些:guggulsterone(Z) ；guggulsterone (E) ；scalarane ；80-574 ；和 胆汁醇。此类抗瘢痕 形成剂可以以下治疗有效量提供在24小时时段内在每厘米期望抑制瘢痕形成的身体部位至多32 μ M的拮抗剂。WNT3A本发明人已经发现WNT3A(或其治疗有效片段或衍生物)可以用于抑制瘢痕形成， 并且认为这些药剂可以代表可以按照本发明使用的抗瘢痕形成剂。这更充分地描述在本发 明人的早期专利申请GB 0702930.9中，他们的早期专利申请的内容通过引用结合于此，只 要它们涉及适当抗瘢痕形成剂的选择和这些药剂的治疗有效量。仅作为实例，这些药剂可 以以每厘米其中瘢痕形成有待抑制的部位约Ing的量提供，以便提供治疗有效量。sFRP3本发明人已经发现sFRP3(或其治疗有效片段或衍生物)可以用于抑制瘢痕形成， 并且认为这些药剂可以代表可以按照本发明使用的抗瘢痕形成剂。这更充分地描述在本发 明人的早期专利申请GB 0707348.9中，他们的早期专利申请的内容通过引用结合于此，只 要它们涉及适当抗瘢痕形成剂的选择和这些药剂的治疗有效量。仅作为实例，这些药剂可 以以每厘米其中瘢痕形成有待抑制的部位约2. 6fmol至40pmol的量提供，以便提供治疗有 效量。NR4A 激动剂本发明人已经发现核激素受体NR4A亚类的成员的激动剂可以用于抑制瘢痕形 成，并且认为这些药剂可以代表可按照本发明使用的抗瘢痕形成剂。这更充分地描述在本 发明人的早期专利申请GB 0714934. 7中，他们的早期专利申请的内容通过引用结合于此， 只要它们涉及适当抗瘢痕形成剂的选择和这些药剂的治疗有效量。仅作为实例，6-巯基嘌 呤(6-mercaptopurie)可以代表按照该实施方案的优选抗瘢痕形成剂，并且可以以每厘米 其中瘢痕形成有待抑制的部位约0. 59pmol至8. 85nmol的量提供，以便提供治疗有效量。创缘的厘米数为了本公开内容的目的，伤口长度，如以创缘厘米数测量，应当计算为伤口各个边 缘长度的总和(以厘米计)。可优选待治疗部位的长度计算为延伸超出伤口边缘的各端。 这可以帮助确保将治疗有效量的抗瘢痕形成剂提供给伤口各端。因此，可优选按照本发明 待治疗的创缘的计算长度延伸超出伤口各端约半厘米(或更多)的距离。“治疗有效量”为了本公开内容目的的抗瘢痕形成剂的治疗有效量是当按照本发明使用时能够 防止、减少或抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的抗瘢痕形成剂的任何量。应当理解，当在例 如使用药剂的单次给药的剂量反应实验中考虑时不是治疗有效的抗瘢痕形成剂的量可能 使用两次进行的治疗仍然在瘢痕形成模型中是治疗有效的，如本说明书所述。关于可以希望按照本发明使用的具体抗瘢痕形成剂的治疗有效量的指导(例如 在本发明的方法，应用或试剂盒中)可以在现有技术中、通过实验或参照本说明书其它部 分提供的指导而找到。应当理解，先前已经显示具有治疗活性的此类抗瘢痕形成剂的量可 以在第一次进行的治疗中用作适于提供给其中瘢痕形成有待抑制的身体部位的治疗有效 量，或者作为实验起点，所述实验意欲确定可以在第一次进行的治疗中提供的适当治疗有 效量。瘢痕形成的预防/抑制/减少/最小化在本发明上下文中瘢痕形成的抑制应当理解为包括与对照处理或未处理的伤口愈合时出现的瘢痕形成的水平相比，按照本发明的方法(或本发明的试剂盒或药物)处理 的伤口愈合时实现的任何程度的瘢痕形成的预防，减少，最小化或抑制。为了简洁的目的， 本发明说明书将主要引用使用抗瘢痕形成剂对瘢痕形成的“抑制”，然而该引用应当理解为 (除了上下文另外要求)还包括使用这些抗瘢痕形成剂对瘢痕形成的预防、减少或最小化。药用的如本文所用，短语“药用的”是指下述分子实体和组合物，其“通常被认为是安全 的”，例如当施用于人时在生理学上是可耐受的和典型地不产生变应性或类似的不适当的 反应，如胃部不适，头晕等。优选地，如本文所用，术语“药用的，，是指由联邦政府或州政府 的管理机构批准的或在美国药典或其它公认的用于动物和更具体地人的药典中所列出的。药物组合物和给药当可以照原样使用本发明提供的用于治疗的组合物时，可优选以药用制剂施用 它，例如与适当的药用赋形剂、稀释剂或载体混合，所述药用赋形剂、稀释剂或载体按照预 期给药途径和标准的药用实践选择。因此，在一方面，本发明提供一种药物组合物或制剂， 其包含至少一种活性组合物或其药用衍生物，其与药用赋形剂、稀释剂和/或载体联合。该 赋形剂、稀释剂和/或载体必须是在与制剂其它成分相容性方面“可接受的”并且对其受体 不是有害的。本发明的组合物可以配制用于以任何便利方式给药用于人或动物医学。本发明因 此在其范围内包括药物组合物，所述药物组合物包含本发明的产品，该产品适合于人或动 物医学使用。用于治疗用途的可接受的赋形剂、稀释剂和载体是药物领域公知的，并且描述 在例如雷明顿药物科学和实践(Remington :The Science和Practice of Pharmacy) Lippincott Williams & Wilkins (A. R. Gennaro 编辑，2005)中。药物赋形剂、稀释剂和载 体的选择可以按照预期给药途径和标准药物实践来选择。伤口本发明人认为按照本发明使用的治疗方法可以用于在所有类型的伤口中有益地 抑制瘢痕形成。使用本发明的药物和方法可以抑制瘢痕形成的具体伤口的实例包括但不限于，独 立地选自以下组成的组的那些皮肤伤口 ；眼部伤口(包括抑制由眼外科手术如LASIK外 科手术、LASEK外科手术、PRK外科手术、青光眼过滤外科手术、白内障外科手术或其中晶状 体囊可能经受瘢痕形成的外科手术所导致的瘢痕形成)如产生角膜瘢痕组织的那些；经受 囊性收缩的伤口(这在乳房移植体周围是常见的)；血管伤口 ；中枢和周围神经系统的伤口 (其中瘢痕形成的预防、减少或抑制可以增强神经元再连接和/或神经元功能)；腱、韧带或 肌肉的伤口 ；口腔伤口，包括唇和腭(诸如，用于抑制由唇裂和腭裂治疗导致的瘢痕形成)； 内脏器官，诸如肝、心、脑、消化组织和生殖组织的伤口 ；体腔，如腹腔、盆腔和胸腔(其中瘢 痕形成的抑制可以减小粘连形成的发生次数和/或所形成的粘连的尺寸)的伤口 ；和外科 手术伤口(特别是与整容操作如瘢痕修复相关的伤口)。特别优选本发明的药物和方法用 来预防、减少、抑制或最小化与皮肤伤口相关的瘢痕形成。可以按照本发明使用的具体抗瘢痕形成剂可以在某些类型的伤口中具有增加的 效用。关于在治疗特定类型的目的伤口中可以是有益的具体抗瘢痕形成剂的指导可以获自现有技术中报道的抗瘢痕形成剂的活性。瘢痕形成的评估瘢痕形成的程度，和因此实现的任何瘢痕形成的抑制，可以通过瘢痕的肉眼临床 评估来评价。这可以通过直接评估受试者上的瘢痕；或通过评估瘢痕的照相图像；或评估 从瘢痕采获的硅酮模或从该模制成的石膏阳模型来实现。为了本公开内容的目的，“经治疗 的瘢痕”应当理解为包括按照本发明治疗的伤口愈合时产生的瘢痕。可以在人受试者中或在适当动物模型中进行瘢痕形成的适当评估，和因此对瘢痕 形成的抑制的适当评估，所述瘢痕形成的抑制指示假定的药剂适合用作本文所述的抗瘢痕 形成剂。动物模型用于研究抗瘢痕形成剂的活性的应用在文献中有大量记载并且是在科学 上已被接受，所述抗瘢痕形成剂随后预期用于人受试者。当评估瘢痕形成时可以考虑的瘢痕的宏观特征包括i)瘢痕颜色。相对于周围的皮肤，瘢痕可以典型地是色素沉着不足或色素沉着过 度。当与未治疗的瘢痕的色素沉着相比，经治疗的瘢痕的色素沉着更接近未形成瘢痕的皮 肤的色素沉着时，可以证明有瘢痕形成的抑制。瘢痕可以经常比周围皮肤更红。在这种情 形中，当与未治疗的瘢痕相比较，经治疗的瘢痕的红色消褪得更早、或更完全、或更接近地 相似于周围皮肤的外观时，可以证明有瘢痕形成的抑制。颜色可以例如通过使用分光光度 计来容易地测量。ii)瘢痕高度。与周围皮肤相比，瘢痕可以典型地是凸起的或凹陷的。当与未治疗 的瘢痕的高度相比，经治疗的瘢痕的高度更接近于未形成瘢痕的皮肤的高度(即，既不隆 肿也不凹陷)时，可以证明有瘢痕形成的抑制。瘢痕高度可以直接在患者上(例如通过轮 廓测量法)或间接地(例如，通过获自瘢痕的模型的轮廓测量法)测量。iii)瘢痕的表面质地。瘢痕可以具有比周围皮肤相对更光滑的表面(产生具有 “光亮的”外观的瘢痕)，或者具有比周围皮肤更粗糙的表面。当与未治疗的瘢痕的表面质 地相比，经治疗的瘢痕的表面质地更接近于未形成瘢痕的皮肤的质地时，可以证明有瘢痕 形成的抑制。表面质地也可以直接在患者上(例如通过轮廓测量法)或者间接(例如通过 获自瘢痕的模型的轮廓测量法)测量。iv)瘢痕的硬度。瘢痕的异常组成和结构意指它们通常比瘢痕周围未受损伤的皮 肤更硬。在这种情形中，当与未治疗的瘢痕的硬度相比时，经治疗的瘢痕的硬度更接近于未 形成瘢痕的皮肤的硬度时，可以证明有瘢痕形成的抑制。当参照本说明书中列出的至少一种肉眼评估参数进行评估时，经治疗的瘢痕优选 地表现出瘢痕形成的抑制。更优选地，参照至少两种参数，甚至更优选地参照至少三种参 数，并且最优选地参照所有四种这些参数评估时，经治疗的瘢痕可以证明有抑制的瘢痕形 成(例如，所有四种以上列出的参数)。瘢痕的高度、长度、宽度、表面积、凹陷和凸起体积、粗糙度/光滑度可以在受试者 上例如通过使用光学3D测量装置直接测量。瘢痕测量可以在受试者上或在代表瘢痕的模 型或铸件(其可以通过制造瘢痕的硅酮模型复制印模和随后从硅酮模型产生石膏模型来 形成)上直接进行。所有这些方法可以使用光学3D测量装置或通过对瘢痕照片图像分析 来分析。3D测量装置具有沿着所有轴的微米范围内的分辨率，这保证了精确测定所有皮 肤和瘢痕参数。本领域技术人员将还了解可以用于研究适当参数的更多的无创方法和装置，包括用于人工测量的卡钳，超声，3D照相术(例如使用可获自Canfield科学有限公司 (Canfield Scientific, Inc.)的硬件和/或软件)和高分辨率磁性共振成像。瘢痕形成的抑制可以通过与未治疗瘢痕相比，经治疗的瘢痕的高度、长度、宽度、 表面积、凹陷或凸起体积、粗糙度或光滑度或它们的任何组合来证明。一种优选的用于肉眼评估瘢痕的方法是整体评估。这可以通过专家小组或外行小 组评估宏观照片或临床上通过临床医师或患者本身肉眼评估来实现。通过VAS (直观模拟 标度尺(visual analogue scale))或分类量表来捕获评估值。以下描述用于评估瘢痕形 成(和因此获得的瘢痕形成的任何减少)的适当参数的实例。Duncan等(2006)，Beausang 等(1998)和van Zuijlen等(2002)描述了适当参数和可以捕获这些参数的评估值的装置 的更多实例。使用直观模拟标度尺(VAS)瘢痕评分进行评估使用基于瘢痕形成的VAS可以捕获瘢痕的评估值。用于评估瘢痕的适当VAS可以 基于Duncan等(2006)或Beausang等(1998)所述的方法。这典型地是IOcm线，其中认为 Ocm是觉察不到的分数，IOcm是非常不良的肥厚性瘢痕。以这种方式使用VAS允许容易的 捕获和定量瘢痕形成的评估值。VAS评分可以用于瘢痕形成的肉眼和/或显微镜评估。仅作为实例，一种适当的瘢痕形成的肉眼评估可以使用VAS来进行，所述VAS由 O-IOcm线组成，该O-IOcm线表示从左到右，0(对应正常的皮肤)到10 (不良瘢痕的指示) 的刻度。基于瘢痕的整体评估，评估者在IOcm线上可以作标记。这可以考虑参数如瘢痕的 高度、宽度、轮廓和颜色。最好的瘢痕(典型地宽度小，具有与正常皮肤相似的颜色、高度和 轮廓)可以靠近该刻度的正常皮肤一端(VAS线的左手侧)评分，并且不良瘢痕(典型地宽 度大，凸起的外形，具有不均勻的轮廓和更白的颜色)可以靠近该刻度的“不良瘢痕”一端 (VAS线的右手侧)评分。可以从左手侧测量所述标记，以提供关于瘢痕评估的以厘米为单 位的最终值(至1个小数位)。瘢痕形成的备选评估(无论是肉眼评估还是显微镜评估)涉及比较两个瘢痕或两 个瘢痕区段(如一个经治疗的区段和另一个未治疗的区段，或对照治疗的)以确定哪个具 有较优的外观，该评估可以使用VAS进行，所述VAS包含两条被垂直线交叉的100mm VAS线。 在该类型的VAS中，两条VAS线对应于被比较的两个瘢痕，而垂直线表示零(指示在比较的 瘢痕之间没有可觉察的差异)。100%的极值(在任一 VAS线的末端的100mm)表示瘢痕之 一相比于周围皮肤是觉察不到的。一种特别优选的以此方式评估瘢痕肉眼外观的方法称为整体瘢痕比较量表(The Global Scar Comparison Scale (GSCS))。该量表已经被欧洲医药局(European Medicines Agency(EMEA))明确接受，并且接受为可以评估瘢痕和确定与瘢痕形成抑制相关的临床相 关终点的优选量表。具体地，可优选使用基于临床专家小组评估的GSCS版本，这被EMEA视 为特别相关。当使用这类VAS如GSCS比较一对瘢痕时，评估者必须首先决定哪个瘢痕具有较优 的外观，或在两者之间是否有可察觉的区别。如果不存在可察觉的区别，则此通过将标记放 在零垂直线上来记录。如果存在可察觉的区别，评估者使用两个瘢痕中较差的瘢痕作为锚 来确定在较优瘢痕中发现的改善水平，然后在刻度的相关部分标注评分。标注的点表示相 对于锚瘢痕的改善百分比。
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本发明人已经发现使用这类VAS测量评估瘢痕的肉眼或显微镜外观提供了许多 优势。由于这些VAS在本性上是直观的，所以它们1)减少了使用不同皮肤类型中不同瘢痕 严重性的参考图像进行广泛培训的需要，使得该工具相对简单地在大的3期临床中使用； 2)减少了数据的变异性与药物和安慰剂瘢痕的两次独立评估相反，进行每对瘢痕的一次 评估；3)将VAS的明确原则和等级评定的益处结合到同一量表中；和4)允许将药物作用 (改善百分比)更容易地传达给临床医师和患者。现在将参照下来实验结果部分和附图进一步描述本发明。实验结果部分参考公知 的抗瘢痕形成剂TGF-β 3举例说明了本发明的功效，尽管可以优选本发明(在其任一方面 或实施方案中)使用不同于TGF-β 3的抗瘢痕形成剂。图1比较了在单次进行的治疗中提供给人伤口的不同剂量的TGF-β 3的抗-瘢痕 形成活性。图2比较了在两次进行的治疗中提供给人伤口的不同剂量的TGF-β 3的抗-瘢痕 形成活性，所述两次进行的治疗在彼此约1小时内施用。图3比较了在两次进行的治疗中提供给人伤口的不同剂量的TGF-β 3的抗-瘢痕 形成活性，所述两次进行的治疗在彼此约24小时内施用。图4比较了 TGF-β 3对照治疗的瘢痕或安慰剂治疗的对照瘢痕的宏观图像。三个 TGF-β 3-治疗的瘢痕在相隔约24小时进行的多次治疗中提供了不同量的TGF-β 3。图5图示了 3维模拟和从瘢痕获得的瘢痕测量值，所述瘢痕在用TGF-β 3对照或 安慰剂治疗的伤口愈合时形成。图6图示了 3维模拟和从瘢痕获得的瘢痕测量值，所述瘢痕在用TGF-β 3对照或 安慰剂治疗的伤口愈合时形成。图7图示了 3维模拟和从瘢痕获得的瘢痕测量值，所述瘢痕在用TGF-β 3或安慰 剂治疗的伤口愈合时形成。图8比较了在对照治疗的瘢痕中随时间变化获得的瘢痕形成抑制的大小，所述瘢 痕在用采用TGF-β 3的四种实验方案之一治疗的伤口愈合后形成(在相隔约1小时的两次 进行的治疗的每一次中以每厘米5ng，50ng, 200ng或500ng的量施用)。图9比较了在对照治疗的瘢痕中随时间变化获得的瘢痕形成抑制的大小，所述瘢 痕在用采用TGF-β 3的四种实验方案之一治疗的伤口愈合后形成(在相隔约24小时的两 次进行的治疗的每一次中以每厘米5ng，50ng, 200ng或500ng的量施用)。图10图示了在瘢痕形成的大鼠模型中响应于不同剂量的TGF-β 3的“钟形”剂量 反应曲线。经过相隔约24小时的两次TGF-β 3注射将提供TGF-β 3给伤口。在每次注射 中提供的TGF-β 3的量在每次进行的治疗中是相同的。图11比较了在对照治疗的伤口愈合时(每个经受两次治疗，其中在多次治疗之间 施用的TGF-β 3的量保持不变)和在按照本发明治疗的伤口愈合时获得的瘢痕形成抑制的 大小。图12显示了以下瘢痕的代表性图像在(在两次进行的治疗中用稀释剂对照提供 的)安慰剂治疗的伤口愈合时产生的瘢痕，对照处理的伤口(每个进行两次治疗，其中在多 次治疗之间施用的TGF-β 3的量保持不变)愈合时产生的瘢痕，和在按照本发明治疗的伤 口愈合时产生的瘢痕。
图13是比较使用利用抗瘢痕形成剂IL-10的本发明方法获得的瘢痕形成减少百 分比和在对照治疗方案中使用相同药剂的瘢痕形成减少的图表。图14图示了在按照本发明使用抗瘢痕形成剂IL-10治疗的伤口愈合时产生的瘢 痕(图片B)和在对照方案中使用相同抗瘢痕形成剂治疗的伤口愈合时产生的瘢痕形成 (图片A)的宏观图像。图15比较了在按照本发明用抗瘢痕形成剂IL-10治疗的伤口中和在用安慰剂对 照治疗或使用IL-10对照治疗的伤口中发现的炎症细胞的百分比。图16显示了图示了可以用于提供抗瘢痕形成剂给身体部位的优选给药途径的照 片，在所述身体部位处希望按照本发明抑制瘢痕形成。图片A显示在待受伤部位处单次注 射包含抗瘢痕形成剂的组合物的给药。该注射已经产生了大疱，其覆盖了将形成伤口的部 位(在两个内侧点之间)并且覆盖了延伸超出目标创伤部位的区域(由外侧点为边界的区 域)。图片B显示沿着未来创缘施用包含抗瘢痕形成剂的组合物。实线图示待形成伤口的 部位，并且通过围绕未来伤口的点显示可以施用抗瘢痕形成剂的部位。图片C和D图示包 含抗瘢痕形成剂的组合物对现有伤口(其已经用缝合线闭合)的边缘的给药。图17图示了一种优选方法，通过该方法可以将皮内注射用于按照本发明抗瘢痕 形成剂的给药。将皮下注射器针头插入到部位B的皮内并推进到部位A(与部位B间隔Icm 的距离)，通过所述皮下注射器针头施用抗瘢痕形成剂。然后当抽出针头时将100 μ 1组合 物在部位A和B之间均勻地施用。然后将针头插入到部位C的皮内，在部位B方向上推进， 并重复给药过程。当已经完成对伤口的一个边缘的给药时，然后可以在另一边缘上重复给 药。实验结果下述结果阐述了治疗方案的使用，并且显示了该方案的有效性，在该方案中在两 次进行的治疗中提供抗瘢痕形成剂给伤口或待形成伤口的部位，其中两次进行的治疗之间 经过的时间是在8和48小时之间。它们还清楚地阐述了按照本发明可以实现的瘢痕形成 的有益抑制，其中提供的抗瘢痕形成剂的量在第二次进行的治疗中与第一次相比增加。图 1图1图示了来自本发明人进行的临床试验的数据，以生成指示在单次进行的治疗 中施用各种不同剂量的TGF-β 3获得的抗-瘢痕形成效果的剂量反应曲线。将TGF-β 3或 安慰剂作为单次皮内注射施用给1厘米实验伤口。该图以来自方差分析(ANOVA)的最小二 乘均数和95%置信区间来显示使用TGFii 3的治疗效果，在所述方差分析中将部位作为因 子。为了检验治疗效果，将TGFii 3瘢痕的ToScar从在每个受试者上另一臂上的在解剖学 上匹配的安慰剂ToScar中减去。ToScar计算为来自第6周和第3，4，5，6和7个月的VAS 分数(mm)的总和。瘢痕是由独立的外行小组在给药后(第6周，第3-7个月)6个时间点 使用IOOmm VAS线评分。图1图示了每厘米创缘单次施用50ng，200ng或500ng/100y 1 TGF β 3有效抑制 瘢痕形成。改善水平显示了典型的钟形剂量反应曲线，最大改善(在TGFi33治疗的伤口中 平均> 50mm瘢痕改善)是在200ng/100y 1剂量下观察到，朝向剂量范围的顶部即每厘米 创缘500ng/100y 1，药物功效降低。图 2
图2图示了来自本发明人进行的临床试验的数据。在本研究中，将TGFβ 3和安慰 剂各自在两次独立进行的治疗中施用(通过两次皮内注射)。然而，不同于本发明的方法， 第一次进行的治疗在即将受伤前发生，但是第二次进行的治疗在伤口闭合后立即发生，即 两次剂量在彼此约1小时内施用(在受伤之前10-30分钟第一次，和受伤后10-30分钟第 二次)。该图以来自方差分析(ANOVA)的最小二乘均数和95%置信区间来显示使用TGF3 3 的治疗效果，在所述方差分析中将部位作为因子。为了检验治疗效果，将TGFii 3瘢痕的 ToScar从在每个受试者上另一臂上的在解剖学上匹配的安慰剂ToScar中减去。ToScar计 算为来自第6周和第3，4，5，6和7个月的VAS分数(mm)的总和。瘢痕是由独立的外行小 组在给药后(第6周，第3-7个月)6个时间点使用IOOmm VAS线评分。图2图示了通过在伤口闭合前和闭合后即刻(即两次剂量在约1小时内)，通过每 厘米创缘施用5ng，50ng，200ng和500ng/100y 1 TGF β 3有效抑制了瘢痕形成。改善水平 显示了典型的钟形剂量反应曲线，最大改善(在TGFβ 3治疗的伤口中平均> 40mm瘢痕改 善)是在200ng/100y 1剂量下观察到，朝向剂量范围的顶部即每厘米创缘500ng/100 μ 1， 药物功效降低。(在约1小时内)两次给予TGFi33治疗的改善程度和剂量反应曲线与一次 给予TGF β 3的那些相当(参见图1)，但是整体上瘢痕形成被抑制的程度稍小于单次给药方 案。这图示了重复给药TGF-i33(不同于在本发明中所述的方法)并不导致更大的瘢痕形 成抑制，并且如果有的话可能稍微降低该化合物的抗_瘢痕形成功效。图 3图3显示了本发明人在人研究中产生的比较数据。在本研究中，使用TGFβ 3和安 慰剂的对照治疗在两次进行的治疗(各自通过皮内注射)中施用，第一次在受伤之前，并 第二次在受伤之后约24小时。该图以来自方差分析(ANOVA)的最小二乘均数和95%置信 区间来显示使用TGFii 3的治疗效果，在所述方差分析中将部位作为因子。为了检验使用 TGF-β 3的治疗效果，将TGFii 3瘢痕的ToScar从在每个受试者上另一臂上的在解剖学上 匹配的安慰剂ToScar中减去。ToScar计算为来自第6周和第3，4，5，6和7个月的VAS分 数(mm)的总和。瘢痕是由独立的外行小组在给药后(第6周，第3-7个月)6个时间点使 用100_ VAS线评分。图3图示了通过在受伤前和在受伤后约24小时，通过每厘米创缘两次施用5ng， 50ng，200ng和500ng/100l·! 1 TGF β 3，有效抑制瘢痕形成。在这些实验治疗方法中，其中以 相隔24小时的两次进行的治疗施用500ngTGF-i3 3的方法显著比其它更有效。图 4图4显示来自三个受试者的代表性宏观图像，图示了使用不同TGFii 3治疗方案， 瘢痕形成可以被抑制的不同程度。该宏观图像来自受试者瘢痕内，所述瘢痕是在本发明人 进行的临床试验中在安慰剂治疗和TGFii 3对照治疗(在相隔约24小时的两次进行的治 疗中以每厘米创缘50ng，200ng或500ng/100y 1 TGF03的给药两次)的伤口愈合时产生 的。在每次进行治疗中施用相同量的TGF-β 3，并且所用的量在标题中显示(在左上部显 示每厘米创缘50ng/100y 1 TGF β 3，右上部来自同一受试者的安慰剂；左中部显示每厘米 创缘200ng/100l·! 1 TGF β 3，右中部来自同一受试者的安慰剂；和左下部显示每厘米创缘 500ng/100 μ 1 TGF β 3，右下部来自同一受试者的安慰剂)。可以看到，接受所用的最高剂量的对照TGF-β 3治疗的伤口(左下)受益于获得
24的对瘢痕形成的最大抑制。图 5图5显示3-维模拟和瘢痕测量值，其获自硅酮模型的轮廓测量法分析，所述硅酮 模型来自在本发明人进行的临床试验中安慰剂治疗和TGFii 3对照治疗的伤口愈合时生成 的瘢痕(以每厘米创缘100 μ 1 50ng/100 μ 1 TGF β 3或100 μ 1安慰剂相隔约24小时两次 给药)。注意这不是按照本发明的治疗方法，而是(连同图6—起)用来提供比较数据，阐 明按照本发明的治疗方法的出人意料的有效性。上部图片显示原始的3-维模拟，并且为了清楚起见，底部图片图示了由白色箭 头划界的瘢痕边界，其余图像区域是围绕瘢痕的正常皮肤。通过轮廓测量法分析每个瘢 痕的一系列定量参数，并且证明与安慰剂相比，使用TGFii 3治疗在瘢痕表面积方面减少 30.21% (TGF β 3治疗的伤口瘢痕表面积=12.823mm2 ；安慰剂治疗的伤口瘢痕表面积= 18. 375mm2)。图 6图6显示3-维模拟和瘢痕测量值，其获自硅酮模型的轮廓测量法分析，所述硅酮 模型来自在本发明人进行的临床试验中安慰剂治疗和TGFii 3对照治疗的伤口愈合时生成 的瘢痕(以每厘米创缘100 μ 1 200ng/100 μ 1 TGF β 3或100 μ 1安慰剂相隔约24小时两 次给药)。关于图6中所示的结果，这不构成按照本发明的治疗方法，而是用来提供比较数 据，阐明按照本发明的治疗方法的出人意料的有效性。上部图片显示原始的3-维模拟，并且为了清楚起见，底部图片图示了由白色箭 头划界的瘢痕边界，其余图像区域是围绕瘢痕的正常皮肤。通过轮廓测量法分析每个瘢 痕的一系列定量参数，并且证明与安慰剂相比，使用TGFii 3治疗在瘢痕表面积方面减少 75. 19% (TGF β 3治疗的伤口瘢痕表面积=3. 532mm2 ；安慰剂治疗的伤口瘢痕表面积= 14. 239mm2)。轮廓测量法分析还证明与安慰剂治疗相比，使用TGFi^ 3治疗的瘢痕凸起体积 减小73. 33% (TGFβ 3治疗的伤口瘢痕凸起体积=0. 0008mm3 ；安慰剂治疗的伤口瘢痕凸起 体积=0. 003mm3)。图 7图7显示3-维模拟和瘢痕测量值，其获自硅酮模型的轮廓测量法分析，所述硅酮 模型来自安慰剂治疗和TGF β 3对照治疗的伤口愈合时生成的瘢痕(彼此相隔约24小时的 两次进行的治疗中，以每厘米创缘100μ 1500ng/100l·! 1 TGFi3 3或100μ 1安慰剂两次给 药，在每次进行的治疗中提供等量的TGF-β 3)。上部图片显示原始的3-维模拟，并且为了清楚起见，底部图片图示了由白色箭头 划界的瘢痕边界，其余图像区域是围绕瘢痕的正常皮肤。响应于使用两个相对高剂量的 TGF-β 3的治疗，在本研究中获得了最大的瘢痕形成抑制。尽管该方法可以有效抑制瘢痕形 成，但是应当理解与该治疗方案相关的费用将高于按照本发明的治疗方法(其中在使用较 少总量的抗瘢痕形成剂的同时可以实现瘢痕形成的有效抑制)。图 8图8图示来自本发明人进行的临床试验的数据，在所述临床试验中将TGF-β 3或 安慰剂在两次进行的治疗(每次包括通过皮内注射施用测试物质)中施用，第一次进行的 治疗在受伤之前发生，第二次在伤口闭合后立即发生，即两次TGF-β 3剂量是彼此相同的，并且在约1小时内施用(在受伤之前10-30min和受伤之后10-30min)。应当认识到该实 验治疗方法(其结果显示在图8中)不代表按照本发明的治疗方法，而是备选(治疗有效 的)治疗方法，其阐明了本发明方法的出人意料的功效。图8显示了使用TGF-β 3(这里标记为“Juvista”)和安慰剂的治疗效果，该治疗 效果表示为平均直观模拟标度尺(VAS)分数(mm)。该瘢痕是由独立的外行小组在给药后 (第6周和第3-7个月)6个时间点使用100mm VAS线评分。图8显示通过在伤口闭合前和伤口闭合后即刻施用(即两次剂量在约1小时内) 的每厘米创缘100 μ 1 5ng，50ng, 200ng和500ng/100 μ 1 TGF- β 3的两次给药抑制瘢痕形 成。改善的水平是剂量响应性的并且典型地首先在早期时间点(在先的第6周)是明显的， 并且在整个评估期期间保持(即在本研究中直至7个月)。*表示在由TGF-β 3对照治疗提供的伤口愈合导致的瘢痕形成和安慰剂治疗提供 的那些之间的显著差异(P < 0. 05)。图 9图9图示来自由本发明人进行的另一个临床试验的数据，比较了使用TGF-β 3的 治疗有效的抗_瘢痕形成治疗。在两次进行的治疗中皮内注射TGFii 3和安慰剂，第一次在受伤前，第二次在之后 约24小时。提供的TGF-β 3的量在两次进行的治疗之间不改变，因此本研究不构成按照本 发明的治疗方法。该图显示使用TGFii 3(再次标记为“Juvista”)和安慰剂的治疗效果，该 治疗效果表示为平均直观模拟标度(VAS)分数(mm)。该瘢痕是由独立的外行小组在给药后 (第6周，第3-7个月)6个时间点使用100mm VAS线评分。图9图示通过在受伤前和受伤后约24小时施用的每厘米创缘100μ 15ng，50ng， 200ng或500ng/100 μ 1 TGF-β 3的两次给药抑制瘢痕形成。改善的水平是剂量响应性的 并且典型地首先在早期时间点(在先的第6周)是明显的，并且在整个评估期期间保持 (即在本研究中直至7个月)。出人意料地，效果大小要远远大于先前数据所期望的效果。 可以看到，本发明的方法(其中在每次进行的治疗中治疗的每厘米身体部位提供500ng的 TGF-β 3)出人意料地比其它治疗方法(它们自身仍然是治疗有效的)更有效。*表示在由TGF-β 3对照治疗提供的伤口愈合导致的瘢痕形成和安慰剂治疗提供 的那些之间的显著差异(P < 0. 05)。图 10图10图示了在人受试者中观察到的TGF-3 3 “钟形”剂量反应曲线也在实验动 物中发现。这里，在相隔24小时的两次进行的治疗中提供TGF-β 3至实验大鼠伤口(第 一次进行的治疗发生在受伤时或接近受伤时)。在每次进行的治疗中每厘米伤口施用的 TGF- β 3 的量在 X-轴上显示(5ng/cm，50ng/cm, 200ng/cm 或 500ng/cm)。可以看到，使用低剂量的TGF-β 3或使用高剂量的TGF-β 3的重复治疗导致很少 的瘢痕形成抑制。图 11使用伤口愈合和瘢痕形成的大鼠实验模型来阐述瘢痕形成的抑制，其可以在序贯 进行的多次治疗中使用递增剂量的TGF-β 3来实现，其与未治疗对照或使用TGF-β 3的对 照治疗相比较，在所述使用TGF- β 3的对照治疗中，施用的TGF- β 3的量在第一次和第二次
26进行的治疗之间不增加。图11是比较在用稀释剂对照处理的Icm切口大鼠伤口( “安慰剂治疗的伤口”) 愈合时形成的瘢痕和在以下列方案之一提供的伤口愈合时形成的瘢痕的肉眼VAS分数之 间平均值差异的图表i)使用每厘米20ng TGF- β 3的TGF- β 3对照治疗；ii)使用每厘米IOOng TGF-β 3的TGF-β 3对照治疗；或iii)在序贯进行的多次治疗中使用递增剂量的TGF-β 3的TGFβ 3治疗。在将伤口经受两次进行的治疗的每种情形中，第一次在受伤之前和第二次在约24 小时后。安慰剂治疗的对照伤口提供两次进行的治疗，每次治疗由稀释剂的给药组成。这 些安慰剂治疗的伤口提供瘢痕形成的基线值，相对于该基线值可以确定由TGF-β 3治疗产 生的瘢痕抑制。“对照治疗的伤口”提供有两次进行的治疗，每次包括以20ng/100y 1或 100ng/100yl注射TGF-β 3(在每次进行的治疗中注射相同浓度的TGF-β 3)。“治疗的伤 口 ”提供递增剂量的用药方案，其中第一次进行的治疗包括注射20ng/100y 1 TGF β 3，而第 二次进行的治疗包括注射lOOng/ΙΟΟμ 1 TGFii 3。每只动物接受两个伤口，并且安排这些以便每只动物的伤口包括安慰剂治疗的伤 口，以及治疗的伤口(使用递增剂量的TGF- β 3治疗的实例，所述递增剂量的TGF- β 3在序 贯进行的多次治疗中施用)或对照治疗的伤口(接受使用TGF-β 3的对照治疗，每次进行 的治疗中TGF-β 3剂量相同)。这允许在安慰剂治疗的伤口或同一受试者内治疗的伤口或 对照治疗的伤口愈合时形成的瘢痕之间进行比较。该研究设计允许当评估TGFii 3治疗(对 照治疗或在序贯进行的多次治疗中施用递增剂量的TGF-β 3)的抗-瘢痕形成效果时减少 受试者内的变异性。在受伤后70天，评估瘢痕，和产生VAS分数。与以上图10报道的结果一致，与接受安慰剂的对照未处理伤口相比，对照治疗的 伤口(使用20ng/100yl或lOOng/ΙΟΟμΙ TGFβ 3两次给药)显示了瘢痕形成的减少。这 并不出人意料，因为TGF-β 3的量处于该模型的“钟形”分布中显示最有效的区域内。然 而，意外的发现就伤口愈合时实现的瘢痕形成的抑制而言以下的伤口显示了大得多的程度 的效果，在所述伤口中在第二次进行的治疗中提供比第一次进行的治疗中施用的治疗有效 量更大量的TGFii 3。与根据20ng/100l·! 1或lOOng/ΙΟΟμ 1 TGF β 3两次给药获得的相加的 抗_瘢痕形成效果所期望的相比，以20ng/100 μ 1 TGF β 3给药接着lOOng/lOO μ 1 TGF β 3 给药的抗-瘢痕形成效果是大得多的协同效果。结果显示使用在序贯进行的多次治疗中施用的递增剂量的TGF-β 3治疗的伤口 愈合时观察到的瘢痕形成的抑制要远远大于使用备选治疗方案治疗的伤口愈合时观察到 的瘢痕形成的抑制，所述备选治疗方案包括在提供等剂量的TGF-β 3的两次进行的治疗中 施用 TGF-β 3。图 12图12显示瘢痕的宏观外观的代表性图像，所述瘢痕通过关于以上图11描述的研 究来产生。这些瘢痕图像是在受伤后70天采集的，并且所示箭头标注了瘢痕的各端。所示瘢痕是在Icm切口大鼠伤口愈合时形成的那些，所述伤口提供有相隔24小时的两次进行的治疗，其中使用安慰剂(以提供安慰剂治疗的对照伤口 )或TGF-β 3(以产生 使用在序贯进行的多次治疗中施用递增剂量的TGF-β 3治疗的伤口，或对照治疗的伤口)。在对照安慰剂治疗的伤口愈合时产生的瘢痕的代表性图像在图片A中显示。图片 B图示在TGFii 3对照治疗的伤口愈合时产生的瘢痕，所述伤口提供有两次进行的治疗，每 次包括注射20ng/100l·! 1 TGFβ 3。图片C图示了在TGFβ 3对照治疗的伤口愈合时产生的 瘢痕，所述伤口提供有两次进行的治疗，每次包括注射lOOng/ΙΟΟμ 1 TGFii 3。图片D中显 示的瘢痕是在使用在序贯进行的多次治疗中施用递增剂量的TGF-β 3治疗的伤口愈合时 产生的。在第一次进行的治疗中，它们注射以20ng/100y 1 TGF β 3，并且在第二次进行的治 疗中，注射以 lOOng/lOOy 1 TGF3 3。这些图像显示与安慰剂治疗的伤口相比，由用TGF3 3治疗的伤口导致的瘢痕减 少了，因为它们显示了减小的宽度，不太白(色素沉着不足的减少)和与周围皮肤更好融 合。对照TGF-β 3处理的伤口显示瘢痕形成减少的事实与在以上所示的剂量反应曲线的生 成中观察到的效果相符。如关于图11所报道的，用在受伤前20ng/100yl TGF03接着之 后约24小时注射lOOng/lOOy 1 TGFβ 3的递增剂量方案治疗的伤口显示了最大的瘢痕形 成抑制，与在用其它治疗方案治疗的伤口愈合时产生的瘢痕相比，获得的瘢痕更接近地近 似周围未受伤的皮肤。图 13图13是显示与安慰剂对照相比，瘢痕形成减少的百分比的图，其是在Icm切口大 鼠伤口愈合时形成的瘢痕中获得的，所述伤口用IL-10在两次进行的治疗中通过皮内注射 施用而治疗的，第一次在受伤之前，并且第二次在之后约24小时。用IL-10给药的伤口接受 两次注射500ng/100l·! 1 IL-10，两次注射lOOOng/ΙΟΟμ 1 IL-10，或按照本发明的递增剂量 方案，其中第一次注射包括500ng/100y 1 IL-10和第二次注射包括1000ng/100 μ 1 IL-10。图13图示通过两次施用500ng/100 μ 1 IL-10或两次施用1000ng/100 μ 1IL-10 至伤口，有效抑制瘢痕形成。该改善的水平提示剂量反应曲线，最大改善(27.5%)在 500ng/100y 1剂量下观察到，药物功效朝向lOOOng/lOOy 1范围而降低(22.8%)。出 人意料地，与两次500ng/100y 1或lOOOng/lOOy 1给药所观察到的相比，按照本发明方 法给药的伤口(其中在第二次进行的治疗中提供的IL-10的量要大于在第一次进行的治 疗中施用的治疗有效量)显示了显著更大程度的效果。给药500ng/100yl IL-10接着 lOOOng/lOOy 1IL-10的抗-瘢痕形成效果要大于基于当用lOOOng/lOOy 1 IL-10对伤口给 药两次时观察到的瘢痕形成减少所期望的抗_瘢痕形成效果。该结果阐明了在用本发明方法治疗的伤口愈合时观察到的瘢痕形成的抑制要远 远大于在使用备选治疗方案治疗的伤口愈合时观察到的瘢痕形成的抑制。图 14图14显示瘢痕的宏观外观的代表性图像，所述瘢痕由Icm切口大鼠伤口产生，所 述伤口用500ng/100 μ 1 IL-10给药两次(间隔24小时)(A)或用500ng/100 μ 1 IL-10给 药一次接着lOOOng/ΙΟΟμΙ IL-10 (B)。箭头标注了在受伤后70天瘢痕的各端。这些图像显示与用相同量(500ng/100y 1)的IL-10给药两次的伤口相比，由受伤 前500ng/100 μ 1 IL-10接着约24小时后注射1000ng/100 μ 1 IL-10的递增剂量方案治疗 的伤口导致的瘢痕显示更大的瘢痕形成抑制。与用其它剂量给药方案治疗的瘢痕相比，使
28用本发明的方法治疗的瘢痕具有减小的宽度，不太白(色素沉着不足的减少)和与周围未 受伤皮肤更接近地近似。图 15图15显示在Icm切口大鼠伤口中炎症细胞的百分比，所述伤口用两次注射安 慰剂，两次注射500ng/100 μ 1 IL-10,或一次注射500ng/100 μ 1 IL-10接着第二次注射 1000ng/100y 1 IL-10来治疗；在相同动物上用IL-10或安慰剂治疗的伤口，允许受试者内 进行比较。在治疗后3天时将伤口从实验大鼠上切除，固定在10% (ν/ν)福尔马林缓冲盐 水中，组织学处理并用CD68染色以评估炎症细胞数目。图15图示当与对照相比时，IL-10减少了炎症细胞向伤口的浸润。与在使用备选 治疗方案(两次给予相同剂量的IL-10)治疗的伤口愈合时观察到的相比，用本发明方法 (递增剂量方案)治疗的伤口显示了炎症细胞数量出人意料地显著的减少。结论以上展示的结果清楚地表明使用在序贯进行的多次治疗中施用的递增剂量的抗 瘢痕形成剂能够增加抑制瘢痕形成的程度，该程度超过了可以预期的程度。这已经参照两 种独立的在生物学上有效的抗瘢痕形成剂，抗-瘢痕形成生长因子TGF-β 3和IL-10，得到 证明，这表明使用递增剂量的抗瘢痕形成剂成功抑制瘢痕形成的方法可以适用于各种各样 的抗瘢痕形成剂。序列信息TGF- β 3 (序列 ID No. 1)ALDTNYCFRNLEENCCVRPLYIDFRQDLGWKWVHEPKGYYANFCSGPCPYLRSADT
THSTVLGLYNTLNPEASASPCCVPQDLEPLTILYYVGRTPKVEQLSNMVVKSCKCS序列ID No. 2-编码野生型人TGF- β 3的DNAGCT TTG GAC ACC AAT TAC TGC TTC CGC AAC TTG GAG GAG AAC TGCGTG CGC CCC CTC TAC ATT GAC TTC CGA CAG GAT CTG GGC TGG AAGGTC CAT GAA CCT AAG GGC TAC TAT GCC AAC TTC TGC TCA GGC CCTCCA TAC CTC CGC AGT GCA GAC ACA ACC CAC AGC ACG GTG CTG GGATAC AAC ACT CTG AAC CCT GAA GCA TCT GCC TCG CCT TGC TGC GTGCAG GAC CTG GAG CCC CTG ACC ATC CTG TAC TAT GTT GGG AGG ACCAAA GTG GAG CAG CTC TCC AAC ATG GTG GTG AAG TCT TGT AAA TGT白介素 10 (IL-10)(序列 ID No. 3)MSPGQGTQSE NSCTHFPGNL PNMLRDLRDA FSRVKTFFQ MKDQLDNLLL KESLLEDFKG YLGCQALSEMIQFYLEEVMP QAENQDPDI KAHVNSLGEN LKTLRLRLRR CHRFLPCENK SKAVEQVKNA FNKLQEKGIYKAMSEFDIF INYIEAYMTM KIRN编码智人(Homosapiens)白介素 IO(IL-IO)的 DNA(序列 ID No. 4)ATG AGC CCA GGC CAG GGC ACC CAG TCT GAG AAC AGC TGC ACC CAC TTC CCA GGCMC CTG CCT AAC ATG CTT CGA GAT CTC CGA GAT GCC TTC AGC AGA GTG MG ACTTTC TTT CM ATG AAG GAT CAG CTG GAC AAC TTG TTG TTA MG GAG TCC TTG CTG
TGT TGG TGC CTG CCC CCC AGC
GAGGACTTTAAGGGTTACCTGGGT
TACCTGGAGGAGGTGATGCCCCM
CATGTGAACTCCCTGGGGGAG MC
TGTCATCGATTTCTTCCCTGTGM
MTGCCTTTAATAAGCTCCAAGAG
GACATCTTCATCAACTACATAGM
AAG
TGC CMGCCTTGTCTGAGATGATCCAGTTTGCT GAGAACCAAGACCCAGACATCMGGCGCTG AAGACCCTCAGGCTGAGGCTACGGCGCAAC AAGAGCMGGCCGTGGAGCAGGTGMGAM GGCATCTACMAGCCATGAGTGAGTTTGCC TACATGACAATGMGATACGAMCTGA
权利要求
一种抗瘢痕形成剂，其应用作为治疗伤口或将形成伤口的部位以抑制瘢痕形成的药物，其中在第一次进行的治疗中，提供所述药物以使第一治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂被提供至每厘米创缘或每厘米将形成伤口的部位；并且其中在先前进行的治疗后8小时至48小时之间在随后进行的治疗中，提供所述药物以使更大治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂被提供至每厘米创缘。
2.根据权利要求1所述的抗瘢痕形成剂，其中所述抗瘢痕形成剂是不同于TGF-β3的 试齐LU
3.根据权利要求1或权利要求2所述的抗瘢痕形成剂，其中所述抗瘢痕形成剂包括白 介素-10 (IL-10)，或其治疗有效的片段或衍生物。
4.根据任一在前权利要求所述的抗瘢痕形成剂，其中作为药物的应用还包括第三次或 进一步进行的治疗。
5.根据权利要求4所述的抗瘢痕形成剂，其中在第三次或进一步进行的治疗中提供的 所述抗瘢痕形成剂的量与在所述第二次进行的治疗中提供的量基本上相同。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的抗瘢痕形成剂，其中在所述第三次或进一步进 行的治疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量大于在先前进行的治疗中提供的所述 抗瘢痕形成剂的量。
7.根据权利要求6所述的抗瘢痕形成剂，其中在所述第二次或进一步进行的治疗中每 厘米伤口提供的所述抗瘢痕形成剂的量比在先前进行的治疗中提供的量要大至少10%。
8.根据权利要求7所述的抗瘢痕形成剂，其中在所述第二次或进一步进行的治疗中每 厘米伤口提供的所述抗瘢痕形成剂的量比在先前进行的治疗中提供的量要大至少50%。
9.根据任一在前权利要求所述的抗瘢痕形成剂，其中所述治疗的进行间隔约24小时。
10.根据任一在前权利要求所述的抗瘢痕形成剂，其中所述药物是用在皮肤中。
11.根据任一在前权利要求所述的抗瘢痕形成剂，其中所述药物是用在循环系统中。
12.根据任一在前权利要求所述的抗瘢痕形成剂，其中所述药物是用于抑制由外科手 术导致的瘢痕形成。
13.根据任一在前权利要求所述的抗瘢痕形成剂，其中所述药物是通过局部注射提供。
14.白介素-IO(IL-IO)或其治疗有效片段或衍生物，其用作治疗伤口或将形成伤口的 部位以抑制瘢痕形成的药物，其中在第一次进行的治疗中，提供所述药物以使第一治疗有 效量的IL-10或其治疗有效片段或衍生物被提供至每厘米创缘或每厘米将形成伤口的部 位；并且其中在先前进行的治疗后8小时至48小时之间在随后进行的治疗中，提供所述药 物以使更大治疗有效量的IL-10或其治疗有效片段或衍生物被提供至每厘米创缘。
15.一种抑制在伤口愈合时瘢痕形成的方法，所述方法包括治疗其中瘢痕形成有待抑 制的身体部位在第一次进行的治疗中，提供第一治疗有效量的抗瘢痕形成剂至每厘米创缘或每厘米 将形成伤口的部位；和在伤口形成后和在所述第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生的第二次进行 的治疗中，为所述伤口提供治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂，所述治疗有效量大于在所述 第一次进行的治疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述抗瘢痕形成剂是通过局部注射提供的。
17.根据权利要求16所述的方法，其中在将形成伤口的部位提供所述第一次进行的治 疗，并且基本上沿着将要形成的伤口的中线施用所述局部注射。
18.根据权利要求16所述的方法，其中在将形成伤口的部位提供所述第一次进行的治 疗，并且其中在将要形成的伤口的每个边缘施用局部注射。
19.根据权利要求16所述的方法，其中将所述第一次和或第二次进行的治疗提供给创 缘，并且在所述创缘的半厘米内的位置处施用所述局部注射。
20.根据权利要求15至19中任一项所述的方法，其中所述第一次和/或第二次进行的 治疗包括提供所述抗瘢痕形成剂至延伸超出所述伤口各端至少半厘米的区域。
21.—种抑制在伤口愈合时瘢痕形成的方法，所述方法包括治疗其中瘢痕形成有待抑 制的身体部位在第一次进行的治疗中，提供第一治疗有效量的抗瘢痕形成剂至每厘米将形成伤口的 部位；和在伤口形成后和在所述第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生的第二次进行 的治疗中，为所述伤口提供治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂，所述治疗有效量大于在所述 第一次进行的治疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量。
22.—种抑制在伤口愈合时瘢痕形成的方法，所述方法包括治疗其中瘢痕形成有待抑 制的身体部位在第一次进行的治疗中，提供第一治疗有效量的抗瘢痕形成剂至每厘米创缘或每厘米 将来的创缘；和在伤口形成后和在所述第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生的第二次进行 的治疗中，为所述伤口提供治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂，所述治疗有效量大于在所述 第一次进行的治疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量。
23.根据权利要求15至22中任一项所述的方法，另外包括第三次或进一步进行的治疗。
24.根据权利要求23所述的方法，其中在所述第三次或进一步进行的治疗中提供的所 述抗瘢痕形成剂的量与在所述第二次进行的治疗中提供的量基本上相同。
25.根据权利要求15至23中任一项所述的方法，其中在所述第三次或进一步进行的治 疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量大于在先前进行的治疗中提供的所述抗瘢痕 形成剂的量。
26.根据权利要求25所述的方法，其中在所述第二次或进一步进行的治疗中每厘米伤 口提供的所述抗瘢痕形成剂的量比在先前进行的治疗中提供的量要大至少10%。
27.根据权利要求26所述的方法，其中在所述第二次或进一步进行的治疗中每厘米伤 口提供的所述抗瘢痕形成剂的量比在先前进行的治疗中提供的量要大至少50%。
28.根据权利要求15至27中任一项所述的方法，其中所述治疗的进行间隔约24小时。
29.根据权利要求15至28中任一项所述的方法，其中所述伤口是皮肤伤口。
30.根据权利要求15至29中任一项所述的方法，其中所述伤口是循环系统伤口。
31.根据权利要求15至30中任一项所述的方法，其中所述伤口由外科手术导致。
32.根据权利要求15至31中任一项所述的方法，其中所述抗瘢痕形成剂是通过施用于 所述身体部位的局部注射来提供的。
33.根据权利要求15至32中任一项所述的方法，其中所述抗瘢痕形成剂是在药用溶液 中提供，每厘米治疗的身体部位施用约100 μ 1所述药用溶液。
34.根据权利要求21至33中任一项所述的方法，其中在创伤前发生所述第一次进行的 治疗。
35.根据权利要求34所述的方法，其中在创伤前发生所述第一次进行的治疗至多1小时。
36.根据权利要求21至33中任一项所述的方法，其中在创伤后发生所述第一次进行的 治疗。
37.根据权利要求36所述的方法，其中在创伤后发生所述第一次进行的治疗至多2小时。
38.根据权利要求21至33中任一项所述的方法，其中在伤口闭合后发生所述第一次进 行的治疗。
39.根据权利要求38所述的方法，其中在伤口闭合后发生所述第一次进行的治疗至多 2小时。
40.一种选择适当治疗方案以抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的方法，所述方法包括确定需要该瘢痕形成的抑制的个体是否能够完成第二次进行的治疗，所述第二次进行 的治疗在第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生；如果所述个体将能够完成第二次进行的治疗，所述第二次进行的治疗在第一次进行的 治疗后8小时至48小时之间发生，则选择以下治疗方案，所述治疗方案包括治疗其中瘢痕 形成待抑制的身体部位，以使在第一次进行的治疗中，提供第一治疗有效量的抗瘢痕形成剂至每厘米创缘或每厘米 将形成伤口的部位；和在伤口形成后和在所述第一次进行的治疗后8小时至48小时之间发生的第二次进行 的治疗中，为所述伤口提供治疗有效量的所述抗瘢痕形成剂，所述治疗有效量大于在所述 第一次进行的治疗中提供的所述抗瘢痕形成剂的治疗有效量；或如果所述个体将不能够完成第二次进行的治疗，所述第二次进行的治疗在第一次进行 的治疗后8小时至48小时之间发生，则选择以下治疗方案，所述治疗方案包括在单次进行的治疗中，提供已知在单次进行的治疗中能抑制瘢痕形成的量的所述抗瘢 痕形成剂至其中瘢痕形成有待抑制的每厘米创缘或每厘米将形成伤口的部位。
41.一种用于抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的试剂盒，所述试剂盒包括至少第一和 第二小瓶，所述小瓶包括用于以彼此间隔8至48小时的多次施用于伤口或将形成伤口的部 位的抗瘢痕形成剂。
42.一种用于抑制与伤口愈合相关的瘢痕形成的试剂盒，所述试剂盒包括第一个量的组合物，所述组合物含有抗瘢痕形成剂，该第一个量用于在第一次进行的 治疗中施用于伤口或将形成伤口的部位；第二个量的组合物，所述组合物含有所述抗瘢痕形成剂，该第二个量用于在第二次进 行的治疗中施用于伤口；关于以彼此间隔8至48小时的多次施用所述第一个和第二个量的所述组合物的使用说明，并且所述施用的方式是使得在所述第二次进行的治疗中施用于伤口的所述抗瘢痕形 成剂的治疗有效剂量要大于在所述第一次进行的治疗中施用的治疗有效剂量。
43.根据权利要求41或42所述的试剂盒，包括作为抗瘢痕形成剂的IL-10或其治疗有 效片段或衍生物。
44.根据权利要求42或43所述的试剂盒，其中所述第一个量和第二个量的组合物分别 包括不同的第一和第二组合物，其中所述第二组合物含有浓度大于所述第一组合物的所述 抗瘢痕形成剂。
45.根据权利要求42所述的试剂盒，其中所述第一和第二组合物含有基本上相等浓度 的所述抗瘢痕形成剂，并且所述使用说明指示在所述第二次进行的治疗中施用的所述第二 组合物的体积应当大于在所述第一次进行的治疗中施用的所述第一组合物的体积。
全文摘要
本发明提供使用抗瘢痕形成剂抑制人瘢痕形成的新治疗方法，并且还提供用于抑制人瘢痕形成的新应用的抗瘢痕形成剂。在第一次进行的治疗中，以第一治疗有效量提供抗瘢痕形成剂至每厘米创缘或每厘米将形成伤口的部位；并且在随后进行的治疗中，以更大治疗有效量提供抗瘢痕形成剂至每厘米创缘。治疗的进行彼此之间间隔8小时至48小时之间。抗瘢痕形成剂优选不是TGF-β3。抗瘢痕形成剂可以通过皮内注射提供。还提供了选择适当治疗方案以抑制与人伤口愈合相关的瘢痕形成的试剂盒和方法。
文档编号A61K38/20GK101951941SQ200880126581
公开日2011年1月19日 申请日期2008年12月11日 优先权日2007年12月12日
发明者亚当·博阿纳斯, 凯丽·尼尔德, 凯特·欧文, 尼古拉斯·奥克莱斯顿, 尼古拉斯·格德斯宾克, 沙伦·奥凯恩, 詹姆斯·布什, 阿卜杜尔·萨塔尔, 马克·威廉·詹姆斯·弗格森 申请人:瑞诺弗有限责任公司