专利名称：醋制柴胡提取物、其制备方法及其在制备降血脂药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及天然药物化学领域，具体说，涉及一种醋制柴胡提取物、其制备方法及其在制备降血脂药物中的应用。
背景技术：
柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Wild.的干燥根，味苦，微寒，归肝、胆经，具有疏散退热，舒肝、升阳的作用，在本草中被列为上品。历代本草和现代中医的肝病用药中多以柴胡为君药。但柴胡的不同炮制品治疗病症侧重点不一，在用于治疗肝病时，常用其醋制品，与柴胡生品多用于解表退热相比，醋制品能缓和升散之性，有助于引药入肝，增强疏肝止痛的作用，适用于肝郁气滞的胁痛、腹痛及月经不调等证。其药理作用的改变要从成分转化进行分析，柴胡主要成分为挥发油、三萜皂苷，此药在醋制过程中，部分挥发油因受热而挥发，而柴胡其解表退热功能的主要成分就是挥发油，所以柴胡用醋制就是为达到舒肝、理气、散瘀止痛的目的。目前，前人在柴胡中已经大量分到的柴胡皂苷类化合物为其疏肝解郁的主要物质基础。柴胡皂苷主要有柴胡皂苷a、c、d、e、f和h，其中最具促进胆汁分泌作用的活性成分是柴胡皂苷
3- Λ C、do中国专利200710039351. 3公开了一种醋制柴胡活性部位传统的提取方法如下 醋制柴胡用醇渗漉，将醇蒸干，得流浸膏；将所得流浸膏用乙醇或水稀释成悬浊液，所述悬浊液依次分别用有机溶剂石油醚、氯仿和乙酸乙酯提取，将乙酸乙酯层蒸干，得到柴胡乙酸乙酯提取物；或所述悬浊液依次分别用有机溶剂石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇提取，将正丁醇层蒸干，得到柴胡正丁醇提取物。如此提取得到的醋制柴胡提取物也被证实具有一定的分泌胆汁的效果。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明人改良了传统的醋制柴胡活性部位的提取方法，从而得到了在降血脂方面有明显作用的醋制柴胡提取物。一方面，本发明提供新颖的醋制柴胡提取物的制备方法，所述醋制柴胡溶剂提取物由醇提后树脂法或水提醇沉法精制。所谓醇提后树脂法的具体操作步骤如下醋制柴胡用50% -100%浓度的甲醇或乙醇溶液加热回流提取，提取液合并浓缩至低浓度，浓缩液上大孔树脂，用水和不同浓度的乙醇依次洗脱，得醋制柴胡溶剂提取物。根据本发明的一种优选的实施方式，将加热回流提取得到的提取液浓缩至浓度为 20-40 %，优选将提取液浓缩至浓度为30 %。根据本发明的一种优选的实施方式，所述大孔树脂优选为860021型。根据本发明的一种优选的实施方式，所述不同浓度的乙醇优选为30-95%的乙醇，更优选为30%、50%、70%或95%的乙醇。所谓水提醇沉法的具体操作步骤如下醋制柴胡用水加热提取，提取液合并浓缩至低密度，加乙醇使产生沉淀，并使混合液浓缩至高浓度，充分超声后静置，得醋制柴胡提取物。根据本发明的一种优选的实施方式，将用水加热提取后的提取液合并浓缩至密度为1. 1-1. 2 ；加乙醇使产生沉淀，其中乙醇的浓度为70% "100% ；混合液浓缩至浓度为 60-80%，优选为 70%。水提醇沉法的一种优选的实施方式中，上述步骤得到的醋制柴胡提取物可以进一步精制再次过滤所得醋制柴胡提取物，浓缩滤液，浓缩液上大孔树脂，用水和不同浓度的乙醇依次洗脱，得精制醋制柴胡溶剂提取物。根据本发明的一种优选的实施方式，所述大孔树脂优选为860021型。根据本发明的一种优选的实施方式，所述不同浓度的乙醇优选为30-95%的乙醇， 更优选为30%、50%、70%或95%的乙醇。另一方面，本发明提供根据所述方法制备得到的醋制柴胡提取物。再一方面，本发明提供由本发明所述方法制备得到的醋制柴胡提取物在制备降血脂药物中的应用。本发明从醋制柴胡中获得提取物的方法简单易行，并且该提取物在降血脂方面有明显作用。
具体实施例方式实施例1醋制柴胡lOOOg，用8倍量75%乙醇溶液加热回流提取数次2次，提取液合并浓缩至30%浓度，浓缩液上860021型大孔树脂，依次用水洗液、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇和95%乙醇洗脱，分别得到30%乙醇洗脱液G号提取物)、50%乙醇洗脱液(3号提取物)、 70%乙醇洗脱液O号提取物)和95%乙醇洗脱液(1号提取物)。实施例2醋制柴胡500g，用水加热至微沸提取2次，提取液合并浓缩至密度为1. 1，加3倍量95%乙醇使产生沉淀，并使最终混合液浓度至70%左右，充分超声静置一段时间，过滤， 分为沉淀(5号提取物)和滤液(6号提取物)。实施例3醋制柴胡500g，用水加热至微沸提取2次，提取液合并浓缩至密度为1. 1，加3倍量95%乙醇使产生沉淀，并使最终混合液浓度至70%左右，充分超声静置一段时间，过滤， 分为沉淀和滤液，滤液浓缩加适量水产生沉淀，过滤，分为沉淀和滤液，滤液浓缩，上860021 型大孔树脂，依次用水和70%乙醇洗脱，得到水洗液和70%乙醇洗脱液(7号提取物)。实施例1中所用的醋制柴胡为上海雷允上中药饮片厂生产；批号批3 ；生产日期2006. 12. 7 ；实施例2、3中所用的醋制柴胡为上海雷允上中药饮片厂生产；批号批2 ；生产日期2006. 12. 7 ；以上实施例中所用的大孔树脂为山东鲁抗医药股份有限公司树脂分厂生产的860021 型；以上实施例中所用的超声为昆山市超声仪器有限公司生产的KQ2200型超声波清洗器。试验例本发明制得的醋制柴胡提取物对高血脂大鼠模型抗血脂作用研究1. 1实验目的观察实施例1制得的4号提取物和实施例2制得的6号提取物对高血脂大鼠模型血液中CHO、TG、HDL、LDL的影响。1. 2受试药物药物名称醋制柴胡提取物药物提供单位上海医工院中药室药物批号4号提取物和6号提取物1. 3实验动物名称SD大鼠来源上海斯莱克动物责任有限公司合格证SCXK(沪)2003-0003体重I8Og左右性别雄性1. 4实验剂量本实验剂量设计为300mg/kg。1. 5给药途径及容量口服、lml/kg。1. 6高脂饲料配方将大鼠饲料作基础饲料按2%胆固醇、10%猪油、0. 25%硫氧嘧啶添加到饲料中。1. 7实验方法将大鼠随机分组，为4、6号提取物组、模型组和空白对照组。除空白对照组饲喂正常饲料外，其余各组饲喂配制的高脂饲料，同时灌服4、6号提取物，连续4周，颈动脉采血、 离心取血清，测定血清中CHO、TG、HDL、LDL的含量。1. 8实验结果根据实验数据统计可知4号提取物具有较好的抗血脂作用(见下表1)表1 :4、6号提取物对高血脂大鼠血清CHO、TG、HDL、LDL的影响
权利要求
1.醋制柴胡提取物的制备方法，包括以下步骤醋制柴胡用50%-100%浓度的甲醇或乙醇溶液加热回流提取，提取液合并浓缩至低浓度，浓缩液上大孔树脂，用水和不同浓度的乙醇依次洗脱，得醋制柴胡溶剂提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述低浓度为20-40%。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述低浓度为30%。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂为860021型。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述不同浓度的乙醇为30-95%的乙醇。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述不同浓度的乙醇为30%、50%、 70%或95%的乙醇。
7.醋制柴胡提取物的制备方法，包括以下步骤醋制柴胡用水加热提取，提取液合并浓缩至低密度，加乙醇使产生沉淀，并使混合液浓缩至高浓度，充分超声后静置，得醋制柴胡提取物。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述低密度为1.1-1. 2。
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇的浓度为70%-100%。
10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述高浓度为60-80%。
11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述高浓度为70%。
12.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，进一步过滤所述醋制柴胡提取物， 浓缩滤液，浓缩液上大孔树脂，用水和不同浓度的乙醇依次洗脱，得精制醋制柴胡提取物。
13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂为860021型。
14.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述不同浓度的乙醇为30-95%的乙醇。
15.根据权利要求14所述的制备方法，其特征在于，所述不同浓度的乙醇为30%、 50%、70%或95%的乙醇。
16.根据权利要求1-6或7-15所述方法制备得到的醋制柴胡提取物。
17.根据权利要求1-6或7-15所述方法制备得到的醋制柴胡提取物在制备降血脂药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了醋制柴胡提取物的制备方法，包括以下步骤醋制柴胡用50％-100％浓度的甲醇或乙醇溶液加热回流提取，提取液合并浓缩至低浓度，浓缩液上大孔树脂，用水和不同浓度的乙醇依次洗脱，得醋制柴胡溶剂提取物。本发明同时公开了由所述方法制备得到的醋制柴胡提取物以及所述醋制柴胡提取物在制备降血脂药物中的应用。
文档编号A61K36/233GK102526144SQ20101058996
公开日2012年7月4日 申请日期2010年12月14日 优先权日2010年12月14日
发明者吴彤, 周海凤, 庄昌龙, 张乐乐, 李燕, 杨方, 樊晓, 沈龙海, 王鑫杰, 缪刘萍 申请人:上海医药工业研究院