专利名称：一种用于预防或治疗中风病的组合物及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物领域，特别是涉及一种用于预防或治疗中风病的组合物。
背景技术：
脑中风是一组以脑部缺血及出血性损伤症状为主要临床表现的疾病，又称脑卒中 或脑血管意外。脑中风发病急，具有极高的病死率和致残率，世界卫生组织的报告显示，因 脑中风死亡者高居全球死亡率的第二位，仅次于癌症，每年死亡人数中约有1/4的人死于 脑中风。癌症的种类有10多种，如果以单一种类的死亡率来说，脑中风可排在死亡率的第 一位。在美国，第一次脑中风患者的死亡率在7%左右，我国的死亡率要更高。脑中风还是 成年人致残的首要因素，约有1/2的脑中风患者会造成不同程度的残疾，绝大多数患者伴 有偏瘫、口齿不清等后遗症，生活自理能力有限，给自己及家庭都带来极大的不便。脑中风分为出血性与缺血性两种，即脑出血与脑梗死。高血压是脑出血的直接原 因，近年来，由于降压药的普遍使用，降低了出血性脑中风的发病率；但在我国，脑梗死的发 生率更高，占所有脑中风的70%左右，冠状动脉硬化、狭窄、冠动脉血管灌注、血管扩张储备 力不足，如血压过低，血流减缓，势必导致冠状动脉供血不足，发生梗死。因而低血压与脑梗 死的形成也有一定关系，可以成为脑梗死发病的诱因。近年来的研究表明，高同型半胱氨酸血症可能是脑血管病重要的独立危险因素。 同型半胱氨酸来源于饮食中的蛋氨酸、由蛋氨酸在体内去甲基化生成S-腺苷水解后生成。 叶酸和B12参与同型半胱氨酸的再甲基化途径和转硫化途径，当叶酸、B12缺乏或机体摄入 障碍时，可导致高同型半胱氨酸血症。文献报道血清同型半胱氨酸浓度升高可增加脑血管 病的风险，这与传统的脑中风危险因素无关。越来越多的研究提示，高同型半胱氨酸血症可 能是脑出血的一个重要危险因素，同时也与动脉粥样硬化疾病密切相关。及早发现并干预 高同型半胱氨酸血症，对预防和减少脑出血的发生可能有一定的作用。当前通过手术或药物控制住中风病的病情后，对其恢复期的药物治疗通常采用一 些活血、溶栓的药物，同时根据病情配以降压、降脂、降糖的药物控制并发症。中风病患者本 身自理能力就差，还要服用多种药物，对患者及家属均是一种负担。而且，除了“三高”因素 之外，尚有低血压、高同型半胱氨酸血症等因素也是发生中风病的危险因素。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于预防或治疗中风病的组合物，以克服现有技术存在 的上述缺陷。本发明提供的用于预防或治疗中风病的组合物按重量份计包含下述组分三七皂苷Rl 4. 8-10份人参皂苷Rgl 19. 8-45 份人参皂苷Rbl 20-40份人参皂苷Re 3. 5-6份
人参皂苷Rd 1.5-9. 9 份。优选地，所述组合物按重量份计包含下述组分三七皂苷Rl 4. 8-7份人参皂苷Rgl 19. 8-45 份人参皂苷Rbl 20-40份人参皂苷Re 3. 5-4. 7份人参皂苷Rd 1.5-7. 9 份。优选地，所述组合物按重量份计包含下述组分三七皂苷Rl 4. 8-7份人参皂苷Rgl 19. 8-45 份人参皂苷Rbl 20-40份人参皂苷Re 3. 5-4. 7份人参皂苷Rd 1.5-4. 9 份。优选地，所述组合物按重量份计包含下述组分三七皂苷Rl 4. 8-7份人参皂苷Rgl 25-45份人参皂苷Rbl 20-40份人参皂苷Re 3. 5-4. 7份人参皂苷Rd 1.5-4. 9 份。优选地，所述组合物按重量份计包含下述组分三七皂苷Rl 4. 8-7份人参皂苷Rgl 25-45份人参皂苷Rbl 20-40份人参皂苷Re 3. 5-4. 7份人参皂苷Rd 2. 6-3. 9 份。本发明还提供制备上述组合物的方法，包括下述步骤将三七适度粉碎，加 70% -90%乙醇热回流提取，浓缩至无醇味，加水稀释沉淀12- 小时，过滤，滤液经树脂吸 附，依次用体积比为20 %、40 %、60 %、80 %和95 %的乙醇进行梯度洗脱，流速为8ml/min。 洗脱液用硅胶H薄层色谱分析，展开剂为“正丁醇-乙酸乙酯-水” 5 0.5 4，体积比为 10%的硫酸乙醇溶液显色。合并色谱斑点相同组分，减压回收溶剂。上层析硅胶柱，用不同 比例的“氯仿-甲醇-水”混合溶剂洗脱，流速为Sml/min。合并色谱斑点相同组分，减压回 收溶剂，分别得高纯度的三七皂苷Rl、人参皂苷Rgl、人参皂苷Rb 1、人参皂苷Re和人参皂苷 Rd。将上述五个成分按比例混合即得组合物。本发明还提供包含上述组合物和药学上可用载体的制剂。本发明还提供上述组合物在用于制备降低血浆中同型半胱氨酸的含量的药物中 的应用。本发明进一步提供上述组合物在用于制备调节血压的药物中的应用。本发明进一步提供上述组合物在用于制备预防或治疗中风病的药物中的应用。本发明的中药组合物具有以下有益效果
1)人参皂苷Rd除协同其他组分共同治疗中风病外，在上述含量比例范围内，还可 显著降低血浆中同型半胱氨酸的含量并有调节血压的作用，能有效预防中风病的发生及中 风病的二次发生，而且在治疗中风病的过程中可调节血压，缩短病程、缓解病痛。2)人参皂苷Rgl可快速恢复疲劳、改善学习记忆、延缓衰老，具有兴奋中枢神经作 用、抑制血小板凝集作用。人参皂苷Rbl具有增强胆碱系统的功能，增加乙酰胆碱的合成和 释放以及改善记忆力作用。人参皂苷Re具有抑制中枢神经，促进DNA，RNA合成。升高血浆 皮质酮的作用，扩张血管。3)五个成分组合，具有扩张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板凝集、延长凝血时 间、降血脂、清除自由基、抗炎、抗氧化等作用。4)与同类产品比较，本发明的组合物可有效预防、治疗中风病，且效果更显著、安 全性更高、可显著缩短病程，缓解病痛。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例1组分的提取将三七生药材IOOOg粉碎成粗粉，加入2. 5倍量90%乙醇，加热回流提取，减压浓 缩至无醇味。加水稀释至0. 3g(生药)/ml，静置M小时，过滤。滤液通过大孔吸附树脂柱， 依次用20%、40%、60%、80%和95% (体积比)乙醇梯度洗脱，流速8ml/min，以每份500ml 收集。洗脱液用硅胶H薄层色谱分析，展开剂为“正丁醇-乙酸乙酯-水”5 0.5 4(上 层)，10% (体积比)硫酸乙醇溶液显色。合并色谱斑点相同组分，减压回收溶剂。再上层析 硅胶柱，依次用“氯仿-甲醇-水”为 80 18 2、75 20 5、65 30 5、60 33 7、 54 38 8的溶剂洗脱，流速Sml/min，以每份500ml收集。洗脱液用硅胶H薄层色谱分 析，展开剂同上。合并色谱斑点相同组分，减压回收溶剂，分别得高纯度的上述各组分。以乙腈-水梯度洗脱，乙腈0_20min，18%(体积比)；20-45min, 20-45 % (体积比)；45-55min,45-55% (体积比)。流速1. 5ml/min，检测波长203nm，进样量10 μ 1， 柱温为25°C的方法检测上述各成分。分离提取三七皂苷R1 3. 67g，其中三七皂苷R1的含量为96.8%。分离提取人参皂苷Rg1 14.25g，其中人参皂苷的含量为95.9%。分离提取人参皂苷Re 1. 45g，其中人参皂苷Re的含量为96. 1 %。分离提取人参皂苷Md1 13. 4g，其中人参皂苷Md1的含量为96. 2%。分离提取人参皂苷Rd 3. 25g，其中人参皂苷Rd的含量为95.6%。称取下述重量的各组分(按上述方法制得的基本纯组分)三七皂苷Rl 7g，人参 皂苷Rgl 25g，人参皂苷Rbl 30g，人参皂苷Re 4. 7g，人参皂苷Rd 7. 9g。制备方法如下将上述各组分混合，用注射用水适量溶解，加针用活性炭脱色，滤 过，加注射用水至总量，调节PH值至6. 5，滤过，冷冻干燥，即得。实施例2称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 4. 8g，人参皂苷Rgl 19. 8g，人参皂苷 Rbl20g，人参皂苷Re 3. 5g，人参皂苷Rd 1. 5g。
制备方法如下将上述各组分混合，用注射用水适量溶解，加针用活性炭脱色，滤 过，加注射用水至总量，调节PH值至6. 0，滤过，冷冻干燥，即得。实施例3称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 10g，人参皂苷Rgl 45g，人参皂苷Rbl 40g， 人参皂苷Re 6g，人参皂苷Rd 9.9g。制备方法如下将上述各组分混合，用注射用水适量溶解，加针用活性炭脱色，滤 过，加注射用水至总量，调节PH值至7. 0，滤过，冷冻干燥，即得。实施例4称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 7g，人参皂苷Rgl 25g，人参皂苷Rbl 30g， 人参皂苷Re 4. 7g，人参皂苷Rd 7.9g。制备方法如下将上述各组分混合，用注射用水适量溶解，加针用活性炭脱色，滤 过，加注射用水至总量，调节PH值至6. 5，滤过，冷冻干燥，即得。实施例5称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 5g，人参皂苷Rgl 35g，人参皂苷Rbl 33g， 人参皂苷Re 4. 0g，人参皂苷Rd 4.9g。制备方法如下将上述各组分混合，用注射用水适量溶解，加针用活性炭脱色，滤 过，加注射用水至总量，调节PH值至6. 8，滤过，冷冻干燥，即得。实施例6称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 9g，人参皂苷Rgl 30g，人参皂苷Rbl35g，人 参皂苷Re 5g，人参皂苷Rd 3.9g。制备方法如下将上述各组分混合，用注射用水适量溶解，加针用活性炭脱色，滤 过，加注射用水至总量，调节PH值至6. 7，滤过，冷冻干燥，即得。实施例7称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 8g，人参皂苷Rgl 40g,人参皂苷Rbl38g，人 参皂苷Re 5. 5g，人参皂苷Rd 2.6g。制备方法如下将上述各组分混合，用注射用水适量溶解，加针用活性炭脱色，滤 过，加注射用水至总量，调节PH值至6. 6，滤过，冷冻干燥，即得。实施例8称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 8. 5g，人参皂苷Rgl 32g，人参皂苷Rbl 36g，人参皂苷Re 4. 5g，人参皂苷Rd 6g。制备方法如下将上述各组分混合，用注射用水适量溶解，加0. 5%针用活性炭脱 色，滤过，加注射用水至全量，调pH至6. 5，滤过，灌装，灭菌即得小容量注射剂。实施例9称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 8. 5g，人参皂苷Rgl 32g，人参皂苷Rbl 36g，人参皂苷Re 4. 5g，人参皂苷Rd 6g。制备方法如下将上述各组分混合，用0. 9%氯化钠注射液溶解，加0. 5%针用活 性炭脱色，滤过，加氯化钠注射液至1000ml，调pH6. 5，滤过，灌装，灭菌即得大容量注射剂。实施例10称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 8. 5g，人参皂苷Rgl 32g，人参皂苷Rbl36g，人参皂苷Re 4. 5g，人参皂苷Rd 6g。制备方法如下将上述各组分混合，用5%葡萄糖注射液适量溶解，加0. 5%针用 活性炭脱色，滤过，加5 %葡萄糖注射液至IOOOml，调pH6. 5，滤过，灌装，灭菌即得大容量注 射剂。实施例11称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 8. 5g，人参皂苷Rgl 32g，人参皂苷Rbl 36g，人参皂苷Re 4. 5g，人参皂苷Rd 6g。制备方法如下将上述各组分混合，进一步粉碎成细粉，过300目筛，加入组合物 重量76%淀粉，混勻，制成颗粒，加入组合物重量4%滑石粉混和均勻后装入胶囊，即得胶囊剂。实施例12称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 8. 5g，人参皂苷Rgl 32g，人参皂苷Rbl 36g，人参皂苷Re 4. 5g，人参皂苷Rd 6g。制备方法如下将上述各组分混合，进一步粉碎成细粉，加入组合物重量70%糊 精，混勻，制成颗粒，加入组合物重量1 %滑石粉和组合物重量1 %硬脂酸镁混和均勻后打 片，包装，即得片剂。实施例13称取下述重量的各组分三七皂苷Rl 8. 5g，人参皂苷Rgl 32g，人参皂苷Rbl 36g，人参皂苷Re 4. 5g，人参皂苷Rd 6g。制备方法如下将上述各组分混合，进一步粉碎成细粉，加入组合物重量2倍蔗 糖，混勻，制成颗粒，分装，包装，即得颗粒剂。实验例1对控制性低血压脑损伤的保护作用1、方法与分组健康成年雄性大鼠，体重250 350g，禁食12h，自由饮水。水合氯醛腹腔麻醉，大 鼠安静后将其仰卧置于手术台上并固定头与四肢；口腔内放入自制的口咽通气道以保持呼 吸道通畅；肛温计放入大鼠肛门内，并用白炽灯照射大鼠，保持肛温在(37. 0 士 0. 5) °C ；双侧 腹股沟剪毛，消毒，切皮时用2%利多卡因局部麻醉，分别分离一侧股动、静脉；静脉侧用一 次性静脉输液针穿刺股静脉，用于输入降压药物和补液动脉侧用24G动脉穿刺针穿刺股 动脉，置管，接三通及直接测压转换器直接测动脉压。待血压稳定后，由5 %的葡萄糖液配制 成0. 2mg/ml硝普钠复合lmg/ml艾司络尔降压，10 15min内降到目标血压，通过间断的调 节泵速，维持目标血压；降压期间所有大鼠总的补液量(包括降压药物液体量)为3. 6ml， 尽量减少对血容量的影响。降压完毕后，从动脉侧抽取0. 5ml动脉血进行血气分析，并补相 应的盐水量；拔除动脉套管针，动脉压迫止血，并拔除一次性静脉输液针，压迫，肌肉皮肤相 应缝合，监护其苏醒。并Mh内予8U/kg的青霉素两次，腹腔皮下注射，观察Mh。取手术成功大鼠40只，随机分为控制性降压组、组合物给药组1、组合物给药组2 和给药对照组，每组10只。另取健康大鼠10只作为假手术组。假手术组给予生理盐水， 控制性降压组给予生理盐水，组合物给药组1给予实施例4组合物，组合物给药组2给予 实施例1组合物、给药对照组给予市售三七总皂苷产品(三七皂苷R18.0%，人参皂苷Rgl 30%，人参皂苷31%，人参皂苷Re 2.5%，人参皂苷Rd 11%)。给药30日后，观察各组动物进食、步态、翻正反射、行为功能等。2、结果假手术组术后神经行为学功能评价未见明显异常，生存率为100% ；控制性降压组 出现呆滞现象，行动迟缓，对食物和水反应迟钝，翻正反射和斜坡平衡能力均出现减退，生 存率仅为36% ；给药对照组对上述反应略有改善，但不显著，生存率为68% ；组合物给药组 1和2可显著改善神经行为学功能评价指标，翻正反射和斜坡平衡功能基本恢复正常，血压 基本恢复正常，存活率100%。表明本组合物可通过调节血压，改善脑损伤功能。实验例2对同型半胱氨酸含量的影响选择脑梗死患者145例，分为两组，药物组合物组男40例，女35例，平均年龄 52. 62士7. 66岁；给药对照组男38例，女32例，平均年龄50. 32士6. 93岁。分别于入院次 日早晨空腹抽取静脉血anl，检测同型半胱氨酸。药物组合物组患者同型半胱氨酸量平均为 22. 48士6. 03，给药对照组患者同型半胱氨酸量平均为20. 67士5. 44。两组患者分别给予实 施例4组合物及市售品(三七皂苷Rl 8.0%，人参皂苷Rgl 30%，人参皂苷Rbl 31%，人参 皂苷Re 2.5%，人参皂苷Rd 11%) 30天。结果，药物组合物组的总有效率为86. 33%，同型 半胱氨酸量降低为15. 47士 1. 93，降低率为31% ；给药对照组的总有效率为80. 74%，同型 半胱氨酸量降低为16. 55士2. 61，降低率为20%。表明，本药物组合物可有效治疗脑中风， 并显著降低同型半胱氨酸量。实验例3异常毒性、过敏反应、急性毒性等检查选取实施例4进行以下各项安全性试验1)急性毒性试验参照《中药药理研究方法学》急性毒性试验进行，采用常规预试，测出产品腹腔和 尾静脉注射的最大致死量和最小致死量，取130只小鼠随机分为13组，每组10只，雌雄各 半，给小鼠尾静脉和腹腔注射不同剂量的产品溶液，观察小鼠的中毒症状，采用孙氏综合法 计算LD50值。结果发现，在给药后不同时间内，小鼠出现自由活动减少，濒死时呼吸频率增 快、张口呼吸、鼻翼扇动等中毒症状。腹腔注射的LD50为765. 12mg/kg ；尾静脉注射的LD50 为 450. 34mg/kg。2)过敏试验用氯化钠注射液将产品稀释为每Iml中含组合物20mg的溶液，给豚鼠腹腔注射。 每次0. 5ml/只，隔日一次，共三次。给药后第14天及第21天分别静脉注射该溶液1. Oml/ 只，结果均未见豚鼠有过敏反应。给予5%新鲜蛋清的豚鼠在给予蛋清后的第14天及第21 天，在分别静脉注射蛋清后均出现过敏反应，且皆于15min内死亡。这些结果表明，本产品 的过敏反应检查符合规定。3)溶血与凝聚试验参照《中国药典》2010年版一部附录相关内容进行试验，结果表明，本产品在3小 时内对家兔红细胞无溶血作用和红细胞凝集反应。4)血管刺激试验参照《中药新药研究的技术要求》相关内容进行试验，采用同体左右耳对照，取3 只家兔，左耳由耳缘静脉注射本产品5. Oml 05mg)/只，右耳给予等容量的氯化钠注射液， 每日一次，连续三日。结果表明，家兔耳缘静脉给药部位肉眼观察无明显变化，病理切片显微镜检显示，距注射部位Icm处血管内皮连续、完整，未见增生、肿胀，血管周围组织未见炎 性细胞浸润及坏死现象，而且管腔内无血栓形成。这些结果表明，本产品无血管刺激反应。幻异常毒性试验参照《中国药典》2010年版一部附录相关内容进行试验，小鼠尾静脉注射本产品溶 液0. 5ml (2. 5mg)/只，结果表明，5只小鼠均未发生死亡及其他异常表现。上述试验结果表明，本产品的应用安全符合规定。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易风见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这此修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
权利要求
1.一种用于预防或治疗中风病的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包含下 述组分三七皂苷Rl 4. 8-10份 人参皂苷Rgl 19. 8-45份 人参皂苷Rbl 20-40份 人参皂苷Re 3. 5-6份 人参皂苷Rd 1.5-9. 9份。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包含下述组分 三七皂苷Rl 4. 8-7份人参皂苷Rgl 19. 8-45份 人参皂苷Rbl 20-40份 人参皂苷Re 3. 5-4. 7份 人参皂苷Rd 1.5-7. 9份。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包含下述组分 三七皂苷Rl 4. 8-7份人参皂苷Rgl 19. 8-45份 人参皂苷Rbl 20-40份 人参皂苷Re 3. 5-4. 7份 人参皂苷Rd 1.5-4. 9份。
4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包含下述组分 三七皂苷Rl 4. 8-7份人参皂苷Rgl 25-45份 人参皂苷Rbl 20-40份 人参皂苷Re 3. 5-4. 7份 人参皂苷Rd 1.5-4. 9份。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述组合物按重量份计包含下述组分 三七皂苷Rl 4. 8-7份人参皂苷Rgl 25-45份 人参皂苷Rbl 20-40份 人参皂苷Re 3. 5-4. 7份 人参皂苷Rd 2. 6-3. 9份。
6.包含权利要求1-5任一项所述的组合物和药学上可用载体的制剂。
7.权利要求1-5任一项所述的组合物在用于制备降低血浆中同型半胱氨酸的含量的 药物中的应用。
8.权利要求1-5任一项所述的组合物在用于制备调节血压的药物中的应用。
9.权利要求1-5任一项所述的组合物在用于制备预防或治疗中风病的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种用于预防或治疗中风病的组合物及其制备方法，其中，所述组合物按重量份计包含下述组分三七皂苷R1 4.8-10份，人参皂苷Rg1 19.8-45份，人参皂苷Rb1 20-40份，人参皂苷Re3.5-6份，人参皂苷Rd 1.5-9.9份。本发明的组合物效果显著、安全性高、可显著缩短病程，缓解病痛。
文档编号A61P9/12GK102091081SQ20101062461
公开日2011年6月15日 申请日期2010年12月30日 优先权日2010年12月30日
发明者方同华 申请人:黑龙江珍宝岛药业股份有限公司