防粘连材料的制作方法

专利名称：防粘连材料的制作方法
技术领域：
本发明涉及防止术后脏器粘连的防粘连材料。另外，本发明涉及羧甲基纤维素(CMC)结构体及其制备方法。本发明的CMC结构体例如可用作医疗材料，更具体而言，可用于要求在生物体内保持一定时间形状后被吸收/排泄的性质的物品，例如防粘连材料、片状纤蛋白粘合剂用基材、DDS用基材、吸收性缝合增强材料、人造硬膜、骨接合材料、吸收性缝合线等。
背景技术：
在心脏外科、整形外科、脑神经外科、腹部外科、妇产科等临床领域，在各种外科手术后或由于外伤，患部与其周围的生物体组织粘连会导致重大问题。例如，引起疼痛或功能障碍，当严重时，可引起肠梗阻等，往往需要另外实施用以剥离上述粘连的手木。另外，由于 粘连，也会产生针对原疾病的再次手术变难的问题。因此，目前为防止生物体组织的粘连，开发出覆盖、保护有发生粘连之虞的组织的防粘连材料，实际上，再生氧化纤维素布和透明质酸钠 羧甲基纤维素混合膜等作为防粘连材料已实用化。关于防粘连材料，为了具体发挥防粘连功能，防粘连材料需要在必要的时间内存在于有粘连之虞的应用部位(患部)，在作为上述应用部位的组织间的屏障发挥作用后，最终被分解，被生物体所吸收。换句话说，防粘连材料要求生物相容性、生物吸收性、时间控制等优异。但是，如上所述的现有防粘连材料例如难以控制在体内存在的时间，或即使生物体组织无粘连之虞，还存在于体内，由此对患者造成负担。为消除此类缺点，专利文献I中公开了以含有溶解性半衰期为5小时 30小时的水难溶性化的羧甲基纤维素为特征的防粘连材料。该水难溶性化的羧甲基纤维素例如可通过以下方法获得将水溶性的羧甲基纤维素钠(钠型CMC)溶于蒸馏水以达到1%质量后，将该水溶液的PH用IN硝酸调节至I. 5，将该酸性溶液于-20°C静置3日后，于25°C解冻，从而得到海绵状的水难溶性化的羧甲基纤维素(实施例I)。即，专利文献I中记载的水难溶性化的羧甲基纤维素在通过酸处理而完全转化为酸型CMC后，经冻结和解冻获得。该防粘连材料的特征在于可控制溶解性半衰期的方面，但到底只是半衰期，存在发挥完作用的防粘连材料完全不溶而残留于体内的可能性，无法完全消除对患者的负担。另外，术后脏器粘连可引起疼痛、不孕、肠梗阻(肠梗阻，ileus)等并发症，使术后患者的QOL (生活质量，quality of life)恶化。特别是妇产科领域的粘连是成为不孕症病因的重大问题。据说主要的妇产科手术的约90%会发生粘连。在防止术后粘连方面，以通过密封手术创伤部分来防止与邻近脏器的粘连的方法为主。例如，专利文献2中公开了使用水溶性羧甲基纤维素钠的1%水溶液作为注入腹腔内的防粘连材料的技术，或者专利文献3中公开了使用水难溶性化的羧甲基纤维素(酸型羧甲基纤维素)的膜作为防粘连材料的技木。另外，作为市售的防粘连材料，已知有
Seprafilm (セプラフイルム)(Genzyme Japan K. K.(ジニンザイム ジャパン)，以2:1
的比例(重量比)含有透明质酸钠和羧甲基纤维素的半透明膜状防粘连材料)、Interceed(インタ一シ一ド)(Johnson & Johnson K. K.(ジヨンソン エンド ジヨンソン)，再
生氧化纤维素网)，但期待具有更优异的防粘连效果的防粘连材料。例如，在上述专利文献3中记载有使用羧甲基纤维素钠水溶液的防粘连材料的效果虽然被确认，但未得到充分的效果的内容。另外，S^rafilm (セブラフイルム)由于一旦润湿则会自身相互粘附，和若用湿润的手接触则会粘在手上而难以重新粘贴的方面，以及取决于保管条件，若过度干燥则会破裂的方面，和密封的操作复杂，从该方面也无法期待充分的防粘连效果。技术文献 专利文献
专利文献I :日本特开2004-51531号公报 专利文献2 :日本特开平1-301624号公报 专利文献3 :国际公开W001/034214号小册子。

发明内容
发明所要解决的课题
作为需要在生物体内植埋一定时间的医疗材料(例如防粘连材料)，为完全消除对患者的负担，希望在其功能变得不再需要后(例如就防粘连材料而言，在生物体组织粘连的可能性消失后)迅速溶解，为生物体所吸收。即，仅凭对溶解性半衰期的控制并不足够，希望可控制作用发挥时间和溶解时间。或者，公知碱金属型CMC (特别是钠型CMC)具有创伤愈合效果，若术后可对患部缓慢释放此类碱金属型CMC，则使得在发挥防粘连效果的同时顺利的创伤愈合持续进展，合
乎需要。本发明人为获得这样的CMC结构体而深入研究的结果发现，通过对水易溶性的碱金属型CMC构成的结构体在维持其结构的状态下进行部分酸处理，或对酸型CMC构成的结构体在維持其结构的状态下进行部分碱处理(例如通过在完全进行碱金属型CMC构成的结构体的上述酸处理后进行碱处理)，可获得水易溶性的碱金属型CMC与水难溶性的酸型CMC混杂的新型CMC结构体，这些结构体可发挥上述性能。因此，本发明的第I课题在于，提供可提供作为医疗材料，特别是防粘连材料有用的新型CMC结构体的制备方法，进而提供生物相容性、生物吸收性优异，并且作用发挥时间和溶解时间可控的CMC结构体，或可同时发挥防粘连效果和创伤愈合效果的CMC结构体。另外，本发明的第2课题在于，提供具有比现有产品更优异的防粘连效果的防粘连材料。本发明人为解决上述课题而刻苦努力时发现，通过以纤维状形态使用已知作为防粘连材料未示出充分的效果的羧甲基纤维素钠，即使与目前市售的已知作为防粘连材料示出最优异的效果的S印rafilm (セブラフイルム)相比，也示出同等或在它之上的优异的防粘连效果，从而完成本发明。需说明的是，在羧甲基纤维素钠作为防粘连材料的用途方面，若附帯说本专利申请时的技术常识，则推測上述S印rafilm (セブラフイルム)以2:1的比例(重量比)含有透明质酸钠和羧甲基纤维素作为原料的理由为，由于羧甲基纤维素钠单独的防粘连效果不充分，所以与透明质酸钠合用。另外，在本发明人已知范围内，不存在实质上仅由羧甲基纤维素钠构成的防粘连材料市售品，从这一点也可知単独使用羧甲基纤维素钠时防粘连效果不充分为本专利申请时的技术常识。因此，根据本专利申请时的上述技术常识，通过以纤维状形态使用羧甲基纤维素钠而示出比市售的S印rafilm (セブラフイルム)优异的防粘连效果是极其意外并且预想不到的发现。解决课题的手段 本发明涉及
[1]羧甲基纤维素结构体，其特征在于，实质上由羧甲基纤维素构成，处于酸型羧甲基纤维素与碱金属型羧甲基纤维素混杂的状态；
[2][I]的羧甲基纤维素结构体，其中，形状为纤维片、膜或海绵；
[3][I]或[2]的羧甲基纤维素结构体，其中，在体内的作用持续时间为5小时飞个 月；
[4]防粘连材料，其特征在于，含有[1] [3]的羧甲基纤维素结构体；
[5][1] [3]的羧甲基纤维素结构体或[4]的防粘连材料的制备方法，其特征在于，从外侧对由碱金属型羧甲基纤维素构成的结构体进行酸处理(特别是浸溃于酸性溶液中)，在碱金属型羧甲基纤维素完全转化为酸型羧甲基纤维素前结束上述酸处理(特别是浸溃)；
[6][ir[3]的羧甲基纤维素结构体或[4]的防粘连材料的制备方法，其特征在于，从外侧对由酸型羧甲基纤维素构成的结构体进行碱处理(特别是浸溃于碱性溶液中)，在酸型羧甲基纤维素完全转化为碱金属型羧甲基纤维素前结束上述碱处理；
[7]通过调节从外侧对由碱金属型羧甲基纤维素构成的结构体进行酸处理的时间(特别是浸溃于酸性溶液中的时间)，从而控制由羧甲基纤维素构成的结构体在体内的作用持续时间的方法；
[8]通过调节从外侧对由酸型羧甲基纤维素构成的结构体进行碱处理的时间(特别是浸溃于碱性溶液中的时间)，从而控制由羧甲基纤维素构成的结构体在体内的作用持续时间的方法。
以下往往将这些本发明称为本发明的第I发明。另外，本发明涉及
[1]防粘连材料，其特征在于，实质上由纤维状碱金属型羧甲基纤维素构成；
[2][I]的防粘连材料，其中，単位面积重量为l(T300g/m2;
[3][I]或[2]的防粘连材料，其中，分子量为2万 200万道尔顿。
以下往往将这些本发明称为本发明的第2发明。发明的效果
根据本发明的制备方法，可提供作为医疗材料，特别是防粘连材料有用的新型CMC结构体。通过本发明的制备方法获得的CMC结构体可控制作用发挥时间和溶解时间，作为要求在生物体内保持一定时间形状后被吸收/排泄的性质的物品的材料优异。或者，可同时发挥防粘连效果和创伤愈合效果。另外，本发明的防粘连材料与公知的市售的各种防粘连材料相比，示出优异的防粘连效果。


[图I]示出在实施实施例1(1)中的盐酸处理前无纺布试验片(盐酸未处理)形状的代替附图的照片。[图2]示出将无纺布试验片(盐酸处理时间=2小时)用MEM培养基培养10日后的形状的代替附图的照片。[图3]示出将无纺布试验片(盐酸处理时间=4小时)用MEM培养基培养10日后的形状的代替附图的照片。[图4]示出将无纺布试验片(盐酸处理时间=6小时)用MEM培养基培养10日 后的形状的代替附图的照片。[图5]示出针对本发明的防粘连材料和比较用的市售品(Seprafilm(セプラフィルム))使用猪评价防粘连效果的结果(实施例4)的图。[图6]示出针对本发明的防粘连材料和比较用的各种防粘连材料使用小鼠评价防粘连效果的结果(实施例7)的图。[图7]示出针对本发明的防粘连材料和比较用的市販品(Seprafilm(セプラフィルム))使用小鼠评价防粘连效果的结果(实施例9)的图。
具体实施例方式本发明的羧甲基纤维素(CMC)结构体例如可通过本发明的制备方法获得，实质上由羧甲基纤维素构成，处于酸型羧甲基纤维素与碱金属型羧甲基纤维素混杂的状态。在本说明书中“羧甲基纤维素(CMC)”只要无特殊说明，均以包含易溶于水的碱金属型羧甲基纤维素(以下称碱金属型CMC)和难溶于水的酸型羧甲基纤维素(狭义的羧甲基纤维素，以下称酸型CMC)的含义使用。作为上述碱金属型CMC，例如可列举出羧甲基纤维素钠(Na型CMC)、羧甲基纤维素钾等。以下在对本发明的第I发明进行说明后，对本发明的第2发明进行说明。《本发明的第I发明》
在本发明的制备方法中，对碱金属型CMC (优选Na型CMC)构成的结构体在維持其结构的状态下进行酸处理，在碱金属型CMC完全转化为酸型CMC前，例如酸处理到达上述结构体的中心部或内侧部分前结束上述酸处理(以下称第I制备方法)。或者，对酸型CMC构成的结构体在维持其结构的状态下进行碱处理，在酸型CMC完全转化为碱金属型CMC (优选Na型CMC)前，例如碱处理到达上述结构体的中心部或内侧部分前结束上述碱处理(以下称第2制备方法)。碱金属型CMC构成的结构体由于为水易溶性，所以容易通过加水形成水溶液，失去其结构，但在本发明的制备方法中，例如通过使用含有低级醇的溶剂实施酸处理或碱处理，可維持其结构。作为第I制备方法中的上述酸处理，可列举出结构体在酸性溶液中的浸溃、酸性溶液在结构体表面的涂布或喷雾等。例如，作为上述酸处理，当进行在酸性溶液中的浸溃时，将碱金属型CMC构成的结构体浸溃于酸性溶液中，在酸性溶液到达上述结构体的中心部或内侧部分前结束上述浸溃。另外，第2制备方法中的上述碱处理除使用碱性溶液代替酸性溶液以外，与上述酸处理一祥，也可列举出结构体在碱性溶液中的浸溃、碱性溶液在结构体表面的涂布或喷雾等。例如，作为上述碱处理，当进行在碱性溶液中的浸溃时，将酸型CMC构成的结构体浸溃于碱性溶液中，在碱性溶液到达上述结构体的中心部或内侧部分前结束上述浸溃。第I制备方法中使用的碱金属型CMC结构体例如可通过以下方法制备对任意的CMC构成的结构体进行碱处理，完全转化为碱金属型CMC，或由碱金属型CMC直接形成结构体。另外，第2制备方法中使用的酸型CMC结构体例如可通过以下方法制备对任意的CMC构成的结构体(例如将任意的CMC构成的结构体通过碱处理完全转化为碱金属型CMC而成的碱金属型CMC结构体)进行酸处理，完全转化为酸型CMC，或由酸型CMC直接形成结构体。
本发明中可使用的CMC可使用能够用作医疗材料的各种CMC，例如可使用醚化度为0. 5^1. 5、优选0. 5^1的CMC，分子量(以出芽短梗孢糖(pullulan)为指标时)为2万 200万Da、优选2万 100万Da的CMC。本发明的第I制备方法中使用的上述酸性溶液只要在对碱金属型CMC结构体进行酸处理(例如浸溃于酸性溶液中)时可缓慢渗透至碱金属型CMC结构体的内部，并且可将形成结构体的碱金属型CMC置换为酸型CMC，则无特殊限定。例如可使用盐酸、硫酸、硝酸、醋酸等。作为酸浓度，例如可为0. Of 4. 8当量浓度、优选0. r3. 6当量浓度、更优选0. 5^2. 4当量浓度。需说明的是，碱金属型CMC结构体由于由易溶于水的碱金属型CMC构成，所以作为溶剂优选使用以低级醇(例如甲醇、こ醇、异丙醇)为主体的醇水溶液(作为醇浓度，例如为60%以上、优选70%以上、更优选80%以上)。本发明的第2制备方法中使用的上述碱性溶液只要在对酸型CMC结构体进行碱处理(例如浸溃于碱性溶液中)时可缓慢渗透至酸型CMC结构体的内部，并且可将形成结构体的酸型CMC置换为碱金属型CMC，则无特殊限定。例如可使用氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡、胍的各自的水溶液。作为浓度，例如可为0. 0广5当量浓度、优选0. r4当量浓度、更优选0. 3^3当量浓度。在第2制备方法中，由于进行碱处理获得的反应生成物中含有易溶于水的碱金属型CMC，所以作为溶剂优选使用以低级醇(例如甲醇、こ醇、异丙醇)为主体的醇水溶液(作为醇浓度，例如为60%以上、优选70%以上、更优选80%以上)。在酸性溶液或碱性溶液中的浸溃时间可考虑所使用的碱金属型CMC结构体或酸型CMC结构体的形状、酸性溶液或碱性溶液的种类、浓度、pH、温度、产品所要求的在生物体内的功能(即作用发挥时间、溶解时间)等条件适宜确定，例如可通过如下述实施例所示的简单的小規模试验来确定。具体而言，可通过改变浸溃时间来准备不同的多个样品[參照实施例1(1)、实施例2(1)]，通过使用适当的溶解试验用溶液的溶解速度试验来选择示出所希望的溶解分布曲线的样品[參照实施例1(2)、实施例2(2)]，从而确定浸溃时间。作为上述溶解试验用溶液，可使用尽可能忠实再现生物体内条件的试验用溶液，或者也可使用以迅速评价为先的试验用溶液(例如实施例I (2)中记载的MEM培养基)。通过本发明的第I制备方法获得的本发明的CMC结构体中，关于酸型CMC与碱金属型CMC的混杂状态，由于可考虑产品所要求的在生物体内的功能，通过CMC结构体的形状、酸处理的条件等适宜确定，所以无特殊限定，但由其制备方法可知，酸型CMC与碱金属型CMC混杂遍及该结构体的表面至中心部的全部区域，在其含有比率方面，在表面为酸型CMC占优势，在中心部为碱金属型CMC占优势，可列举出该含有比率从表面向中心部连续或间断变化的混杂状态，或外侧部分为酸型CMC，内侧部分为碱金属型CMC的混杂状态等。另外，在通过本发明的第2制备方法获得的本发明的CMC结构体中，除将酸型CMC与碱金属型CMC的构成反转以外，也示出同样的混杂状态。即，酸型CMC与碱金属型CMC混杂遍及该结构体从表面至中心部的全部区域，在其含有比率方面，在表面碱金属型CMC占优势，在中心部酸型CMC占优势，可列举出其含有比率从表面向中心部连续或间断变化的混杂状态，或外侧部分为碱金属型CMC，内侧部分为酸型CMC的混杂状态等。需说明的是，当外侧部分为酸型CMC，内侧部分为碱金属型CMC时，或外侧部分为碱金属型CMC，内侧部分为酸型CMC时，其中间部分无特殊限定，例如为酸型CMC或碱金属型CMC中的任一方时，可为酸型CMC与碱金属型CMC混杂的状态等。本发明的CMC结构体的形状无特殊限定，但优选可用作医疗材料的形状。作为本 发明的CMC结构体，例如可列举出纤维片(例如编织品、织布、无纺布)、膜或海绵。将CMC构成的结构体浸溃于溶液中时，溶液缓慢渗透至结构体内部的现象进展。在本说明书中，结构体“外侧部分”、“中间部分”、“内侧部分”指，将从在溶液中的浸溃开始至对结构体整体的滲透完成为止的过程分为初期、中期、后期时，分别将在初期阶段溶液所滲透的区域称为“外侧部分”，将在后期阶段溶液所滲透的区域称为“内侧部分”，将“外侧部分”与“内侧部分”之间的区域称为“中间部分”。另外，结构体的“表面”指将结构体浸溃于溶液中时，在刚浸溃后溶液所接触的区域。例如，当CMC构成的结构体为膜时，其表面指膜表面，而当CMC构成的结构体为纤维片(例如编织物、织布、无纺布)时，其表面并不是表观的片表面，而是指各组成纤维的纤维表面。另外，对于外侧部分和内侧部分，在膜的情况下，直接指膜的外侧部分和内侧部分，在纤维片的情况下，并非指作为纤维片的外侧部分和内侧部分，而是指各组成纤维的外侧部分和内侧部分。本发明的CMC结构体在酸型CMC与碱金属型CMC混杂遍及从表面至中心部的全部区域吋，由于缓慢释放出具有创伤愈合效果的碱金属型CMC，所以可同时发挥防粘连效果和创伤愈合效果。另外，本发明的CMC结构体在外侧部分由水难溶性的酸型CMC构成，内侧部分由水易溶性的碱金属型CMC构成时，例如作为防粘连材料留置于生物体内时，外侧的酸型CMC部分缓慢溶解。但是，若外侧的酸型CMC部分溶解，内侧的碱金属型CMC部分露出，则由于内侧部分迅速溶解，因此以此时刻为界，CMC结构体的形状急剧发生变化。即，就这样的本发明的CMC结构体而言，在内侧的碱金属型CMC部分露出为止的时间(作用发挥时间)，和在内侧的碱金属型CMC部分露出后的时间(溶解时间)，作为CMC结构体整体的表观溶解速度急剧发生变化，所以使得发挥过作用的CMC结构体被迅速从生物体内排除。另外，本发明的CMC结构体在外侧部分由水易溶性的碱金属型CMC构成，内侧部分由水难溶性的酸型CMC构成时，例如适合在留置后希望在初期阶段发挥创伤愈合效果的情况。此时，使得具有创伤愈合效果、为水易溶性的碱金属型CMC在初期阶段迅速对脏器等起作用，然后残存的内侧部分的酸型CMC在留置的最适时间内发挥作用。关于本发明的CMC结构体，例如在作为术后粘连的预防用途(例如防粘连材料)使用时，在体内的作用持续时间通常认为优选2日 14日，但若采用本发明技术，则上述时间可为比通常时间短的5小时或比通常时间长的6个月，可按照手术或症状适应所希望的时间(优选I日个月，更优选I日 I个月)。优选可通过目测确认在体内的存在，例如可在腹腔内、骨盆腔内使用。当作为片状纤蛋白粘合剂用基材使用时，在体内的作用持续时间通常认为优选2日个月，但若采用本发明技术，则上述时间可为比通常时间短的I日或比通常时间长的3个月，可按照手术或症状适应所希望的时间(优选I日 I个月)。优选具有充分的強度(例如IMPa以上)，例如可在腹腔内、骨盆腔内、胸腔内使用。通过在本发明的CMC结构体上担载纤蛋白粘合剂(例如凝血酶/纤维蛋白原)，可制备片状纤蛋 白粘合剤。当作为载药用基材(例如DDS用基材)使用时，在体内的作用持续时间通常认为优选I周个月，但若采用本发明技术，则上述时间可为比通常时间短的I日或比通常时间长的6个月，可按照手术或症状适应所希望的时间(优选4日个月，更优选I周 I个月)。优选可通过目测确认在体内的存在，例如可在腹腔内、骨盆腔内、胸腔内、颅使用。当作为组织结合部等的增强用补片用途(例如吸收性缝合增强材料)使用时，在体内的作用持续时间通常认为优选I周个月，但若采用本发明技术，则上述时间可为比通常时间短的3日或比通常时间长的6个月，可按照手术或症状适应所希望的时间(优选3日 3个月，更优选3日 2个月)。优选具有充分的強度(例如IMPa以上)，例如可在腹腔内、骨盆腔内、胸腔内、颅中使用。当作为硬膜替代品用途(例如人造硬膜)使用时，在体内的作用持续时间通常认为优选4个月I个月，但若采用本发明技术，则上述时间可为比通常时间短的I个月或比通常时间长的24个月，可按照手术或症状适应所希望的时间(优选3个月 12个月)。优选具有充分的强度(例如IMPa以上)，可在颅中使用。当作为用以固定骨与骨的骨接合材料用途(例如螺钉、螺帽、螺杆、板等)使用吋，在体内的作用持续时间通常认为优选3个月飞个月，但若采用本发明技术，上述时间可为比通常时间短的I个月或比通常时间长的24个月，可按照手术或症状适应所希望的时间(优选I个月 12个月，更优选2个月、个月)。优选具有充分的強度(例如IMPa以上)，可在全身的骨骼中使用。当作为吸收性缝合线使用时，在体内的作用持续时间通常认为优选I周个月，但若采用本发明技术，则上述时间可为比通常时间短的I周或比通常时间长的24个月，可按照手术或症状适应所希望的时间(优选I周 12个月，更优选I周飞个月)。优选具有充分的強度(例如IMPa以上)，例如可在全身各脏器或组织、颅、皮肤中使用。《本发明的第2发明》
本发明的防粘连材料实质上由纤维状碱金属型羧甲基纤维素构成，优选仅由纤维状碱金属型羧甲基纤维素构成。在本说明书中“羧甲基纤维素(CMC)”如在本发明的第I发明中所述，只要无特殊说明，均以包含易溶于水的碱金属型羧甲基纤维素(以下往往称碱金属型CMC)和难溶于水的酸型羧甲基纤维素(狭义的羧甲基纤维素，以下往往称酸型CMC)的含义使用。
本发明中使用的羧甲基纤维素为碱金属型羧甲基纤维素。作为碱金属型羧甲基纤维素，例如可列举出羧甲基纤维素钠(Na型CMC)、羧甲基纤维素钾等。本发明中使用的碱金属型羧甲基纤维素在pH7. 4下羧甲基解离，处于阴离子的状态。因此，上述碱金属型羧甲基纤维素可在PH7.4下与碱性蛋白质(例如趋化因子、肝素结合细胞因子等)进行离子结合。在本发明中，可使用能够用作医疗材料的各种碱金属型羧甲基纤维素，例如可使用醚化度为0. 5^1. 5、优选0. 5 1、更优选0. 6^0. 9的碱金属型羧甲基纤维素、分子量(以出芽短梗孢糖为指标时)为2万 200万Da、优选2万 100万Da、更优选2万 50万Da的碱
金属型羧甲基纤维素。
本发明中使用的碱金属型羧甲基纤维素的形状只要为纤维状，则无特殊限定，例如可直接或以编织物、织布、无纺布等纤维片形状使用纤维结构体。当碱金属型羧甲基纤维素为纤维片形状时，其単位面积重量(目付)优选为l(T300g/m2。特别是当碱金属型羧甲基纤维素为织布时，其単位面积重量优选为4(T300g/m2，更优选为8(T250g/m2。当碱金属型羧甲基纤维素为无纺布时，其単位面积重量优选为10 150g/m2,更优选为 15 80g/m2。本发明中使用的纤维状碱金属型羧甲基纤维素其本身公知(例如參照日本特许第3057446号说明书)，可通过公知方法制备。例如，羧甲基纤维素钠如下述实施例所示可通过在将天然、纯化或再生纤维素用含氢氧化钠的こ醇水溶液处理后，用含一氯こ酸的こ醇水溶液进ー步处理而羧甲基化来获得。对于在本发明的防粘连材料中碱金属型羧甲基纤维素示出防粘连效果的机制，虽然目前并未完全阐明，但本发明人推測其基于以下机制。需说明的是，本发明并不限定于以下机制。本发明中使用的羧甲基纤维素由于为碱金属型羧甲基纤维素，所以在pH7. 4下羧甲基解离，处于阴离子的状态。因此，认为可在PH7. 4下与已知为粘连促进物质的碱性蛋白质趋化因子、肝素结合细胞因子等细胞因子进行离子结合，由此抑制粘连促进活性。另外，已知碱金属型羧甲基纤维素具有止血作用和细胞粘合促进作用，可用作创伤愈合止血材料(日本特许第3057446号)，若考虑因出血造成的血液贮留被认为是粘连的原因之一，则该止血作用被认为可进ー步提高防粘连效果。
实施例以下通过实施例对本发明进行具体说明，但它们并不限定本发明的范围。《实施例I》
(I)无纺布状防粘连材料的制备
将0. 17g的人造丝制无纺布(尺寸IOcmX 10cm、单位面积重量17g/m2、厚0. 08mm)放入反应容器中，添加IL的含氢氧化钠的こ醇水溶液(4. 2mol/L氢氧化钠、9. 3mol/Lこ醇)，于室温培养17小吋。进ー步添加615mL的含一氯こ酸的こ醇水溶液(4. 9mol/L ー氯こ酸、10. 3mol/Lこ醇)，于50°C培养4小吋。依次用70%甲醇水溶液、80%甲醇水溶液洗涤，然后用含盐酸的甲醇水溶液(I. 2mol/L盐酸、90%甲醇)中和至pH6. 0^8. O。
然后，依次用80%甲醇水溶液、100%甲醇洗涤后，干燥，获得片材(I)。构成该片材的CMC的大部分为Na型CMC。另外，此时醚化度为0. 83，分子量为16万Da。由获得的片材⑴切出切片(2cmX lcm)，向8支50mL塑料管中分别各放入10片。向各管中添加30mL的含盐酸的甲醇水溶液(I. 2mol/L盐酸、90%甲醇)，于室温培养0分钟(即未处理)、10分钟、20分钟、30分钟、I小时、2小时、4小时、6小时。在培养后依次用80%甲醇水溶液、100%甲醇洗涤，然后干燥，获得本发明的防粘连材料(以下称样品)。(2)基于溶解速度的评价
向装有各样品的50mL塑料管中分别添加5mL的100%こ醇。将管盖上,使液体无遗漏地覆盖管内。减压抽吸，干燥样品，用于以下评价试验。 溶解速度实验中使用的MEM培养基通过向IOOmL的培养基(GIBC0 10370-021)中添加 ImL 的 200mmol/L L-谷氨酰胺(GIBC0 25030-081)、IOmL 的胎牛血清(TRACEBIOSCIENCE 15-010-0500V)、ImL 的 5000u/mL 青霉素-5000 u g/mL 链霉素溶液(GIBC015070-063)来制备。由于在培养基中添加作为pH指示剂的酚红，所以如下所示，可根据培养基的顔色判断大概的PH
酸性(黄)く<约PH6. 8 (橙) 约pH8. 0 (红)〈〈碱性(红紫)。在实施例1(1)中于各种处理时间下实施盐酸处理，然后在实施例1(2)中向15mL取样管中各放入I片实施过こ醇消毒的各种样品。向各管中添加5mL的MEM培养基，将盖子松开，在可换气的状态下放入培养箱(37°C、5%C02)中。作为MEM培养基的颜色样本，对未投入样品者也同样进行培养。在刚添加MEM培养基后、I日后、2日后、3日后、6日后、7日后、10日后、14日后、16日后、17日后从培养箱中取出，观察样品的状态和培养基的顔色。将样品的溶解程度示出于表I中。如表I所示的样品栏中示出的时间为实施例1(1)中实施的盐酸处理的处理时间。另外，在经时观察用之外，将添加MEM培养基10日后从MEM培养基中取出，用100%甲醇洗涤后的形状分别示出于图2 (盐酸处理时间=2小吋)、图3 (盐酸处理时间=4小时)、图4 (盐酸处理时间=6小时)中。另外，作为參考，将实施在实施例1(1)中实施的盐酸处理前的片材切片的形状示出于图I中。[表 I]I终品]ゆ]擧加后 1020 3 ￡1 6 3 7 a IO 日14316 0I El
表.处理EE E E E E EEEE
10 分计BCDEEEEEEE
20 分钟BE I I E E EI*fc；E
30 分钟BC D E E E IiIiEE
1小时AA BCEEEEEE
2小时AA A A BBEEEE
4小时AA A A 4 A DDF,E 6 小时/\A A A A A ABI)E
A:未膨润 B:膨润./透明， C:部分溶解,..
D;大部分溶解 E:完全溶解ハ
如表I所示，虽然在10分钟处理样品和20分钟处理样品中至溶解为止所需要的天数的顺序相替换了，但在其它结果中，对应于盐酸处理(酸型化处理)时间，至溶解为止所需要的天数延长。另外，如图广图4所示，盐酸处理时间短者透明，大部分溶解(图2)，而随着盐酸处理时间延长，接近与实施盐酸处理前的样品(图I)同样的外观(图3、图4)。需说明的是，虽然在图2(盐酸处理时间=2小时)的结果(虽然大部分溶解但有残留物)与表I中的结果[盐酸处理时间=2小时，作为10日后的结果评价为E (完全溶解)]之间发现不一致，但认为其理由是由于经时观察用样品(表I用样品)在观察时毎次在摇晃取样管的同时进行状态观察，与之相対，图疒图4的摄影用样品静置10日。《实施例2》
(I)膜状防粘连材料的制备
将在实施例I (I)中作为中间产物获得的由Na型CMC (醚化度0.83，分子量16万Da)构成的片材(I)溶于水中，使浓度达到50mg/mL，制备Na型CMC水溶液。将其中的5mL添加于载玻片(76mmX26mm)上，于室温放置2昼夜使之干燥。将获得的膜状物质从载玻片上剥离，剪裁成切片(2cmX lcm)后，向50mL塑料管中分别各放入10片。向各管中添加30mL的含盐酸的甲醇水溶液(I. 2mol/L盐酸，90%甲醇)，于室温培养0小时(即未处理)和2小吋。在培养后依次用80%甲醇水溶液、100%甲醇洗涤，然后干燥，获得本发明的防粘连材料样品。(2)基于溶解速度的评价
基于溶解速度的评价依据实施例1(2)中记载的方法实施。另外，除在实施例2(1)中制备的膜状样品外，对在实施例1(1)中制备的无纺布状样品也同时进行评价。将结果示出于表2中 [表2]
权利要求
1.防粘连材料，其特征在于，实质上由纤维状碱金属型羧甲基纤维素构成。
2.权利要求I的防粘连材料，其中，単位面积重量为l(T300g/m2。
3.权利要求I或2的防粘连材料，其中，分子量为2万 200万道尔顿。
4.羧甲基纤维素结构体，其特征在于，实质上由羧甲基纤维素构成，处于酸型羧甲基纤维素与碱金属型羧甲基纤维素混杂的状态。
5.权利要求4的羧甲基纤维素结构体，其中，形状为纤维片、膜或海绵。
6.权利要求4的羧甲基纤维素结构体，其中，在体内的作用持续时间为5小时飞个月。
7.防粘连材料，其特征在于，含有权利要求4飞中任一项的羧甲基纤维素结构体。
8.权利要求Γ6中任一项的羧甲基纤维素结构体的制备方法，其特征在于，从外侧对由碱金属型羧甲基纤维素构成的结构体进行酸处理，在碱金属型羧甲基纤维素完全转化为酸型羧甲基纤维素前结束所述酸处理。
9.权利要求Γ6中任一项的羧甲基纤维素结构体的制备方法，其特征在于，从外侧对由酸型羧甲基纤维素构成的结构体进行碱处理，在酸型羧甲基纤维素完全转化为碱金属型羧甲基纤维素前结束所述碱处理。
10.通过调节从外侧对由碱金属型羧甲基纤维素构成的结构体进行酸处理的时间，从而控制由羧甲基纤维素构成的结构体在体内的作用持续时间的方法。
11.通过调节从外侧对由酸型羧甲基纤维素构成的结构体进行碱处理的时间，从而控制由羧甲基纤维素构成的结构体在体内的作用持续时间的方法。
全文摘要
本发明提供可提供作为医疗材料、特别是防粘连材料有用的新型羧甲基纤维素(CMC)结构体的制备方法，进而提供生物相容性、生物吸收性优异，并且可控制作用发挥时间和溶解时间的CMC结构体，或可同时发挥防粘连效果和创伤愈合效果的CMC结构体。上述结构体实质上由羧甲基纤维素构成，处于酸型羧甲基纤维素与碱金属型羧甲基纤维素混杂的状态。上述制备方法的特征在于，从外侧对由碱金属型(或酸型)羧甲基纤维素构成的结构体进行酸处理(或碱处理)，在碱金属型(或酸型)羧甲基纤维素完全转化为酸型(或碱金属型)羧甲基纤维素前结束上述酸处理(或碱处理)。
文档编号A61L31/00GK102858383SQ201080066048
公开日2013年1月2日 申请日期2010年12月9日 优先权日2010年3月31日
发明者徐吉夫, 青岛元法, 井上利树, 长谷川清孝 申请人:保木医疗股份有限公司