一种鸦胆子油栓剂的制作方法

专利名称：一种鸦胆子油栓剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药制药技术领域，具体涉及一种含有鸦胆子油的栓剂。
背景技术：
鸦胆子又名老鸦胆、苦参子，始载于清代赵学敏所著的《本草纲目拾遗》，味苦、有毒，为苦木科植物鸦胆子javanica (L. ) Merr.的干燥成熟果实。产于我国的广东、湖南、广西、福建等地，主要功能为清热、躁湿、杀虫、解毒、腐蚀赘疣。鸦胆子所含成分可分为水溶性和脂溶性(鸦胆子油)两部分。水溶性成分主要为一系列的四环三萜类化合物，有毒。鸦胆子油含有三油酸甘油酯(水解后的产物为油酸)，其他类型的结合脂肪酸以及非酯化部分(包括油酸、亚油酸、亚麻酸、硬脂酸、棕榈酸、豆蘧酸、山嵛酸、花生烯酸等)。其中，油酸、亚油酸被认为是主要有效成分。大量的临床验证发现鸦胆子油抗癌谱广，适用于肺癌、转移性脑瘤、肝癌、消化道肿瘤、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、淋巴瘤等多种恶性肿瘤。而且，鸦胆子油还可用于治疗胃炎、结肠炎、消化道溃疡、尖锐湿疣、前列腺增生、子宫内膜异位症及降血脂等非肿瘤疾病。目前使用比较普遍的鸦胆子油为石油醚提取物，也可以经过一定的精制处理(例如脱色、水洗、除杂质或者去除一些毒性成分)。鸦胆子油临床应用最广泛的剂型主要有注射液和口服液，但是多年的生产和临床实践证明这两种制剂均存在一定的缺陷。例如，鸦胆子油乳注射液的工艺不稳定，温度、乳化时间和生产设备都可对产品质量产生影响而造成乳粒不均匀；产品贮存中易出现油、水分层，破裂，转相，絮凝和败坏等现象而无法使用，而且在实际使用中受环境影响大，经常在有效期内即失效或性状不合格等。中国专利“含鸦胆子油的乳化药物组合物的制备方法”(公开号CN 101683367A)说明了市售鸦胆子油乳注射液在规定条件下贮存6个月的溶血检验不合格，临床上药物引起的溶血反应可以导致人体内血红蛋白急剧下降，轻者伴有发冷、发热、寒战、麻疹、头痛或头晕等症状；重者可出现少尿或闭尿及急性肾功能衰竭的症状，并出现蛋白尿，可以导致休克和死亡，存在着较大的安全隐患。鉴于鸦胆子油乳注射液在临床使用中出现较严重的副作用(刘乃清等，华西药学杂志，1999，14(1):39)，有人开发了鸦胆子油口服乳液。但它与注射液一样，是水包油型乳剂，属于热力学不稳定体系，稳定性也较差，有效成分在放置过程中易氧化分解，产生特异的酸败气味，其生物利用度也不高(刘晓旭等，中国药科大学学报，2009，40 (I) 37 - 40 ;张柯萍等，华西药学杂志，2005，20 (3) :199-201.)。值得注意的是，鸦胆子油性苦、寒，易伤胃肠，不宜多用久服，对于胃肠出血及肝肾病患者应禁用或慎用。而且，因鸦胆子油特有的腥臭味和油腻感，患者会产生油腻、恶心、厌食、呕吐等消化道不适反应，即使加入大量的矫味剂也不能明显改善。尤为不利的是，放化疗治疗通常都会诱发患者呕吐，而服用鸦胆子油口服制剂会进一步加重这种痛苦，使患者的治疗依从性显著降低，不利于临床治疗工作的顺利开 展。另外，目前应用鸦胆子油治疗宫颈癌时采用的是以棉球蘸乳液置子宫颈内作阴道填塞或宫颈局部注射，治疗前列腺癌时是在前列腺腺体内局部注射乳液，治疗直肠癌时是以乳液保留灌肠，但上述用药方法剂量不宜控制、药物易流失以及受器械等条件的限制，均不太方便。栓剂便于携带及长期贮存使用，可经直肠或阴道给药，不仅能避免药物对胃肠道刺激和对肝脏的损害，也避免了胃肠道消化液对药物的破坏以及肝脏的首过效应。而且，药物除了能直接作用于直肠、阴道、宫颈，经直肠淋巴系统与痔静脉作用于前列腺(江鱼，前列腺疾病.武汉湖北人民出版社，1982 :1-8 ;谢桐，前列腺外科.北京人民卫生出版社，1983 9-10.)等局部病灶，还能通过黏膜吸收进入全身发挥治疗作用，适合用于鸦胆子油。有人曾将鸦胆子油负载于甘油明胶或香果脂制成传统的普通栓剂以供局部治疗(张汝华等，沈阳药学院学报，1978，10 :7-10)，但未见后续的研究报道。而且，该种普通栓剂不能控制释药，无法充分发挥鸦胆子油的治疗作用。所以，根据体内应用特点，有必要开发鸦胆子油新的栓剂类型，以有效改善药物疗效，提高患者的顺应性。

发明内容
本发明的目的在于根据现有鸦胆子油剂型的局限性，提供一种鸦胆子油新型栓齐U，该新剂型结合了栓剂和微粒的优点，不但可以有效避免鸦胆子油对胃肠道的刺激，降低其毒副作用，发挥局部和全身作用，还能控制药物释放，延长药物作用时间，减少用药次数，并显著增强鸦胆子油的药用效果。本发明目的通过以下技术方案予以实现
本发明通过大量实验发现，可以将鸦胆子油作为主要活性成分以微粒形式负载于基质中制成栓剂，其中鸦胆子油可以为石油醚提取物，也可以经过一定的精制处理，例如脱色、水洗、除杂质或者去除一些毒性成分，含量为O. 5 50 wt%，优选为I 40 Wt%0可以理解的是，所述活性成分还包括采用现有技术，从鸦胆子中提取、精制、分离、纯化出的单一组分(或化学物质)或混合组分，例如鸦胆丁，并包括其药学上可以接受的多种形式包括其衍生物或其他各种酯类，例如乙酰鸦胆丁、鸦胆丁磷酸酯。所述的微粒包括微球、微囊、纳米球、纳米囊或脂质体，以天然、半合成或合成的高分子化合物为材料制成，均能控制释放药物，降低毒性、延长药效。其中微囊、微球是指直径大小以微米(Mffl)计的囊或球，通常其粒径在广250 Mffl，纳米球、纳米囊通常粒径在1(Γ1000rim。所述的高分子材料可为明胶，阿拉伯胶，葡聚糖，壳聚糖，海藻酸盐，淀粉如玉米淀粉、小麦淀粉、马铃薯淀粉等，蛋白类如白蛋白、玉米蛋白、鸡蛋白等，纤维素衍生物如羧甲纤维素盐、纤维醋法酯、乙基纤维素、甲基纤维素、羟丙甲纤维素、丁酸醋酸纤维素、琥珀酸醋酸纤维素等，聚酰胺，硅橡胶，聚碳酯，聚酯类如聚乳酸(PLA)、乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)，聚氰基丙烯酸烷酯，聚甲基丙烯酸烷酯，聚乙烯醇(PVA)，聚维酮(PVP)，聚合酸酐，聚氨基酸，羧甲基葡聚糖，两亲性嵌段共聚物如聚氧乙烯-氧丙烯嵌段共聚物、聚乳酸-聚乙二醇(PLA-PEG)嵌段共聚物，离子型嵌段共聚物如PEG-聚L-赖氨酸，磷脂类如卵磷脂、豆磷脂、脑磷脂、磷脂酰胆碱，胆固醇，脂肪酸甘油酯中的一种或几种混合物。因此，本领域技术人员可以将鸦胆子油制备成为任何药学上可接受的微球、微囊、纳米球、纳米囊或脂质体相等同或类似的物质，从而制备成鸦胆子油栓剂。本发明鸦胆子油栓剂中的鸦胆子油除了以微粒形式负载于基质中，还可以游离形式存在，并可根据临床需要调节二者比例，以达到不同的作用特点。 本发明鸦胆子油栓剂除了鸦胆子油外，还包含基质。
本发明所述鸦胆子油栓剂的基质可以是油脂性基质、水溶性基质或凝胶基质。作为一种优选方案，所述油脂性基质包括可可豆脂、半合成或全合成脂肪酸甘油酯(半合成椰油酯、半合成山苍子油酯、半合成棕榈油酯、硬脂酸丙二醇酯)、氢化植物油、香果脂等。所述水溶性基质包括甘油明胶、聚乙二醇、聚氧乙烯硬脂酸脂、聚山梨酯、硬脂酸聚烃氧酯类。所述凝胶基质包括普通凝胶、原位(在体)凝胶基质。原位(在体)凝胶是指以液体状态给药后，随着环境条件如温度、PH的转变，能在直肠或阴道内立即胶凝形成凝胶，包括温度敏感、PH敏感或离子敏感凝胶。鉴于治疗的特殊需要，本发明尤其优选提供原位(在体)凝胶基质来制备“液体栓剂”。这是因为该凝胶基质可加载不同性质的药物；药物和辅料通过简单混合就可使用；凝胶的流动特性能很好地适应填充直肠或阴道；凝胶与用药部位特 别是黏膜组织亲和力强、滞留时间长；以及具有良好的控制释药性能。所述凝胶基质以天然或合成的高分子化合物为材料制成，其中所述高分子材料可为卡波姆、壳聚糖、聚乙烯醇、结冷胶、海藻酸盐、黄原胶、卡拉胶、文莱胶、醋酸纤维素肽酸酯、聚乙烯缩醛二乙氨醋酸盐、纤维素类衍生物、木聚糖、壳聚糖/甘油磷酸、ΡΕ0/ΡΡ0共聚物和相关衍生物、N-异丙基丙烯酰胺共聚物(PNIPAM)及衍生物、聚乙二醇(PEG) /聚乳酸/羟基乙酸(PLGA)嵌段共聚物、聚有机磷氮烯衍生物、聚(1，2-丙烯磷酸)、聚乙二醇一聚ε-己内酯多嵌段共聚物中的任意一种或几种的混合物。本发明的鸦胆子油栓剂中，还可根据需要加入一些添加剂吸收促进剂、阻滞剂、硬化剂、增稠剂、乳化剂、着色剂、抑菌剂、抗氧剂。其中所述促吸收剂可以促进药物透过黏膜进入体循环，可以是天然表面活性剂、合成表面活性剂、氮酮、环糊精类、聚乙烯吡咯烷酮、薄荷、冰片或麝香中的一种或几种的混合物。可以理解的是，本发明还可任选加入不改变鸦胆子油化学性质的分散剂、稀释剂、溶剂等辅料，以改善在制备或贮存过程中可能出现的分层、聚集或迁移等情况，包括甘油、丙二醇、维生素Ε、棕榈油、蜂蜡、磷脂、可药用的动物或植物油、精制油以及脂肪油的合成代用品等。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果
本发明将鸦胆子油制成的栓剂可经直肠或阴道用药，不需口服，完全避开了鸦胆子油的不良腥臭味，即使在无水的情况下也可以容易地、没有任何不适地给药，能有效避免药物对胃肠道的刺激，降低毒副作用，显著提高了病人的顺应性，还能直接接触局部(直肠、阴道或宫颈等)病灶，达到局部高浓度、提高疗效，与目前市售产品相比有显著的治疗优点；与目前鸦胆子油治疗阴道、宫颈、直肠、前列腺等局部疾病时采用乳液经灌注或局部注射相比，本发明提供的鸦胆子油栓剂不易流失、更加稳定、更易控制剂量，并且简便易行，不受器械等条件的限制，可作为现有技术的替代，值得推广；而且，与传统的普通栓剂相比，本发明提供的鸦胆子油栓剂能控制释放药物，单剂量给药后可获得较稳定的血药浓度，生物利用度高，因而能更加充分发挥鸦胆子油的治疗作用，尤其适合不能或不愿口服或注射用药的患者。


图I为鸦胆子油微囊的显微镜图(X400)；图2 和10、11为气相色谱法的方法专属性图谱；其中，图2为溶剂正己烷的气相色谱图，图3为油酸甲酯对照品的气相色谱图，图4为亚油酸甲酯对照品的气相色谱图，图5为油酸甲酯对照品和亚油酸甲酯对照品的气相色谱图，图6为空白微囊的气相色谱图，图7为鸦胆子油微囊的气相色谱图，图10为空白血浆的气相色谱图，图11为空白血浆+油酸甲酯对照品和亚油酸甲酯对照品的气相色谱图；图中的I为油酸甲酷，2为亚油酸甲酯；
图8为鸦胆子油栓剂的的溶蚀曲线(η=4)
图9为鸦胆子油栓剂的释药曲线(η=4)；
图12为鸦胆子油普通栓剂经直肠给药在大鼠血浆的药-时曲线(η=4)，图13为鸦胆子油栓剂经直肠给药在大鼠血浆的药-时曲线(η=4)。
具体实施例方式以下结合实施例来进ー步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。实施例I鸦胆子油以微囊形式负载于原位(在体)凝胶基质 一、鸦胆子油微囊的制备
取阿拉伯胶2. 5 g,加蒸懼水6 mL研磨均勻，滴加鸦胆子油I g,研磨使其成初乳,加蒸馏水60 mL，稀释，备用(a);取明胶2. 5g，加蒸馏水60 mL，搅拌均匀，备用(b)。将上述a、b混合，50°C下搅拌，加10%醋酸调节pH值至3-4 (C)。将蒸馏水100 mL倾入C，冰浴搅拌至10°C，加36%甲醛6 mL,搅拌15 min，加20%Na0H调节pH值至8-9，搅拌lh，静置，过滤，水洗至无醛味，干燥得微囊。所得鸦胆子油微囊为球形(见图1)，粒径大小为3-15 Mm，稳定性良好。ニ、气相色谱法测定鸦胆子油微囊中油酸、亚油酸的含量
目前公认，鸦胆子油的主要有效成分为油酸和亚油酸，而且鸦胆子油及其制剂一般以油酸和亚油酸作为评价指标。由于气相色谱法具有分析周期短、操作简单等特点，因此，本实验采用气相色谱法对鸦胆子油微囊中油酸和亚油酸的含量进行測定。实验方法 (I)色谱条件
色谱柱为中国科学院兰州化学物理研究所中等极性0V-17 (苯基甲基硅酮)(30m*0. 32mm*0. 50 μ m)的毛细管柱，进样ロ温度230°C，柱温220°C ;氢火焰离子化检测器温度240°C ;载气为高纯氮气；分流比50 1 ;进样量2 μ 。(2)样品的处理
精密称取干燥微囊，约O. 5g，加入O. 04g胰酶于碘量瓶中，加IOmL蒸馏水，于37° C水浴3h，往碘量瓶中加入O. 5 moL ·じ1氢氧化钾溶液25mL，在85°C水浴30 min,加入O. 5mL，然后加入30 mL石油醚萃取，取石油醚层于试管中，80°C水浴挥干。往试管里加入加入O. 5 moL ·じ1氢氧化钾-甲醇溶液2mL,水浴60°C 15 20min,加入三氟化硼-こ醚lmL，水浴60°C酷化2min，取出。冷却后加入正己烷I. OmL萃取，加入适量饱和氯化钠溶液，涡旋振荡，静置分层，所得上清液经O. 22 μ m有机滤膜过滤后进样測定。实验结果 (I)方法专属性记录溶剂正己烷、単独及混合对照品、空白微囊、鸦胆子油微囊的色谱图。结果发现，在本色谱条件下，油酸甲酯和亚油酸甲酯达到基线分离，而且溶剂和空白微囊对測定无干扰(图2 7)。
(2)标准曲线
精密吸取油酸甲酷、亚油酸甲酯对照品溶液适量于容量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，配制成一系列对照品混合溶液。按上述色谱条件进样2PL，以油酸甲酯对照品浓度为横坐标，油酸甲酯峰面积为纵坐标，进行回归，结果油酸甲酯在5. 94 380 μ g · mL-1范围内，线性方程Y=O. 9904X-0. 5012，相关系数r=0. 9999，表明线性关系良好；同样以亚油酸甲酯对照品浓度为横坐标，亚油酸甲酯峰面积为纵坐标，进行线性回归，结果亚油酸甲酯在5. 37 340 μ g ·ι じ1范围内，线性方程Y=O. 8375Χ-0. 5485，相关系数r=0. 9999，表明亚油酸甲酯线性关系良好。(3)回收率
5.0148g的空白微囊，加入O. 04527g的胰酶于碘量瓶中，按照2. 3项下的方法破囊然后酷化。将处理后的上清液分成5份，分别置于5mL容量瓶中，精密移取O. 5mL标准曲线项下浓度为380 μ g · mじ1的油酸甲酯和浓度为340 μ g/mL的亚油酸甲酯标准溶液到相应的容量瓶中，用正己烷稀释到刻度。精密吸取上述溶液2 μ L，按2. I项下方法測定，计算得油酸甲酯和亚油酸甲酯的平均回收率分别为97. 8% (RSD=L 5%)和98. 0% (RSD=L 8%)。(4)精密度
取浓度为135 μ g · mじ1、38 μ g · mじ1、9. 5 μ g · mじ1样品各ー份，进2μ 进行色谱分析，日内连续进样6次，计算日内精密度；连续进样6天，计算日间精密度。油酸甲酯高、中、低浓度样品日内峰面积的RSD分别为I. 7%、I. 2%、1.5%，其日间峰面积的RSD分别为2. 3%、I. 5%、1. 8% ;亚油酸甲酯高、中、低浓度样品日内峰面积的RSD分别为I. 8%、2. 6%、2. 3%，日间峰面积的RSD分别2. 1%、2· 4%、3· 0%。(5)稳定性试验
取制备的微囊，经破囊处理并甲酯化后所得的供试品，分别放室温和冰箱4° C保存，并将在室温和4° C保存的样品分别于0、2、4、8、12、24、48、72、96h进行測定。结果油酸甲酷在室温和4° C的条件下，峰面积的RSD分别为2. 6%、2. 3% ;亚油酸甲酯在室温和4° C的条件下，峰面积的RSD分别为2. 8%ヽ2. 2%，表明油酸甲酯和亚油酸甲酯在上述两种条件下稳定性良好。(6)重复性试验
分别精密称取干燥微囊5份，每份约O. 5g，按照2. 3项下制备样品溶液，取2 μ L进行气相色谱測定。结果油酸甲酯含量的RSD为I. 2%，亚油酸甲酯含量的RSD为O. 9%，表明该方法的重复性良好。(7)鸦胆子油微囊载药量的測定
分别精密称取3个批次(1#、2#、3#)的鸦胆子油微囊，按上述方法处理，进行分析，结果见表I。而所用鸦胆子油中油酸和亚油酸的含量分别为156. 7 mg/g、139. 6 mg/g。因此,若以鸦胆子油计，3批鸦胆子油微囊的载药量分别为49. 4 %、49.8 %、54. 3 %。表I鸦胆子油微囊中油酸和亚油酸的含量
权利要求
1.一种鸦胆子油栓剂，其特征在于所述栓剂的活性成分鸦胆子油以微粒形式负载于基质中。
2.根据权利要求I所述的鸦胆子油栓剂，其特征在于所述鸦胆子油的含量为0.5^50Wt%。
3.根据权利要求2所述的鸦胆子油栓剂，其特征在于所述鸦胆子油的含量为广40Wt%。
4.根据权利要求I所述的鸦胆子油栓剂，其特征在于所述微粒为微球、微囊、纳米球、纳米囊或脂质体。
5.根据权利要求I所述的鸦胆子油栓剂，其特征在于所述基质为油脂性基质、水溶性基质或凝I父基质。
6.根据权利要求I或5所述的鸦胆子油栓剂，其特征在于所述油脂性基质为可可豆脂、半合成脂肪酸甘油酯、全合成脂肪酸甘油酯、氢化植物油或香果脂；所述水溶性基质为甘油明胶、聚乙二醇、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚山梨酯或硬脂酸聚烃氧酯类；所述凝胶基质为普通凝胶或原位(在体)凝胶基质。
7.根据权利要求6所述的鸦胆子油栓剂，其特征在于所述原位(在体)凝胶为温度敏感凝胶、PH敏感凝胶或离子敏感凝胶。
全文摘要
本发明公开了一种鸦胆子油栓剂。本发明所述鸦胆子油栓剂的活性成分鸦胆子油以微粒形式负载于基质中。本发明所述鸦胆子油栓剂兼具栓剂和微粒的优点，不仅可经直肠或阴道给药发挥局部和全身作用，有效避免鸦胆子油的不良反应，而且可以控制药物释放速度，充分发挥药物疗效，显著提高患者的顺应性，与现在市售的鸦胆子油产品及传统的普通鸦胆子油栓剂相比具有显著的治疗优越性。
文档编号A61P15/00GK102641310SQ201110039330
公开日2012年8月22日 申请日期2011年2月17日 优先权日2011年2月17日
发明者温露, 陈钢 申请人:广东药学院