组合的制作方法与工艺

组合发明领域本发明涉及一种治疗哺乳动物的癌症的方法和在这些治疗中有用的组合。具体地，该方法涉及新的组合，其包含蛋白酶体抑制化合物和Akt抑制剂：N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐，和任选的其它抗肿瘤药物；涉及包含该组合的药物组合物；以及涉及一种使用这些组合治疗癌症的方法。发明背景通常，癌症是由于控制细胞分裂、分化和凋亡性细胞死亡的正常过程失调引起的。凋亡(程序性细胞死亡)在胚胎发育和多种疾病(如退行性神经病变、心血管疾病和癌症)的发病中起着重要的作用。一种涉及凋亡的激酶调节的最常研究的通路是从细胞表面的生长因子受体到细胞核的细胞信号传导(CrewsandErikson,Cell,74:215-17,1993)。凋亡(程序性细胞死亡)在胚胎发育和多种疾病(如退行性神经病变、心血管疾病和癌症)的发病中起着重要的作用。近期的研究已经鉴定了参与程序性细胞死亡的调节或执行的多种促凋亡基因和抗凋亡基因产物。抗凋亡基因(如Bcl2或Bcl-xL)的表达抑制多种刺激诱导的凋亡性细胞死亡。另一方面，促凋亡基因(如Bax或Bad)的表达导致程序性细胞死亡(Adams等人，Science,281:1322-1326(1998))。程序性细胞死亡的执行是由半胱天冬酶-1相关的蛋白酶(包括半胱天冬酶-3、半胱天冬酶-7、半胱天冬酶-8和半胱天冬酶-9等)介导的(Thornberry等人，Science,281:1312-1316(1998))。磷脂酰肌醇3’-OH激酶(PI3K)/Akt/PKB通路在调节细胞生存/细胞死亡中显得很重要(Kulik等人，Mol.Cell.Biol.17:1595-1606(1997)；Franke等人，Cell,88:435-437(1997)；Kauffmann-Zeh等人，Nature385:544-548(1997)；HemmingsScience,275:628-630(1997)；Dudek等人，Science,275:661-665(1997))。存活因子(如血小板衍生生长因子(PDGF)、神经生长因子(NGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1))通过诱导PI3K的活性促进细胞在各种条件下生存(Kulik等人，1997,Hemmings1997)。激活的PI3K导致磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸酯(Ptdlns(3,4,5)-P3)的生成，其又结合并促进含有普列克底物蛋白同源(PH)域的丝氨酸/苏氨酸激酶Akt的激活(Franke等人，Cell,81:727-736(1995)；HemmingsScience,277:534(1997)；Downward,Curr.Opin.CellBiol.10:262-267(1998),Alessi等人，EMBOJ.15:6541-6551(1996))。PI3K或显性失活的Akt/PKB突变体的特异性抑制剂破坏了这些生长因子或细胞因子的促存活活性。之前曾公开过PI3K的抑制剂(LY294002或渥曼青霉素)通过上游激酶阻断Akt/PKB的激活。此外，组成性活化的PI3K或Akt/PKB突变体的引入在细胞通常进行凋亡性细胞死亡的条件下促进细胞存活(Kulik等人，1997，Dudek等人，1997)。人类肿瘤的Akt水平分析显示Akt2在大量的卵巢癌(J.Q.Cheung等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89:9267-9271(1992))和胰腺癌(J.Q.Cheung等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.93:3636-3641(1996))中过表达。类似地，发现Akt3在乳腺癌和前列腺癌细胞系中过表达(Nakatani等人，J.Biol.Chem.274:21528-21532(1999))。已证明Akt-2在12％的卵巢癌中过表达，且Akt的扩增在50％的未分化肿瘤中尤其频繁，意味着Akt可能与肿瘤的侵袭性有关(Bellacosa等人，Int.J.Cancer,64,pp.280-285,1995)。乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌中已报道Akt1激酶活性的升高(Sun等人，Am.J.Pathol.159:431-7(2001))。肿瘤抑制物PTEN(一种特异性除去Ptdlns(3,4,5)-P3的3’磷酸酯的蛋白和脂质磷酸酶)是PI3K/Akt通路的负调节物(Li等人，Science275:1943-1947(1997),Stambolic等人，Cell95:29-39(1998),Sun等人，Proc.Nati.Acad.Sci.U.S.A.96:6199-6204(1999))。PTEN的胚系突变是造成人类癌症综合征(如Cowden病)的原因(Liaw等人，NatureGenetics16:64-67(1997))。PTEN在大部分人类肿瘤中缺失，且没有功能性PTEN的肿瘤细胞系显示激活的Akt的水平升高(Li等人，supra,Guldberg等人，CancerResearch57:3660-3663(1997),Risinger等人，CancerResearch57:4736-4738(1997))。这些观测证明PI3K/Akt通路在肿瘤发生和/或癌症的细胞存活或凋亡的调节中起着重要作用。蛋白酶体抑制剂是阻断蛋白酶体作用的药物，且蛋白酶体是分解蛋白(如P53蛋白)的细胞复合体(cellularcomplexes)。若干种蛋白酶体抑制剂在售或用于癌症治疗的研究中。因此，提供一种更有效和/或更强的治疗罹患癌症的个体的新疗法是有用的。发明概述本发明的一个实施方案提供组合，其包含：(i)蛋白酶体抑制化合物；(ii)结构(II)的化合物：或其可药用盐；和(iii)任选的其它抗肿瘤药物。本发明的一个实施方案提供组合，其包含：(i)蛋白酶体抑制化合物；和(ii)结构(II)的化合物：或其可药用盐。本发明的一个实施方案提供组合，其包含：(i)结构(I)的化合物：或其可药用盐；(ii)结构(II)的化合物：或其可药用盐；和(iii)任选的其它抗肿瘤药物。本发明的一个实施方案提供组合，其包含：(i)结构(I)的化合物：或其可药用盐；(ii)结构(II)的化合物：或其可药用盐。本发明的一个实施方案提供一种在有需要的人中治疗癌症的方法，其包括体内给予该人治疗有效量的蛋白酶体抑制化合物和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为盐酸盐)，和任选的其它抗肿瘤药物的组合。本发明的一个实施方案提供一种在有需要的人中治疗癌症的方法，其包括体内给予该人治疗有效量的蛋白酶体抑制化合物和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为盐酸盐)的组合，其中该组合在规定期限内给药，和其中该组合给药达一段持续时间。本发明的一个实施方案提供一种在有需要的人中治疗癌症的方法，其包括体内给予该人治疗有效量的蛋白酶体抑制化合物和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为盐酸盐)的组合，其中该组合的化合物相继给药。附图说明图1表示在多发性骨髓瘤细胞系中硼替佐米(bortezomib)和化合物C的组合。图2表示在NCI-H929多发性骨髓瘤细胞异种移植物中硼替佐米和化合物C的组合。图3表示在RPMI-8226多发性骨髓瘤细胞异种移植物中硼替佐米和化合物C的组合。发明详述本发明涉及表现出抗增殖活性的组合。适当地，该方法涉及治疗癌症的方法，其通过共同给药蛋白酶体抑制化合物(适当地为硼替佐米()(下文称为化合物A))或其可药用盐，该化合物通过结构(I)表示：和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为盐酸盐)(下文称为化合物B或其可药用盐，适当地为盐酸盐)，该化合物通过结构(II)表示：化合物A市售用于治疗癌症。化合物A已知为通用名硼替佐米和商品名在国际申请日为2008年2月7日的国际申请PCT/US2008/053269，即国际公布日为2008年8月14日的国际公开WO2008/098104中，公开并要求保护化合物B及其可药用盐，它们用作Akt活性的抑制剂，尤其用于治疗癌症，该申请的全部内容引入本文作为参考，其中化合物B为实施例96的化合物。化合物B可根据国际申请PCT/US2008/053269中的描述制备。适当地，化合物B为盐酸盐形式。本领域技术人员可根据2010年1月28日提交、2010年8月5日公开的美国专利申请公开US2010/0197754A1中的描述制备其盐形式。本文所用的术语“化合物C“是指N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺盐酸盐。给药治疗有效量的本发明的组合比给药单独的组分化合物是有优势的，在于与单独给药治疗有效量的组分化合物相比，该组合提供一种或多种以下改良的特性：i)比最具活性的单一药物更强的抗癌效果，ii)协同或高度协同的抗癌活性，iii)提供增强的抗癌活性同时减少的副作用的给药方案，iv)减少毒性作用，v)增加治疗窗，或vi)增加一种或两种组分化合物的生物利用度。本发明的化合物可含有一个或多个手性原子，或可能以两种对映异构体存在。相应地，本发明的化合物包括对应异构体的混合物和纯化的对映异构体或对映体富集的混合物。应当理解所有互变异构体和互变异构体混合物也包括在蛋白酶体抑制化合物(适当地为化合物A)及其可药用盐、化合物B及其可药用盐以及任选的其它抗肿瘤药物的范围内。本发明的化合物可能形成溶剂合物，其可被理解为一种由溶质(在本发明中，化合物A或其盐和/或化合物B或其盐以及任选的其它抗肿瘤药物)和溶剂形成的可变化学计量的复合物。用于本发明目的的这些溶剂不可妨碍溶质的生物学活性。合适的溶剂的实例包括但不限于水、甲醇、乙醇和乙酸。适当地，所用溶剂是可药用溶剂。适当地，所用溶剂是水。本发明化合物的可药用盐可由本领域技术人员容易地制得。本文也包括一种使用本发明的组合治疗癌症的方法，其中化合物A或其可药用盐，和/或化合物B或其可药用盐或任选的其它抗肿瘤药物以前药形式给药。本发明的化合物的可药用前药可由本领域技术人员容易地制得。当涉及给药方案时，术语“天”、“每天”等指的是始于午夜终于下个午夜的一个日历天。本文所用的术语“治疗”及其类似措辞是指治疗疗法。参考具体疾病，治疗是指：(1)改善或预防疾病的一种或多种生物学表现，(2)干扰(a)导致或造成该疾病的生物级联中的一个或多个点(b)该疾病的一种或多种生物学表现，(3)减轻与该疾病或其治疗相关的一种或多种症状、作用或副作用，或(4)减慢该疾病或该疾病的一种或多种生物学表现的进展。本文也包括预防疗法。本领域技术人员应当理解“预防”并不是绝对术语。在医学中，“预防”被理解为指预防性给予药物以实质性减少疾病的可能性或严重程度或其生物学表现，或延缓该疾病或其生物学表现发生的时间。例如，当患者认为处于形成癌症的高风险时(如当患者有很强的癌症家族史或患者曾暴露于致癌物时)预防性疗法是合适的，。本文所用的术语“有效量”是指例如研究者或临床医生所需的能够引出组织、系统、动物或人的生物学或医学反应的药物或药剂或组合的量。此外，术语“治疗有效量”是指与相应的未接受此剂量的患者相比，能够引起改善治疗、治愈、预防或减轻疾病、障碍或副作用，或降低疾病或障碍的进展率的任何剂量。该术语的范围还包括能有效地增强正常生理功能的剂量。除非另外定义，否则术语“组合”及其类似措辞是指同时给药或任何方式的单独相继给药治疗有效量的化合物A或其可药用盐，和化合物B或其可药用盐以及任选的其它抗肿瘤药物。优选地，如果给药不是同时的，化合物应在彼此接近的时间给药。此外，化合物是否以相同的剂型给药并不重要，例如，一种化合物可能局部用药，而另一种化合物可口服给药。适当地，两种化合物均口服给药。适当地，化合物A静脉给药而化合物B口服给药。本文所用的术语“组合试剂盒(combinationkit)”是指用于给药根据本发明的化合物A或其可药用盐，和化合物B或其可药用盐，以及任选的其它抗肿瘤药物的一种或多种药物组合物。当两种化合物同时给药时，组合试剂盒可在单个药物组合物(如片剂)或分开的药物组合物中包含化合物A或其可药用盐，和化合物B或其可药用盐。当化合物不同时给药时，组合试剂盒将在分开的药物组合物中包含化合物A或其可药用盐，和化合物B或其可药用盐，以及任选的其它抗肿瘤药物。组合试剂盒可在单一包装中的分开的药物组合物或分开包装中的分开的药物组合物中包含化合物A或其可药用盐，和化合物B或其可药用盐。一方面，提供了组合试剂盒，其包含以下组分：化合物A，或其可药用盐，以及可药用载体，和化合物B，或其可药用盐，以及可药用载体。本发明的一个实施方案中，该组合试剂盒包含以下组分：化合物A，或其可药用盐，以及可药用载体；和化合物B，或其可药用盐，以及可药用载体，其中该组分以适合连续、单独和/或同时给药的形式提供。在一个实施方案中，该组合试剂盒包含：第一个容器，其包含化合物A或其可药用盐，以及可药用载体；和第二个容器，其包含化合物B或其可药用盐，以及可药用载体，和用来容纳所述第一个和第二个容器的容器装置。“组合试剂盒”也可以提供说明书，如用量和用法说明书。这些用量和用法说明书可以是提供给医生的那种，例如药物产品标签，或者它们可以是由医生提供的那种，例如给患者的说明书。本文所用的术语“化合物A2”是指---化合物A或其可药用盐或本文所定义的其它蛋白酶体抑制剂，适当地为化合物A---。本文所用的术语“化合物B2”是指---化合物B或其可药用盐---。在本发明的一个实施方案中，化合物B由8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1,2,4]三唑并[3,4-f]-1,6-萘啶-3(2H)-酮替代，其具有如下结构式(以氯盐描述)。在本发明的一个实施方案中，化合物B2由8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1,2,4]三唑并[3,4-f]-1,6-萘啶-3(2H)-酮或其可药用盐替代。2009年8月18授权的美国专利7,576,209公开并要求保护化合物8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1,2,4]三唑并[3,4-f]-1,6-萘啶-3(2H)-酮及其可药用盐，其用作Akt活性的抑制剂，尤其用于肿瘤治疗中。8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基[1,2,4]三唑并[3,4-f]-1,6-萘啶-3(2H)-酮可根据美国专利7,576,209的描述制备。除非另外定义，否则本文所用的术语“蛋白酶体抑制化合物”、“蛋白酶体抑制剂”及其类似措辞是指阻断蛋白酶体作用的一类化合物，其中蛋白酶体是分解蛋白(如P53蛋白)的细胞复合体。若干种蛋白酶体抑制剂在售或者用于癌症治疗的研究中。本文可用的合适的蛋白酶体抑制剂包括：1.硼替佐米(),包括其可药用盐。AdamsJ,KauffmanM(2004),CancerInvest22(2):304-11。硼替佐米具有以下化学结构和名称：[(1R)-3-甲基-1-({(2S)-3-苯基-2-[(吡嗪-2-基羰基)氨基]丙酰基}氨基)丁基]硼酸。2.双硫仑，包括其可药用盐。Bouma等人，(1998).J.Antimicrob.Chemother.42(6):817-20。双硫仑具有以下化学结构和名称：1,1',1”,1”'-[二硫烷二基双(硫代甲酰基次氮基)]四乙烷。3.表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)，包括其可药用盐。Williamson等人，(2006年12月),TheJournalofAllergyandClinicalImmunology118(6):1369-74。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有以下化学结构和名称：[(2R,3R)-5,7-二羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)色满-3-基]3,4,5-三羟基苯甲酸酯。4.SalinosporamideA，包括其可药用盐。Feling等人，(2003),Angew.Chem.Int.Ed.Engl.42(3):355-7。SalinosporamideA具有以下化学结构和名称：(4R,5S)-4-(2-氯乙基)-1-((1S)-环己-2-烯基(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环3.2.0庚烷-3,7-二酮。5.卡非佐米(Carfilzomib)，包括其可药用盐。KuhnDJ等人，Blood,2007,110:3281-3290。卡非佐米具有以下化学结构和名称：(aS)-a-[(4-吗啉基乙酰基)氨基]苯丁酰基-L-亮氨酰基-N-[(1S)-3-甲基-1-[[(2R)-2-甲基氧杂环丙烷基]羰基]丁基]-L-苯丙氨酰胺。除非另外定义，否则本文所用的术语“其它抗肿瘤药物”及其类似措辞是指其它已知的治疗癌症的化合物或与一种或多种已知治疗癌症的化合物合并给药时有用的化合物。适当地，本文所用的其它抗肿瘤药物包括：吉西他滨、卡铂、顺铂、阿糖胞苷、沙利度胺、(来那度胺)、地西他滨、美法仑(Alkeran)、环磷酰胺(Cytoxan)、长春新碱(Oncovin)、多柔吡星(Adriamycin)、多柔吡星脂质体(Doxil)、泼尼松、地塞米松(Decadron)和艾曲波帕()。适当地，该其它抗肿瘤药物是对治疗多发性骨髓瘤有用的药物。本文所用的术语“规定期限(specifiedperiod)”是指化合物A2和化合物B2中的一种化合物与化合物A2和化合物B2中的另一种化合物之间的给药时间间隔。除非另外定义，否则规定期限可包括同时给药。当本发明的两种化合物每天给药一次时，规定期限指的是化合物A2和化合物B2在单天内的给药时间。当本发明的一种或全部两种化合物每天给药多于一次时，规定期限的计算基于具体天的每种化合物的第一次给药。在计算规定期限时，在具体天内本发明的化合物的第一次给药后的全部给药不予考虑。适当地，如果化合物给药在“规定期限”内但并不同时给药，则两种化合物在彼此给药的约24小时内给药—这种情况下规定期限是约24小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约12小时内给药—这种情况下规定期限是约12小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约11小时内给药—这种情况下规定期限是约11小时；两种化合物在彼此给药的约10小时内给药—这种情况下规定期限是约10小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约9小时内给药—这种情况下规定期限是约9小时；两种化合物在彼此给药的约8小时内给药—这种情况下规定期限是约8小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约7小时内给药—这种情况下规定期限是约7小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约6小时内给药—这种情况下规定期限是约6小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约5小时内给药—这种情况下规定期限是约5小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约4小时内给药—这种情况下规定期限是约4小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约3小时内给药—这种情况下规定期限是约3小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约2小时内给药—这种情况下规定期限是约2小时；适当地，两种化合物在彼此给药的约1小时内给药—这种情况下规定期限是约1小时。如本文所用，化合物A2和化合物B2的给药时间相距少于约45分钟被认为是同时给药。适当地，当本发明的组合在“规定期限”内给药时，所述化合物将在一段“持续时间”共同给药。本文所用的“持续时间”及其类似措辞是指在“规定期限”内给药本发明的两种化合物达指定数目的连续天数，任选地接下来仅给药一种组分化合物达一定数目的连续天数。除非另外定义，否则“持续时间”在本文所描述的所有给药方案中，无需从治疗起点开始到治疗终点结束，只需要两种化合物给药的连续天数和任选的仅一种组分化合物给药的连续天数，或指定的给药方案发生于疗程中的某一时间点。关于“规定期限”给药：适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少1天—这种情况下持续时间将是至少1天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少2个连续天—这种情况下持续时间将是至少2个连续天；在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少3个连续天—这种情况下持续时间将是至少3天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少5个连续天—这种情况下持续时间将是至少5天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少7个连续天—这种情况下持续时间将是至少7天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少14个连续天—这种情况下持续时间将是至少14天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少30连续天—这种情况下持续时间将是至少30天。当在疗程中，在规定期限内给药两种化合物超过30天，则治疗被认为是慢性治疗并将持续直至变更事件(如癌症状态的重新评估或患者病情的改变)发生，以保证对方案进行改进。进一步关于“规定期限”给药：适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少1天，然后单独给药化合物A2至少1天—这种情况下持续时间为至少2天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少1天，然后单独给药化合物A2至少2天—这种情况下持续时间为至少3天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少1天，然后单独给药化合物A2至少3天—这种情况下持续时间为至少4天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少1天，然后单独给药化合物A2至少4天—这种情况下持续时间为至少5天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少1天，然后单独给药化合物A2至少5天—这种情况下持续时间为至少6天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少1天，然后单独给药化合物A2至少6天—这种情况下持续时间为至少7天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少1天，然后单独给药化合物A2至少7天—这种情况下持续时间为至少8天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少2个连续天，然后单独给药化合物A2至少1天—这种情况下持续时间为至少3天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少2个连续天，然后单独给药化合物A2至少2个连续天—这种情况下持续时间为至少4天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少2个连续天，然后单独给药化合物A2至少3个连续天—这种情况下持续时间为至少5天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少2个连续天，然后单独给药化合物A2至少4个连续天—这种情况下持续时间为至少6天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少2个连续天，然后单独给药化合物A2至少5个连续天—这种情况下持续时间为至少7天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少2个连续天，然后单独给药化合物A2至少6个连续天—这种情况下持续时间为至少8天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少2个连续天，然后单独给药化合物A2至少7个连续天—这种情况下持续时间为至少9天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少3个连续天，然后单独给药化合物A2至少1天—这种情况下持续时间为至少4天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少3个连续天，然后单独给药化合物A2至少2个连续天—这种情况下持续时间为至少5天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少3个连续天，然后单独给药化合物A2至少3个连续天—这种情况下持续时间为至少6天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少3个连续天，然后单独给药化合物A2至少4个连续天—这种情况下持续时间为至少7天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少3个连续天，然后单独给药化合物A2至少5个连续天—这种情况下持续时间为至少8天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少3个连续天，然后单独给药化合物A2至少6个连续天—这种情况下持续时间为至少9天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少3个连续天，然后单独给药化合物A2至少7个连续天—这种情况下持续时间为至少10天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少4个连续天，然后单独给药化合物A2至少1天—这种情况下持续时间为至少5天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少4个连续天，然后单独给药化合物A2至少2个连续天—这种情况下持续时间为至少6天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少4个连续天，然后单独给药化合物A2至少3个连续天—这种情况下持续时间为至少7天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少4个连续天，然后单独给药化合物A2至少4个连续天—这种情况下持续时间为至少8天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少4个连续天，然后单独给药化合物A2至少7个连续天—这种情况下持续时间为至少11个连续天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少5个连续天，然后单独给药化合物A2至少1天—这种情况下持续时间为至少6个连续天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少5个连续天，然后单独给药化合物A2至少2个连续天—这种情况下持续时间为至少7个连续天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少5个连续天，然后单独给药化合物A2至少3个连续天—这种情况下持续时间为至少8个连续天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少5个连续天，然后单独给药化合物A2至少4个连续天—这种情况下持续时间为至少9个连续天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少5个连续天，然后单独给药化合物A2至少5个连续天—这种情况下持续时间为至少10个连续天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少7个连续天，然后单独给药化合物A2至少2个连续天—这种情况下持续时间为至少9个连续天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少14个连续天，然后单独给药化合物A2至少7个连续天—这种情况下持续时间为至少21个连续天；适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物至少30个连续天，然后单独给药化合物A2至少7个连续天—这种情况下持续时间为至少37个连续天。适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物1至3个连续天，然后单独给药化合物A23至7个连续天。适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物3至6个连续天，然后单独给药化合物A21至4个连续天。适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物5个连续天，然后单独给药化合物A22个连续天。适当地，在疗程中，在规定期限内给药两种化合物2个连续天，然后单独给药化合物A23至7个连续天。适当地，在疗程中，在7天周期的1至3天中在规定期限内给药两种化合物，而在7天周期的其它天中单独给药化合物A2。适当地，在疗程中，在7天周期的2天中在规定期限内给药两种化合物，而在7天周期的其它天中单独给药化合物A2。适当地，在疗程中，在7天周期的2天中在规定期限内给药两种化合物，而在7天周期的其它天中单独给药化合物B2。适当地，在疗程中，在7天周期的1天中在规定期限内给药两种化合物，而在7天期限的其它天中单独给药化合物B2。进一步关于“规定期限”给药—当化合物A2和化合物B2在规定期限内给药时，任选的其它抗肿瘤药物可在疗程中或在本文所述的持续时间中的任何时间给药。适当地，如果化合物不在“规定期限”过程中给药，则进行相继给药。本文所用的术语“相继给药”及其类似措辞是指化合物A2和化合物B2中的一种给药一个或多个连续天，且化合物A2和化合物B2中的另一种后续给药一个或多个连续天。本文也包括相继给药化合物A2和B2中的一种和另一种之间使用的休药期。本文所用的休药期是相继给药化合物A2和B2中的一种后，且在给药化合物A2和B2中的另一种前的时间段，此时化合物A2和化合物B2均不给药。适当地，休药期为选自以下的时间：1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天和14天。关于相继给药：适当地，给药化合物A2和化合物B2中的一种1至30个连续天，然后为任选的休药期，再给药化合物A2和化合物B2中的另一种1至30个连续天。适当地，给药化合物A2和化合物B2中的一种1至21个连续天，然后为任选的休药期，再给药化合物A2和化合物B2中的另一种1至21个连续天。适当地，给药化合物A2和化合物B2中的一种1至14个连续天，然后1至14天的休药期，再给药化合物A2和化合物B2中的另一种1至14个连续天。适当地，给药化合物A2和化合物B2中的一种2至7个连续天，然后为2至10天的休药期，再给药化合物A2和化合物B2中的另一种2至7个连续天。适当地，在顺序中首先给药化合物B2，然后任选的休药期，再给药化合物A2。适当地，给药化合物B21至21个连续天，然后任选的休药期，再给药化合物A21至21个连续天。适当地，给药化合物B23至21个连续天，然后1-14天的休药期，再给药化合物A23至21个连续天。适当地，给药化合物B23至21个连续天，然后3至14天的休药期，再给药化合物A23至21个连续天。适当地，给药化合物B221个连续天，然后任选的休药期，再给药化合物A214个连续天。适当地，给药化合物B214个连续天，然后1至14天的休药期，再给药化合物A214个连续天。适当地，给药化合物B27个连续天，然后3至10天的休药期，再给药化合物A27个连续天。适当地，给药化合物B23个连续天，然后3至14天的休药期，再给药化合物A27个连续天。适当地，给药化合物B23个连续天，然后3至10天的休药期，再给药化合物A23个连续天。适当地，在顺序中首先给药化合物A2，然后任选的休药期，再给药化合物B2。适当地，给药化合物A21至21个连续天，然后任选的休药期，再给药化合物B21至21个连续天。适当地，给药化合物A23至21个连续天，然后1至14天的休药期，再给药化合物B23至21个连续天。适当地，给药化合物A23至21个连续天，然后3至14天的休药期，再给药化合物B23至21个连续天。适当地，给药化合物A221个连续天，然后任选的休药期，再给药化合物B214个连续天。适当地，给药化合物A214个连续天，然后1至14天的休药期，再给药化合物B214个连续天。适当地，给药化合物A27个连续天，然后3至10天的休药期，再给药化合物B27个连续天。适当地，给药化合物A23个连续天，然后3至14天的休药期，再给药化合物B27个连续天。适当地，给药化合物A23个连续天，然后3至10天的休药期，再给药化合物B23个连续天。适当地，给药化合物A27个连续天，然后给药化合物B21天。适当地，给药化合物A26个连续天，然后给药化合物B21天。适当地，给药化合物B21天，然后给药化合物A27个连续天。适当地，给药化合物B21天，然后给药化合物A26个连续天。进一步关于“相继给药”—当化合物A2和化合物B2相继给药时，任选的其它抗肿瘤药物可在疗程内任何时间给药。应当理解“规定期限”给药和“连续”给药可进行重复给药方案或交替的给药方案，而休药期可能在重复给药或交替给药方案之前。适当地，作为本发明的组合的部分，化合物A2的给药量是有效、无非毒性量，每天给药1至4次。适当地，所选量的化合物A2每天给药两次。适当地，所选量的化合物A2每天给药一次。适当地，所选量的化合物A2每周静脉给药一次。适当地，所选量的化合物A2每周静脉给药两次。适当地，化合物A2为且每周静脉给药一或两次。适当地，化合物A2为且每周静脉给药一或两次，其量选自0.5至1.3mg/m2。适当地，化合物A2为且每周静脉给药一或两次，其量为1mg/m2。适当地，化合物A2为且每周静脉给药一或两次，其量为1.3mg/m2。适当地，化合物A2为且每周静脉给药一或两次，其量为0.6mg/m2。适当地，化合物A2为且每周静脉给药一或两次，其量为0.7mg/m2。适当地，化合物A2为且每周静脉给药一或两次，其量为0.8mg/m2。适当地，化合物A2为且每周静脉给药一或两次，其量为0.9mg/m2。适当地，作为本发明的组合的部分，化合物B2的给药量选自约5mg至约500mg；适当地，其量选自约25mg至约400mg；适当地，其量选自约30mg至约375mg；适当地，其量选自约35mg至约350mg；适当地，其量选自约40mg至约300mg；适当地，其量选自约45mg至约275mg；适当地，其量选自约50mg至约250mg；适当地，其量选自约55mg至约225mg；适当地，其量选自约60mg至约200mg；适当地，其量选自约65mg至约175mg；适当地，其量选自约70mg至约150mg；适当地，其量选自约50mg至约300mg；适当地，其量选自约75mg至约150mg；适当地，剂量约为100mg；相应的，作为本发明的组合的部分，化合物B2的给药量选自约5mg至约500mg。例如，作为本发明的组合的部分，化合物B2的给药量可以是5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、105mg、110mg、115mg、120mg、125mg、130mg、135mg、140mg、145mg、150mg、175mg、200mg、225mg、250mg、275mg、300mg、325mg、350mg、375mg、400mg、425mg、450mg、475mg或500mg。适当地，所选量的化合物B2每天给药两次。适当地，所选量的化合物B2每天给药一次。如本文所用，化合物A2和化合物B2所有的具体量均表示每剂中游离的或未成盐的化合物的给药量。本发明的方法也可能与癌症治疗的其它治疗方法一起使用。虽然治疗有效量的本发明的组合可作为原料化学品给药用于治疗，但是优选地该组合以一种或多种药物组合物的形式存在。因此，本发明还提供了药物组合物，其包括化合物A2和/或化合物B2，以及一种或多种可药用载体。本发明的组合如上所述。载体必须是可接受的，意味着与制剂的其它成分是相容的，能进行药物配制且不会损害其接受者。根据本发明的另一方面，提供了制备药物制剂的方法，其包括混合化合物A2和/或化合物B2以及一种或多种可药用载体。如上文所示，该药物组合使用的这些成分可能存在于单独的药物组合物中或一起配制在一种药物制剂中。药物制剂可能以单位剂量存在，每单位剂量包含预定量的活性成分。如本领域技术人员所知，每剂活性成分的量取决于待治疗的疾病、给药途径和患者的年龄、体重及身体状态。优选的单位剂量制剂为含有日剂量或亚剂量，或其适当部分的活性成分的制剂。此外，这些药物制剂可通过药学领域熟知的任何方法制备。化合物A2和化合物B2可通过任意合适的途径给药。合适的途径包括口服、直肠、鼻、局部(口腔和舌下)、阴道和肠胃外(包括皮下、肌内、静脉、皮内、鞘内和硬膜外)。应当理解优选的途径可能会随例如该组合的接受者的情况和待治疗的癌症而变化。还应当理解每种给药的药物可通过相同或不同的途径给药，而且化合物A2和化合物B2可一起配制在一种药物组合物/制剂中。适当地，化合物A2和化合物B2在单独的药物组合物中给药。将本发明的化合物或组合加入到方便的剂型(如胶囊、片剂或注射剂)中。使用固体或液体药物载体。固体载体包括淀粉、乳糖、硫酸钙二水合物、石膏粉、蔗糖、滑石粉、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体包括糖浆、花生油、橄榄油、盐水和水。类似地，载体可包括延长药物释放材料，如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，单独使用或合用蜂蜡。固体载体的量变化较大，但合适的可为每剂量单位约25mg至约1g。当使用液体载体时，合适的制剂形式为糖浆剂、酏剂、乳剂、软明胶胶囊、无菌注射液如针剂、或水性或非水的液体混悬液。例如，对于口服给药的片剂或胶囊剂型，活性药物组分可与口服的、非毒性的可药用惰性载体(如乙醇、甘油、水等)混合。粉剂的制备方法是，将化合物研细至适合大小，再与类似研细的药用载体(如可食用的碳水化合物，例如淀粉或甘露醇)混合。也含有调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。应当理解除了上述成分，该制剂还可包括本领域中与所讨论的制剂类型相关的其它常规试剂，例如适合口服给药的试剂可包括调味剂。如文中所指出，将治疗有效量的本发明的组合(化合物A2与化合物B2的组合)给药至人体。典型地，本发明的给药药物的治疗有效量取决于许多因素，例如患者的年龄和体重、需要治疗的精确状态、疾病的严重程度、制剂的性质以及给药途径。最终治疗有效量取决于住院医生的判断。根据已知的操作广泛地测试本发明组合的疗效、优势及协同作用性质。例如：方法：对雌性SCID小鼠皮下植入1x106NCI-H929细胞或来自RPMI-8226细胞的小肿瘤碎片(均为人多发性骨髓瘤)。当肿瘤体积达到200-300mm3时，小鼠被随机分成不同的治疗组(n＝8只小鼠/组)。小鼠在研究期间以30或100mg/kg，每天一次(SID)或30mg/kg，每天两次(BID)通过经口管饲法接受Akt抑制剂，化合物B(在本实验中，化合物B使用其盐酸盐形式)的20％PEG-400、1％DMSO的水溶液。化合物A2在研究期间以0.5或1.0mg/kg，一周两次腹膜内给药，单独使用或联合化合物B一起给药。也可加入任选的其它抗肿瘤药物。每周称重小鼠两次并用测径器测量肿瘤两次。肿瘤体积通过以下公式计算：肿瘤体积＝(长×宽2)/2。肿瘤生长抑制的百分比基于每天的肿瘤测量计算，其计算公式为：100×[1-(化合物治疗的肿瘤的平均生长/载体治疗的对照肿瘤的平均生长)]。将每组肿瘤体积的数据绘制为平均值±SEM，并在以下的图1至图3中报告。通过如下描述的已知操作广泛地测试本发明组合的疗效、优势和协同作用特性。适当地，本发明的组合根据以下组合细胞增殖实验广泛地测试其疗效、优势和协同作用特性。细胞以每孔500-5000个细胞放置在96或384孔板的适合于各细胞类型的培养基中，其添加有10％的FBS和1％的青霉素/链霉素，并在37℃，5％CO2下过夜培养。将细胞以分格方式用化合物A2的稀释液(8种稀释液，包括无化合物，取决于组合从0.1至30μM开始的3倍稀释液)从96孔板左侧向右侧处理，也用化合物B2(8种稀释液，包括无化合物，取决于组合从1至30μM开始的3倍稀释液)从96孔板顶部向底部处理，并如上述再培养72小时。也可加入任选的其它抗肿瘤药物。在一些情况下，化合物以交错方式加入，培养时间可延长到7天。使用试剂根据厂商说明书测量细胞生长，且信号在PerkinElmerEnVisionTM读数器上读取，该读数器设置为0.5s读取的发光模式。数据分析如下所述。结果表示为对照(未处理的细胞)的百分比，且将各种浓度的各单一药物的信号下降与在相应单一药物浓度的组合治疗进行对比。或者，结果表示为t＝0值的百分比并对比化合物的浓度绘图。t＝0值被标准化(normalized)为100％，且表示加入化合物时存在的细胞数。各化合物和/或化合物组合的细胞响应如下测定，使用微软Excel软件的IDBSXLfit插件使用细胞活力对比浓度的4或6参数曲线拟合，并测定抑制50％细胞生长所需的浓度(gIC50)。通过减去不含细胞的孔的值进行背景校正。对各药物组合，组合指数(CI)、ExcessOverHighestSingleAgent(EOHSA)和ExcessOverBliss(EOBliss)均通过已知的方法计算，如Chou和Talalay(1984)AdvancesinEnzymeRegulation,22,37至55；和Berenbaum,MC(1981)Adv.CancerResearch,35,269-335中描述的方法。因为本发明的组合在上述实验中是有效的，因此它们在治疗癌症中展现出有优势的治疗效用。适当地，本发明涉及一种治疗或减轻选自以下的癌症的严重程度的方法：脑癌(神经胶质瘤)、成胶质细胞瘤、Bannayan-Zonana综合征、Cowden病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、炎性乳腺癌、Wilm’s瘤、尤因氏肉瘤、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、结肠癌、头颈癌、肾脏癌(kidney)、肺脏癌(lung)、肝癌、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨细胞瘤、甲状腺癌、T细胞成淋巴细胞性白血病(LymphoblasticTcellleukemia)、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病、急性成淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、慢性中性粒细胞性白血病、急性T细胞成淋巴细胞性白血病、浆细胞瘤、成免疫细胞性大细胞白血病(Immunoblasticlargecellleukemia)、套细胞白血病、多发性骨髓瘤巨核母细胞性白血病、多发性骨髓瘤、急性巨核细胞性白血病、前髓细胞性白血病、红白血病、恶性淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、T细胞成淋巴细胞性淋巴瘤、Burkitt’s淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、成神经细胞瘤、膀胱癌、泌尿道上皮癌、肺癌(lungcancer)、外阴癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌(renalcancer)、间皮瘤、食管癌、唾液腺癌、肝细胞癌、胃癌、鼻咽癌、口腔癌、口癌、GIST(胃肠道间质瘤)和睾丸癌。适当地，本发明涉及一种治疗或减轻选自以下的癌症的严重程度的方法：脑肿瘤(神经胶质瘤)、成胶质细胞瘤、Bannayan-Zonana综合征、Cowden病、Lhermitte-Duclos病、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、肾脏癌、肺脏癌、肝癌、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤和甲状腺癌。适当地，本发明涉及治疗或减轻选自以下的癌症的严重程度的方法：卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌。适当地，本发明涉及一种治疗多发性骨髓瘤或减轻其严重程度的方法。本发明提供了组合，其包含蛋白酶体抑制化合物(适当地为硼替佐米)和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地为盐酸盐)，以及任选的其它抗肿瘤药物。本发明还提供组合，其包含硼替佐米和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地其盐酸盐)。本发明还提供用于治疗癌症的组合，其包含硼替佐米和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地其盐酸盐)。本发明还提供了药物组合物，其包含硼替佐米和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地其盐酸盐)的组合。本发明还提供了组合试剂盒，其包含蛋白酶体抑制化合物(适当地为硼替佐米)和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地其盐酸盐)，以及任选的其它抗肿瘤药物。本发明还提供了组合在制备药物中的用途，该组合包含蛋白酶体抑制化合物(适当地为硼替佐米)和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地其盐酸盐)。本发明还提供了组合在制备用于治疗癌症的药物中的用途，该组合包含蛋白酶体抑制化合物，适当地为硼替佐米和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐，适当地其盐酸盐。本发明还提供了治疗癌症的方法，其包括向有需要的患者给药蛋白酶体抑制化合物(适当地为硼替佐米)和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺或其可药用盐(适当地其盐酸盐)，以及任选的其它抗肿瘤药物的组合。以下的实施例为了说明而非以任何方式限制本发明的范围。实验详述实施例1：胶囊组合物用于给药本发明组合的口服剂型通过向标准的两部分硬明胶胶囊中填充所述成分制得，其成分的比例如下表I所示。表I实施例2：胶囊组合物用于给药一种本发明化合物的口服剂型通过向标准的两部分硬明胶胶囊中填充所述成分制得，其成分的比例如下表II所示。表II实施例3：胶囊组合物用于给药一种本发明化合物的口服剂型通过向标准的两部分硬明胶胶囊中填充所述成分制得，其成分的比例如下表III所示。表III实施例4：片剂组合物如下表IV所示，蔗糖、微晶纤维素和本发明组合的化合物按照所示的比例使用10％的明胶溶液混合并制粒。将湿颗粒筛选、干燥，与淀粉、滑石粉和硬脂酸混合，然后筛选并压缩成片剂。表IV实施例5：片剂组合物如下表V所示，蔗糖、微晶纤维素和一种本发明组合的化合物按照所示的比例使用10％的明胶溶液混合并制粒。将湿颗粒筛选、干燥，与淀粉、滑石粉和硬脂酸混合，然后筛选并压缩成片剂。表V实施例6：片剂组合物如下表VI所示，蔗糖、微晶纤维素和一种本发明组合的化合物按照所示的比例使用10％的明胶溶液混合并制粒。将湿颗粒筛选、干燥，与淀粉、滑石粉和硬脂酸混合，然后筛选并压缩成片剂。表VI实施例7：可注射肠胃外组合物用于给药本发明组合的可注射形式通过在10％体积的丙二醇的水溶液中搅拌1.5％重量的化合物A2和N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺盐酸盐(化合物B的盐酸盐)制得。实施例8：可注射肠胃外组合物用于给药本发明组合的可注射形式通过在10％体积的丙二醇的水溶液中搅拌1.5％重量的化合物A2制得。实施例9：可注射肠胃外组合物用于给药本发明组合的可注射形式通过在10％体积的丙二醇的水溶液中搅拌1.5％重量N-{(1S)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺盐酸盐(化合物B的盐酸盐)制得。虽然本发明的优选实施方案如上所例示，但是应当理解本发明不限于本文公开的精确说明，并保留对权利要求范围内所有改进的权利。