保护和再生性组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种保护和再生性组合物。该组合物包括含有干葡萄蔓提取物的第一美容活性成分和含有四氢嘧啶类物质组分的第二美容活性成分的组合。该组合物能够起到抗衰老美容护理作用和皮肤再生的功效。
【专利说明】保护和再生性组合物
[0001]本申请是申请日为2007年2月2日，申请号为200710003286.9，发明名称为“保护和再生性组合物”的发明专利申请的分案申请。
【技术领域】
[0002]本发明涉及保护和再生性组合物。 [0003]具体而言，本发明涉及一种组合物，其包括含有葡萄蔓(枝)提取物的第一美容活性成分和含有四氢嘧啶类或族物质成分(即四氢嘧啶组分)的第二美容活性成分的组合。更具体而言，所述第二成分选自四氢嘧啶类、羟基四氢嘧啶类及其混合物。
[0004]本发明更具体地涉及含有这种组合物的用于局部施用至皮肤的美容组合物。
[0005]本发明另外涉及美容护理的方法，包括将该组合物局部涂抹到期望得到美容护理之人的皮肤。
【背景技术】
[0006]文献W001/03713公开了一种方法，用于从干的葡萄蔓中提取白藜芦醇和/或Viniferine0其指出，viniferine是白藜芦醇的二聚体。该文献也指出，白藜芦醇一般是单体形式，但是也存在含有高达4单体的低聚物(第I页，第11~17行)。
[0007]由于干芽获得白藜芦醇和viniferine的产率比用鲜芽获得白藜芦醇和viniferine的产率高得多，因此强调使用干芽的价值。(第2页第31行至第3页第2行)
[0008]该文献预见了获得葡萄藤提取物的可能性，这种葡萄藤的提取物对于白藜芦醇要比从葡萄蔓获得的商业化提取物浓一千倍，能够制成具有高白藜芦醇含量的液体、粉末或片剂，适宜于这类产品的传统工业用途，该文献还广泛地提及了在制药、饮食和美容领域的应用(第5页25~32行和权利要求18)。
[0009]而且，应该可以看到，在所述现有技术文献中描述的葡萄蔓的干燥是在露天下进行的，但是所用时间段不超过4个月(实施例1:干燥4个月；实施例2:干燥3个月；实施例3:干燥最长的时间是3个月)。
【发明内容】
[0010]本发明的一个主要目的是提供一种包括活性成分的协同性组合的新组合物，更具体而言是一种局部施用于皮肤的美容组合物。
[0011]本发明的另一主要目的是提供来自美容上可接受的活性成分的组合物，即对皮肤细胞不具有可检测毒性的活性成分，其可以以合理的价格大量获得，以用于美容工业规模化的美容组合物生产。
[0012]本发明还有另一个主要目的是提供一种具有限制含量的白藜芦醇(其低聚物更为有利)的组合物
[0013]本发明同时以在美容工业规模上易于实施的简单方式实现上述目的。
[0014]因此，根据第一方面，本发明提供一种包括含有干葡萄蔓提取物的第一美容活性成分和含有四氢嘧啶类物质成分的第二美容活性成分的组合的组合物。
[0015]在本发明的范围内，“四氢嘧啶类物质的成分”的表达应理解为是指(S)-1, 4，5，6-四氢嘧啶-4-羧酸及其美容上可接受的盐和酯，其为未取代或由至少一个Cl~C6低级烷基自由基(radical)取代，尤其是2-位取代，和/或由至少一个羟基或甲氧基取代，尤其是5-位取代。
[0016]优选地，所述第二成分选自四氢嘧啶类物质，或(S) -1, 4，5，6-四氢-2-甲基嘧啶-4-羧酸，和羟基四氢嘧啶类物质，或(S，S)-l, 4，5，6-四氢-5-羟基-2-甲基嘧啶_4_羧酸，及其美容上可接受的盐或酯。
[0017]在本发明另一个特定的【具体实施方式】中，该组合物含有0.lwt%至20wt%，优选0.lwt%至10wt%的第一成分；和0.lwt%至20wt%,优选0.lwt%至10wt%的第二成分，但是这两种成分的总量基于该组合物总重量，最好小于或等于20wt%，优选低于10wt%。
[0018]在本发明又一个特定的【具体实施方式】中，第一成分和第二成分各自的重量比在1/10至10/1之间，特别是约1/1。
[0019]在本发明的一个特定的【具体实施方式】中，所述第二成分是重量比基本相等的四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶的混合物。
[0020]根据第二方面，本发明还涉及一种用于局部施用至皮肤的美容组合物，其含有如上限定的或由以下描述获得的组合物，并与美容上可接受的赋形剂组合。
[0021]在另一种变化形式中，该组合物含有至少一种其他的美容活性成分，特别是具有抗衰老活性，特别是防止、修正或延缓皮肤衰老影响的另一种美容活性成分，例如维生素A、维生素E或维生素C ;或一种实现皮肤再生护理的美容活性成分，例如羟基积雪草甙；或一种具有保湿功效的美容活性成分，例如蜕皮类固醇、含有蜕皮类固醇的植物提取物诸如土耳其斯坦筋骨草(Ajuga turkestanica)提取物；或一种防光化福射的美容活性成分，例如美容上可接受的物理或化学防晒剂，如甲氧基肉桂酸酯(盐)。
[0022]根据第三方面，本发明还涉及一种美容护理方法，包括给期望得到美容护理效果之人的皮肤局部施用如上所定义的组合物或如上所定义的或由以下描述获得的美容组合物。
[0023]在该方法的一个特定的变化形式中，所述美容护理选自抗衰老护理，尤其是防止、修正或延缓皮肤衰老的影响，和皮肤再生护理。其对抗皮肤衰老的效果主要包括阻止皮肤随年龄而发生的衰老或光化学引起的衰老。
[0024]在本发明的范围内，已经能够证明由含有葡萄蔓提取物的第一美容活性成分和含有四氢嘧啶类物质组分的第二美容活性成分因组合而产生的协同效应。
[0025]在本发明的范围内，葡萄蔓提取物是葡萄园收获的葡萄蔓(嫩枝)的任何提取物。各种葡萄藤的芽都能够使用，具体的品种是梅鹿辄、品丽珠、加美、西拉、赛美蓉和苏维翁(农)。根据本发明的优选葡萄蔓是赛美蓉和/或苏维翁(农)品种的藤嫩芽。
[0026]在一个特定的【具体实施方式】中，使用的是干葡萄蔓。干葡萄蔓应理解为是指实施过干燥步骤使其水分含量最好低于20wt%，优选低于5wt%的藤嫩芽。
[0027]在一个具体的变化形式中，所述藤嫩芽或者在露天进行，在干燥之处或在适度温度例如不超过约40°C的干燥炉中干燥，在上述每一种情况下都是直至使水分含量低于20wt%,优选低于5wt%。[0028]例如，所述干燥步骤能够在露天的干燥之处，根据上述文献W001/03713推荐的干燥方法进行天然干燥，具体而言，其包括至少2个月优选至少4个月的干燥期间。
[0029]这种在露天的天然干燥有利于随后进行的活性成分提取，特别是有利于白藜芦醇低聚物的生成。
[0030]用于本发明范围的葡萄蔓提取物最好通过最终提供富含多酚分子特别是白藜芦醇低聚物的提取物的方法获得，这是在本发明范围内为获得美容效果所追求的。
[0031]在本发明目前优选的【具体实施方式】中，提取工序主要包括以下步骤:
[0032]a)从葡萄园收获葡萄蔓；
[0033]b)进行最少为期4个月的干燥；
[0034]c)用极性有机溶剂例如C1~C6低级醇诸如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、戊醇或己醇(要么使用纯的，要么与水混合，要么是含水溶液)或酮特别是丙酮(或酮和水的混合物)进行提取的至少一个提取步骤，以得到第一极性溶剂提取物；
[0035]d)用非极性有机溶剂如己烷对所述第一极性溶剂提取物的至少一个洗涤步骤，以得到第二提取物，其能如此使用；
[0036]e)可选地，为获得更高纯度的提取物，可以在层析柱，特别是硅胶柱中进行纯化，借此所需的活性物质主要是多酚物质特别是白藜芦醇低聚物被固定，然后用合适的洗脱混合物如乙酸乙酯/己烷(特别是相对比例为80/20 (v/v))选择性地洗脱，以获得高纯化的第三提取物，其也能够如此使用；和
[0037]f)可选地，特别是通·过蒸发能够除去洗脱溶剂，以获得米色粉末，其构成了根据本发明的优选的最终纯化葡萄蔓提取物。
[0038]在本发明一个具体的变化形式中，所述最终粉末能够再溶解于例如80/20 (v/v)相对比例的醇/水混合物，特别是80/20 (v/v)的丁二醇/水混合物。
[0039]在该最终溶液中，该再溶解于80/20 (v/v)醇/水混合物中的粉末提供至少约1%，有利地至少10%的viniferine (白藜芦醇的二聚体)。
[0040]关于含有四氢嘧啶类物质成分的第二美容活性成分，是可以商购获得。例如，可以使用MERCK销售的例如商标名为RON AC ARE? hydroine的产品。由MERCK商购的该产品是特别有价值的，因为四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶的相对比例基本上相等(50wt%至60wt%四氢嘧啶，40wt%至50wt%的羟基四氢嘧啶)。该产品也具有很好的稳定性，而勿需加入抗氧剂或防腐剂，且属于美容级。
[0041]由以下解释性说明并参照本发明的实施例，本发明的其他目的、特征和优点会显得清楚明了，其只是通过举例说明的方式给出，因此并不能以任何方式限制本发明的范围。
[0042]在实施例中，除非另外指出，所有的百分比都是重量比，温度为摄氏度，而压力为大气压。
【专利附图】
【附图说明】
[0043]图1显示了实施例3中描述的细胞生长实验的结果，该实验借助B0EHRINGER的称为“细胞增殖试剂盒II”的商业化XTT测试用品而进行，其分别显示了对于未经处理的对照品、单独的葡萄蔓提取物I3、“hydroine”产品(Merck的RONACARE?)以及提取物13和hydroine组合的细胞生长动力学。所述动力学是由6h、9h、15h和18h的细胞生长测定建立起来的，以这些时间为横坐标，细胞数为纵坐标作图，其中细胞数计为相对6h时的细胞数(计为100%)的百分数。
[0044]图2是由图1衍生的曲线图，其以条状形式分别显示了经18h细胞处理时间的、
对于未经处理的对照品、提取物I3、“hydroine”产品(Merck的RONACARE ":)和最后
的根据本发明的组合以百分数表示的细胞数，其中根据本发明的组合使用了提取物13和“hydroine”产品的组合，表现出了所述组合的协同效应。
[0045]图3显示了实施例4中实施的抗自由基保护测试的结果，以保护百分数为纵坐标，
对使用提取物I3、“hydroine”产品(Merck的RONACAR.E_K:)和这两种活性组分的组合
分别获得的以条状形式的结果作为横坐标作图，显示了与单一采用每一种产品相比较通过这种组合所产生保护作用的意外优势。
【具体实施方式】
[0046]实施例1
[0047]根据本发明制备葡萄蔓提取物(称为13)的方法
[0048]根据本发明，提取工序主要包括以下步骤:
[0049]a)在3至4月份从波尔多(Bordeaux)东南部葡萄园收获Ikg苏维翁(农)(Sauvignon)品种的葡萄蔓；
[0050]b)在露天的干燥之处对收集的葡萄蔓进行最低4个月的干燥，直至水分含量低于5wt% ；`
[0051]c)进行提取，把干燥的葡萄蔓碾磨成平均粒度小于4_的颗粒。用极性有机溶剂(在这种情况下为丙酮)进行至少一个提取步骤，其中磨碎的藤嫩芽与溶剂的各自重量比至少为1/10，时间至少为20h，温度为室温或30°C左右的温度；所述固体残渣通过过滤除去。
[0052]从含有溶解提取物的丙酮溶液中蒸发掉丙酮获得基本上干燥的第一粗提取物，其被再溶解于50/50 (v/v)的乙醇/水混合物，该粗提取物称重约30g，需要约225ml所述溶剂。含有所溶解的提取物的水/乙醇溶液在室温或25至30°C维持lh，搅拌，并通过过滤分离出上清液。
[0053]呈固体状的纯化提取物要么通过蒸发完全除去乙醇获得，要么通过蒸发部分除去乙醇使纯化提取物沉淀，其通过传统方式干燥获得粉末形式的纯化提取物。
[0054]d)然后，通过把所获得的粉末再溶解于相对比例为80/20 (v/v)的丙酮/水混合物中而将上述纯化提取物再次纯化。
[0055]加入己烷直至获得两相溶液，有机相基本上是己烷，水相基本上包括丙酮/水混合物。这样，通过在室温下强烈搅拌几分钟如约IOmin进行提取操作。
[0056]混合物经过静置，通过倾析实现相分离。
[0057]回收含有期望的纯化藤嫩芽提取物的水相。
[0058]e)蒸发掉溶液，获得所需的第一纯化藤嫩芽提取物，其同样能够使用，并称为本发明的产物II。
[0059]f)所述产品最好在硅胶柱上纯化，由此所需活性物质、主要是多酚物质尤其是白藜芦醇低聚物被固定。在本实施例中使用的硅胶柱是用Merck的60-型硅胶填充的柱子。固定于所述硅胶上的多酚物质然后用洗脱溶剂选择性地洗脱，该洗脱溶剂包括相对比例为80/20 (v/v)的乙酸乙酯/己烷混合物，其以IL溶剂/克干提取物的比率引入所述柱；
[0060]g)除去洗脱溶剂，特别是通过蒸发除去，以获得米色粉末，其构成了根据本发明的最终纯化的第二葡萄蔓提取物，称为12 ;和
[0061]h)为了促进其在组合物特别是美容组合物中的应用，有利地，可以将该最终粉末12再溶解于醇/水混合物中，在该情况下为80/20 (v/v)的丁二醇/水。
[0062]根据本发明的该再溶解的粉末(称为产品或提取物13)的分析表明，其含有约68%的白藜芦醇低聚物，其中约24%是vinferine。
[0063]实施例2
_4] 根据本发明的组合物
[0065]制备一组合物，其含有50wt%的实施例1获得的提取物13 (含有约68%的白藜芦醇低聚物)，和约50%商购获得的四氢嘧啶类成分，即MERCK的hydroine产品
RONACARE" ο
[0066]该组合物能够以各种比例进行稀释，以便进行实验形成以下实施例的目标物。
[0067]实施例3
[0068]细朐牛长实齡
[0069]A-细朐牛长樽型
·[0070]测试实施例2的组合物，以测定其对细胞生长的影响，其中使用可商业获得的XTT，其来自 B0EHRINGER，称为“Cell proliferation kit II”(细胞增殖试剂盒 II)测试。
[0071]在该模型中，通过在线粒体呼吸链中存在的脱氢酶把四唑盐转化成甲瓒
(formazan)--一种橙色化合物，其由可商购的如商标TECAN分光光度计于450nm处检测。
因此，仅仅活细胞能够生成甲瓒。
[0072]反应如下:
[0073]
【权利要求】
1.一种用于局部施用于皮肤的美容组合物，包括0.1被％至20被％的含有干葡萄蔓提取物的第一美容活性成分和0.lwt%至20wt%的含有四氢嘧啶类物质成分的第二美容活性成分的组合，其中，所述葡萄蔓是实施过干燥步骤以使其水分含量低于5wt%的藤嫩芽从而促进在白藜芦醇低聚物中的含量，所述四氢嘧啶类物质成分选自四氢嘧啶、羟基四氢嘧啶及其美容上可接受的盐或酯；其中所述第一成分和所述第二成分各自重量比在1/10~10/1之间。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述第二成分是等重量比的四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶的混合物。
3.根据权利要求1所述的组合物，其含有0.lwt%至10wt%的所述第一成分；和0.lwt%至10wt%的所述第二成分。
4.根据权利要求1所述的组合物，其中第一成分和第二成分的总量小于或等于20wt%。
5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述第一成分和所述第二成分各自重量比是.1/1。
6.一种通过局部施用于皮肤的用于选自由抗衰老护理和皮肤再生护理构成的组的美容护理的美容组合物，其包括0.lwt%至20wt%的含有干葡萄蔓提取物的第一美容活性成分和0.lwt%至20wt%的含有四氢嘧啶类物质成分的第二美容活性成分与美容上可接受赋形剂的组合，其中，所述葡萄蔓是实施过干燥步骤以使其水分含量低于5wt%的藤嫩芽从而促进在白藜芦醇低聚物中的含量，所述四氢嘧啶类物质成分选自四氢嘧啶、羟基四氢嘧啶及其美容上可接受的盐或酯；并且其中所述第一成分和所述第二成分各自重量比在1/10~10/1之间。
7.根据权利要求6所述的组合物,其含有0.lwt%至10wt%的所述第一成分；和0.lwt%至10wt%的所述第二成分。
8.根据权利要求6所述的组合物，含有至少一种其他的美容活性成分，其选自由具有抗衰老活性的美容活性成分；具有皮肤再生功效的美容活性成分；具有保湿功效的美容活性成分；和防光化辐射的美容活性成分构成的组。
9.根据权利要求6所述的组合物，其中所述具有抗衰老活性的美容活性成分选自维生素A、维生素E和维生素C ;所述具有皮肤再生功效的美容活性成分是羟基积雪草甙；所述具有保湿功效的美容活性成分选自蜕皮类固醇、含有蜕皮类固醇的植物提取物和土耳其斯坦筋骨草提取物；所述防光化辐射的美容活性成分选自美容上可接受的物理防晒剂和美容上可接受的化学防晒剂。
10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述美容上可接受的化学防晒剂是甲氧基肉桂酸酯(盐)。
11.0.lwt%至20wt%的含有干葡萄蔓提取物的第一美容活性成分和0.lwt%至20wt%的含有四氢嘧啶类物质成分的第二美容活性成分与美容上可接受的赋形剂的组合作为用于局部施用于期望得到美容护理效果的人的皮肤的美容组合物的应用，其中所述葡萄蔓是实施过干燥步骤以使其水分含量低于5wt%的藤嫩芽从而促进在白藜芦醇低聚物中的含量，所述四氢嘧啶类物质成分选自四氢嘧啶、羟基四氢嘧啶及其美容上可接受的盐或酯；并且其中所述第一成分和所述第二成分各自重量比在1/10~10/1之间。
12.根据权利要求11所述的应用，其含有0.1被％至10wt%的所述第一成分；和0.lwt%至10wt%的所述第二成分。
13.根据权利要求11所述的应用，其中所述美容组合物含有至少一种其他美容活性成分，其选自由具有抗衰老活性的美容活性成分、具有皮肤再生功效的美容活性成分、具有保湿功效的美容活性成分以及具有防光化辐射的美容活性成分构成的组。
14.根据权利要求13所述的应用，其中所述具有抗衰老活性的美容活性成分选自维生素A、维生素E和维生素C ;所述具有皮肤再生功效的美容活性成分是羟基积雪草甙；所述具有保湿功效的美容活性成分选自蜕皮类固醇、含有蜕皮类固醇的植物提取物和土耳其斯坦筋骨草提取物；所述防光化辐射的美容活性成分选自美容上可接受的物理防晒剂和美容上可接受的化学防晒剂。
15.根据权利要求11所述的应用，其中所述美容护理选自由抗衰老护理和皮肤再生护理构成的组。
【文档编号】A61K8/49GK103622877SQ201310658977
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2007年2月2日 优先权日:2006年2月3日
【发明者】帕特里斯·安德烈, 伊莎贝尔·雷尼梅尔 申请人:Lvmh研究公司