用于动脉瘤的治疗或预防的方法和药物组合物的制作方法

用于动脉瘤的治疗或预防的方法和药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种用于动脉瘤的治疗或预防的化合物，该化合物为IL-1β拮抗物或IL-1β表达抑制剂。在另一种实施方式中，本发明涉及一种用于动脉瘤的治疗或预防的药物组合物，该药物组合物包含IL-1β拮抗物或IL-1β表达抑制剂。
【专利说明】用于动脉瘤的治疗或预防的方法和药物组合物

【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种用于动脉瘤的治疗或预防的化合物，该化合物为IL-Ιβ拮抗物 或IL-Ιβ表达抑制剂。
[0002] 在另一种实施方式中，本发明涉及一种用于动脉瘤的治疗或预防的药物组合物， 该药物组合物包含IL-1 β拮抗物或IL-1 β表达抑制剂。

【背景技术】
[0003] 动脉瘤是由疾病或血管壁弱化造成的血管局部扩张（球状隆起物）。动脉瘤通常 最多发生在脑底部的动脉（威利斯环（circle of Willis))和主动脉（出自心脏的主动 脉），即所谓的主动脉瘤。血管中的隆起物能够破裂并且导致随时死亡。动脉瘤变得越大， 它越可能破裂，并且如果没有被检测到，在时间足够的条件下，由于动脉瘤自然生长，动脉 瘤将不可避免地达到的破裂点。
[0004] 由于动脉瘤的严重后果，为了提前发现动脉瘤的存在，现在通常进行检查。如果发 生主动脉瘤，充血的扩张通常位于腹部中靠近髂分叉的延伸到腿的肾下主动脉中。在这个 位置，主动脉典型地约为2. 5厘米宽，主动脉能够使用基于超声波或X-射线的测量仪器进 行测量。
[0005] 当检测到动脉瘤时，目前的治疗包括使用开腹手术在血管周围进行移植物植入。 可替代的外科手术过程为从腹股沟植入管道并且引导支架移植物经由动脉股间肌到血流 通过人工血管能够绕过主动脉瘤的位置。后面的治疗方法具有重新介入几率增大的缺点。
[0006] 因此，存在着不涉及外科手术的动脉瘤的其他疗法的需求。


【发明内容】

[0007] 致力于动脉瘤的体内模型的研究，发明人发现IL-1 β的敲除（K0)减少了致死主 动脉破裂并延长小鼠的存活。
[0008] 因此，本发明涉及一种用于动脉瘤的治疗或预防的化合物，该化合物为IL-1 β拮 抗物或IL-Ιβ表达抑制剂。
[0009] 在另一种实施方式中，本发明涉及一种用于动脉瘤的治疗或预防的药物组合物， 该药物组合物包含IL-1 β拮抗物或IL-1 β表达抑制剂。

【具体实施方式】
[0010] 本发明的首要目标涉及一种用于动脉瘤的治疗或预防的化合物，该化合物为 IL-1 β拮抗物或IL-1 β表达抑制剂。
[0011] 白介素1β (IL-Ιβ)是已被熟知的。IL-Ιβ是白介素1细胞因子家族的成员。 该细胞因子以原蛋白产生，通过半胱天冬酶1(CASP1/ICE)蛋白水解加工成为它的活化型。 该细胞因子是炎症反应的重要中介物，并且参与各种细胞活动，包括细胞的增殖、分化和凋 亡。
[0012] 本文所用的术语"治疗"或"疗法"，表示逆转、缓解、抑制该术语所用的失调或状况 的进程，或阻止该术语所用的失调或状况，或逆转、缓解、抑制该术语所用失调或状况的一 种或多种症状的进程，或阻止一个或多个该术语所用失调或状况的一种或多种症状。
[0013] 本文所用的术语"IL-1 β拮抗物"指的是能够抑制IL-1 β活性的任何化合物。典 型地，所述拮抗物可以抑制或不抑制IL-la的活性。然而在【具体实施方式】中，所述拮抗物 特异地抑制IL-1 β超过抑制IL-I a。
[0014] 在优选实施方式中，动脉瘤是主动脉的、神经末梢区域的或颅内的动脉瘤。
[0015] 在一种实施方式中，所述IL-1 β拮抗物可以为有机小分子（天然或非天然）。术 语"有机小分子"指的是大小比得上那些通常用于药物中的有机分子的分子（天然或非天 然）。所述术语排除生物大分子（例如，蛋白质、核苷酸等）。优选的小有机分子大小至多 约lOOOODa，更优选地，至多5000Da，更优选地至多2000Da，并且最优选地，至多约lOOODa。
[0016] 在另一种实施方式中，本发明的IL-Ιβ拮抗物可以为中和IL-Ιβ的抗IL-Ιβ抗 体或中和IL-1 β的抗IL-1 β的片段的抗体。
[0017] 可以根据已知方法，通过给予从例如猪、牛、马、兔、山羊、绵羊、小鼠和其它动物中 选择的宿主动物适当的抗原或抗原表位，来产生针对IL-Ιβ的抗体。文献中各种已知的佐 剂可以用于增强抗体产生。虽然可用于实施本发明中的抗体可以为多克隆抗体，但是优选 为单克隆抗体。可以使用任意的利用培养的传代细胞系生产抗体分子的技术，来制备和分 离针对IL-Ιβ的单克隆抗体。用于制备和分离的技术包括但不限于最初被科勒和米尔施 泰（1975)描述的杂交瘤技术；人Β细胞杂交瘤技术（科特等，1983);和EBV-杂种瘤技术 (科特等，1985)。可替代地，所述生产单链抗体的技术（例如，U.S.专利号4946778)可适 用于生产抗-IL-Ιβ单链抗体。实施本发明中有用的IL-Ιβ拮抗物也可以包括抗IL-Ιβ 抗体的片段，所述片段包括但不限于F (ab'）2片段和Fab片段，F (ab'）2片段通过完整抗体 分子的胃蛋白酶消化产生，Fab片段通过还原F(ab'）2片段的二硫键产生。可替代地，可以 构建Fab和/或scFV表达文库以便对具有对IL-1 β所需特异性的片段的快速鉴定。
[0018] 根据已知的技术，同样能够制备人源化抗IL-1 β抗体和抗体片段。"人源化抗体" 是（例如，啮齿类动物）包含衍生自非人免疫球蛋白的最小序列的非人嵌合抗体形式。大 多数情况下，人源化抗体是人免疫球蛋白，该人免疫球蛋白中的受体高变区（CDRs)(受体 抗体）的残基被非人物种的高变区（供体抗体）的残基取代，非人物种例如小鼠、大鼠、兔 或非人灵长动物，非人物种的高变区残基（供体抗体）具有所需特异性、亲合性和兼容性。 在一些情况下，人免疫球蛋白的骨架区（FR)残基被相应的非人残基取代。此外，人源化抗 体可以包含未在受体抗体或供体抗体中发现的残基。这些改性是为了进一步改善抗体的表 现。通常，人源化抗体包含至少一个，和典型地包含两个可变区的基本上全部，该可变区中， 全部或基本上全部的对应于非人免疫球蛋白的高变环以及全部或基本上全部的骨架区是 具有人免疫球蛋白的序列的。人源化抗体同样可选择地也包含免疫球蛋白恒定区（Fc)的 至少部分，典型地包含人免疫球蛋白的免疫球蛋白恒定区（Fc)。制备人源化抗体的方法是 已有记载的，例如，温特（U.S.专利号5225539)和博斯（希尔泰克，U.S.专利号4816397)。
[0019] 然后，对于本发明，所选择的是中和IL-Ιβ的抗体。
[0020] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为康纳单抗（canakinumab)(见于Church LD等2010的实例）。
[0021] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请US2009226461的抗体。
[0022] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为ACZ885抗体（见于专利申请 W02010066762 的实例）。
[0023] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请W00153353的抗体。
[0024] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为Hu007抗体（见于专利申请W003073982 的实例）。
[0025] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请US5348858的抗体。
[0026] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请EP0364778的抗体。
[0027] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请US7566772的抗体。
[0028] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请US7714120的抗体。
[0029] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请US20110182894的抗体。
[0030] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请US4935343的抗体。
[0031] 在特定实施方式中，本发明的抗体可以为依据专利申请US20090226461的抗体。
[0032] 在一种实施方式中，本发明涉及用于动脉瘤1的治疗或预防的化合物，该化合物 为IL-Ιβ拮抗物或IL-Ιβ表达抑制剂，其中拮抗物为抗-IL-Ιβ抗体。
[0033] 在另一种实施方式中，IL-Ιβ拮抗物可以选自适配子。适配子是一类代表在分子 识别方面抗体的替换物的分子。适配子是具有以高亲合性和特异性来识别几乎任意类别的 靶向分子的能力的寡核苷酸或寡肽序列。利用在Tuerk C和Gold L，1990中描述的随机序 列文库的富集指数（SELEX)，这样的配体可以通过配体的系统进化得到分离。随机序列文库 可以通过DNA的组合化学合成得到。在这种文库中，每个成员是单一序列的最终化学修饰 的线性低聚物。在贾亚塞纳S. D.，1999中，已经对这个类别的分子的可能的修饰、使用和优 势进行了评估。肽适配子由构象约束的抗体可变区组成，抗体可变区由平台（platform)蛋 白所展示，例如通过两种杂交法（科拉等，1996)从组合文库中选出的大肠杆菌硫氧还蛋白 L·
[0034] IL-Ιβ的中和适配子可以由本领域技术人员很容易选定。
[0035] 在优选实施方式中，本发明的化合物为IL-Ιβ表达抑制剂。
[0036] 小抑制核糖核酸（siRNAs)同样能够起到用于本发明的IL-1 β基因表达抑制剂的 作用。IL-1 β基因表达能够通过利用导致产生小的双链RNA的小双链RNA(dsRNA)、或载 体或构建体接触受试者或细胞而得到减少，由此使得IL-1 β基因表达特异性地得到抑制 (也就是，RNA干扰或RNAi)。对于已知序列的基因，选择合适的dsRNA或dsRNA-编码载体 的方法在本领域中是公知的（例如，见于Tuschl，T.等（1999) ;Elbashir，S.M.等（2001); Hannon, GJ. (2002) ;McManus，MT.等（2002) ;fcummelkamp，TR.等（2002) ;U.S.专利号 6573099 和 6506559 ;和国际专利申请号 W001/36646, W02099/32619,和 W001/68836)。
[0037] 核酶同样能够起到用于本发明的IL-Ιβ基因表达抑制剂的作用。核酶是能够催 化RNA的特异性切割的酶RNA分子。核酶作用的机理涉及在内切切割之前的核酶分子与互 补靶RNA的序列特异的杂交。因此，在本发明范围内，特定并有效地催化IL-1 β mRNA序列 的内切核苷酸切割的改造发夹或锤头状模体的核酶分子是可以使用的。在任意的潜在RNA 靶标中的特异性核酶切割位点是通过在靶分子中扫描核酶切割位点来初步鉴定的，核酶切 割位点典型地包括以下序列：GUA、GUU和GUC。一旦得到识别，为了能够放弃不适合的寡核 苷酸序列，可以对对应于含有切割位点的靶标基因区域的15-20个核苷酸之间的短RNA序 列进行预测结构特征的评估，预测结构例如二级结构。也可以利用例如核糖核苷酸蛋白保 护试验，测试候补靶标与互补寡核苷酸的杂交的可及性，来对候补靶标的适合度进行评估。
[0038] 用作IL-1 β基因表达抑制剂的反义寡核苷酸和核酶能够通过公知的方法制备。 这些方法包括例如通过固相亚磷酰胺化学合成的化学合成技术。可替代地，通过编码RNA 分子的DNA序列的体外或体内转录，能够产生反义RNA分子。这样的DNA序列能够整合至 种类广泛的载体中，该载体整合了合适的RNA聚合酶启动子，例如Τ7或SP6聚合酶启动子。 对本发明的寡核苷酸的多种修饰可以作为增加细胞内的稳定性和半衰期的方法引入。可能 的修饰包括但不限于将核苷酸或脱氧核苷酸的侧翼序列添加到所述分子的5'和/或3'末 端，或在寡核苷酸骨架中使用硫代磷酸或2' -0-甲基链接而不是磷酸二酯键的链接。
[0039] 反义寡核苷酸siRNA和本发明的核酶可以独自或与载体联合递送到体内。最广 义地说，载体是能够促进反义核苷酸siRNA或核酶核酸传递到细胞并且优选为细胞表达 IL-Ιβ的任何媒介物。优选地，载体运送核酸到具有相对于可能导致缺乏载体的退化程度 的减少的退化的细胞。总的来说，能用于本发明中的载体包括，但不限于已经插入或结合反 义寡核苷酸siRNA或核酶核酸序列的质粒、噬菌体、病毒、衍生自病毒或细菌源的其他媒介 物。病毒载体是优选的载体类型，并且包括但不限于来自下列病毒：例如莫罗尼鼠白血病病 毒的逆转录病毒、小鼠肉瘤病毒、小鼠乳腺病毒和劳斯氏肉瘤病毒；腺病毒、腺相关的病毒； SV40-型病毒；多瘤病毒；爱泼斯坦病毒；乳头状瘤病毒；疱疹病毒；牛痘病毒；小儿麻痹症 病毒；和例如逆转录病毒的RNA病毒的核酸序列。可以使用没有点名但是本领域公知的其 它载体。
[0040] 优选的病毒载体是基于其中非必要基因已经被有利基因取代的非-细胞 (cytopathic)真核病毒。非细胞病毒包括逆转录病毒（例如,慢病毒），逆转录病毒的生命 周期涉及基因组病毒RNA的逆转录到具有整合到宿主细胞DNA中的后续前病毒的DNA。逆 转录病毒已经被批准用于人基因治疗试验。最有用的逆转录病毒是那些复制-有缺陷的 逆转录病毒（例如，能够指导所需蛋白的合成，但是不能制造传染性颗粒）。为了高效的体 内基因转导，从遗传学角度改变逆转录病毒表达载体具有一般效用。在Kriegler，1990和 Murry，1991中，提供了生产复制-有缺陷的逆转录病毒的标准操作步骤（包括外源遗传物 质结合到质粒上，用质粒转染包装细胞，通过包装细胞系生产重组逆转录病毒，从组织培养 介质中收集病毒微粒，和感染带有病毒微粒的靶细胞的步骤）。
[0041] 对特定应用的优选病毒是腺病毒和腺相关病毒，它们是已经被批准用于人的基因 治疗使用的双链DNA病毒。腺相关病毒能够被设计为复制缺陷型并且能够感染大范围的细 胞类型和种类。腺相关病毒还具有例如对热和脂质溶剂具有稳定性；对包括造血细胞的多 种世系细胞的高转导频率；和双重感染抑制的缺乏因此允许转导的多重级数的优点。据报 道，腺相关病毒能够以位点特异的方式整合到人细胞DNA中，由此将插入诱变的可能性和 逆转录病毒感染的插入基因表达特性的变异性减小到最小。另外，在缺少选择压力的100 位以上受试者（passages)的组织培养中，已经追踪到野生型腺相关病毒感染，意味着腺相 关病毒基因组整合是相对稳定事件。所述腺-相关病毒同样能够以染色体外的形式起作 用。
[0042] 其他载体包括质粒载体。在本领域中已经广泛地对质粒载体进行了描述并且对于 本领域技术人员是公知的。见于例如，Sambrook等，1989。在最近几年，为了传递抗原-编 码基因到体内细胞中，质粒载体已经被用作DNA疫苗。质粒载体在这种用途上特别有优势， 这是因为他们没有与许多病毒载体同样的安全顾虑。然而具有与宿主细胞兼容的启动子 的这些质粒，能够从在质粒中有效编码的基因中表达缩氨酸。一些通常用使用的质粒包括 pBR322、pUC18、pUC19、pRC/CMV、SV40和pBluescript。其它质粒对于那些本领域普通技术 人员是公知的。另外，使用限制酶和连接反应去移除和增加 DNA特定片段，可以定制设计质 粒。质粒可以通过注射、黏膜、局部的多种途径进行递送。例如，DNA质粒能够通过肌内，眼， 皮肤内，皮下或其他途径进行注射。DNA质粒同样可以通过鼻内喷雾或滴剂，直肠栓剂和口 服进行给药。DNA质粒同样可以使用基因枪在上皮或黏膜表面给药。所述质粒可以以水溶 液形式，干燥在金颗粒上或耦合在包括但不限于脂质体树枝状大分子，螺旋状分子和微型 胶囊的另外的DNA传递系统上的方式给药。
[0043] 在优选实施方式中，反义寡核苷酸、siRNA、shRNA或核酶核酸序列在异种调节区域 的控制中，例如异种启动子。所述启动子对Mu 11 er神经胶质细胞、小神经胶质细胞、内皮细 胞、周皮细胞和星形胶质细胞可以特异性的。例如，在Muller神经胶质细胞中的特定表达 可以通过合适的谷氨酰胺合成酶基因的启动子得到。所述启动子同样能够为例如，例如CMV 启动子或其它合成的启动子的病毒启动子。
[0044] 为了在动脉瘤上测试假定的IL-1 β化合物的功能，体内或体外测试是必要的。为 了那个目的，动脉瘤的模型是高度相关的。
[0045] 本发明的另外一个目的涉及治疗或预防动脉瘤的方法，该方法包括向有需要的对 象给药治疗有效量的化合物，该化合物为如上所述的IL-Ιβ拮抗物或IL-Ιβ表达抑制剂。
[0046] -方面，本发明涉及治疗或预防动脉瘤的方法，该方法包括向有需要的对象给药 治疗有效量的如上所述的IL-Ιβ拮抗物。
[0047] 在优选实施方式中，拮抗物是抗IL-1 β抗体。
[0048] 本发明的化合物可以以如下面所定义的药物组合物的形式给药。
[0049] 因此，本发明的进一步的目的涉及包含用于动脉瘤的预防或治疗的IL-Ιβ拮抗 物或IL-1 β表达抑制剂的药物组合物。
[0050] "药学地"或"药学可接受的"是指当分子实体和组合物给药于视情况而定的哺乳 动物，尤其是人时，不会引起副作用、过敏反应或其他麻烦的反应。药学可接受的载体或辅 料指的是无毒固体、半固体或液体填料、稀释液、灌封材料或任意类型的剂型辅料。
[0051] 在本发明的药物组合物中，作为与传统药物载体的混合物，有效成分单独或与另 外的成分组合在一起，可以以单位给药形式对动物或人给药。适合的单位给药形式包括例 如药片、凝胶胶囊、粉末、颗粒和口服混悬剂或溶液的口腔-途径形式、舌下的和颊的给药 的形式、气溶胶、埋植剂、皮下用的、经皮的、局部的、覆膜内的、肌肉内的、静脉内的、皮下 的、经皮的、囊内的、鼻内的给药形式和直肠的给药形式。
[0052] 优选地，药物组合物包含对用于能够被注射的剂型的药学上可接受的媒介。这些 媒介尤其可以为等渗的、无菌的、含盐的溶液（磷酸单钠或磷酸二钠，氯化钠，氯化钾，氯化 钙或氯化镁和类似的盐，或这些盐的混合物），或干燥的，特别是根据情况添加无菌水或生 理盐水的基础上允许可注射溶液组成的冻干组合物。
[0053] 适于注射使用的药物制剂包括无菌的水溶液或分散体；制剂包括芝麻油、花生油 或丙二醇水溶液；和用于即时制备无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。在所有的情况中， 所述制剂必须是无菌的并且必须是达到具有容易注射能力的程度的液体。所述制剂必须在 制造和储存条件下稳定并且必须预防例如细菌和真菌的微生物污染。
[0054] 作为自由碱或药学可接受盐的包含本发明化合物的溶液可以通过在水中与例如 羟丙基纤维素的表面活性剂适度混合来制备。分散体同样可以在甘油、液态聚乙二醇和它 们的混合物和油中制备。在储存和使用的普通条件下，这些制备物包含防止微生物生长的 防腐剂。
[0055] IL-Ιβ拮抗物或IL-Ιβ表达的抑制剂可以以中性的或盐的形式被配制成组合 物。药物可接受的盐包括酸成盐（与蛋白质的自由氨基基团形成的）和与例如氯化氢或磷 酸的无机酸，或与例如乙酸，草酸，酒石酸，扁桃酸和类似酸的有机酸形成的盐。与自由羧基 基团形成的盐同样能够衍生自例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙或氢氧化铁的 无机碱，和例如异丙胺、三甲基胺、组氨酸、普鲁卡因和类似胺的有机碱。
[0056] 载体同样可以是溶剂或包含例如水、乙醇、多元醇（例如甘油，丙二醇，液体聚乙 二醇和类似物）分散媒介、它们的适当混合物和植物油。举例来说，使用例如卵磷脂的包 衣，和通过保持分散情况下需要的微粒尺寸，和通过使用表面活性剂，能够保持适当流动 性。例如对羟苯甲酸酯、氯丁酸、苯酚、山梨酸、硫汞撒和类似物的多种抗菌剂和抗真菌剂， 能够带来对微生物的预防作用。在很多情况下，优选包含等渗剂，例如糖或氯化钠。在组合 物中，使用例如单硬脂酸铝和明胶的延迟吸收剂能够延长可注射组合物的吸收。
[0057] 通过将适当溶剂中需要量的活性多肽与多种以上列举的其它组分结合，接着按要 求过滤消毒，来制备无菌的可注射溶液。通常，通过将多种消毒的活性成分结合到含有基础 分散介质和以上列举的所需其他成分的无菌媒介上，来制备分散体。就用于制备无菌可注 射溶液的无菌粉末来说，优选的制备方法是从预先无菌-过滤溶液产出活性成分粉末加上 任何附加的所需成分的真空干燥和冻干技术。
[0058] 关于剂型，溶液以与剂量剂型兼容的方式和以治疗有效的量给药。以例如以上描 述的可注射溶液类型的多种剂量形式的剂型是容易给药的，但是药物释放胶囊和类似物同 样可以应用。
[0059] 对于水溶液中不经肠道的给药，例如，如果有必要，溶液应该适当地缓冲，并且首 先利用充分的盐和葡萄糖使液体稀释液等压。这些特定的水溶液尤其适合静脉的、肌肉内 的、皮下的、腹膜内的给药。在这方面，能够应用的无菌水溶液介质对本领域那些技术人员 是公知的。例如，一个剂量可以溶解在lml的等渗NaCl溶液中，然后或添加到1000ml的皮 下灌注术液体中或注射在注射的推荐位点。根据被治疗对象的情况，剂量的一些变化是必 要的。在任意情况下，负责注射的人为个体对象确定适当的剂量。
[0060] 本发明的IL-1 β拮抗物和IL-1 β表达抑制剂可以在治疗混合物中配制为每剂包 含大约0. 0001到1. 〇mg，或大约0. 001到0. lmg，或0. 1到1. Omg，或大约1. 0到10mg，或10 到lOOmg，或100到200mg，或甚至大约200mg。同样可以倍剂量给药。
[0061] 除了制成例如静脉注射或肌肉注射的不经肠道给药的本发明的化合物，其他药物 可接受形式包括例如药片或其它口服给药的固体；脂质体剂型；延时释放胶囊；和当前使 用的任意其它剂型。
[0062] 本发明将通过以下附图和实施例进行进一步解释说明。但是，这些实施例和附图 不应理解为限制本发明的范围的任何形式。

【专利附图】

【附图说明】
[0063] 图1 :TGF_i3活性的中和导致对Ang II-引起的AAA形成和并发症的高度耐受状 态。通过渗透泵以lug/Kg/min的速率连续灌输Ang-II。抗-TGF0抗体的给药是按照 Wang Y等，J Clin Invest 2010中的描述进行的。
[0064] 图2 :Rag2 K0小鼠中的AAA被轻微减少并且没有被IFNi、IL-4信号的抑制阻 止。通过渗透泵以lyg/Kg/min的速率连续灌输Angll。给药抗-TGF0和抗-IFNY抗体 按照Wang Y等.，J Clin Invest 2010中的描述进行的。
[0065] 图3 :IL_1 β缺陷阻止致死性动脉瘤破裂。通过渗透泵以1 μ g/Kg/min的速率连 续灌输Angll。抗-TGF0抗体的给药是按照Wang Y等，J Clin Invest2010中的描述进行 的。
[0066] 图4 :使用阿那白滞素（Anakinra(Kineret))的治疗没有阻止致死性动脉瘤破裂。 通过渗透泵以lug/Kg/min的速率连续灌输Angll。抗-TGF0抗体的给药是按照Wang Y等，J Clin Invest 2010中的描述进行的。每周3次，按照100mg/kg给药阿那白滞素 (Kineret)〇
[0067] 图5 :与IL-β缺陷相反，IL-1 α缺陷没有阻止致死性动脉瘤破裂。通过渗透泵 以lyg/Kg/min的速率连续灌输Angll。抗-TGF0抗体的给药是按照Wang Υ等，J Clin Invest 2010中的描述进行的。.

【具体实施方式】 [0068]
[0069] 实施例：
[0070] 材料和方法
[0071] 我们使用8周到12周之间的雄性小鼠。使用C57BL/6J IL-1 β +和IL-1 α +小 鼠。C57BL/6J 小鼠购买于动物冷冻保存、分发、登记归档中心（Centre de Cryop r6servation, Distribution, Typage et Archivage animal)或由奥利维耶兰兹居里研究 所，法国，巴黎（Olivier Lantz,Institut Curie, Paris, France)提供。C57BL/6J 114+小 鼠购买于杰克逊实验室。中和纯化的单克隆大鼠 IgGl抗-IFN-γ抗体（克隆XMG. 1)由 L.R6nia生产。小鼠抗-人TGF-P(M，β2,和β3)(克隆2G7)由ΒΙ0ΤΕΜ生产。多克隆 兔抗-TGF-β 来自 R&D 系统（ΑΒ-100-ΝΑ，货号 Ε016)。阿那白滞素（Anakinra(Kineret)) 是重组的人白细胞介素-1受体拮抗物（IL-lRa)的非糖基化形式。阿那白滞素（Kineret) 从安进公司（Amgen)得到并且按照每周注射3次，100mg/kg使用。血管紧张肽II购买于西 格玛奥德里奇（Sigma-Aldrich)，并且ALZET渗透泵来自查尔斯河实验室。
[0072] Ang II-诱导的主动脉瘤的小鼠模型。
[0073] Ang II-诱导的主动脉瘤形成的小鼠模型之前已进行了描述（Wang Y J Clin Invest 2010)。以1000 ng/kg/min通过皮下渗透泵灌输Ang II达最长28天。画出 Kaplan-Meier生存曲线，并使用log-等级曼德尔考克斯（Mantel-Cox)检验进行分析。P 值小于0.05被认为是显著的。
[0074] 结果
[0075] 结果如图1-5所示。中和TGF-β活性导致对Ang II-诱导的AAA形成和并发症 (图1)的高度耐受状态。AAA没有被IFN- γ，IL-4信号（图2)的抑制阻止。IL-1 β缺陷 阻止了致死性动脉瘤破裂（图3)。使用阿那白滞素（Anakinra(Kineret))的治疗没有阻 止致死性动脉瘤破裂（图4)。与IL-β缺陷相反，IL-la缺陷没有阻止致死性动脉瘤破裂 (图 5)。
[0076] 参考文献：
[0077] 本发明中，多种文献描述了本发明所属领域的状态。据此，将这些公开文献合并到 本发明中。
[0078] Church LD, McDermott MF.康纳单抗：治疗周期性综合症的人抗-IL-1 β单克隆 抗体· Expert Rev Clin Immunol 2010 Nov ;6 (6) : 831-41。
[0079] Solignac M.骨关节炎中白细胞介素-1的第一抑制剂二乙酰大黄酸的作用机 制.Presse Med.2004 May 22;33(9 Pt 2):S10-2。
【权利要求】
1. 一种用于动脉瘤的治疗或预防的化合物，该化合物为IL-Ιβ拮抗物或IL-Ιβ表达 抑制剂。
2. 根据权利要求1所述的用于动脉瘤的治疗或预防的化合物，其中，拮抗物是抗 IL-1 β抗体。
3. -种用于动脉瘤的治疗或预防中的药物组合物，其中，该药物组合物包括权利要求 1-2中任意一项所述的化合物和药学上可接受的载体。
【文档编号】A61P9/00GK104203979SQ201380015053
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2013年3月15日 优先权日:2012年3月19日
【发明者】Z·马拉特, S·塔利布, A·泰德吉 申请人:法国国家健康医学研究院, 巴黎第五大学