本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含有夫西地酸的外用乳膏组合物及其制备方法和用途。
背景技术：
葡萄球菌对多种抗菌药物的广泛耐药使临床治疗面临困境，全球各地耐甲氧西林葡萄球菌分离率差别较大，但均呈现快速上升趋势。我国细菌耐药监测结果表明，临床分离耐甲氧西林葡萄球菌比例大多占葡萄球菌的50％以上。迄今为止，我国临床治疗甲氧西林耐药葡萄球菌感染的抗菌药物仅有万古霉素与替考拉宁两种，长期频繁的应用势必造成细菌耐药发生；为此应该积极开发新的抗菌药物和重新评估既有的抗菌药物，使临床治疗有更多选择，避免单纯应用糖肽类药物所导致的耐药选择压力，减低耐糖肽类药物葡萄球菌发生机会。
夫西地酸(fusidicacid)又译梭霉孢酸，可由fusidiumcoccineum或cephalosporiumlamellaecolla等产生，为类甾类抗生素，主要通过干扰蛋白质合成延长因子g(ef-g)抑制细菌核糖体的易位，阻碍细菌蛋白质的合成而产生杀菌作用，这种独特的作用机理避免了与其他抗生素的交叉耐药性。夫西地酸为窄谱抗生素，对g+菌活性强，也可抗多种厌氧菌和几种其他菌，尤对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、梭状芽孢菌属、棒状杆菌非常敏感；另外对分支杆菌、嗜肺军团菌、奴卡氏菌中度敏感；同时具有良好的安全性，且其毒性低，罕见过敏反应。用于治疗葡萄球菌所致各种感染，如败血症、肺炎、心内膜炎、皮肤和软组织感染、骨与关节感染等。
1962年丹麦利奥制药公司首次从梭链孢酸脂球菌的发酵液中提取出夫西地酸，夫西地酸钠(sodiumfusidate，商品名立思丁)是夫西地酸(fusidicacid)的钠盐，属梭链孢酸类抗生素。为目前唯一具有类甾体结构的抗生素，化学名：反-16α-羧基-3β,11β-二羟基-4β,8β,14α-三甲基-18-去甲基-5β,10α-胆甾-(17z)-17(20)，24-二烯-21-酸半水合物。分子式：c31h48o6，结构式如下：
如上述结构看出夫西地酸分子结构中存在，不共轭的烯烃侧链，因此容易受氧化的影响。并且含有一个乙酯键，按此预期此结构稳定性较差，经检索，确认此结构易氧化，生成相应的氧化杂质，同时乙酯键易水解，生成相应羧酸和乙酸，以及羧酸相关异构体，内酯杂质等。
欧洲药典8.0中，夫西地酸项下，记述了其氧化和水解降解杂质，如下表所示：
经检索发现，目前的制剂研究，尤其是外用制剂研究中，均没有同时关注此两方面杂质降解，从而得到稳定的夫西地酸外用制剂的研究。
此外由于夫西地酸水溶性较差，较难制得水溶性制剂，例如喷剂，溶液剂等。
因此急待开发一种性质稳定的夫西地酸制剂，尤其是外用制剂，在制剂研究中同时关注制剂中的原料药的氧化和水解降解，从而大大增强制剂的稳定性。
技术实现要素：
为降低制剂中原料药氧化和水解的产生发明人经过研究，得到一种含有夫西地酸的外用乳膏组合物，由主药夫西地酸，油相溶剂，乳化剂，助乳化剂，抗氧剂，增稠剂，水相溶剂，水解稳定剂组成，该组合物通过如下步骤进一步制备成乳膏剂：
步骤一：取夫西地酸原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂，在氮气保护条件下，水浴加热至60℃，依次取处方量抗氧剂，夫西地酸，增稠剂，助乳化剂搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解水解稳定剂，乳化剂，以naoh水溶液调节ph值至4.0-5.5，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到含有夫西地酸的乳膏；
步骤五：取步骤四所得夫西地酸乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
其特征在于，所述水解稳定剂为醋酸，醋酸用量为2.0％-5.0％。单位剂量夫西地酸含量为0.5％-2.0％。
所述油相溶剂为丙二醇。
所述水相溶剂为纯化水，所述乳化剂为聚山梨酯80，助乳化剂为单硬脂酸甘油酯，抗氧剂为丁基羟基茴香醚，增稠剂为十六醇。
所述含有夫西地酸的外用乳膏组合物，单位制剂处方组成如下：
所述含有夫西地酸的外用乳膏组合物，通过如下步骤进一步制备成外用乳膏剂：
步骤一：取夫西地酸原料药超微粉碎，使平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇在氮气保护条件下，水浴加热至60℃，依次取处方量抗氧剂丁基羟基茴香醚，夫西地酸，增稠剂十六醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取纯化水，水浴加热至60℃，加入醋酸，乳化剂聚山梨酯80，搅拌溶解，以naoh水溶液调节ph值至4.0-5.5，在溶液中形成醋酸-醋酸钠缓冲对，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到含有夫西地酸的乳膏；
步骤五：取步骤四所得夫西地酸乳膏，灌装于聚乙烯软膏管中，得成品。
通过如下实验进一步说明本发明专利申请
针对夫西地酸制剂容易氧化降解及水解的缺陷，发明人拟通过在制剂体系中加入抗氧剂，水解稳定剂的方式，避免氧化和水解反应的发生，并通过选择原料药粒度和溶解，成功解决了夫西地酸溶解问题，使其以分子状态存在于乳膏中，提高了疗效。
本发明的技术方案中，虽然夫西地酸水溶性较差，但是其醇溶性较好，易溶于乙醇，但是以乙醇溶剂容易引起乳膏体系破乳，故选择同为醇溶剂，但是不会对乳膏产生破坏作用的丙二醇为有机相溶剂。并通过超微粉碎的方式，减小原料药粒径，从而增加其在丙二醇中的溶解度，圆满解决了原料药溶解的问题。
在本发明技术方案中，由于夫西地酸原料药分子结构中的酯键水解产生相应羧酸和乙酸，故拟选择添加乙酸为稳定剂，推动水解反应向左移动，并通过选择合适的水相，从而显著降低原料药的水解。水解反应方程式如下：
试验证明所得乳膏剂各项检测均符合标准，同时氧化和水解降解杂质的生成被显著抑制，大大增加及了产品的稳定性，达到了本发明最初的目的。
实验一：原料药溶解试验
本试验主要考察不同粒径夫西地酸在甘油和丙二醇中的溶解度，在氮气保护条件下，不同温度条件下，分别考察不同粒径夫西地酸原料药在甘油和丙二醇中的溶解性。
试验结果如下：
从上述试验数据可以看出，室温条件下，当原料药粒径降低至20μm及以下时，其在丙二醇中的溶解性良好，在室温时溶解度可以达到95mg/g，即0.95％。
实验二：醋酸对夫西地酸的稳定作用
本试验主要考察在不同ph值条件下，4小时后，1.0％-5.0％醋酸溶液对夫西地酸的稳定作用，经检测所用夫西地酸原料药中水解反应杂质，即杂质i，j，k，o杂质总含量为0.020％，试验条件下水解杂质含量如下所示：
如上所示，在ph4.0-6.0条件下，醋酸质量分数为2.0％-5.0％时，60℃，40℃以及室温条件下，水解反应被明显抑制，可以作为乳膏制备的稳定剂。
实验三：不同抗氧剂浓度下，药物的氧化程度。
本试验主要考察在不同抗氧剂，及抗氧剂浓度下，4小时内，抗氧剂对夫西地酸的稳定作用，经检测所用夫西地酸原料药中氧化降解杂质，即杂质a，b，c，d，e，f杂质总含量为0.011％，试验条件及对应条件下氧化杂质含量如下所示：
如上数据可以看出，0.1％-0.5％的丁基羟基茴香醚bha即对夫西地酸氧化具有明显的抑制作用。
实验四：处方筛选试验
根据经验设计如下处方组成：
制备工艺：
步骤一：取夫西地酸原料药超微粉碎，使平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇在氮气保护条件下，水浴加热至60℃，依次取处方量抗氧剂丁基羟基茴香醚，夫西地酸，增稠剂十六醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取纯化水，水浴加热至60℃，加入醋酸，乳化剂聚山梨酯80，搅拌溶解，以naoh水溶液调节ph值至4.0-5.5，在溶液中形成醋酸-醋酸钠缓冲对，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到含有夫西地酸的乳膏；
步骤五：取步骤四所得夫西地酸乳膏，灌装于聚乙烯软膏管中，得成品。
试验结果分析：上述处方1-3乳膏成型较好，色泽均匀，质地细腻，具适当粘稠性，易涂布于皮肤上，无砂砾感。
实验五：产品性质检测试验
经过上述筛选，确定了1.0％的夫西地酸乳膏剂的三个处方及制备工艺。
制备工艺：
步骤一：取夫西地酸原料药超微粉碎，使平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇在氮气保护条件下，水浴加热至60℃，依次取处方量抗氧剂丁基羟基茴香醚，夫西地酸，增稠剂十六醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取纯化水，水浴加热至60℃，加入醋酸，乳化剂聚山梨酯80，搅拌溶解，以naoh水溶液调节ph值至4.0-5.5，在溶液中形成醋酸-醋酸钠缓冲对，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到含有夫西地酸的乳膏；
步骤五：取步骤四所得夫西地酸乳膏，灌装于聚乙烯软膏管中，得成品。
刺激性试验：
新西兰兔12只，分为正常皮肤组和破损皮肤组，每组6只，雌雄各半。采用同体左右侧自身对比法。试验前24h对给药区进行脱毛处理，左右各一块，去毛范围3cm*3cm。破损皮肤组在用药部位划“井”字，以渗出血为度。左侧脱毛处分别涂抹处方1,2,3乳膏0.5g，右侧涂等量空白对照乳膏。贴敷时间4h，每天一次，连续28天。贴敷结束后，除去供试品并用温水或无刺激性溶剂清洁给药部位。每次涂药前仔细观察涂药处皮肤有无红斑或水肿，停药后继续观察3天。
试验结果，在给药期和观察期内。在全光谱灯光下肉眼观察兔给药部位与对照部位皮肤均未见红斑形成。也未见糜烂、溃疡等病变。镜下检查。正常皮肤组和破损皮肤组空白对照部位表皮完整。表面无角化不全。颗粒层、棘层厚度正常。细胞未见变性、坏死。真皮血管无明显的扩张尧充血。间质无水肿。毛囊、皮脂腺等皮肤附件结构清楚。正常皮肤组和破损皮肤组给位表皮各层组织结构完整。真皮无血管扩张、充血及炎性细胞浸润。
稳定性即耐热耐寒试验：将取上述处方1-3乳膏各适量，分别置于55℃恒温6小时及-15℃放置24小时，观察是否分层，结果如下：
实验六：6个月加速稳定性实验
取上述3个处方乳膏剂(实施例1中3个处方)及市售品立思丁2％(含包装)四组样品分别编号a-d分别置40℃±2℃，75％±5％rh条件下存储12个月，分别于0月，1月，3月，6月，12月，取样测定相关性质，得到相应数据，如下表所示：
表5实施例1中3个处方与市售制剂样品稳定性比较
由上表数据可以看出，依本发明所述实施例1-3所述处方和工艺所制备的夫西地酸乳膏，在40℃±2℃，75％±5％rh加速条件下，12个月存储后，其含量，有关物质均有所变化，但是含量均超过98.6％，水解杂质总量小于0.09％，氧化杂质总量小于0.09％，总杂质均低于0.3％；与之相对应，市售夫西地酸乳膏经过加速12个月存储后，其含量下降至约95％，水解杂质总量超过1.5％，氧化杂质总量超过1.7％，总杂质则超过5.0％。
基于如上分析，依本发明所述实施例1-3所述处方和工艺所制备的夫西地酸乳膏在加速条件下，存储12个月后的数据显示，其稳定性明显好于市售乳膏，即通过本发明的处方和工艺使夫西地酸乳膏的稳定性得到了明显增强，氧化及水解杂质的生成得到显著抑制，从而使得本发明具有突出的实质性特点和显著进步，并具有实用性。
具体实施方式
通过以下实验进一步说明本发明的有益效果。但并不局限于下述实施例，本领域的技术人员在本发明基础上所作的，不脱离本发明实质内容的等同替代或变换,亦均在本发明的保护范围之内。
实施例1夫西地酸乳膏剂制备(单位：g)
处方：
制备工艺：
步骤一：取夫西地酸原料药超微粉碎，使平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇在氮气保护条件下，水浴加热至60℃，依次取处方量抗氧剂丁基羟基茴香醚，夫西地酸，增稠剂十六醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取纯化水，水浴加热至60℃，加入醋酸，乳化剂聚山梨酯80，搅拌溶解，以naoh水溶液调节ph值至4.0-5.5，在溶液中形成醋酸-醋酸钠缓冲对，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到含有夫西地酸的乳膏；
步骤五：取步骤四所得夫西地酸乳膏，灌装于聚乙烯软膏管中，得成品。