本申请要求2016年11月18日提交的美国临时专利申请no.62/423,794的申请日的权益，其公开内容通过引用整体并入本文。
本公开总体涉及药物和生物技术领域。本公开涉及通过给予某些活性药物成分来赋予骨髓保护作用。本公开还涉及在干细胞植入之前给予活性药物成分。
工业实用性声明
本公开在医学和基因治疗领域具有工业实用性。
背景技术：
在20世纪50年代早期引入临床的6-硫鸟嘌呤(6-tg)是一种经过充分研究的具有抗癌和免疫抑制活性的嘌呤类似物。硫鸟嘌呤与次黄嘌呤和鸟嘌呤竞争次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hgprtase)，并且本身转化为6-硫鸟苷酸(tgmp)。该核苷酸在治疗剂量下达到高细胞内浓度。tgmp干扰鸟嘌呤核苷酸合成的几个点。它通过谷氨酰胺-5-磷酸核糖基焦磷酸酰胺转移酶的假反馈抑制来抑制从头嘌呤生物合成，其是嘌呤核糖核苷酸的从头途径所特有的第一酶。tgmp还通过竞争酶imp脱氢酶抑制肌苷酸(imp)向黄苷酸(xmp)的转化。tgmp一度认为是atp的重要抑制剂：gmp磷酸转移酶(鸟苷酸激酶)，但最近的结果表明情况并非如此。硫鸟苷酸通过代谢鸟嘌呤核苷酸的相同酶进一步转化为二磷酸和三磷酸，即硫鸟苷二磷酸(tgdp)和硫鸟苷三磷酸(tgtp)(以及它们的2'-脱氧核糖基类似物)。
技术实现要素：
在本公开的一个方面是造血干细胞移植后增加干细胞植入的方法，包括向人类患者给予一定剂量的硫嘌呤。在一些实施例中，硫嘌呤是6tg。在一些实施例中，任何给药周期内硫嘌呤的总剂量不超过7mg/kg。
在本公开的另一个方面是在造血干细胞移植后增加干细胞植入的方法，包括向人类患者给予范围为约0.2mg/kg/天至约0.6mg/kg/天的6tg剂量。在一些实施例中，任何给药周期内6tg的总剂量不超过7mg/kg。在一些实施例中，给药周期包括3至15个剂量。
在本公开的另一个方面是选择性消耗hprt野生型细胞的方法，包括干细胞移植后，给予人类患者剂量范围为约0.2mg/kg/天至约0.6mg/kg/天的6tg剂量。在一些实施例中，剂量范围为约0.3mg/kg/天至约0.5mg/kg/天。在一些实施例中，剂量为约0.4mg/kg/天。在一些实施例中，剂量以一周一至三次的方式给予人类患者，其方案具有选自由以下组成的组的周期：(i)每周；(ii)每隔一周；(iii)治疗一周，然后休息两周、三周或四周；(iv)治疗两周，然后休息一周、两周、三周或四周；(v)治疗三周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(vi)治疗四周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(vii)治疗五周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(viii)每月。
在一些实施例中，在1周至约4周的给药期内向患者给予约3至约10剂量的6tg。在一些实施例中，在14天期间向患者给予4或5剂量的6tg。在一些实施例中，剂量在相等的时间段间隔开。在一些实施例中，后续剂量每三天进行一次。在一些实施例中，每个剂量包含相同量的6tg。在一些实施例中，至少一个后续剂量包含比初始剂量中6tg的量大的6tg的量。在一些实施例中，该周期重复4次、6次、8次或10次。在一些实施例中，给予6tg和干细胞移植之间的时间段为约2周至约6周。在一些实施例中，所述时间段为约3周至约4周。
在一些实施例中，将6tg的后续剂量分开至少一天的时间。在一些实施例中，给予的6tg的量基于测量的hprt酶活性水平。在一些实施例中，给予的6tg的总量不超过5mg/kg。
在本公开的另一方面，提供了一种赋予骨髓保护作用的方法，包括：(i)在干细胞移植之前进行骨髓抑制调节步骤，骨髓抑制调节步骤包括以有效诱导选择性骨髓毒性的量给予6tg；(ii)在干细胞移植后进行移植后化学选择步骤，其中移植后调节步骤包括给予一剂或多剂6tg，其中一剂或多剂中的每一剂包含约0.3mg/kg至约0.5mg/kg的6tg量。在一些实施例中，移植后化学选择步骤包括在一个或多个给予周期内给予6tg。在一些实施例中，任何单一给予周期中6tg的总剂量不超过6mg/kg。在一些实施例中，总剂量不超过5mg/kg。
在一些实施例中，用于移植后调节的6tg的量为约0.4mg/kg。在一些实施例中，在1周至约4周的给药期内，在移植后向患者给予约3至约10剂量的6tg。在一些实施例中，移植后在14天的时间内向患者给予5剂量的6tg。在一些实施例中，移植后剂量在相等的时间段内间隔开。在一些实施例中，随后的移植后剂量每三天进行一次。在一些实施例中，每个移植后剂量包含相同量的6tg。在一些实施例中，至少一个随后的移植后剂量包含比初始剂量中6tg的量大的6tg的量。在一些实施例中，该周期重复4次、6次、8次或10次。在一些实施例中，在骨髓抑制调节步骤中每剂量给予的6tg的量为约0.8mg/kg至约3mg/kg。在一些实施例中，在骨髓抑制调节步骤中提供多剂量(例如，从2到约15剂量)，其中每剂量包含约0.8mg/kg至约3mg/kg的6tg。在一些实施例中，类似的剂量和/或给药周期用于骨髓抑制调节步骤和移植后调节步骤。在一些实施例中，在骨髓抑制调节步骤中使用的剂量大于在移植后调节步骤中使用的剂量。
在本公开的另一方面是增加干细胞植入的方法，包括向人类患者给予一剂或多剂6tg，其中干细胞移植后每剂中6tg的量为约0.2mg/kg/天至约0.6mg/kg/天，其中在任何给药周期中给予的6tg总量不超过7mg/kg。在一些实施例中，在给药周期中给予的6tg的总量不超过6mg/kg。在一些实施例中，在给药周期中给予的6tg的总量不超过5mg/kg。在一些实施例中，在给药周期中给予的6tg的总量不超过4.5mg/kg。在一些实施例中，每剂中6tg的量为约0.3mg/kg/天至约0.5mg/kg/天。在一些实施例中，每剂中6tg的量为约0.4mg/kg/天。在一些实施例中，在1周至约4周的给药期内向人患者给予约3和约10剂量的6tg。在一些实施例中，在14天给予期间向患者给予4或5剂量的6tg。在一些实施例中，6tg的剂量在相等的时间段内间隔开。在一些实施例中，每隔一天，即每两天，进行6tg的剂量。在一些实施例中，每三天进行6tg的剂量。在一些实施例中，每个剂量包含相同量的6tg。在一些实施例中，6tg的至少一个后续剂量包含比初始剂量中6tg的量大的6tg的量。在一些实施例中，给予人类患者6tg和干细胞移植之间的时间段为约2周至约6周。在一些实施例中，给予的6tg的量基于测量的hprt酶活性水平。
在本公开的另一个方面是在造血干细胞移植后增加干细胞植入的方法，包括向人类患者给予范围为约0.2mg/kg/天至约0.6mg/kg/天的6tg的剂量，但是在化学选择的任何单一给药周期中给予的6tg总累积剂量不超过7mg/kg。
在本公开的另一个方面是包含6tg和至少一种药学上可接受的赋形剂的口服给药制剂，其中6tg的存在量为约0.2mg至约0.6mg。
在本公开的另一方面，提供了包含6tg和至少一种药学上可接受的赋形剂的口服给药制剂，其中6tg的存在量为约12mg至约20mg。在一些实施例中，所述至少一种药学上可接受的赋形剂选自预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素钠、聚维酮、乳糖一水合物、微晶纤维素和硬脂酸镁及其组合。在一些实施例中，所述制剂包括包含6tg的速释部分和包含6tg的延长释放部分，并且其中所述延长释放部分允许在给药后约30分钟至约12小时的时间段内释放6tg。在一些实施例中，延长释放部分中6tg的量为延长释放部分重量的约50％至约75％。在一些实施例中，延长释放部分包含(i)蜡和(ii)选自由琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、硬脂酸、琥珀酸、乳酸、天冬氨酸、谷氨酸、葡萄糖酸、乙酸、甲酸、盐酸、硫酸、磷酸、亲水聚合物、聚乙二醇、ph依赖性丙烯酸酯聚合物或共聚物和成孔剂组成的基质形成组分的组。
使用遗传修饰的造血干细胞的临床功效仍然取决于赋予移植细胞选择性优势。申请人已经开发了一种在体内选择这种遗传修饰的造血干细胞的方法。不希望受任何特定理论的束缚，据信体内选择将允许基于临床需要和结果给药；治疗窗口可以基于临床评估迭代地和药理学地拨动。在某种程度上，选择是基于至少在hsc隔室中的骨髓毒性。然而，在影响hsc隔室的剂量的动物中，其他造血隔室(淋巴或骨髓)几乎没有或没有毒性。这种对hsc的选择性毒性是本公开的重要方面，并且基于各种细胞类型中的hprt水平(hsc具有高hprt活性)，尽管也可能与tpmt(解毒6tg)水平或嘌呤生物合成的总体水平有关。
具体实施方式
本公开涉及在体内选择用于修饰的干细胞的方法。本公开还涉及6tg给药方案。本公开还涉及包含6tg的口服制剂。
如本文所用，除非上下文另有明确说明，否则单数术语“一”、“一个”和“该”包括复数指示物。类似地，除非上下文另有明确说明，否则词语“或”旨在包括“和”。
如本说明书和权利要求书中所使用的，关于一个或多个元素的列表，短语“至少一个”应理解为表示选自元素列表中的任何一个或多个要素中的至少一个元素，但不一定包括元素列表中具体列出的每个元素中的至少一个元素，并且不排除元素列表中元素的任何组合。该定义还允许除了在短语“至少一个”所指的元素列表内具体标识的元素之外，可选地存在元素，无论是与具体标识的那些元素相关还是不相关。因此，作为非限制性示例，“a和b中的至少一个”(或等价地，“a或b中的至少一个”，或等价地“a和/或b中的至少一个”)在一个实施例中，可以是指至少一个，可选地包括多于一个、a且不存在b(并且可选地包括除b之外的元素)；在另一个实施例中，是指至少一个，可选地包括多于一个、b且不存在a(并且可选地包括除a之外的元素)；在又一个实施例中，是指至少一个，可选地包括多于一个和至少一个，可选地包括多于一个，b(可任选地包括其他元素)等等。
术语“包括”、“包含”、“具有”等可互换使用并具有相同的含义。类似地，“包括”、“包含”、“具有”等可互换使用并具有相同的含义。具体地，每个术语的定义与美国专利法的共同定义“包括”一致，因此解释为开放术语，意思是“至少以下”，并且也解释为不排除其他特征、限制、方面等。因此，例如，“具有部件a、b和c的设备”意味着该设备至少包括部件a、b和c。同样，短语：“涉及步骤a、b和c的方法”意味着该方法至少包括步骤a、b和c。此外，虽然本文可以按特定顺序概述步骤和过程，但技术人员将认识到，顺序步骤和过程可以变化。
如本文所用，术语“6tg”是指6-硫鸟嘌呤及其药学上可接受的盐、衍生物或类似物。
如本文所用，术语“给予”(administer，administration)，当它们应用于受试者或患者、安慰剂受试者、研究受试者、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体，是指但不限于外源配体、试剂、安慰剂、小分子、药剂、治疗剂、诊断剂或组合物，与受试者、细胞、组织、器官或生物流体等接触。“给予”可以指例如治疗、药代动力学、诊断、研究、安慰剂和实验方法。细胞的处理包括试剂与细胞的接触，以及试剂与流体的接触，其中流体与细胞接触。“给药”还包括例如细胞的体外和离体治疗，由试剂、诊断、结合组合物或另一种细胞进行。
如本文所用，术语“造血细胞移植”(hematopoieticcelltransplant,hematopoieticcelltransplantation)是指骨髓移植、外周血干细胞移植、脐静脉血液移植或任何其他多能造血干细胞来源。同样，术语“干细胞移植”或“移植”是指包含与药学上可接受的载体接触(例如悬浮在其中)的干细胞的组合物。这些组合物能够通过导管给予受试者。
如本文所用，“hprt”是由hprt1基因编码的参与嘌呤代谢的酶。hprt1位于x染色体上，因此在男性中以单拷贝形式存在。hprt1编码转移酶，其通过将5-磷酸核糖基从5-磷酸核糖基1-焦磷酸转移至嘌呤，而催化次黄嘌呤转化为肌苷单磷酸、催化鸟嘌呤转化为鸟苷单磷酸。该酶主要用于从降解的dna中挽救嘌呤以用于更新的嘌呤合成(参见图5)。
如本文所用，术语“受试者”或“患者”是指脊椎动物，包括哺乳动物。人类、智人认为是受试者或患者。
在一些实施例中，本公开涉及选择性消耗表达hprt的细胞(包括干细胞，即hprt野生型细胞)的方法。在一些实施例中，该方法包括给予一个或多个剂量的6tg，其中一个或多个剂量中的每一种包含的6tg的量小于用于治疗人类患者的癌症的6tg的量。例如，设计用于治疗人类患者癌症的剂量中的6tg的量可以为约2mg/kg至约4mg/kg。
在一些实施例中，该方法包括给予一个或多个剂量的6tg，其中一种或多种剂量中的每一种包含的6tg的量比设计用于治疗癌症的剂量中的6tg的量少至少5倍。在其他实施例中，该方法包括给予一种或多种剂量的6tg，其中一种或多种剂量中的每一种包含的6tg的量比设计用于治疗癌症的剂量中的6tg的量少至少10倍。在另外其他实施例中，该方法包括给予一种或多种剂量的6tg，其中一种或多种剂量中的每一种包含的6tg的量比设计用于治疗癌症的剂量中的6tg的量少至少15倍。在进一步的实施例中，该方法包括给予一种或多种剂量的6tg，其中一种或多种剂量中的每一种包含的6tg的量比设计用于治疗癌症的剂量中的6tg的量少至少20倍。
在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量为约0.05至约1mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量为约0.05至约0.8mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量的6tg的量为约0.05至约0.7mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.1至约0.8mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.1至约0.7mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.2至约0.7mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.15至约0.75mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.2至约0.7mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.25至约0.65mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.3至约0.5mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.35至约0.55mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.4至约0.5mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.375mg/kg/天至约0.425mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.35mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.375mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.4mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.425mg/kg/天。在其他实施例中，用于体内化学选择的给予的6tg的量为约0.45mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量小于0.8mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量小于0.75mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量小于0.7mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量小于0.65mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量小于0.6mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量小于0.55mg/kg/天。在一些实施例中，用于体内化学选择的给予患者的每剂量6tg的量小于0.5mg/kg/天。
在一些实施例中，将6tg的剂量给予于人类患者，用于体内化学选择，每周一至三次，其方案具有选自下组的周期：(i)每周；(ii)每隔一周；(iii)治疗一周，然后休息两周、三周或四周；(iv)治疗两周，然后休息一周、两周、三周或四周；(v)治疗三周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(vi)治疗四周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(vii)治疗五周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(viii)每月。
在一些实施例中，每天向人类患者给予6tg的剂量。在一些实施例中，每隔一天向人类患者给予6tg的剂量。在其他实施例中，每三天向患者给予6tg的剂量。在一些实施例中，每三天向患者给予6tg的剂量，持续约1周至约4周的时间段。在其他实施例中，每3天向患者给予6tg剂量，持续约1周至约3周的时间段。在一些实施例中，每3天向患者给予6tg剂量，持续约2周至约4周的时间段。
在一些实施例中，体内化学选择包括提供1个治疗周期，即用于选择性消耗表达hprt的细胞的治疗周期。在其他实施例中，体内化学选择包括提供1至约10个治疗周期。在其他实施例中，体内化学选择包括提供1至约8个治疗周期。在其他实施例中，体内化学选择包括提供1至约6个治疗周期。在其他实施例中，体内化学选择包括提供1至约4个治疗周期。在其他实施例中，体内化学选择包括提供1至约2个治疗周期。
在一些实施例中，在每个治疗周期中提供的剂量总数范围为约1至约15个剂量。在其他实施例中，在每个治疗周期中提供的剂量总数范围为约2至约15个剂量。在其他实施例中，在每个治疗周期中提供的剂量总数范围为约3至约15个剂量。在其他实施例中，在每个治疗周期中提供的剂量总数范围为约3至约12个剂量。在其他实施例中，在每个治疗周期中提供的剂量总数范围为约3至约10个剂量。在其他实施例中，在每个治疗周期中提供的剂量总数范围为约3至约8个剂量。在其他实施例中，在每个治疗周期中提供的剂量总数范围为约3至约6个剂量。在其他实施例中，在每个治疗周期中提供的剂量总数范围为约3至约5个剂量。
在一些实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约1mg/kg至约7mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约1mg/kg至约6mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约1mg/kg至约5mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约1.25mg/kg至约5mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约1.5mg/kg至约5mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约2mg/kg至约5mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约2mg/kg至约4.5mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约2.5mg/kg至约4.5mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约2mg/kg至约3mg/kg。在其他实施例中，每个周期给予的用于体内化学选择的总量为6tg，范围为约3mg/kg至约4mg/kg。
在一些实施例中，在任何单个周期中提供的6tg剂量可以全部包含相同量的6tg或不同量的6tg。在一些实施例中，在具有第一量的6tg的初始剂量之后，该周期中的6tg的至少一个后续剂量包含大于第一量的6tg的量。例如，如果初始剂量包含约0.4mg/kg的6tg，则周期内的第三剂量可以折衷为0.5mg/kg。在其他实施例中，任何周期中的前两个剂量的6tg包含第一量的活性剂，而后续剂量包含相对于第一量的增加量的活性剂。或者，并且在其他实施例中，任何周期中的前两个剂量的6tg包含第一量的活性剂，而后续剂量包含相对于第一量的减少量的活性剂。在一些实施例中，增加的量是额外的0.05mg/kg、0.075mg/kg或0.1mg/kg。在一些实施例中，任何周期中6tg剂量的一半可包含第一量的6tg，而另一半剂量相对于第一量的量增加。例如，一个周期中的剂量1、3和5可以包括0.35mg/kg的剂量，而剂量2和4可以包括0.4mg/kg的量。
技术人员还将理解，在任何单个周期中提供的总剂量可以在不同的周期之间变化。例如，第一周期中6tg的总剂量可以是约2mg/kg，但是第二周期(或任何子序列)中的总剂量可以比第一周期中的总剂量多25％或少25％。
在一些实施例中，每剂量给予的6tg的量基于患者hprt酶活性的确定。本领域普通技术人员将理解，具有较高hprt酶活性水平的那些可以提供具有较低量的6tg的剂量。hprt水平越高，6tg向毒性代谢物的转化越大。因此，您需要给予较低剂量才能达到相同的目标。
在开始6tg调节之前测量tpmt基因型和/或tpmt酶活性可以鉴定具有低的或不存在tpmt酶活性的个体。因此，在其他实施例中，给予的6tg的量基于硫嘌呤s-甲基转移酶(tpmt)水平或tpmt基因型。
在一些实施例中，后续周期可包含相同或不同数量的6tg剂量，或每剂量包含相同或不同量的6tg。例如，第一周期可包括五个离散的6tg剂量，而第二周期可包括六个离散的6tg剂量。作为另一个实例，第一周期中的每个剂量可以包含0.4mg/kg/天的6tg，而第二周期中的每个剂量可以包含0.45mg/kg/天的6tg。
在一些实施例中，用于体内选择的用6tg给药遵循干细胞移植。在一些实施例中，在干细胞移植后约2至约12周给予6tg。在其他实施例中，在干细胞移植后约3至约8周给予6tg。在其他实施例中，在干细胞移植后约2至约6周给予6tg。在其他实施例中，在干细胞移植后约3至约6周给予6tg。
在一些实施例中，用于体内化学选择的用6tg给药在干细胞移植后至少一天发生。在其他实施例中，用于体内化学选择的用6tg给药在干细胞移植后约1天至约90天进行。在其他实施例中，用于体内化学选择的用6tg给药在干细胞移植后约1天至约45天进行。在其他实施例中，用于体内化学选择的用6tg给药在干细胞移植后约1天至约30天进行。在其他实施例中，用于体内化学选择的用6tg给药在干细胞移植后约1天至约20天进行。在其他实施例中，用于体内化学选择的用6tg给药在干细胞移植后约1天至约14天进行。在其他实施例中，用于体内化学选择的用6tg给药在干细胞移植后约1天至约7天进行。
制剂
在本公开的另一方面是包含硫嘌呤、6tg或其他嘌呤类似物的用于给药的制剂，其中活性剂的存在量为约12mg至约20mg。
本公开的制剂还可包含一种或多种药学上可接受的赋形剂，包括但不限于：稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、调味剂、掩味剂、着色剂、ph调节剂、稳定剂、吸收促进剂、粘度调节剂、成膜聚合物、填充剂、表面活性剂、助流剂、增塑剂、防腐剂、精油和甜味剂。
本领域技术人员将能够为制剂选择合适的赋形剂或赋形剂的混合物。通常，任何制剂中包含的任何药学上可接受的赋形剂、载体和/或添加剂的量可以根据所需效果、给药途径、最终制剂的形式而变化。然而，通常，用制剂配制的药学上可接受的赋形剂、载体和/或添加剂的总量可以为制剂总重量的约1％至约99％。在其他实施例中，用制剂配制的药学上可接受的赋形剂、载体和/或添加剂的总量可以为组合物总重量的约1％至约90％。在其他实施例中，用制剂配制的药学上可接受的赋形剂、载体和/或添加剂的总量可以为制剂总重量的约1％至约80％。在其他实施例中，组合物中药学上可接受的赋形剂、载体和/或添加剂的总量可以为制剂总重量的约1％至约50％。在其他实施例中，用组合物配制的药学上可接受的赋形剂、载体和/或添加剂的总量可以为制剂总重量的约5％至约50％。仅举例来说，制剂可包含任何组合物和药学上可接受的赋形剂、载体和/或添加剂的50:50混合物。
在一些实施例中，6tg的量与药学上可接受的赋形剂或载体的量的比率为约100：1至约1：100。在一些实施例中，6tg的量与药学上可接受的赋形剂或载体的量的比率为约50：1至约1:50。在一些实施例中，6tg的量与药学上可接受的赋形剂或载体的量的比率为约25：1至约1:25。在一些实施例中，组合物的量与药学上可接受的赋形剂或载体的量的比率为约10：1至约1:10。在一些实施例中，组合物的量与药学上可接受的赋形剂或载体的量的比率为约5：1至约1：5。
可以通过任何常规途径向受试者给予根据本公开的制剂，只要该途径可用于目标组织。制剂可以方便地以剂量单位形式存在，并且可以通过药学领域熟知的任何方法制备。所有方法包括使活性药物成分(例如硫嘌呤、6tg或另一种嘌呤类似物)与赋形剂或载体结合的步骤。通常，通过将活性组分与液体载体或细碎的固体载体或这两者均匀且紧密地结合制备制剂，然后，如果需要，将产物成形为所需的剂型。在本文设想的制剂中，活性组分的含量足以产生所需的药理学作用。
通常，制剂可以以离散单元的形式提供，例如硬或软胶囊、片剂、锭剂(troches或lozenges)，每个含有预定量的活性组分；以可分散的粉末或颗粒的形式；以水液体或非水液体的溶液或悬浮液形式；以糖浆或酏剂的形式；或以水包油乳液或油包水乳液的形式。在这种固体剂型中，制剂可以与至少一种药学上可接受的赋形剂或载体混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或a)填充剂或增量剂如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)保湿剂如甘油，d)崩解剂如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂如石蜡，f)吸收促进剂如季铵化合物，g)润湿剂如乙酰醇和甘油单硬脂酸酯，h)吸收剂如高岭土和膨润土，和i)润滑剂例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠及其混合物。对于胶囊、片剂和丸剂，剂型还可包含缓冲剂。
实例1
周期1-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。可选的后续周期间隔两周。
可选的后续周期-每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
实例2
在干细胞移植后给予两轮6tg剂量用于化学选择。
第1轮包括3个周期，如下所示：
周期1-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期2-在第一个周期停止后2周开始周期2。然后每隔三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期3-周期2在第二周期结束后2周开始。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
第2轮包括3个周期，如下所述。第1轮和第2轮间隔2周。
周期4-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期5-在第一个周期结束后2周开始周期2。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期6-在第二个周期结束后2周开始周期2。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
实例3
周期1-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.3mg/kg/天的量再次给予6tg，持续19天的时间。给予总计7个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2.1mg/kg。可选的后续周期间隔两周。
可选的后续周期-每三天再次以0.3mg/kg/天的量给予6tg，持续19天的时间。给予总计7个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2.1mg/kg。
实例4
周期1-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续19天的时间。给予总计7个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2.8mg/kg。可选的后续周期间隔两周。
可选的后续周期-每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续19天的时间。给予总计7个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2.8mg/kg。
实例5
周期1-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。可选的后续周期间隔两周。
可选的后续周期-每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续19天的时间。给予7个总剂量的6tg，所给予6tg的总量为2.8mg/kg。
实例6
周期1-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续19天的时间。给予总计7个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2.8mg/kg。可选的后续周期间隔两周。
可选的后续周期-每三天再次以0.3mg/kg/天的量给予6tg，持续19天的时间。给予总计7个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2.1mg/kg。
实例7
周期1-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.3mg/kg/天的量再次给予6tg，持续19天的时间。给予总计7个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2.1mg/kg。可选的后续周期间隔两周。
可选的后续周期-每隔三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
实例8
在干细胞移植后，向患者提供两轮6tg治疗用于化学选择。在两轮化学选择后，进行另外的干细胞移植。以这种方式，第二轮化学选择不仅用于增加移植细胞的植入，而且还用于预处理患者进行第二次干细胞移植。
第1轮包括3个周期，如下所示：
周期1-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期2-在第一个周期结束后2周开始周期2。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期3-在第二个周期结束后2周开始周期2。然后每三天以0.6mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为3mg/kg。
第2轮包括3个周期，如下所述。第1轮和第2轮间隔2周。
周期4-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期5-在第一个周期停止后2周开始周期2。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期6-在第二个周期结束后2周开始周期2。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
第二次干细胞移植-第二次干细胞移植在第六个周期结束后两周进行。在第二次干细胞移植后两天，用6tg开始另外两轮的化学选择。
第3轮包括3个周期，如下所示：
周期7-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期8-在第一个周期结束后2周开始周期2。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期9-在第二个周期结束后2周开始周期2。然后每隔三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
第4轮包括如下所述的3个周期。第3轮和第4轮间隔2周。
周期10-在移植后两天给予患者6tg。给予的6tg的量为0.4mg/kg。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期11-在第一个周期结束后2周开始周期2。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
周期12-在第二个周期结束后2周开始周期2。然后每三天以0.4mg/kg/天的量再次给予6tg，持续13天的时间。给予总计5个剂量的6tg，所给予6tg的总量为2mg/kg。
附加实施例
1.一种增加干细胞植入的方法，包括在干细胞移植后给予人类患者范围为约0.2mg/kg/天至约0.6mg/kg/天的6tg剂量。
2.根据实施例1的方法，其中剂量范围为约0.3mg/kg/天至约0.5mg/kg/天。
3.根据实施例2的方法，其中剂量为约0.4mg/kg/天。
4.根据实施例1的方法，其中所述剂量按照周期方案每周一至三次给予于所述人类患者，所述周期选自由以下组成的组：(i)每周；(ii)每隔一周；(iii)治疗一周，然后休息两周、三周或四周；(iv)治疗两周，然后休息一周、两周、三周或四周；(v)治疗三周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(vi)治疗四周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(vii)治疗五周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(viii)每月。
5.根据实施例1的方法，其中在1周至约4周的给药期内给予患者约3至约10剂量的6tg。
6.根据实施例5的方法，其中在14天期间向患者给予4或5剂量的6tg。
7.根据实施例6所述的方法，其中所述剂量在相等的时间段内间隔开。
8.根据实施例7的方法，其中后续剂量每三天进行一次。
9.根据实施例6的方法，其中每个剂量包含相同量的6tg。
10.根据实施例6的方法，其中至少一种后续剂量包含大于初始剂量中6tg量的6tg量。
11.根据实施例3的方法，其中所述周期重复4次、6次、8次或10次。
12.根据实施例1的方法，其中给予人类患者6tg和干细胞移植之间的时间段为约2周至约6周。
13.根据实施例5的方法，其中所述时间段为约3周至约4周。
14.根据实施例1的方法，其中将6tg的后续剂量间隔至少一天的时间。
15.根据实施例1的方法，其中给予的6tg的量基于测量的hprt酶活性水平。
16.根据实施例4的方法，其中给予的6tg的总量不超过5mg/kg。
17.一种赋予骨髓保护作用的方法，包括：(i)在干细胞移植之前进行骨髓抑制调节步骤，骨髓抑制调节步骤包括给予一剂量或多剂量6tg以诱导选择性骨髓毒性；(ii)在干细胞移植后进行移植后化学选择步骤，其中移植后调节步骤包括给予一剂量或多剂量6tg，其中一剂量或多剂量中的每一种包含约0.3mg/kg至约0.5mg/kg的6tg量。
18.根据实施例17的方法，其中6tg的量为约0.4mg/kg。
19.根据实施例17的方法，其中在1周至约4周的给药期内向患者给予约3至约10剂量6tg。
20.根据实施例19的方法，其中在14天期间向患者给予4或5剂量的6tg。
21.根据实施例20的方法，其中所述剂量在相等的时间段内间隔开。
22.根据实施例21的方法，其中后续剂量每三天进行一次。
23.根据实施例19的方法，其中每个剂量包含相同量的6tg。
24.根据实施例19的方法，其中至少一种后续剂量包含大于初始剂量中6tg量的6tg量。
25.根据实施例19的方法，其中所述周期重复4次、6次、8次或10次。
26.一种包含6tg和至少一种药学上可接受的赋形剂的口服给药制剂，其中6tg的存在量为约12mg至约20mg。
27.根据实施例26的制剂，其中所述至少一种药学上可接受的赋形剂选自预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素钠、聚维酮、乳糖一水合物、微晶纤维素和硬脂酸镁及其组合。
28.根据实施例26的制剂，其中所述制剂包括包含6tg的速释部分和包含6tg的延长释放部分，并且其中所述延长释放部分允许在给药后约30分钟至约12小时的时间段内释放6tg。
29.根据实施例28的制剂，其中所述延长释放部分中6tg的量为延长释放部分重量的约50％至约75％。
30.根据实施例28的制剂，其中所述延长释放部分包括(i)蜡和(ii)选自由琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、硬脂酸、琥珀酸、乳酸、天冬氨酸、谷氨酸、葡萄糖酸、乙酸、甲酸、盐酸、硫酸、磷酸、亲水聚合物、聚乙二醇、ph依赖性丙烯酸酯聚合物或共聚物和成孔剂组成的基质形成组分的组。
31.一种增加干细胞植入的方法，包括在干细胞移植后给予人类患者范围为约0.2mg/kg/天至约0.6mg/kg/天的剂量的嘌呤类似物。
32.根据实施例31的方法，其中所述剂量范围为约0.3mg/kg/天至约0.5mg/kg/天。
33.根据实施例32的方法，其中剂量为约0.4mg/kg/天。
34.根据实施例31的方法，其中所述剂量按照周期方案每周一至三次给予所述人类患者，所述周期选自由以下组成的组：(i)每周；(ii)每隔一周；(iii)治疗一周，然后休息两周、三周或四周；(iv)治疗两周，然后休息一周、两周、三周或四周；(v)治疗三周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(vi)治疗四周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(vii)治疗五周，然后休息一周、两周、三周、四周或五周；(viii)每月。
35.根据实施例31的方法，其中在约1周至约4周的给药期内向患者给予约3至约10个剂量的嘌呤类似物。
36.根据实施例35的方法，其中在14天的时间内向患者给予4或5剂量的嘌呤类似物。
37.根据实施例36的方法，其中所述剂量在相等的时间段内间隔开。
38.根据实施例37的方法，其中后续剂量每三天进行一次。
39.根据实施例31的方法，其中嘌呤类似物是6tg。
40.一种包含嘌呤类似物和至少一种药学上可接受的赋形剂的制剂，其中所述嘌呤类似物以约8mg至约240mg的量存在。
41.根据实施例40的制剂，其中所述量为约12mg至约20mg。
42.根据实施例40的制剂，其中所述嘌呤类似物是6tg。
43.根据实施例40的制剂，其中所述制剂是固体剂型。
44.根据实施例40的制剂，其中所述制剂是液体剂型。
本说明书中提及和/或在申请数据表中列出的所有美国专利、美国专利申请公开、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利出版物均通过引用整体并入本文。如果需要，可以修改实施例的各方面以采用各种专利、申请和出版物的概念来提供其他实施例。
尽管已经参考多个说明性实施例描述了本公开，但是应当理解，本领域技术人员可以设计出落入本公开的原理的精神和范围内的许多其他修改和实施例。更具体地，在前述公开内容、附图和所附权利要求的范围内，在不脱离本公开的精神的情况下，可以对主题组合布置的组成部件和/或布置进行合理的变化和修改。除了组成部件和/或布置的变化和修改之外，其替代使用对于本领域技术人员而言也是显而易见的。