纳米颗粒制剂及其制备和使用方法与流程

本申请要求2016年10月10日提交的美国临时专利申请号62/406,367的优先权，其内容通过引用整体并入本文。以ascii文本文件提交序列表以下提交的ascii文本文件的内容整体通过引用并入本文：序列表的计算机可读形式(crf)(文件名638772021740seqlist.txt，记录日期：2017年10月9日，大小：6kb)。本公开涉及包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白和(c)生物活性多肽。
背景技术：
：已经开发了白蛋白类(基于白蛋白的，albumin-based)纳米颗粒组合物作为用于递送疏水性药物如紫杉烷的药物递送系统。参见，例如，美国专利号5,916,596；6,506,405；6,749,868；6,537,579；7,820,788；和7,923,536。是紫杉醇的白蛋白稳定化纳米颗粒制剂，于2005年在美国获得批准并随后在其他各个国家被批准用于治疗转移性乳腺癌。其最近还在美国、欧洲和其他全球市场中被批准用于治疗局部晚期或转移性非小细胞肺癌和转移性胰腺癌。贝伐单抗(bevacizumab)，以商品名销售，是抗血管生成抗体，其靶向血管内皮生长因子a(vegf-a)并且对于治疗多种癌症是有效的。先前已经尝试将白蛋白类纳米颗粒组合物的治疗潜力与抗体疗法相结合(参见，例如，美国专利号9,427,477；美国专利号9,446,148；和pct申请号wo2014/055415)。但是仍然需要有效的纳米颗粒生产以及含有疏水性药物和免疫治疗剂的更高品质的白蛋白类纳米颗粒。本文提及的所有出版物、专利、专利申请和公开的专利申请的公开内容均整体通过引用并入本文。技术实现要素：本文描述了包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白和(c)与白蛋白缀合(conjugated)的生物活性多肽的纳米颗粒。在一些实施方式中，生物活性多肽是抗体或其片段。在一些实施方式中，生物活性多肽与纳米颗粒的白蛋白缀合(共价或非共价)。在一些实施方式中，生物活性多肽嵌入纳米颗粒中。本文进一步描述了制备这种纳米颗粒组合物的方法。在一个方面，提供了包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)与白蛋白缀合的生物活性多肽。在一些实施方式中，生物活性多肽与白蛋白共价交联。在一些实施方式中，生物活性多肽通过化学交联剂与白蛋白共价交联。在一些实施方式中，生物活性多肽通过二硫键与白蛋白共价交联。在一些实施方式中，生物活性多肽通过非共价交联剂与白蛋白缀合。在一些实施方式中，生物活性多肽包含非共价交联剂的第一组分，白蛋白包含非共价交联剂的第二组分，并且其中第一组分特异性结合第二组分。在一些实施方式中，非共价交联剂包含核酸分子，其中至少一部分核酸分子是互补的。另一方面，提供了包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)包含疏水性药物的实体核芯(solidcore)、(b)与纳米颗粒表面缔合(associated)的白蛋白、和(c)嵌入纳米颗粒表面或者实体核芯的生物活性多肽。在一些实施方式中，生物活性多肽嵌入纳米颗粒的表面中。在一些实施方式中，生物活性多肽嵌入实体核芯中。在上述纳米颗粒的一些实施方式中，组合物中至少75％的生物活性多肽与纳米颗粒缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含至少约100个生物活性多肽。在上述纳米颗粒的一些实施方式中，生物活性多肽是抗体或其片段。在一些实施方式中，生物活性多肽是贝伐单抗、曲妥珠单抗(trastuzumab)、bgb-a317或托珠单抗(tocilizumab)。在上述纳米颗粒的一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中疏水性药物与生物活性多肽的重量比为约1：1至约100：1。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中白蛋白与生物活性多肽的重量比为约1：1至约1000：1。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：1至约20：1。在一些实施方式中，通过反相高效液相色谱(hplc)测定疏水性药物的重量，并且通过尺寸排阻色谱(sec)测定生物活性多肽和白蛋白的重量；或者通过反相高效液相色谱(hplc)测定疏水性药物的重量，通过尺寸排阻色谱(sec)测定白蛋白的重量，并且通过酶联免疫吸附分析(elisa)测定生物活性多肽的重量。在上述纳米颗粒的一些实施方式中，组合物还包含不与纳米颗粒缔合的生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物的纳米颗粒部分中至少约40％的白蛋白通过二硫键交联。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物还包含不与纳米颗粒缔合的白蛋白。在一些实施方式中，疏水性药物是紫杉烷或莫司(limus)药物。在一些实施方式中，疏水性药物是紫杉醇。在一些实施方式中，疏水性药物是雷帕霉素。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：(i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白和生物活性多肽；(ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。在一些实施方式中，在水溶液中生物活性多肽与白蛋白缀合。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：(i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；(ii)将生物活性多肽加入乳液中；(iii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：(i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；(ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂以获得蒸发后的悬浮液；和(iii)将生物活性多肽加入蒸发后的悬浮液中，从而形成组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：(i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；(ii)从乳液中除去至少部分但不是全部所述一种或多种有机溶剂，得到乳液-悬浮液中间体；(iii)将生物活性多肽加入乳液-悬浮液中间体；(iv)从包含生物活性多肽的乳液-悬浮液中间体中除去另一部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：(i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中白蛋白用交联剂部分衍生化；(ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂以获得蒸发后的悬浮液，和(iii)将生物活性多肽加入蒸发后的悬浮液中，其中生物活性多肽用交联剂部分衍生化，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括用非衍生化白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的衍生化白蛋白。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：(i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白与生物活性多肽缀合；(ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括用未缀合的白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的生物活性多肽缀合的白蛋白。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽，包括将生物活性多肽与包含疏水性药物和白蛋白的纳米颗粒缀合。在上述方法的一些实施方式中，该方法还包括对组合物进行无菌过滤。在上述方法的一些实施方式中，生物活性多肽是抗体或其片段。在一些实施方式中，生物活性多肽是贝伐单抗、曲妥珠单抗、bgb-a317或托珠单抗。本文进一步提供了通过上述方法中的任一种方法获得的组合物。本文还提供了药物组合物，其包含任一种上述组合物和药学上可接受的赋形剂。另一方面，提供了治疗个体的疾病的方法，包括给个体给予有效量的任何上述组合物。在一些实施方式中，该疾病是癌症。在一些实施方式中，个体是人。本发明的这些和其他方面和优点将由随后的详细描述和所附权利要求变得显而易见。应理解，本文所述的各种实施方式的一个、一些或所有性质可以组合以形成本发明的其他实施方式。附图说明图1显示了示例通过在水溶液中包含生物活性多肽和白蛋白来制备包含本文所述纳米颗粒的组合物的方法的一个实施方式的示意图。图2显示了示例通过将生物活性多肽添加到包含水溶液(包含白蛋白和水)和有机溶液(包含一种或多种有机溶剂和疏水性药物)的粗混合物中来制备包含本文所述纳米颗粒的组合物的方法的一个实施方式的示意图。图3显示了示例通过向包含水溶液(包含白蛋白和水)和有机溶液(包含一种或多种有机溶剂和疏水性药物)的乳液中添加生物活性多肽来制备包含本文所述纳米颗粒的组合物的方法的一个实施方式的示意图。图4显示了通过将生物活性多肽添加至蒸发后的纳米颗粒悬浮液(其中所述纳米颗粒包含白蛋白和疏水性药物)来制备包含本文所述纳米颗粒的组合物的方法的一个实施方式。图5显示了示例通过将生物活性多肽添加到包含白蛋白和疏水性药物的预制纳米颗粒中来制备包含本文所述纳米颗粒的组合物的方法的一个实施方式的示意图。图6显示了示例通过将生物活性多肽添加到纳米颗粒悬浮液(其中纳米颗粒包含衍生化白蛋白和疏水性药物)中来制备包含本文所述纳米颗粒的组合物的方法的一个实施方式的示意图。生物活性多肽与衍生化的、与纳米颗粒缔合的白蛋白缀合。图7a是通过光学显微术获取的的图像，该用100％缓冲剂(含有磷酸钠缓冲剂和α,α-海藻糖，但不包括聚山梨醇酯20)重构成10mg/ml，并且在室温下温育24小时后未经调节ph(ph测为6.4)。图7b是通过光学显微术获取的的图像，该用20％缓冲剂(含有磷酸钠缓冲剂和α,α-海藻糖，但不包括聚山梨醇酯20)和80％生理盐水重构成10mg/ml，并且在58℃下温育24小时后ph被调节至5。图7c是通过光学显微术获取的的图像，该用100％缓冲剂(含有磷酸钠缓冲剂和α,α-海藻糖以及聚山梨醇酯20)重构成10mg/ml，并且在室温下温育24小时后未经调节ph(ph测为6.8)。图8a显示了在纳米颗粒制备过程中各种时间点在没有白蛋白的情况下贝伐单抗的尺寸排阻色谱测量结果。图8b显示了在制备过程的各步骤之后回收的贝伐单抗(在没有白蛋白的情况下)相对于在制备过程开始时添加的初始浓度的分数。图9a显示了在纳米颗粒制备过程中各种时间点带有10％人白蛋白的贝伐单抗的尺寸排阻色谱测量结果。图9b显示了当贝伐单抗被提供在初始水溶液中时，在制备过程的各步骤之后回收的贝伐单抗(带有0％、1％、2.5％、5％或10％人白蛋白)相对于在制备过程开始时添加的初始浓度的分数。图9c显示了当贝伐单抗被提供在初始水溶液中时，在制备过程的各步骤之后剩余的贝伐单抗单体(带有0％、1％、2.5％、5％或10％人白蛋白)相对于在制备过程开始时添加的初始浓度的分数。图10a显示了当贝伐单抗与5％人白蛋白一起被提供在初始水溶液中或在白蛋白水溶液和有机溶液高压均质化后被提供给乳液时，在制备过程的各步骤后回收的贝伐单抗相对于贝伐单抗提供量的分数。图10b显示当贝伐单抗与5％人白蛋白被提供在初始水溶液中或在白蛋白水溶液和有机溶液高压均质化后被提供给乳液时，在制备过程的各步骤后剩余的贝伐单抗单体相对于贝伐单抗提供量的分数。图11显示了在不同盐水浓度下，nab-紫杉醇(“abx”)、不同比例(“bev：abx(8:10)”和“bev：abx(8:10)”。)的贝伐单抗和nab-紫杉醇的混合物、不同比例(“tras：abx(8:10)”和“tras：abx(8:10)”)的曲妥珠单抗和nab-紫杉醇的混合物、和单独贝伐单抗(“bev”)的纳米颗粒尺寸(通过动态光散射测定)。图12显示在给予贝伐单抗和nab-紫杉醇的混合物(“ab160”)、nab-紫杉醇和贝伐单抗——同一天给予(“bev12+abx30——同一天”)或相隔一天(“bev12+abx30——相隔1天”)、单独贝伐单抗(“bev12”)、单独nab-紫杉醇(“abx30”)或媒介对照(“媒介”)七天后肿瘤体积的百分比变化。图13显示抗体与游离人血清白蛋白(hsa)缀合的示意图。图14a-14c显示曲妥珠单抗和sm(peg)6活化的曲妥珠单抗物质的解卷积质谱。图14a显示曲妥珠单抗的质谱。图14b显示采用曲妥珠单抗：连接体比例1：5的、sm(peg)6活化的曲妥珠单抗的质谱。图14c显示采用曲妥珠单抗：连接体比例1:10的、sm(peg)6活化的曲妥珠单抗的质谱。图15显示1：1曲妥珠单抗-hsa缀合物、曲妥珠单抗和hsa的sec色谱图。图16显示曲妥珠单抗-hsa缀合产物的sds-page凝胶(4-12％)。图17显示曲妥珠单抗-hsa缀合和曲妥珠单抗缀合产物的天然凝胶。图18显示活化的抗体与分离的nab-紫杉醇颗粒缀合的示意图。图19显示活化的抗体和硫醇化的分离的nab-紫杉醇颗粒缀合的示意图。图20显示来自分离的nab-紫杉醇纳米颗粒或nab-紫杉醇制剂(abx)和曲妥珠单抗的缀合反应的样品的3-8％tris-乙酸酯sdspage凝胶。图21显示使用无铜点击化学法缀合抗体和分离的nab-紫杉醇颗粒的示意图。图22显示了分离的nab-紫杉醇颗粒的硼酸修饰的示意图。图23显示利用dna交联剂缀合活化的抗体和活化的分离的nab-紫杉醇颗粒的示意图。图24显示来自纳武单抗(nivolumab)和活化的纳武单抗物质的lc-ms分析的解卷积质谱。图25a-25d显示了在治疗给予后的多个时间点小型肿瘤研究的肿瘤体积百分比变化。图25a和25b显示在第0天治疗给予后第7天小型肿瘤研究的肿瘤体积百分比变化。图23c-d显示在第0天和第7天治疗给予后第14天小型肿瘤研究的肿瘤体积百分比变化。图26a-26b显示在治疗给予后的多个时间点大型肿瘤研究的肿瘤体积百分比变化。图26a显示在第0天治疗给予后第7天大型肿瘤研究的肿瘤体积百分比变化。图26b显示在第0天和第7天治疗给予后第14天大型肿瘤研究的肿瘤体积百分比变化。图27a-27b显示在治疗给予后的多个时间点bt-474异种移植肿瘤的肿瘤体积百分比变化。图27a显示在第0天治疗给予后第7天bt-474异种移植肿瘤的肿瘤体积百分比变化。图27b显示在第0天和第7天治疗给予后第14天bt-474异种移植肿瘤的肿瘤体积百分比变化。图28a-28d显示了在治疗给予后的多个时间点bt-474异种移植肿瘤的肿瘤体积百分比变化。图28a和28b显示在第0天治疗给予后第7天bt-474异种移植肿瘤的肿瘤体积百分比变化。图28c和28d显示在第0天和第7天治疗给予后第14天bt-474异种移植肿瘤的肿瘤体积百分比变化。具体实施方式本申请提供了包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽(如抗体或其片段)。例如，在一些实施方式中，提供了包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物(如紫杉烷，例如紫杉醇)、(b)白蛋白(如人白蛋白或衍生化白蛋白)、和(c)生物活性多肽(如抗体，如治疗性抗体)。在一些实施方式中，组合物还包含另一种治疗剂。在一些实施方式中，组合物还包含与组合物的纳米颗粒部分不缔合的白蛋白和/或生物活性多肽。在某些实施方式中，生物活性多肽被嵌入纳米颗粒中。嵌入的生物活性多肽可以嵌入纳米颗粒的表面白蛋白中，或者可以嵌入纳米颗粒的疏水核芯中。生物活性多肽可以通过如下被嵌入纳米颗粒中：在纳米颗粒的一个或多个制备阶段中将生物活性多肽加入，而非将生物活性多肽与预形成的冻干纳米颗粒组合物(即混合物)混合。如本文进一步详细描述，在某些实施方式中，纳米颗粒悬浮液(其中纳米颗粒含有白蛋白和疏水性药物)的制备包括i)形成含有疏水性药物的有机溶剂和含有白蛋白的水溶液的乳液(例如，通过高压均质化)；和ii)从乳液中除去至少一部分有机溶剂(例如，通过蒸发)以形成纳米颗粒悬浮液。在某些实施方式中，制备过程可以进一步包括配制纳米颗粒悬浮液(例如，通过添加白蛋白或水)和/或冻干该悬浮液以形成纳米颗粒组合物。在一些实施方式中，将生物活性多肽形成乳液之前添加至一种或多种纳米颗粒组合物前体如含有白蛋白的水溶液，添加至形成的乳液(在除去有机溶剂之前或期间)，或者在除去有机溶剂后添加至悬浮液(即“蒸发后的悬浮液”)。在某些实施方式中，生物活性多肽与纳米颗粒缀合，例如通过交联剂，该交联剂可以是共价交联剂或非共价交联剂。交联可以将生物活性多肽的(一个)区段与白蛋白的(一个)区段连接，从而将生物活性多肽与白蛋白(并因此与纳米颗粒)缔合。在一些实施方式中，交联剂在生物活性多肽和白蛋白之间提供共价连接。也就是说，交联剂与生物活性多肽共价连接并与白蛋白共价连接，从而在这两个实体之间提供共价桥。在某些方面，交联剂在生物活性多肽和白蛋白之间提供非共价连接。例如，白蛋白可以与第一交联剂组分共价缀合，并且生物活性多肽可以与第二交联剂组分共价缀合，其中第一交联剂组分和第二交联剂组分结合在一起(例如，互补核酸分子，如互补dna)。本申请还提供制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白和生物活性多肽；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)将生物活性多肽添加到乳液中；iii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂以获得蒸发后的悬浮液；和iii)将生物活性多肽加入蒸发后的悬浮液中，从而形成组合物。在某些实施方式中，在纳米颗粒制备过程中水溶液中包含的至少一部分白蛋白与生物活性多肽缀合。例如，在一些实施方式中，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白与生物活性多肽缀合；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。在某些实施方式中，在纳米颗粒制备过程中水溶液中包含的至少一部分白蛋白被衍生化(例如，通过白蛋白硫醇化或将非共价交联剂的第一区段共价附接至白蛋白)。在一些实施方式中，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白被衍生化；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，得到蒸发后的悬浮液；iii)将生物活性多肽加入蒸发后的悬浮液中。在一些实施方式中，生物活性多肽被衍生化。例如，在一些实施方式中，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白被衍生化；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，得到蒸发后的悬浮液；iii)将衍生化的生物活性多肽加入蒸发后的悬浮液中。在某些实施方式中，通过将生物活性多肽与预形成的纳米颗粒缀合来制备纳米颗粒，所述预形成的纳米颗粒可以是冻干的或在悬浮液中(例如，重构悬浮液——其中纳米颗粒之前是冻干的，或在蒸发后的纳米颗粒悬浮液中)。本文公开的组合物(如药物组合物)可用于治疗各种疾病，如癌症。因此，本申请提供了包含纳米颗粒的组合物(如药物组合物)——所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白和(c)生物活性多肽，以及利用这种组合物治疗疾病(包括癌症)的方法。本文进一步提供组合治疗，其包括给予有效量的本文所述的组合物和有效量的另一治疗剂(如化学治疗剂)。还提供了包含本文所述的组合物的套组(kit)、医药、药物、应用组合物、单位剂型、药物组合物(如冻干的组合物)。下文提供的章节标题仅用于组织目的，并不旨在限制本发明的范围。定义如本文所用，“治疗(treatment或treating)”是获得有益或期望的结果(包括临床结果)的途径。出于本发明的目的，有益或期望的临床结果包括但不限于以下一种或多种：缓解由疾病引起的一种或多种症状、降低疾病程度、稳定疾病(例如，预防或延迟疾病的恶化)、预防或延迟疾病的扩散(例如，转移)、预防或延迟疾病的复发、延迟或减缓疾病的进展、改善疾病状态、提供疾病缓解(部分或全部)、减少治疗疾病所需的一种或多种其他药物的剂量、延迟疾病的进展、提高生活质量和/或延长生存期。“治疗”还包括减轻疾病(如癌症)的病理后果。本发明的方法考虑这些方面的治疗中的任何一个或多个。术语“个体”是指哺乳动物，包括但不限于人、牛、马、猫、犬、啮齿动物或灵长类动物。在一些实施方式中，个体是人。在一些实施方式中，人是男性。在一些实施方式中，人是女性。如本文所用，术语“抗体”包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、cdr嫁接抗体、人源化抗体、fab、fab'、f(ab')2、fv、二硫键连接的fv、scfv、单结构域抗体(dab)、双抗体、多特异性抗体、双特异性抗体、抗个体型抗体、双特异性抗体、其功能活性表位结合片段、双功能杂合抗体、单链抗体和含fc多肽，如免疫粘附(immunoadhesion)。在一些实施方式中，抗体可以是任何重链同种型的(例如，igg、iga、igm、ige或igd)。在一些实施方式中，抗体可以是任何轻链同种型的(例如κ或γ)。抗体可以是非人的(例如，来自小鼠、山羊或任何其他动物)、全人的、人源化的或嵌合的。在一些实施方式中，抗体是衍生化抗体。如本文所用，“有风险”的个体是有发展疾病(如癌症)的风险的个体。“有风险”的个体可具有或可不具有可检测的疾病，并且在本文所述的治疗方法之前可已显示或可未显示可检测的疾病。“有风险”表示个体具有一种或多种所谓的风险因子，该风险因子是本文描述的与疾病发展相关的可测量参数。具有这些风险因子中的一种或多种的个体比没有这些风险因子(一种或多种)的个体具有更高的发展疾病的概率。“辅助环境(adjuvantsetting)”是指个体具有疾病历史并且总体上(但不是一定)已对包括但不限于手术(例如，手术切除)、放疗和/或化疗的治疗有响应的临床环境。然而，由于其有疾病历史，这些个体被认为有发展该疾病的风险。“辅助环境”中的治疗或给药是指后续的治疗模式。风险程度(例如，当处于辅助环境中的个体被认为是“高风险”或“低风险”时)取决于若干因素，最常见的是首次治疗时的疾病程度。如本文所用，“生物活性多肽”是指包含通过肽(酰胺)键连接的两个或更多个氨基酸的分子，其包含的一部分具有与配体或受体结合相关的活性或与抑制结合配体或受体的另一剂相关的活性。生物活性多肽包括但不限于寡肽、肽、多肽适体、蛋白质、多聚体蛋白、融合蛋白、抗体或其片段。在一些实施方式中，生物活性多肽包含用于与白蛋白-疏水性药物纳米颗粒缔合的部分。“新辅助环境(neoadjuvantsetting)”指的是其中方法在主要/决定性治疗之前进行的临床环境。如本文所用，“延迟”疾病的发展意味着推迟、阻碍、减缓、延缓、稳定化和/或延后疾病的发展。该延迟可以是不同的时间长度——取决于疾病的历史和/或被治疗的个体。对于本领域技术人员显而易见的是，充分或显著的延迟实际上可以包括预防，因为个体不会发展该疾病。“延迟”疾病发展的方法，与不采用该方法相比，是在给定时间框架内降低疾病发展概率和/或在给定时间框架内降低疾病程度的方法。这种比较一般基于临床研究，利用统计学上显著数量的对象。疾病发展可以是利用标准方法可检测的，该标准方法包括但不限于计算机化轴向断层扫描术(cat扫描)、磁共振成像(mri)、腹部超声、凝血测试、动脉造影或活组织检查。发展还可以指代这样的疾病进展：可以是最初检测不到的，并且包括发生、复发和发作。本文使用的术语“有效量”是指足以治疗指定障碍、状况或疾病如改善、缓和、减轻和/或延迟其一种或多种症状的化合物或组合物量。关于诸如癌症的疾病，有效量包括足以引起肿瘤缩小和/或降低肿瘤生长速率(如抑制肿瘤生长)或预防或延迟其他不期望的癌症细胞增殖的量。在一些实施方式中，有效量是足以延迟癌症发展的量。在一些实施方式中，有效量是足以预防或延迟复发的量。有效量可以在一次或多次给药中被给予。在癌症的情况下，药物或组合物的有效量可以：(i)减少上皮样细胞的数量；(ii)减小肿瘤尺寸；(iii)在一定程度上抑制、延缓、减缓以及优选地阻止癌细胞浸润到周围器官中；(iv)抑制(例如，在一定程度上缓慢以及优选地阻止)肿瘤转移；(v)抑制肿瘤生长；(vi)预防或延迟肿瘤的发生和/或复发；和/或(vii)在一定程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。如本文所用，“组合治疗”是指第一药剂与另一种治疗剂联合给药。“与……联合”是指一种治疗方式再加另一种治疗方式的给予，如向同一个体给予本文所述的纳米颗粒组合物，还给予另一种治疗剂。因此，“与……联合”是指在向个体给予一种治疗方式之后、期间或之前递送另一治疗方式。如本文所用，术语“同时给予”是指组合治疗中的第一治疗和第二治疗以不超过约15分钟的时间间隔被给予，如不超过约10、5或约1分钟中的任一者。当同时给予第一和第二治疗时，第一和第二治疗可以被包含在相同的组合物中(例如，包含第一和第二治疗两者的组合物)或在单独的组合物中(例如，第一治疗被包含在一个组合物中，并且第二治疗被包含在另一组合物中)。如本文所用，术语“顺序给予”是指组合治疗中的第一治疗和第二治疗以超过约15分钟的时间间隔被给予，如超过约20分钟或更多分钟、30分钟或更多分钟、40分钟或更多分钟、50分钟或更多分钟、60分钟或更多分钟、2小时或更多小时、4小时或更多小时、6小时或更多小时、12小时或更多小时、或24小时或更多小时中的任一种。可以先给予第一治疗或第二治疗。第一种和第二种治疗被包含在单独的组合物中，该单独的组合物可以被包含在相同或不同的包装或套组中。如本文所用，术语“同步给予”是指组合治疗中第一治疗的给予和第二治疗的给予彼此重叠。如本文所用，术语“nab”表示纳米颗粒白蛋白结合型。例如，nab-紫杉醇是紫杉醇的纳米颗粒白蛋白结合型制剂。如本文所用的术语“乳液”是指具有在连续水相中分散的有机相的液体，所述有机相包含具有约1微米或更小的平均直径的液滴。术语“疏水性药物”是指在ph7、约25℃下的水中具有约1mg/ml或更低溶解度的药物。应理解，本文描述的本发明的方面和实施方式包括“由(方面和实施方式)组成”和/或“主要由(方面和实施方式)组成”。这里对“约”某值或参数的提及包括(和描述)针对该值或参数本身的变动。例如，涉及“约x“的描述包括对”x“的描述。另外，”约“在任何一系列数值之前的使用包括”约“该系列中所述的每个数值。例如，涉及“约x、y或z”的描述意图描述“约x、约y或约z”。如本文和所附权利要求中所用，单数形式“一”，“或”和“该”包括复数指代，除非上下文另有明确说明。包含纳米颗粒的组合物本文所述的组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，本文所述的组合物还包含不与纳米颗粒缔合的白蛋白和/或生物活性多肽。在一些实施方式中，本文所述的组合物还包含另一种治疗剂。在一些实施方式中，本文所述的组合物还包含药学上可接受的载体。本文描述的纳米颗粒包含疏水性药物。在一些实施方式中，纳米颗粒包含实体核芯，该实体核芯包含疏水性药物。如本文所用，“核芯”是指纳米颗粒的内部部分，基本上所有与纳米颗粒缔合的疏水性药物都位于其中。在一些实施方式中，纳米颗粒包含实体核芯，该实体核芯包含疏水性药物。在一些实施方式中，纳米颗粒包含疏水性药物的实体核芯。在一些实施方式中，纳米颗粒中的疏水性药物按重量计占纳米颗粒的大于约50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％。在一些实施方式中，纳米颗粒具有非聚合物基质。在一些实施方式中，纳米颗粒包含基本上不含聚合物材料(如聚合物基质)的疏水性药物的实体核芯。在一些实施方式中，纳米颗粒中的疏水性药物的实体核芯还包含部分生物活性多肽。在一些实施方式中，纳米颗粒包含实体核芯，该实体核芯包含疏水性药物和部分生物活性多肽。如本文所述，纳米颗粒包含白蛋白。本发明中考虑白蛋白包括但不限于人白蛋白、人血清白蛋白、重组白蛋白及其衍生物。在一些实施方式中，白蛋白是人白蛋白。在一些实施方式中，白蛋白是人血清白蛋白。在一些实施方式中，人白蛋白是人血清白蛋白。在一些实施方式中，白蛋白是重组白蛋白。在一些实施方式中，白蛋白是人重组白蛋白。在一些实施方式中，重组白蛋白是人重组白蛋白。白蛋白，如人血清白蛋白(hsa)，是高度可溶的球状蛋白质。例如，人血清白蛋白由585个氨基酸组成，分子量约为66kda。hsa是人血浆中最丰富的蛋白质，并且占人血浆胶体渗透压的70-80％。hsa的氨基酸序列含有总共17个二硫桥，一个自由巯基(cys34)和一个色氨酸(trp214)。静脉内应用hsa溶液已被提出用于预防和治疗低血容量休克(参见，例如，tullis、jama、237、355-360、460-463(1977)；houseretal.、surgery、gynecologyandobstetrics、150、811-816(1980))和与交换输血(exchangetransfusion)联合用于治疗新生儿高胆红素血症(参见，例如，finlayson、seminarsinthrombosisandhemostasis、6、85-120、(1980))。白蛋白，如人血清白蛋白(hsa)，具有多个疏水结合位点。hsa具有8个脂肪酸结合位点并结合多种疏水性药物，例如紫杉烷类，包括中性和带负电的疏水性化合物(goodmanetal.、thepharmacologicalbasisoftherapeutics、9thed、mcgraw-hillnewyork(1996))。已经提出在hsa的亚结构域iia和iiia中的两个高亲和力结合位点，其是表面附近具有带电荷的赖氨酸和精氨酸残基充当极性配体特征的附接点的高度伸长的疏水袋(pockets)(参见，例如，参见，例如，fehskeetal.、biochem.pharmcol.、30、687-92(198a)、vorum、dan.med.bull.、46、379-99(1999)、kragh-hansen、dan.med.bull.、1441、131-40(1990)、curryetal.、nat.struct.biol.、5、827-35(1998)、sugioetal.、protein.eng.、12、439-46(1999)、heetal.、nature、358、209-15(199b)、和carteretal.、adv.protein.chem.、45、153-203(1994))。已显示紫杉醇和丙泊酚(propofol)结合hsa(参见，例如，paaletal.、eur.j.biochem.、268(7)、2187-91(200a)、purcelletal.、biochim.biophys.acta、1478(a)、61-8(2000)、altmayeretal.、arzneimittelforschung、45、1053-6(1995)、和garridoetal.、rev.esp.anestestiol.reanim.、41、308-12(1994))。此外，已显示多西紫杉醇与人血浆蛋白结合(参见，例如，urienetal.、invest.newdrugs、14(b)、147-51(1996))。考虑其他白蛋白，例如牛血清白蛋白。这种非人白蛋白的使用可以是适当的，例如在非人哺乳动物中使用这种组合物的境况下，如兽医(包括家养宠物和农业境况)。在本公开的范围内还考虑衍生化的白蛋白。如本文所用，“衍生化白蛋白”是在白蛋白表达后已被修饰的白蛋白。在一些实施方式中，衍生化白蛋白是与化学交联剂缀合的白蛋白。在一些实施方式中，衍生化白蛋白是与化学交联剂部分缀合的白蛋白，所述化学交联剂部分与缀合至生物活性多肽的另一化学交联剂部分具有反应性(如特异性反应性)。例如，在一些实施方式中，衍生化白蛋白与包含炔部分的化学交联剂缀合，并且衍生化生物活性多肽与包含叠氮部分的化学交联剂缀合。在一些实施方式中，衍生化白蛋白与包含叠氮部分的化学交联剂缀合，并且衍生化生物活性多肽与包含炔部分的化学交联剂缀合。可用于缔合白蛋白和生物活性多肽的其他成对的交联部分包括但不限于应变炔(变形炔，strainedalkyne)和叠氮、应变炔和硝酮(如1,3-硝酮)、应变烯烃和叠氮、应变烯烃和四嗪、以及应变烯烃和四唑。在一些实施方式中，衍生化白蛋白被硫醇化，例如通过使白蛋白的一种或多种胺反应形成巯基(例如，但使胺与2-亚氨基硫烷(2-iminothiolane)(traut试剂)或其他硫醇化试剂反应)。在一些实施方式中，衍生化白蛋白被共价附接至非共价交联剂(如核酸分子，例如dna)的第一组分，其中生物活性多肽可以被交联至可以特异性结合交联剂的第一组分的非共价交联剂的第二组分(例如，与交联剂的第一组分的核酸链互补的核酸链)。在一些实施方式中，衍生化白蛋白是衍生化的人白蛋白。在一些实施方式中，衍生化白蛋白是衍生化的人血清白蛋白。在一些实施方式中，衍生化的人白蛋白是衍生化的人血清白蛋白。在一些实施方式中，衍生化白蛋白是衍生化的重组白蛋白。在一些实施方式中，衍生化白蛋白是衍生化的人重组白蛋白。在一些实施方式中，衍生化的重组白蛋白是衍生化的人重组白蛋白。在一些实施方式中，白蛋白具有可形成二硫键的巯基。在一些实施方式中，白蛋白与另一白蛋白形成分子间二硫键。在一些实施方式中，白蛋白与生物活性多肽形成分子间二硫键。在一些实施方式中，组合物的纳米颗粒部分中至少约5％(包括例如至少约10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％)的白蛋白交联(例如通过一个或多个二硫键交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒部分，其中组合物的纳米颗粒部分中至少约40％、50％、60％、70％或80％的白蛋白通过二硫键交联。在一些实施方式中，组合物的纳米颗粒部分中约40％、50％、60％、70％或80％的白蛋白通过二硫键交联。在一些实施方式中，组合物的纳米颗粒部分中约40％至约80％、约40％至约70％、或约50％至约80％的白蛋白通过二硫键交联。在某些实施方式中，通过将生物活性多肽附接到白蛋白上的硫醇基团(例如cys34)，将纳米颗粒中的白蛋白与生物活性多肽缀合。在一些实施方式中，包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒比包含疏水性药物和白蛋白而没有与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒具有更少的自由硫醇。在一些实施方式中，包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒上的自由硫醇，与包含疏水性药物和白蛋白而没有与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒相比，减少约5％或更多(如约10％、15％、20％、25％、30％、40％、45％或50％或更多)。在一些实施方式中，包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒比包含疏水性药物和白蛋白而没有与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒具有更少的自由表面硫醇。在一些实施方式中，包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒的表面上的自由硫醇，与包含疏水性药物和白蛋白而没有与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒相比，减少约5％或更多(如约10％、15％、20％、25％、30％、40％、45％或50％或更多)。在一些实施方式中，与包含疏水性药物和白蛋白而没有与白蛋白结合的生物活性多肽的纳米颗粒相比，包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒具有更少的白蛋白单体(即，未与另一白蛋白、生物活性多肽或任何其他多肽缀合的白蛋白)。在一些实施方式中，与包含疏水性药物和白蛋白而没有与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒所缔合的白蛋白单体量相比，与包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽的纳米颗粒缔合的白蛋白单体量减少约5％或更多(如约10％、15％、20％、25％、30％、40％、45％或50％或更多)。在一些实施方式中，纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽，其中纳米颗粒上的生物活性多肽的生物活性部分保持暴露。例如，在一些实施方式中，生物活性多肽被定位在纳米颗粒上以允许部分生物活性多肽结合配体或受体。在一些实施方式中，纳米颗粒包含具有治疗活性的生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物中至少约15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的生物活性多肽与纳米颗粒缔合。在一些实施方式中，组合物中约15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％的生物活性多肽与纳米颗粒缔合。在一些实施方式中，组合物中约15％至约90％、约20％至约85％、约30％至约80％、约40％至约80％、约50％至约75％、约60％至约85％、约65％至约80％、或约70％至约80％的生物活性多肽与纳米颗粒缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含至少约50、100、150、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1050、1100、1150或1200个生物活性多肽。在一些实施方式中，纳米颗粒包含约50、100、150、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1050、1100、1150或1200个生物活性多肽。在一些实施方式中，纳米颗粒包含约100至约900、约100至约500、约150至约700、约100至约800、约300至约600、约200至约900、约500至约1000、约500至约800、约600至约800个生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，其中每个纳米颗粒的生物活性多肽平均数量为至少约50、100、150、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1050、1100、1150或1200个生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，其中每个纳米颗粒的生物活性多肽平均数量为约50、100、150、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1050、1100、1150或1200个生物活性多肽。组合物中的纳米颗粒中疏水性药物与生物活性多肽的重量比可以针对预期的治疗用途优化。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中疏水性药物与生物活性多肽的重量比为约1：1至200：1之间(如约1：1至约100：1、约1：1至约80：1、约1：1至约60：1、约1：1至约50：1、约2：1至约40：1、约4：1至约30：1、或约6：1至约约20：1之间)。在一些实施方式中，疏水性药物的重量通过反相高效液相色谱(rp-hplc)测定。在一些实施方式中，生物活性多肽的重量通过尺寸排阻色谱(sec)或酶联免疫吸附分析(elisa)测定。elisa允许直接测量与纳米颗粒缔合的生物活性多肽，并且还允许区分功能性生物活性多肽与非功能性(例如，变性)生物活性多肽。可以基于疏水性药物、白蛋白、生物活性多肽、另一治疗剂或其组合的存在来优化组合物中的纳米颗粒中白蛋白与疏水性药物的重量比。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：1至约50：1、约1：1至约20：1、约1：1至约18：1、约1：1至约15：1、约1：1至约12：1、约1：1至约10：1、约1：1至约9：1、约1：1至约8：1、约1：1：1至约7：1、约1：1至约6：1、约1：1至约5：1、约1：1至约4：1、约1：1至约3：1、或约1：1至2：1。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中白蛋白与疏水性药物的重量比小于约18：1、15：1或10：1。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：1至约18：1、约2：1至约15：1、约3：1至约13：1、约4：1至约12：1、约5：1至约10：1。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：2、1：3、1：4、1：5、1：6、1：7、1：8、1：9、1：10、1：11、1：12、1：13、1：14或1：15。在一些实施方式中，白蛋白的重量通过尺寸排阻色谱(sec)测定。在一些实施方式中，疏水性药物的重量通过反相高效液相色谱(rp-hplc)测定。可以基于疏水性药物、白蛋白、生物活性多肽、另一治疗剂或其组合的存在来优化组合物中的纳米颗粒中生物活性多肽与白蛋白的重量比。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中生物活性多肽与白蛋白的重量比为约1：1至约1：1000、约1：1至约1：800、约1：1至约1：600、约1：1至约1：500、约1：1至约1：400、约1：1至约1：300、约1：1至约1：250、约2：1至约1：200、约2：1至约1：150、约4：1至约1：100、或约4：1至约1：50。在一些实施方式中，白蛋白的重量通过尺寸排阻色谱(sec)测定。在一些实施方式中，生物活性多肽的重量通过尺寸排阻色谱(sec)或通过酶联免疫吸附分析(elisa)测定。在一些实施方式中，组合物包含具有如下平均直径的纳米颗粒：不大于约1000纳米(nm)，如不大于约900、800、700、600、500、400、300、200和100nm中的任一种。在一些实施方式中，纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，纳米颗粒的平均直径不大于约150nm。在一些实施方式中，纳米颗粒的平均直径不大于约100nm。在一些实施方式中，纳米颗粒的平均直径为约20至约400nm。在一些实施方式中，纳米颗粒的平均直径为约40至约200nm。在一些实施方式中，纳米颗粒是可无菌过滤的。可以通过动态光散射(dls)测量纳米颗粒的平均直径。在一些实施方式中，本文所述组合物中的纳米颗粒的平均直径不大于约200nm，包括例如不大于约190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70或60nm中的任一种。在一些实施方式中，组合物中至少约50％(例如至少约60％、70％、80％、90％、95％或99％中的任一种)的纳米颗粒的直径不大于约200nm，包括例如不大于约190、180、170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70或60nm中的任一种。在一些实施方式中，组合物中至少约50％(例如，至少60％、70％、80％、90％、95％或99％中的任一种)的纳米颗粒落在约20至约400nm的范围内，包括例如约20至约200nm、约40至约200nm、约30至约180nm、以及约40至约150、约50至约120、和约60至约100nm。以下进一步详述含有疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽的纳米颗粒的示例性实施方式。这种纳米颗粒可包括嵌入纳米颗粒中(如嵌入纳米颗粒的表面或核芯中)的生物活性多肽、或包含与纳米颗粒中的白蛋白缀合(例如，通过共价或非共价交联剂)的生物活性多肽的纳米颗粒。生物活性多肽和纳米颗粒上的白蛋白的缔合可以是非共价的或共价的。在一些实施方式中，纳米颗粒包含与白蛋白缔合的疏水性药物，其中生物活性多肽与白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，生物活性多肽嵌入纳米颗粒的表面。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯，其中生物活性多肽与白蛋白非共价地缔合。在一些实施方式中，生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白非共价地缔合。在一些实施方式中，白蛋白是衍生化白蛋白，其中白蛋白被非共价结合至生物活性多肽的部分衍生化。在一些实施方式中，生物活性多肽包含与白蛋白非共价结合的部分。在一些实施方式中，生物活性多肽包含与衍生化白蛋白非共价结合的部分。本领域普通技术人员基于本公开将理解，以上关于纳米颗粒描述的特征可以适用于下面描述的具体实施方式。具有嵌入型生物活性多肽的纳米颗粒在本发明范围内考虑包含疏水性药物的纳米颗粒，其中疏水性药物与白蛋白缔合(如吸附或涂覆有白蛋白)或其中疏水性药物与白蛋白和生物活性多肽(如抗体或其片段)缔合(如吸附或涂覆有白蛋白和生物活性多肽(如抗体或其片段))。在某些实施方式中，生物活性多肽被包含在一种或多种纳米颗粒前体中，如下文进一步详细讨论。在制备过程中，至少一部分生物活性多肽与纳米颗粒缔合，使得生物活性多肽嵌入纳米颗粒的表面或纳米颗粒的疏水核芯。例如，在一些实施方式中，纳米颗粒包含与白蛋白缔合的疏水性药物。在一些实施方式中，纳米颗粒包含与白蛋白缔合的疏水性药物的实体核芯。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯。在一些实施例中，纳米颗粒包含基本上涂覆有白蛋白的疏水性药物。在一些实施方式中，纳米颗粒包含基本上涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白和生物活性多肽的疏水性药物。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白和生物活性多肽的疏水性药物的实体核芯。在一些实施方式中，纳米颗粒包含疏水性药物的实体核芯，其中生物活性多肽与疏水性药物的实体核芯的表面缔合，并且其中疏水性药物的实体核芯涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，纳米颗粒包含疏水性药物的实体核芯，其中部分生物活性多肽嵌入疏水性药物的实体核芯，并且其中疏水性药物的实体核芯涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，与纳米颗粒缔合的生物活性多肽的约1％或更多(如约2％、3％、4％、5％、10％、15％、20％或25％或更多)嵌入纳米颗粒的实体核芯。在一些实施方式中，约25％或更少(如约20％、15％、10％、5％、4％、3％、2％或1％或更少)的生物活性多肽嵌入纳米颗粒的实体核芯。在一些实施方式中，约1％至约25％之间(如约1％至约2％、约2％至约3％、约3％至约4％、约4％至约5％、约5％至约10％、约10％至约15％、约15％至约20％、或约20％至约25％之间)的生物活性多肽嵌入纳米颗粒的实体核芯。在一些实施方式中，纳米颗粒包含与白蛋白缔合的疏水性药物，其中生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白缔合。如本文所述，生物活性多肽和白蛋白之间的接触(如缔合)可以例如在纳米颗粒的外部白蛋白表面处、在纳米颗粒的白蛋白涂层内、在纳米颗粒的内部白蛋白表面处(如疏水性药物的实体核芯与白蛋白的涂层之间的界面)、或其组合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物，其中生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯，其中生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，生物活性多肽与疏水性药物和白蛋白缔合。因此，例如，在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯，其中至少一部分生物活性多肽与疏水性药物的实体核芯缔合，并且其中至少一部分生物活性多肽与白蛋白缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯，其中至少一部分生物活性多肽嵌入疏水性药物的实体核芯，并且其中至少一部分生物活性多肽与白蛋白缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯，其中至少一部分生物活性多肽部分地嵌入疏水性药物的实体核芯并且部分地与白蛋白缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯，其中至少一个生物活性多肽的疏水部分嵌入疏水性药物的实体核芯中，并且其中同一生物活性多肽的第二部分与白蛋白缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯，其中生物活性多肽的疏水部分嵌入疏水性药物的实体核芯中，并且其中同一生物活性多肽的亲水部分与白蛋白缔合。具有缀合型生物活性多肽的纳米颗粒在某些实施方式中，生物活性多肽(如抗体或其片段)与纳米颗粒(例如，纳米颗粒的白蛋白组分)缀合。在一些实施方式中，生物活性多肽和白蛋白的缔合是直接缔合(如生物活性多肽直接结合白蛋白)。例如，在某些实施方式中，生物活性多肽直接结合白蛋白，例如通过形成二硫键。在一些实施方式中，缀合通过交联剂发生，该交联剂可与生物活性多肽和白蛋白共价键合。在一些实施方式中，生物活性多肽和白蛋白的缔合是共价缔合(如使用化学连接体缀合生物活性多肽和白蛋白)。在某些实施方式中，交联剂包括与白蛋白共价结合的第一组分和与多肽共价结合的第二组分，并且第一组分和第二组分通过非共价相互作用特异性结合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含与白蛋白缔合的疏水性药物，其中生物活性多肽与白蛋白共价缔合(即，生物活性多肽与白蛋白缀合)。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯，其中生物活性多肽与白蛋白共价缔合。在一些实施方式中，生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合。在一些实施方式中，生物活性多肽通过直接共价结合而与纳米颗粒上的白蛋白缔合。例如，在一些实施方式中，通过在生物活性多肽和白蛋白之间形成二硫键，生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，生物活性多肽通过白蛋白上的自由硫醇(如cys34)与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过在生物活性多肽和白蛋白上的自由硫醇(如cys34)之间形成二硫键，生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，生物活性多肽包含自由硫醇，如自由半胱氨酸，其共价结合(通过二硫键)至白蛋白上的自由硫醇，如自由半胱氨酸(例如cys34)。在一些实施方式中，白蛋白是衍生化的白蛋白，并且白蛋白上的硫醇是衍生的(例如，衍生自胺，通过使用硫醇化试剂如2-亚氨基硫烷)。在一些实施方式中，生物活性多肽通过化学交联剂(如非零长度交联剂或任何适当长度的交联剂)与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，交联剂是单官能交联剂。在一些实施方式中，交联剂是双官能交联剂。在一些实施方式中，生物活性多肽通过多于一种化学交联剂与纳米颗粒上的多于一种白蛋白缔合。适于通过与氨基酸残基或蛋白质缔合的其他官能团(如聚糖)共价附接或形成复合物来缔合两种或更多种蛋白质(如共价缀合或形成复合物)的交联剂是本领域已知的。例如，在一些实施方式中，交联剂可以与白蛋白上的自由硫醇(如cys34或衍生化硫醇)附接，其中交联剂的另一末端可用于结合生物活性多肽。在一些实施方式中，交联剂可以与白蛋白上的自由硫醇附接，其中交联剂的另一末端与生物活性多肽结合。在一些实施方式中，交联剂可以附接至白蛋白上的自由硫醇(如cys34)，其中交联剂的另一末端可用于结合或被结合到与生物活性多肽附接的交联剂。在一些实施方式中，交联剂可以与白蛋白上的自由胺(如赖氨酸残基)附接。在一些实施方式中，交联剂可以与白蛋白上的自由赖氨酸附接，其中交联剂的另一末端与生物活性多肽结合。在一些实施方式中，交联剂可以与白蛋白上的自由赖氨酸附接，其中交联剂的另一末端可用于与附接生物活性多肽的交联剂结合。在一些实施方式中，交联剂可以与白蛋白上的自由赖氨酸附接，其中交联剂的另一末端可用于结合或被结合与生物活性多肽附接的交联剂。在一些实施方式中，交联剂包含马来酰亚胺官能团(如马来酰亚胺基丙酸(mpa)或γ-马来酰亚胺-丁酰胺(gmba))。在一些实施方式中，交联剂包含琥珀酰亚胺酯基团，如n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)酯。在一些实施方式中，交联剂的长度由桥接交联剂的化学反应性基团的聚合物如聚乙二醇(peg)决定。例如，在一些实施方式中，交联剂是nhs-(聚乙二醇)n-马来酰亚胺(sm(peg)n)，其中n是2或更多。例如，在一些实施方式中，交联剂是(sm(peg)2)、(sm(peg)4)、(sm(peg)6)、(sm(peg)8)、(sm(peg)12)或(sm(peg)24)。在一些实施方式中，交联剂是4-(n-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯(smcc)。在一些实施方式中，交联剂包含硼部分，如硼酸酯(其可以衍生自硼酸)。硼酸可以与碳水化合物如糖基化生物活性蛋白质(如糖基化抗体)上的聚糖反应，以形成硼酸酯。在一些实施方式中，交联剂包含硼酸和n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)酯。在一些实施方式中，交联剂包含连接硼酸和nhs酯的化学桥，其中该桥决定交联剂的长度。示例性交联剂可通过例如如下形成：将4-(2-羧乙基)苯硼酸、n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)和n,n-二环己基碳二亚胺在dmf中组合以形成活化的酯交联剂。nhs部分可以与白蛋白反应，并且硼酸部分可以与生物活性多肽上的聚糖反应。在一些实施方式中，交联剂是点击化学(例如，无铜点击化学)交联剂。例如，在一些实施方式中，交联剂包含三唑部分，其可以通过如下形成：使环辛烯衍生物部分(如二苯并环辛炔(dbco)部分)与叠氮化物反应——通过应变促进的炔叠氮化物环加成反应。白蛋白或抗体可以与环辛烯衍生物部分共价连接，例如通过与桥接至环辛烯衍生物部分的nhs(例如，dbco-pegn-nhs，其中n为2或更多)反应，并且另一交联实体(即，白蛋白或抗体)可以通过叠氮化物官能化。在一些实施方式中，交联剂包含共价附接至白蛋白的第一组分、和共价附接至生物活性多肽的第二组分，其中第一组分和第二组分彼此特异性结合。例如，第一组分或第二组分可以是单链多核苷酸，如dna；或合成聚合物，例如吗啉基。在一些实施方式中，交联剂包含两条基本上互补的单链多核苷酸链，其中一条单链多核苷酸与生物活性多肽缀合，并且另一条单链多核苷酸与白蛋白缀合。例如，在一些实施方式中，第一组分或第二组分包含含有多个“ca”重复序列的单链dna，如根据seqidno：1(5’-cacacacacacacacacaca-3’)的分子，并且另一组分(即，第一组分或第二组分)包含含有多个“gt”重复序列的单链dna分子，如根据seqidno：2(5’-gtgtgtgtgtgtgtg-3’)的dna分子。在白蛋白和生物活性多肽组合后，dna链特异性结合，从而将白蛋白与生物活性多肽缀合。当与白蛋白和生物活性多肽缀合时，交联剂的长度可以是任何适当的长度。在一些实施方式中，交联剂的长度计入(accountsfor)已经缀合的、两个最初单独的交联剂，例如，附接于白蛋白的交联剂与附接于生物活性多肽的交联剂缔合或缀合，例如通过通过点击化学或互补dna碱基配对。在一些实施方式中，交联剂的长度为约200埃或更小，如约175、150、125、100、90、80、70、60、50、40、30、20或10埃或更小中的任一种。在一些实施方式中，交联剂的长度为约10埃或更大，如约20、30、40、50、60、70、80、90、100、125、150、175、200埃或更大中的任一种。在一些实施方式中，交联剂的长度为约8.3埃、约17.6埃、约24.6埃、约32.5埃、约39.2埃、约53.4埃或约95.2埃。在一些上述实施方式中，纳米颗粒上的白蛋白是衍生化的白蛋白(如用化学交联剂衍生化的白蛋白)。在一些实施方式中，纳米颗粒上衍生化白蛋白的量小于纳米颗粒上总白蛋白的约50％、25％、20％、15％、10％或5％。在一些实施方式中，纳米颗粒上衍生化白蛋白的量小于纳米颗粒上总白蛋白的约5％、4％、3％、2％或1％。在一些实施方式中，纳米颗粒上衍生化白蛋白的量为纳米颗粒上总白蛋白的约25％、24％、23％、22％、21％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％。在一些实施方式中，纳米颗粒上衍生化白蛋白的量为纳米颗粒上的总白蛋白的约1％至约3％、约1％至约5％、约1％至约7％、约1％至约10％、约3％至约7％、约3％至约10％、或约5％至约15％之间。在一些实施方式中，生物活性多肽与一个或多个交联剂缀合。在一些实施方式中，生物活性多肽与1至20个交联剂缀合，如1至10、1至5、1至4、1至3、2至5、3至5、和2至4个交联剂中的任一种。在一些实施方式中，生物活性多肽与少于10个交联剂缀合，如少于9、8、7、6、5、4、3和2个交联剂中的任一种。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物中每个生物活性多肽的交联剂平均数量是约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个交联剂。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物中每个生物活性多肽的交联剂平均数量为约1至10个交联剂，如1至5、1至4、1至3、2至5、3至5、和2至4个交联剂中的任一种。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物中每个生物活性多肽的交联剂平均数量小于约10个交联剂，如小于约9、8、7、6、5、4、3和2个交联剂中的任一种。在一些实施方式中，生物活性多肽与一个或多个白蛋白缀合。在一些实施方式中，生物活性多肽与1至10个白蛋白缀合，如1至3、1至4、1至5、1至6、2至4、和2至5个白蛋白中的任一种。在一些实施方式中，生物活性多肽与少于10个白蛋白缀合，如少于9、8、7、6、5、4、3和2个白蛋白中的任一种。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物中每个生物活性多肽的缀合白蛋白平均数量为约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物中每个生物活性多肽的缀合白蛋白平均数量为约1至10个，如1至5、1至4、1至3、2至5、3至5、和2至4个中的任一种。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物中每个生物活性多肽的缀合白蛋白平均数量小于约10个，如小于约9、8、7、6、5、4、3和2个中的任一种。纳米颗粒组合物本文考虑包含纳米颗粒的组合物可包含本文所述纳米颗粒的任何组合。此外，在一些实施方式中，纳米颗粒可包含本文所述特征的任何组合。如本文所述，在一些实施方式中，组合物包含在组合物的纳米颗粒和非纳米颗粒部分中的白蛋白。在一些实施方式中，本文所述的组合物还包含不与组合物中的纳米颗粒缔合的白蛋白。本文所述的组合物中的白蛋白的量将根据组合物中的其他组分(如疏水性药物或生物活性多肽)而变化。在一些实施方式中，组合物包含的白蛋白量足以使疏水性药物在水性悬浮液中稳定，例如，以稳定的胶体悬浮液(如纳米颗粒的稳定悬浮液)的形式。在一些实施方式中，白蛋白的量使疏水性药物在水性介质中的沉降速率降低。对于含颗粒的组合物，白蛋白的量还取决于纳米颗粒的尺寸和密度。在一些实施方式中，组合物中至少约50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的白蛋白在组合物的非纳米颗粒部分中。如果疏水性药物在水性介质中长时间保持悬浮(如没有可见的沉淀或沉降)，如至少约0.1、0.2、0.25、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、24、36、48、60或72小时中的任一种，则其在水性悬浮液中“稳定”。悬浮液总体上但不是一定适合给予个体(如人)。悬浮液的稳定性总体上(但不是一定)在储存温度(如室温(如20-25℃)或冷藏条件(如4℃))下被评价。例如，如果在制作悬浮液后约15分钟对于裸眼或在光学显微镜下以400倍放大率观察时悬浮液没有表现出絮凝或颗粒聚集，则悬浮液在储存温度下是稳定的。还可以在加速测试条件下评价稳定性，例如在40℃或高于约40℃的温度下。白蛋白在组合物的非纳米颗粒部分中的使用可以避免使用有毒溶剂(或表面活性剂)来溶解疏水性药物和/或纳米颗粒，从而可以减少疏水性药物给予个体(如人)的一种或多种副作用。因此，在一些实施方式中，本文所述的组合物基本上不含(如，不含)表面活性剂，如cremophor(包括cremophor(basf))。在一些实施方式中，组合物基本上不含(如，不含)表面活性剂(例如聚山梨醇酯，如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80)。如果组合物中的cremophor或表面活性剂的量小于约0.02％，则组合物“基本上不含cremophor”或“基本上不含表面活性剂”。“基本上不含cremophor”或“基本上不含表面活性剂”是指具有少于约0.01％的cremophor或表面活性剂。在一些实施方式中，组合物具有小于约0.005％、小于约0.0001％、小于约0.00005％、或小于约0.00001％的cremophor或表面活性剂。在一些实施方式中，白蛋白在组合物中的存在量足以使疏水性药物在一定浓度下在水性悬浮液中稳定。例如，组合物中疏水性药物的浓度为约0.1至约100mg/ml，包括例如约0.1至约50mg/ml、约0.1至约20mg/ml、约1至约10mg/ml、约2mg/ml至约8mg/ml、约4至约6mg/ml、约5mg/ml中的任一种。在一些实施方式中，疏水性药物的浓度为至少约1.3mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、和50mg/ml中的任一种。在一些实施方式中，白蛋白以避免使用表面活性剂(如cremophor、聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80)的量存在，使得组合物不含或基本上不含表面活性剂(如cremophor、聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80)。在一些实施方式中，组合物基本上不含(或不含)磷酸钠。如本文所用，“基本上不含磷酸钠”是指具有少于约0.1mg/ml的磷酸钠。在一些实施方式中，组合物具有少于约0.05mg/ml、少于约0.01mg/ml、少于约0.005mg/ml、少于约0.001mg/ml、或少于约0.0001mg/ml的磷酸钠。在一些实施方式中，组合物包含磷酸钠。在一些实施方式中，组合物基本上不含(或不含)海藻糖。如本文所用，“基本上不含海藻糖”是指具有少于约1mg/ml的海藻糖。在一些实施方式中，组合物具有少于约0.5mg/ml、少于约0.1mg/ml、少于约0.05mg/ml、少于约0.01mg/ml、或少于约0.001mg/ml的海藻糖。在一些实施方式中，组合物包含海藻糖。在一些实施方式中，液体形式的纳米颗粒组合物包含约0.1％至约50％(w/v)(例如约0.5％(w/v)、约5％(w/v)、约10％(w/v)、约15％(w/v)、约20％(w/v)、约30％(w/v)、约40％(w/v)或约50％(w/v))的白蛋白。在一些实施方式中，液体形式的纳米颗粒组合物包含约0.5％至约10％(w/v)的白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含在组合物的纳米颗粒和非纳米颗粒部分中的疏水性药物。在一些实施方式中，组合物中不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％或20％的疏水性药物在组合物的非纳米颗粒部分中。在一些实施方式中，组合物中至少约50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的疏水性药物在组合物的纳米颗粒部分中。在一些实施方式中，组合物包含在组合物的纳米颗粒和非纳米颗粒部分中的生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物还包含不与纳米颗粒缔合的生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物中不大于1％、2％、3％、4％、5％、10％或20％的生物活性多肽在组合物的非纳米颗粒部分中。在一些实施方式中，组合物中至少约50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的生物活性多肽在组合物的纳米颗粒部分中。组合物中白蛋白与疏水性药物的重量比可以基于疏水性药物、白蛋白、生物活性多肽、另一治疗剂或其组合的存在来优化。在一些实施方式中，组合物中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：1至约50：1、约1：1至约20：1、约1：1至约18：1、约1：1至约15：1、约1：1至约12：1、约1：1至约10：1、约1：1至约9：1、约1：1至约8：1、约1：1至约7：1、约1：1至约6：1、约1：1至约5：1、约1：1至约4：1、约1：1至约3：1、或约1：1至2：1。在一些实施方式中，组合物中白蛋白与疏水性药物的重量比小于约18：1、15：1或10：1。在一些实施方式中，组合物中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：1至约18：1、约2：1至约15：1、约3：1至约13：1、约4：1至约12：1、约5：1至约10：1。在一些实施方式中，组合物中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：2、1：3、1：4、1：5、1：6、1：7、1：8、1：9、1：10、1：11、1：12、1：13、1：14、或1：15。在一些实施方式中，白蛋白的重量通过尺寸排阻色谱(sec)测定。在一些实施方式中，疏水性药物的重量通过反相高效液相色谱(rp-hplc)测定。组合物中疏水性药物与生物活性多肽的重量比可以基于疏水性药物、白蛋白、生物活性多肽、另一治疗剂或其组合的存在来优化。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物与生物活性多肽的重量比为约1：1至200：1之间(如1：1至约100：1、约1：1至约80：1、约1：1和约60：1、约1：1和约50：1、约2：1和约40：1、约4：1和约30：1、或约6：1至约20：1之间)。在一些实施方式中，疏水性药物的重量通过反相高效液相色谱(rp-hplc)测定。在一些实施方式中，生物活性多肽的重量通过尺寸排阻色谱(sec)或酶联免疫吸附分析(elisa)测定。组合物中生物活性多肽与白蛋白的重量比可以基于疏水性药物、白蛋白、生物活性多肽、另一治疗剂或其组合的存在来优化。在一些实施方式中，组合物中生物活性多肽与白蛋白的重量比为约1：1至约1：1000、约1：1至约1：800、约1：1至约1：600、约1：1至约1：500、约1：1至约1：400、约1：1至约1：300、约1：1至约1：250、约2：1至约1：200、约2：1至约1：150、约4：1至约1：100、或约4：1至约1：50。在一些实施方式中，白蛋白的重量通过尺寸排阻色谱(sec)测定。在一些实施方式中，生物活性多肽的重量通过尺寸排阻色谱(sec)或通过酶联免疫吸附分析(elisa)测定。疏水性药物本文所述的疏水性药物可以是例如在约25℃下在水(ph7)中的溶解度小于约1mg/ml的药物，包括例如溶解度小于约0.5、0.2、0.1、0.05、0.02或0.01mg/ml中任一种的药物。在一些实施方式中，疏水性药物是抗肿瘤剂。在一些实施方式中，疏水性药物是化学治疗剂。适当的疏水性药物包括但不限于紫杉烷(如紫杉醇、多西紫杉醇、沃塔紫杉醇(ortataxel)和其他紫杉烷)、莫司药物(如西罗莫司(sirolimus))、17-烯丙基氨基格尔德霉素(17-aag)或硫代秋水仙碱二聚体(如idn5404)。在一些实施方式中，疏水性药物是紫杉烷。在一些实施方式中，紫杉烷是紫杉醇。在一些实施方式中，疏水性药物是紫杉醇。在一些实施方式中，疏水性药物是莫司药物，其包括雷帕霉素(西罗莫司)及其类似物。莫司药物的实例包括但不限于替西罗莫司(temsirolimus)(cci-779)、依维莫司(everolimus)(rad001)、地磷莫司(ridaforolimus)(ap-23573)、deforolimus(mk-8669)、佐他莫司(zotarolimus)(abt-578)、吡美莫司(pimecrolimus)和他克莫司(tacrolimus)(fk-506)。在一些实施方式中，莫司药物选自替西罗莫司(cci-779)、依维莫司(rad001)、地磷莫司(ap-23573)、deforolimus(mk-8669)、佐他莫司(abt-578)、吡美莫司和他克莫司(fk-506)。在一些实施方式中，疏水性药物是雷帕霉素(西罗莫司)。因此，在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中紫杉烷涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中紫杉烷涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与紫杉烷缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中紫杉烷涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中紫杉烷涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与紫杉烷和白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中紫杉醇涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与紫杉醇和白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中紫杉烷涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中紫杉烷涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与紫杉烷缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中紫杉烷涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉烷、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中紫杉烷涂覆有白蛋白，并且其中抗体与紫杉烷和白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中紫杉醇涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中所述抗体与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中抗体与白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中所述抗体与紫杉醇和白蛋白缔合。因此，在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中莫司药物涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中莫司药物涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与莫司药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中莫司药物涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中莫司药物涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与莫司药物和白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)生物活性多肽，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中生物活性多肽与雷帕霉素和白蛋白缔合。因此，在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中莫司药物涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中所述莫司药物涂覆有白蛋白，并且其中所述抗体与莫司药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中所述莫司药物涂覆有白蛋白，并且其中所述抗体与白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)莫司药物、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中所述莫司药物涂覆有白蛋白，并且其中所述抗体与莫司药物和白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中抗体与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中抗体与白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)抗体，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中抗体与雷帕霉素和白蛋白缔合。生物活性多肽在一些实施方式中，生物活性多肽是抗体或其片段。在一些实施方式中，生物活性多肽是特异性识别抗原的抗体或其片段。在一些实施方式中，生物活性多肽选自：阿仑单抗(alemtuzumab)、贝伐单抗、博纳吐单抗(blinatumomab)、本妥昔单抗(brentuximab)、西妥昔单抗、地诺单抗(denosumab)、丹尼托昔单抗(dinutuximab)、度伐单抗(durvalumab)、伊匹单抗(ipilimumab)、纳武单抗、奥滨尤妥珠单抗(obinutuzumab)、奥法木单抗(ofatumumab)、帕尼单抗(panitumumab)、派姆单抗(pembrolizumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、曲妥珠单抗、度伐单抗、和利妥昔单抗。在一些实施方式中、生物活性多肽是bgb-a317(beigene)。在一些实施方式中，生物活性多肽是托珠单抗。在一些实施方式中，本文所述组合物的生物活性多肽(如纳米颗粒上的生物活性多肽)能够在个体(例如人)中引发免疫应答。可优化本文所述的组合物以平衡个体中的adcc和cdc效应。在一些实施方式中，生物活性多肽在个体中引发抗体依赖性细胞介导的(adcc)效应。在一些实施方式中，生物活性多肽在个体中引发补体依赖性细胞毒性(cdc)效应。在一些实施方式中，包含纳米颗粒的组合物在个体中引发adcc效应。在一些实施方式中，包含纳米颗粒的组合物在个体中引发cdc效应。在一些实施方式中，包含纳米颗粒的组合物在个体中引发adcc和cdc效应。在一些实施方式中，生物活性多肽特异性识别(例如结合)抗原。在一些实施方式中，生物活性多肽是特异性结合α-胎蛋白(afp)、癌胚抗原(cea)、癌抗原125(ca-125)、粘蛋白1(muc1)、上皮肿瘤抗原(eta)、黑素瘤相关抗原(mage)、程序性细胞死亡蛋白1(pd-1)、程序性死亡配体1(pd-l1)、酪氨酸酶、表皮生长因子受体(egfr)、血管内皮生长因子(vegf)、ny-eso-1、gp100、bcr-abl、egfr、psa、pmsa、her2/neu、htert、mart1、trp-1、trp-2、ras、braf、brca1、brca2、flt3、il-6受体或smad4的抗体。在一些实施方式中，抗原是肿瘤抗原。肿瘤相关抗原包括但不限于可充当靶向癌组织(例如癌细胞)或肿瘤相关组织(例如肿瘤相关基质)的基础的肿瘤组分。例如，肿瘤相关抗原包括但不限于α-胎蛋白(afp)、癌胚抗原(cea)、癌抗原125(ca-125)、粘蛋白1(muc1)、上皮肿瘤抗原(eta)、黑素瘤相关抗原(mage)、程序性细胞死亡蛋白1(pd-1)、程序性死亡配体1(pd-l1)、酪氨酸酶、表皮生长因子受体(egfr)、血管内皮生长因子(vegf)、ny-eso-1、gp100、bcr-abl、egfr、psa、pmsa、her2/neu、htert、mart1、trp-1、trp-2、ras、braf、brca1、brca2、flt-3和smad4。在一些实施方式中，生物活性多肽包含用于化学缀合的位点。在一些实施方式中，生物活性多肽包含交联剂缔合位点，如氨基酸残基或聚糖结构。在一些实施方式中，生物活性多肽还包含化学连接体。在一些实施方式中，生物活性多肽是衍生化的生物活性多肽(例如包含化学交联剂部分的抗体)。在一些实施方式中，衍生化的生物活性多肽是与化学交联剂(或其部分)缀合的生物活性多肽，该化学交联剂与缀合至白蛋白的另一化学交联剂(或其部分)具有反应性(例如特异性反应性)。例如，在一些实施方式中，衍生化的生物活性多肽与包含炔部分的化学交联剂缀合，并且衍生化的白蛋白与包含叠氮部分的化学交联剂缀合。在一些实施方式中，衍生化的生物活性多肽与包含叠氮部分的化学交联剂缀合，并且衍生化的白蛋白与包含炔部分的化学交联剂缀合。可用于缔合生物活性多肽和白蛋白的其他成对交联部分包括但不限于应变炔和叠氮、应变炔和硝酮(例如1,3-硝酮)、应变烯烃和叠氮、应变烯烃和四嗪、以及应变烯烃和四唑。在一些实施方式中，组合物中基本上所有的生物活性多肽用化学交联剂(或其部分)衍生化(例如缀合)。在一些实施方式中，组合物中至少约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的生物活性多肽用化学交联剂(或其部分)衍生化(例如缀合)。在一些实施方式中，衍生化的生物活性多肽特异性地与衍生化的白蛋白交联，从而形成生物活性多肽-白蛋白缀合物。缀合(交联)可以发生在例如组合包含衍生化白蛋白的水溶液和有机溶液之前。在一些实施方式中，缀合通过将衍生化的生物活性多肽与包含衍生化白蛋白的纳米颗粒组合而进行。在一些实施方式中，缀合通过将衍生化的生物活性多肽与分离的纳米颗粒组合而发生。在一些实施方式中，缀合通过将衍生化的生物活性多肽与包含衍生化白蛋白的分离的纳米颗粒组合而进行。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗与疏水性药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗嵌入紫杉醇的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与紫杉醇(例如紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中贝伐单抗嵌入雷帕霉素的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)贝伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中贝伐单抗与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗与疏水性药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗嵌入紫杉醇的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与紫杉醇(例如紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中西妥昔单抗嵌入雷帕霉素的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)西妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中西妥昔单抗与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗与疏水性药物结合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗嵌入紫杉醇的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与紫杉醇(例如紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中伊匹单抗嵌入雷帕霉素的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)伊匹单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中伊匹单抗与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗与疏水性药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗嵌入紫杉醇的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与紫杉醇(例如紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中纳武单抗嵌入雷帕霉素的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)纳武单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中纳武单抗与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、+组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗与疏水性药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗嵌入紫杉醇的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与紫杉醇(例如紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中帕尼单抗嵌入雷帕霉素的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)帕尼单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中帕尼单抗与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗与疏水性药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗嵌入紫杉醇的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与紫杉醇(例如紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中利妥昔单抗嵌入雷帕霉素的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)利妥昔单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中利妥昔单抗与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗与疏水性药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗嵌入紫杉醇的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与紫杉醇(例如紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中度伐单抗嵌入雷帕霉素的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)度伐单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中度伐单抗与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。因此，在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317与疏水性药物缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317嵌入紫杉醇的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与紫杉醇(如紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中bgb-a317嵌入雷帕霉素的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)bgb-a317，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中bgb-a317与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。因此，在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗与疏水性药物结合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗与疏水性药物的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中所述疏水性药物涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物(例如紫杉烷或莫司药物)、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中所述疏水性药物涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与疏水性药物(例如疏水性药物的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗与紫杉醇缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗与紫杉醇的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中紫杉醇涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗嵌入紫杉醇的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)紫杉醇、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中紫杉醇涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与紫杉醇(例如作为紫杉醇的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗与雷帕霉素缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗与雷帕霉素的实体核芯缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中雷帕霉素涂覆有(例如基本上涂覆有)白蛋白，并且其中托珠单抗嵌入雷帕霉素的实体核芯。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合(例如通过二硫键或化学交联)。在一些实施方式中，组合物包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)雷帕霉素、(b)白蛋白(如人白蛋白)、和(c)托珠单抗，其中雷帕霉素涂覆有白蛋白，并且其中托珠单抗与雷帕霉素(例如雷帕霉素的实体核芯)和纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的、组合物中纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。包含纳米颗粒的组合物或制备前体中的其他组分本文所述的组合物可用于药物组合物或制剂——通过将本文所述的组合物与药学上可接受的载体、赋形剂、稳定剂、填充剂和/或本领域已知的用于本文所述的治疗方法、给药方法和剂量方案的其他试剂组合。药学上可接受的试剂也可以被包括在任何制备前体溶液中，前体溶液包括包含白蛋白或生物活性多肽的水溶液、或在制备过程中的各种时间点添加到粗混合物、乳液或纳米颗粒悬浮液的水溶液。如本文所用，“药学上可接受的”或“药理学上相容的”是指不是生物学上或其他方面不期望的材料，例如，该材料可以被掺入给予患者的药物组合物中，而不引起任何显著的不期望的生物学效应或以有害的方式与组合物含有的任何其它组分相互作用。药学上可接受的载体或赋形剂优选满足毒理学和制备测试的所需标准和/或被包含在由美国食品和药物管理局(u.s.foodanddrugadministration)制作的非活性成分指南(inactiveingredientguide)上。例如，在一些实施方式中，药学上可接受的材料是赋形剂、稳定剂、抗微生物剂或填充剂。为了增加本文所述的组合物中纳米颗粒的稳定性，可以添加材料以增加纳米颗粒的负ζ电位，例如某些带负电荷的组分。这种带负电荷的组分包括但不限于胆汁盐、胆汁酸、甘氨胆酸、胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺酸鹅去氧胆酸、石胆酸(litocholicacid)、熊去氧胆酸、脱氢胆酸等；磷脂，包括基于卵磷脂(蛋黄)的磷脂，包括以下磷脂酰胆碱：棕榈酰基油酰基磷脂酰胆碱、棕榈酰基亚油酰基磷脂酰胆碱、硬脂酰基亚油酰基磷脂酰胆碱、硬脂酰基油酰基磷脂酰胆碱、硬脂酰基花生酰基磷脂酰胆碱和二棕榈酰基磷脂酰胆碱。其他磷脂包括l-α-二肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱(dmpc)、二油酰基磷脂酰胆碱(dopc)、二硬脂酰基磷脂酰胆碱(dspc)、氢化大豆磷脂酰胆碱(hspc)和其他相关化合物。带负电荷的表面活性剂或乳化剂也适合作为添加剂，例如，胆固醇硫酸钠等。适当的药学上可接受的载体包括无菌水；盐水、右旋糖；在水或盐水中的右旋糖；蓖麻油和环氧乙烷的缩合产物，每摩尔蓖麻油组合约30至约35摩尔环氧乙烷；液态酸；低级烷醇；油，如玉米油；花生油，芝麻油等，具有乳化剂，如脂肪酸的甘油单酯或甘油二酯，或磷脂，如卵磷脂等；二醇；聚亚烷基二醇；在悬浮剂存在下的水性介质，例如羧甲基纤维素钠；海藻酸钠；聚(乙烯基吡咯烷酮)；等等，单独使用或与适当的分配剂一起使用，如卵磷脂；聚氧乙烯硬脂酸酯；等等。载体还可含有佐剂，如保存稳定剂、润湿剂、乳化剂等，与渗透增强剂一起。最终形式可以是无菌的，并且还可以能够容易通过注射装置，例如空心针。通过适当选择溶剂或赋形剂可以达到并保持适当的粘度。此外，可采取使用分子或颗粒涂层如卵磷脂，适当选择分散体中的颗粒尺寸，或使用具有表面活性剂性质的材料。本文所述的组合物可包含其他试剂、赋形剂或稳定剂以改善组合物的性质。适当的赋形剂和稀释剂的实例包括但不限于乳糖、右旋糖、蔗糖、海藻糖(包括α,α-海藻糖)、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、盐水溶液、糖浆、甲基纤维素、甲基-和丙基羟基苯甲酸酯和矿物油。制剂可另外包括润滑剂、润湿剂、乳化剂和悬浮剂、以及防腐剂。乳化剂的实例包括生育酚酯如生育酚聚乙二醇琥珀酸酯等、基于聚氧乙烯化合物的乳化剂、span80和相关化合物以及本领域已知的并且批准用于动物或人剂型的其它乳化剂。可以配制组合物，以便在通过采用本领域公知的程序给予患者后，提供活性成分的快速、持续或延迟释放。在一些实施方式中，将组合物配制成具有约4.5至约9.0的ph，包括例如约5.0至约8.0、约6.5至约7.5、和约6.5至约7.0中任一种的ph范围。在一些实施方式中，组合物的ph配制为不低于约6，包括例如不低于约6.5、7或8中的任一种(例如，约8)。在一些实施方式中，组合物还包括缓冲剂，例如tris、磷酸盐(例如磷酸钠或磷酸钾)、柠檬酸盐、琥珀酸盐、组氨酸或乙酸盐。还可以通过添加适当的张力调节剂(例如甘油)使组合物与血液等渗。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物适于给予人。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物适于给予哺乳动物，例如在兽医境况中，家养宠物和农业动物。存在各种适当的组合物制剂(参见，例如，美国专利号5,916,596和6,096,331，其通过引用并入)。以下制剂和方法仅是示例性的，而不以任何方式限制。适于肠胃外给药的制剂包括水性和非水性的、等渗无菌注射溶液(其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与目标接受者的血液相容的溶质)、以及水性和非水性无菌悬浮液(其可包括悬浮剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂)。制剂可以单位剂量或多剂量密封容器如安瓿和小瓶呈现，并且可以在冷冻干燥(冻干)条件下储存，仅需要在使用前夕添加注射用无菌液体赋形剂，例如水。临时注射溶液和悬浮液可由前述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制作。可注射制剂是优选的。在一些实施方式中，组合物基本上不含(如，不含)生物活性多肽的药物制剂中发现的不期望的组分。例如，在一些实施方式中，组合物基本上不含(如，不含)表面活性剂(例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80)。在一些实施方式中，组合物基本上不含(如，不含)聚山梨醇酯20。在一些实施方式中，组合物基本上不含(如，不含)聚山梨醇酯80。在一些实施方式中，组合物基本上不含(如，不含)缓冲剂盐。在一些实施方式中，组合物包含表面活性剂(例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80)。在一些实施方式中，组合物包含聚山梨醇酯20。在一些实施方式中，组合物包含聚山梨醇酯80。在一些实施方式中，组合物包含缓冲剂盐。制备纳米颗粒制剂的方法本申请还提供了制备本文所述的纳米颗粒组合物的方法。含有疏水性药物和白蛋白的纳米颗粒可以在高剪切力(例如，超声、高压均质化等)的条件下制作。这些方法被公开在例如美国专利号5,916,596；6,096,331；6,749,868；6,537,579；和pct申请公开号w098/14174；wo99/00113；wo07/027941；和wo07/027819中。这些出版物的内容，特别是关于制备纳米颗粒组合物的方法，整体通过引用并入本文。这些方法可以如本文所述经改动以制备包含疏水性药物、白蛋白(例如衍生化白蛋白)和生物活性多肽(例如抗体)的纳米颗粒。在一些实施方式中，至少一部分生物活性多肽与白蛋白多肽缀合(即生物活性多肽-白蛋白缀合物)。在一些实施方式中，生物活性多肽或生物活性多肽-白蛋白缀合物在制备过程中在一个或多个步骤添加。在一些实施方式中，生物活性多肽与含有疏水性药物和白蛋白的预形成纳米颗粒缀合。在一个方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，由此形成乳液，其中所述有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中所述水溶液包含白蛋白和生物活性多肽；和ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如，通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后将生物活性多肽添加到组合物中。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。在一些实施方式中，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和抗体(如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)和抗pd-1抗体(如bgb-a317)或抗il-6-受体抗体(如托珠单抗))，该方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白和抗体；和ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如，通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。在一些实施方式中，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(例如紫杉醇)、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的紫杉烷(例如紫杉醇)，并且其中水溶液包含白蛋白和抗体；和ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如，通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)将生物活性多肽添加到乳液中；iii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法包括防止在将生物活性多肽添加到乳液和开始除去一种或多种有机溶剂之间的任何温育时间。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后将生物活性多肽添加到组合物中。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。在一些实施方式中，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如，抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)将抗体加入乳液中；iii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如，通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法包括防止在将生物活性多肽添加到乳液和开始除去一种或多种有机溶剂之间的任何温育时间。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。在另一个实施方式中，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(例如紫杉醇)、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的紫杉烷(例如紫杉醇)，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)将抗体加入乳液中；iii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法包括防止在将生物活性多肽添加到乳液和开始除去一种或多种有机溶剂之间的任何温育时间。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)以获得蒸发后的悬浮液；和iii)将生物活性多肽加入蒸发后的悬浮液中，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后将生物活性多肽添加到组合物中。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如，抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，以获得蒸发后的悬浮液；和iii)将抗体加入蒸发后的悬浮液中，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(例如紫杉醇)、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的紫杉烷(例如紫杉醇)，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)以获得蒸发后的悬浮液；和iii)将抗体加入蒸发后的悬浮液中，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分但不是全部所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)以获得乳液-悬浮液中间体；iii)将生物活性多肽加入乳液-悬浮液中间体；和iv)从包含生物活性多肽的乳液-悬浮液中间体中除去另一部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后将生物活性多肽添加到组合物中。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如，抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分但不是全部所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)以获得乳液-悬浮液中间体；iii)将生物活性多肽加入乳液-悬浮液中间体；和iv)从包含生物活性多肽的乳液-悬浮液中间体中除去另一部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(例如紫杉醇)、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的紫杉烷(例如紫杉醇)，并且其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分但不是全部所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)以获得乳液-悬浮液中间体；iii)将生物活性多肽加入乳液-悬浮液中间体；和iv)从包含生物活性多肽的乳液-悬浮液中间体中除去另一部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白与生物活性多肽缀合；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，生物活性多肽与白蛋白共价缀合，例如通过二硫键或化学交联剂，如包含马来酰亚胺官能团和/或nhs部分的交联剂、smcc交联剂、包含硼酸酯的交联剂、或源自点击化学的部分(例如无铜点击化学，例如三唑部分)。在一些实施方式中，白蛋白和生物活性多肽是非共价缀合的。例如，在一些实施方式中，交联剂包含共价附接至白蛋白的第一组分、和共价附接至生物活性多肽的第二组分，其中第一组分和第二组分彼此特异性结合(例如互补核酸分子)。在一些实施方式中，该方法还包括用未缀合的白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的、生物活性多肽缀合的白蛋白，例如通过透析、缓冲剂交换(例如切向流过滤)、或通过经由离心将纳米颗粒与不与纳米颗粒缔合的、生物活性多肽缀合的白蛋白分离和用包含未缀合的白蛋白的溶液重新悬浮纳米颗粒。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后将生物活性多肽添加到组合物中。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。在一些实施方式中，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如，抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白与抗体缀合；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，生物活性多肽与白蛋白共价缀合，例如通过二硫键或化学交联剂，如包含马来酰亚胺官能团和/或nhs部分的交联剂、smcc交联剂、包含硼酸酯的交联剂、或源自点击化学的部分(例如无铜点击化学，例如三唑部分)。在一些实施方式中，白蛋白和生物活性多肽是非共价缀合的。例如，在一些实施方式中，交联剂包含共价附接至白蛋白的第一组分、和共价附接至生物活性多肽的第二组分，其中第一组分和第二组分彼此特异性结合(例如互补核酸分子)。在一些实施方式中，该方法还包括用未缀合的白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的、抗体缀合的白蛋白，例如通过透析、缓冲剂交换(例如切向流过滤)、或通过经由离心将纳米颗粒与不与纳米颗粒缔合的、抗体缀合的白蛋白分离和用包含未缀合的白蛋白的溶液重新悬浮纳米颗粒。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(例如紫杉醇)、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的紫杉烷(例如紫杉醇)，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白与抗体缀合；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，从而形成组合物。在一些实施方式中，生物活性多肽与白蛋白共价缀合，例如通过二硫键或化学交联剂，如包含马来酰亚胺官能团和/或nhs部分的交联剂、smcc交联剂、包含硼酸酯的交联剂、或源自点击化学的部分(例如无铜点击化学，例如三唑部分)。在一些实施方式中，白蛋白和生物活性多肽是非共价缀合的。例如，在一些实施方式中，交联剂包含共价附接至白蛋白的第一组分、和共价附接至生物活性多肽的第二组分，其中第一组分和第二组分彼此特异性结合(例如互补核酸分子)。在一些实施方式中，该方法还包括用未缀合的白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的、抗体缀合的白蛋白，例如通过透析、缓冲剂交换(例如切向流过滤)、或通过经由离心从不与纳米颗粒缔合的、抗体缀合的白蛋白中分离纳米颗粒和用包含未缀合的白蛋白的溶液重新悬浮纳米颗粒。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入抗体。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白被衍生化；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，以得到蒸发后的悬浮液；iii)将生物活性多肽加入蒸发后的悬浮液中。在一些实施方式中，生物活性多肽是衍生化的。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后将生物活性多肽添加到组合物中。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白被衍生化；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，以获得包含纳米颗粒的蒸发后的悬浮液；iii)用非衍生化白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的衍生化白蛋白；iv)将生物活性多肽添加到纳米颗粒中。在一些实施方式中，生物活性多肽是衍生化的。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如，抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白是衍生化的；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，以获得包含纳米颗粒的蒸发后的悬浮液；iii)用非衍生化白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的衍生化白蛋白；iv)将抗体加入纳米颗粒中。在一些实施方式中，抗体是衍生化的。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(例如紫杉醇)、白蛋白和抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的紫杉烷(例如紫杉醇)，并且其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白被衍生化；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂(例如通过蒸发)，以获得包含纳米颗粒的蒸发后的悬浮液；iii)用非衍生化白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的衍生化白蛋白；iv)将抗体加入纳米颗粒中。在一些实施方式中，抗体是衍生化的。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。在一些实施方式中，该方法还包括在除去有机溶剂后无菌过滤组合物。在一些实施方式中，该方法还包括将组合物填充到一个或多个小瓶中。在一些实施方式中，该方法还包括冻干组合物。疏水性药物被溶解在有机溶剂(或有机溶剂的混合物)中以形成包含疏水性药物的有机溶液。适当的有机溶剂包括例如烷烃、环烷烃、酮、醇、酯、醚、氯化溶剂和本领域已知的其他溶剂。在一些实施方式中，有机溶液包括水混溶性有机溶剂、水不混溶性有机溶剂、或水混溶性和水不混溶性有机溶剂的混合物。在一些实施方式中，有机溶液中水混溶性与水不混溶有机溶剂的比例为约20：1至约1：20之间(例如，约20：1至约15：1、约15：1至约12：、约12：1和约10：1、约10：1和约8：1、约8：1和约6：1、约6：1和约4：1、约4：1和约2：1、约2：1和约1：1、约1：1和约1：2、约1：2和约1：4、约1：4和约1：6、约1：6和约1：8、约1：8和约1：10、约1：10至约1：12、约1：12至约1：15、或约1：15至约1：20之间)。示例性有机溶剂包括例如氯仿、二氯甲烷(dichloromethane)、二氯甲烷(methylenechloride)、乙酸乙酯、乙醇、叔丁醇、甲醇、异丙醇、丙醇、正丁醇、四氢呋喃、环己烷、二烷、乙腈、丙酮、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、甲基吡咯烷酮。在一些实施方式中，疏水性药物以约1mg/ml至约200mg/ml(例如约1mg/ml至约5mg/ml、约5mg/ml至约10mg/ml、约10mg/ml至约25mg/ml、约25mg/ml至约50mg/ml、约50mg/ml至约100mg/ml、约100mg/ml至约150mg/ml、或约150mg/ml至约200mg/ml)的浓度溶解于有机溶剂中。包含疏水性药物的有机溶液与水溶液组合。在一些实施方式中，水溶液包含溶解在水中的白蛋白(例如重组白蛋白)。白蛋白可以是例如人白蛋白。在一些实施方式中，水溶液还包含一种或多种盐、缓冲剂或稳定剂。在一些实施方式中，水溶液基本上不含(如，不含)表面活性剂(例如聚山梨醇酯)。在一些实施方式中，水溶液的ph为约5至约8之间。在一些实施方式中，水溶液中白蛋白(包括任何生物活性多肽-白蛋白缀合物的白蛋白部分)的浓度为约0.5mg/ml至约250mg/ml之间(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml之间、约1mg/ml至约5mg/ml之间、约5mg/ml至约10mg/ml之间、约10mg/ml至约25mg/ml之间、约25mg/ml约50mg/ml之间、约50mg/ml至约100mg/ml之间、约100mg/ml至约150mg/ml之间、约150mg/ml至约200mg/ml之间、或约200mg/ml至约250mg/ml之间)。在一些实施方式中，水溶液包含生物活性多肽或生物活性多肽-白蛋白缀合物。即，水溶液可包含i)白蛋白、ii)生物活性多肽、iii)生物活性多肽-白蛋白缀合物、或iv)两种或更多种的组合。在一些实施方式中，白蛋白被衍生化，例如通过包含交联部分(例如胺反应性琥珀酰亚胺酯或马来酰亚胺部分)。在一些实施方式中，水溶液中生物活性多肽(包括生物活性白蛋白缀合物的生物活性多肽部分)的浓度为约0.5mg/ml至约30mg/ml之间(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml之间、约1mg/ml至约5mg/ml之间、约5mg/ml至约10mg/ml之间、约10mg/ml至约20mg/ml之间、或约20mg/ml和约30mg/ml之间)。在一些实施方式中，水溶液包含的白蛋白和生物活性多肽的w/w比(白蛋白：生物活性多肽)为约1：1至约20：1。在一些实施方式中，生物活性多肽(或生物活性多肽-白蛋白缀合物)在单独的水溶液中提供(即，与包含白蛋白的水溶液或包含白蛋白和生物活性多肽的水溶液分开的水溶液)。单独的水溶液(其可以称为“生物活性多肽溶液”)包含溶解在水中的生物活性多肽(或生物活性多肽-白蛋白缀合物、或其组合)。在一些实施方式中，生物活性多肽溶液还包含一种或多种盐、缓冲剂或稳定剂。在一些实施方式中，生物活性多肽溶液基本上不含(例如不含)表面活性剂(例如聚山梨醇酯)。在一些实施方式中，生物活性多肽溶液的ph为约4至约8之间。在一些实施方式中，生物活性多肽溶液中生物活性多肽(包括生物活性多肽-白蛋白缀合物的生物活性多肽部分)的浓度为约0.5mg/ml至约30mg/ml之间(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml之间、约1mg/ml至约5mg/ml之间、约5mg/ml至约10mg/ml之间、约10mg/ml至约20mg/ml之间、或约20mg/ml至约30mg/ml之间)。在一些实施方式中，将有机溶液和水溶液(其可以包括或不包括生物活性多肽或生物活性多肽-白蛋白缀合物)混合，例如使用高剪切混合器(例如转子-定子混合器)，以形成粗混合物。例如，在一些实施方式中，将水溶液和包含疏水性药物的有机溶液组合，并将组合的水溶液和有机溶液混合以形成粗混合物。在一些实施方式中，将水溶液用高剪切混合器混合，并在混合水溶液时将有机溶液加入水溶液以形成粗混合物。在一些实施方式中，将水溶液、生物活性多肽溶液和有机溶液组合，并将组合的水溶液、生物活性多肽溶液、有机溶液混合以形成粗混合物。在一些实施方式中，将水溶液用高剪切混合器混合，并且在混合水溶液时将生物活性多肽溶液和有机溶液与水溶液混合。在一些实施方式中，将生物活性多肽溶液用高剪切混合器混合，并且可以在混合生物活性多肽溶液时将水溶液和有机溶液与生物活性多肽溶液组合。在一些实施方式中，可以将白蛋白或生物活性多肽(或生物活性多肽-白蛋白缀合物)添加到粗混合物中。例如，在一些实施方式中，将另外的水溶液(包含白蛋白、生物活性多肽和/或生物活性多肽缀合物中的一种或多种)加入粗混合物中，例如在有机溶液和第一水溶液的混合完成之后。在一些实施方式中，将另外的水溶液与粗混合物混合，这可以使用高剪切混合器或低剪切混合器进行。在一些实施方式中，将另外的水溶液与粗混合物组合，以将粗混合物中白蛋白(包括任何生物活性多肽-白蛋白缀合物的白蛋白部分)的浓度调节至约0.5mg/ml至约250mg/ml之间(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml、约1mg/ml至约5mg/ml、约5mg/ml至约10mg/ml、约10mg/ml至约25mg/ml、约25mg/ml至约50mg/ml、约50mg/ml至约100mg/ml、约100mg/ml至约150mg/ml、约150mg/ml至约200mg/ml、或约200mg/ml至约250mg/ml)。在一些实施方式中，将另外的水溶液与粗混合物组合，以将粗混合物中生物活性多肽(包括任何生物活性多肽-白蛋白缀合物的生物活性多肽部分)的浓度调节至约0.5mg/ml至约30mg/ml(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml、约1mg/ml至约5mg/ml、约5mg/ml至约10mg/ml、约10mg/ml至约20mg/ml、或约20mg/ml至约30mg/ml)。在一些实施方式中，将另外的水溶液与粗混合物组合，以将白蛋白与生物活性多肽的比例(w/w)调节至1：1至约1000：1。在一些实施方式中，将另外的水溶液与粗混合物组合，以将白蛋白与疏水性药物的比例(w/w)调节至约2.5：1至约20：1。将有机溶液和水溶液的粗混合物(其中粗混合物可以包括或不包括在形成粗混合物后添加的另外的水溶液)进行高压均质化，以形成乳液。在一些实施方式中，乳液通过高压均质器循环约2至约100个循环，例如约5至约50个循环、或约8至约20个循环(例如，约8、10、12、14、16、18或20个循环中的任一种)。在一些实施方式中，可以将另外的白蛋白或生物活性多肽(或生物活性多肽-白蛋白缀合物)添加到乳液中。例如，在一些实施方式中，向乳液中加入另外的水溶液(包含白蛋白、生物活性多肽和/或生物活性多肽缀合物中的一种或多种)。在一些实施方式中，在通过高压均质器之间将另外的水溶液加入乳液中。在一些实施方式中，在均质化过程完成后将另外的水溶液加入乳液中。在一些实施方式中，将另外的水溶液与乳液混合，这可以使用高剪切混合器或低剪切混合器进行。在一些实施方式中，将另外的水溶液添加到乳液中，以将乳液中白蛋白(包括任何生物活性多肽-白蛋白缀合物的白蛋白部分)的浓度调节至约0.5mg/ml至约250mg/ml(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml、约1mg/ml至约5mg/ml、约5mg/ml至约10mg/ml、约10mg/ml至约25mg/ml、约25mg/ml至约50mg/ml、约50mg/ml至约100mg/ml、约100mg/ml至约150mg/ml、约150mg/ml至约200mg/ml、或约200mg/ml至约250mg/ml)。在一些实施方式中，将另外的水溶液与乳液组合，以将乳液中生物活性多肽(包括任何生物活性多肽-白蛋白缀合物的生物活性多肽部分)的浓度调节至约0.5mg/ml至约30mg/ml(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml、约1mg/ml至约5mg/ml、约5mg/ml至约10mg/ml、约10mg/ml至约20mg/ml、或约20mg/ml至约30mg/ml)。在一些实施方式中，将另外的水溶液与乳液组合，以将白蛋白与生物活性多肽的比例(w/w)调节至1：1至约1000：1之间。在一些实施方式中，将另外的水溶液与乳液组合，以将白蛋白与疏水性药物的比例(w/w)调节至约2.5：1至约50：1。至少一部分有机溶剂(例如基本上所有的有机溶剂)可以利用已知用于此用途的适当设备通过蒸发除去，包括但不限于旋转蒸发器、降膜蒸发器、刮膜式蒸发器、喷雾干燥器等等。有机溶剂的蒸发导致纳米颗粒的形成，如果在蒸发后保留足够的水，则纳米颗粒可以是纳米颗粒悬浮液的形式(并且可以称为“蒸发后的悬浮液”)。可以在减压下(例如在25mmhg、30mmhg、40mmhg、50mmhg、100mmhg、200mmhg或300mmhg中的任一种中)除去溶剂。可以基于制剂的体积来调节在减压下用于除去溶剂的时间量。例如，对于以300ml规模生产的制剂，可以在约1至约300mmhg下(例如，约5-100mmhg、10-50mmhg、20-40mmhg或25mmhg中的任一种)以约5至约60分钟(例如，约7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、18、20、25或30分钟中的任一种)除去溶剂。在一些实施方式中，可以将另外的白蛋白和/或生物活性多肽(或生物活性多肽-白蛋白缀合物)添加到纳米颗粒(例如蒸发后的悬浮液)。例如，在一些实施方式中，将另外的水溶液(包含白蛋白、生物活性多肽和/或生物活性多肽缀合物中的一种或多种)添加到纳米颗粒中。在一些实施方式中，将另外的水溶液加入蒸发后的悬浮液中，以将纳米颗粒悬浮液中白蛋白(包括任何生物活性多肽-白蛋白缀合物的白蛋白部分)的浓度调节至约0.5mg/ml至约250mg/ml(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml、约1mg/ml至约5mg/ml、约5mg/ml至约10mg/ml、约10mg/ml至约25mg/ml、约25mg/ml至约50mg/ml、约50mg/ml至约100mg/ml、约100mg/ml至约150mg/ml、约150mg/ml至约200mg/ml、或约200mg/ml至约250mg/ml)。在一些实施方式中，将另外的水溶液与纳米颗粒悬浮液组合，以将纳米颗粒悬浮液中的生物活性多肽(包括任何生物活性多肽-白蛋白缀合物的生物活性多肽部分)的浓度调节至约0.5mg/ml至约30mg/ml(例如约0.5mg/ml至约1mg/ml、约1mg/ml至约5mg/ml、约5mg/ml至约10mg/ml、约10mg/ml至约20mg/ml、或约20mg/ml至约30mg/ml)。在一些实施方式中，将另外的水溶液与纳米颗粒悬浮液组合，以将白蛋白与生物活性多肽的比例(w/w)调节至1：1至约1000：1。在一些实施方式中，将另外的水溶液与纳米颗粒悬浮液组合以将白蛋白与疏水性药物的比例(w/w)调节至约2.5：1至约50：1。在一些实施方式中，将纳米颗粒配制用于给予，例如通过向纳米颗粒(例如蒸发后的悬浮液)添加一种或多种赋形剂(例如稳定剂、缓冲剂、填充剂、抗微生物剂、渗透剂或重构增强剂)。所述一种或多种赋形剂可以与水溶液分开地添加到纳米颗粒中，或者可以被包含在水溶液中。在一些实施方式中，将纳米颗粒悬浮液的ph调节至约4至约9(例如约4至约5、约5至约6、约6至约7、约7至约8，或约8至约9)。蒸发后的悬浮液可以与白蛋白或生物活性多肽(或生物活性多肽-白蛋白缀合物)一起温育期望的时间量(例如约15分钟至约48小时)。在一些实施方式中，温育在约3℃至约30℃进行。该温育期允许生物活性多肽(或生物活性多肽-白蛋白缀合物)与纳米颗粒缔合。例如，在一些实施方式中，将部分与纳米颗粒缔合的白蛋白衍生化，并且温育期允许衍生化白蛋白与生物活性多肽缀合。在一些实施方式中，白蛋白与生物活性多肽缀合以形成生物活性多肽-白蛋白缀合物。生物活性多肽与白蛋白的缀合可以在制备过程中的各种时间点发生。例如，在一些实施方式中，生物活性多肽与白蛋白缀合在将水溶液与有机溶液混合之前。在一些实施方式中，生物活性多肽与白蛋白缀合在多肽与纳米颗粒悬浮液组合之时。在一些实施方式中，白蛋白(或部分白蛋白)是衍生化的，其可以提供与生物活性多肽的缀合。在一些实施方式中，生物活性多肽是衍生化的，其可以提供与白蛋白的缀合。在一些实施方式中，将白蛋白(或部分白蛋白)和生物活性多肽衍生化以提供缀合。生物活性多肽可以与白蛋白缀合，例如利用点击化学或其他已知的交联剂。例如，在一些实施方式中，白蛋白或生物活性多肽用应变烯烃或应变炔烃衍生化，并且白蛋白和生物活性多肽可以通过环加成反应缀合。在一些实施方式中，白蛋白或生物活性多肽上的赖氨酸残基被衍生化，例如利用胺反应性琥珀酰亚胺酯(例如n-羟基琥珀酰亚胺酯(nhs-酯))、异氰酸酯或异硫氰酸酯。在一些实施方式中，白蛋白或生物活性多肽上的半胱氨酸残基被衍生化，例如利用马来酰亚胺或碘乙酰胺。白蛋白的半胱氨酸34是可以被衍生化的示例性半胱氨酸。其他缀合方法是本领域已知的。衍生化的白蛋白可以与生物活性多肽一起温育，或者衍生化的生物活性多肽可以与白蛋白一起温育，以形成生物活性多肽-白蛋白缀合物。可以形成生物活性多肽-白蛋白缀合物，然后将生物活性多肽-白蛋白缀合物加入水溶液、粗混合物、乳液或蒸发后的悬浮液。例如，在生物活性多肽-白蛋白缀合物加入纳米颗粒制备过程之前，生物活性多肽-白蛋白缀合物可以是与非缀合的白蛋白或生物活性多肽分离的。生物活性多肽-白蛋白缀合物还可以或可选地可以在纳米颗粒形成后形成。例如，在一些实施方式中，衍生化的白蛋白被包含在水溶液、粗混合物或乳液中，并且生物活性多肽被添加到纳米颗粒悬浮液中。与纳米颗粒缔合的衍生化白蛋白可与生物活性多肽反应，以形成生物活性多肽-白蛋白缀合物。在一些实施方式中，将衍生化的生物活性多肽添加至包含白蛋白的水溶液、粗混合物、乳液、蒸发后的悬浮液、或其他纳米颗粒悬浮液中，并与白蛋白反应以形成生物活性多肽-白蛋白缀合物。在一些实施方式中，从纳米颗粒悬浮液中除去未与纳米颗粒缔合的生物活性多肽、生物活性多肽-白蛋白缀合物或衍生化白蛋白(如果存在)。在一些实施方式中，生物活性多肽-白蛋白缀合物或衍生化白蛋白被非衍生化或未缀合的白蛋白替代。例如，在一些实施方式中，将纳米颗粒悬浮液离心，除去上清液，并将纳米颗粒悬浮在新制水溶液(其可以是非衍生化的或未缀合的白蛋白)中。在一些实施方式中，透析纳米颗粒悬浮液，以除去未与纳米颗粒缔合的生物活性多肽、生物活性多肽-白蛋白缀合物或衍生化白蛋白(如果存在)，其可以被非衍生化或未缀合的白蛋白替代。在一些实施方式中，通过缓冲剂交换(例如，通过切向流过滤)除去未与纳米颗粒缔合的生物活性多肽、生物活性多肽-白蛋白缀合物或衍生化白蛋白(如果存在)，其可以被非衍生化或未缀合的白蛋白替代。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽，该方法包括将生物活性多肽与包含疏水性药物和白蛋白的纳米颗粒缀合。在一些实施方式中，该方法包括将生物活性多肽共价交联至白蛋白。在一些实施方式中，生物活性多肽与白蛋白共价缀合，例如通过二硫键或化学交联剂，如包含马来酰亚胺官能团和/或nhs部分的交联剂、smcc交联剂、包含硼酸酯的交联剂、或源自点击化学的部分(例如无铜点击化学，例如三唑部分)。在一些实施方式中，该方法包括将生物活性多肽非共价交联至白蛋白，其中白蛋白与交联剂的第一组分共价结合，并且生物活性多肽与交联剂的第二组分共价结合，其中交联剂的第一组分特异性结合交联剂的第二组分(如至少部分互补的核酸分子)。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的抗体(例如抗vegf抗体(例如，抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括将抗体缀合至包含疏水性药物和白蛋白的纳米颗粒。在一些实施方式中，该方法包括将抗体与白蛋白共价交联。在一些实施方式中，抗体与白蛋白共价缀合，例如通过二硫键或化学交联剂，如包含马来酰亚胺官能团和/或nhs部分的交联剂、smcc交联剂、包含硼酸酯的交联剂、或来自点击化学的部分(例如无铜点击化学，例如三唑部分)。在一些实施方式中，该方法包括使抗体与白蛋白非共价交联，其中白蛋白与交联剂的第一组分共价结合，并且抗体与交联剂的第二组分共价结合，其中交联剂的第一组分特异性结合交联剂的第二组分(如至少部分互补的核酸分子)。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(例如紫杉醇)、白蛋白和与白蛋白缀合的抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括将抗体与包含紫杉烷和白蛋白的纳米颗粒缀合。在一些实施方式中，该方法包括将抗体与白蛋白共价交联。在一些实施方式中，抗体与白蛋白共价缀合，例如通过二硫键或化学交联剂，如包含马来酰亚胺官能团和/或nhs部分的交联剂、smcc交联剂、包含硼酸酯的交联剂、或来自点击化学的部分(例如无铜点击化学，例如三唑部分)。在一些实施方式中，该方法包括使抗体与白蛋白非共价交联，其中白蛋白与交联剂的第一组分共价结合，并且抗体与交联剂的第二组分共价结合，其中交联剂的第一组分特异性结合交联剂的第二组分(如至少部分互补的核酸分子)。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽，该方法包括i)用交联剂官能化生物活性多肽，和ii)组合活化的生物活性多肽与包含疏水性药物和白蛋白的纳米颗粒。图18示出了这种方法的实例。在一些实施方式中，交联剂包括马来酰亚胺官能团和/或nhs部分、smcc交联剂、硼酸、点击化学交联剂。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的抗体(例如抗vegf抗体(例如，抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括i)用交联剂将抗体官能化；和ii)将活化的抗体与包含疏水性药物和白蛋白的纳米颗粒组合。在一些实施方式中，交联剂包括马来酰亚胺官能团和/或nhs部分、smcc交联剂、硼酸、点击化学交联剂。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(例如紫杉醇)、白蛋白和与白蛋白缀合的抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括i)用交联剂将抗体官能化；和ii)将活化的抗体与包含紫杉烷和白蛋白的纳米颗粒组合。在一些实施方式中，交联剂包括马来酰亚胺官能团和/或nhs部分、smcc交联剂、硼酸、点击化学交联剂。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽，该方法包括i)用交联剂官能化生物活性多肽；ii)衍生化至少一部分与包含白蛋白和疏水性药物的纳米颗粒的表面缔合的白蛋白；和iii)将活化的生物活性多肽与包含衍生化白蛋白的纳米颗粒组合。图19、21和23示出了衍生化与纳米颗粒表面缔合的白蛋白和使官能化生物活性多肽与衍生化白蛋白缀合的示例性方法。在一些实施方式中，衍生化白蛋白包括硫醇化白蛋白，例如通过将包含白蛋白和疏水性药物的纳米颗粒与硫醇化剂(例如2-亚氨基硫烷)组合。在一些实施方式中，交联剂包括马来酰亚胺官能团和/或nhs部分、smcc交联剂、硼酸、点击化学交联剂。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的抗体(例如抗vegf抗体(例如，抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，包括i)用交联剂将抗体官能化；ii)衍生化至少一部分与包含白蛋白和疏水性药物的纳米颗粒的表面缔合的白蛋白；和iii)将活化的抗体与包含衍生化白蛋白的纳米颗粒组合。在一些实施方式中，衍生化白蛋白包括硫醇化白蛋白，例如通过将包含白蛋白和疏水性药物的纳米颗粒与硫醇化剂(例如2-亚氨基硫烷)组合。在一些实施方式中，交联剂包括马来酰亚胺官能团和/或nhs部分、smcc交联剂、硼酸、点击化学交联剂。另一方面，提供了制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含紫杉烷(紫杉醇)、白蛋白和与白蛋白缀合的抗体(例如抗vegf抗体(例如抗vegf-a抗体，例如贝伐单抗)、抗her2抗体(例如曲妥珠单抗)、和抗pd-1抗体(例如bgb-a317)、或抗il-6-受体抗体(例如托珠单抗))，该方法包括i)用交联剂将抗体官能化；ii)衍生至少一部分与包含白蛋白和紫杉烷的纳米颗粒的表面缔合的白蛋白；和iii)将活化的抗体与包含衍生化白蛋白的纳米颗粒组合。在一些实施方式中，衍生化白蛋白包括硫醇化白蛋白，例如通过将包含白蛋白和疏水性药物的纳米颗粒与硫醇化剂(例如2-亚氨基硫烷)组合。在一些实施方式中，交联剂包括马来酰亚胺官能团和/或nhs部分、smcc交联剂、硼酸、点击化学交联剂。在一些实施方式中，通过一个或多个过滤器过滤纳米颗粒悬浮液，这可以对纳米颗粒悬浮液进行灭菌(即，无菌过滤)。纳米颗粒悬浮液可以顺序通过多个过滤器过滤。在一些实施方式中，将纳米颗粒分配到小瓶中。在一些实施方式中，将小瓶密封。在一些实施方式中，小瓶是一次性使用的小瓶。在一些实施方式中，小瓶是多次性使用的小瓶。纳米颗粒悬浮液也可以被冻干，在小瓶内部或外部。在一些实施方式中，冻干的纳米颗粒在水溶液(例如水或盐水)中被重构。在一些实施方式中，水溶液包含白蛋白、生物活性多肽和/或生物活性多肽-白蛋白缀合物中的一种或多种。在一些实施方式中，重构的纳米颗粒可以在水溶液中被温育，可以被过滤，生物活性多肽或生物活性多肽-白蛋白缀合物可以被除去，或者可以再冻干，例如如上所述。在一些实施方式中，将重构的纳米颗粒给予对象。以下实施方式是用于制备本文所述纳米颗粒的示例性方法，并且不应被视为是限制性的。图1是示例制备本文所述纳米颗粒的方法的一个实施方式的流程图。在步骤102，将含有溶解在水中的白蛋白和生物活性多肽(例如抗体)的水溶液转移到容器中，并用高剪切混合器混合。在步骤104，在用高剪切混合器混合水溶液时，将含有一种或多种有机溶剂(例如水混溶性溶剂和水不混溶性溶剂)和疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的有机溶液加入含有水溶液的容器中，从而形成粗混合物。在步骤106，通过使粗混合物通过高压均质器使粗混合物均质化，从而形成乳液。任选地，使乳液通过高压均质器两次或更多次。在步骤108，通过蒸发从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成蒸发后的纳米颗粒悬浮液。任选地，在步骤110，配制蒸发后的纳米颗粒悬浮液，例如通过添加含有白蛋白或一种或多种赋形剂的水溶液。在步骤112，任选地对配制的纳米颗粒悬浮液进行无菌过滤，并且在步骤114，任选地将无菌纳米颗粒悬浮液填充到一个或多个小瓶中。任选地，在步骤116，将小瓶冻干和/或密封。图2是示例制备本文所述纳米颗粒的方法的另一个实施方式的流程图。在步骤202，将含有溶解在水中的白蛋白的水溶液转移到容器中，并用高剪切混合器混合。在步骤204，在用高剪切混合器混合水溶液时，将含有一种或多种有机溶剂(例如水混溶性溶剂和水不混溶性溶剂)和疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的有机溶液加入含有水溶液的容器中，从而形成粗混合物。在步骤206，将生物活性多肽(其可以被包含在第二水溶液中)加入粗混合物中。在步骤208，通过使粗混合物通过高压均质器，将粗混合物均质化，从而形成乳液。任选地，使乳液通过高压均质器两次或更多次。在步骤210，通过蒸发从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成蒸发后的纳米颗粒悬浮液。任选地，在步骤212，配制蒸发后的纳米颗粒悬浮液，例如通过添加含有白蛋白或一种或多种赋形剂的水溶液。在步骤214，任选地对配制的纳米颗粒悬浮液进行无菌过滤，并且在步骤216，任选地将无菌纳米颗粒悬浮液填充到一个或多个小瓶中。任选地，在步骤218，将小瓶冻干和/或密封。图3是示例制备本文所述纳米颗粒的方法的另一个实施方式的流程图。在步骤302，将含有溶解在水中的白蛋白的水溶液转移到容器中，并用高剪切混合器混合。在步骤304，在用高剪切混合器混合水溶液时，将含有一种或多种有机溶剂(例如水混溶性溶剂和水不混溶性溶剂)和疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的有机溶液加入含有水溶液的容器中，从而形成粗混合物。在步骤306，通过使粗混合物通过高压均质器，使粗混合物均质化，从而形成乳液。任选地，使乳液通过高压均质器两次或更多次。在步骤308，将生物活性多肽(其可以被包含在第二水溶液中)加入乳液中。在步骤310，通过蒸发从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成蒸发后的纳米颗粒悬浮液。任选地，在步骤312，配制蒸发后纳米颗粒悬浮液，例如通过添加含有白蛋白或一种或多种赋形剂的水溶液。在步骤314，任选地对配制的纳米颗粒悬浮液进行无菌过滤，并且在步骤316，任选地将无菌纳米颗粒悬浮液填充到一个或多个小瓶中。任选地，在步骤318，将小瓶冻干和/或密封。图4是示例制备本文所述纳米颗粒的方法的另一个实施方式的流程图。在步骤402，将含有溶解在水中的白蛋白的水溶液转移到容器中，并用高剪切混合器混合。在步骤404，将用高剪切混合器混合水溶液时，将含有一种或多种有机溶剂(例如水混溶性溶剂和水不混溶性溶剂)和疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的有机溶液加入含有水溶液的容器中，从而形成粗混合物。在步骤406，通过使粗混合物通过高压均质器，使粗混合物均质化，从而形成乳液。任选地，使乳液通过高压均质器两次或更多次。在步骤408，通过蒸发从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成蒸发后的纳米颗粒悬浮液。在步骤410，将生物活性多肽(其可以被包含在第二水溶液中)添加到蒸发后的纳米颗粒悬浮液中。在一些实施方式中，将生物活性多肽和纳米颗粒悬浮液温育一段时间。任选地，在步骤412，配制蒸发后纳米颗粒悬浮液，例如通过添加含有白蛋白或一种或多种赋形剂的水溶液。在一些实施例中，步骤410和412组合在单个步骤中。例如，可以将生物活性多肽添加到纳米颗粒悬浮液中，同时添加白蛋白或一种或多种赋形剂。生物活性多肽、白蛋白或赋形剂可以在相同的水溶液或不同的水溶液中组合。在步骤414，任选地对配制的纳米颗粒悬浮液进行无菌过滤，并且在步骤416，任选地将无菌纳米颗粒悬浮液填充到一个或多个小瓶中。任选地，在步骤418，将小瓶冻干和/或密封。图5是示例制备本文所述纳米颗粒的方法的另一个实施方式的流程图。在步骤502，将生物活性多肽(例如，在水溶液中)与包含纳米颗粒的组合物组合，所述纳米颗粒包含白蛋白和疏水性药物。预制纳米颗粒可以例如来自早前制备的过滤的纳米颗粒悬浮液或冻干的纳米颗粒组合物(其可以重构或不重构)。示例性的预制纳米颗粒是(nab-紫杉醇)。在一些实施方式中，利用包含生物活性多肽的水溶液悬浮冻干的纳米颗粒组合物。任选地，在步骤504，配制包含的纳米颗粒悬浮液，例如通过添加含有白蛋白或一种或多种赋形剂的水溶液。在一些实施例中，步骤502和504组合在单个步骤中。例如，可以将生物活性多肽添加到纳米颗粒悬浮液中，同时添加白蛋白或一种或多种赋形剂。生物活性多肽、白蛋白或赋形剂可以在相同的水溶液或不同的水溶液中组合。在步骤506，任选地对配制的纳米颗粒悬浮液进行无菌过滤，并且在步骤508，任选地将无菌纳米颗粒悬浮液填充到一个或多个小瓶中。任选地，在步骤510，将小瓶冻干和/或密封。图6是示例制备本文所述纳米颗粒的方法的另一个实施方式的流程图。在步骤602，将含有溶解在水中的衍生化白蛋白的水溶液转移到容器中，并用高剪切混合器混合。在一些实施方式中，水溶液还包含非衍生化白蛋白。在步骤604，在用高剪切混合器混合水溶液时，将含有一种或多种有机溶剂(例如水混溶性溶剂和水不混溶性溶剂)和疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的有机溶液加入含有水溶液的容器中，从而形成粗混合物。在步骤606，通过使粗混合物通过高压均质器，使粗混合物均质化，从而形成乳液。任选地，使乳液通过高压均质器两次或更多次。在步骤608，通过蒸发从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成蒸发后的纳米颗粒悬浮液。在步骤610，可以用非衍生化白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的衍生化白蛋白，例如通过透析、离心和纳米颗粒再悬浮、或切向流过滤。在步骤612，将生物活性多肽(其可以被包含在第二水溶液中)添加到纳米颗粒悬浮液中。在一些实施方式中，生物活性多肽是衍生化的(取决于缀合方法)。任选地，在步骤614，配制悬浮液，例如通过添加含有白蛋白或一种或多种赋形剂的水溶液。在一些实施例中，步骤610和614、或步骤612和614组合在单个步骤中。例如，可以将生物活性多肽添加到纳米颗粒悬浮液中，同时添加白蛋白或一种或多种赋形剂。生物活性多肽、白蛋白或赋形剂可以在相同的水溶液或不同的水溶液中组合。在步骤616，任选地对配制的纳米颗粒悬浮液进行无菌过滤，并且在步骤618，任选地将无菌纳米颗粒悬浮液填充到一个或多个小瓶中。任选地，在步骤620，将小瓶冻干和/或密封。使用方法本文所述的组合物可用于治疗与细胞增殖或过度增殖有关的疾病，例如癌症。因此，在一些实施方式中，提供了治疗有此需要的个体的疾病(例如癌症)的方法，包括向个体给予有效量的包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯。在一些实施方式中，生物活性多肽与疏水性药物的实体核芯的表面缔合。在一些实施方式中，部分生物活性多肽嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物中至少约75％的生物活性多肽与纳米颗粒缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含至少约100个生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中疏水性药物和生物活性多肽的重量比为约4：1。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中白蛋白和疏水性药物的重量比为小于约1：1至约9：1。在一些实施方式中，通过动态光散射(dls)测量的纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物还包含不与纳米颗粒缔合的生物活性多肽。在一些实施方式中，疏水性药物是紫杉烷。在一些实施方式中，紫杉烷是紫杉醇。在一些实施方式中，疏水性药物是莫司药物。在一些实施方式中，莫司药物是雷帕霉素。在一些实施方式中，生物活性多肽是治疗性抗体。在一些实施方式中，生物活性多肽选自：贝伐单抗、西妥昔单抗、伊匹单抗、纳武单抗、帕尼单抗和利妥昔单抗。通过本文所述组合物治疗的癌症包括但不限于癌、淋巴瘤、胚细胞瘤、肉瘤和白血病。可通过本文描述的组合物治疗的癌症的实例包括但不限于鳞状细胞癌、肺癌(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺腺癌和肺鳞状细胞癌，包括鳞状nsclc)、腹膜癌、肝细胞癌、胃癌或胃部癌(包括胃肠癌)、胰腺癌(如晚期胰腺癌)、胶质母细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌(如肝细胞癌)、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、黑素瘤、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌或肾部癌、肝癌、前列腺癌(如晚期前列腺癌)、外阴癌、甲状腺癌、肝部癌、头颈癌、结肠直肠癌、直肠癌、软组织肉瘤、卡波西氏(kaposi)肉瘤、b细胞淋巴瘤(包括低级/滤泡性非霍奇金淋巴瘤(nhl)、小淋巴细胞癌(sl)nhl、中级/滤泡性nhl、中级弥漫性nhl、高级免疫母细胞性nhl、高级淋巴细胞性nhl、高级小型非切割细胞nhl、大体积性疾病(bulkydisease)nhl、套细胞淋巴瘤、aids相关淋巴瘤、和waldenstrom巨球蛋白血症)、慢性淋巴细胞白血病(cll)、急性淋巴母细胞白血病(all)、骨髓瘤、毛细胞白血病、慢性成髓细胞白血病、和移植后淋巴组织增生性障碍(ptld)、以及与斑痣性错构瘤病(phakomatoses)、水肿(如与脑肿瘤相关)和梅格斯(meigs)综合征相关的异常血管增生。在一些实施方式中，提供了治疗转移性癌症(即，已经从原发性肿瘤转移的癌症)的方法。在一些实施方式中，提供了减少细胞增殖和/或细胞迁移的方法。在一些实施方式中，提供了治疗增生的方法，例如血管系统中的增生，其可导致再狭窄或增生，该再狭窄或增生可导致动脉或静脉高血压。在一些实施方式中，提供了治疗晚期阶段癌症的方法。在一些实施方式中，提供了治疗乳腺癌(其可以是her2阳性或her2阴性)的方法，包括例如晚期乳腺癌、iv期乳腺癌、局部晚期乳腺癌和转移性乳腺癌。在一些实施方式中、癌症是肺癌、包括例如非小细胞肺癌(nsclc，例如晚期nsclc)、小细胞肺癌(sclc、例如晚期sclc)、和肺中的晚期实体瘤恶性肿瘤。在一些实施方式中，癌症是卵巢癌、头颈癌、胃恶性肿瘤、黑素瘤(包括转移性黑素瘤)、结肠直肠癌、胰腺癌和实体瘤(例如晚期实体瘤)。在一些实施方式中、癌症是下列中的任一种(并且在一些实施方式中选自)：乳腺癌、结肠直肠癌、直肠癌、非小细胞肺癌、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、肾细胞癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、软组织肉瘤、卡波西氏肉瘤、类癌癌、头颈癌、黑素瘤、卵巢癌、间皮瘤、胶质瘤、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤和多发性骨髓瘤。在一些实施方式中，癌症是实体瘤。在一些实施方式中，待治疗的癌症是乳腺癌，例如转移性乳腺癌。在一些实施方式中，待治疗的癌症是肺癌。例如非小细胞肺癌，包括晚期非小细胞肺癌。在一些实施方式中，待治疗的癌症是胰腺癌，例如早期胰腺癌或晚期或转移性胰腺癌。在一些实施方式中，待治疗的癌症是黑素瘤，例如iii期或iv期黑素瘤。在一些实施方式中，针对增殖性疾病治疗的个体已被鉴定具有一种或多种本文所述的状况。技术人员对本文所述病症的鉴定是本领域常规的(例如，通过血液测试、x射线、ct扫描、内窥镜检查、活组织检查、血管造影、ct血管造影等)，并且也可能被个体或其他人怀疑，例如由于肿瘤生长、出血、溃疡、疼痛、淋巴结肿大、咳嗽、黄疸、肿胀、体重减轻、恶病质、出汗、贫血、副肿瘤现象、血栓形成等。在一些实施方式中，个体已被鉴定为易感一种或多种本文所述的状况。个体的易感性可以基于技术人员所理解的多种风险因素和/或诊断方法中的任一种或多种，包括但不限于遗传谱、家族史、病史(例如，相关状况的出现)、生活方式或习惯。在一些实施方式中，本文使用的方法和/或组合物使与增殖性疾病(例如，癌症)相关的一种或多种症状的严重程度，与治疗前相同个体中的相应症状相比，或与未接受所述方法和/或组合物的其他个体中的相应症状相比，降低至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％中的任一种。在一些实施方式中，本文所述的组合物(例如药物组合物)与另一种给药模式或治疗组合使用。组合治疗本文所述的组合物可用作组合治疗的组分，以治疗与细胞增殖或过度增殖相关的疾病，例如癌症。因此，在一些实施方式中，提供了治疗有此需要的个体的疾病(例如癌症)的方法，包括向个体给予：(1)有效量的包含纳米颗粒的组合物，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽；(2)有效量的一种或多种另外的治疗剂。在一些实施方式中，本文所述的组合物包含(1)纳米颗粒，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽；(2)一个或多个另外的治疗剂。在一些实施方式中，所述一种或多种另外的治疗剂是水溶性药剂。在一些实施方式中，其他治疗剂是化学治疗剂。在一些实施方式中，其他治疗剂是铂类药剂。在一些实施方式中，铂类药剂是卡铂。在一些实施方式中，铂类药剂是顺铂。在一些实施方式中，其他治疗剂是抗代谢物。在一些实施方式中，其他治疗剂是吉西他滨(gemcitabine)。在一些实施方式中，其他治疗剂是度伐单抗。在一些实施方式中，其他治疗剂是卡培他滨(capecitabine)。在一些实施方式中，其他治疗剂是5-氟尿嘧啶、甲酰四氢叶酸(leucovorin)、伊立替康(irinotecan)和/或奥沙利铂(oxaliplatin)。在一些实施方式中，其他治疗剂是ipafricept。在一些实施方式中，其他治疗剂是vantictumab。在一些实施方式中，其他治疗剂是pegph20。在一些实施方式中，其他治疗剂是纳武单抗。在一些实施方式中，其他治疗剂是耐昔妥珠单抗(necitumumab)。因此，在一些实施方式中，提供了治疗有此需要的个体的疾病(例如癌症)的方法，包括向个体给予：(1)有效量的包含纳米颗粒的组合物，该纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽；(2)有效量的其他治疗剂。在一些实施方式中，纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯。在一些实施方式中，生物活性多肽与疏水性药物的实体核芯的表面缔合。在一些实施方式中，部分生物活性多肽嵌入疏水性药物的实体核芯中。在一些实施方式中，生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白缔合。在一些实施方式中，组合物中至少约75％的生物活性多肽与纳米颗粒缔合。在一些实施方式中，纳米颗粒包含至少约100个生物活性多肽。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中疏水性药物和生物活性多肽的重量比为约4：1。在一些实施方式中，组合物中的纳米颗粒中白蛋白和疏水性药物的重量比为小于约1：1至约9：1。在一些实施方式中，通过动态光散射测量的纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。在一些实施方式中，组合物还包含不与纳米颗粒缔合的生物活性多肽。在一些实施方式中，疏水性药物是紫杉烷。在一些实施方式中，紫杉烷是紫杉醇。在一些实施方式中，疏水性药物是莫司药物。在一些实施方式中，莫司药物是雷帕霉素。在一些实施方式中，生物活性多肽是治疗性抗体。在一些实施方式中，生物活性多肽选自：贝伐单抗、西妥昔单抗、伊匹单抗、纳武单抗、帕尼单抗和利妥昔单抗。在一些实施方式中，其他治疗剂是化学治疗剂。在一些实施方式中，其他治疗剂是铂类药剂。在一些实施方式中，铂类药剂是卡铂。在一些实施方式中，铂类药剂是顺铂。在一些实施方式中，其他治疗剂是吉西他滨。用药和给予纳米颗粒组合物的方法给予个体(例如人)的组合物的剂量可随具体组合物、给予模式和所治疗疾病类型而变化。在一些实施方式中，纳米颗粒量有效导致客观响应(例如部分响应或完全响应)。在一些实施方式中，组合物量足以导致个体的完全响应。在一些实施方式中，组合物量足以导致个体的部分响应。在一些实施方式中，组合物给予量(例如当单独给予时)足以在用该组合物治疗的个体群中产生大于约40％、50％、60％或64％中任一种的总响应率。个体对本文所述方法的治疗的响应可以例如基于recist水平确定。在一些实施方式中，组合物的量足以延长个体的无进展存活期。在一些实施方式中，组合物的量足以延长个体的总存活期。在一些实施方式中，组合物的量(例如当单独给予时)足以在用该组合物治疗的个体群中产生超过约50％、60％、70％或77％中的任一种的临床益处。在一些实施方式中，组合物、第一治疗、第二治疗或组合治疗的量是足以使肿瘤尺寸减小，使癌细胞数量减少，或使肿瘤生长速率降低至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％中任一种——与在治疗前的同一对象的相应肿瘤尺寸、癌细胞数量或肿瘤生长速率相比或与未接受治疗的其他对象的相应活性相比。标准方法可用于测量此效应的量级，例如利用纯化酶的体外测定、基于细胞的测定、动物模型或人体测试。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的量在引起毒理作用(即，在临床可接受的毒性水平以上的作用)的水平以下或处于在将组合物给予个体时潜在的副作用可以被控制或耐受的水平。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的包含量在以下任意范围内：约0.1mg至约500mg、约0.1mg至约2.5mg、约0.5至约5mg、约5至约10mg、约10至约15mg、约15至约20mg、约20至约25mg、约20至约50mg、约25至约50mg、约50至约75mg、约50至约100mg、约75至约100mg、约100至约125mg、约125至约150mg、约150至约175mg、约175至约200mg、约200至约225mg、约225至约250mg、约250至约300mg、约300至约350mg、约350至约400mg、约400至约450mg、或约450至约500mg。在一些实施方式中，有效量组合物(例如，单位剂型)中的疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的量在约5mg至约500mg的范围内，例如约30mg至约300mg或约50mg至约200mg。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的浓度是稀释的(约0.1mg/ml)或浓缩的(约100mg/ml)，包括例如约0.1至约50mg/ml、约0.1至约20mg/ml、约1至约10mg/ml、约2mg/ml至约8mg/ml、约4至约6mg/ml、或约5mg/ml中的任一种。在一些实施方式中，疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的浓度为至少约0.5mg/ml、1.3mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ml或50mg/ml中的任一种。组合物中疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的示例性有效量包括但不限于，至少约25mg/m2、30mg/m2、50mg/m2、60mg/m2、75mg/m2、80mg/m2、90mg/m2、100mg/m2、120mg/m2、125mg/m2、150mg/m2、160mg/m2、175mg/m2、180mg/m2、200mg/m2、210mg/m2、220mg/m2、250mg/m2、260mg/m2、300mg/m2、350mg/m2、400mg/m2、500mg/m2、540mg/m2、750mg/m2、1000mg/m2、或1080mg/m2疏水性药物中的任一种。在各种实施方式中，组合物包含小于约350mg/m2、300mg/m2、250mg/m2、200mg/m2、150mg/m2、120mg/m2、100mg/m2、90mg/m2、50mg/m2、或30mg/m2的疏水性药物(例如，紫杉醇，如紫杉醇)。在一些实施方式中，每次给予的疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的量小于约25mg/m2、22mg/m2、20mg/m2、18mg/m2、15mg/m2、14mg/m2、13mg/m2、12mg/m2、11mg/m2、10mg/m2、9mg/m2、8mg/m2、7mg/m2、6mg/m2、5mg/m2、4mg/m2、3mg/m2、2mg/m2、或1mg/m2中的任一种。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的有效量被包括在以下范围中的任何范围内：约1至约5mg/m2、约5至约10mg/m2、约10至约25mg/m2、约25至约50mg/m2、约50至约75mg/m2、约75至约100mg/m2、约100至约125mg/m2、约125至约150mg/m2、约150至约175mg/m2、约175至约200mg/m2、约200至约225mg/m2、约225至约250mg/m2、约250至约300mg/m2、约300至约350mg/m2、或约350至约400mg/m2。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的有效量为约5至约300mg/m2，如约100至约150mg/m2、约120mg/m2、约130mg/m2、或约140mg/m2。在任何上述方面的一些实施方式中，组合物中疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的有效量包括至少约1mg/kg、2.5mg/kg、3.5mg/kg、5mg/kg、6.5mg/kg、7.5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg、或60mg/kg中的任一种。在各种实施方式中，组合物中疏水性药物(例如紫杉醇，例如紫杉醇)的有效量包括小于约350mg/kg、300mg/kg、250mg/kg、200mg/kg、150mg/kg、100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg、20mg/kg、10mg/kg、7.5mg/kg、6.5mg/kg、5mg/kg、3.5mg/kg、2.5mg/kg、或1mg/kg疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)中的任一种。在一些实施方式中，组合物中生物活性多肽(例如，治疗性抗体)的量被包括在以下范围中的任何范围内：约0.1mg至约500mg、约0.1mg至约2.5mg、约0.5至约5mg、约5至约10mg、约10至约15mg、约15至约20mg、约20至约25mg、约20至约50mg、约25至约50mg、约50至约75mg、约50至约100mg、约75至约100mg、约100至约125mg、约125至约150mg、约150至约175mg、约175至约200mg、约200至约225mg、约225至约250mg、约250至约300mg、约300至约350mg、约350至约400mg、约400至约450mg、或约450至约500mg。在一些实施方式中，有效量的组合物(例如，单位剂型)中的生物活性多肽(例如，治疗性抗体)的量在约5mg至约500mg的范围内，如约30mg至约300mg、或约50mg至约200mg。在一些实施方式中，组合物中生物活性多肽(例如治疗性抗体)的浓度是稀释的(约0.1mg/ml)或浓缩的(约100mg/ml)，包括例如约0.1至约50mg、约0.1至约20mg/ml、约1至约10mg/ml、约2mg/ml至约8mg/ml、约4至约6mg/ml、或约5mg/ml中的任一种。在一些实施方式中，生物活性多肽(例如，治疗性抗体)的浓度为至少约0.5mg/ml、1.3mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、或50mg/ml中的任一种。组合物中生物活性多肽(例如治疗性抗体)的示例性有效量包括但不限于25mg/m2、30mg/m2、50mg/m2、60mg/m2、75mg/m2、80mg/m2、90mg/m2、100mg/m2、120mg/m2、125mg/m2、150mg/m2、160mg/m2、175mg/m2、180mg/m2、200mg/m2、210mg/m2、220mg/m2、250mg/m2、260mg/m2、300mg/m2、350mg/m2、400mg/m2、500mg/m2、540mg/m2、750mg/m2、1000mg/m2、或1080mg/m2的生物活性多肽。在各种实施方式中，组合物包含小于约350mg/m2、300mg/m2、250mg/m2、200mg/m2、150mg/m2、120mg/m2、100mg/m2、90mg/m2、50mg/m2、或30mg/m2生物活性多肽(例如，治疗性抗体)中的任一种。在一些实施方式中，每次给予的生物活性多肽(例如，治疗性抗体)的量小于约25mg/m2、22mg/m2、20mg/m2、18mg/m2、15mg/m2、14mg/m2、13mg/m2、12mg/m2、11mg/m2、10mg/m2、9mg/m2、8mg/m2、7mg/m2、6mg/m2、5mg/m2、4mg/m2、3mg/m2、2mg/m2、或1mg/m2中的任一种。在一些实施方式中，组合物中生物活性多肽(例如，治疗性抗体)的有效量被包括在以下范围中的任何范围内：约1至约5mg/m2、约5至约10mg/m2、约10至约25mg/m2、约25至约50mg/m2、约50至约75mg/m2、约75至约100mg/m2、约100至约125mg/m2、约125至约150mg/m2、约150至约175mg/m2、约175至约200mg/m2、约200至约225mg/m2、约225至约250mg/m2、约250至约300mg/m2、约300至约350mg/m2、或约350至约400mg/m2。在一些实施方式中，组合物中生物活性多肽(例如治疗性抗体)的有效量为约5至约300mg/m2、suchas约100至约150mg/m2、约120mg/m2、约130mg/m2、或约140mg/m2。在任何上述方面的一些实施方式中，组合物中生物活性多肽(例如治疗性抗体)的有效量包括至少约1mg/kg、2.5mg/kg、3.5mg/kg、5mg/kg、6.5mg/kg、7.5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg、或60mg/kg中的任一种。在各种实施方式中，组合物中生物活性多肽(例如治疗性抗体)的有效量包括小于约350mg/kg、300mg/kg、250mg/kg、200mg/kg、150mg/kg、100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg、20mg/kg、10mg/kg、7.5mg/kg、6.5mg/kg、5mg/kg、3.5mg/kg、2.5mg/kg、或1mg/kg生物活性多肽中的任一种。在一些实施方式中，组合物中与组合物的非纳米颗粒部分相关的生物活性多肽的量针对疾病(例如癌症)和/或被治疗个体进行优化。在一些实施方式中，组合物中与组合物的纳米颗粒部分相关的生物活性多肽的量针对疾病(例如癌症)和/或被治疗个体进行优化。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物和生物活性多肽的比例针对疾病(例如癌症)和/或被治疗个体进行优化。在一些实施方式中，组合物的量接近按照相同用药方案的组合物最大耐受剂量(mtd)。在一些实施方式中，组合物的量大于mtd的约80％、90％、95％或98％中的任一种。用于给予本文所述组合物的示例性用药频率包括但不限于每天、每两天、每三天、每四天、每五天、每六天、每周不中断、四周三次、每三周一次、每两周一次、或三周两次。在一些实施方式中，组合物被给予约每2周一次、每3周一次、每4周一次、每6周一次、或每8周一次。在一些实施方式中，组合物被给予至少约1次、2次、3次、4次、5次、6次或7次/周(即每天)中的任一种。在一些实施方式中，每次给予之间的间隔小于约6个月、3个月、1个月、20天、15天、14天、13天、12天、11天、10天、9天、8天、7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天中的任一种。在一些实施方式中，每次给予之间的间隔大于约1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、8个月或12个月中的任一种。在一些实施方式中，用药安排无中断。在一些实施方式中，每次给予之间的间隔不超过约一周。在一些实施方式中，用药频率是每两天一次，用一次、两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次、十次和十一次。在一些实施方式中，用药频率是每两天一次，用五次。在一些实施方式中，组合物经至少十天的时间被给予，其中每次给予之间的间隔不超过约两天，并且其中每次给予时组合物的剂量为约0.25mg/m2至约250mg/m2、约0.25mg/m2至约150mg/m2、约0.25mg/m2至约75mg/m2，如约0.25mg/m2至约25mg/m2、或约25mg/m2至约50mg/m2——通过组合物中的疏水性药物量测量。组合物的给予可以长时间延长，如约一个月上至约七年。在一些实施方式中，组合物经至少约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、18、24、30、36、48、60、72或84个月中任一种的时间被给予。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的剂量可以处于如下范围内：在基于3周安排给予时为5-400mg/m2，或在基于每周安排给予时为5-250mg/m2(例如80-150mg/m2，例如100-120mg/m2)。例如，疏水性药物(例如紫杉烷，例如紫杉醇)的量基于三周安排为约60至约300mg/m2(例如，约260mg/m2)。用于组合物给予的其他示例性用药安排包括但不限于100mg/m2，每周一次，无中断；75mg/m2，每周一次，四周3次；100mg/m2，每周一次，4周3次；125mg/m2，每周一次，四周3次；125mg/m2，每周一次，3周2次；130mg/m2，每周一次，无中断；175mg/m2，每2周一次；260mg/m2，每2周一次；260mg/m2，每3周一次；180-300mg/m2，每3周一次；60-175mg/m2，每周一次，无中断；20-150mg/m2，每周两次；和150-250mg/m2，每周两次——通过组合物中疏水性药物的量测量。基于给药医师的判断，可以在治疗过程中调节纳米颗粒组合物的用药频率。在一些实施方式中，个体被治疗至少约一、二、三、四、五、六、七、八、九或十个治疗周期中的任一种。本文所述的组合物允许经短于约24小时的输注时间将组合物输注给个体。例如，在一些实施方式中，组合物经小于约24小时、12小时、8小时、5小时、3小时、2小时、1小时、30分钟、20分钟或10小时中任一种的输注期被给予。在一些实施方式中，组合物经约30分钟的输注期被给予。组合物中疏水性药物的其他示例性剂量包括但不限于约50mg/m2、60mg/m2、75mg/m2、80mg/m2、90mg/m2、100mg/m2、120mg/m2、160mg/m2、175mg/m2、200mg/m2、210mg/m2、220mg/m2、260mg/m2、和300mg/m2中的任一种——通过组合物中疏水性药物的量测量。例如，在一些实施方式中，组合物中紫杉醇的剂量可以在如下范围内：当基于3周安排给予时为约100-400mg/m2，或当基于每周安排给予时为约50-250mg/m2。本文所述的组合物可通过各种途径被给予个体(例如人)，该途径包括例如静脉内、动脉内、腹膜内、囊内、皮下、鞘内、肺内、肌内、气管内、眼内、透皮、皮内、口服、门静脉内(intraportally)、肝内、肝动脉输注、或吸入。在一些实施方式中，可以使用组合物的持续连续释放制剂。在一些实施方式中，组合物被静脉内给予。在一些实施方式中，组合物被门静脉内被给予。在一些实施方式中，组合物被动脉内给予给予。在一些实施方式中，组合物经腹膜内给予。在一些实施方式中，组合物被肝内给予。组合治疗的给药模式本文所述组合物的用药方案适用于单一治疗和组合治疗环境。以下进一步描述用于组合治疗方法的给药模式。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂(包括本文所述的具体化学治疗剂)被同时给予。当药物被同时给予时，组合物中的药物和其他治疗剂可以被包含在相同的组合物中(例如，包含纳米颗粒组合物和其他治疗剂的组合物)或单独的组合物中(例如，组合物和其他治疗剂被包含在单独的组合物中)。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂被相继给予。可以先给予组合物或先给予其他治疗剂。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂被包含在单独的组合物中，该单独的组合物可以被包含在相同或不同的包装中。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂的给药是同步的，即组合物的给予期和其他治疗剂的给予期彼此重叠。在一些实施方式中，组合物被给予至少一个周期(例如，至少2、3或4个周期中的任一种)，然后给予其他治疗剂。在一些实施方式中，其他治疗剂被给予至少一周、两周、三周或四周中的任一种。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂的给予在大约相同的时间开始(例如，在1、2、3、4、5、6或7天中的任一种内)。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂的给予在大约相同的时间终止(例如，在1、2、3、4、5、6或7天中的任一种内)。在一些实施方式中，在组合物的给予终止后，其他治疗剂的给予继续(例如，约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月中的任一种)。在一些实施方式中，在组合物的给药开始之后(例如约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12月中的任一种之后)，其他治疗剂的给予开始。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂的给予在大约相同的时间开始和终止。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂的给予在大约相同的时间开始，并且在组合物给予终止后，其他治疗剂的给予继续(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月中的任一种)。在一些实施方式中，组合物和其它治疗剂的给予大约同时停止，并且在组合物的给予开始后(例如在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月中任一种之后)，开始其他治疗剂的给予。在一些实施方式中，组合物和其他治疗剂的给予是非同步的。例如，在一些实施方式中，在给予其他治疗剂之前终止组合物的给予。在一些实施方式中，在给予组合物之前终止其他治疗剂的给予。这两种非同步给药之间的时期范围可以为约2-8周，例如约4周。基于给药医师的判断，可以在治疗过程中调整组合物和其他治疗剂的用药频率。当单独给药时，组合物和其他治疗剂可以以不同的用药频率或间隔被给予。例如，组合物可以被每周给予，而其他药剂可以更高或更低频率给予。在一些实施方式中，可以使用组合物和/或其他药剂的持续连续释放制剂。用于实现持续释放的各种制剂和装置是本领域已知的。也可以使用本文所述的给药配置的组合。组合物和其他治疗剂可以利用相同的给予途径或不同的给予途径被给予。在一些实施方式中(同时和相继给予)，组合物和其他治疗剂以预定比例被给予。例如，在一些实施方式中，组合物中的疏水性药物与其他治疗剂的重量比为约1：1。在一些实施方式中，该重量比可以为约0.001：约1至约1000：约1之间、或约0.01：约1至100：约1之间。在一些实施方式中，组合物中的疏水性药物与其他治疗剂的重量比小于约100：1、50：1、30：1、10：1、9：1、8：1、7：1、6：1、5：1、4：1、3：1、2：1和1：1中的任一种。在一些实施方式中，组合物中的疏水性药物与其他治疗剂的重量比大于约1：1、2：1、3：1、4：1、5：1、6：1、7：1、8：1、9：1、30：1、50：1、100：1中的任一种。考虑其他比例。疏水性药物、生物活性多肽和/或其他治疗剂所需的剂量可以(但不一定)低于当单独给予各药剂时或当生物活性多肽不是疏水性药物纳米颗粒组合物的一部分时通常所需的剂量。因此，在一些实施方式中，给予亚治疗量的、组合物中的疏水性药物和/或其他治疗剂。“亚治疗量”或“亚治疗水平”是指小于治疗量的量，即小于单独给予组合物中的疏水性药物和/或生物活性多肽和/或其他治疗剂时通常使用的量。该减少可以反映在给定给药时的给药量和/或经给定时间的给药量(减少的频率)方面。在一些实施方式中，给予其他化学治疗剂以允许将实现相同程度治疗所需的组合物中的疏水性药物和/或生物活性多肽的正常剂量减少至少约5％、10％、20％、30％、50％、60％、70％、80％、90％或更多中的任一种。在一些实施方式中，给予组合物中足够的疏水性药物和/或生物活性多肽，以允许将实现相同程度治疗所需的其他治疗剂的正常剂量减少至少约5％、10％、20％、30％、50％、60％、70％、80％、90％或更多中的任一种。在一些实施方式中，与单独给予时各自的相应正常剂量相比，组合物中的疏水性药物和/或生物活性多肽以及其他治疗剂的剂量均减少。在一些实施方式中，组合物中的疏水性药物和/或生物活性多肽以及其他治疗剂均以亚治疗水平，即降低的水平被给予。在一些实施方式中，组合物和/或其他治疗剂的剂量显著小于已确立的最大毒性剂量(mtd)。例如，纳米颗粒组合物和/或其他治疗剂的剂量小于mtd的约50％、40％、30％、20％或10％。可以使用本文描述的给药配置的组合。本文所述的组合治疗方法可以单独进行，或与另一种治疗联合进行，如化学治疗、放射治疗、手术、激素治疗、基因治疗、免疫治疗、化学免疫治疗、肝动脉系治疗、冷冻治疗、超声治疗、肝移植、局部消融治疗、射频消融治疗、光动力治疗等。另外，具有更大疾病(例如癌症)发展风险的人可以接受抑制和/或延迟疾病发展的治疗。本文所述的其他治疗剂可通过各种途径被给予个体(如人)，例如肠胃外，包括静脉内、动脉内、腹膜内、肺内、口服、吸入、囊内、肌内、气管内、皮下、眼内、鞘内或透皮。在一些实施方式中，静脉内给予其他治疗剂。在一些实施方式中，纳米颗粒组合物经口服给予。其他治疗剂的用药频率可以与组合物的用药频率相同或不同。以上提供了示例性频率。作为进一步的实例，其他治疗剂可以被给予一天三次、一天两次、每日一次、一周六次、一周五次、一周四次、一周三次、一周两次、每周一次。在一些实施方式中，其他治疗剂被给予每日两次或每日三次。其他治疗剂的示例性量包括但不限于以下范围中的任一种：约1至约2000mg、约500至约1500mg、约700至约1200mg、约800至约1000mg、约0.5至约5mg、约5至约10mg、约10至约15mg、约15至约20mg、约20至约25mg、约20至约50mg、约25至约50mg、约50至约75mg、约50至约100mg、约75至约100mg、约100至约125mg、约125至约150mg、约150至约175mg、约175至约200mg、约200至约225mg、约225至约250mg、约250至约300mg、约300至约350mg、约350至约400mg、约400至约450mg、或约450至约500mg。例如，其他治疗剂可以以下列剂量被给予：约1mg/kg至约200mg/kg(包括例如约1mg/kg至约20mg/kg、约20mg/kg至约40mg/kg、约40mg/kg至约60mg/kg、约60mg/kg至约80mg/kg、约80mg/kg至约100mg/kg、约100mg/kg至约120mg/kg、约120mg/kg至约140mg/kg、约140mg/kg至约200mg/kg)。在一些实施方式中，例如当给予铂类药剂时，其他治疗剂以小于约8、7、6、5、4、3、2或1auc的剂量被给予。在一些实施方式中，其他治疗剂以约1、2、3、4、5、6、7或8auc的剂量被给予。在一些实施方式中，其他治疗剂以约4auc的剂量被给予。在一些实施方式中，其他治疗剂以约5auc的剂量被给予。在一些实施方式中，其他治疗剂以约6auc的剂量被给予。在一些实施方式中，其他治疗剂以约4至约7auc、约5至约6auc、约3至约6auc、约4至约5auc、或约5至约7auc的剂量被给予。在一些实施方式中，其他治疗剂的适当剂量大约是已经在临床治疗中(其中所述其他治疗剂被单独给予或与另外的治疗剂组合给予)使用的那些。药物组合物和单位剂量本文所述的组合物可用于药物组合物或制剂中，通过将本文所述的组合物与药学上可接受的载体、赋形剂、稳定剂和/或用于本文所述的治疗方法、给药方法和剂量方案的本领域已知的其它试剂组合。还提供了本文所述组合物的单位剂量。在一些实施方式中，白蛋白允许将组合物被给予于个体(例如人)而没有显著的副作用。在一些实施方式中，白蛋白(例如人血清白蛋白)的量有效减少疏水性药物或生物活性多肽向个体(例如人)给予的一种或多种副作用。术语“减少给药的一种或多种副作用”是指减少、减轻、消除或避免由诸如疏水性药物或生物活性多肽的药剂的给予引起的一种或多种不期望的作用、以及由用于递送的递送媒介(例如使药剂适合注射的表面活性剂和溶剂)引起的副作用。这种副作用包括，例如，骨髓抑制、神经毒性、过敏、炎症、静脉刺激、静脉炎、疼痛、皮肤刺激、周围神经病、粒细胞缺乏性发热、过敏反应、静脉血栓形成、外渗及其组合。然而，这些副作用仅仅是示例性的，并且与疏水性药物和/或生物活性多肽相关的其他副作用或副作用组合可以被减少。本文所述的组合物可以以干燥制剂(例如冻干组合物)存在或悬浮在生物相容性介质中。适当的生物相容性介质包括但不限于水、缓冲水性介质、盐水、缓冲盐水、任选地缓冲的氨基酸溶液、任选地缓冲的蛋白质溶液、任选地缓冲的糖溶液、任选地缓冲的维生素溶液、任选地缓冲的合成聚合物溶液、含脂质乳液等。本文所述的组合物可以存在于密封的小瓶中。在一些实施方式中，密封的小瓶用于一次性使用。在一些实施方式中，密封的小瓶用于多次性使用。还提供了包含本文所述组合物和制剂的单位剂型。这些单位剂型可以单个或多个单位剂量储存在适当的包装中，并且还可以被进一步灭菌和密封。在一些实施方式中，组合物(例如药物组合物)还包括可用于治疗癌症的一种或多种其他化合物(或其药学上可接受的盐)。在各种变型中，组合物中疏水性药物的量被包括在以下范围中的任一种中：约5至约50mg、约20至约50mg、约50至约100mg、约100至约125mg、约125至约150mg、约150至约175mg、约175至约200mg、约200至约225mg、约225至约250mg、约250至约300mg、约300至约350mg、约350至约400mg、约400至约450mg、或约450至约500mg。在一些实施方式中，组合物中疏水性药物的量(例如，剂量或单位剂型)在约5mg至约500mg的范围内，例如约30mg至约300mg、或约50mg至约200mg衍生物。在一些实施方式中，载体适于肠胃外给予(例如，静脉内给予)。在一些实施方式中，提供了用于治疗癌症的剂型(例如，单位剂型)，其包含本文所述的任一种组合物(例如药物组合物)。在一些实施方式中，提供了制品，其在适当包装中包含本文所述的组合物、制剂和单位剂量，用于本文所述的治疗方法、给药方法和剂量方案。用于本文所述组合物的适当包装是本领域已知的，并且包括例如小瓶(例如密封小瓶)、容器(例如密封容器)、安瓿、长瓶、罐、软包装(例如密封的mylar或塑料袋)等。这些制品可被进一步灭菌和/或密封。套组、药物、医药和组合物本发明还提供了用于本文所述任何方法的套组、药物、医药和组合物。本发明的套组包括一个或多个容器，该容器包含本文所述的一种或多种组合物(或单位剂型和/或制品)和/或其他治疗剂(例如本文所述的试剂)，并且在一些实施方式中，还包含根据本文描述的任何方法使用的说明书。套组可以进一步包括选择适合治疗的个体的描述。本发明的套组中提供的说明书一般是在标签或包装内插物(例如，套组中包括的纸张)上的书面说明，但是机器可读的说明书(例如，磁性或光学存储盘上携带的说明书)也是可以接受的。例如，在一些实施方式中，套组包含：(1)包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽；和(2)给予组合物以治疗疾病(例如癌症)的说明书。在一些实施方式中，套组包含：(1)包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽；(2)有效量的其他治疗剂；(3)给予组合物和其他治疗剂以治疗疾病(例如癌症)的说明。组合物(一种或多种)和其他治疗剂(一种或多种)可以存在于单独容器中或单一容器中。本发明的套组处于适当的包装中。适当的包装包括但不限于小瓶、长瓶、罐、软包装(例如，密封的mylar或塑料袋)等。套组可以任选地提供另外的组分，如缓冲剂和说明信息。因此，本申请还提供制品，其包括小瓶(例如密封小瓶)、长瓶、罐、软包装等。关于本文所述组合物的使用的说明书总体上包括对于预期治疗的剂量、用药安排和给药途径的信息。容器可以是单位剂量、散装(例如，多剂量包装)或亚单位剂量。例如，可以提供这样的套组：含有足够剂量的本文公开的组合物，以长期提供个体的有效治疗，如一周、8天、9天、10天、11天、12天、13天、2周、3周、4周、6周、8周、3个月、4个月、5个月、7个月、8个月、9个月或更长时间中的任一种。套组还可包括多个单位剂量的本文所述组合物和使用说明书，其包装量足以在药房(例如医院药房和复合药房)中储存和使用。还提供了用于本文所述方法的药物、医药、组合和组合物。在一些实施方式中，提供了包含纳米颗粒的、用于治疗疾病(例如癌症)的药物(或组合物)，该纳米颗粒包括(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，提供了包含纳米颗粒的、用于治疗疾病(例如癌症)的药物(或组合物)，该纳米颗粒包括(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽的，其中药物(或组合物)进一步与另一治疗剂一起被给予。在一些实施方式中，提供了包含纳米颗粒的组合物在制备用于个体的疾病(例如癌症)的药物中的用途，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽。在一些实施方式中，提供了包含纳米颗粒的组合物在制备用于个体的疾病(例如癌症)的药物中的用途，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽，其中所述药物进一步与另一治疗剂一起被给予。在一些实施方式中，提供了(1)包含纳米颗粒的组合物——所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽；和(2)另一治疗剂，在制备用于个体的疾病(例如癌症)的药物组合中的用途。在一些实施方式中，提供了组合，其包含：(1)包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽；和(2)另一治疗剂，其用于治疗有此需要的个体的疾病(例如癌症)。本领域技术人员将认识到，在本发明的范围和精神内，若干实施方式是可能的。现在将参考以下非限制性实施例更详细地描述本发明。以下实施例进一步示例了本发明，但当然不应被解释为以任何方式限制其范围。示例性实施方式以下示例性实施方式仅用于示例目的，并不意图限制本发明的范围。实施方式1.包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物、(b)白蛋白、和(c)生物活性多肽。实施方式2.实施方式1的组合物，其中生物活性多肽与白蛋白缀合。实施方式3.实施方式2的组合物，其中生物活性多肽与白蛋白共价交联。实施方式4.实施方式3的组合物，其中生物活性多肽通过化学交联剂与白蛋白共价交联。实施方式5.实施方式3的组合物，其中生物活性多肽通过二硫键与白蛋白共价交联。实施方式6.实施方式2的组合物，其中生物活性多肽通过非共价交联剂与白蛋白缀合。实施方式7.实施方式6的组合物，其中生物活性多肽包含非共价交联剂的第一组分，并且白蛋白包含非共价交联剂的第二组分，并且其中第一组分特异性结合第二组分。实施方式8.实施方式7的组合物，其中非共价交联剂包含核酸分子，其中至少一部分核酸分子是互补的。实施方式9.实施方式1-8中任一项的组合物，其中纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯。实施方式10.实施方式1或9的组合物，其中生物活性多肽与疏水性药物的实体核芯的表面缔合。实施方式11.实施方式9或10的组合物，其中部分生物活性多肽嵌入疏水性药物的实体核芯中。实施方式12.实施方式1-11中任一项的组合物，其中所述生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白缔合。实施方式13.实施方式12的组合物，其中生物活性多肽嵌入纳米颗粒的表面中。实施方式14.实施方式12或13的组合物，其中生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白非共价缔合。实施方式15.实施方式12-14中任一项的组合物，其中生物活性多肽与纳米颗粒上的白蛋白共价缔合。实施方式16.实施方式1-15中任一项的组合物，其中组合物中至少75％的生物活性多肽与纳米颗粒缔合。实施方式17.实施方式1-16中任一项的组合物，其中纳米颗粒包含至少约100个生物活性多肽。实施方式18.实施方式1-17中任一项的组合物，其中组合物中的纳米颗粒中疏水性药物与生物活性多肽的重量比为约1：1至约100：1。实施方式19.实施方式1-18中任一项的组合物，其中纳米颗粒中白蛋白与生物活性多肽的重量比为约1：1至约1000：1。实施方式20.实施方式18或19的组合物，其中：疏水性药物的重量通过反相高效液相色谱(hplc)测定，并且生物活性多肽和白蛋白的重量通过尺寸排阻色谱(sec)测定；或疏水性药物的重量通过反相高效液相色谱(hplc)测定，白蛋白的重量通过尺寸排阻色谱(sec)测定，并且生物活性多肽的重量通过酶联免疫吸附分析(elisa)测定。实施方式21.实施方式1-20中任一项的组合物，其中所述组合物还包含不与纳米颗粒缔合的生物活性多肽。实施方式22.实施方式1-21中任一项的组合物，其中生物活性多肽是抗体或其片段。实施方式23.实施方式22的组合物，其中所述抗体或其片段特异性结合肿瘤相关抗原。实施方式24.实施方式22或23的组合物，其中所述抗体或其片段选自全长抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、cdr嫁接抗体、人源化抗体、fab、fab'、f(ab')2、fv、二硫键连接的fv、scfv、单结构域抗体(dab)、双抗体、多特异性抗体、双特异性抗体、抗个体型抗体、双特异性抗体、其功能活性表位结合片段、双功能杂合抗体和单链抗体。实施方式25.实施方式24的组合物，其中抗体或其片段是fc片段。实施方式26.实施方式1-13中任一个的组合物，其中生物活性多肽是贝伐单抗、曲妥珠单抗、bgb-a317或托珠单抗。实施方式27.包含纳米颗粒的组合物，所述纳米颗粒包含(a)疏水性药物，和(b)用交联剂部分衍生化的白蛋白。实施方式28.实施方式27的组合物，其中纳米颗粒包含涂覆有白蛋白的疏水性药物的实体核芯。实施方式29.实施方式1-19中任一项的组合物，其中组合物中的纳米颗粒中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：1至约20：1。实施方式30.实施方式29的组合物，其中疏水性药物的重量通过反相高效液相色谱(hplc)测定，并且白蛋白的重量通过尺寸排阻色谱(sec)测定。实施方式31.实施方式1-30中任一项的组合物，其中组合物的纳米颗粒部分中至少约40％的白蛋白通过二硫键交联。实施方式32.实施方式1-31中任一项的组合物，其中通过动态光散射测量的纳米颗粒的平均直径不大于约200nm。实施方式33.实施方式1-32中任一项的组合物，其中所述组合物还包含不与纳米颗粒缔合的白蛋白。实施方式34.实施方式1-33中任一项的组合物，其中疏水性药物是紫杉烷。实施方式35.实施方式1-34中任一项的组合物，其中疏水性药物是紫杉醇。实施方式36.实施方式1-33中任一项的组合物，其中疏水性药物是莫司药物。实施方式37.实施方式1-33和36中任一项的组合物，其中疏水性药物是雷帕霉素。实施方式38.制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，和其中水溶液包含白蛋白和生物活性多肽；和ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。实施方式39.实施方式38的方法，其中水溶液中生物活性多肽与白蛋白缀合。实施方式40.制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，和其中水溶液包含白蛋白；ii)将生物活性多肽添加到乳液中；和iii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。实施方式41.制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，和其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，得到蒸发后的悬浮液，和iii)将生物活性多肽加入蒸发后的悬浮液中，从而形成组合物。实施方式42.制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，和其中水溶液包含白蛋白；ii)从乳液中除去至少部分但不是全部所述一种或多种有机溶剂，得到乳液-悬浮液中间体；iii)将生物活性多肽加入乳液-悬浮液中间体；和iv)从包含生物活性多肽的乳液-悬浮液中间体中除去另一部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。实施方式43.制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，和其中水溶液包含白蛋白，其中白蛋白用交联剂部分衍生化；ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，得到蒸发后的悬浮液，和iii)将生物活性多肽添加到蒸发后的悬浮液中，其中生物活性多肽用交联剂部分衍生化，从而形成组合物。实施方式44.实施方式43的方法，其进一步包括用非衍生化白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的衍生化白蛋白。实施方式45.实施方式44的方法，其中所述替代是通过透析进行的。实施方式46.实施方式44的方法，其中所述替代是通过缓冲剂交换进行的。实施方式47.实施方式44的方法，其中所述替代是通过下列进行的：通过离心将纳米颗粒与不与纳米颗粒缔合的衍生化白蛋白分离，和用包含非衍生化白蛋白的溶液重新悬浮纳米颗粒。实施方式48.制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和生物活性多肽，所述方法包括：i)使有机溶液和水溶液的混合物进行高压均质化，从而形成乳液，其中有机溶液包含溶解在一种或多种有机溶剂中的疏水性药物，和其中水溶液包含白蛋白，其中至少一部分白蛋白与生物活性多肽缀合；和ii)从乳液中除去至少部分所述一种或多种有机溶剂，从而形成组合物。实施方式49.实施方式48的方法，其进一步包括用未缀合的白蛋白替代不与纳米颗粒缔合的生物活性多肽缀合的白蛋白。实施方式50.实施方式48的方法，其中所述替代是通过透析进行的。实施方式51.实施方式48的方法，其中所述替代是通过缓冲剂交换进行的。实施方式52.实施方式48的方法，其中所述替代是通过下列进行的：通过离心将纳米颗粒与不与纳米颗粒缔合的生物活性多肽缀合的白蛋白分离，和用包含未缀合的白蛋白的溶液重新悬浮纳米颗粒。实施方式53.制备包含纳米颗粒的组合物的方法，所述纳米颗粒包含疏水性药物、白蛋白和与白蛋白缀合的生物活性多肽，所述方法包括将生物活性多肽与包含疏水性药物和白蛋白的纳米颗粒缀合。实施方式54.实施方式38-53中任一项的方法，还包括在除去有机溶剂之前向乳液加入白蛋白。实施方式55.实施方式38-54中任一项的方法，还包括在除去有机溶剂后向组合物加入白蛋白。实施方式56.实施方式38-55中任一项的方法，还包括在除去有机溶剂后将生物活性多肽添加到组合物中。实施方式57.实施方式38-56中任一项的方法，还包括无菌过滤除去有机溶剂后形成的组合物。实施方式58.实施方式38-57中任一项的方法，其中疏水性药物是紫杉烷。实施方式59.实施方式38-58中任一项的方法，其中疏水性药物是紫杉醇。实施方式60.实施方式38-59中任一项的方法，其中疏水性药物是莫司药物。实施方式61.实施方式38-57和60中任一项的方法，其中疏水性药物是雷帕霉素。实施方式62.实施方式38-61中任一项的方法，其中生物活性多肽是抗体或其片段。实施方式63.实施方式62的方法，其中所述抗体或其片段特异性结合肿瘤相关抗原。实施方式64.实施方式62或63的方法，其中抗体或其片段选自全长抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、cdr嫁接抗体、人源化抗体、fab、fab'、f(ab')2、fv、二硫键连接的fv、scfv、单结构域抗体(dab)、双抗体、多特异性抗体、双特异性抗体、抗个体型抗体、双特异性抗体、其功能活性表位结合片段、双功能杂合抗体和单链抗体。实施方式65.实施方式64的方法，其中所述抗体或其片段是fc片段。实施方式66.实施方式38-65中任一项的方法，其中生物活性多肽是贝伐单抗、曲妥珠单抗、bgb-a317或托珠单抗。实施方式67.通过实施方式37-67中任一项的方法获得的组合物。实施方式68.实施方式1-37和67中任一项的组合物，其中组合物基本上不含表面活性剂。实施方式69.实施方式1-37、67和68中任一项的组合物，其中组合物是水悬浮液。实施方式70.实施方式1-37、67和68中任一项的组合物，其中组合物是干燥组合物。实施方式71.实施方式70的组合物，其中组合物被冻干。实施方式72.实施方式1-37和67-71中任一项的组合物，还包含一种或多种另外的治疗剂。实施方式73.药物组合物，其包含实施方式1-37和67-72中任一项的组合物和药学上可接受的赋形剂。实施方式74.密封小瓶，其包含实施方式1-37和67-73中任一项的组合物。实施方式75.实施方式74的密封小瓶，其中密封小瓶用于一次性使用。实施方式76.实施方式74的密封小瓶，其中密封小瓶用于多次性使用。实施方式77.乳液，其包含：a)分散的有机相，该有机相包括含有一种或多种有机溶剂和疏水性药物的纳米液滴；和b)连续的水相，该水相包含白蛋白和生物活性多肽。实施方式78.实施方式77的乳液，其中至少一部分白蛋白与生物活性多肽缀合。实施方式79.实施方式77或78的乳液，其中乳液中白蛋白与生物活性多肽的重量比为约1：1至约1000：1。实施方式80.实施方式77-79中任一项的乳液，其中乳液中疏水性药物与生物活性多肽的重量比为约1：1至约100：1。实施方式81.乳液，其包含：a)分散的有机相，该有机相包含纳米液滴，所述纳米液滴包含一种或多种有机溶剂和疏水性药物；和b)连续的水相，该水相包含用交联剂部分衍生化的白蛋白。实施方式82.实施方式77-81中任一项的乳液，其中乳液中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：1至约20：1。实施方式83.粗混合物，包含：a)包含一种或多种有机溶剂和疏水性药物的有机溶液、和b)包含用交联剂部分衍生化的白蛋白的连续水相。实施方式84.实施方式84的粗混合物，其中粗混合物中白蛋白与疏水性药物的重量比为约1：1至约20：1。实施方式85.治疗个体的疾病的方法，包括向个体给予有效量的实施方式1-37和67-73中任一项的组合物。实施方式86.实施方式85的方法，进一步包括向个体给予有效量的另一治疗剂。实施方式87.实施方式85或86的方法，其中疾病是癌症。实施方式88.实施方式85-87中任一项的方法，其中将所述组合物静脉内给予个体。实施方式89.实施方式85-88中任一项的方法，其中所述个体是人。实施例实施例1：赋形剂对nab-紫杉醇组合物的影响(贝伐单抗)中含有的赋形剂包括磷酸钠缓冲剂，ph6.2；α,α-海藻糖；和聚山梨醇酯20。在这些赋形剂存在下，在各种温度和ph下，包含白蛋白和紫杉醇的纳米颗粒的稳定性通过以下确定：通过动态光散射测量颗粒尺寸分布，以及在一些情况下，利用0.2μm膜测量过滤性。包含白蛋白和紫杉醇(即)的预制纳米颗粒以10mg/ml的紫杉醇浓度重构，并经受以下条件。1.用生理盐水溶液将重构至10mg/ml，并将ph调节至7。在室温下24小时后，纳米颗粒是稳定的(通过动态光散射测定的颗粒尺寸分布没有显著改变，以及通过颗粒、聚集体和沉降的目视和显微镜观察判断)。2.用生理盐水溶液将重构至10mg/ml，并将ph调节至5。在室温下24小时后，纳米颗粒不稳定，最可能是因为接近白蛋白的近似5等电点(pi)时的聚集。3.用20％的缓冲剂(5.8mg/ml磷酸钠(一元，一水合物)，1.2mg/ml磷酸钠(二元，无水)，ph6.2，60mg/mlα,α-海藻糖)，但不包括聚山梨醇酯20)和80％生理盐水将重构成10mg/ml，并将ph调节至7。在室温下24小时后，纳米颗粒稳定，颗粒尺寸分布没有显著变化。推断磷酸钠和α,α-海藻糖对纳米颗粒稳定性没有显著影响。4.用20％的缓冲剂(含有磷酸钠缓冲剂和α,α-海藻糖，但不包括聚山梨醇酯20)和80％生理盐水将重构至10mg/ml，并将ph调节至5。在室温下24小时后，纳米颗粒不稳定。5.用20％的缓冲剂(含有磷酸钠缓冲剂和α,α-海藻糖，但不包括聚山梨醇酯20)和80％生理盐水将重构成10mg/ml，并将ph调节至5。在58℃下24小时后，纳米颗粒不稳定，因为检测到纳米颗粒聚集体。见图7b。6.用100％的缓冲剂(含有磷酸钠缓冲剂和α,α-海藻糖，但不包括聚山梨醇酯20)将重构至10mg/ml，并且不调节ph(ph测量为6.4)。在室温下24小时后，纳米颗粒稳定，颗粒尺寸分布没有显著变化。见图7a。推断磷酸钠和α,α-海藻糖对纳米颗粒稳定性没有显著影响。7.用100％的缓冲剂(含有磷酸钠缓冲剂和α,α-海藻糖以及聚山梨醇酯20每一种)将重构至10mg/ml，并且不调节ph(ph测量为6.8)。在通过光学显微术观察时，纳米颗粒立即聚集(图7c)，并且在室温下温育24小时后产生微小颗粒和可见的悬浮液沉降。因此，制剂中提供的浓度的聚山梨醇酯表面活性剂本身确实会影响纳米颗粒的稳定性。8.用100％的缓冲剂(含有磷酸钠缓冲剂和α,α-海藻糖以及聚山梨醇酯20(0.04％)每一种)将重构至10mg/ml，并将ph调节至5。纳米颗粒在制作后立即聚集(平均颗粒尺寸从143nm增长至159nm)，并且在室温下24小时后纳米颗粒持续不稳定。这些研究表明，缓冲剂中存在的聚山梨醇酯20会导致纳米颗粒聚集。此外，将ph降低至5会导致颗粒聚集。实施例2：在不存在白蛋白的情况下纳米颗粒制备过程步骤对贝伐单抗稳定性的影响在一些实施方式中，包含白蛋白和疏水性药物的纳米颗粒包括将水溶液中的白蛋白与包含一种或多种溶剂和疏水性药物的有机溶液混合以形成粗混合物，将粗混合物高压均质化以形成乳液，蒸发有机溶剂以形成蒸发后的纳米颗粒悬浮液，稀释纳米颗粒悬浮液，和过滤纳米颗粒悬浮液。在不存在白蛋白和聚山梨醇酯20的情况下贝伐单抗耐受这些制备步骤中的每一个的能力通过使贝伐单抗进行每个制备步骤来确定。通过尺寸排阻色谱(sec)确定贝伐单抗保留量及其聚集状态(即，通过测量向高分子量物质的转化)，来分析来自每个制备步骤的样品。通过离子交换色谱除去聚山梨醇酯20，从而由(25mg/ml贝伐单抗，400mg/小瓶)纯化贝伐单抗。将400mg贝伐单抗加载到具有85mlcaptosimpact柱的制备型fplc(atka纯化器)上。将柱用ph5.0的5m柠檬酸钠洗涤，用25mm柠檬酸钠，ph5.0，1mnacl洗脱。将纯化的贝伐单抗在5℃下对1l透析缓冲剂(50mm磷酸钠缓冲剂，ph6.2)进行缓冲剂交换两次。通过加入10.059ml海藻糖原液(50mm磷酸钠缓冲剂，ph6.2，含有400mg/mlα,α-海藻糖二水合物)来配制透析的贝伐单抗。配制的贝伐单抗的最终组成为5.98mg/ml(理论值)，50mm磷酸钠，ph6.2，60mg/mlα,α-海藻糖二水合物。利用理论消光系数1.661，通过a280测定，配制的贝伐单抗中的贝伐单抗浓度为5.966mg/ml。通过将6.7ml纯化的贝伐单抗原液(5.966mg/ml)与11.7ml水混合，制作18.4ml的2.18mg/ml贝伐单抗溶液。使用设定在5400rpm的高剪切混合器混合贝伐单抗溶液。在混合贝伐单抗溶液的同时，加入1.5ml含有90％v/v氯仿和10％v/v乙醇的有机溶液。将有机溶液和水溶液混合5分钟以产生粗混合物，将其取样并使其沉降，其中沉降的上清液用于sec测量。将粗混合物转移到高压均质器中的容器中。利用高压均质器将粗混合物均质化数次，从而形成乳液。对乳液取样并使其沉降，沉降的上清液用于sec测量。将约18ml的高压均质化乳液转移至配备有2l圆底蒸发烧瓶的旋转蒸发器中。保持蒸发烧瓶的真空压力，并使蒸发部分地浸入水浴中，水浴设定在40℃。从乳液中蒸发有机溶剂(和部分水)，并根据需要通过改变烧瓶的旋转速度和压力来控制烧瓶内的起泡。蒸发约15分钟后，所得体积约为2ml。将蒸发后的纳米颗粒悬浮液转移到单独的容器中并加入3ml水。对稀释的蒸发后纳米颗粒悬浮液进行取样以进行sec测量。将约0.5ml稀释的蒸发后纳米颗粒悬浮液无菌过滤并取样用于sec测量。尺寸排阻色谱测量的结果显示在图8a中。这些测量包括未经处理的贝伐单抗、来自粗混合物的上清液、来自高压均质乳液的上清液、稀释的蒸发后悬浮液、和过滤的样品。晚期洗脱峰(图的右侧)示例了贝伐单抗单体，早期洗脱的峰表示贝伐单抗的较高分子量物质。随着处理进行，贝伐单抗单体的量减少。每个步骤时收集的贝伐单抗相对于过程开始时添加的贝伐单抗初始浓度的分数示于图8b中，显示大部分贝伐单抗在高压均质化步骤中降解或聚集。实施例3：制备过程中白蛋白对贝伐单抗稳定性的影响在不存在聚山梨醇酯20但包含不同量的人白蛋白(ha)的情况下贝伐单抗耐受各制备步骤的能力通过使贝伐单抗进行每个制备步骤来确定。贝伐单抗如实施例2中所述制备，除了在制备过程开始时贝伐单抗制剂中包含1％、2.5％、5％或10％人白蛋白。通过尺寸排阻色谱(sec)确定贝伐单抗保留量及其聚集状态(即，通过测量向高分子量物质的转化)，从而分析来自每个制备步骤的样品。对于含1％ha的制剂，将0.945ml的20％人白蛋白、6.9ml的贝伐单抗原液(5.966mg/ml，实施例2)、和11.1ml的水组合以制备水溶液，用于处理。对于含2.5％ha的制剂，将2.363ml的20％人白蛋白、6.9ml的贝伐单抗原液(5.966mg/ml，实施例2)、和9.6ml的水组合以制备水溶液，用于处理。对于含5％ha的制剂，将4.85ml的20％人白蛋白、7ml的贝伐单抗原液(5.966mg/ml，实施例2)、和7.55ml的水组合以制备水溶液，用于处理。对于含10％ha的制剂，将9.45ml的20％人白蛋白、6.9ml贝伐单抗原液(5.966mg/ml，实施例2)、和2.55ml水组合以制备水溶液，用于处理。利用设定在5400rpm的高剪切混合器混合贝伐单抗溶液。在混合贝伐单抗溶液时，加入1.5ml含有90％v/v氯仿和10％v/v乙醇的有机溶液。将有机溶液和水溶液混合5分钟以生成粗混合物，对其进行取样以进行sec测量。将粗混合物转移到高压均质器中的容器中。利用高压均质器将粗混合物均质化数次，从而形成乳液。对乳液进行取样以进行sec测量。将约18ml的高压均质化乳液转移至配备有2l圆底蒸发烧瓶的旋转蒸发器中。保持蒸发烧瓶的真空压力，并使蒸发部分地浸入水浴中，水浴设定在40℃。从乳液中蒸发有机溶剂(和部分水)，并根据需要通过改变烧瓶的旋转速度和压力来控制烧瓶内的起泡。蒸发约3-5分钟后，测量所得体积。将此蒸发后的纳米颗粒悬浮液取样以进行sec测量。将部分该悬浮液过滤并取样以进行sec测量。10％ha溶液的尺寸排阻色谱测量结果示于图9a中。最晚洗脱峰(约18.3分钟)含有ha单体，约17.6分钟时的洗脱峰含有贝伐单抗单体。早期洗脱峰表示人白蛋白和/或贝伐单抗的较高分子量物质。通过峰下面积，定量每个物质的量。图9b显示了在不同ha浓度的各制剂的过程各步骤后收集的贝伐单抗的量，包括不含ha的制剂(实施例2)。含有0％和1％ha的制剂失去了加入制剂中的大部分初始贝伐单抗。对于各含有2.5％、5％和10％ha的制剂，大部分贝伐单抗在整个制备过程中保留，表明制剂中至少2.5％ha的存在防止贝伐单抗通过严重降解和聚集而损失。图9c显示了在各制剂的过程各步骤中保留的贝伐单抗单体量——通过仅整合贝伐单抗单体峰。通过未聚集的贝伐单抗单体的分数测量，在处理过程中未不利地降解的贝伐单抗的分数随着制剂中的ha浓度增加而单调增加(具有0％ha的制剂在后续处理步骤中的结果是不确定的，因为那些样品中存在少量贝伐单抗。在10％ha下，大约100％的贝伐单抗在整个制备过程中作为单体保留，表明此浓度的ha可以完全防止贝伐单抗在纳米颗粒制备过程中降解。实施例4：在制备过程的不同阶段添加贝伐单抗将贝伐单抗加入包含含有白蛋白的水相和含有机溶剂的有机相的乳液的效果与纳米颗粒制备过程中早期加入贝伐单抗进行比较。通过尺寸排阻色谱(sec)确定贝伐单抗保留量及其聚集状态(即，通过测量向高分子量物质的转化)，从而分析来自各制备步骤的样品。通过混合4.6mlha原液(20％)和13.8ml水来制备18.4ml的5％人白蛋白(ha)溶液(水溶液)。在对照样品中，将4.85ml的20％人白蛋白、7ml贝伐单抗原液(5.966mg/ml，实施例2)、和7.55ml水组合以制备水溶液。使用设定为5400rpm的高剪切混合器混合水溶液。在混合贝伐单抗溶液时，加入1.5ml含有90％v/v氯仿和10％v/v乙醇的有机溶液。将有机溶液和水溶液混合5分钟以产生粗混合物。将粗混合物转移到高压均质器中的容器中。通过高压均质器将粗混合物均质化数次，从而形成乳液。将6.0ml贝伐单抗原液(5.966mg/ml，实施例2)加入粗乳液中，并对乳液取样以进行sec测量。将约24ml高压均质化乳液转移至配备有2l圆底蒸发烧瓶的旋转蒸发器中。保持蒸发烧瓶的真空压力，并使蒸发部分地浸入水浴中，水浴设定在40℃。从乳液中蒸发有机溶剂(和部分水)，并根据需要通过改变烧瓶的旋转速度和压力来控制烧瓶内的起泡。蒸发约6分钟后，测量所得体积约3ml。将2ml水加入蒸发后的纳米颗粒悬浮液中，并对蒸发后的纳米颗粒悬浮液进行取样以进行sec测量。将部分悬浮液过滤并取样用于sec测量。图10a显示了在初始水溶液中加入贝伐单抗的制剂(对照)和在乳液形成后加入贝伐单抗的制剂的过程各步骤中的贝伐单抗的保留量。图10b显示在这两种制剂的过程各步骤中的贝伐单抗单体保留量——通过仅整合贝伐单抗单体峰。对于通过将贝伐单抗添加到乳液中而产生的制剂，在过程结束时保留了超过96％的贝伐单抗单体，相比之下通过在初始水溶液中添加贝伐单抗而制备的制剂(对照)为约85％。此结果表明，在乳液产生之后添加贝伐单抗可以防止贝伐单抗在纳米颗粒制备过程中过度降解，同时仍然提供贝伐单抗在颗粒形成完成之前与乳液液滴表面接触并缔合的机会。实施例5：含有白蛋白、紫杉醇和贝伐单抗的纳米颗粒的制备制备1.6ml的100mg/ml紫杉醇在含有90％v/v氯仿和10％v/v乙醇的有机混合物中的溶液(“有机溶液”)。单独地，通过混合4.725mlha原液、6.9ml贝伐单抗原液和7.275ml水，制备18.4ml含有5％ha溶液和2.2mg/ml贝伐单抗的水溶液。使用设定为5400rpm的高剪切混合器混合水溶液。在混合水溶液时，加入1.6ml含有紫杉醇的有机溶液。将水溶液和有机溶液混合5分钟以产生粗混合物。可以对粗混合物进行取样以进行sec测量。将粗混合物转移到高压均质器中的容器中。然后通过高压均质器将粗混合物均质化数次。将约24ml乳液转移至配备有2l圆底烧瓶和设定在40℃的水浴的旋转蒸发器。通过施加并保持真空压力和将旋转圆底烧瓶部分浸入水浴中，从乳液中蒸发有机溶剂和部分水。通过根据需要改变烧瓶的旋转速度和压力来控制烧瓶内的起泡。蒸发约5分钟后，所得体积约为4ml，并将其转移到单独的容器中，其中加入4ml水。可以对此蒸发后的悬浮液进行取样以进行sec测量。然后将此悬浮液的总保留体积无菌过滤。可以通过动态光散射和sec测量对所得颗粒悬浮液进行颗粒尺寸取样。通过超速离心收集颗粒。可以确定与纳米颗粒缔合的贝伐单抗量。实施例6：nab-紫杉醇和贝伐单抗的混合物制备根据以下方案，以各种贝伐单抗浓度形成nab-紫杉醇和贝伐单抗的混合物。批次1.将1.6ml的(贝伐单抗和赋形剂，25mg/ml)和3.4ml的0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入5ml生理盐水。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为10mg/ml(具有90mg/ml白蛋白)，并且贝伐单抗的最终浓度为4mg/ml。批次2.将3.2ml(贝伐单抗和赋形剂，25mg/ml)和1.8ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入5ml生理盐水。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为10mg/ml(具有90mg/ml白蛋白)，并且贝伐单抗的最终浓度为8mg/ml。批次3.将6ml(贝伐单抗和赋形剂，25mg/ml)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入4ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为10mg/ml(具有90mg/ml白蛋白)，并且贝伐单抗的最终浓度为15mg/ml。对照批次4.将5ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入5ml生理盐水。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为10mg/ml。利用下列，将每种悬浮液的样品稀释10倍：(1)0.9％nacl生理盐水；(2)注射用水(wfi)；(3)磷酸盐缓冲盐水(pbs)(amresco，从10xpbs稀释)；(4)wfi和10xpbs的9：1混合物——通过向样品中加入wfi，在室温下温育5分钟，然后加入一股(aspikeof)10xpbs而形成；或(5)10xpbs和wfi的1：9混合物——通过向样品中加入10xpbs，在室温下温育5分钟，然后加入wfi而形成。利用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)，通过动态光散射(dls)，测量稀释后的颗粒尺寸和颗粒尺寸分布。结果如表1所示。表1：样品10倍稀释后通过dls得到的颗粒尺寸和分布n.d.＝未测定。*＝样品在wfi下变得不透明并在储存期间沉淀。**＝样品在wfi下变得不透明，但在加入10xpbs的情况下恢复低浊度。实施例7：混合后贝伐单抗与nab-紫杉醇缔合将6ml(贝伐单抗和赋形剂，25mg/ml)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入4ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为10mg/ml(具有90mg/ml白蛋白)，并且贝伐单抗的最终浓度为15mg/ml。将样品在39,000rpm(176,351×g)下在20℃下离心70分钟(具有ti45转子和teflon插入物的beckmanoptimale-80超速离心机)。保留上清液(样品“s”)。用磷酸盐缓冲盐水(pbs)洗涤丸粒(pellet)五次(样品“w1”至“w5”)。向离心管中加入200标准酒精度的乙醇，并超声处理丸粒以溶解紫杉醇。将用乙醇洗涤了的样品在10,000rpm(14,029.3×g)下在20℃下离心20分钟，倾去上清液，并通过冻干来干燥样品。将冻干的丸粒重新悬浮于pbs中(样品“p”)。将保留的样品进行免疫印迹分析。将样品在mops缓冲剂中的4-1％bis-trissds-page凝胶上运行。将蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并使用抗hsa(人血清白蛋白，1：5000小鼠)和抗人igg(1：2000兔)一抗以及irdye标记的抗小鼠(1：20,000)和抗兔(1：20,000)二抗染色。免疫印迹显示，在提取紫杉醇后，贝伐单抗和白蛋白都保留在丸粒中。这表明在混合和nab-紫杉醇后，贝伐单抗与nab-紫杉醇缔合。实施例8：nab-紫杉醇和曲妥珠单抗的混合物制备按照以下方案，在各种曲妥珠单抗浓度下形成nab-紫杉醇和曲妥珠单抗的混合物。通过以下将(曲妥珠单抗和赋形剂)重构：向小瓶中加入20ml0.9％nacl注射用盐水，和使内容物溶解以提供21mg/ml溶液。然后将小瓶温和混合以确保完全重构。批次1.将0.476ml重构的(21mg/ml)和9.524ml0.9％nacl注射用盐水加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。使小瓶中的内容物溶解15分钟，然后温和旋转小瓶以确保完全溶解。然后将溶解的内容物在室温下静置1小时。然后将10ml用于0.9％nacl注射用盐水加入小瓶中。紫杉醇的最终浓度为5mg/ml，并且曲妥珠单抗的最终浓度为0.5mg/ml。批次2.将3.808ml重构的(21mg/ml)和6.192ml0.9％nacl注射用盐水加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。使小瓶中的内容物溶解15分钟，然后温和旋转小瓶以确保完全溶解。然后将溶解的内容物在室温下静置1小时。然后将10ml0.9％nacl注射用盐水加入小瓶中。紫杉醇的最终浓度为5mg/ml，并且曲妥珠单抗的最终浓度为4mg/ml。批次3.将7.14ml重构的(21mg/ml)和2.86ml0.9％nacl注射用盐水加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。使小瓶中的内容物溶解15分钟，然后温和旋转小瓶以确保完全溶解。然后将溶解的内容物在室温下静置1小时。然后将10ml0.9％nacl注射用盐水加入小瓶中。紫杉醇的最终浓度为5mg/ml，并且曲妥珠单抗的最终浓度为7.5mg/ml。实施例9：nab-紫杉醇与贝伐单抗或曲妥珠单抗混合的离子强度影响根据实施例6和8中描述的方案,将nab-紫杉醇与贝伐单抗或曲妥珠单抗混合(8：10或15：10的抗体/nab-紫杉醇比例)。用wfi或各种浓度的nacl盐水稀释纳米颗粒悬浮液。使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)，通过动态光散射(dls)，测量稀释后的颗粒尺寸(z-平均直径，以纳米计)。结果显示在图11中。单独贝伐单抗或单独nab-紫杉醇在低离子强度介质中的10倍稀释不导致颗粒尺寸增加。然而，nab-紫杉醇和抗体的混合物在低离子强度介质中的10倍稀释导致颗粒尺寸增加。对于曲妥珠单抗与nab-紫杉醇以15：10的曲妥珠单抗/紫杉醇比例混合，颗粒尺寸在小于0.15％(25mm)的nacl中增加；对于曲妥珠单抗与nab-紫杉醇以8：10的曲妥珠单抗/紫杉醇比例混合，颗粒尺寸在小于0.075％(12.5mm)的nacl中增加。对于贝伐单抗与nab-紫杉醇混合(15：10的贝伐单抗/紫杉醇比例)，颗粒尺寸在小于0.05％(9mm)nacl中增加。从图11中所示的结果可以看出，低离子强度介质(例如，wfi)引起颗粒尺寸增加，并且较高的离子强度介质使颗粒尺寸减小直至其达到对照样品的尺寸。颗粒尺寸的变化可能是由于抗体与游离白蛋白或在nab-紫杉醇纳米颗粒上表面结合的白蛋白静电缔合。尺寸的增加取决于介质的离子强度、抗体的类型(例如，贝伐单抗或曲妥珠单抗)、以及混合物中的抗体浓度。如果增加离子强度，则颗粒尺寸的增加是可逆的。实施例10：用与贝伐单抗混合的nab-紫杉醇治疗a375小鼠异种移植物将a375人黑素瘤细胞皮下注射到小鼠中以产生异种移植模型。根据以下方案，在治疗前使肿瘤生长至约600mm3。除非另有提示，每种方案治疗9只小鼠。第1组-媒介对照(“媒介”)。通过在无菌30mlpetg容器中混合960mgα,α-海藻糖脱水物、92.8mg磷酸钠(一元，一水合物)、19.2mg磷酸钠(二元，无水)、6.4mg聚山梨醇酯20、和16ml注射用水(wfi)，制备缓冲剂。然后使缓冲剂通过0.2μm无菌过滤器。将96μl缓冲剂与270μl200mg/ml人白蛋白溶液和834μl0.9％nacl注射用盐水混合。在实验的第二天以120μl/小鼠的剂量给予每只小鼠媒介对照。第2组–30mg/kg紫杉醇剂量的nab-紫杉醇(“abx30”)。利用20ml0.9％nacl注射用盐水将冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)重构至5mg/ml紫杉醇的浓度。每只小鼠重约0.02kg，并且在实验的第二天以120μl/小鼠的剂量向每只小鼠给予重构的β-丙氨酸。第3组-12mg/kg剂量的贝伐单抗(“bev12”)。将96μl贝伐单抗(25mg/ml)用904μl0.9％nacl注射用盐水稀释至2.4mg/ml贝伐单抗的最终浓度。每只小鼠体重约0.02kg，并且在实验的第二天以100μl/小鼠的剂量向每只小鼠给予稀释的第4组-同天的bev12和abx30(“bev12+abx30-同天”)。在实验的第二天将100μl/小鼠的如第3组(“bev12”)制备的稀释和120μl/小鼠的如第2组制备的nab-紫杉醇(“abx30”)给予每个小鼠。第5组-bev12然后隔天abx30(“bev12+abx30–1天间隔”)；治疗8只小鼠。在实验的第一天向每只小鼠给予100μl/小鼠的如第3组制备的稀释(“bev12”)。在实验的第二天向每只小鼠给予120μl/小鼠的如第2组制备的nab-紫杉醇(“abx30”)。第6组-nab-紫杉醇(30mg/kg紫杉醇)与贝伐单抗(12mg/kg)(“ab160”)混合。用1.6ml贝伐单抗(25mg/ml)和3.4ml0.9％nacl注射用盐水重构冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)。将混合物在室温下温育1小时，然后加入15ml0.9％nacl注射用盐水，得到最终浓度5mg/ml的紫杉醇和2mg/ml的贝伐单抗。在实验的第二天，将混合物以120μl/小鼠的剂量给予每只小鼠。在实验的第7天测量肿瘤体积，并且每个小组中每只小鼠的肿瘤体积变化百分比显示在图12中。nab-紫杉醇和贝伐单抗(“ab160”)的混合物与同天(“bev12+abx30-同天”)或隔天(“bev12+abx30–1天间隔”)给予之间观察不到显著差异。然而，与给予单独nab-紫杉醇(“abx30”；p＝0.0034)、单独贝伐单抗(“bev12”；p＝0.006)、或媒介对照(”媒介“；p<0.0001)相比，nab-紫杉醇和贝伐单抗的混合物(“ab160”)确实导致肿瘤生长统计学显著减少。p值利用非配对t检验确定。被治疗小鼠的存活时间也被重新赋值。对肿瘤大于2000mm3的小鼠实施安乐死。中值存活时间和相关的p值显示在表2中。如p值所示，用nab-紫杉醇和贝伐单抗的混合物(“ab160”)和分开给予的nab-紫杉醇和贝伐单抗(“bev12+abx30”–同天”或“bev12+abx30-1天间隔”)治疗的小鼠的存活期没有显著差异。表2：a375黑素瘤异种移植模型的存活研究n/a＝不适用；n/s＝不显著。实施例11：具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒的制备将27.6ml的15mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液(在水中)与2.4ml的200mg/ml紫杉醇溶液(chcl3和乙醇的90/10混合物)组合，同时混合形成混合物。将混合物转移到avestin均质器并在20-22kpsi下均质化。使另外5ml的15mg/mlhsa通过均质器以收集35ml的最终体积。使混合物通过均质器若干循环，然后将另外20ml的15mg/mlhsa加入均质器中以并入乳液。收集总共40ml的精细乳液。在将精细乳液进行旋转蒸发之前，将0.714ml的21mg/ml曲妥珠单抗和3.426ml的0.9％nacl加入精细乳液中。使用旋转蒸发器从精细乳液中除去液体，直至9.3ml样品留下作为蒸发后的悬浮液。将蒸发后的悬浮液转移至闪烁瓶(scintillationvial)中，并用1.5ml等份的注射用水(wfi)将旋转蒸发器洗涤两次，该注射用水加入闪烁瓶(12.3ml最终体积)。将得到的蒸发后的悬浮液在5℃下储存过夜。从冷藏中取出蒸发后的悬浮液并平衡至室温。将12ml蒸发后的悬浮液与10.84ml的200mg/mlhsa和33.82ml0.9％nacl混合。然后在测量颗粒尺寸和紫杉醇浓度之前过滤混合物。通过在1.5ml0.9％nacl盐水中稀释50μl蒸发后的悬浮液，使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)，通过动态光散射(dls)测量颗粒尺寸和分布。过滤后的悬浮液的z-平均直径为145.5nm，多分散指数(pdi)为0.159。通过rp-hplc测量过滤后的悬浮液的紫杉醇浓度为6.21mg/ml。将过滤后的悬浮液在-80℃下冷冻过夜。将冷冻的过滤后的悬浮液从冷藏中取出并使其解冻并平衡至室温。将0.829ml的21mg/ml曲妥珠单抗和10.787ml的0.9％nacl加入48ml过滤后的悬浮液中，从而调节悬浮液的浓度以包含5mg/ml紫杉醇和0.5mg/ml曲妥珠单抗。将最终悬浮液等分到小瓶中(每小瓶3ml)并储存在-80℃。一个样品等份不经冷冻并分析其颗粒尺寸(z-平均直径145.6nm，通过dls)、颗粒尺寸分布(pdi为0.130，通过dls)、紫杉醇浓度(5.0mg/ml，通过rp-hplc)、曲妥珠单抗浓度(0.53mg/ml，通过sec-hplc)和同渗质量摩尔浓度(266mosm)。实施例12；具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒的制备通过在制备过程中的不同时间点加入曲妥珠单抗来制备四批次的包括嵌入型曲妥珠单抗的nab-紫杉醇。将曲妥珠单抗(1)加入精细乳液中并温育10分钟，然后通过旋转蒸发处理；(2)加入精细乳液，将该精细乳液立即通过旋转蒸发处理；(3)加入旋转蒸发约3分钟后的精细乳液；或(4)加入刚旋转蒸发后的蒸发后悬浮液。还制备了对照批次(5)：无曲妥珠单抗的nab-紫杉醇。批次1.将27.6ml的15mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液(在水中)与2.4ml的200mg/ml紫杉醇溶液(chcl3和乙醇的90/10混合物)组合，同时混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器并在20-22kpsi下均质化。使混合物通过均质器若干循环，然后将另外20ml的15mg/mlhsa加入均质器中以并入乳液。将2.14ml的21mg/ml曲妥珠单抗(在0.9％nacl盐水中的)和2.00ml0.9％nacl盐水加入乳液中并在室温下温育10分钟，然后通过旋转蒸发处理乳液。将乳液进行旋转蒸发以使体积减少至5.0ml。然后将蒸发后的悬浮液转移到闪烁瓶中。用2.5ml注射用水(wfi)洗涤旋转蒸发器烧瓶，并将洗涤液加入小瓶中。再用2.5mlwfi洗涤旋转蒸发器烧瓶，然后将其加入小瓶中。批次2.将27.6ml的15mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液(在水中)与2.4ml的200mg/ml紫杉醇溶液(chcl3和乙醇的90/10混合物)组合，同时混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器并在20-22kpsi下均质化。使混合物通过均质器若干循环，然后将另外20ml的15mg/mlhsa加入均质器中以并入乳液。将2.14ml的21mg/ml曲妥珠单抗(在0.9％nacl盐水中的)和2.00ml0.9％nacl盐水加入乳液中，简短旋转，并立即通过旋转蒸发进行处理。将乳液进行旋转蒸发以使体积减少至6.0ml。然后将蒸发后的悬浮液转移到闪烁瓶中。用2.0ml注射用水(wfi)洗涤旋转蒸发器烧瓶，并将洗涤液加入小瓶中。再用2.0mlwfi洗涤旋转蒸发器烧瓶，然后将其加入小瓶中。批次3.将27.6ml的15mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液(在水中)与2.4ml的200mg/ml紫杉醇溶液(chcl3和乙醇的90/10混合物)组合，同时混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器并在20-22kpsi下均质化。使混合物通过均质器若干循环，然后将另外20ml的15mg/mlhsa加入均质器中以并入乳液。立即用旋转蒸发器处理乳液3分钟，然后将2.14ml的21mg/ml曲妥珠单抗(在0.9％nacl盐水中的)和2.00ml0.9％nacl盐水加入乳液中。在将曲妥珠单抗和盐水加入乳液中后，立即继续使用旋转蒸发器进行处理，直至样品的体积为6.8ml。然后将蒸发后的悬浮液转移到闪烁瓶中。用1.6ml注射用水(wfi)洗涤旋转蒸发器烧瓶，并将洗涤液加入小瓶中。再用1.6mlwfi洗涤旋转蒸发器烧瓶，然后将其加入小瓶中。批次4.将27.6ml的15mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液(在水中)与2.4ml的200mg/ml紫杉醇溶液(chcl3和乙醇的90/10混合物)组合，同时混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器并在20-22kpsi下均质化。使混合物通过均质器若干循环，然后将另外20ml的15mg/mlhsa加入均质器中以并入乳液。立即用旋转蒸发器处理乳液以使体积减少至约10ml。将2.14ml的21mg/ml曲妥珠单抗(在0.9％nacl盐水中的)和2.00ml0.9％nacl盐水加入蒸发后的溶液中，将其用旋转蒸发器进一步处理以使体积减少至7.0ml。然后将蒸发后的悬浮液转移到闪烁瓶中。用1.5ml注射用水(wfi)洗涤旋转蒸发器烧瓶，并将洗涤液加入小瓶中。再用1.5mlwfi洗涤旋转蒸发器烧瓶，然后将其加入小瓶中。批次5(对照nab-紫杉醇).将27.6ml的15mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液(在水中)与2.4ml的200mg/ml紫杉醇溶液(chcl3和乙醇的90/10混合物)组合，同时混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化。使混合物通过均质器若干循环，然后将另外20ml的15mg/mlhsa加入均质器中以并入乳液。向乳液中加入4.14ml0.9％nacl盐水，并将乳液进行旋转蒸发，直至所得蒸发后的悬浮液的体积为6.4ml。然后将蒸发后的悬浮液转移到闪烁瓶中。用1.8ml注射用水(wfi)洗涤旋转蒸发器烧瓶，并将洗涤液加入小瓶中。再用1.8mlwfi洗涤旋转蒸发器烧瓶，然后将其加入小瓶中。通过动态光散射(dls)测量各批次(在洗涤旋转蒸发器并将洗涤液加入样品后)的蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸和多分散指数，结果示于表3中。通过用1.5ml0.9％nacl生理盐水稀释50μl蒸发后的悬浮液，利用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)进行dls测量。表3：蒸发后悬浮液的颗粒尺寸直径和多分散指数最终批次的颗粒尺寸(通过dls测量)显示出在制备过程中越早添加抗体的批次的颗粒尺寸越大的趋势。与未添加抗体的对照批次(批次5)相比，所有含有抗体的批次均具有更大的颗粒尺寸。对于批次1观察到最大的颗粒尺寸(抗体加入乳液，然后在室温下温育10分钟，然后开始旋转蒸发)，这可能是由于在旋转蒸发之前乳液液滴的聚结除去了液滴中的溶剂并产生固体颗粒。其他批次(批次2、3、4)在通过旋转蒸发除去溶剂之前不包括任何温育时间，并且观察到这些批次相对于对照(批次1)的颗粒尺寸增加较小。测定蒸发后悬浮液中紫杉醇和曲妥珠单抗的浓度。通过rp-hplc测定紫杉醇浓度，并通过sec-hplc测定曲妥珠单抗浓度。结果显示在表4中。表4：蒸发后悬浮液中的紫杉醇和曲妥珠单抗浓度将2ml蒸发后的悬浮液离心以粒化颗粒，并且除去上清液以从纳米颗粒分离未结合的曲妥珠单抗。将丸粒重新悬浮在新制的2ml磷酸盐缓冲盐水(pbs)中。通过sec-hplc和elisa(曲妥珠单抗elisa分析试剂盒，#1g-aa105，eaglebioscience)测量重新悬浮的纳米颗粒中曲妥珠单抗的浓度，结果示于表5中。基于蒸发后悬浮液中的曲妥珠单抗浓度以及洗涤后纳米颗粒悬浮液中的曲妥珠单抗浓度(sec-hplc和elisa测量的平均值)，表5中还显示了蒸发后悬浮液中与纳米颗粒缔合的曲妥珠单抗的百分比。在蒸发之前刻并且不经温育地添加曲妥珠单抗导致悬浮液中与纳米颗粒缔合的曲妥珠单抗的部分最大，5.76％。表5：洗涤后的纳米颗粒悬浮液中的曲妥珠单抗浓度实施例13：通过在均质化之前向水溶液添加曲妥珠单抗制备具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒将曲妥珠单抗在注射用水(wfi)中重构至21mg/ml的浓度。将7.14ml的21mg/ml曲妥珠单抗与5ml的200mg/ml人血清白蛋白(hsa)、2.86ml水和5ml0.9％nacl生理盐水混合，形成50mg/mlhsa和7.5mg/ml曲妥珠单抗的溶液。将18.4ml的hsa/曲妥珠单抗溶液与1.6ml的200mg/ml紫杉醇溶液(溶于90/10chcl3/乙醇中)混合形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化若干循环以形成精细乳液。将15ml的50mg/mlhsa溶液加入均质器中以追求精细乳液，并收集25.5ml的精细乳液。将精细乳液立即转移到旋转蒸发器中，得到7.3ml的蒸发后体积。利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。通过用1.5ml0.9％nacl生理盐水稀释20μl蒸发后的悬浮液，使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)进行dls测量。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸测定为147.8nm，并且pdi测定为0.131。通过rp-hplc测定蒸发后溶液的紫杉醇浓度为25.88mg/ml。通过sec-hplc测量总hsa浓度和曲妥珠单抗浓度分别为117mg/ml和16.2mg/ml。将蒸发后的悬浮液在-20℃下冷冻过夜，然后使其解冻，并使其平衡至室温。再次利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)——使用0.9％nacl生理盐水或wfi作为稀释剂。当使用0.9％nacl生理盐水作为稀释剂时，平均颗粒尺寸测定为147.8nm，并且pdi测定为0.145。当使用wfi作为稀释剂时，平均颗粒尺寸测定为2354nm，并且pdi测定为0.500。将解冻的蒸发后悬浮液用2.7mlwfi稀释至最终体积10ml。将8ml(分成两份)稀释的蒸发后悬浮液在20℃下以39,000rpm离心70分钟以粒化纳米颗粒——使用具有ti45转子和teflon插入物的beckmanoptimale-80离心机。取出上层3ml上清液作为上清液1，并取出下层～1ml上清液作为上清液2。将丸粒用4.0ml磷酸盐缓冲盐水(pbs)洗涤三次，作为洗涤液1、洗涤液2和洗涤液3。将第一离心管中的丸粒重新悬浮于3.0ml乙醇中，涡旋并超声处理，以从丸粒提取紫杉醇。将样品再次离心，并取出上清液作为丸粒1。将第二离心管中的丸粒重新悬浮于4.0mlpbs中，涡旋，超声处理，并取出作为丸粒2。通过rp-hplc分析样品的紫杉醇含量，并通过sec-hplc分析样品的hsa或曲妥珠单抗含量。这些结果显示在表6中。表6：通过离心分析得到的在蒸发后(pe)悬浮液中并且与纳米颗粒(np)缔合的has、曲妥珠单抗(tz)和紫杉醇(ptx)*＝基于8ml处理样品，由上清液1、上清液2、洗涤液1、洗涤液2、洗涤液3和丸粒2的总和测定的总量。实施例14：通过在均质化之后向乳液添加曲妥珠单抗制备具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒将18.4ml的50mg/ml人血清白蛋白(hsa)与1.6ml的200mg/ml紫杉醇溶液(溶于90/10的chcl3/乙醇)混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化若干循环以形成精细乳液。将15ml的50mg/mlhsa溶液加入均质器中以追求精细乳液，并收集22ml的精细乳液。将收集的精细乳液立即转移至含有7.15ml的21mg/ml曲妥珠单抗(溶于注射用水(wfi))和5ml0.9％nacl生理盐水的圆底烧瓶中。将圆底烧瓶转移到旋转蒸发器中，其中使乳液的体积减少至10ml蒸发后的悬浮液。利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)进行dls测量。将1.5ml0.9％nacl生理盐水稀释剂与20μl蒸发后悬浮液在1cm2的一次性比色杯中混合。利用仪器选择的衰减器水平(attenuatorlevel)和1.15mm固定测量位置，在173°检测角度下2分钟平衡后在25℃下进行测量。测量一式三份，每次测量持续60秒。利用一般分析模型，颗粒折射率1.465+0i、分散剂粘度0.8872cp、和分散剂折射率1.330+0i，计算尺寸分布。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)测定为141.6nm，并且pdi测定为0.110。通过rp-hplc测定蒸发后悬浮液的紫杉醇浓度为18.18mg/ml。通过sec-hplc测量总hsa浓度和曲妥珠单抗浓度分别为76mg/ml和15.6mg/ml。将蒸发后的悬浮液在-20℃下冷冻过夜，然后使其解冻，并使其平衡至室温。再次利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)——使用0.9％nacl生理盐水或wfi作为稀释剂。当使用0.9％nacl生理盐水作为稀释剂时，平均颗粒尺寸测定为142.2nm，并且pdi测定为0.125。当wfi用作稀释剂时，平均颗粒尺寸测定为2295nm，并且pdi测定为0.587。将解冻的蒸发后悬浮液用2.7mlwfi稀释至最终体积10ml。将8ml(分成两份)稀释的蒸发后悬浮液在20℃下以39,000rpm离心70分钟以粒化纳米颗粒——使用具有ti45转子和teflon插入物的beckmanoptimale-80离心机。取上层3ml上清液作为上清液1，取下层～1ml上清液作为上清液2。将丸粒用4.0ml磷酸盐缓冲盐水(pbs)洗涤三次，作为洗涤液1、洗涤液2和洗涤液3。将来自第一离心管的丸粒重新悬浮于3.0ml乙醇中，涡旋并超声处理，以从丸粒提取紫杉醇。将样品再次离心，并将上清液取出作为丸粒1。将来自第二离心管的丸粒重新悬浮于4.0mlpbs中，涡旋，超声处理，并取出作为丸粒2。通过rp-hplc分析样品的紫杉醇含量，并通过sec-hplc分析样品的hsa或曲妥珠单抗含量。这些结果显示在表7中。表7：通过离心分析得到的在蒸发后(pe)悬浮液中并且与纳米颗粒(np)缔合的has、曲妥珠单抗(tz)和紫杉醇(ptx)*＝基于8ml处理样品，由上清液1、上清液2、洗涤液1、洗涤液2、洗涤液3和丸粒2的总和测定的总量。实施例15：通过向蒸发后的悬浮液添加曲妥珠单抗制备具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒将18.4ml的50mg/ml人血清白蛋白(hsa)与1.6ml的200mg/ml紫杉醇溶液(溶于90/10的chcl3/乙醇)混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化若干循环以形成精细乳液。将15ml的50mg/mlhsa溶液加入均质器中以追求精细乳液，并收集20ml的精细乳液。将收集的精细乳液立即转移到圆底烧瓶中并利用旋转蒸发器处理，直至获得7.9ml的最终蒸发后悬浮液体积。利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。通过用1.5ml0.9％nacl生理盐水稀释150μl蒸发后的悬浮液，使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)进行dls测量。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)测定为140.2nm，并且pdi测定为0.088。通过rp-hplc测定蒸发后悬浮液的紫杉醇浓度为20.73mg/ml。通过sec-hplc测量蒸发后悬浮液的hsa浓度为77.7mg/ml。将蒸发后的悬浮液在-20℃下冷冻过夜，然后使其解冻，并使其平衡至室温。再次利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。平均颗粒尺寸测定为132.3nm，并且pdi测定为0.094。将蒸发后的悬浮液再次在-20℃下冷冻过夜，然后使其解冻，并使其平衡至室温。在解冻时观察到悬浮液的乳白色。通过rp-hplc测定解冻的蒸发后悬浮液的紫杉醇浓度为20.70mg/ml。将3.47ml的200mg/mlhsa和11.37ml的21.5mg/ml曲妥珠单抗(在0.9％nacl生理盐水中的)加入7.9ml的蒸发后悬浮液中。将混合物在室温下温育1小时。再次利用动态光散射(dls)测量具有曲妥珠单抗的悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。平均颗粒尺寸测定为139.9nm，并且pdi测定为0.105。通过rp-hplc测定解冻的悬浮液的紫杉醇浓度为7.2mg/ml。使用1.2μm过滤器过滤具有曲妥珠单抗的悬浮液。再次利用动态光散射(dls)测量过滤后的悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。平均颗粒尺寸测定为136.9nm，并且pdi测定为0.119。通过rp-hplc测定解冻的悬浮液的紫杉醇浓度为7.1mg/ml。使用virtisgenesisel25架式冷冻干燥机(spindustries，gardiner，ny)将过滤后的悬浮液冻干为4个2ml等份，并储存在-80℃下。将过滤后悬浮液的第一冻干等份从-80℃取出，平衡至室温，并用2ml0.9％nacl生理盐水重构，并在室温下温育24小时。利用动态光散射(dls)测量具有曲妥珠单抗的悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。平均颗粒尺寸测定为141.4nm，并且pdi测定为0.081。将过滤悬浮液的第二冻干等份从-80℃取出，平衡至室温，并用2ml0.9％nacl生理盐水重构。10-15分钟后，利用动态光散射(dls)测量具有曲妥珠单抗的悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。平均颗粒尺寸测定为141.8nm，并且pdi测定为0.112。实施例16：通过在均质化之前向水溶液添加曲妥珠单抗制备具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒通过在初始混合物的水溶液中加入含有15mg/ml人血清白蛋白(hsa)和15mg/ml曲妥珠单抗的溶液来制备第一批次的纳米颗粒组合物。通过在初始混合物的水溶液中加入含有30mg/ml人血清白蛋白(hsa)和15mg/ml曲妥珠单抗的溶液来制备第二批次的纳米颗粒组合物。作为对照，使用15mg/mlhas并且不使用曲妥珠单抗制备第三批次的纳米颗粒组合物。批次1.将4.01ml注射用水(wfi)、1.425ml200mg/ml人血清白蛋白(hsa)、13.57ml的21mg/ml曲妥珠单抗(在注射用水(wfi)中)和87.3mgnacl组合，得到含有15mg/mlhsa和15mg/ml曲妥珠单抗的19ml溶液。将1.6ml的200mg/ml紫杉醇(溶于90/10的chcl3/乙醇中)加入18.4mlhsa/曲妥珠单抗溶液中以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化若干循环以形成精细乳液。向均质器中加入15mlwfi以追求精细乳液，并收集20ml精细乳液。通过旋转蒸发器处理精细乳液，直至所得蒸发后悬浮液的体积为5.6ml。利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。通过用1.5ml0.9％nacl生理盐水稀释50μl蒸发后悬浮液，使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)进行dls测量。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸测定为134.8nm，并且pdi测定为0.084。批次2.将85.5mgnacl溶于2.85ml注射用水(wfi)中，形成3％nacl盐水溶液。将2.85ml的200mg/ml人血清白蛋白(hsa)和13.57ml的21mg/ml曲妥珠单抗(在注射用水(wfi)中)与3％nacl盐水溶液组合，得到含30mg/mlhsa和15mg/ml曲妥珠单抗的19ml溶液。将1.6ml的200mg/ml紫杉醇(溶于90/10的chcl3/乙醇中)加入18.4mlhsa/曲妥珠单抗溶液中以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化若干循环以形成乳液。将15ml的0.045％nacl盐水加入均质器中以追求精细乳液，并收集20ml的精细乳液。通过旋转蒸发器处理精细乳液，直至所得蒸发后悬浮液的体积为5.4ml。如批次1所述，利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸测定为153.8nm，并且pdi测定为0.124。批次3.将18.4ml的15mg/mlhsa与1.6ml的200mg/ml紫杉醇(溶于90/10的chcl3/乙醇)混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化若干循环以形成乳液。将15ml的15mg/ml加入均质器中以追求精细乳液，并收集20ml的精细乳液。通过旋转蒸发器处理精细乳液，直至所得蒸发后悬浮液的体积为7.2ml。如批次1所述，利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸测定为142.9nm，并且pdi测定为0.133。通过rp-hplc测量来自批次1、批次2和批次3的蒸发后悬浮液的紫杉醇浓度。来自批次1的蒸发后悬浮液中的紫杉醇浓度为29.19mg/ml、来自批次2的为35.59mg/ml，并且来自批次3的为22.77mg/ml。将各批次的蒸发后悬浮液用0.9％nacl生理盐水稀释至紫杉醇浓度为7.00mg/ml。将来自各批次的8ml稀释的蒸发后悬浮液分到两个离心管中。将未使用的部分在-20℃下冷冻。使用具有ti45转子和teflon插入物的beckmanoptimale-80离心机，将样品在20℃下以39,000rpm离心70分钟以粒化纳米颗粒。将来自各样品的上层3ml上清液取出作为上清液1，并且将下层～1ml上清液取出作为上清液2。将丸粒用4.0ml磷酸盐缓冲盐水(pbs)洗涤两次，作为洗涤液1和洗涤液2。将来自两个离心管中的第一离心管的丸粒重新悬浮于3.0ml乙醇中，涡旋，并超声处理，以从丸粒提取紫杉醇。将样品再次离心，并将上清液取出作为丸粒1。将来自两个离心管中的第二离心管的丸粒重新悬浮于4.0mlpbs中，涡旋，超声处理，并取出作为丸粒2。通过rp-hplc分析样品的紫杉醇含量，并通过sec-hplc分析样品的hsa或曲妥珠单抗含量。这些结果显示在表8和9中。表8：批次1-通过离心分析得到的在蒸发后(pe)悬浮液中并且与纳米颗粒(np)缔合的has、曲妥珠单抗(tz)和紫杉醇(ptx)*基于7.00mg/ml紫杉醇的8ml处理样品。**＝基于8ml处理的样品，由上清液1、上清液2、洗涤液1、洗涤液2和丸粒2的总和测定的总量。表9：批次2-通过离心分析得到的在蒸发后(pe)悬浮液中并且与纳米颗粒(np)缔合的has、曲妥珠单抗(tz)和紫杉醇(ptx)*基于7.00mg/ml紫杉醇的8ml处理样品。**＝基于8ml处理的样品，由上清液1、上清液2、洗涤液1、洗涤液2和丸粒2的总和测定的总量。实施例17：通过在冻干之前添加曲妥珠单抗制备具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒将36.8ml的50mg/ml人血清白蛋白(hsa)与3.2ml的200mg/ml紫杉醇溶液(溶于90/10的chcl3/乙醇)混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化若干循环以形成精细乳液。将20ml的50mg/mlhsa溶液加入均质器中以追求精细乳液，并收集43ml的精细乳液。将乳液立即转移至旋转蒸发器中，并使体积减少至11.5ml的蒸发后悬浮液体积。利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。通过用1.5ml0.9％nacl生理盐水稀释50μl蒸发后悬浮液，使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)进行dls测量。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸测定为149.1nm，并且pdi测定为0.151。通过rp-hplc测定蒸发后悬浮液的紫杉醇浓度为35.79mg/ml，并且通过sec-hplc测定蒸发后悬浮液的hsa浓度为126.0mg/ml。将蒸发后的悬浮液在两个单独的批次中进一步处理，如下。批次1.将4.60ml蒸发后的悬浮液与0.888ml的181.63mg/mlhsa(在注射用水(wfi)中)和10.98ml的2.7mg/mlnacl混合，形成16.46ml的最终溶液，其含有的紫杉醇：白蛋白比例为1：4.5(并且没有曲妥珠单抗)。批次2.将4.60ml蒸发后的悬浮液与0.888ml的181.63mg/mlhsa(在wfi中)和10.98ml的22.5mg/ml曲妥珠单抗(在2.7mg/mlnacl中重构)混合以形成16.46ml的最终溶液，其包含的紫杉醇：白蛋白：曲妥珠单抗比例为1：4.5：1.5。将4ml等份的批次1或批次2分配到小瓶中，并使用virtisgenesisel25架式冷冻干燥机(spindustries，gardiner，ny)冻干。实施例18：通过在冻干之前添加曲妥珠单抗制备具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒将36.8ml的15mg/ml人血清白蛋白(hsa)与3.2ml的200mg/ml紫杉醇溶液(溶于90/10的chcl3/乙醇)混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化若干循环以形成精细乳液。将20ml的15mg/mlhsa溶液加入均质器中以追求精细乳液，并收集约40ml的精细乳液。将乳液立即转移到旋转蒸发器中，并使体积减少至9.9ml的蒸发后悬浮液体积。利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。通过用1.5ml0.9％nacl生理盐水稀释50μl蒸发后悬浮液，使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)进行dls测量。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸确定为161.8nm，并且pdi测定为0.118。通过rp-hplc测定蒸发后悬浮液的紫杉醇浓度为42.43mg/ml，并且通过sec-hplc测定蒸发后悬浮液的hsa浓度为50.33mg/ml。将蒸发后的悬浮液在两个单独的批次中进一步处理，如下。批次1.将3.90ml的蒸发后悬浮液与1.62ml的32.14mg/mlhsa(在注射用水(wfi)中)和11.03ml的2.7mg/mlnacl混合，形成16.55ml的最终溶液，其包含的紫杉醇：白蛋白比例为1：4.5(并且没有曲妥珠单抗)。批次2.将3.90ml的蒸发后悬浮液与1.62ml的32.14mg/mlhsa(在wfi中)和11.03ml的22.5mg/ml曲妥珠单抗(在2.7mg/mlnacl中重构)混合，形成16.55ml最终溶液，其包含的紫杉醇：白蛋白：曲妥珠单抗比例为1：1.5：1.5。将4ml等份的批次1或批次2分配到小瓶中，并使用virtisgenesisel25架式冷冻干燥机(spindustries，gardiner，ny)冻干。实施例19：通过在冻干前添加曲妥珠单抗制备的具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒，与nab-紫杉醇和曲妥珠单抗的时间历程(timecourse)混合物进行比较本实施例采用具有表10中所述特征的冻干纳米颗粒。表10：实施例18的冻干样品将4ml溶于5.4mg/mlnacl中的15mg/ml曲妥珠单抗加入样品1和样品3的小瓶中。将样品温育10分钟，然后表征并离心样品；温育70分钟，然后表征和离心样品；或温育250分钟，然后表征和离心样品。向样品2和样品4中加入4ml的7.2mg/mlnacl。将样品在室温下温育10分钟，然后表征和离心。样品的表征包括测定同渗质量摩尔浓度——通过冰点降低(advancedmicroosmometermodel3300(advancedinstruments，inc。))、平均颗粒尺寸(直径)和多分散指数(pdi)——通过动态光散射(zetasizernanozs，malverninstruments，westborough，ma)、紫杉醇含量(rp-hplc)、以及hsa和曲妥珠单抗(tz)含量(sec-hplc)。颗粒尺寸(z-平均直径)、pdi和同渗质量摩尔浓度示于表11中。表11：重构样品的颗粒尺寸、pdi和同渗质量摩尔浓度对于离心分析，使用具有ti45转子和teflon插入物的beckmanoptimale-80离心机，将3.6ml样品在20℃下以39,000rpm离心70分钟以粒化纳米颗粒。从每个样品中取出上清液。将丸粒用4.0ml磷酸盐缓冲盐水(pbs)洗涤两次，作为洗涤液1和洗涤液2。将丸粒重新悬浮于3.0ml乙醇中，涡旋，并超声处理，以从丸粒提取紫杉醇。将样品再次离心，并将上清液取出作为丸粒1。将其他离心管中的丸粒重新悬浮于4.0mlpbs中，涡旋，超声处理，并取出作为丸粒2。通过rp-hplc测定每个级分(部分，fraction)中的紫杉醇量，并通过sec-hplc测定每个级分中的hsa和曲妥珠单抗(tz)量。结果显示在表12中。表12：离心分析的每个级分中的紫杉醇(ptx)、白蛋白(hsa)和曲妥珠单抗*＝两次测量的平均值。实施例20：通过在均质化后向乳液添加曲妥珠单抗制备具有嵌入型曲妥珠单抗、紫杉醇和白蛋白的纳米颗粒，用于体内给予将27.6ml的15mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液(在水中)与2.4ml的200mg/ml紫杉醇溶液(chcl3和乙醇的90/10混合物)组合，同时混合以形成混合物。将混合物转移到avestin均质器中并在20-22kpsi下均质化。使用另外5ml的15mg/mlhsa洗涤容纳混合物的容器，将其加入均质器中。使混合物通过均质器若干循环，然后将另外20ml的15mg/mlhsa加入均质器中以并入乳液。收集总共42ml的精细乳液。将1.2ml的21mg/ml曲妥珠单抗(在0.9％nacl盐水中的)和10ml的0.9％nacl盐水与精细乳液组合，然后将精细乳液进行旋转蒸发。在蒸发后悬浮液的体积减少至约10ml后，将蒸发后悬浮液转移至闪烁瓶中。将旋转蒸发器烧瓶用1.5ml等份的注射用水(wfi)洗涤两次，将其加入闪烁瓶中，产生12.5ml最终体积的蒸发后悬浮液。利用动态光散射(dls)测量蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)和多分散指数(pdi)。通过用1.5ml0.9％nacl生理盐水稀释50μl蒸发后悬浮液，使用malvernzetasizernanozs(malverninstruments，westborough，ma)进行dls测量。蒸发后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)测定为149.1nm，并且pdi测定为0.133。通过rp-hplc测定蒸发后悬浮液的紫杉醇浓度为28.7mg/ml，并且通过sec-hplc测定蒸发后悬浮液的hsa和曲妥珠单抗浓度分别为41.61mg/ml和2.07mg/ml。然后将蒸发后的悬浮液在5℃下储存过夜。从冷藏中取出蒸发后悬浮液并使其平衡至室温。将11.27ml的200mg/mlhsa和34.03ml0.9％nacl盐水与12ml蒸发后悬浮液混合，得到57.3ml的体积。使用一系列无菌过滤器过滤稀释的悬浮液，得到49.7ml的过滤后体积。通过dls测定过滤后悬浮液的平均颗粒尺寸(z-平均)为149.2nm，并且测定pdi为0.13。通过rp-hplc测定过滤后悬浮液的紫杉醇浓度为5.693mg/ml。将0.32ml的21mg/ml曲妥珠单抗和6.56ml0.9％nacl盐水加入49.7ml过滤后悬浮液中，得到56.58ml含有5mg/ml紫杉醇和0.5mg/ml曲妥珠单抗的悬浮液，并在室温下温和地混合并温育10分钟。再次分析校准的过滤后的悬浮液。通过dls测定平均颗粒尺寸(z-平均)为149nm，并且测定pdi为0.13。通过rp-hplc测定过滤后悬浮液的紫杉醇浓度为5.4mg/ml。通过sec-hplc测定曲妥珠单抗浓度为0.5mg/ml。同渗质量摩尔浓度测定为288mosm。将悬浮液分成3ml等份并储存在-80℃。实施例21；缀合制剂表征方法除非另有说明，按照本实施例中详述的方案实施以下实施例中的免疫印迹、sds-page凝胶和elisa分析。天然凝胶免疫印迹本方案中使用的材料包括：样品缓冲剂：novextmtris-甘氨酸天然样品缓冲剂(2x)(cat#lc2673)；运行缓冲剂：novextmtris-甘氨酸天然运行缓冲剂(10x)(cat#lc2672)；蛋白质凝胶：nupagetm3-8％tris-乙酸盐(酯)蛋白凝胶，1.0mm，10孔(cat#ea0375box)；和westernblot试剂盒：trans-blotturbortamininitrocellulosetransfer试剂盒(cat#1704270)。用pbs稀释样品至0.1-2mg/μl的浓度范围。将稀释的样品与tris-甘氨酸天然样品缓冲剂1：1(v/v)混合，然后简短涡旋。制备具有一种蛋白质凝胶的凝胶罐(可以基于样品的数量使用两种蛋白质凝胶)。将样品加载到孔中(每孔约16-20μl)。将凝胶在200v，120ma下运行90分钟。在运行凝胶后，将凝胶从其壳中取出并用水洗涤。将凝胶中的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上。将该膜用tbst洗涤，并在室温下在20mllicor封闭溶液中温育1小时。然后将膜用tbst洗涤三次，并在4℃下与抗hsa(1：5000，小鼠)和抗人igg(1：5000，兔)一抗一起温育过夜。(任选地，该温育可已在室温下进行1小时。)用tbst洗涤该膜三次(每次温育5分钟)。将膜与抗小鼠(1：20000，680nm)和抗兔(1：20000，800nm)一起在室温下温育45分钟。用tbst洗涤该膜三次(每次温育5分钟)。将膜用去离子水简单洗涤，然后用licor成像。sds-page免疫印迹本方案中使用的材料包括：sds运行缓冲剂：lds样品缓冲剂，非还原(4x)(目录号84788)；凝胶运行缓冲剂：novextmmopssds运行缓冲剂(20x)(cat#np0001)；凝胶运行缓冲剂：novextmtris-乙酸盐(酯)sds运行缓冲剂(20x)(cat#la0041)；蛋白质凝胶：nupagetm3-8％tris-乙酸盐(酯)蛋白凝胶，1.0mm，10孔(cat#ea0375box)；蛋白质凝胶：nupagetm4-12％，1.0mm，10孔(cat#np0321pk2)；和westernblot试剂盒：trans-blotturbortamininitrocellulosetransfer试剂盒(cat#1704270)。用pbs稀释样品至1-2mg/ml的浓度范围。制备250mmnem溶液(31μgnem在1ml水中)。制备sds-page(非还原)主混合物(60μl1xsds运行缓冲剂+100μl4xsds加载缓冲剂+40μl250mmnem)。将稀释的蛋白质样品与主混合物以1：1(v/v)混合，然后简短涡旋。将样品在70℃温育10分钟。制备具有一种蛋白质凝胶的凝胶罐(可以基于样品的数量使用两种蛋白质凝胶)。将样品加载到孔中(每孔约16-20μl)。将凝胶在200v，120ma下运行45分钟。在运行凝胶后，将凝胶从其壳中取出并用水洗涤。将凝胶中的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上。将该膜用tbst洗涤，并在室温下在20mllicor封闭溶液中温育1小时。然后将膜用tbst洗涤三次，并在4℃下与抗hsa(1：5000，小鼠)和抗人igg(1：5000，兔)一抗(primaryantibodies)一起温育过夜。(任选地，该温育可已在室温下进行1小时。)用tbst洗涤该膜三次(每次温育5分钟)。将膜与抗小鼠(1：20000，680nm)和抗兔(1：20000，800nm)在室温下温育45分钟。用tbst洗涤该膜三次(每次温育5分钟)。将膜用去离子水简单洗涤，然后用licor成像。elisa本方案中使用的材料包括：elisa分析试剂盒(#ig-aa105，eaglebioscience)。将提供的标准样品稀释以产生100ng/ml、60ng/ml、20ng/ml、6ng/ml和空白的标准品。根据不同形式的样品，用稀释缓冲剂将mab缀合的颗粒溶液直接稀释至1：1000至1：10000。将100μl分析缓冲剂移液到各待用孔中。将100μl标准品或样品移液到微量滴定板的对应孔中。将该板用粘性密封物覆盖，并在室温下温育60分钟。除去粘合剂密封物并滗析温育溶液。将板用每孔3×300μl洗涤缓冲剂洗涤。通过在纸巾上轻敲倒置的板来除去过量的溶液。将100ul酶缀合物移液到各孔中。用粘合剂密封物覆盖该板，并在室温下温育30分钟。除去粘合剂密封物并滗析温育溶液。将该板用每孔3×300μl洗涤缓冲剂洗涤。通过在纸巾上轻敲倒置的板来除去过量的溶液。将100μl的tmb底物溶液移液到各孔中。用粘性密封物覆盖该板，并在黑暗中温育20分钟。除去粘合剂密封物，并将100μl终止溶液移液到各孔中。在移液终止溶液后测量吸光度(450nm)。实施例22；曲妥珠单抗与游离人血清白蛋白通过sm(pfg)6活化的曲妥珠单抗缀合图1中显示了本实施例中描述的抗体和游离人血清白蛋白(hsa)的缀合的示意图。将13.1ml的在生理盐水中的21mg/ml等分到15ml旋转浓缩器(mw截止值30,000kda)中。向旋转浓缩器装入100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)并以3750rpm离心35分钟。向旋转浓缩器再次装入磷酸盐缓冲剂(ph6.6)，并以3750rpm离心35分钟。将得到的曲妥珠单抗溶液移液到falcon管中并稀释至总体积为2ml。通过尺寸排阻色谱(sec)测量曲妥珠单抗溶液浓度，并根据需要调节至10.5mg/ml。将sm(peg)6包装物从-20℃取出并在室温下升温1小时。将122μl二甲基亚砜(dmso)加入8.3mgsm(peg)6(112mm最终浓度)中。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解。将1ml曲妥珠单抗溶液等分到eppendorf管中。向每个管中缓慢加入3.4μl连接体溶液(连接体：曲妥珠单抗的化学计量比为5：1)。在仍保护溶液避光的同时，使连接体/曲妥珠单抗溶液在振荡器上反应2小时。用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤5ml脱盐柱4次(每次离心为1，000rcf，6分钟)。将连接体/曲妥珠单抗溶液通过脱盐柱过滤以除去任何未反应的连接体。收集活化的曲妥珠单抗溶液，并将0.8ml等份移液到eppendorf管中。将200μl的200mg/ml(3mm)人血清白蛋白(hsa)溶液在4ml旋转浓缩器(mw截止值10,000kda)中稀释至4ml。按照制造商的说明将样品离心20分钟。再次重复此稀释和离心。将所得溶液移液到falcon管中并稀释至最终体积0.8ml。随后将0.8ml活化的曲妥珠单抗溶液(0.07mm)加入0.8ml的hsa溶液(0.75mm)中。将溶液温育过夜。利用类似的方案，采用各种连接体负载比和连接体反应条件(例如缀合反应的不同ph条件)进一步生成活化的曲妥珠单抗。利用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)和10x连接体负载，对与sm(peg)6交联的活化曲妥珠单抗进行sec分析。在ph6.6和10x连接体负载下，曲妥珠单抗聚集小于总抗体量的约2％。还利用pbs盐水(ph7.4)和20x连接体负载，对与sm(peg)6交联的活化曲妥珠单抗进行sec分析。在ph7.4和20x连接体负载下，曲妥珠单抗聚集为总抗体量的约30％。进行sec分析以比较sm(peg)6活化的曲妥珠单抗和未缀合的曲妥珠单抗。当sm(peg)6和曲妥珠单抗以10：1的比例使用时，缀合没有显著增加曲妥珠单抗的高分子量(hmw)物质的量(曲妥珠单抗：总抗体中0.6％hmw；sm(peg)6活化的曲妥珠单抗：总抗体中1.7％hmw)。图14a-14c显示曲妥珠单抗(图14a)、sm(peg)6活化的曲妥珠单抗——采用1：5的曲妥珠单抗：连接体比例(图14b)、和sm(peg)6活化的曲妥珠单抗——采用1：10的曲妥珠单抗：连接体比例(图14c)的解卷积质谱。显示了代表无sm(peg)6缀合的曲妥珠单抗的同位素簇(1：0；曲妥珠单抗：sm(peg)6)，并且观察到曲妥珠单抗上的n-聚糖未被切割(图14a)。采用1：5的曲妥珠单抗：连接体比例时，活化的曲妥珠单抗的最具代表性物质是1：0、1：1、1：2和1：3(曲妥珠单抗：sm(peg)6)(图14b)。利用1：10的曲妥珠单抗：连接体比例时，活化的曲妥珠单抗的最具代表性物质是1：1、1：2、1：3和1：4(曲妥珠单抗：sm(peg)6)(图14c)。利用sec分离曲妥珠单抗和hsa的1：1sm(peg)6缀合物(图15；显示缀合物、曲妥珠单抗和hsa的分离峰)。利用质谱法确认缀合物的质量为215498.52da。通过sds-page凝胶确认5：1和10：1的连接体：抗体反应比例的sm(peg)6曲妥珠单抗-hsa缀合物，其显示存在1：1的曲妥珠单抗：hsa和更高级的缀合物，包括例如1：2和1：3(图16)。通过免疫印迹(数据未显示)确认曲妥珠单抗：hsa缀合物。进行天然凝胶，分析sm(peg)6缀合的曲妥珠单抗的样品(图17)。曲妥珠单抗的pi为8.5，并且除非缀合，否则曲妥珠单抗不会迁移到凝胶中(泳道d；图17)。在泳道a中，箭头指示1：1的曲妥珠单抗-hsa缀合物(图17)。泳道b和c分别显示10：1的连接体：抗体比例和5：1的连接体：抗体比例(不与白蛋白缀合)(图17)。实施例23；通过sm(peg)6活化的曲妥珠单抗，曲妥珠单抗与分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合图18显示本实施例中描述的活化的抗体与分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合示意图。本方案中使用的材料如下：(a)nab-紫杉醇(100mg紫杉醇小瓶，lot#013397)；(b)(曲妥珠单抗，440mg小瓶，21mg/ml，lot#3157971)；(c)生理盐水，usp级(rmbiolot##20607161)；(d)milliq水，18.4mohms·cm和4ppbtoc；(e)闪烁瓶(vwr，20-ml一次性闪烁瓶)；(f)15ml聚丙烯锥形管(falcon，p/n352097)；(g)zepa旋转脱盐柱7kmwco，5ml(cat#89892，lot#sc245087)；(h)dmso(sigma，cat#d2438-50ml，lot#rnbg0012)；(i)sm(peg)6(thermoscientific，cat#22105，lot#sd249151)；(j)磷酸盐缓冲盐水片(sigma，cat#p4417-50tab，lot#slbs4223)。从1瓶冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)分离nab-紫杉醇纳米颗粒。向小瓶中加入20ml生理盐水以重构纳米颗粒，并将1.2ml重构的nab-紫杉醇制剂等分到eppendorf管中。将eppendorf管温和混合20分钟。利用一个eppendorf管以使用rp-hplc测定紫杉醇含量，测量颗粒尺寸。将其余eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液。向剩余的丸粒中加入0.6ml生理盐水以重构纳米颗粒(最终浓度为10mg/ml的紫杉醇)。使用生理盐水制备21mg/ml(曲妥珠单抗)溶液。将1.2ml溶液等分到2个15ml旋转浓缩器中。使用不含内毒素的水制备100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)并过滤。向旋转浓缩器装入ph6.6磷酸盐缓冲剂，并按照制造商的说明离心30分钟。将此重复一次。将剩余的曲妥珠单抗溶液移液到15mlfalcon管中并稀释至总体积2.4ml。通过尺寸排阻色谱(sec)测量曲妥珠单抗的浓度。根据需要将曲妥珠单抗浓度调节至10.5mg/ml。将sm(peg)6包装物从-20℃冰箱中取出并升温至室温1小时。将2ml无菌dmso溶液等分到eppendorf管中。从该eppendorf管，将1.51mldmso转移到含有100mgsm(peg)6(112mm最终浓度)的小瓶中。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解在dmso中。将1ml的10.5mg/ml曲妥珠单抗溶液等分到eppendorf管中。向含有1ml曲妥珠单抗溶液的各eppendorf管中缓慢加入5.1μl连接体溶液(连接体与抗体的比例为7.5：1；使用15：1以上的比例引起抗体聚集)。在此过程中，使溶液避光。在仍然避光的同时，使连接体/抗体溶液在振荡器上反应2小时。通过动态光散射测定颗粒尺寸为157nm。用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤5ml脱盐柱4次(1000g，每次离心5分钟)。将活化的抗体溶液通过脱盐柱过滤以除去未反应的连接体。收集滤液并组合。通过液相色谱-质谱(lc-ms)测定曲妥珠单抗与连接体的比例。将600μl活化的曲妥珠单抗缓慢加入600μl纳米颗粒溶液中。然后将溶液在4℃温育过夜(避免振荡或搅动)。将缀合溶液从冰箱中取出。该溶液没有在eppendorf管表面上的聚集体。将缀合溶液在21,000g下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液，并用pbs盐水洗涤各管一次。在pbs盐水(ph7.4)中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将800μl的40mg/mlhsa溶液等分到各管中。然后将管超声处理20秒，然后混合(该步骤重复数次，直到纳米颗粒完全重新悬浮)。通过rp-hplc测量紫杉醇含量。然后将所得溶液转移到小瓶中并在-80℃下储存。对来自分离的nab-紫杉醇纳米颗粒和曲妥珠单抗缀合的颗粒的样品进行免疫印迹，证实存在1：1曲妥珠单抗-hsa缀合以及更高级的缀合物，包括1：2、1：3和1：4。在进行免疫印迹之前，首先将颗粒样品溶解在乙醇中以溶解紫杉醇，然后在10,000rcf下离心。将得到的丸粒重新悬浮于pbs中，用于免疫印迹分析。使用sec测定在缀合至曲妥珠单抗之前和之后的来自分离的nab-紫杉醇纳米颗粒的颗粒的白蛋白异构体特征(例如白蛋白单体的量)。表13中提供了分离的nab-紫杉醇纳米颗粒和与曲妥珠单抗缀合的分离的nab-紫杉醇颗粒的白蛋白单体与总白蛋白的比例。表13：白蛋白单体比例。将sm(peg)6与等份的分离的nab-紫杉醇纳米颗粒和等份的未经颗粒分离的nab-紫杉醇制剂(abx)的缀合进行比较。来自缀合反应样品和标准品的sds-page凝胶显示在图20中，其中泳道1、2和3显示曲妥珠单抗-hsa缀合物的存在。泳道3和5的比较显示使用本文所述的方法存在曲妥珠单抗的hsa缀合，包括1：1曲妥珠单抗：hsa缀合物以及更高级的缀合物。进行免疫印迹并证实曲妥珠单抗：hsa缀合物的存在，包括更高级的曲妥珠单抗：hsa缀合物。实施例24；使用具有不同间隔长度的连接体缀合抗体与分离的nab-紫杉醇颗粒本实施例证明抗体与分离的nab-紫杉醇颗粒通过sm(peg)6(32.6埃)、sm(peg)2(17.5埃)和smcc(8埃)活化的抗体的缀合。除了使用指定的连接体以外，基本上如实施例23中所述制备缀合的颗粒。将10mg/ml抗体-连接体缀合物(以连接体：抗体的比例5：1制备)加入10mg/ml在盐水中重构的nab-紫杉醇中。使用elisa测量抗体浓度，并且在离心和重新悬浮于5％hsa后使用rp-hplc测量紫杉醇含量。纳米颗粒制剂的紫杉醇/曲妥珠单抗(tz)质量比报告在表14中。对于4.5mg/ml的nab-紫杉醇悬浮液，nab-紫杉醇颗粒表面上的总自由巯基测量为0.66μm。这表示4％摩尔比的hsa(天然游离hsa含有40％自由巯基)。表14.曲妥珠单抗浓度和紫杉醇/tz比连接体tz(mg/ml)紫杉醇/tz质量比sm(peg)60.039114sm(peg)20.029150smcc0.038123实施例25：通过分离的nab-紫杉醇纳米颗粒的活化和曲妥珠单抗的活化，曲妥珠单抗和分离的nab-紫杉醇颗粒缀合本实施例中描述的活化的抗体与硫醇化的分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合示意图显示在图19中。为了从nab-紫杉醇制剂分离纳米颗粒，将20ml生理盐水加入1个小瓶的冻干nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。将1.2ml的nab-紫杉醇制剂等分到1.5mleppendorf管中。将eppendorf管温和混合20分钟。用一个eppendorf管使用rp-hplc测定紫杉醇含量并测量颗粒尺寸。平均颗粒尺寸为147nm。将其余eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液。向所得丸粒加入500μl乙酸钠(ph8.0)和150mm氯化钠以重构纳米颗粒(nab-紫杉醇颗粒浓度为10mg/ml紫杉醇；含有2.5mg/ml(0.0376mm)hsa)。将traut试剂以2mg/ml(14.5mm)的浓度溶解于wfi中。依据期望的硫醇化程度，将15μl至60μl(连接体：hsa比例分别为10：1至40：1)的traut试剂缓慢加入分离的纳米颗粒溶液中并在4℃下反应70分钟。加入2.4μl的500mmedta(ph8.0)并在4℃温育10分钟。将样品在21,000rcf下在4℃下离心80分钟。将管从离心机中取出，滗析，并用pbs盐水洗涤两次。将分离的活化的nab-紫杉醇颗粒重新悬浮于500μlpbs盐水中，并超声处理1分钟以重新悬浮颗粒。颗粒尺寸测量为150nm。在通过不同化学计量的traut试剂对分离的nab-紫杉醇颗粒进行硫醇化后，通过蛋白质硫荧光检测试剂盒(invitrogen)分析颗粒。对于紫杉醇浓度为4.6mg/ml的纳米颗粒，测定硫醇基团的浓度(表15)。表15：分离的nab-紫杉醇纳米颗粒的硫醇化。浓度(um)仅abx0.6610:18.0220:115.8930:122.5340:130.46使用生理盐水制备21mg/ml(曲妥珠单抗)溶液。将1ml溶液等分到各15ml旋转浓缩器中。使用不含内毒素的水制备100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)并过滤。向旋转浓缩器装入ph6.6磷酸盐缓冲剂并以3750rpm离心35分钟。将此重复一次。将剩余的溶液移液到15mlfalcon管中并稀释至2.4ml总体积。通过尺寸排阻色谱(sec)测量曲妥珠单抗浓度。根据需要将曲妥珠单抗浓度调节至10.5mg/ml。将sm(peg)6包装物从-20℃冰箱中取出并升温至室温1小时。将2ml无菌dmso溶液等分到eppendorf管中。从该eppendorf管中，将122μldmso转移到含有8.3mgsm(peg)6(112mm最终浓度)的小瓶中。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解在dmso中。将1ml曲妥珠单抗溶液等分到各eppendorf管中。将3.4μl的sm(peg)6连接体溶液缓慢加入含有1ml曲妥珠单抗的各管中。在此过程中，使溶液避光。在仍然避光的同时，使连接体/抗体溶液在振荡器上反应2小时。用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤5ml脱盐柱4次(每次离心1000g，6分钟)。将活化的抗体溶液通过脱盐柱过滤，以除去未反应的连接体。收集滤液并组合。通过液相色谱-质谱(lc-ms)测定曲妥珠单抗与连接体的比例。将500μl活化的曲妥珠单抗缓慢加入500μl纳米颗粒溶液。然后将溶液在4℃温育过夜(避免振荡或搅动)。从4℃取出缀合溶液。该溶液没有在eppendorf管表面上的聚集体。测量颗粒尺寸。10：1硫醇化连接体：hsa的平均颗粒尺寸为159nm，20：1硫醇化连接体：has的平均颗粒尺寸为166nm，30：1硫醇化连接体：has的平均颗粒尺寸为215.9nm，并且40：1硫醇化连接体：has的平均颗粒尺寸为734.1nm。将缀合溶液在21,000g下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液，并用pbs盐水洗涤各管两次。在pbs盐水中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将800μl的40mg/mlhsa溶液等分到各管中。然后将管超声处理20秒并混合(此步骤重复数次，直至纳米颗粒完全重新悬浮)。使用rp-hplc测量紫杉醇含量。然后根据所需浓度调节紫杉醇浓度。测量最终制剂的颗粒尺寸和紫杉醇浓度。10：1硫醇化连接体：hsa的平均颗粒尺寸为159.8nm，20：1硫醇化连接体：hsa的平均颗粒尺寸为171.5nm，30：1硫醇化连接体：hsa的平均颗粒尺寸为175.8nm，并且40：1硫醇化连接体：hsa的平均颗粒尺寸为196.4nm。然后将所得溶液转移到小瓶中并在-80℃下储存。通过elisa测量最终的缀合曲妥珠单抗(tz)浓度，并通过rp-hplc测量紫杉醇(ptx)浓度。(表16)。表16：缀合颗粒的浓度测量。实施例26：利用无铜点击化学进行的曲妥珠单抗与分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合利用无铜点击化学进行的抗体与分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合示意图显示于图21中。为了从nab-紫杉醇组合物分离纳米颗粒，将20ml生理盐水加入1个小瓶的冻干nab-紫杉醇(100mg紫杉醇)中。将1.2ml的nab-紫杉醇制剂等分到16个eppendorf管中。将eppendorf管温和混合20分钟。将一个eppendorf管用于hplc分析，以利用rp-hplc测定紫杉醇含量。将其余eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液。将600μlpbs(ph7.4)加入所得丸粒中，以重构纳米颗粒(nab-紫杉醇浓度为约为10mg/ml的紫杉醇)。通过将3mg连接体试剂溶解在150μldmso中制备29mm二芳基环辛炔(dbco)-peg5-nhs溶液。将15μl(20：1；连接体：hsa)或30μl(40：1；连接体：hsa)的dbco溶液加入各等份的分离的纳米颗粒中，并使悬浮液在室温下反应70分钟。然后将样品在21,000rcf下在4℃下离心70分钟。离心后，滗析样品以除去上清液并用pbs盐水洗涤两次。将500ulpbs盐水加入粒化的纳米颗粒中，然后对样品进行超声处理以重新悬浮纳米颗粒。使用生理盐水制备21mg/ml(曲妥珠单抗)溶液。将6ml抗体溶液等分到两个15ml旋转浓缩器中。向旋转浓缩器装入100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)，并按照制造商的说明离心30分钟。将此重复一次。将其余曲妥珠单抗溶液移液至15mlfalcon管中并稀释至12ml总体积。根据需要将曲妥珠单抗浓度调节至10.5mg/ml。从-20℃取出叠氮基-peg5-nhs并升温至室温1小时。在小瓶中称重4.03mg叠氮基-peg5-nhs，并加入82μldmso(112mm溶液)。涡旋溶液，直至连接体完全溶解。将1.5ml抗体溶液等分到单独的管中。将5.1μl(5：1的连接体：抗体比)或10.2μl(10：1的连接体：抗体比)缓慢加入含有抗体溶液的各管中。使溶液在振荡器上反应2小时。用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤两个5ml脱盐柱4次(每次离心1000g，6分钟)。将活化的抗体溶液通过脱盐柱过滤以除去未反应的连接体。收集滤液并组合。通过液相色谱-质谱(lc-ms)测定曲妥珠单抗与连接体的比例。将500μl活化的曲妥珠单抗缓慢加入500μl纳米颗粒溶液中。将溶液在室温下温育30分钟，然后在4℃下温育过夜。从4℃取出缀合溶液。该溶液没有在eppendorf管表面上的聚集体。测量颗粒尺寸。将缀合溶液在21,000g下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液，并用pbs盐水洗涤各管两次。在pbs盐水中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将800μl的40mg/mlhsa溶液等分到各管中。然后对管进行超声处理，直至纳米颗粒完全重新悬浮。然后将所得溶液转移到小瓶中并在-80℃下储存。测定颗粒尺寸为169nm。测定与颗粒缔合的最终紫杉醇浓度为5.73mg/ml(rp-hplc)，并测定最终的曲妥珠单抗浓度为0.11mg/ml。实施例27；硼酸改性的nab-紫杉醇本实施例中所述的分离的nab-紫杉醇颗粒的硼酸改性示意图显示在图22中。为制备活化的nhs酯，将4-(2-羧基乙基)苯硼酸(16mg，82.4μmol，mw＝193.99)、n,n'-二环己基碳二亚胺(dcc，17.04mg，82.4μmol)、和n-羟基琥珀酰亚胺(nhs，9.52mg，82.4μmol)溶解在1mldmf中并在室温下搅拌2小时。将颗粒重新悬浮于600μlpbs缓冲剂(ph7.4)中以制备10mg/ml纳米颗粒悬浮液。测试三种比例的活化nhs酯(20：1、40：1和80：1的nhs酯与表面白蛋白，呈现25％的纳米颗粒重量是源于白蛋白)。达到各比例(20：1、40：1和80：1)所需的浓度分别为0.75mm、1.5mm和3mm。因此，将5.5μl、11μl和22μlnhs酯加入各eppendorf管(含有600μl纳米颗粒悬浮液)中，以形成20：1、40：1和80：1的比例。将反应物在室温下温育2小时，然后将管在21,000rcf下离心70分钟。将丸粒洗涤三次，然后重新悬浮于500μlpbs缓冲剂(ph7.4)中。通过与茜素红s反应和测定590nm的荧光信号，测量颗粒表面上的硼酸量。将该浓度与4-(2-羧基乙基)苯硼酸标准品进行比较。对于20：1、40：1和80：1的比例，按照5mg/ml的nab-紫杉醇，硼酸量分别被测定为1.4mm、2.0mm和2.6mm。未修饰的纳米颗粒以及20：1和40：1修饰的纳米颗粒是稳定的，但80：1纳米颗粒开始聚集。实施例28：利用互补dna进行的曲妥珠单抗与分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合利用互补dna进行的活化的抗体与活化的分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合示意图显示于图23中。简而言之，第一链与nab-紫杉醇纳米颗粒缀合，并且与第一链互补的第二链与抗体缀合。纳米颗粒和抗体的混合使互补链配对，从而将抗体与nab-紫杉醇纳米颗粒缀合。将单链dna(ssdna)与从nab-紫杉醇制剂分离的nab-紫杉醇颗粒缀合。制备20mmtcep溶液。称取3mgssdna(5硫mc6-cacacacacacacacacaca；seqidno：1；“ca20”)并溶解于1mlddh2o(447μmssdna溶液)中。将20mmtcep溶液添加至447μmssdna溶液中——以3：7的体积比，混合，然后在室温下反应2小时。使用nap-10(gehealthcarelifescience，cat：#17-0854-01)纯化反应混合物。通过uv光谱(260nm)测定，收集的ca20ssdna的测量浓度为216μm。称取6.83mgsm(peg)6并溶于0.5mldmso(22.4mmsm(peg)6溶液)中。将11l的22.4mmsm(peg)6溶液加入1.2ml的ca20ssdna溶液中并反应20分钟。将600μl分离的nab-紫杉醇悬浮液等分到eppendorf管中。将600μl的ca20-sm(peg)6加入各等份纳米颗粒溶液中。将反应混合物温育过夜。将eppendorf管离心以粒化纳米颗粒，并滗析上清液。用pbs洗涤丸粒三次。向各管中加入500μlpbs，并通过超声处理使丸粒重新悬浮(5秒并重复，直至颗粒重新悬浮)。使用动态光散射测定颗粒尺寸。来自受控的nab-紫杉醇制剂的nab-紫杉醇标准品的颗粒尺寸为152nm，并且ca20缀合的nab-紫杉醇的颗粒尺寸为152nm。将ssdna与来自制剂的曲妥珠单抗缀合。制备4mmtcep溶液。将ssdna(5硫mc6-gtgtgtgtgtgtgtg；seqidno：2；“gt15”)溶解在ddh2o中以制备500mmssdna溶液。将4mmtcep溶液添加至500μmssdna溶液中——以1：2的体积比，混合，然后在室温下反应2小时。使用nap-10(gehealthcarelifescience，cat：#17-0854-01)纯化反应混合物。将1ml(21mg/ml，在生理盐水中重构)等分到15ml旋转浓缩器中。制备pbs缓冲剂(ph7.4)。向旋转浓缩器装入pbs缓冲剂，并按照制造商的说明离心30分钟。再次向旋转浓缩器装入pbs并离心。取出得到的曲妥珠单抗溶液，并根据需要将浓度用pbs缓冲剂调节至10.5mg/ml。称取6.8mgsm(peg)6并溶解于100μldmso中(112mmsm(peg)6溶液)。将2.3μl的112mmsm(peg)6溶液加入500μl曲妥珠单抗溶液中，并反应1.5小时。使用脱盐柱除去未反应的连接体。将脱保护的gt15溶液加入所得的活化的曲妥珠单抗中并温育2小时。将混合物加入旋转浓缩器中并装入pbs缓冲剂(ph7.4)。将混合物离心并分析流通物(flowthrough)的ssdna存在性。向旋转浓缩器重新装入pbs并离心5次，然后在流通物中未检测到ssdna。将曲妥珠单抗-gt15溶液和ca20-nab-紫杉醇溶液在eppendorf管中混合并温育2小时。然后将反应混合物在21,000rcf下离心。立即从离心机中取出该管，滗析上清液，用pbs洗涤所得丸粒三次。将丸粒重新悬浮于4％has的pbs溶液，并进行超声处理以使颗粒重新悬浮。将缀合的颗粒储存在-80℃。实施例29；贝伐单抗与分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合本实施例中使用的材料包括：(a)nab-紫杉醇，100mg紫杉醇；(b)(贝伐单抗；25mg/ml，lot#3039196)；(c)生理盐水(rmbio，usp级，lot#20607161)；(d)milliq水(18.4mohms·cm和4ppbtoc)；(e)闪烁瓶(vwr，20-ml一次性闪烁瓶)；(f)15ml聚丙烯锥形管(falcon，p/n352097)；(g)zepa旋转脱盐柱(7kmwco，5ml，cat#89892，lot#sc245087)；(h)dmso(sigma，cat#d2438-50ml，lot#rnbg0012)；(i)sm(peg)6(thermoscientific，cat#22105，lot#sd249151)；(j)磷酸盐缓冲盐水(pbs)片剂(sigma，cat#p4417-50tab，lot#slbs4223)。将20ml生理盐水加入一小瓶的冻干nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。将等份的1.2mlnab-紫杉醇溶液加入四个eppendorf管中。将该管温育并温和旋转20分钟。用一个管进行紫杉醇hplc分析以利用rp-hplc测定紫杉醇含量。将其余含有nab-紫杉醇悬浮液的eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即取出各管，取出各管的上清液。用0.5ml生理盐水温和地重构纳米颗粒丸粒，以制备12mg/ml紫杉醇的最终纳米颗粒溶液。将1ml(25mg/ml，在wfi中重构)等分到15ml旋转浓缩器中。制备100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)。向旋转浓缩器装入磷酸盐缓冲剂(ph6.6)并按照制造商的说明离心30分钟。再次向旋转浓缩器装入磷酸盐缓冲剂(ph6.6)，并按照制造商的说明离心30分钟。将剩余的贝伐单抗溶液移液到15mlfalcon管中并稀释至2.5ml总体积。使用尺寸排阻色谱(sec)确认浓度。从-20℃取出sm(peg)6包装物并在室温下升温1小时。将6.83mgsm(peg)6溶于100μldmso中(112mm连接体溶液)。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解。将0.5ml贝伐单抗溶液等分到四个eppendorf管中。在其中两个eppendorf管中缓慢加入1.65μl和3.3μl的连接体溶液，以产生5：1和10：1摩尔比的连接体与抗体。准备没有连接体修饰的混合物对照管。在此过程中，使溶液避光。使溶液在振荡器上反应2小时。通过用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤脱盐柱4次(1000g，每次离心5分钟)，准备两个5ml脱盐柱。然后将活化的贝伐单抗溶液通过该柱过滤以除去任何未反应的连接体。然后将500μl各连接体比例的活化的贝伐单抗溶液的缓慢加入500μl纳米颗粒溶液中。将500μl未活化的贝伐单抗溶液加入500μl纳米颗粒溶液中。然后将所得溶液在无振荡或搅动的情况下在4℃下温育过夜。从4℃储存中取出缀合溶液(该溶液没有呈现在表面上具有聚集体)并在21,000g下离心80分钟。然后立即将管从离心机中取出并除去上清液。用pbs盐水洗涤各管三次。在pbs盐水(ph7.4)中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将500μl的40mg/mlhsa溶液加入含有粒化纳米颗粒的各管中。将管超声处理20秒并混合。超声处理步骤重复数次，直到纳米颗粒完全重新悬浮。取出样品用于表征后，将溶液转移到小瓶中并在-80℃下储存。测量样品的颗粒尺寸。平均颗粒尺寸如下：nab-紫杉醇，146nm；贝伐单抗混合物对照，148nm；5：1的连接体：贝伐单抗抗体纳米颗粒，152nm；以及10：1的连接体：贝伐单抗抗体纳米颗粒，153nm。通过elisa测量样品的贝伐单抗含量，并通过rp-hplc测量样品的紫杉醇含量(表16)。表16：贝伐单抗和紫杉醇浓度。进行样品的免疫印迹分析，并证实了贝伐单抗与颗粒上的has缀合，包括存在更高级的缀合物，来自分离的nab-紫杉醇纳米颗粒的缀合反应。实施例30：西妥昔单抗与分离的nab-紫杉醇'颗粒的缀合本方法中使用的材料包括：(a)nab-紫杉醇，100mg紫杉醇；(b)(西妥昔单抗，lot#img395)；(c)生理盐水(rmbio，usp级，lot#20607161)；(d)milliq水(18.4mohms·cm和4ppbtoc)；(e)闪烁瓶(vwr，20-ml一次性闪烁瓶)；(f)15ml聚丙烯锥形管(falcon，p/n352097)；(g)zepa旋转脱盐柱(7kmwco，5ml，cat#89892，lot#sc245087)；(h)dmso(sigma，cat#d2438-50ml，lot#rnbg0012)；(i)sm(peg)6(thermoscientific，cat#22105，lot#sd249151)；(j)磷酸盐缓冲盐水(pbs)片剂(sigma，cat#p4417-50tab，lot#slbs4223)。向一小瓶的冻干nab-紫杉醇组合物中加入20ml生理盐水。将等份的1.2mlnab-紫杉醇悬浮液加入四个eppendorf管。将该管温育并温和旋转20分钟。用一个管进行紫杉醇hplc分析以利用rp-hplc测定紫杉醇含量。将其余含有nab-紫杉醇悬浮液的eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即取出各管，并取出各管的上清液。用0.5ml生理盐水温和地重构纳米颗粒丸粒，制成最终12mg/ml的纳米颗粒溶液。将1ml爱必妥(erbitux)溶液(25mg/ml，在wfi中重构)等分到15ml旋转浓缩器中。制备100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)。向旋转浓缩器装入磷酸盐缓冲剂(ph6.6)并按照制造商的说明离心30分钟。再次向旋转浓缩器装入磷酸盐缓冲剂(ph6.6)，并按照制造商的说明离心30分钟。将剩余的西妥昔单抗溶液移液到15mlfalcon管中并稀释至2.5ml总体积。使用尺寸排阻色谱(sec)确认浓度。从-20℃取出sm(peg)6包装物并在室温下升温1小时。将6.83mgsm(peg)6溶于100μldmso中(112mm连接体溶液)。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解。将0.5ml西妥昔单抗溶液等分到四个eppendorf管中。在其中两个eppendorf管中缓慢加入1.65μl和3.3μl连接体溶液，以产生5：1和10：1摩尔比的连接体与抗体。准备没有连接体修饰的混合物对照管。在此过程中，使溶液避光。使溶液在振荡器上反应2小时。通过用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤脱盐柱4次(1000g，每次离心5分钟)，准备两个5ml脱盐柱。然后将活化的西妥昔单抗溶液通过该柱过滤，以除去任何未反应的连接体。然后将500μl各连接体比例的活化的西妥昔单抗溶液缓慢加入500μl纳米颗粒溶液中。将500μl未活化的西妥昔单抗溶液加入500μl纳米颗粒溶液中。然后将所得溶液在不经振荡或搅动的情况下在4℃下温育过夜。将缀合溶液从冰箱中取出(溶液未呈现在表面上具有聚集物)并在21,000g下离心80分钟。然后立即从离心机中取出该管并除去上清液。用pbs盐水洗涤各管三次。在pbs盐水(ph7.4)中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将500μl的40mg/mlhsa溶液加入含有粒化纳米颗粒的各管中。将管超声处理20秒并混合。超声处理步骤重复数次，直到纳米颗粒完全重新悬浮。取出样品用于表征后，将溶液转移到小瓶中并在-80℃下储存。测量样品的颗粒尺寸。平均颗粒尺寸如下：nab-紫杉醇，146nm；西妥昔单抗混合物对照，148nm；5：1的连接体：西妥昔单抗抗体纳米颗粒，149nm；和10：1的连接体：西妥昔单抗抗体纳米颗粒，147nm。通过elisa测量样品的西妥昔单抗含量，并通过rp-hplc测量样品的紫杉醇含量(表17)。表17：西妥昔单抗和紫杉醇浓度。样品西妥昔单抗(mg/ml)紫杉醇(mg/ml)紫杉醇/西妥昔单抗nab-紫杉醇0.00075.006971混合物对照0.0328.522695:1西妥昔单抗0.0448.2818810:1西妥昔单抗0.0578.38148进行样品的免疫印迹分析，并证实西妥昔单抗和颗粒上的hsa缀合，包括更高级缀合物的存在，来自分离的nab-紫杉醇纳米颗粒的缀合反应。实施例31：纳武单抗与分离的nab-紫杉醇颗粒的缀合本方法中使用的材料包括：(a)nab-紫杉醇，100mg小瓶；(b)opdivo(纳武单抗，lot#aal6305)；(c)生理盐水(rmbio，usp级，lot#20607161)；(d)milliq水(18.4mohms·cm和4ppbtoc)；(e)闪烁瓶(vwr，20-ml一次性闪烁瓶)；(f)15ml聚丙烯锥形管(falcon，p/n352097)；(g)zepa旋转脱盐柱(7kmwco，5ml，cat#89892，lot#sc245087)；(h)dmso(sigma，cat#d2438-50ml，lot#rnbg0012)；(i)sm(peg)6(thermoscientific，cat#22105，lot#sd249151)；(j)磷酸盐缓冲盐水(pbs)片剂(sigma，cat#p4417-50tab，lot#slbs4223)。将20ml生理盐水加入1个小瓶的冻干nab-紫杉醇组合物中。将等份的1.2mlnab-紫杉醇悬浮液加入四个eppendorf管。将该管温育并温和旋转20分钟。用一个管利用rp-hplc测量紫杉醇含量。将其余含有nab-紫杉醇悬浮液的eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即取出各管，并取出各管的上清液。用0.5ml生理盐水温和地重构纳米颗粒丸粒，以制成最终12mg/ml的纳米颗粒溶液。将2mlopdivo(10mg/ml，在wfi中重构)等分到15ml旋转浓缩器中。制备100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)。向旋转浓缩器中加入磷酸盐缓冲剂(ph6.6)并按照制造商的说明离心30分钟。再次向旋转浓缩器装入磷酸盐缓冲剂(ph6.6)，并按照制造商的说明离心30分钟。将剩余的纳武单抗溶液移液到15mlfalcon管中并稀释至2ml总体积。从-20℃取出sm(peg)6包装物并在室温下升温1小时。将6.83mgsm(peg)6溶于100μldmso中(112mm连接体溶液)。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解。将0.5ml纳武单抗溶液等分到4个eppendorf管中。在其中三个eppendorf管中缓慢加入1.7μl、3.4μl和5.1μl的连接体溶液，以产生5：1、10：1或15：1摩尔比的连接体与抗体。准备没有连接体修饰的混合物对照管。在此过程中，应使溶液避光。使溶液在振荡器上反应2小时。通过用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤脱盐柱4次(1000g，每次离心5分钟)，准备三个5ml脱盐柱。然后将活化的纳武单抗溶液通过该柱过滤，以除去任何未反应的连接体。然后将500μl各浓度的活化的纳武单抗溶液的缓慢加入500μl的纳米颗粒溶液中。将500μl未活化的纳武单抗溶液加入500μl纳米颗粒溶液中。然后将所得溶液在不经振荡或搅动的情况下在4℃下温育过夜。将缀合溶液从冰箱中取出(溶液未呈现在表面上具有聚集物)并在21,000g下离心80分钟。然后立即从离心机中取出该管并除去上清液。用pbs盐水洗涤各管三次。在pbs盐水(ph7.4)中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将500μl的40mg/mlhsa溶液加入含有粒化纳米颗粒的各管中。将管超声处理20秒并混合。超声处理步骤重复数次，直到纳米颗粒完全重新悬浮。在取出样品用于表征后，将溶液转移到小瓶中并储存在-80℃。测量样品的颗粒尺寸。平均颗粒尺寸如下：nab-紫杉醇，145nm；纳武单抗混合物对照，145nm；5：1的连接体：纳武单抗抗体纳米颗粒，149nm；10：1的连接体：纳武单抗抗体纳米颗粒，147nm；和15：1的连接体：纳武单抗抗体纳米颗粒，150nm。通过elisa测量样品的纳武单抗含量，并通过rp-hplc测量样品的紫杉醇含量(表18)。表18：纳武单抗和紫杉醇浓度。样品纳武单抗(mg/ml)紫杉醇(mg/ml)紫杉醇/纳武单抗nab-紫杉醇0.00055.0010000混合物对照0.0239.484115:1纳武单抗0.0429.2021610:1纳武单抗0.0429.2622115:1纳武单抗0.0359.29267进行样品的免疫印迹分析，并证实纳武单抗与颗粒上的has的缀合，包括更高级缀合物的存在，来自分离的nab-紫杉醇纳米颗粒的缀合反应。图24显示来自连接体：抗体反应比例为5：1、10：1和15：1的纳武单抗和活化的纳武单抗的lc-ms分析的解卷积质谱。增加连接体：抗体的反应比例使与纳武单抗缀合的连接体的数量增加，如在各同位素簇作为抗体：缀合的连接体情况下所示(图24)。实施例32：制备混合曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂用于体外和体内研究批次1.将0.39ml(曲妥珠单抗和赋形剂，21mg/ml)和9.61ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入10ml生理盐水。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为5mg/ml(45mg/ml白蛋白)，并且曲妥珠单抗的最终浓度为0.41mg/ml。批次2.将0.152ml(曲妥珠单抗和赋形剂，21mg/ml)和9.848ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)加入在小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入10ml生理盐水。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为5mg/ml(45mg/ml白蛋白)，并且曲妥珠单抗的最终浓度为0.16mg/ml。批次3.将0.093ml(曲妥珠单抗和赋形剂，21mg/ml)和9.907ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入10ml生理盐水。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为5mg/ml(45mg/ml白蛋白)，并且曲妥珠单抗的最终浓度为0.098mg/ml。批次4.将0.051ml(曲妥珠单抗和赋形剂，21mg/ml)和9.949ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入10ml生理盐水。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为5mg/ml(45mg/ml白蛋白)，并且曲妥珠单抗的最终浓度为0.054mg/ml。批次5.将0.476ml(曲妥珠单抗和赋形剂，21mg/ml)和9.524ml0.9％nacl生理盐水(g-biosciences)加入小瓶中的冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)中。在不经混合5分钟的情况下将小瓶的内容物重构，然后温和混合以确保完全重构。将混合物在室温(～20℃)下温育1小时，然后向小瓶中加入10ml生理盐水。温和混合该混合物以确保均匀。紫杉醇的最终浓度为5mg/ml(45mg/ml白蛋白)，并且曲妥珠单抗的最终浓度为0.5mg/ml。实施例33：制备缀合曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂用于体外和体内研究为了分离nab-紫杉醇纳米颗粒，将20ml生理盐水加入含有冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)的1个小瓶中。将1.2ml的nab-紫杉醇悬浮液等分到16个1.5mleppendorf管中。将eppendorf管温和混合20分钟。将一个eppendorf管用于hplc分析以测定紫杉醇含量并测量颗粒尺寸。平均颗粒尺寸为147nm。将其余eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液。将500μl乙酸钠(ph8.0)和150mm氯化钠加入得到的丸粒中以重构纳米颗粒(nab-紫杉醇颗粒浓度为10mg/ml的紫杉醇)。将traut试剂以2mg/ml(14.5mm)的浓度溶解于wfi中。将30μl(连接体：hsa比例为20：1)traut试剂缓慢加入分离的纳米颗粒溶液中并在4℃下反应70分钟。加入2.4μl的500mmedta(ph8.0)并在4℃下温育10分钟。将样品在21,000rcf下在4℃下离心80分钟。将管从离心机中取出，滗析，并用pbs盐水洗涤两次。将分离的活化的nab-紫杉醇颗粒重新悬浮于500μlpbs盐水中并超声处理1分钟以使颗粒重新悬浮。使用生理盐水制备21mg/ml(曲妥珠单抗)溶液。将6ml溶液等分到3个15ml旋转浓缩器中。使用无内毒素的水制备100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)并过滤。向旋转浓缩器装入ph6.6的磷酸盐缓冲剂并以3750rpm离心35分钟。将此重复一次。将剩余的溶液移液到15mlfalcon管中并稀释至12ml总体积。通过尺寸排阻色谱(sec)测量曲妥珠单抗浓度。根据需要将曲妥珠单抗浓度调节至10.5mg/ml。将sm(peg)6包装物从-20℃冰箱中取出并升温至室温1小时。将2ml无菌dmso溶液等分到eppendorf管中。从该eppendorf管中，将122μldmso转移到含有8.3mgsm(peg)6(112mm最终浓度)的小瓶中。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解在dmso中。将2ml曲妥珠单抗溶液等分到六个15mlfalcon管中的每一个中。将6.8μlsm(peg)6连接剂溶液缓慢加入含有1ml曲妥珠单抗的各2ml管中。在此过程中，使溶液避光。在仍然避光的同时，使连接体/抗体溶液在振荡器上反应2小时。用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤5ml脱盐柱4次(1000g，每次离心6分钟)。将活化的抗体溶液通过脱盐柱过滤以除去未反应的连接体。收集滤液并组合。通过液相色谱-质谱(lc-ms)测定曲妥珠单抗和连接体的比例。将500μl活化的曲妥珠单抗缓慢加入500μl纳米颗粒溶液中。然后将溶液在4℃温育过夜(避免振荡或搅动)。从4℃取出缀合溶液。该溶液没有在eppendorf管表面上的聚集体。将缀合溶液在21,000g下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液，并用pbs盐水洗涤各管两次。在pbs盐水中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将500μl的40mg/mlhsa溶液等分到各管中。然后将该管超声处理20秒并混合(此步骤重复数次，直至纳米颗粒完全重新悬浮)。通过rp-hplc测量紫杉醇含量，然后将其调节至5.33mg/ml。通过dls测量颗粒尺寸。颗粒尺寸为175nm。然后将所得溶液转移到小瓶中并在-80℃下储存。通过体外细胞结合检验，分析最终的缀合颗粒的赫赛汀浓度。浓度为0.43mg/ml。实施例34；制备缀合曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂用于体外和体内研究为了分离nab-紫杉醇纳米颗粒，将20ml生理盐水加入含有冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)的1个小瓶中将。1.2ml的nab-紫杉醇悬浮液等分到16个1.5mleppendorf管中。将eppendorf管温和混合20分钟。将一个eppendorf管用于hplc分析以测定紫杉醇含量并测量颗粒尺寸。平均颗粒尺寸为147nm。将其余eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液。向得到的丸粒中加入500μl乙酸钠(ph8.0)和150mm氯化钠以重构纳米颗粒(nab-紫杉醇颗粒浓度为10mg/ml紫杉醇)。将traut试剂以2mg/ml(14.5mm)的浓度溶解于wfi中。将15μl(连接体：hsa比例为10：1)traut试剂缓慢加入分离的纳米颗粒溶液中并在4℃下反应70分钟。加入2.4μl的500mmedta(ph8.0)并在4℃下温育10分钟。将样品在21,000rcf下在4℃下离心80分钟。将管从离心机中取出，滗析，并用pbs盐水洗涤两次。将分离的活化的nab-紫杉醇颗粒重新悬浮于500μlpbs盐水中并超声处理1分钟以使颗粒重新悬浮。使用生理盐水制备21mg/ml(曲妥珠单抗)溶液。将6ml溶液等分到3个15ml旋转浓缩器中。使用无内毒素的水制备100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)并过滤。向旋转浓缩器装入ph6.6的磷酸盐缓冲剂并以3750rpm离心35分钟。将此重复一次。将剩余的溶液移液到15mlfalcon管中并稀释至12ml总体积。通过尺寸排阻色谱(sec)测量曲妥珠单抗浓度。根据需要将曲妥珠单抗浓度调节至10.5mg/ml。将sm(peg)6包装物从-20℃冰箱中取出并升温至室温1小时。将2ml无菌dmso溶液等分到eppendorf管中。从该eppendorf管中，将122μldmso转移到含有8.3mgsm(peg)6(112mm最终浓度)的小瓶中。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解在dmso中。将2ml曲妥珠单抗溶液等分到6个15mlfalcon管中。将6.8μlsm(peg)6连接剂溶液缓慢加入含有1ml曲妥珠单抗的各管中。在此过程中，使溶液避光。在仍然避光的同时，使连接体/抗体溶液在振荡器上反应2小时。用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤5ml脱盐柱4次(1000g，每次离心6分钟)。将活化的抗体溶液通过脱盐柱过滤以除去未反应的连接体。收集滤液并组合。通过液相色谱-质谱(lc-ms)测定曲妥珠单抗和连接体的比例。将500μl活化的曲妥珠单抗缓慢加入500μl纳米颗粒溶液中。然后将溶液在4℃下温育过夜(避免振荡或搅动)。从4℃取出缀合溶液。该溶液没有在eppendorf管表面上的聚集体。将缀合溶液在21,000g下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液，并用pbs盐水洗涤各管两次。在pbs盐水中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将500μl的40mg/mlhsa溶液等分到各管中。然后将管超声处理20秒并混合(此步骤重复数次，直至纳米颗粒完全重新悬浮)。通过rp-hplc测量紫杉醇含量，然后将其调节至5.56mg/ml。通过dls测量颗粒尺寸。颗粒尺寸为164nm。然后将所得溶液转移到小瓶中并在-80℃下储存。通过elisa分析最终缀合颗粒的赫赛汀浓度。浓度为0.18mg/ml。实施例35：制备缀合曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂用于体外和体内研究为了分离nab-紫杉醇纳米颗粒，将20ml生理盐水加入含有冻干的nab-紫杉醇组合物(100mg紫杉醇)的1个小瓶中。将1.2ml的nab-紫杉醇悬浮液等分到25个eppendorf管中。将eppendorf管温和混合20分钟。将一个eppendorf管用于rp-hplc分析以测定紫杉醇含量并测量颗粒尺寸。将其余eppendorf管在21,000rcf下在20℃下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液。向保留的丸粒中加入0.6ml生理盐水以重构纳米颗粒(最终浓度为10mg/ml的紫杉醇)。颗粒尺寸测量为149nm。使用生理盐水制备21mg/ml(曲妥珠单抗)溶液。将8ml溶液等分到2个15ml旋转浓缩器中。使用不含内毒素的水制备100mm磷酸钾缓冲剂(ph6.6)并过滤。向旋转浓缩器装入ph6.6的磷酸盐缓冲剂，并按照制造商的说明离心30分钟。将此重复一次。将剩余的曲妥珠单抗溶液移液到15mlfalcon管中并稀释至总体积2.4ml。通过尺寸排阻色谱(sec)测量曲妥珠单抗浓度。根据需要将曲妥珠单抗浓度调节至10.5mg/ml。将sm(peg)6包装物从-20℃冰箱中取出并升温至室温1小时。将2ml无菌dmso溶液等分到eppendorf管中。从该eppendorf管中，将1.51mldmso转移到含有100mgsm(peg)6(112mm最终浓度)的小瓶中。涡旋连接体溶液，直至连接体完全溶解在dmso中。将1ml的10.5mg/ml曲妥珠单抗溶液等分到16个eppendorf管中。向含有1ml曲妥珠单抗溶液的各eppendorf管中缓慢加入5.1μl连接体溶液(连接体与抗体的比例为7.5：1)。在此过程中，使溶液避光。在仍然避光的同时，使连接体/抗体溶液在振荡器上反应2小时。用磷酸盐缓冲剂(ph6.6)洗涤5ml脱盐柱4次(1000g，每次离心5分钟)。将活化的抗体溶液通过脱盐柱过滤以除去未反应的连接体。收集滤液并组合。通过液相色谱-质谱(lc-ms)测定曲妥珠单抗和连接体的比例。将600μl活化的曲妥珠单抗缓慢加入600μl纳米颗粒溶液中。然后将溶液在4℃温育过夜(避免振荡或搅动)。将缀合溶液从冰箱中取出。该溶液没有在eppendorf管表面上的聚集体。颗粒尺寸测量为164nm。将缀合溶液在21,000g下离心80分钟。离心后，立即滗析该管以除去上清液，并用pbs盐水洗涤各管两次。在pbs盐水(ph7.4)中制备40mg/ml人血清白蛋白(hsa)溶液。将800μl的40mg/mlhsa溶液等分到各管中。然后将管超声处理20秒，然后混合(此步骤重复数次，直到纳米颗粒完全重新悬浮)。通过rp-hplc测量紫杉醇含量，然后通过添加40mg/mlhsa和赫赛汀的溶液调节至最终5.05mg/ml紫杉醇和0.5mg/ml赫赛汀。颗粒尺寸测定为157nm。然后将所得溶液转移到小瓶中并在-80℃下储存。对分离的nab-紫杉醇纳米颗粒和曲妥珠单抗缀合的颗粒进行免疫印迹以确认抗体缀合。实施例36：混合型、嵌入型和缀合型曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂的体外效力测试抗体-nab-紫杉醇的各种制剂的体外抗增殖作用和对p(tyrl248)/总erbb2结合的抑制。抗增殖分析。利用抗增殖分析评价体外生长抑制活性。将40μl/孔的细胞以其优化的密度接种到384孔板(corning，3712)中，并使其在37℃和5％co2下温育过夜。第二天，用测试物曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂处理细胞，并将其放回37℃和5％co2的培养箱中3天。3天处理后，通过添加20μl/孔的celltiter-glo(promega，g7573)评估细胞活力。温育30分钟后，在perkinelmerenvision上读取平板，进行发光检测。磷酸(tyrl248)/总erbb2结合分析。通过py1248/总erbb2全细胞裂解物分析试剂盒(mesoscalediscovery，k15125d)表征测试物曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂的erbb2结合。接种25,000个细胞/孔过夜，并使其在37℃和5％co2下附着于96孔培养板(corning3704)。第二天，用测试物曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂处理细胞2小时。2小时处理后，通过加入65μl/孔的msd裂解缓冲剂裂解细胞，并将其置于4℃的摇晃振荡器上1小时。在此期间，用msd封闭缓冲剂a封闭msd捕获板。1小时后，用msd洗涤缓冲剂洗涤msd捕获板。然后将35μl/孔的细胞裂解物转移至msd捕获板，并使其在室温下在摇晃振荡器上温育1小时。然后，通过丢弃细胞裂解物以及然后用msd洗涤缓冲剂洗涤msd捕获板，来评估捕获的蛋白质量的erb2水平。加入25μl/孔的在抗体稀释缓冲剂中的sulfo-tag抗总erbb2抗体，然后使其与msd板一起在摇晃振荡器上在室温下温育1小时。温度。一小时后，用msd洗涤缓冲剂洗涤msd板。然后加入150μl/孔的msd读取缓冲剂，并立即在msdsectors600仪器上读取平板。来自结合研究的数据提供在表19中，并且来自增殖研究的数据提供在表20中。表19：磷酸(tyr1248)/总erbb2结合分析的ic50表20：细胞增殖分析ex.＝实施例；tz＝曲妥珠单抗；pxt＝紫杉醇实施例37：混合型、嵌入型和缀合型曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂的体内效力本实施例证明了在bt-474异种移植小鼠中给予的混合型、嵌入型和缀合型nab-紫杉醇-曲妥珠单抗制剂的治疗效力。在肿瘤细胞接种前一天(第-1天)，对严重联合免疫缺陷(scid)小鼠皮下植入17β-雌二醇丸粒(90天释放，0.36mg/丸粒)。在第0天，用bt-474细胞(来自atcc)皮下接种小鼠。对于小型肿瘤研究，在接种bt-474细胞后约2周，测量肿瘤并将小鼠随机分入研究组。对于大型肿瘤研究，在接种bt-474细胞后约4周，测量肿瘤并将小鼠随机分入研究组，如下所述。对于小型肿瘤研究(肿瘤尺寸约150mm3-180mm3)，将7-8只scid小鼠分配给以下研究组中的各组，并且接受每周一次的给药：(1)媒介；(2)nab-紫杉醇：50mg/kg(“abx50”)；(3)nab-紫杉醇：25mg/kg(“abx25”)；(4)5mg/kg(“tratsu5”)；(5)2.5mg/kg(“tratsu2.5”)；(6)nab-紫杉醇-曲妥珠单抗缀合物(50mgnab-紫杉醇/5mg曲妥珠单抗/kg)(“缀合物(50/5)”)(根据实施例35)；(7)nab-紫杉醇-曲妥珠单抗缀合物(25mgnab-紫杉醇/2.5mg曲妥珠单抗/kg)(“缀合物(25/2.5)”)(根据实施例35)；(8)嵌入型nab-紫杉醇-曲妥珠单抗(50mgnab-紫杉醇/5mg曲妥珠单抗/kg)(“嵌入型(50/5)”)(根据实施例20)；(9)嵌入型nab-紫杉醇-曲妥珠单抗(25mgnab-紫杉醇/2.5mg曲妥珠单抗/kg)(“嵌入型(25/2.5)”)(根据实施例20)；(10)nab-紫杉醇和的混合物(50mgnab-紫杉醇和5mg/kg)(“混合物50/5”)(根据实施例32，批次5)；和(11)nab-紫杉醇和的混合物(25mgnab-紫杉醇和2.5mg/kg)(“混合物25/2.5”)(根据实施例32，批次5)。对于大型肿瘤研究(肿瘤尺寸约为500mm3-750mm3)，将7只scid小鼠分配给以下研究组中的各组并接受每周一次的给药：(1)媒介；(2)nab-紫杉醇：50mg/kg；(3)5mg/kg；(4)nab-紫杉醇-曲妥珠单抗缀合物(50mgnab-紫杉醇/5mg曲妥珠单抗/kg)(根据实施例35)；(5)嵌入型nab-紫杉醇-曲妥珠单抗(50mgnab-紫杉醇/5mg曲妥珠单抗/kg)(根据实施例20)；和(6)和的混合物(50mgnab-紫杉醇和5mg/kg)(根据实施例32，批次5)。一周两次测量动物肿瘤测量值和体重。最后一次肿瘤测量盲测，不知指定原始组。小型肿瘤研究的肿瘤体积变化百分比结果显示在图25a-25b(治疗后7天)和图25c-25d(治疗后14天)中。到第14天，与单药nab-紫杉醇相比，较高剂量的nab-紫杉醇-曲妥珠单抗缀合物组(50mgnab-紫杉醇/5mg曲妥珠单抗/kg)实现了显著提高的抗肿瘤活性(图25c)。大型肿瘤研究的结果显示图26a(治疗后7天)和图26b(治疗后14天)中。到第14天，与单药nab-紫杉醇或单药曲妥珠单抗相比，嵌入型nab-紫杉醇-曲妥珠单抗(50mgnab-紫杉醇/5mg曲妥珠单抗/kg)实现了显著提高的抗肿瘤活性。此外，在治疗后14天，与单药曲妥珠单抗相比，缀合型nab-紫杉醇-曲妥珠单抗(50mgnab-紫杉醇/5mg曲妥珠单抗/kg)实现显著提高的抗肿瘤活性。实施例38：混合型、嵌入型和缀合型曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂的体内效力本实施例证明了混合型、嵌入型和缀合型nab-紫杉醇-曲妥珠单抗制剂对bt-474异种移植小鼠模型的治疗效力。如实施例31中所述，准备严重联合免疫缺陷(scid)小鼠。在用bt-474细胞接种后约4周，测量肿瘤(约600mm3)并将小鼠随机分入研究组，如下所述。将8只scid小鼠分配到以下研究组中的各组并接受每周一次的给药：(1)媒介(5％hsa)；(2)nab-紫杉醇：50mg/kg(“abx50”)；(3)4.1mg/kg(“tratsu4.1”)；(4)nab-紫杉醇-曲妥珠单抗缀合物(50mgnab-紫杉醇/4.1mg曲妥珠单抗/kg)(“缀合物50/4.1＝12：1”)(根据实施例33)；(5)nab-紫杉醇-曲妥珠单抗缀合物(50mgnab-紫杉醇/0.54mg曲妥珠单抗/kg)(“缀合物50/0.54＝92.5：1”)(根据实施例23)；(6)nab-紫杉醇和的混合物(50mgnab-紫杉醇和4.1mg/kg)(混合物(50/4.1＝12：1)“)(根据实施例36，批次1))；(7)nab-紫杉醇和的混合物(50mgnab-紫杉醇和0.54mg/kg)(“混合物(50/0.54＝92.5：1)”)(根据实施例36，批次4)；和(8)相继给予nab-紫杉醇(50mg/kg)和(4.1mg/kg)(“相继(50/4.1)”)。本研究的肿瘤体积变化百分比结果显示在图27a(第0天治疗后7天)和27b(第0天和第7天治疗后14天)。实施例39：混合型、嵌入型和缀合型曲妥珠单抗-纳米颗粒制剂的体内效力本实施例证明了嵌入型和缀合型nab-紫杉醇-曲妥珠单抗制剂对bt-474异种移植小鼠模型的治疗效力。如实施例m中所述，准备严重联合免疫缺陷(scid)小鼠。在用bt-474细胞接种后约4周，测量肿瘤(约600mm3)并将小鼠随机分入研究组，如下所示。将8只scid小鼠分配到在1mg/kg研究组中的以下研究组的各组中，并接受每周一次的给药：(1)媒介(5％hsa)；(2)nab-紫杉醇：30mg/kg；(3)1mg/kg；(4)相继给予nab-紫杉醇(30mg/kg)和(1mg/kg)；和(5)nab-紫杉醇-曲妥珠单抗缀合物(30mgnab-紫杉醇/1mg曲妥珠单抗/kg)(根据实施例34)；(6)0.6mg/kg；(7)相继给予nab-紫杉醇(30mg/kg)和(0.6mg/kg)；和(8)nab-紫杉醇-曲妥珠单抗缀合物(30mgnab-紫杉醇/0.6mg曲妥珠单抗/kg)(根据实施例26)。在第0天单次上述治疗后第7天测量肿瘤体积。第7天的肿瘤体积变化百分比结果示于图28a-28b中。在第0天和第7天两次上述治疗后第14天测量肿瘤体积。第14天的肿瘤体积变化百分比结果示于图28c-28d中。序列表<110>阿布拉科斯生物科学有限公司w·福斯v·裴科夫<120>纳米颗粒制剂及其制备和使用方法<130>638772021740<140>还未分配<141>同时在此<150>62/406,367<151>2016-10-10<160>2<170>fastseqforwindowsversion4.0<210>1<211>20<212>dna<213>人工序列<220><223>合成构建物<400>1cacacacacacacacacaca20<210>2<211>15<212>dna<213>人工序列<220><223>合成构建物<400>2gtgtgtgtgtgtgtg15当前第1页12