本发明涉及的一种具有抗过敏作用的栗子花提取物的制备方法,主要应用在生物提取的技术领域。
背景技术:
栗子花又称栗花,为壳斗科植物栗的花,呈穗形,有氧化精氨酸特有的腥味,性味微温、微苦、涩,中医认为适用于泻痢、便血。
过敏是过敏原进入机体诱导产生特异性ige,ige结合到肥大细胞和嗜酸性粒细胞,使机体进入对该过敏原特异致敏状态,当过敏原再次接触时,与细胞膜上的ige受体结合引起一系列生化反应,继而释放出诸如组织胺等各种与过敏反应和炎症有关的生物活性介质。
栗子花提取物为多糖、黄酮类物质、蛋白等多类物质的混合物,该混合物能有效地降低生物体内的ige,减轻过敏症状或避免过敏发生。
技术实现要素:
本发明的目的在于克服现有技术的不足,采用简洁的生物技术操作方法,提供了一种具有抗过敏作用的栗子花提取物的制备方法,以提供一种具有抗过敏作用的栗子花提取物。
本发明是通过以下技术方案实现的:
本发明提供一种具有抗过敏作用的栗子花提取物的制备方法,该栗子花提取物的制备方法包括以下步骤:
(1)取干燥的栗子花,粉碎,用含氯化钠的乙醇提取液进行提取,然后过滤;
(2)将步骤(1)的提取液浓缩,冻干,获得上述栗子花提取物
优选地,所述步骤(1)中,栗子花粉碎至100-150目。
优选地,所述步骤(1)中,提取液(体积ml)与栗子花粉(重量g)比为20∶1。
优选地,所述步骤(1)中,提取液的ph值为8.0。
优选地,所述步骤(1)中,所述提取液为含3-4%氯化钠的30%的乙醇溶液。
优选地,所述步骤(1)中,提取方法为室温搅拌2-3小时。
优选地,所述步骤(2)中,提取液用超滤器(截留分子量为1000)浓缩至原体积的五分之一。
本发明相比现有技术具有以下优点:本发明提供了一种具有抗过敏作用的栗子花提取物的制备方法,该栗子花提取物中包括多糖、黄酮、蛋白等多种成分,其中,多糖成分能有效地结合人体内游离的钙,促进钙质吸收;同时,该栗子花提取物中的有效成分还能选择性地与人体内的ige结合,对过敏体质的人有预防过敏作用。本发明采用生物技术操作方法相对简洁。
附图说明
图1为不同ph值下提取液提取的栗子花提取物的收率曲线图。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明,本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施,给出了详细的实施方式和具体的操作过程,但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
1、栗子花提取物的制备:
(1)取干燥的栗子花,粉碎至120目,分成7组,分别用ph值为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0的含3%氯化钠的30%乙醇提取液进行提取,其中提取液(体积ml)与栗子花粉(重量g)比为20∶1,室温下搅拌提取3小时,然后过滤;
(2)将步骤(1)的提取液用超滤器(截留分子量为1000)浓缩至原体积的五分之一,冻干,获得上述栗子花提取物。
(3)计算7组栗子花提取物的收率,获得如图1所示的结果。
收率(%)=栗子花提取物冻干品的质量/提取前栗子花干重的质量×100%
图1中可看出,当提取液的ph值为8.0时,栗子花提取物的收率最高,为最佳提取ph值。
以下实验均取提取液ph值为8.0组获得的栗子花提取物为试验材料。
2、栗子花提取物的成分鉴定
利用蒽酮试剂测定栗子花提取物的含糖量,按重量计,该栗子花提取物的含糖量为69%;
利用bca蛋白浓度测定试剂盒测定栗子花提取物的蛋白质含量,按重量计,该栗子花提取物的蛋白质含量为18%;
利用黄酮检测试剂盒(微板法)测定栗子花提取物的黄酮含量,按重量计,该栗子花提取物的黄酮含量为9%;
其它物质成分含量为4%。
3、栗子花提取物抗过敏效果试验
血清ige升高是过敏性疾病最有力的提示,过敏原进入机体诱导产生特异性ige,ige结合到肥大细胞和嗜酸性粒细胞,使机体进入对该过敏原特异致敏状态,当过敏原再次接触时,与细胞膜上的ige受体结合引起一系列生化反应,继而释放出诸如组织胺等各种与过敏反应和炎症有关的生物活性介质。
本实施例中,选用卵清蛋白为过敏原,通过腹腔注射、雾化器熏蒸和滴鼻的方法,在豚鼠上复制人类过敏性鼻炎的动物模型(ige试剂盒检测为阳性+),获得过敏性豚鼠。
将上述过敏性豚鼠分为四组,每组20只,每只约500克,用所述栗子花提取物干品进行饲喂,每日早晚各灌喂一次,每次每只0.2克,每周取一组豚鼠,用ige试剂盒检测,计算阳性(+)转阴性(-)的比例(阳性转阴性数/20×100%),获得如下表1所示的结果:
表1:用栗子花提取物喂食过敏性豚鼠(+)转(-)比例
从表1中可看出,在喂食本发明所述的栗子花提取物的过程中,豚鼠的过敏性反应从阳性转为阴性的比率逐渐升高,当喂食四周后,豚鼠过敏性反应的治愈率达到80%,说明栗子花提取物具有较好的抗过敏效果。
实施例2
本实施例提供了另一种栗子花提取物的制备方法,其制备方法中,利用ph值为7.5,含4%的氯化钠30%乙醇溶液提取液进行提取,其它步骤同实施例1,计算收率为5.8%。
利用蒽酮试剂测定栗子花提取物的含糖量,按重量计,该栗子花提取物的含糖量为66%。
利用bca蛋白浓度测定试剂盒测定栗子花提取物的蛋白质含量,按重量计,该栗子花提取物的蛋白质含量为20%;
利用黄酮检测试剂盒(微板法)测定栗子花提取物的黄酮含量,按重量计,该栗子花提取物的黄酮含量为9%;
其它物质成分含量为5%。
本发明,提取方法较为简易,上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明内容并加以实施,并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围内。