相关申请的交叉引用
本申请要求于2017年4月21日提交的美国临时专利申请no.62/488,161的优先权权益，其全部内容通过引用并入本文。
本发明一般性地涉及用于治疗视网膜病变(retinopathy)(包括糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy)和黄斑变性(maculardegeneration))的组合物、药盒(kit)和方法。
背景技术：
视网膜是内衬于眼球内部后壁的神经细胞层。视网膜接收由晶状体形成的光图像，并将该图像转换为通过视神经到达脑的信号。黄斑(macula)是视网膜中央的小区域，其使眼睛能够分辨出细小的细节，例如书面文本。视网膜病变是涉及视网膜病症的一般术语。
视网膜病变的一种类型是糖尿病视网膜病变。糖尿病患者中的高血糖水平损害视网膜中的血管。这种损害可导致血管肿胀和渗漏，血管闭合以切断流向视网膜的血流，以及视网膜上异常血管的生长。糖尿病视网膜病变通常以两个阶段进行。在糖尿病视网膜病变的早期阶段(称为非增生性糖尿病视网膜病变(non-proliferativediabeticretinopathy))，血管可能肿胀和渗漏，引起黄斑水肿。血管也可能闭合，引起黄斑缺血。糖尿病视网膜病变的晚期阶段称为增生性糖尿病视网膜病变。在该阶段，视网膜长出新血管，所述新血管可能渗漏或形成瘢痕组织。糖尿病视网膜病变在从视力模糊到视力丧失不利地影响视力。
视网膜病变的另一种类型是黄斑变性。黄斑变性由黄斑损伤引起，并导致中心视力(centralvision)，包括看见细小细节的能力的丧失。黄斑变性通常与年龄相关，作为衰老过程的自然部分发生。
黄斑变性有两种类型：干性黄斑变性和湿性黄斑变性。黄斑变性最常见的类型是干性黄斑变性，其发生在黄斑随着年龄变薄并且在视网膜下形成小的蛋白质沉积物时。在湿性黄斑变性中，新的异常血管在视网膜下生长并导致黄斑瘢痕化。
目前可用于治疗糖尿病视网膜病变和黄斑变性的药物包括兰尼单抗(ranibizumab)、贝伐单抗(bevacizumab)和阿柏西普(aflibercept)。这些抗体来源的药物全部由医生通过注射施用到患者的眼中。因此，仍然需要针对视网膜病变的另外的有效治疗或治愈，特别是可由患者施用的那些。
技术实现要素：
本发明提供了用于在有此需要的对象中治疗视网膜病变(包括糖尿病视网膜病变和黄斑变性)的方法、组合物和药盒。在某些实施方案中，本发明提供了包括向有此需要的对象施用有效量的酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂的方法。
在另一些实施方案中，本发明提供了包含酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂的药物组合物。还提供了包含酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂及其包装的药盒。
具体实施方式
通过参考形成本公开内容的一部分的以下详细描述可更容易地理解本主题。应当理解，本发明不限于本文中描述和/或示出的特定产品、方法、条件或参数，并且本文中使用的术语仅用于通过实例来描述一些特定实施方案的目的，而不旨在限制所要求保护的发明。
除非本文中另有定义，否则结合本申请使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。此外，除非上下文中另有要求，否则没有数量词修饰的名词表示一个/种或更多个/种。
除非另有说明，否则以上和整个公开内容中所采用的以下术语和缩写应理解为具有以下含义。
除非上下文中另外明确指出，否则在本公开内容中没有数量词修饰的名词表示一个/种或更多个/种，并且提及特定的数值包括至少该特定值。因此，例如，提及“化合物”是指一个/种或更多个/种这样的化合物以及本领域技术人员已知的其等同物等。本文中使用的术语“多个”意指多于一个。当表示值的范围时，另一个实施方案包括从一个特定值和/或至另一个特定值。类似地，当通过使用在前的“约”将值表示为近似值时，应理解该特定值形成另一个实施方案。所有范围都是包括性的且可组合的。
本文中使用的术语“组分”、“组合物”、“化合物的组合物”、“化合物”、“药品”、“药理学活性剂”、“活性剂”、“治疗剂”、“疗法”、“治疗”或“药物”在本文中可互换使用，是指当施用于对象(人或动物)时，通过局部和/或全身作用诱导期望的药理学和/或生理学作用的化合物或物质的组合物。
本文中使用的术语“治疗”或“疗法”(及其不同的形式)包括预防性(例如，预防)、治愈性或姑息性治疗。本文中使用的术语“治疗”包括减轻或降低病症、疾病或障碍的至少一种不利或负面的作用或症状。该病症、疾病或障碍可以是视网膜病变。
以上和整个公开内容中所采用的术语“有效量”是指在剂量和必要的时间段下有效地实现对于相关障碍、病症或副作用的治疗的期望结果的量。应当理解，本发明组分的有效量会随患者而不同，不仅与所选的特定化合物、组分或组合物，施用途径以及组分在个体中引起期望结果的能力相关，还与例如以下因素有关：待缓解的病症的严重程度或疾病状态，个体的激素水平、年龄、性别、体重，患者当时的状态以及治疗中的病理性状况的严重程度、同时使用的药物或特殊饮食，然后是特定患者以及本领域技术人员会意识到的其他因素，恰当的剂量由主治医生判断。可调整剂量方案以提供改善的治疗响应。有效量也是其中组分的治疗有益作用胜过任何毒性或有害作用的量。
“可药用”是指在合理的医学判断范围内适合用于与人和动物的组织相接触而没有过度的毒性、刺激、变态反应或其他问题并发症，与合理的收益/风险比匹配的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
“高血糖水平”在本文中与“高血糖症”互换使用，并且定义为在两个分开的时机下的空腹血浆血糖水平为126mg/dl或更高。
在本发明内，所公开的化合物可以以可药用盐的形式制备。“可药用盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸式或碱式盐来修饰。可药用盐的实例包括但不限于碱性残基(例如胺)的无机或有机酸盐；酸性残基(例如羧酸)的碱金属盐或有机盐；等。可药用盐包括例如由无毒性无机或有机酸形成的母体化合物的常规无毒性盐或季铵盐。例如，这样的常规无毒性盐包括来自于无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等)的那些；以及由有机酸(例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸(sulfanilicacid)、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙磺酸(isethionicacid)等)制备的盐。这些生理学上可接受的盐通过本领域中已知的方法来制备，例如通过将游离的胺碱与过量的酸溶解在醇水溶液中，或者通过用碱金属碱(例如氢氧化物)或用胺中和游离羧酸。
本文中所述的化合物可以以替代形式制备。例如，许多含氨基化合物可作为酸加成盐使用或制备。这样的盐通常改善了化合物的分离和处理特性。例如，取决于试剂、反应条件等，如本文中所述的化合物可用作或制备成例如其盐酸盐或甲苯磺酸盐。同构的结晶形式、所有手性和外消旋形式、n-氧化物、水合物、溶剂合物和酸式盐的水合物也被考虑在本发明的范围之内。
本发明的某些酸性或碱性化合物可作为两性离子存在。化合物的所有形式(包括游离酸、游离碱和两性离子)被考虑在本发明的范围之内。本领域中公知，含有氨基和羧基二者的化合物经常与其两性离子形式平衡存在。因此，含有例如氨基和羧基二者的任何本文中所述化合物也包括提及其相应的两性离子。
术语“立体异构体”是指具有相同化学组成，但在原子或基团的空间排列方面不同的化合物。术语“对映异构体”是指不可重叠的互为镜像的立体异构体。
术语“施用”意指直接施用本发明的化合物或组合物，或者施用将在体内形成等量的活性化合物或物质的前药、衍生物或类似物。
术语“对象”、“个体”和“患者”在本文中可互换使用，并且是指向其提供用根据本发明的药物组合物进行治疗(包括预防性治疗)的动物(例如人)。本文中使用的术语“对象”是指人或非人动物。术语“非人动物”和“非人哺乳动物”在本文中可互换使用并且包括所有脊椎动物，例如哺乳动物，例如非人灵长类(特别是高等灵长类)、绵羊、狗、啮齿动物(例如小鼠或大鼠)、豚鼠、山羊、猪、猫、兔、牛、马；以及非哺乳动物，例如爬行动物、两栖动物、鸡和火鸡。
本文中使用的术语“抑制剂”包括抑制蛋白质、多肽或酶的表达或活性(但不一定意味着完全抑制表达和/或活性)的化合物。更确切地，抑制包括抑制蛋白质、多肽或酶的表达和/或活性至足以产生期望效果的程度和时间。
本文中使用的术语“促进剂”包括促进蛋白质、多肽或酶的表达或活性(但不一定意味着完全促进表达和/或活性)的化合物。更确切地，促进包括促进蛋白质、多肽或酶的表达和/或活性至足以产生期望效果的程度和时间。
虽然不旨在受任何特定作用机制的束缚，但认为根据本发明的酪氨酸羟化酶抑制剂通过降低肾上腺系统的活性来降低血管收缩并进而增加流向视网膜的血流而发挥作用。
提供了在对象中治疗视网膜病变的方法。这样的方法可包括向有此需要的对象施用有效量的酪氨酸羟化酶抑制剂。另一些这样的方法包括向有此需要的对象施用有效量的酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂。该酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂可同时施用。
酪氨酸羟化酶抑制剂或者酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂的施用可通过多种途径进行，包括经口、经鼻、皮下、静脉内、肌内、经皮、经阴道、经直肠或以其任意组合。经皮施用可使用例如油酸、1-甲基-2-吡咯烷酮、十二烷基壬氧基乙二醇单醚(dodecylnonaoxyethyleneglycolmonoether)进行。优选的经皮制剂在美国公开申请no.2016-0199453中描述，其通过引用并入本文。
在本发明的另一些合适的实施方案中，酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂在由施用酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂五至七天和不施用酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂一至两天组成的周期期间施用。在本发明的一些合适的实施方案中，进行至少六个所述施用周期。在本发明的一些合适的实施方案中，施用25mg的酪氨酸羟化酶抑制剂。
在某些实施方案中，酪氨酸羟化酶抑制剂是酪氨酸衍生物。酪氨酸衍生物可能够以不同的异构体形式包括立体异构体和对映异构体存在。酪氨酸衍生物可以例如以l形式或d形式二者存在。酪氨酸衍生物也可以例如以外消旋形式存在。代表性的酪氨酸衍生物包括以下的一种或更多种：(2r)-2-氨基-3-(2-氯-4-羟基苯基)丙酸甲酯、d-酪氨酸乙酯盐酸盐、(2r)-2-氨基-3-(2，6-二氯-3，4-二甲氧基苯基)丙酸甲酯、h-d-酪氨酸(tbu)-烯丙酯盐酸盐、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-4，5-二甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(2-氯-3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(4-[(2-氯-6-氟苯基)甲氧基]苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(2-氯-3，4-二甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-5-氟-4-羟基苯基)丙酸甲酯、2-(乙酰氨基)-2-(4-[(2-氯-6-氟苄基)氧基]苄基丙二酸二乙酯、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-4-羟基-5-甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(2，6-二氯-3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-4-羟基苯基)丙酸甲酯、h-dl-酪氨酸甲酯盐酸盐、h-3，5-二碘-酪氨酸甲酯盐酸盐、h-d-3，5-二碘-酪氨酸甲酯盐酸盐、h-d-酪氨酸甲酯盐酸盐、d-酪氨酸甲酯盐酸盐、d-酪氨酸-甲酯盐酸盐、甲基d-酪氨酸酯盐酸盐、h-d-酪氨酸甲酯·盐酸盐、d-酪氨酸甲酯盐酸盐、h-d-酪氨酸甲酯盐酸盐、(2r)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸、(2r)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)甲酯盐酸盐、(2r)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸甲酯盐酸盐、(2r)-2-氮烷基-3-(4-羟基苯基)丙酸甲酯盐酸盐、3-氯-l-酪氨酸、3-硝基-l-酪氨酸、3-硝基-l-酪氨酸乙酯盐酸盐、dl-m-酪氨酸、dl-o-酪氨酸、boc-酪氨酸(3，5-i2)-osu、fmoc-酪氨酸(3-no2)-oh、α-甲基-l-酪氨酸、α-甲基-d-酪氨酸和α-甲基-dl-酪氨酸。在本发明的某些实施方案中，酪氨酸衍生物是α-甲基-l-酪氨酸。在另一些实施方案中，酪氨酸衍生物是α-甲基-d-酪氨酸。在另一些实施方案中，酪氨酸衍生物是外消旋形式的α-甲基-dl-酪氨酸。
代表性的p4503a4促进剂包括5，5-二苯基乙内酰脲、丙戊酸和卡马西平。在本发明的一个合适的实施方案中，组合物包含5mg至25mg的5，5-二苯基乙内酰脲。代表性的对象包括哺乳动物。在某些实施方案中，哺乳动物是人。
在本发明的一些实施方案中，提供了还包括在所述对象中评估所述视网膜病变的进展的方法。该评估步骤可在所述施用步骤之前或所述施用步骤之后进行。
可用本发明的方法治疗的代表性病症包括视网膜病变，其包括糖尿病视网膜病变、非增生性糖尿病视网膜病变、增生性糖尿病视网膜病变、黄斑变性、干性黄斑变性和湿性黄斑变性。
药物活性分子例如抑制剂和/或促进剂的施用可通过多种途径进行，包括经口、经鼻、皮下、静脉内、肌内、经皮、经阴道、经直肠、或以其任意组合。经皮施用可使用例如油酸、1-甲基-2-吡咯烷酮、十二烷基壬氧基乙二醇单醚进行。
酪氨酸羟化酶抑制剂可在由施用酪氨酸羟化酶抑制剂五至七天和不施用酪氨酸羟化酶抑制剂一至两天组成的周期期间施用。可以施用酪氨酸羟化酶抑制剂至少六个所述周期的疗程。在本发明的一个合适的实施方案中，每天施用酪氨酸羟化酶抑制剂。在本发明的另一个合适的实施方案中，每天多次施用酪氨酸羟化酶抑制剂。
提供了根据本发明的代表性治疗方法，其包括向有此需要的对象施用有效量的酪氨酸羟化酶抑制剂或者酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂。
一些合适的实施方案可包括包含酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂的药物组合物。酪氨酸羟化酶抑制剂可以是酪氨酸衍生物。
本文中还提供了包含酪氨酸羟化酶抑制剂和p4503a4促进剂及其包装的药盒。酪氨酸羟化酶抑制剂可以是酪氨酸衍生物。酪氨酸衍生物可包括能够以异构形式存在的酪氨酸衍生物。酪氨酸衍生物可包括为其l-形式或其d-形式的酪氨酸衍生物。酪氨酸衍生物也可以例如以外消旋形式存在。代表性的酪氨酸衍生物包括以下的一种或更多种：(2r)-2-氨基-3-(2-氯-4羟基苯基)丙酸甲酯、d-酪氨酸乙酯盐酸盐、(2r)-2-氨基-3-(2，6-二氯-3，4-二甲氧基苯基)丙酸甲酯、h-d-酪氨酸(tbu)-烯丙酯盐酸盐、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-4，5-二甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(2-氯-3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(4-[(2-氯-6-氟苯基)甲氧基]苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(2-氯-3，4-二甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-5-氟-4-羟基苯基)丙酸甲酯、2-(乙酰氨基)-2-(4-[(2-氯-6-氟苄基)氧基]苄基丙二酸二乙酯、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-4-羟基-5-甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(2，6-二氯-3-羟基-4-甲氧基苯基)丙酸甲酯、(2r)-2-氨基-3-(3-氯-4-羟基苯基)丙酸甲酯、h-dl-酪氨酸-甲酯盐酸盐、h-3，5-二碘-酪氨酸-甲酯盐酸盐、h-d-3，5-二碘-酪氨酸-甲酯盐酸盐、h-d-酪氨酸-甲酯盐酸盐、d-酪氨酸甲酯盐酸盐、d-酪氨酸-ome盐酸盐、甲基d-酪氨酸酯盐酸盐、h-d-酪氨酸-甲酯·盐酸盐、d-酪氨酸甲酯盐酸盐、h-d-酪氨酸-甲酯盐酸盐、(2r)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸、(2r)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)甲酯盐酸盐、(2r)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸甲酯盐酸盐、(2r)-2-氮烷基-3-(4-羟基苯基)丙酸甲酯盐酸盐、3-氯-l-酪氨酸、3-硝基-l-酪氨酸、3-硝基-l-酪氨酸乙酯盐酸盐、dl-m-酪氨酸、dl-o-酪氨酸、boc-酪氨酸(3，5-12)-osu、fmoc-酪氨酸(3-no2)-oh、α-甲基-l-酪氨酸、α-甲基-d-酪氨酸和α-甲基-dl-酪氨酸。在本发明的某些实施方案中，酪氨酸衍生物是α-甲基-l-酪氨酸。在本发明的另一些具体实施方案中，酪氨酸衍生物是α-甲基-d-酪氨酸。在另一些实施方案中，酪氨酸衍生物是外消旋形式的α-甲基-dl-酪氨酸。
提供以下实施例以补充现有公开内容并提供对本文中所述主题的更好理解。这些实施例不应被视为限制所描述的主题。应当理解，本文中所描述的实施例和实施方案仅用于举例说明目的，并且对于本领域技术人员而言其多种修改或变化将是明显的，并且将包括在本发明的真实范围内并且可在不脱离本发明的真实范围的情况下做出。
实施例1-糖尿病视网膜病变
将患有糖尿病视网膜病变的100名患者分为对照组(n＝50)和测试组(n＝50)。使用多普勒光学相干断层成像(doppleropticalcoherencetomography)和光学相干断层扫描血管造影(opticalcoherencetomographyangioagraphy)来评估两组中的基线视网膜血流和血管形成。参见，例如，gaoss，等，opticalcoherencetomographyangiography，investophthalmolvissci.2016，57：oct27-oct36；另见leitgeb，ra等，doppleropticalcoherencetomography，progressinretinalandeygresearch2014.41，26-43。测试组中的患者每天施用酪氨酸羟化酶抑制剂的剂量。30天之后，再次评价对照组和测试组二者的视网膜血流和视网膜血管。相对于对照组，测试组显示出改善的视网膜血流和减少的异常视网膜血管。
实施例2-黄斑变性
将患有黄斑变性的100名患者分为对照组(n＝50)和测试组(n＝50)。使用多普勒光学相干断层成像和光学相干断层扫描血管造影来评估两组中的基线视网膜血流和血管形成。参见，例如，gaoss，等，opticalcoherencetomographyangiography，investophthalmolvissci.2016，57：oct27-oct36；另见leitgeb，ra等，doppleropticalcoherencetomography，progressinretinalandeygresearch2014，41，26-43。测试组中的患者每天施用酪氨酸羟化酶抑制剂的剂量。30天之后，再次评价对照组和测试组二者的视网膜血流和视网膜血管。相对于对照组，测试组显示出改善的视网膜血流和减少的异常视网膜血管。