本申请要求2018年9月10日向中国国家知识产权局提交的专利申请号为201811051396.7，发明名称为“萜内酯类化合物的镇痛用途”的在先申请的优先权。该在先申请的全文通过引用的方式结合于本申请中。
本发明属于医药化合物技术领域，具体涉及萜内酯类化合物的镇痛用途。
背景技术：
疼痛是一种复杂的生理心理活动，是临床上最常见的症状之一。某些长期的剧烈疼痛已成为一种难以忍受的折磨。
疼痛是机体受到伤害性刺激后产生的一种保护性反应，常伴有恐惧、紧张、不安等情绪活动。疼痛又是某些疾病的一种症状，可使人感到痛苦。剧烈疼痛除反映在感觉上的痛苦和情绪上的不安外，还可导致生理功能紊乱，引起失眠，甚至诱发休克而危及生命。因此，临床上适当使用镇痛药以缓解剧痛并预防休克是必要的，在治疗疾病和创伤救护中有重要意义。
镇痛药主要作用于中枢神经系统，选择性抑制和缓解各种疼痛，减轻疼痛而致恐惧紧张和不安情绪，镇痛同时不影响其它感觉如知觉、听觉，并且能保持意识清醒。
因此，需要开发用于预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症，例如用于镇痛的天然活性成分及其衍生物。
技术实现要素：
为改善上述问题，本发明提供下式i所示的萜内酯类化合物在制备药物中的用途，其中所述药物用于预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症。
根据本发明的实施方案，所述药物可以用于镇痛。
根据本发明的实施方案，所述药物用于解痉且用于预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症。
根据本发明的实施方案，所述药物用于解痉和镇痛。
其中，每一个r1相同或不同，彼此独立地选自h、无取代或任选被一个或多个ra取代的下列基团：c1-40烷基、c1-40烷氧基；
每一个ra相同或不同，彼此独立地选自-f、-cl、-br、-i、-oh、-sh、-cn、＝o、-no2、-nh2；
每一个r2相同或不同，彼此独立地选自h、c1-40烷基、c1-40烷氧基。
根据本发明的实施方案，每一个r1相同或不同，彼此独立地选自h、无取代或任选被一个或多个ra取代的下列基团：c1-6烷基、c1-6烷氧基；
其中，每一个ra相同或不同，彼此独立地选自-f、-cl、-br、-i、-oh、-sh、-cn、＝o、-no2、-nh2；
每一个r2相同或不同，彼此独立地选自h、c1-6烷基、c1-6烷氧基。
作为具体的实例，所述萜内酯类化合物可以选自如下所示式ii化合物：
根据本发明，所述药物可以制成液体、固体或气体制剂，并可以通过口服或肠胃外给药；口服制剂包括但不限于片剂、丸剂、粉剂、液体或食物。肠胃外给药制剂包括但不限于注射剂、局部给药制剂或喷雾剂；所述局部给药制剂例如选自霜剂或膏剂；
根据本发明，所述式i化合物的用药剂量为0.001mg/kg～100g/kg。
值得注意的是，上述用药剂量并非限制性范围，所述用药剂量可以随需要缓解的症状的严重和根据因素如受试者的疾病状态、年龄、性别和体重发生变化。
作为实例，所述式i化合物的用药剂量可以为0.001mg/kg～10mg/kg，例如0.001mg/kg、0.002mg/kg、0.003mg/kg、0.0038mg/kg、0.004mg/kg、0.005mg/kg、0.006mg/kg、0.007mg/kg、0.008mg/kg、0.009mg/kg、0.01mg/kg、0.013mg/kg、0.02mg/kg、0.03mg/kg、0.04mg/kg、0.05mg/kg、0.06mg/kg、0.07mg/kg、0.08mg/kg、0.09mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、0.6mg/kg、0.7mg/kg、0.8mg/kg、0.9mg/kg、1.0mg/kg、1.1mg/kg、1.2mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg、10mg/kg。
作为实例，所述式i化合物的用药剂量可以为1.3g/kg～100g/kg，例如1.3g/kg、1.5g/kg、2.5g/kg、5.8g/kg、7.6g/kg、10g/kg、12g/kg、20.5g/kg、31g/kg、40g/kg、50g/kg、70g/kg、90g/kg、100g/kg。
本发明还提供一种用于预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症，例如用于镇痛的药物组合物，其包含所述的萜内酯类化合物。
本发明还提供一种用于解痉且用于预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症的药物组合物，其包含所述的萜内酯类化合物。
本发明还提供一种用于解痉和镇痛的药物组合物，其包含所述的萜内酯类化合物。
根据本发明，所述药物组合物可以包含药用辅料，如载体、赋形剂，例如溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、ph值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂等中的一种、两种或更多种。
根据本发明，所述药物组合物还可以包含用于预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症，例如可用于镇痛的其它化合物中的一种、两种或更多种。
根据本发明，所述药物组合物还可以包含用于解痉的其它化合物中的一种、两种或更多种。
本发明还提供一种预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症，例如用于镇痛的方法，包括给需要治疗的患者施用上述萜内酯类化合物或药物组合物。
本发明还提供一种解痉且预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症，例如解痉和镇痛的方法，包括给需要治疗的患者施用上述萜内酯类化合物或其药物组合物。
根据本发明，与疼痛相关的疾病或病症包括但不限于恐惧、紧张、不安、生理功能紊乱、失眠、休克、死亡。
本发明对于式ii化合物的制备方法没有特别限制。本领域技术人员可以理解，可以通过本领域已知的制备方法(例如提取、分离等)得到本发明的式ii化合物。
例如，所述式ii化合物的制备方法包括如下步骤：
1)提取：取粉碎好的缬草药材，用有机溶剂提取；
2)萃取：将提取液浓缩后用非极性有机溶剂萃取，收集萃取液；
3)分离：将萃取液进行柱色谱分离，并用与该柱色谱相适应的洗脱剂进行梯度洗脱，用薄层色谱法检查得到的洗脱流份，然后合并含有结构如式ⅰi所示的二倍半萜内酯类化合物的洗脱流份，减压浓缩后得到粗品，将粗品用非极性有机溶剂溶解后按前述方法再进行1-3次柱色谱分离，洗脱，将洗脱流份浓缩，干燥得到纯品。
应当理解，本领域技术人员可以根据已知方法，以式ii化合物为原料制备式i范围内的其他化合物，所述已知方法包括但不限于：烷基化、醚化、还原、氧化、卤代、氰基化、氨基化、水解、缩合等中的一种、两种或更多种。
有益效果
迄今为止，现有技术并未发现式i化合物可以用于镇痛。发明人惊讶地发现，本发明式i化合物及其药物组合物可以用于预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症。为此，应当理解，式i化合物在疼痛或与疼痛相关的疾病或病症中发挥作用，可以作为镇痛药物的活性组分，这将为镇痛药物的开发提供更多的选择。并且，式i化合物及其药物组合物还可以用于在解痉的同时用于预防和/或治疗疼痛或与疼痛相关的疾病或病症，例如在解痉的同时用于镇痛。而且，式i化合物的制备方法简单，原料廉价易得，降低了式i化合物制备镇痛药物的成本。并且，由式i化合物制备的药物具有适用人群广泛且安全的特点。
术语定义和说明
除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当属于本申请说明书记载的范围内。
术语“c1-40烷基”应理解为优选表示具有1～40个碳原子的直链或支链饱和一价烃基，优选为c1-10烷基。“c1-10烷基”应理解为优选表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。所述烷基是例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基或1,2-二甲基丁基等或它们的异构体。特别地，所述基团具有1、2、3、4、5、6个碳原子(“c1-6烷基”)，例如甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基，更特别地，所述基团具有1、2或3个碳原子(“c1-3烷基”)，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基。
术语“c1-40烷氧基”应理解为“c1-40烷基-o”，其中c1-40烷基具有上文所述的定义。
具体实施方式
下文将结合具体实施例对本发明做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。
除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
实施例1式ii化合物的制备
1)提取：取缬草药材20kg，粉碎后用50％乙醇(指重量含量为50％的乙醇水溶液)回流提取2次，每次2小时，每次的乙醇用量为120kg。
2)萃取：合并乙醇提取液并减压浓缩至相对密度为1.20的清膏，然后加入正己烷萃取，收集正己烷萃取液。
3)分离：称取200-300目硅胶700g，干法装柱，用石油醚(60-90℃)洗脱平衡，将上述萃取液作为样品溶液过硅胶色谱柱，使样品溶液的有效成分完全吸附于硅胶上。然后先用体积比为99:1的石油醚(60-90℃)与乙酸乙酯混合溶剂洗脱，用薄层色谱法在254nm紫外光下检查得到的洗脱流份，薄层色谱中所使用的展开剂为石油醚:乙酸乙酯(7:1)。当洗脱流份中出现目标物组分时，改用体积比为98:2的石油醚(60-90℃)与乙酸乙酯混合溶剂作为洗脱剂洗脱，至洗脱流份中检测不到目标物组分，合并98:2的洗脱流份，用旋转蒸发仪浓缩，得到粗品；
将粗品用正己烷溶解后按前述方法再进行2次柱色谱分离，洗脱，将洗脱流份浓缩、干燥后得到纯品。
经hplc检测，产物的纯度为98.8％，产量为5.39g，由于缬草药材中结构如式ⅰi所示的二倍半萜内酯类化合物的含量为0.045％，由此计算转移率为：5.39*98.8％/20000*0.045％＝59.2％。
高效液相色谱法的检测条件为：ods24.6*250mm，5μm分析柱；柱温：30℃；流动相：乙腈-去离子水(70:30，v/v)，流速：0.6ml/min，检测波长268nm，进样量20μl。
实施例2式ii化合物的结构鉴定与解析
1)淡黄色油状物。
2)uv(λmeohmax)谱中，269nm，说明有共轭系统存在。
3)ir(νmaxkbr)cm-1：3443.84,2929.24,2871.71,1735.32,1677.59,1622.83,1453.35,1376.10；
以上数据说明此结构中存在甲基、亚甲基、羰基、烯键等官能团。
4)ei-ms(me/z)：291.29，279.25，263.31，234.16，219.04(100％)，204.98，190.95，178.96，173.06，148.92，144.99，130.92，119.11，107.15，104.92，90.99，76.95，64.99，54.94；
maldi-tofms(me/z)：315.1，299.1，273.0，257.0，235.0。
谱中，219.04(100％)，但没有给出分子离子峰。
5)1h-nmr(cdcl3，500mhz)δppm：9.28(s，1h)，6.35(d，j＝9.5hz，1h)，5.35(dd，j＝5.5hz，j＝11.5hz，2h)，4.18(d，j＝12.0hz，1h)，4.15(d，j＝12.0hz，1h)，2.91(m，1h)，2.85(dd，1h)，2.26(m，1h，c14-h)，2.02(t，2h，c12-h)，2.00(s，3h)，1.28(s，3h，c20-ch3)，1.18(s，3h，c11-ch3)，1.19(s，3h，c11-ch3)，1.02(s，3h，c16-ch3)，1.03(s，3h，c16-ch3)；
谱中，9.28ppm处，给出一个h的s峰的信号，为24位醛基h信号；6.35ppm处，给出一个h，偶合常数为9.5hz的d峰信号，为6位烯h信号；5.35ppm处，给出一个h，偶合常数分别为5.5、11.5hz的dd峰信号，为2位烯h信号；4.18ppm处，给出一个h，偶合常数分别为12.0hz的d峰信号，为23位h信号；4.12ppm处，给出一个h，偶合常数分别为12.0hz的d峰信号，为23位h信号；2.88ppm处，给出一个h，m峰信号，为13位h信号；2.84ppm处，给出一个h，偶合常数分别为12.0hz的dd峰信号，为4位h信号；2.02ppm处，给出3个h，s峰信号，为-ococh3基团h信号；1.28ppm处，给出3个h，s峰信号，为20位ch3基团h信号；1.19ppm处，给出3个h，s峰信号，为11位偕ch3基团h信号；1.18ppm处，给出3个h，s峰信号，为11位偕ch3基团h信号；1.03ppm处，给出3个h，s峰信号，为16位偕ch3基团h信号；1.02ppm处，给出3个h，s峰信号，为16位偕ch3基团h信号；
6)13c-nmr(cdcl3，125mhz)δppm：193.80(d，c-24，醛基碳)，170.89(s，-ococh3，中酰基碳)，175.32(s，c-22，-o-c＝o)，155.88(d，c-6，＝ch)，142.64(s，c-5，＝c-)，132.94(s，c-1，＝c-)，130.23(d，c-2，＝ch)，85.59(s，c-20，-o-c-)，60.76(t，c-23，-och2)，48.87(d，c-13，-c-coo)，41.37(d，c-19，-ch-)，40.65(t，c-21，-ch2-)，40.43(d，c-14，-ch-)，37.01(d，c-8，-ch-)，35.03(d，c-10，-ch2)，29.85(q，c20-ch3)，29.05(s，c11)，28.52(q，c11-ch3)，28.38(q，c16-ch3)，27.77(t，c-3，-ch2)，26.52(t，c-7，-ch2)，25.31，24.38(t，c-9，-ch2)，23.94(d，c-17，-ch)，23.75(t，c-18，-ch2)，23.31(t，c-4，-ch2)，21.07(t，c-15，-ch2)，20.96(q，c-23-ococh3)，20.55(t，c-12，-ch2)，15.86(q，c11-ch3)，15.81(q，c16-ch3)；
谱中给出31个信号，其中193.80(d，c-24，醛基碳)，170.89(s，-ococh3，中酰基碳)，175.32(s，c-22，-o-c＝o)信号很弱，为羰基碳信号；155.88(d，c-6，＝ch)为含有h质子信号与142.64(s，c-5，＝c-)为季碳信号，二者为烯键双键上碳信号，且与基团存在共轭系统；132.94(s，c-1，＝c-)为季碳信号与130.23(d，c-2，＝ch)为含有h质子信号，二者为烯键双键上碳信号；85.59(s，c-20，-o-c-)为含氧的饱和季碳信号，60.76(t，c-23，-och2)为含氧的饱和仲碳信号；48.87(d，c-13，-c-coo)为含有吸电子基团的叔碳信号；41.37(d，c-19，-ch-)，40.65(t，c-21，-ch2-)，40.43(d，c-14，-ch-)，37.01(d，c-8，-ch-)，35.03(d，c-10，-ch2)，29.85(q，c20-ch3)为伯碳信号，29.05(s，c11)，28.52(q，c11-ch3)为伯碳信号，28.38(q，c16-ch3)为伯碳信号，27.77(t，c-3，-ch2)，26.52(t，c-7，-ch2)，25.31，24.38(t，c-9，-ch2)，23.94(d，c-17，-ch)，23.75(t，c-18，-ch2)，23.31(t，c-4，-ch2)，21.07(t，c-15，-ch2)，20.96(q，c-23-ococh3)为伯碳信号，20.55(t，c-12，-ch2)，15.86(q，c11-ch3)为伯碳信号，15.81(q，c16-ch3)为伯碳信号。
7)h-hcosy谱中，给出6.35(d，j＝9.5hz，1h，c6-h)与1.48(m，1h)，5.35(dd，j＝5.5hz，j＝11.5hz，1h，c2-h)与2.36、2.00、2.88，2.84(dd，1h，c4-h)与5.35(dd，j＝5.5hz，j＝11.5hz，1h，c2-h)，2.91(m，1h，c13-h)与2.26(m，1h，c14-h)，2.02(t，2h，c12-h)存在相关。
8)hmqc谱中，给出9.28(s，1h)与193.80(d，c-24，醛基碳)，6.35(d，j＝9.5hz，1h)与155.88(d，c-6，＝ch)，5.35(dd，j＝5.5hz，j＝11.5hz，2h)与130.23(d，c-2，＝ch)，4.18(d，j＝12.0hz，1h)和4.12(d，j＝12.0hz，1h)与60.76(t，c-23，-och2)，2.91(m，1h)与48.87(d，c-13，-ch-coo)，2.85(dd，1h)与23.94(d，c-17，-ch)，2.00(s，3h)与20.96(q，c-23-ococh3)，1.02(s，3h)与15.81(q，c16-ch3)，1.03(s，3h)与28.38(q，c16-ch3)，1.18(s，3h)与15.86(q，c11-ch3)，1.19(s，3h)与28.52(q，c11-ch3)，1.28(s，3h)与29.85(q，c20-ch3)等相连接。
9)hmbc谱中，给出9.28(s，1h)与155.88(d，c-6，＝ch)，142.64(s，c-5，＝c-)，23.31(t，c-4，-ch2)相关；6.35(d，j＝9.5hz，1h)与193.80(d，c-24，醛基碳)，142.64(s，c-5，＝c-)，23.31(t，c-4，-ch2)相关。5.35(dd，j＝5.5hz，j＝11.5hz，1h)与60.76(t，c-23，-och2)，35.03(t，c-10，-ch2-)，27.77(t，c-3，-ch2)相关；4.18(d，j＝12.0hz，1h)和4.12(d，j＝12.0hz，1h)与170.89(s，-ococh3，中酰基碳)，130.23(d，c-2，＝ch)，35.03(t，c-10，-ch2-)相关。2.91(m，1h)与26.52(t，c-12，-ch2-)相关；1.28(s，3h，c20-ch3)与41.37(d，c-19，-ch-)，40.65(t，c-21，-ch2-)，85.59(s，c-20，-o-c-)相关。1.18(s，3h，c11-ch3)和1.19(s，3h，c11-ch3)与37.01(d，c-8，-ch-)，20.55(t，c-12，-ch2)，29.05(s，c11)相关。1.02(s，3h，c16-ch3)和1.03(s，3h，c16-ch3)与21.07(t，c-15，-ch2)，23.94(d，c-17，-ch)相关。27.77(t，c-3，-ch2)与5.35(dd，j＝5.5hz，j＝11.5hz，1h)，2.84(dd，1h，c4-h)相关，1.48(m，1h)与142.64(s，c-5，＝c-)，37.01(d，c-8，-ch-)相关。
综合以上分析，得出其分子式为c31h46o5，确认此化合物结构如式ii所示，此结构为2个倍半萜连接在一起，其中一个为变异的倍半萜内酯结构，从生源途径上符合异戊二烯规则。
实施例3式ii化合物的镇痛作用
采用热板法实验，评价式ii化合物对小鼠的镇痛作用。spf级nih小鼠，雌性，首先进行筛选，小鼠禁食12小时，将小鼠放在热板仪上(调整温度在55±0.5℃)，小鼠自放在热板上至出现舔后足所需时间(称)作用为该鼠的痛阈值，痛阈小于5秒或大于30秒及跳跃者弃去不用。取筛选合格小鼠随机分为3组，即空白对照组、式ii化合物剂量组1(0.6mg/kg)、式ii化合物剂量组2(1.2mg/kg)。式ii化合物各剂量组提前给药三天，小鼠给药体积为0.2ml/10g体重。末次给药前禁食12h，给药后测定30min、60min、90min及120min痛阈值，痛阈值超过60秒钟将小鼠取出按60秒计算，以防止小鼠烫伤。结果如下表1所示。
表1式ii化合物对小鼠热板痛阈的影响
与基础痛阈比较，**p＜0.01，与空白对照比较，##p＜0.01，#p＜0.05。
从表1可知，给药式ii化合物后小鼠痛阈值明显提高，表明式ii化合物对热板法引起的小鼠疼痛有显著的镇痛作用。
以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。