1.本发明涉及一种基因药物载体领域，具体涉及一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法。
背景技术：
2.曲妥珠单抗（trastuzumab）是一种人源化的单克隆治疗性抗体，作为一线治疗her2高表达乳腺癌患者。然而，患者对于曲妥珠单抗药物的总体反响应率仍然较低：单药治疗的响应率为15%~30%，与化疗药物联合治疗的响应率为50%~75%。在那些对曲妥珠单抗有响应的患者中，大多数在最初响应后，并在持续治疗后疾病进展和获得耐药性。因此，为her2高表达的患者开发新的治疗方法以提高整体生存率是必要的。
3.为了获得更好的抗肿瘤疗效和更少的副作用，迫切需要提高靶向癌细胞的抗癌药物的递送效率。基于氧化石墨烯(go)的纳米材料在可控运载化疗药物的方面显示出了巨大的潜力。大量研究表明go的毒性与其表面功能化有关。甲壳素已广泛应用于药物载体的表面功能化，以降低载体的毒性，提高药物的传递效率，具有良好的生物相容性和靶向给药能力的高效抗癌药物给药系统正引起越来越多的研究兴趣。
4.为了获得更好的抗肿瘤疗效和更少的副作用，迫切需要提高靶向癌细胞的抗癌药物的递送效率，为此，如何提供一种药物载体来达到这一目的成为了重中之重。
技术实现要素：
5.发明目的：提供一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，以解决背景技术中所涉及的问题。
6.技术方案：一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将石墨加入氢氧化钠溶液，在一定的温度条件反应，得到初次氧化的石墨；步骤2、初次氧化的石墨用水进行清洗，在室温环境下进行干燥处理；步骤3、将定量的初次氧化的石墨加入浓硝酸溶液中，边搅拌边加入过氧化氢，得到混合物；步骤4、将混合物在一定温度下，进行搅拌反应，逐渐加入去离子水，再加入水；步骤5、再加入一定量的过氧化氢，得到溶液，先用稀盐酸溶液清洗，再用去离子水反复洗涤，调节ph至7；步骤6、在一定温度下干燥得到氧化石墨烯；步骤7、对酵母细胞进行活化处理；将活化后酵母细胞接种到到葡萄糖溶液中，振荡培养，进行离心操作，得到无细胞酵母溶液；步骤8、将甲壳素溶解于苯乙酸溶液中，与无细胞酵母溶液混合，用氢氧化钾溶液调节混合溶液的ph值至7；步骤9、向混合溶液加入氧化石墨烯，在磁性强度高搅拌环境下，得到氧化石墨烯
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甲壳素溶液，将氧化石墨烯
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甲壳素溶液进行微波操作，在高温环境下反应，得到甲壳素修
饰的氧化石墨烯材料。
7.优选地，所述步骤1的氢氧化钠溶液浓度为30~50%。
8.优选地，所述步骤3的过氧化氢溶液浓度为25~30%。
9.优选地，所述步骤1的温度为50~80℃。
10.优选地，所述步骤6的温度为40~70℃。
11.优选地，所述步骤7的振荡频率1500~2500 rpm。
12.有益效果：本发明涉及一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，甲壳素与氧化石墨烯相结合，对氧化石墨烯有很好的促进作用。在实验数据表明，抗癌药物从甲壳素
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氧化石墨烯上能进行有效地装载和释放；甲壳素
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氧化石墨对促进抗癌药物发挥作用方面有很好的优势，甲壳素
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氧化石墨烯在与抗癌药物结合时，可增强相关细胞的生长抑制作用，能很大程度上阻断癌细胞的分裂。
具体实施方式
13.在下文的描述中，给出了大量具体的细节以便提供对本发明更为彻底的理解。然而，对于本领域技术人员而言显而易见的是，本发明可以无需一个或多个这些细节而得以实施。在其他的例子中，为了避免与本发明发生混淆，对于本领域公知的一些技术特征未进行描述。
14.实施例1本实施提供了一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将石墨加入浓度为30%氢氧化钠溶液，在60℃条件下反应，得到初次氧化的石墨；步骤2、初次氧化的石墨用水进行清洗，在室温环境下进行干燥处理；步骤3、将定量的初次氧化的石墨加入浓硝酸溶液中，边搅拌边加入浓度为25%的过氧化氢，得到混合物；步骤4、将混合物在一定温度下，进行搅拌反应，逐渐加入去离子水，再加入水；步骤5、再加入一定量的过氧化氢，得到溶液，先用稀盐酸溶液清洗，再用去离子水反复洗涤，调节ph至7；步骤6、在60℃干燥得到氧化石墨烯；步骤7、对酵母细胞进行活化处理；将活化后酵母细胞接种到到葡萄糖溶液中，振荡频率为2000 rpm条件下培养，进行离心操作，得到无细胞酵母溶液；步骤8、将甲壳素溶解于苯乙酸溶液中，与无细胞酵母溶液混合，用氢氧化钾溶液调节混合溶液的ph值至7；步骤9、向混合溶液加入氧化石墨烯，在磁性强度高搅拌环境下，得到氧化石墨烯
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甲壳素溶液，将氧化石墨烯
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甲壳素溶液进行微波操作，在高温环境下反应，得到甲壳素修饰的氧化石墨烯材料。
15.实施例2本实施提供了一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将石墨加入浓度为40%氢氧化钠溶液，在60℃条件下反应，得到初次氧化的石墨；
步骤2、初次氧化的石墨用水进行清洗，在室温环境下进行干燥处理；步骤3、将定量的初次氧化的石墨加入浓硝酸溶液中，边搅拌边加入浓度为25%的过氧化氢，得到混合物；步骤4、将混合物在一定温度下，进行搅拌反应，逐渐加入去离子水，再加入水；步骤5、再加入一定量的过氧化氢，得到溶液，先用稀盐酸溶液清洗，再用去离子水反复洗涤，调节ph至7；步骤6、在60℃干燥得到氧化石墨烯；步骤7、对酵母细胞进行活化处理；将活化后酵母细胞接种到到葡萄糖溶液中，振荡频率为2000 rpm条件下培养，进行离心操作，得到无细胞酵母溶液；步骤8、将甲壳素溶解于苯乙酸溶液中，与无细胞酵母溶液混合，用氢氧化钾溶液调节混合溶液的ph值至7；步骤9、向混合溶液加入氧化石墨烯，在磁性强度高搅拌环境下，得到氧化石墨烯
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甲壳素溶液，将氧化石墨烯
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甲壳素溶液进行微波操作，在高温环境下反应，得到甲壳素修饰的氧化石墨烯材料。
16.实施例3本实施提供了一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将石墨加入浓度为50%氢氧化钠溶液，在60℃条件下反应，得到初次氧化的石墨；步骤2、初次氧化的石墨用水进行清洗，在室温环境下进行干燥处理；步骤3、将定量的初次氧化的石墨加入浓硝酸溶液中，边搅拌边加入浓度为25%的过氧化氢，得到混合物；步骤4、将混合物在一定温度下，进行搅拌反应，逐渐加入去离子水，再加入水；步骤5、再加入一定量的过氧化氢，得到溶液，先用稀盐酸溶液清洗，再用去离子水反复洗涤，调节ph至7；步骤6、在60℃干燥得到氧化石墨烯；步骤7、对酵母细胞进行活化处理；将活化后酵母细胞接种到到葡萄糖溶液中，振荡频率为2000 rpm条件下培养，进行离心操作，得到无细胞酵母溶液；步骤8、将甲壳素溶解于苯乙酸溶液中，与无细胞酵母溶液混合，用氢氧化钾溶液调节混合溶液的ph值至7；步骤9、向混合溶液加入氧化石墨烯，在磁性强度高搅拌环境下，得到氧化石墨烯
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甲壳素溶液，将氧化石墨烯
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甲壳素溶液进行微波操作，在高温环境下反应，得到甲壳素修饰的氧化石墨烯材料。
17.实施例4本实施提供了一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将石墨加入浓度为30%氢氧化钠溶液，在60℃条件下反应，得到初次氧化的石墨；步骤2、初次氧化的石墨用水进行清洗，在室温环境下进行干燥处理；步骤3、将定量的初次氧化的石墨加入浓硝酸溶液中，边搅拌边加入浓度为25%的过氧化氢，得到混合物；
步骤4、将混合物在一定温度下，进行搅拌反应，逐渐加入去离子水，再加入水；步骤5、再加入一定量的过氧化氢，得到溶液，先用稀盐酸溶液清洗，再用去离子水反复洗涤，调节ph至7；步骤6、在60℃干燥得到氧化石墨烯；步骤7、对酵母细胞进行活化处理；将活化后酵母细胞接种到到葡萄糖溶液中，振荡频率为1500 rpm条件下培养，进行离心操作，得到无细胞酵母溶液；步骤8、将甲壳素溶解于苯乙酸溶液中，与无细胞酵母溶液混合，用氢氧化钾溶液调节混合溶液的ph值至7；步骤9、向混合溶液加入氧化石墨烯，在磁性强度高搅拌环境下，得到氧化石墨烯
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甲壳素溶液，将氧化石墨烯
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甲壳素溶液进行微波操作，在高温环境下反应，得到甲壳素修饰的氧化石墨烯材料。
18.实施例5本实施提供了一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将石墨加入浓度为30%氢氧化钠溶液，在60℃条件下反应，得到初次氧化的石墨；步骤2、初次氧化的石墨用水进行清洗，在室温环境下进行干燥处理；步骤3、将定量的初次氧化的石墨加入浓硝酸溶液中，边搅拌边加入浓度为25%的过氧化氢，得到混合物；步骤4、将混合物在一定温度下，进行搅拌反应，逐渐加入去离子水，再加入水；步骤5、再加入一定量的过氧化氢，得到溶液，先用稀盐酸溶液清洗，再用去离子水反复洗涤，调节ph至7；步骤6、在60℃干燥得到氧化石墨烯；步骤7、对酵母细胞进行活化处理；将活化后酵母细胞接种到到葡萄糖溶液中，振荡频率为2500 rpm条件下培养，进行离心操作，得到无细胞酵母溶液；步骤8、将甲壳素溶解于苯乙酸溶液中，与无细胞酵母溶液混合，用氢氧化钾溶液调节混合溶液的ph值至7；步骤9、向混合溶液加入氧化石墨烯，在磁性强度高搅拌环境下，得到氧化石墨烯
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甲壳素溶液，将氧化石墨烯
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甲壳素溶液进行微波操作，在高温环境下反应，得到甲壳素修饰的氧化石墨烯材料。
19.实施例6本实施提供了一种甲壳素修饰的氧化石墨烯的制备方法，包括以下步骤：步骤1、将石墨加入浓度为30%氢氧化钠溶液，在70℃条件下反应，得到初次氧化的石墨；步骤2、初次氧化的石墨用水进行清洗，在室温环境下进行干燥处理；步骤3、将定量的初次氧化的石墨加入浓硝酸溶液中，边搅拌边加入浓度为25%的过氧化氢，得到混合物；步骤4、将混合物在一定温度下，进行搅拌反应，逐渐加入去离子水，再加入水；步骤5、再加入一定量的过氧化氢，得到溶液，先用稀盐酸溶液清洗，再用去离子水反复洗涤，调节ph至7；
步骤6、在60℃干燥得到氧化石墨烯；步骤7、对酵母细胞进行活化处理；将活化后酵母细胞接种到到葡萄糖溶液中，振荡频率为2000 rpm条件下培养，进行离心操作，得到无细胞酵母溶液；步骤8、将甲壳素溶解于苯乙酸溶液中，与无细胞酵母溶液混合，用氢氧化钾溶液调节混合溶液的ph值至7；步骤9、向混合溶液加入氧化石墨烯，在磁性强度高搅拌环境下，得到氧化石墨烯
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甲壳素溶液，将氧化石墨烯
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甲壳素溶液进行微波操作，在高温环境下反应，得到甲壳素修饰的氧化石墨烯材料。
20.另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。