一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜及其制备方法与流程

1.本发明涉及冻干粉面膜领域，特别涉及一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜及其制备方法。


背景技术：

2.皮肤是人体最大的器官，起到有效保护体内组织和器官免受病原微生物等外界物质的侵害，以及避免和修复受到的物理等机械损伤，是保护人体的天然屏障。当皮肤的天然屏障损伤后，导致机体的抵御能力降低，易引起炎症反应如瘙痒、红肿、刺痛等现象。天然屏障中的免疫屏障，指的是分布于皮肤表皮和真皮中的免疫细胞，免疫细胞在机体免疫应答和炎症反应中具有重要的调节作用，其中，巨噬细胞是一种免疫细胞，在受到刺激时，其分泌的具有致炎作用的炎性因子，如白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α等，又进一步地加重了炎症反应，同时形成并发病。因此，皮肤的免疫屏障受损后，免疫细胞进一步受到激活和活化，往往造成面部皮肤受到较长时间的持续性伤害。
3.冻干粉面膜是指将面膜原液、增稠剂、保湿剂等成分，与面膜布融合，使用真空冷冻干燥，制得的一种固态干膜形式的面膜。但经过真空冷冻干燥后，添加的成分通常会因时间和环境等因素发生改变，在使用时使得组分的融合度、稳定度受到影响，甚至影响核心成分的功能活性，进而导致使用效果不如液体敷料面膜、功效不明显等问题。


技术实现要素：

4.鉴于此，本发明的目的在于提出一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜及其制备方法，解决上述问题。
5.本发明的技术方案是这样实现的：
6.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜的制备方法，包括如下步骤：
7.s1、取聚甘油-10油酸酯、羟乙基脲、透明质酸钠和丁二醇，超声分散后，加入贻贝提取物、银耳子实体提取物、积雪草叶提取物和β-葡聚糖，超声分散后，得分散乳液；
8.s2、在分散乳液中加入冻干保护剂a，搅拌，得半流体胶凝液；
9.s3、将甘油、聚甘油-2油酸酯、卵磷脂、1,2-戊二醇和丙烯酸(酯)类共聚物钠混合，均质，得乳化液；
10.s4、在水中加入棕榈酰三肽-8、4-叔丁基环己醇和角鲨烷，搅拌，加入乳化液，超声分散后，边均质边加入半流体胶凝液，得乳化凝液；
11.s5、在乳化凝液中加入冻干保护剂b，得冻干液；
12.所述冻干保护剂a和冻干保护剂b由糖基化细胞外基质、十二烷基磺酸钠、氨基酸和聚乙二醇组成；
13.s6、将冻干液加入至面膜布，进行真空冷冻干燥，制得三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜。
14.进一步的，所述糖基化细胞外基质的制备方法为：取细胞外基质，加入磷酸盐缓冲
液，振荡，低温水合反应后，加入纳米纤维素晶体，水浴反应后，冷却，得糖基化细胞外基质。
15.进一步的，所述糖基化细胞外基质的制备方法为：取细胞外基质，加入磷酸盐缓冲液，振荡，于4-8℃水合反应1-2h，加入纳米纤维素晶体，于50-60℃水浴反应1-2h，冷却，得糖基化细胞外基质。
16.进一步的，所述细胞外基质、磷酸盐缓冲液和纳米纤维素晶体的质量比为1：3-4：0.08-0.1；所述细胞外基质取自哺乳动物的脂肪组织。
17.进一步的，按重量份计，所述冻干保护剂a和冻干保护剂b由糖基化细胞外基质20-28份、十二烷基磺酸钠12-16份、氨基酸9-14份和聚乙二醇4-7份组成；所述氨基酸为脯氨酸、l-色氨酸、肌氨酸、l-酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸中的至少一种；
18.进一步的，所述冻干保护剂a的加入量为分散乳液重量的1-3％；所述冻干保护剂b的加入量为乳化凝液重量的3-5％。
19.进一步的，所述边以10-20mpa、3000-5000r/min均质边加入半流体胶凝液；所述每隔30-60s加入一次半流体胶凝液，共计加入5次。
20.进一步的，按重量份计，8-12份贻贝提取物、4-7份棕榈酰三肽-8、3-6份β-葡聚糖、6-9份银耳子实体提取物、6-9份积雪草叶提取物、7-10份4-叔丁基环己醇、4-9份角鲨烷、4-6份霍霍巴籽油、8-15份聚甘油-10油酸酯、10-14份羟乙基脲、12-19份透明质酸钠、6-8份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3-4份丁二醇、6-8份聚甘油-2油酸酯、3-5份卵磷脂、5-9份1,2-戊二醇、10-17份甘油和30-50份水。
21.进一步的，按重量份计，10份贻贝提取物、5份棕榈酰三肽-8、4份β-葡聚糖、7份银耳子实体提取物、8份积雪草叶提取物、8份4-叔丁基环己醇、6份角鲨烷、5份霍霍巴籽油、12份聚甘油-10油酸酯、12份羟乙基脲、15份透明质酸钠、7份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3份丁二醇、、7份聚甘油-2油酸酯、4份卵磷脂、7份1,2-戊二醇、13份甘油和40份水。
22.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜在改善皮肤炎症、过敏、瘙痒中的应用。
23.与现有技术相比，本发明的有益效果为：
24.本发明针对原料特性，分别制备分散乳液和乳化凝液，再通过分步加入糖基化细胞外基质、十二烷基磺酸钠、氨基酸和聚乙二醇组成的冻干保护剂，分别获得半流体胶凝液和冻干液，可形成层覆层包覆颗粒的三重网络交互体系，获得的三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜，对面部皮肤具有改善渗透性屏障、免疫屏障、微生物屏障和光防护屏障的4d屏障的作用，尤其是免疫屏障，能够调节对分布于皮肤表皮和真皮中的免疫细胞，避免该屏障功能紊乱进而引起皮肤炎症、过敏、炎性瘙痒等症状。
25.本发明针对原料特性，分别制备分散乳液和乳化凝液，再通过分步加入糖基化细胞外基质、十二烷基磺酸钠、氨基酸和聚乙二醇组成的冻干保护剂，分别获得半流体胶凝液和冻干液，可形成层覆层包覆颗粒的三重网络交互体系的冻干粉精华面膜，有利于避免核心组分的损失，提高交互体系的稳定性，且在组分发挥功效时，具有逐层释放的缓释作用，可充分提高和促进三重修护皮肤屏障的冻干粉对分布于皮肤表皮和真皮中的免疫细胞的调节作用，起到舒缓、抗炎、抗敏等持续性作用，且对糠秕马拉色菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的生长具有不同程度的抑制效果，可对皮肤表皮的微生态平衡具有良好的调节作用，有利于维持、改善皮肤的微生态和皮肤健康。
26.此外，本发明采用纳米纤维素晶体制备糖基化细胞外基质，不仅起到对三重网络
的支架作用，其糖基化处理后更易促进组分与免疫细胞的结合程度，促进三重修护皮肤屏障的冻干粉对免疫细胞的调节作用。
具体实施方式
27.为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
28.本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
29.本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
30.实施例1
31.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜，按重量份计，10份贻贝提取物、5份棕榈酰三肽-8、4份β-葡聚糖、7份银耳子实体提取物、8份积雪草叶提取物、8份4-叔丁基环己醇、6份角鲨烷、5份霍霍巴籽油、12份聚甘油-10油酸酯、12份羟乙基脲、15份透明质酸钠、7份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3份丁二醇、7份聚甘油-2油酸酯、4份卵磷脂、7份1,2-戊二醇、13份甘油和40份水；
32.上述三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜的制备方法，包括如下步骤：
33.s1、取聚甘油-10油酸酯、羟乙基脲、透明质酸钠和丁二醇，超声分散后，加入贻贝提取物、银耳子实体提取物、积雪草叶提取物和β-葡聚糖，超声分散后，得分散乳液；
34.s2、在分散乳液中加入分散乳液重量的1％冻干保护剂a，搅拌，得半流体胶凝液；
35.s3、将甘油、聚甘油-2油酸酯、卵磷脂、1,2-戊二醇和丙烯酸(酯)类共聚物钠混合，均质，得乳化液；
36.s4、在水中加入棕榈酰三肽-8、4-叔丁基环己醇、角鲨烷和霍霍巴籽油，搅拌，加入乳化液，超声分散后，边以15mpa、4000r/min均质边加入半流体胶凝液，每隔30-60s加入一次半流体胶凝液，共计加入5次，得乳化凝液；
37.s5、在乳化凝液中加入乳化凝液重量的3％冻干保护剂b，得冻干液；
38.上述冻干保护剂a和冻干保护剂b由糖基化细胞外基质20份、十二烷基磺酸钠12份、氨基酸9份和聚乙二醇4份组成；所述氨基酸为质量比1：1：1的脯氨酸、l-色氨酸和肌氨酸组成；
39.其中，糖基化细胞外基质的制备方法为：质量比为1：3：0.08，取脂肪组织中的细胞外基质，加入磷酸盐缓冲液，振荡，于4-8℃水合反应1h，加入纳米纤维素晶体，于50-60℃水浴反应1h，冷却，得糖基化细胞外基质。
40.s6、将冻干液加入至面膜布，进行真空冷冻干燥，制得三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜。
41.实施例2
42.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜，按重量份计，10份贻贝提取物、5份棕榈酰三肽-8、4份β-葡聚糖、7份银耳子实体提取物、8份积雪草叶提取物、8份4-叔丁基环己醇、6份角鲨烷、5份霍霍巴籽油、12份聚甘油-10油酸酯、12份羟乙基脲、15份透明质酸钠、7份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3份丁二醇、7份聚甘油-2油酸酯、4份卵磷脂、7份1,2-戊二醇、13份甘油和40份水；
43.上述三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜的制备方法，包括如下步骤：
44.s1、取聚甘油-10油酸酯、羟乙基脲、透明质酸钠和丁二醇，超声分散后，加入贻贝
提取物、银耳子实体提取物、积雪草叶提取物和β-葡聚糖，超声分散后，得分散乳液；
45.s2、在分散乳液中加入分散乳液重量的3％冻干保护剂a，搅拌，得半流体胶凝液；
46.s3、将甘油、聚甘油-2油酸酯、卵磷脂、1,2-戊二醇和丙烯酸(酯)类共聚物钠混合，均质，得乳化液；
47.s4、在水中加入棕榈酰三肽-8、4-叔丁基环己醇、角鲨烷和霍霍巴籽油，搅拌，加入乳化液，超声分散后，边以15mpa、4000r/min均质边加入半流体胶凝液，每隔30-60s加入一次半流体胶凝液，共计加入5次，得乳化凝液；
48.s5、在乳化凝液中加入乳化凝液重量的5％冻干保护剂b，得冻干液；
49.上述冻干保护剂a和冻干保护剂b由糖基化细胞外基质28份、十二烷基磺酸钠16份、氨基酸14份和聚乙二醇7份组成；所述氨基酸为为质量比1：1：1：1：1的脯氨酸、l-色氨酸、肌氨酸、l-酪氨酸和苯丙氨酸组成；
50.其中，糖基化细胞外基质的制备方法为：质量比为1：4：0.1，取脂肪组织中的细胞外基质，加入磷酸盐缓冲液，振荡，于4-8℃水合反应2h，加入纳米纤维素晶体，于50-60℃水浴反应2h，冷却，得糖基化细胞外基质。
51.s6、将冻干液加入至面膜布，进行真空冷冻干燥，制得三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜。
52.实施例3
53.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜，按重量份计，10份贻贝提取物、5份棕榈酰三肽-8、4份β-葡聚糖、7份银耳子实体提取物、8份积雪草叶提取物、8份4-叔丁基环己醇、6份角鲨烷、5份霍霍巴籽油、12份聚甘油-10油酸酯、12份羟乙基脲、15份透明质酸钠、7份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3份丁二醇、7份聚甘油-2油酸酯、4份卵磷脂、7份1,2-戊二醇、13份甘油和40份水；
54.上述三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜的制备方法，包括如下步骤：
55.s1、取聚甘油-10油酸酯、羟乙基脲、透明质酸钠和丁二醇，超声分散后，加入贻贝提取物、银耳子实体提取物、积雪草叶提取物和β-葡聚糖，超声分散后，得分散乳液；
56.s2、在分散乳液中加入分散乳液重量的2％冻干保护剂a，搅拌，得半流体胶凝液；
57.s3、将甘油、聚甘油-2油酸酯、卵磷脂、1,2-戊二醇和丙烯酸(酯)类共聚物钠混合，均质，得乳化液；
58.s4、在水中加入棕榈酰三肽-8、4-叔丁基环己醇、角鲨烷和霍霍巴籽油，搅拌，加入乳化液，超声分散后，边以15mpa、4000r/min均质边加入半流体胶凝液，每隔30-60s加入一次半流体胶凝液，共计加入5次，得乳化凝液；
59.s5、在乳化凝液中加入乳化凝液重量的4％冻干保护剂b，得冻干液；
60.上述冻干保护剂a和冻干保护剂b由糖基化细胞外基质24份、十二烷基磺酸钠14份、氨基酸12份和聚乙二醇5份组成；所述氨基酸为为质量比1：1：1：1：1的脯氨酸、l-色氨酸、肌氨酸、l-酪氨酸和苯丙氨酸组成；
61.其中，糖基化细胞外基质的制备方法为：质量比为1：3：0.09，取脂肪组织中的细胞外基质，加入磷酸盐缓冲液，振荡，于4-8℃水合反应2h，加入纳米纤维素晶体，于50-60℃水浴反应2h，冷却，得糖基化细胞外基质。
62.s6、将冻干液加入至面膜布，进行真空冷冻干燥，制得三重修护皮肤屏障的冻干粉
精华面膜。
63.对比例1
64.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜，按重量份计，10份贻贝提取物、5份棕榈酰三肽-8、4份β-葡聚糖、7份银耳子实体提取物、8份积雪草叶提取物、8份4-叔丁基环己醇、6份角鲨烷、5份霍霍巴籽油、12份聚甘油-10油酸酯、12份羟乙基脲、15份透明质酸钠、7份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3份丁二醇、7份聚甘油-2油酸酯、4份卵磷脂、7份1,2-戊二醇、13份甘油和40份水；
65.上述三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜的制备方法，包括如下步骤：
66.s1、取聚甘油-10油酸酯、羟乙基脲、透明质酸钠和丁二醇，超声分散后，加入贻贝提取物、银耳子实体提取物、积雪草叶提取物和β-葡聚糖，超声分散后，得分散乳液；
67.s2、将甘油、聚甘油-2油酸酯、卵磷脂、1,2-戊二醇和丙烯酸(酯)类共聚物钠混合，均质，得乳化液；
68.s3、在水中加入棕榈酰三肽-8、4-叔丁基环己醇、角鲨烷和霍霍巴籽油，搅拌，加入乳化液，超声分散后，边以15mpa、4000r/min均质边加入分散乳液，每隔30-60s加入一次半流体胶凝液，共计加入5次，得乳化凝液；
69.s4、在乳化凝液中加入乳化凝液重量的5％冻干保护剂b，得冻干液；
70.上述冻干保护剂b由糖基化细胞外基质24份、十二烷基磺酸钠14份、氨基酸12份和聚乙二醇5份组成；所述氨基酸为为质量比1：1：1：1：1的脯氨酸、l-色氨酸、肌氨酸、l-酪氨酸和苯丙氨酸组成；
71.其中，糖基化细胞外基质的制备方法为：质量比为1：3：0.09，取脂肪组织中的细胞外基质，加入磷酸盐缓冲液，振荡，于4-8℃水合反应2h，加入纳米纤维素晶体，于50-60℃水浴反应2h，冷却，得糖基化细胞外基质。
72.s5、将冻干液加入至面膜布，进行真空冷冻干燥，制得三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜。
73.对比例2
74.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜，按重量份计，10份贻贝提取物、5份棕榈酰三肽-8、4份β-葡聚糖、7份银耳子实体提取物、8份积雪草叶提取物、8份4-叔丁基环己醇、6份角鲨烷、5份霍霍巴籽油、12份聚甘油-10油酸酯、12份羟乙基脲、15份透明质酸钠、7份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3份丁二醇、7份聚甘油-2油酸酯、4份卵磷脂、7份1,2-戊二醇、13份甘油和40份水；
75.上述三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜的制备方法，包括如下步骤：
76.s1、取聚甘油-10油酸酯、羟乙基脲、透明质酸钠、丁二醇、甘油、聚甘油-2油酸酯、卵磷脂、1,2-戊二醇和丙烯酸(酯)类共聚物钠，混合，超声分散后，加入贻贝提取物、银耳子实体提取物、积雪草叶提取物、β-葡聚糖、棕榈酰三肽-8、4-叔丁基环己醇、角鲨烷、霍霍巴籽油和水，超声分散后，得分散乳液；
77.s2、在分散乳液中加入分散乳液重量的5％冻干保护剂b，搅拌，得冻干液；
78.上述冻干保护剂b由糖基化细胞外基质24份、十二烷基磺酸钠14份、氨基酸12份和聚乙二醇5份组成；所述氨基酸为为质量比1：1：1：1：1的脯氨酸、l-色氨酸、肌氨酸、l-酪氨酸和苯丙氨酸组成；
79.其中，糖基化细胞外基质的制备方法为：质量比为1：3：0.09，取脂肪组织中的细胞外基质，加入磷酸盐缓冲液，振荡，于4-8℃水合反应2h，加入纳米纤维素晶体，于50-60℃水浴反应2h，冷却，得糖基化细胞外基质。
80.s3、将冻干液加入至面膜布，进行真空冷冻干燥，制得三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜。
81.对比例3
82.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜，按重量份计，10份贻贝提取物、5份棕榈酰三肽-8、4份β-葡聚糖、7份银耳子实体提取物、8份积雪草叶提取物、8份4-叔丁基环己醇、6份角鲨烷、5份霍霍巴籽油、12份聚甘油-10油酸酯、12份羟乙基脲、15份透明质酸钠、7份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3份丁二醇、7份聚甘油-2油酸酯、4份卵磷脂、7份1,2-戊二醇、13份甘油和40份水；
83.上述三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜的制备方法，包括如下步骤：
84.s1、取聚甘油-10油酸酯、羟乙基脲、透明质酸钠和丁二醇，超声分散后，加入贻贝提取物、银耳子实体提取物、积雪草叶提取物和β-葡聚糖，超声分散后，得分散乳液；
85.s2、在分散乳液中加入分散乳液重量的2％冻干保护剂a，搅拌，得半流体胶凝液；
86.s3、将甘油、聚甘油-2油酸酯、卵磷脂、1,2-戊二醇和丙烯酸(酯)类共聚物钠混合，均质，得乳化液；
87.s4、在水中加入棕榈酰三肽-8、4-叔丁基环己醇、角鲨烷和霍霍巴籽油，搅拌，加入乳化液，超声分散后，边以15mpa、4000r/min均质边加入半流体胶凝液，每隔30-60s加入一次半流体胶凝液，共计加入5次，得乳化凝液；
88.s5、在乳化凝液中加入乳化凝液重量的4％冻干保护剂b，得冻干液；
89.上述冻干保护剂a和冻干保护剂b由细胞外基质24份、十二烷基磺酸钠14份、氨基酸12份和聚乙二醇5份组成；所述氨基酸为为质量比1：1：1：1：1的脯氨酸、l-色氨酸、肌氨酸、l-酪氨酸和苯丙氨酸组成；
90.s6、将冻干液加入至面膜布，进行真空冷冻干燥，制得三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜。
91.对比例4
92.一种三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜，按重量份计，10份贻贝提取物、5份棕榈酰三肽-8、4份β-葡聚糖、7份银耳子实体提取物、8份积雪草叶提取物、8份4-叔丁基环己醇、6份角鲨烷、5份霍霍巴籽油、12份聚甘油-10油酸酯、12份羟乙基脲、15份透明质酸钠、7份丙烯酸(酯)类共聚物钠、3份丁二醇、7份聚甘油-2油酸酯、4份卵磷脂、7份1,2-戊二醇、13份甘油和40份水；
93.上述三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜的制备方法，包括如下步骤：
94.s1、取聚甘油-10油酸酯、羟乙基脲、透明质酸钠和丁二醇，超声分散后，加入贻贝提取物、银耳子实体提取物、积雪草叶提取物和β-葡聚糖，超声分散后，得分散乳液；
95.s2、将甘油、聚甘油-2油酸酯、卵磷脂、1,2-戊二醇和丙烯酸(酯)类共聚物钠混合，均质，得乳化液；
96.s4、在水中加入棕榈酰三肽-8、4-叔丁基环己醇、角鲨烷和霍霍巴籽油，搅拌，加入乳化液，超声分散后，边以15mpa、4000r/min均质边加入半流体胶凝液，每隔30-60s加入一
次半流体胶凝液，共计加入5次，得乳化凝液；
97.s5、将乳化凝液加入至面膜布，进行真空冷冻干燥，制得三重修护皮肤屏障的冻干粉精华面膜。
98.试验例1-三重修护皮肤屏障的冻干粉对巨噬细胞分泌炎性因子tnf-a、il-6的作用试验
99.(1)巨噬细胞培养液：取小鼠raw264.7巨噬细胞，采用含10％胎牛血清dmem培养基培养至对数生长期，加入含edta的胰酶消化处理，1000rpm离心4min，取沉淀物，加入含10％胎牛血清dmem培养基，吹打均匀，以每孔细胞浓度为1
×
105个/ml，取500μl接种于96孔酶标板中，于37℃、5％co2恒温培养箱培养12h，得巨噬细胞培养液；
100.(2)待测样品：取获得的三重修护皮肤屏障的冻干粉，加入含10％胎牛血清dmem培养基溶解，配制成300μl/ml的待测样品；
101.(3)脂多糖诱导巨噬细胞培养液：吸出酶标板巨噬细胞培养液的培养基，加入500μl待测样品，于37℃、5％co2恒温培养箱培养4h，弃去培养上清液，加入含10％胎牛血清dmem培养基，加入2μl、浓度500μg/ml的脂多糖(lipopolysaccharides，简称lps)，于37℃、5％co2恒温培养箱培养36h，收集上清液，5000rpm离心4min，收集上清液，得脂多糖诱导巨噬细胞培养液；
102.(4)检测：采用白介素-6检测试剂盒检测白细胞介素-6含量，白细胞介素-6(interleukin-6，简称il-6)，采用肿瘤坏死因子-α检测试剂盒检测肿瘤坏死因子-α含量，肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor，简称tnf-α)，以地塞米松作为阳性对照，以未加入待测样品的脂多糖诱导巨噬细胞培养液作为空白对照，试验结果如下表：
103.项目il-6(ng/ml)tnf-α(ng/ml)实施例16.835.1实施例26.333.6实施例35.734.4对比例110.538.5对比例29.038.8对比例311.840.5对比例413.041.2空白对照22.952.0阳性对照4.520.6
104.由上表可知，实施例1～3对巨噬细胞分泌的炎性因子tnf-a和il-6具有不同程度的抑制作用，其中，对炎性因子il-6的抑制作用较好，表明本发明针对原料特性，分别制备分散乳液和乳化凝液，再通过分步加入糖基化细胞外基质、十二烷基磺酸钠、氨基酸和聚乙二醇组成的冻干保护剂，分别获得半流体胶凝液和冻干液，可形成层覆层包覆颗粒的三重网络交互体系，有利于避免核心组分的损失，提高交互体系的稳定性，且在组分发挥功效时，具有逐层释放的缓释作用，可充分提高和促进三重修护皮肤屏障的冻干粉对分布于皮肤表皮和真皮中的免疫细胞的调节作用，起到舒缓、抗炎、抗敏、抗炎性皮肤瘙痒等持续性作用。
105.通过对比实施例3、对比例1和对比例2，对比例1和对比例2对脂多糖诱导巨噬细胞
分泌炎性因子tnf-a和il-6含量较高，表明分步加入冻干保护剂不仅有助于降低组分在工艺制备过程中的损失程度，同时，利用冻干保护剂与组分形成的层覆层包覆颗粒的三重网络交互体系，能够使组分具有逐层释放的缓释作用，起到持续性地对巨噬细胞的调节作用。
106.通过对比实施例3和对比例3可知，采用纳米纤维素晶体制备糖基化细胞外基质，不仅起到对三重网络的支架作用，其糖基化处理后更易促进组分与免疫细胞的结合程度，促进三重修护皮肤屏障的冻干粉对免疫细胞的调节作用。
107.通过对比实施例3和对比例4可知，对比例4对脂多糖诱导巨噬细胞分泌炎性因子tnf-a和il-6含量较高，尤其是tnf-a含量，表明分步加入冻干保护剂，有助于形成层覆层包覆颗粒的三重网络交互体系，进而避免核心组分的损失，提高组分间的稳定性。
108.试验例2-三重修护皮肤屏障的冻干粉对糠秕马拉色菌、表皮葡萄球菌等生长抑制作用
109.将糠秕马拉色菌(malassezia furfur)、表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis)、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)分别培养至96孔酶标板中，加入培养液300μl，于37℃恒温培养箱培养至菌液od值为0.2-0.35，加入三重修护皮肤屏障的冻干粉稀释液30μl，采用分光光度计法，于600nm处测定吸光度值a1，再于37℃恒温培养箱培养8h，于600nm处测定吸光度值a2，以无菌液的培养基作为阴性对照a0，抑制率计算公式：抑制率(％)＝(a
0-a
1-a2)/a0×
100，结果如下表：
[0110][0111]
由上表可知，本发明针对原料特性，分别制备分散乳液和乳化凝液，再通过分步加入糖基化细胞外基质、十二烷基磺酸钠、氨基酸和聚乙二醇组成的冻干保护剂，分别获得半流体胶凝液和冻干液，可形成层覆层包覆颗粒的三重网络交互体系的三重修护皮肤屏障的冻干粉，该冻干粉对糠秕马拉色菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的生长具有不同程度的抑制效果，可对皮肤表皮的微生态平衡具有良好的调节作用，有利于维持、改善皮肤的微生态和皮肤健康。
[0112]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。