一种富含强心苷的马利筋乳汁提取物及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然药物化学领域，特别涉及一种富含强心苷的马利筋乳汁提取物及 其制备方法以及在抗肿瘤药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 据世界卫生组织2013年2月1日发表的调查报告显示，2008年全球死于癌症的人 数达760万，每年约有1300万新增癌症患者，其中近60%为肺癌、胃癌、乳腺癌、前列性癌、 结肠直肠癌、口腔癌、肝癌、宫颈癌及食管癌，是仅次于心血管疾病的第二大死因。目前，癌 症的治疗有手术、放化疗、介入等多种手段，但死亡率依然居高不下。世界各国的专家学者 都在积极研究寻找治疗各种癌症的方法和药物。中药和天然药物对于治疗癌症等疑难病症 有着悠久的历史，近年来，药用植物中的活性成分及其衍生物，如长春新碱、羟基喜树碱、紫 杉醇、多西紫杉醇等已经作为一线抗癌药物被广泛使用，因此从药用植物中寻找高效的抗 癌药物已经成为了国内外抗癌药物研究的重点。
[0003]马利筋（AsclepiascurassavicaL.)为萝摩科（Asclepiadaceae)马利筋属一 年或多年生草本植物。原产于热带美洲地区，喜欢温暖多湿的环境。清代《植物名实图考》 (1848年）就已有记载，传入我国至少已有160多年的历史，如今在我国热带、亚热带地区已 广泛栽种。据《中华本草》傣药篇中记载，味甘，性凉，有小毒，主要功效为调经止血，清火退 热，消肿止痛等。
[0004] 近年来，国内外学者对马利筋的化学成分进行了深入系统的研究，已从其中分离 鉴定数十种强心苷类成分，并进行了体外抗肿瘤细胞增殖实验，证明该类化合物对肺癌 细胞A549、乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231、肝癌细胞H印G2以及前列腺癌细胞DU145 都有很强的抗肿瘤活性（Chemical&PharmaceuticalBulletin，1991，39, 2709;Journal ofnaturalproducts,2005, 68, 1494；MedicinalChemistryLetters,2009, 19, 1956 ； Organic&biomolecularchemistry, 2014，D01:10. 1039/010B01545B.)，但这些研究均是 分离马利筋全草中的单体化合物，之后再进行活性筛选。马利筋全草中的强心留较多，单 一化合物的含量较低（分离收率均低于1 %，Organic&biomolecularchemistry，2014， D01:10. 1039/C40B01545B.)，因此，从马利筋全草中分离单体化合物再开发成抗肿瘤药物 较为费时费力。并且，这些单体化合物无选择性，对多种肿瘤细胞的抑制活性相似。
[0005] 马利筋也有其它方面的用途。中国发明专利（公开号101603209)公开了"一种纺 纱用马利筋纤维棉条及其加工方法和设备"涉及纺纱用马利筋纤维棉条及其加工方法和设 备；另一发明专利申请（公开号104082347A)公开了"一种具有杀虫作用的植物提取物"涉 及一种效果显著、环境友好的新型植物源杀虫剂，该杀虫剂系以马利筋干燥全草为原料，用 乙醇加热回流提取制得。这些文献均是以马利筋为研究对象，但是未涉及马利筋提取物在 抗肿瘤药物中的应用。
【发明内容】
[0006] 为了克服现有技术中的缺点和不足，本发明的首要目的在于提供一种富含强心苷 的马利筋乳汁提取物的制备方法。该制备方法以马利筋的乳汁为原料。通过对马利筋各组 织部位化学成分的研究发现，乳汁中所含的强心苷不仅种类特别丰富，含量也非常大，几乎 是叶中强心苷含量的一百倍。并且，乳汁中的总的强心苷对肿瘤细胞的毒性高，而对正常细 胞的毒性低。从马利筋乳汁中可以获得高效低毒的抗肿瘤活性物质。
[0007] 本发明的另一目的在于提供由上述制备方法得到的富含强心苷的马利筋乳汁提 取物。
[0008] 本发明的再一目的在于提供上述富含强心苷的马利筋乳汁提取物在抗肿瘤药物 中的应用。
[0009] 本发明的目的通过下述技术方案实现：
[0010] 一种富含强心苷的马利筋乳汁提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
[0011] (1)将马利筋的乳汁用水稀释，得到稀释液；向稀释液中加入有机溶剂进行萃取， 收集萃取后的有机层；再向剩下的水层中加入有机溶剂进行萃取，再次收集有机层，如此循 环萃取2?4次，弃去水层，将有机层合并，得到马利筋乳汁的强心苷提取液；
[0012] (2)将马利筋乳汁的强心苷提取液进行减压浓缩至恒重，得到白色浆状物，即为富 含强心苷的马利筋乳汁提取物。
[0013] 步骤（1)中所述有机溶剂为乙酸乙酯或正丁醇；所述马利筋的乳汁用水稀释中水 的用量为乳汁体积的5?10倍。
[0014] 步骤（1)中所述有机溶剂每次加入量为乳汁体积的3?5倍
[0015] 步骤⑵中所述减压浓缩的温度为30?50°C。
[0016] 所述富含强心苷的马利筋乳汁提取物中含有化合物l(calotropin)，化合物 2(voruscharin)以及化合物3(uscharin);所述化合物1在所述提取物中的质量百分含量 为31?33%，所述化合物2在所述提取物中的质量百分含量为29?31%，所述化合物3 在所述提取物中的质量百分含量为9?10%。
[0017] 化合物1的结构式如下所示：
[0018]
【主权项】
1. 一种富含强心苷的马利筋乳汁提取物的制备方法，其特征在于：具体包括以下步 骤： (1) 将马利筋的乳汁用水稀释，得到稀释液；向稀释液中加入有机溶剂进行萃取，收集 萃取后的有机层；再向剩下的水层中加入有机溶剂进行萃取，再次收集有机层，如此循环萃 取2?4次，弃去水层，将有机层合并，得到马利筋乳汁的强心苷提取液； (2) 将马利筋乳汁的强心苷提取液进行减压浓缩至恒重，得到白色浆状物，即为富含强 心苷的马利筋乳汁提取物。
2. 根据权利要求1所述富含强心苷的马利筋乳汁提取物的制备方法，其特征在于：步 骤（1)中所述有机溶剂为乙酸乙酯或正丁醇。
3. 根据权利要求1所述富含强心苷的马利筋乳汁提取物的制备方法，其特征在于：步 骤（1)中所述马利筋的乳汁用水稀释中水的用量为乳汁体积的5?10倍。
4. 根据权利要求1所述富含强心苷的马利筋乳汁提取物的制备方法，其特征在于：步 骤（1)中所述有机溶剂每次加入量为乳汁体积的3?5倍。
5. 根据权利要求1所述富含强心苷的马利筋乳汁提取物的制备方法，其特征在于：步 骤（2)中所述减压浓缩的温度为30?50°C。
6. 根据权利要求1所述富含强心苷的马利筋乳汁提取物的制备方法，其特征在于：所 述富含强心苷的马利筋乳汁提取物中含有化合物1，化合物2以及化合物3 ; 所述化合物1的结构式为：
化合物2的结构式为：
化合物3的结构式为：
7. 根据权利要求6所述富含强心苷的马利筋乳汁提取物的制备方法，其特征在于：所 述化合物1在所述提取物中的质量百分含量为31?33%，所述化合物2在所述提取物中的 质量百分含量为29?31%，所述化合物3在所述提取物中的质量百分含量为9?10%。
8. -种富含强心苷的马利筋乳汁提取物通过权利要求1所述的制备方法制备得到。
9. 根据权利要求8所述富含强心苷的马利筋乳汁提取物的应用，其特征在于：所述富 含强心苷的马利筋乳汁提取物在抗肿瘤药物中的应用。
【专利摘要】本发明属于天然药物化学领域，公开了一种富含强心苷的马利筋乳汁提取物及其制备方法与应用。所述提取物的制备方法为：(1)将马利筋的乳汁用水稀释，得到稀释液；向稀释液中加入有机溶剂进行萃取，收集萃取后的有机层；再向剩下的水层中加入有机溶剂进行萃取，再次收集有机层，如此循环萃取2～4次，弃去水层，将有机层合并，得到马利筋乳汁的强心苷提取液；(2)将马利筋乳汁的强心苷提取液进行减压浓缩至恒重，得到富含强心苷的马利筋乳汁提取物。本发明的富含强心苷的马利筋乳汁提取物具有良好的抗肿瘤活性，对正常细胞的毒性低；该提取物中强心苷的种类多，含量丰富。本发明的制备方法简单、成本低、提取率高且抗肿瘤的选择性高。
【IPC分类】A61K31-585, A61K36-27, A61P35-00
【公开号】CN104523792
【申请号】CN201410824396
【发明人】江仁望, 张容容, 谭亚芳, 田海妍, 朱自荣
【申请人】暨南大学
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月24日