专利名称：：白前苷b在制备抗糖尿病药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及白前苷B的一种新用途，具体地说是白前苷B在制备抗糖尿病药物中的应用。
背景技术：
：糖尿病(diabetesmellitus)是当今最常见的慢性疾病之一，其中2型糖尿病(TypeIIdiabetesmellitus，又叫非月夷岛素依赖型4唐尿病，non-insulin画dependeiitdiabetesmellitus,NIDDM)占糖尿病患者的90%以上。糖尿病在发达国家以及发展中国家均是一个日益严重的问题，它造成了严重而代价巨大的后果，包括失明，心脏病及肾病等。据估计，从2000年到2050年，全世界糖尿病患者的数目将增加165%。根据国际糖尿病联盟的统计，目前中国有4.3%的人口患有糖尿病，在未来20年内患者的数目将突石皮5000万。糖尿病是现代疾病中的第二杀手，它对人体的危害仅次于癌症，严重威胁着人类的健康，而且现在的糖尿病有扩大化和年轻化的倾向，如何防治糖尿病已成为目前医药界重点关注的一大课题。目前，普遍认为糖尿病的发病机制主要有两种(1)因胰岛I3细胞死亡或功能减退而引起的胰岛素分泌不足；(2)胰岛素抵抗，是指胰岛素执行其正常生物作用的效应不足，表现为外周组织尤其是肌肉、脂肪组织对葡萄糖的利用障碍，即对胰岛素不敏感，从而不能高效地摄取体液中的多余的葡萄糖。大多数患者能通过药物治疗，外加控制饮食和坚持适量运动来保持血糖水平的稳定。目前市面上推广使用的降糖药物，其作用机制主要(l)刺激胰岛P-细胞分泌胰岛素；(2)降低肠道对葡萄糖吸收；(3)抑制肝糖产生；和(4)增强周缘组织对胰岛素敏感性。目前尚没有报道称白前苷B具有降血糖的活性。
发明内容本发明的目的是为现有制备抗糖尿病药物的
技术领域：
提供一种新途径，提供白前香B在制备抗糖尿病药物中的应用。白前香B(VincetoxicosideB,Quercetin-7國(3-D画rhamnose)为槲皮素布t生4勿，白前苷B的分子式为C^H2()On，结构式如式I:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>(I)本发明的技术方案是白前苷B的应用，具体是应用于制备抗糖尿病药物。所述抗糖尿病药物可以制备成目前适于人用的药物制剂，如片剂、胶嚢剂、颗粒剂、注射剂等。本发明的有益效果是1)本发明为目前抗糖尿病药物提供了一种全新的选择和思路，拓宽了抗糖尿病药物的选择领域，也为该
技术领域：
的发展作出了贡献；2)本发明的白前普B的应用被证明有显著的抗糖尿病效果；3)本发明选用的是天然药物的提取物，是具有明确化学结构的天然药物，用于制药时可量化投料，有利用于制备现代剂型。最重要的是本发明对白前苷B进行实验动物的降血糖实验，在持续灌胃脂肪乳使大鼠产生胰岛素抵抗的基础上，应用小剂量链脲佐菌素损伤胰岛P细胞，造成大鼠血糖升高，所造动物模型与2型糖尿病类似。实验性2型糖尿病大鼠给予白前苷B治疗后，白前苷B高、中和低剂量组的血糖值与模型组血糖值比较，均有显著性差异(PO.01),白前苷B高、中和低剂量组给药前后的血糖值比较，也具有显著性差异(PO.Ol)，说明白前苷B对实验性2型糖尿病有良好的降血糖作用。同时，本发明还考察了白前苷B对链脲佐菌素致胰岛P细胞凋亡的保护作用。实验证明，白前苷B可促进正常的NIT胰岛P细胞增殖，在最高浓度的白前苷B(100uM)作用24h后，NIT胰岛|3细胞的活性与正常组相比较，提高了30%左右。并且对8mM的链脲佐菌素引起的NIT胰岛P细胞凋亡具有明显的保护作用，给药组的细胞活性与模型组相比较有较大的提高(PO.01),且量效关系明显。具体实施方式以下通过具体的实施例进一步说明本发明的技术方案。实施例1白前苷B对实验性2型糖尿病大鼠的影响1动物分组健康Wistar大鼠(SPF级)，雄性，体重180-220g(由南方医科大学实验动物中心提供)，自由饮水进食，随机分为正常对照组和造模组，造模组按如下方法建立模型，造模成功后再将模型组动物随机分为模型对照组、阳性药物格列齐特组、白前苷B高中低组，按下表连续给药l周。给药时间和剂量见表l:表1白前苷B药效实验动物分组组别动物数(只)给药量(mg/kgBW)正常对照组12才莫型7于照纟且12阳性药物组1235.5低剂量组120.16中剂量组120.5高剂量组121.52大鼠模型制备正常组大鼠每天灌胃蒸馏水，高脂组大鼠每天早晚灌胃自制脂肪乳(1ml/100gBW)。连续灌胃脂肪乳2周后，动物禁食不禁水24h，空白对照组10只尾静脉注射生理盐水，其余大鼠均尾静脉注射30mg/kgBW链脲佐菌素(以下简写为STZ)溶液(临用前配制)。给药48h后，禁食不禁水12h,每隔3小时眼球后静脉丛取血，按照血糖测定试剂盒操作测定空腹血糖值，连续测定3次，空腹血糖值^16.7mmol/L的为造模成功大鼠。3血糖的测定末次给药后，动物禁食不禁水12h，眼球后静脉丛取血，按照试剂盒的方法分别测定血糖值。采用SPSS13.0统计软件，分析并比较各组血糖值的变化54白前苦B对实验性2型糖尿病大鼠血糖的影响实验结果见表2，/人表2可知，注射STZ后，大鼠血糖上升，72h后空腹血糖值216.7mmol/L，说明糖尿病模型成功。给药后，阳性药物组，白前苷3高、中和低剂量组的血糖值与模型组血糖值比较，均有显著性差异(PO.Ol)。各组给药前血糖和给药后血糖的T4企验显示，阳性药物组，白前苷B高、中和低剂量组给药前后的血糖值比较，具有显著性差异(PO.Ol)。以上结果表明，白前苷B能够降低实验性2型糖尿病大鼠的血糖。表2实验结果组别动物数(只)给药前血糖值给药后血糖值正常对照组105.25±0.275.27±0.30模型对照组931.02±2.233U6士2.46阳性药物组931.33±2.4218.74±2.34"AA低剂量组831.94±2.2423.69±2.23''AA中剂量组1032.96±1.9319.68±2.69',AA高剂量组935.37±2.5519.88士3.06',AA'PO.05vs模型组''PO.01vs模型组P〈0.05vs同组给药前AAP<0.01vs同组给药前实施例2白前苷B对链脲佐菌素致胰岛P细胞凋亡的保护作用1实—睑方法链脲佐菌素是经典的致糖尿病药物，其存在亚硝基基团，可产生胰岛P细胞毒性物质NO。NO参与许多自由基级联式反应，诱导胰岛P细胞凋亡，降低细胞代谢和胰岛素分泌。NIT-1是建立在非肥胖转基因小鼠上的一种胰岛P细胞，在降糖药物筛选中被广泛应用。本实验用链脲佐菌素作用于NIT-L1胰岛|3细胞，可引NIT-L1胰岛(3细胞损伤，其病变机理与I型糖尿病相似。取生长良好的对数期NIT-L1胰岛(3细胞接种于96孔板中，24h贴壁后，分成10组，空白组、白前苷B(3uM)、白前苷B(10uM)、白前苷B(30uM)、白前苷B(100uM)、才莫型对照组(STZ8mM),以及白前苷B(3uM)+STZ、白前苷B(10uM)+STZ、白前苷B(30uM)+STZ、白前苷B(100uM)+STZ，药物作用24h后，用MTT法测定NIT-L1细胞的活性每孔加入MTT溶液20ia1,继续培养4h，弃上清，每孔加入DMSO150ju61，振荡10min,用酶标仪492nm波长^r测各孔吸光度。2实验结果实验结果见表3和表4:表3不同浓度白前苷B对正常NIT-L1胰岛细胞生长的影响-1(n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>PO.05vs空白组，"PO.01vs空白组，**PO細vs空白组表4不同浓度白前苷B对STZ损伤NIT-L1胰岛细胞生长的影响-1(n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>PO.05vs正常组，**P<0.01vs正常组，"*P<0.001vs正常组△PO.05vs模型组，"PO.01vs模型组，AAAP<0.001vs模型组实验结果显示，白前苷B能显著提高正常NIT-LI胰岛|3细胞的细胞活性(表3)，显示白前苦B对胰岛细胞生长具有促进作用，且量效关系明显。在最高浓度的白前苷B(100uM)作用24h后，胰岛细胞的活性与正常组相比较，提高了30%左右。利用浓度为8mM的链脲佐菌素STZ诱导NIT-L1胰岛P细胞凋亡，再观察不同浓度的白前苷B对STZ致胰岛细胞损伤的保护作用。发现在白前苷B作用24后，给药组的细胞活性与模型组相比较有较大的提高(表4),且量效关系明显。权利要求1.白前苷B在制备抗糖尿病药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述抗糖尿病药物是片剂、胶嚢剂、颗粒剂或注射剂。全文摘要本发明公开了一种白前苷B在制备抗糖尿病药物中的应用。本发明为目前抗糖尿病药物提供了一种全新的选择和思路，拓宽了抗糖尿病药物的选择领域，也为该
技术领域：
的发展作出了贡献；本发明的白前苷B的应用被证明有显著的抗糖尿病效果；本发明选用的是天然药物的提取物，是具有明确化学结构的天然药物，用于制药时可量化投料，用于制备现代剂型。文档编号A61P3/00GK101502529SQ20091003764公开日2009年8月12日申请日期2009年3月6日优先权日2009年3月6日发明者丁林伟,忠吴,维彭,李沛波,王永刚,苏薇薇申请人:中山大学