酯3%，丙二醇1%，透明质酸钠0. 05%， 防腐剂1%，其余为去离子水。
[0088] 所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞；
[0089] 甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至80°C，均质乳化；
[0090] 降温至室温后，加入乳酸、干细胞提取物，搅拌均匀后真空脱气。
[0091] 其中，所述的干细胞提取物制备方法为：按照重量比例I : I : 1 : 2将苹果干细 胞、番茄干细胞，葡萄干细胞和维生素 C混合；
[0092] 常规方法体外培养并收集培养物；
[0093] 收集上清液中分子量相遇5000Da的成份，进行冷冻干燥，其中，冷冻干燥的方法 如下：〇摄氏度5-10分钟，-10摄氏度10-20分钟，-20摄氏度2-3小时，然后-35摄氏度保 存超过5小时，进行冷冻干燥，这是本发明的一个发明点经过了这个方法，可以最大限度保 持细胞活性物质，对最终产品的效果具有非常好的促进作用。
[0094] 合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质。
[0095] 其中，所述的天然植物混合液的制备方法为：将生姜、薄荷、老鹳草（HERBA ERODII/HERBA GERANII)按重量份I : I : 1混合后（优选混合前将全部组份干燥到含水 量为1-3% )，分别用机械绞碎，压榨出汁液，残渣加入到乙醇水溶液中，搅拌2小时后，过滤 去残渣，滤液和汁液混合得到提取液；乙醇水溶液为乙醇与水体积比为0.5 : 1混合制的； 残渣与乙醇水溶液的重量比为1 : 1。因为此天然植物混合成份具有消毒、提味的作用，使 得本产品在不加入防腐剂的前提下，也可以拥有更长时间保质期，因为本发明产品的营养 异常丰富，所以加入这个组份也是在工业上非常有用的。
[0096] 实施例8
[0097] 干细胞精华素，由以下原料按照质量比例混合组成，干细胞提取物30%，玻璃酸二 甲基硅烷醇酯复合物重量份5 %，天然植物混合液5 %，甘油5 %，乳酸0. 5 %，海藻糖1 %，维 生素 A醋酸酯0. 3 %，维生素 E醋酸酯0. 2 %，4 '，6，7-三羟基异黄酮0. 2 %，二氧化钛0. 6 %， 黄原胶0. 015%，三乙醇胺0. 025%，肉豆蔻酸异丙酯3%，丙二醇1%，透明质酸钠0. 05%， 防腐剂1%，其余为去离子水。
[0098] 所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞；
[0099] 甘油、海藻糖、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至80°C，均质乳化；
[0100] 降温至室温后，加入乳酸、干细胞提取物，搅拌均匀后真空脱气。
[0101] 其中，所述的干细胞提取物制备方法为：采集羊的脐带血加入抗凝剂，保持在4°C 的温度，用生理盐水稀释，羊脐带血和生理盐水体积比为1 : 1;
[0102] 将稀释后的羊脐带血加入到胎盘活性抽提液中，稀释的羊脐带血与胎盘活性抽提 液的体积比为1 : 1，再加入质量比为6%明胶溶液，明胶溶液与胎盘活性抽提液的体积比 为0.3 : 1.进行梯度离心分离，获取液相交界面细胞悬液；
[0103] 细胞悬液用磷酸盐缓冲液进行洗涤两次得到干细胞；
[0104] 洗涤后的干细胞放入1640培养基中测定活性，活性大于95%即合格；
[0105] 采用超声波破碎法，利用超声波振荡器发射9千周声波处理9分钟。
[0106] 其中，所述的天然植物混合液的制备方法为：将生姜、薄荷、老鹳草（HERBA ERODII/HERBA GERANII)按重量份I : I : 1混合后（优选混合前将全部组份干燥到含水 量为2% )，分别用机械绞碎，压榨出汁液，残渣加入到乙醇水溶液中，搅拌2小时后，过滤去 残渣，滤液和汁液混合得到提取液；乙醇水溶液为乙醇与水体积比为0. 65 : 1混合制的； 残渣与乙醇水溶液的重量比为1 : 1。因为此天然植物混合成份具有消毒、提味的作用，使 得本产品在不加入防腐剂的前提下，也可以拥有更长时间保质期，因为本发明产品的营养 异常丰富，所以加入这个组份也是在工业上非常有用的。
[0107] 效果检测
[0108] 通过人体试用试验说明本发明通过的胎盘干细胞精华素抗衰老的效果：选用实施 例所制得的干细胞精华素。
[0109] 试验对象选择：男女各一半，27-65岁每十岁为一年龄段，分为四个年龄段，每个 年龄段各男女一名，身体健康，无皮肤病和过敏史。
[0110] 试验人数：160人，每20人一组，为年龄段接近和性别相同的人群。
[0111] 评价指标：眼角、眼下皮肤弹性，水合度、透皮失水、皱纹、毛孔、皮肤光滑度。
[0112] 测试区域：面部，包括眼角、眼下、脸颊区域。
[0113] 测试周期：使用前和使用14天后。
[0114] 皮肤弹性测试：皮肤弹性也是判断皮肤老化的重要标志之一，测试部位选在眼部。 由于眼部皮肤最薄，没有皮脂分泌，而且眼部运动频繁，较面部其它部位易衰老，因此测试 眼下。由于眼角也容易产生皱纹，眼角也为主要检测部位。使用MPA580弹性测试仪，在眼 角和眼下皮肤处施一恒定负压，通过测试皮肤的回复形变的大小考察使用化妆品后皮肤弹 性的变化，评价化妆品的抗衰老功效。
[0115] 弹性的测定指数为R2, R2 = (e(a)-e(a+b)/e(a):即无负压时皮肤的回弹量和有 负压时的最大拉伸量之比，比值越接近于1，说明皮肤弹性越好。通过前后测试对比可见，皮 肤弹性都具有较明显的改善。
[0116] 表1皮肤弹性测试表
[0117]
【主权项】
1. 干细胞精华素，其特征在于：包括以下原料按照重量份比例混合：干细胞提取物 28-32 %，甘油3-7 %，乳酸0. 2-0. 8 %，海藻糖0. 7-1. 3 %，维生素 A醋酸酯0. 2-0. 5 %，维 生素 E醋酸酯0. 1-0. 3%，4'，6, 7-三羟基异黄酮0. 1-0. 3%，二氧化钛0. 5-0. 7%，黄原胶 0. 01-0. 02%，三乙醇胺0. 02-0. 03%，肉豆蔻酸异丙酯2-4%，丙二醇0. 8-1%，透明质酸钠 0. 02-0. 07%，防腐剂0. 8-1. 2%，其余为去离子水； 甘油、海藻糖、维生素 A醋酸酯、维生素 E醋酸酯、4'，6, 7-三羟基异黄酮、透明质酸钠、 黄原胶、三乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、丙二醇、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至 75-80 °C，均质乳化； 降温至室温后，加入乳酸、氧化钛、干细胞提取物，搅拌均匀后真空脱气。
2. 根据权利要求1所述的干细胞精华素，其特征在于：包括以下原料按照重量份比例 混合，干细胞提取物30 %，甘油5 %，乳酸0. 5 %，海藻糖1 %，维生素 A醋酸酯0. 3 %，维生 素 E醋酸酯0. 2%，4'，6, 7-三羟基异黄酮0. 2%，二氧化钛0. 6%，黄原胶0. 015%，三乙醇 胺0. 025%，肉豆蔻酸异丙酯3%，丙二醇1 %，透明质酸钠0. 05%，防腐剂1 %，其余为去离 子水。
3. 根据权利要求1所述的干细胞精华素，其特征在于：原料中还优选包括玻璃酸二甲 基硅烷醇酯复合物重量份2-5%。
4. 根据权利要求3所述的干细胞精华素，其特征在于：更优选地，包括玻璃酸二甲基硅 烷醇酯复合物重量份3%。
5. 根据权利要求1所述的干细胞精华素，其特征在于：所述的干细胞提取物优选为羊 脐带血干细胞提取物或者植物干细胞提取物。
6. 根据权利要求5所述的干细胞精华素，其特征在于：所述的羊脐带血干细胞提取物 制备方法为：采集羊的脐带血加入抗凝剂，保持在4°C的温度，用生理盐水稀释，羊脐带血 和生理盐水体积比为1-1. 2 : 1 ; 将稀释后的羊脐带血加入到胎盘活性抽提液中，稀释的羊脐带血与胎盘活性抽提液的 体积比为0. 8-1. 2 : 1，再加入质量比为3% -6%明胶溶液，明胶溶液与胎盘活性抽提液的 体积比为0.3-0. 5 : 1.进行梯度离心分离，获取液相交界面细胞悬液； 细胞悬液用磷酸盐缓冲液进行洗涤两次得到干细胞； 洗涤后的干细胞放入1640培养基中测定活性，活性大于95%即合格； 合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质或采用超声波 破碎法，利用超声波振荡器发射9?10千周声波处理3-9分钟。
7. 用如权利要求1-6中任意一项所述方法得到的产品。
【专利摘要】本发明涉及一种抗衰老的护肤品，具体为干细胞精华素及其制备方法，包括以下原料按照重量份比例混合：干细胞提取物28-32％，甘油3-7％，乳酸0.2-0.8％，海藻糖0.7-1.3％，维生素A醋酸酯0.2-0.5％，维生素E醋酸酯0.1-0.3％，4’，6，7-三羟基异黄酮0.1-0.3％，二氧化钛0.5-0.7％，黄原胶0.01-0.02％，三乙醇胺0.02-0.03％，肉豆蔻酸异丙酯2-4％，丙二醇0.8-1％，透明质酸钠0.02-0.07％，防腐剂0.8-1.2％，其余为去离子水；所述的干细胞提取物为羊脐带血干细胞提取物；本发明提供的干细胞精华素，通过表皮吸收后，深入到真皮层和皮下组织，全面激活皮肤内干细胞分化，快速地更新替换衰老的细胞，从而增加胶原分泌，改善皮肤弹性；促进蛋白的合成活性化，增强皮肤柔软度；刺激肌层产生成纤维细胞及肌肤蛋白质，增加肌肤紧致度及其弹性。
【IPC分类】A61K8-97, A61K8-98, A61Q19-08, A61Q19-00
【公开号】CN104546639
【申请号】CN201410771341
【发明人】黄宗堂, 李秀云, 周正春
【申请人】黄宗堂, 李秀云, 周正春
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月12日