轴突变性的调节的制作方法
【专利说明】轴突变性的调节
[0001] 本申请是申请日为2009年10月22日、发明名称为"轴突变性的调节"的中国专 利申请200980151522. 9 (国际申请号PCT/US2009/061733)的分案申请。 发明领域
[0002] 本发明一般涉及神经病症和神经系统损伤的治疗。本发明尤其涉及特定靶蛋白和 过程的调节剂在抑制神经元和轴突变性的方法中的用途。
[0003] 发明背景
[0004] 神经元或轴突变性在神经系统的正确发育中起关键作用，并且是许多神经变性疾 病的标志，所述神经变性疾病包括例如，肌萎缩性侧索硬化（ALS)、阿尔茨海默氏病、和帕金 森氏病，以及脑和脊髓的挫伤。这些疾病和损伤对患者和看护者具有破坏性，并还产生极大 的经济负担，目前仅在美国年度费用就超过几千亿美元。用于这些疾病和状况最近的治疗 是不足够的。增加这些疾病产生的问题紧急性的是这样的事实，许多此类疾病与年龄相关， 因此它们的发病率随人口统计学改变而快速升高。极其需要开发有效的方法来治疗神经变 性疾病和神经系统损伤。
[0005] 发明概述
[0006] 本发明提供用于抑制神经元或其部分（例如，神经元细胞体、轴突，或树突）变性 的方法。所述方法包括向神经元或其部分施用这样的试剂，其调节：（i)神经元或其部分中 靶蛋白的活性或表达，或（ii)神经元或其部分中的过程。
[0007] 可在本发明方法中靶向的蛋白质的实例包括携带二元亮氨酸拉链的激酶（DLK)、 糖原合酶激酶3β (GSK3i3)、p38促分裂原活化蛋白激酶（P38MAPK)、β-联蛋白、转录因子 4(TCF4)、表皮生长因子受体（EGFR)、磷酸肌醇3-激酶（ΡΙ3Κ)、细胞周期蛋白依赖性激酶 5 (cdk5)、腺苷酸环化酶、c-Jun N-末端激酶（JNK)、BCL2-结合的X蛋白（Bax)、Ih通道、钙 /钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶（CaMKK)、G-蛋白、G-蛋白偶联受体、转录因子4(TCF4)，或 β -联蛋白，而可靶向的过程的实例是转录和蛋白质合成。
[0008] 神经元或其部分可由选自以下的神经元组成或可以在选自以下的神经元内：小脑 颗粒神经元、背根神经节神经元、皮层神经元、交感神经元，和海马神经元。
[0009] 试剂可以是例如，靶蛋白或过程的抑制剂。此外，所述试剂例如可以选自抗体、多 肽、肽、肽体（peptibodies)、核酸分子、短的干扰RNAs(siRNAs)、多核苷酸、适体、小分子， 和多糖。在抗体的情况下，抗体可以是单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体、人抗体，或抗体 片段（例如，？^? &13、？&13'或？祕'）2片段）。在小分子的情况下，所述试剂例如可以选自 MG132、SB 415286、GSK3P 抑制剂 I、GSK3P 抑制剂 VII、GSK3P 抑制剂 VIII、GSK3@ 抑 制剂 XII、氯化锂、SB 202190、SB 239063、SB 239069、SB 203580、SB 203580HC1、AG 556、 AG 555、AG 494、PD 168393、Tyrphostin B44、Tyrphostin B42 (AG 490)、LY 294022、茴香 霉素、放线菌酮、Roscovitine、毛喉素 、NKH 477、放线菌素 D、SP600125、Bax通道阻断剂、 ZD7288、ST0-609、bortezomid、双硫仑、pamapimod、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼二甲苯 磺酸盐、盐酸去甲金霉素、硫酸庆大霉素、硫酸新霉素、硫酸巴龙霉素，及其药学上可接受的 盐。
[0010] 神经元或其部分可存在于受试者，如人受试者中。所述受试者可以例如患有或处 于发生疾病或状况的风险中，所述疾病或状况选自（i)神经系统的病症，（ii)在神经系统 外具有主要效果的疾病、状况或治疗继发的神经系统状况，（iii)由物理、机械，或化学损伤 引起的神经系统损伤，（iv)疼痛，（V)眼相关的神经变性，（vi)记忆丧失，和（vii)精神疾 病。
[0011] 神经系统病症的实例包括肌萎缩性侧索硬化（ALS)、三叉神经痛、舌咽神经痛、贝 耳氏麻痹、重症肌无力、肌肉萎缩症、进行性肌萎缩、原发性侧索硬化（PLS)、假性延髓性麻 搏、进行性延髓性麻搏、脊髓性肌萎缩、遗传性肌萎缩、椎间盘综合征（invertebrate disk syndrome)、颈椎病、网状组织病症、胸廓出口破坏综合征、外周神经病、吓啉症、阿尔茨海默 氏病、亨延顿舞蹈病、帕金森病、帕金森氏阳性病、多系统萎缩、进行性核上性麻痹、皮质基 底变性、卢伊体痴呆、额颞痴呆、脱髓鞘病、吉-巴综合征、多发性硬化、沙-马-图病、朊病 毒病、克-雅病、吉斯特曼-斯召斯列综合征（GSS)、致命性家族性失眠症（FFI)、牛海绵样 脑病、神经鞘磷脂沉积病、癫痫、和艾滋病痴呆综合征。
[0012] 疼痛的实例包括慢性痛、纤维肌痛、脊柱痛、腕管综合征、来自癌症、关节炎、坐骨 神经痛、头痛的疼痛、来自手术、肌肉痉挛、背痛、内脏痛的疼痛、来自损伤、牙痛、神经痛的 疼痛，如神经源性疼痛或神经性疼痛、神经炎症或损伤、带状疱疹、突出盘、韧带撕裂和糖尿 病。
[0013] 继在神经系统外具有主要效果的疾病、状况或治疗之后的神经系统状况的实例包 括由糖尿病、癌症、艾滋病、肝炎、肾功能异常、科罗拉多蜱传热、白喉、HIV感染、麻风病、莱 姆病、结节性多动脉炎、类风湿性关节炎、肉状瘤病、舍格伦综合征、梅毒、系统性红斑狼疮 和淀粉状蛋白病引起的外周神经病或神经痛。
[0014] 由物理、机械，或化学损伤引起的神经系统损伤的实例包括由暴露在毒性化合物、 重金属、工业溶剂、药物、化学治疗剂、氨苯砜、HIV药物、降低胆固醇的药物、心脏或血压药 物、和甲硝唑引起的神经损伤。额外的实例包括烧伤、创伤、手术、意外伤害、局部缺血、对冷 温度的延长暴露、中风、颅内出血、和大脑出血。
[0015] 精神疾病的实例包括精神分裂症、妄想性障碍、情感分裂性精神障碍、精神分裂症 (schizopheniform)、分享性精神障碍、精神病、偏执型人格障碍、精神分裂样人格障碍、边 缘型人格障碍、反社会性人格障碍、自恋性人格障碍、强制性障碍、妄想、痴呆、心境障碍、双 相性精神障碍、抑郁、应激障碍、惊恐性障碍、广场恐怖症、社会恐怖、创伤后应激障碍、焦虑 障碍、和冲动控制障碍。
[0016] 眼相关神经变性的实例包括青光眼、网络状营养不良、色素性视网膜炎、年龄相关 性黄斑变性（AMD)、与湿或干AMD相关的光受体变性、其它视网膜变性、视神经脉络膜小疣、 视神经病、和视神经炎。青光眼的实例包括原发性青光眼、低眼压性青光眼、原发性闭角型 青光眼、急性闭角型青光眼、慢性闭角型青光眼、间歇性闭角型青光眼、慢性开角闭角型青 光眼、色素性青光眼、脱落性青光眼、发育性青光眼、继发性青光眼、晶状体溶解性青光眼、 眼内出血继发的青光眼、外伤性青光眼、新生血管性青光眼、药物诱导的青光眼、中毒青光 目艮、和眼内瘤相关性青光眼、视网膜脱离、眼睛的严重化学灼伤、和虹膜萎缩。
[0017] 根据本发明的方法将神经元或其部分与试剂接触可包括向受试者施用包括所述 试剂的药物组合物。例如可通过静脉内输注；通过静脉内、腹膜内、大脑内、肌内、眼内、动脉 内或损伤内途径注射；或通过局部或眼睛应用进行施用。此外，本发明的方法可包括向受试 者施用一种或多种额外的药物试剂。
[0018] 在其它实例中，根据本发明的方法治疗的神经元或其部分是离体或体外的（例如 神经移植物或神经移植体）。
[0019] 本发明还包括鉴定试剂的方法，所述试剂用于抑制神经元或其部分的变性。这些 方法包括使神经元或其部分与候选试剂在轴突或神经元变性的测定中（例如，抗神经生长 因子（NGF)抗体、血清剥夺/KCl减少、和/或鱼藤酮治疗）进行接触。在候选试剂存在 下对神经元或其部分相对于对照的减少变性的检测表明，对用于抑制神经元或其部分变 性的试剂的鉴定。所述候选试剂例如可以选自抗体、多肽、肽、肽体、核酸分子、短的干扰 RNAs(SiRNAs)、多核苷酸、适体、小分子，和多糖。
[0020] 本发明还包括药物组合物和试剂盒，其含有如上述用于抑制神经元或其部分变性 的一种或多种试剂。所述药物组合物和试剂盒可包括例如选自以下的一种或多种试剂： MG132、SB 415286、GSK3P 抑制剂 I、GSK3P 抑制剂 VII、GSK3P 抑制剂 VIII、GSK3P 抑制 剂 XII、氯化锂、SB 202190、SB 239063、SB 239069、SB 203580、SB 203580HC1、AG 556、AG 555、AG 494、PD168393、Tyrphostin B44、Tyrphostin B42 (AG 490)、LY 294022、茴香霉素、 放线菌酮、Roscovitine、毛喉素 、NKH 477、放线菌素 D、SP600125、Bax通道阻断剂、ZD7288、 ST0-609、bortezomid、双硫仑、pamapimod、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼二甲苯磺酸盐、盐 酸去甲金霉素、硫酸庆大霉素、硫酸新霉素、硫酸巴龙霉素，及其药学上可接受的盐。所述药 物组合物和药盒可任选地包括一种或多种药学上可接受的赋形剂。此外，所述药物组合物 和药盒可任选地包括在抑制神经元或其部分变性的方法中使用所述药物组合物和药盒的 说明书。
[0021 ] 在本发明的任何方法、组合物和药盒中，所述试剂可以是DLK信号转导抑制剂（例 如，靶向DLK的siRNA分子，其包含例如想要的
[0022] GCACTGAATTGGACAACTCTT(SEQ ID N0:1),
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