或浓度的增加而降低。对于在低频率的聚合物溶液，弹性应力 松弛和粘应应力占主导，因此，在频率低于f。时，G〃大于G'。相反，对于凝胶，不会存在G' 和G"交叉，在频带中G'大于G"。除非另有说明，测试频率为0.04-7HZ。对于粘弹性材料的 物理性能和测定这些性质的方法的综述，参见，例如"Polymers as Rheology Modifiers"， 由 Schulz 和 Glass 编辑，ACS Symposium Series 462, 1991 ; "An Introduction to Rheology, "H. A. Barnes, J. F. Hutton 和 K. Walters, Elsevier, 1989 ;和 Bohlin Rheometer Application Notes MRK544-01，MRK556-01和 MRK573-01。
[0023] 术语"HA"、"透明质酸盐"、"透明质烷"可交换使用，除非另有说明，指任意HA，而 不考虑来源（细菌发酵的或动物衍生的）、分子量、其物理形式（例如凝胶或液体），或存在 或不存在化学改性（例如交联的或其它衍生化的）或制备方法。
[0024] 方案
[0025] 本发明提供粘弹性补充方法和相关的方法。根据本发明，粘弹性补充方法包括在 3、 4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26 周内单次关节 内注射给药粘弹性补充剂，给药量足以在注射后提供达4、5或6个月的治疗效果。在某些 实施方案中，大体积单次注射的治疗效果基本上与在治疗过程内三次注射给药（每次为大 体积的1/3)获得的相同。在某些实施方案中，单次注射方案提供在注射后关节痛减少直至 4、 5或6个月。
[0026] 治疗效果可以通过任意适宜的方法（参见，例如，Altman等（1996)Osteoarth. Cart.，4:217-243)评价。例如，治疗效果可通过测定关节痛的减少来评价。关节痛的程 度可以根据五点Likert分类（例如没有、轻度、中度、严重、非常严重），或者按如在实施 例中描述的IOOmrn直观类比尺（scale) (VAS)分类。其它适宜的疼痛指数包括健康状态 评估调查表（HAQ) (Fries 等（1980)Arthritis Rheumatol. ,23:137-145)和关节炎影响 检测尺（Arthritis Impact Measurement Scale)(AIMS)(Meenan 等（I98O)Arthritis Rheumatol.，23:146-154。
[0027] 治疗效果也可通过测定功能缺损程度的改善来评价。功能缺损可使用分离有 效的多维指数（segregated validated multidimensional index) (SMI)，例如用于髋 部和膝 OA 的 Western Ontario 和 McMaster's 大学（WOMACtm)OA 指数（Bellamy 等人 (1988) J. Rheumatol. 34:1833-1840 ;也参见实施例）；或聚集的多维指数（aggregated multidimensional index) (AMI)，例如用于髋部或膝的痛-函数指数（Algo-Functional Index) (AFI) (Lequesne 等人（1987) Scand. J. Rheumatol. Suppl.，65:85-89)。
[0028] 治疗效果也可由患者或医师通过总体状况评估来评价。总体状况可利用Likert 或VAS尺来评价，例如在实施例中描述的。
[0029] 治疗效果的其它标记可包括关节检查（参见，如Theiler等人（1994)Osteoarth. Cart.，2:1-24)，基于性能测定（performance based measures)(参见，例如 Rejeski 等人 (1995) Osteoarth. Cart.，3:157-168)等。
[0030] 在某些实施方案中，给药进入膝关节的粘弹性补充剂的量为6±2ml或更高，例如 4、4. 25、4. 5、4. 75、5、5. 25、5. 5、5. 75、6、6. 25、6. 5、6. 75、7、7. 25、7. 5、7. 75、8ml 或更尚。
[0031] 粘弾件补充剂
[0032] 在本发明的方法中使用的基于HA的粘弹性补充剂具有下述任一项、任两项或所 有的特征：
[0033] (i)粘弹性补充剂具有小于3周的存留半衰期。
[0034] (ii)粘弹性补充剂包含小于20mg/ml HA ;
[0035] (iii)在粘弹性补充剂中5% (w/w)或更高的HA为凝胶形式。
[0036] 在一个说明性的实施方案中，在本发明中使用的粘弹性补充剂为 Synvisc?。Synvisc?包含两种形式的8±2mg/ml HA :可溶性形式，hylanA (平均MW 6, OOOkDa)和在生理学可接受的溶液中的水合凝胶形式，hylan B。按HA的重量计，在 Synvisc?中的hylan A/hylan B比例为9: ItlHylan A为通过用少量醛共价交联来化学改 性的水溶性透明质烷，所述醛典型地为甲醛，而hylan B为用二乙烯砜进一步交联的hylan A。Hylan液体为水合的hylan A，用少量交联进行的改性形式的透明质烧，所述交联增加了 其平均分子量和增加了其粘弹性性质。Hylan凝胶为hylan B的水合形式，其为使用二乙烯 砜作为双功能的交联剂通过将hylan A交联成连续聚合的网状结构制备的。
[0037] 通常，在本发明提供的方案中使用的粘弹性补充剂包括具有关节内存留半衰期短 于22天例如21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4和3天的基于拟的粘 弹性补充剂。在某些实施方案中，粘弹性补充剂的存留半衰期大于2、3、4、5、6或7天。
[0038] 在本发明中使用的粘弹性补充剂可进一步表征为：其中它们包含小于20mg/ml HA，例如在 1-15、1-10、1-5、5-15、5-10、10-15、6-10 和 7-9mg/ml 的范围。在给定组合物中 的HA的含量可通过任意适宜的方法测定，如例如在实施例中描述的方法。
[0039] 在本发明中使用的粘弹性补充剂组合物可进一步表征为：其中在粘弹性补充剂 中至少10 %重量的HA为凝胶形式。例如，在某些实施方案中，粘弹性补充剂包含至少 5 %UO %> 15 %,20 %,25 %,30 %,35 %,40 %,50 %,55 %,60 %,65 %,70 %,75 %,80 %, 85 %、90 %、95 %、99 %或更高的HA凝胶。在某些实施方案中，粘弹性补充剂包含10-90 %、 10-75 %、10-50 %、10-40 %、10-25 % HA凝胶。在某些实施方案中，在粘弹性补充剂中HA凝 胶 /HA 液体的比例包含 1:50-10: l(w/w)，例如 1:50、1:25、1:15、1:10、1:9、1:8、1:7、1:6、 1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1 和 10:1〇
[0040] 在本发明的方法中使用的粘弹性补充剂可进一步在液体相中包含水溶性的HA， 其具有 HA 的 MW 为 500-20, OOOkDa，例如 500-1，000 ;500-1，500、500-3, 000 ;500-5, 000 ; 500-7,000 ；500-10,000 ；50〇-15,000 ；1,000-1,500 ；1,000-3,000 ；1,000-5,000 ； 1，000-7, 000 ;1，000-10, 000 ;1，000-15, 000 ;5, 000-10, 000 ;和 10, 000-15, OOOkDa。
[0041] HA可以是动物源的，例如来源于公鸡冠或脐带或非动物源，例如细菌发酵的。细菌 发酵的HA可以如在例如Cooney等人（1999) Biotechnol. Prog.，15:898-910中描述的。细 菌发酵的HA也可以为市售的（例如Shiseido, Japan ;Sigma_Aldrich，USA)。
[0042] HA可以是衍生的（例如交联的或另外改性的或稳定的）或非衍生的。交联剂的实 例包括醛、环氧化物、polyaziril、缩水甘油醚（例如1，4-丁二醇二缩水甘油醚）和二乙烯 砜。
[0043] 在本发明的方法中使用的粘弹性补充剂的特定实例包括Adant?、Arthrease?、 Arthrum?、Fermathron?、Goon?、HyalartTM/Hyalgan?、Hy-GAG?、Hya-ject?、Hyalubrix?、 NeoVisc?、SupartzTM/ArtzTM、Synvisc.?、Orthovisc?、Ostenil?、Sinovial?、Suplasyn? 和 Synochrom?、Viscorneal?(参见，例如 Physicians' Desk Reference?, 2004)。其它适 宜在本发明的方法中使用的产物包括在美国专利Nos. 5, 143, 724 ;4, 713, 448 ;5, 099, 013 ; 5, 399, 351 ;6, 521，223 ;5, 827, 937 ;美国专利申请No. 60/533, 429中描述的粘弹性补充剂。
[0044] 包括hylan A和hylan B的hylans和粘弹性补充剂的制备为在例如美国专利 Nos. 5, 143, 724 ;4, 713, 448 ;5, 099, 013 和 5, 399, 351 中描述的。
[0045] 在某些实施方案中，粘弹性补充剂不包括Durolane?和/或其它的具有存留半衰 期比 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、 45、46、47、48、49或50天长的粘弹性补充剂。
[0046] 粘弹性补充剂也可包含另外的活性或无活性化合物，包括例如非留体抗炎药 (NSAIDs),例如 Ibuprofen?、Diclofenac?和 Piroxicam ?;麻醉剂例如，Lidocaine ? 和Bupivacaine?;