茜草的制备亚硝酸盐清除剂用图
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药领域，特别涉及亚硝酸盐清除剂。
【背景技术】
[0002]亚硝胺(NAS)是人和动物的强致癌物质，一般可通过食品和饮品进入机体内。近些年来胃癌，食道癌，鼻咽癌和膀胱癌等癌症疾病频发，其与机体内的N-亚硝基化合物的含量有直接性关系。其中N-二甲基亚硝胺(NDMA)是食品中最常见的致癌的NAS。二甲胺(DMA)和亚硝酸盐是致癌NDMA的直接前体。而二甲胺，二乙胺，三甲胺和三甲胺氧化物多存在于鱼类和海洋生物中如鱿鱼，章鱼等。在食物中，亚硝酸盐几乎存在于所有腌制品、肉类制品、泡菜及采收以后的蔬菜中，亚硝酸盐也常被用作食物防腐剂，亚硝酸盐每天都会随着粮食、蔬菜、鱼、肉制品、蛋奶的摄入而进入人体。蔬菜中亚硝酸盐的平均含量大约为4mg/kg，肉类约为3mg/kg，蛋类约5 mg/kg，豆粉的平均含量可达10 mg/kg，咸菜中的平均含量也在7 mg/kg以上。另外，主要来源于蔬菜和蔬菜制品的硝酸盐，其本身基本是无毒的，但硝酸盐摄入量的5%会在口腔中转化为更毒的亚硝酸盐，而亚硝酸盐可与仲胺在胃的酸性条件下生成NAS。
[0003]此外，摄入过量亚硝酸盐引起的中毒叫做亚硝酸盐中毒，又叫紫绀症、肠原性青紫病等。本病发病急，病情发展快，主要表现为全身乏力、心慌、气短、腹胀、口唇及指甲青紫；严重者出现痉挛、抽搐、血压下降、大小便失禁及昏迷等，若抢救不及时，则易造成死亡。
[0004]目前也有许多调节内源性N-亚硝基化合物的化学催化剂，如硫氰酸盐等；也有抑制剂，如抗坏血酸(Vc )，稀丙基硫化合物等。对天然药用植物的清除亚硝酸盐或其前体的作用也有一定的报道，如果某种药用植物具有清除亚硝酸盐或其前体的作用，那么这种植物就可能具有防癌的作用。研宄表明，金樱子、肉苁蓉、淫羊藿、山楂、桑白皮、洋葱、苹果等均对亚硝酸盐具有清除作用。但上述物质清除亚硝酸盐，或不能克服高温失效的问题，或清除作用不强，或用量偏大。
[0005]我们在对长白山地区的近百种植物活性筛选过程中，发现了几种具有较强亚硝酸盐清除活性的植物，其中就包括茜草。
[0006]稱{Rubia cordifolia L.)，茜草科多年生攀缘草本植物。紫红色或橙红色，圆柱形，肉质，茎粗糙，嫩枝四棱，有倒生的小刺。叶轮生，单叶；叶片卵形或卵状披针形，叶面粗糙，叶柄长短不等，花淡黄色，聚伞花序；果实成熟，黑色或紫黑色。产于东北、华北、西北和四川(北部)及西藏(昌都地区)等地，朝鲜、日本、俄斯等远东地区也有分布。茜草的化学成分以蒽醌及其苷类化合物为主，还含有萘醌类、萜类、己肽类、多糖类等其他化学成分。其具有止血、镇咳祛痰、抗菌等生物活性。目前关于茜草在亚硝酸盐清除方面的研宄为空白。
【发明内容】
[0007]基于以上原因，本发明的目的之一是提供茜草或其提取物的新应用，该应用解决了亚硝酸盐的清除问题。
[0008]为了实现上述目的，本发明的技术方案为:
茜草或茜草提取物用于清除亚硝酸盐的应用。
[0009]本发明的目的之二是提供茜草或其提取物的另一种应用，该应用为治疗由亚硝酸盐引起的疾病提供一种新的食品、保健食品、药品。
[0010]为了实现上述目的，本发明的技术方案为:
茜草或茜草提取物用于制备清除亚硝酸盐的食品、保健食品、药品的应用。
[0011]所述的茜草或茜草提取物用于制备清除亚硝酸盐的食品、保健食品、药品的应用，可以通过下述方法制备:
1.取茜草，干燥，粉碎，制成片剂、胶囊剂、散剂、丸剂等药学上可以接受的剂型。
[0012]2.取茜草，以水或乙醇等溶剂提取，浓缩至干，得到茜草提取物，以该提取物为原料，附加药学可以接受的辅料，制成片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、软胶囊等药学上可以接受的剂型。
[0013]3.取茜草，以水、乙醇等提取，浓缩至干，得到茜草提取物，以该提取物为原料制成液体饮料、固体饮料等食品、保健食品可以接受的形式。
【具体实施方式】
[0014]为了更详细的说明本发明，给出下述制备实例。但本发明的范围并不局限于此。
[0015]实施例1:茜草清除亚硝酸盐的应用
1.茜草亚硝酸盐清除剂的制备
收取新鲜茜草，阴干，以75%乙醇超声提取三次，每次30分钟，过滤，合并滤液，蒸干，粉碎，制成硬胶囊制剂。
[0016]2.茜草清除亚硝酸盐活性研宄
2.1材料和方法
2.1.1实验材料
原料:茜草亚硝酸盐清除剂。
[0017]试剂:Vc、对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺、亚硝酸钠、磷酸氢二钠、柠檬酸、乙醇等试剂均为分析纯。
[0018]仪器:电子天平，旋涡混合仪，数控超声波清洗器，自动酶标仪。
[0019]2.1.2实验方法
2.1.2.1供试品溶液的制备
取茜草亚硝酸盐清除剂内容物5 mg,精密称定，加400 μ L磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(pH = 3)，使其全部溶解，其浓度为10 mg.mL—1，备用。
[0020]2.1.2.2亚硝酸根清除实验试剂的配制
a.0.4 %对氨基苯磺酸溶液的制备:准确称取0.4 g对氨基苯磺酸，用20 %盐酸定容至100 mL，混匀，避光保存，待用。
[0021]b.0.2% N-1-萘乙二胺盐酸盐溶液的制备:准确称取0.2 g N-1-萘乙二胺盐酸盐，用蒸馏水定容至100 mL，混匀，避光保存，待用。
[0022]c.NaNO2标准液(50 mg.L ―1)制备:精密准确称取干燥的NaNO2 0.005 g，用蒸馏溶解，定容至100 mL，待用。
[0023]2.1.2.3在体外模拟胃液pH条件下的N02_清除反应
将供试品溶液稀释成5.0,0.5,0.05,0.005,0.0005 mg.mL—1 5个不同的浓度，准确取50 mg.L4的NaNO 2标准液1.0 mL于两支10 mL比色管中，其中一支加入2.0 mL供试品提取液，而另一支则不加；另取一只比色管，仅加入2.0 mL供试品提取液而不加NaNO2标准液；分别向上述三只比色管中加入2.0 mL蒸馏水，用pH 3.0的柠檬酸钠盐酸缓冲液定容至10 mL，置于37°C水浴I h ;取出冷却至室温，准确吸取上述液体1.0 mL加入10 mL比色管中，加入0.4%对氨基苯磺酸2.0 mL，摇勾，并于5 min后加入0.2 % N-1-萘乙二胺盐酸盐1.0 mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀静置15 min后于538 nm波长处测定吸光度。清除率/%=[A0- (Aa - Aa0) ] / A0 * 100
式中Aci为未加供试品溶液体系的吸光度，Aa为加入供试品溶液反应体系的吸光度，Aatl为供试品本底反应体系的吸光度。亚硝酸根清除率用IC5tl表示，IC5tl为对亚硝酸根清除率达到50%时供试品溶液的浓度。
[0024]2.1.2.4维生素C (Vc)对N02_清除作用
将Vc配置成浓度为0.1、0.3、0.6、1、1.5、2 mg.mL—1的溶液，按2.1.2.3项下测定其对N02_的清除率。
[0025]2.1.2.5数据统计分析
实验数据用平均值土标准差表示(n=3)，运用ORIGIN软件计算IC5tl值，IC5tl值越小，表示其清除NO2-的能力越强。
[0026]2.2结果与分析
通过以上实验，测定的茜草亚硝酸盐清除剂内容物对亚硝酸根的清除率I C5tl为0.039±0.005 mg.πι?Λ而相同条件下Vc对亚硝酸根的清除率IC50仅为0.267±0.036mg.mL—1，茜草亚硝酸盐清除剂对亚硝酸根的清除能力是Vc的近7倍。
[0027]2.3 结论
茜草亚硝酸盐清除剂对亚硝酸根具有较强的清除能力，可进一步开发为用于长期吸烟(吸烟促使致癌物质烟草特异性N-亚硝酸盐分泌到胆管)或其它亚硝酸盐高摄入人群，降低其癌症发病率，以及应对亚硝酸盐中毒的食品、保健食品或药品，其对亚硝酸根的清除能力远超Vc。
[0028]实施例2:茜草软胶囊的制备
收取新鲜茜草，阴干，以乙醇超声提取三次，每次30分钟，过滤，合并滤液，蒸干，以大豆油作为溶解超声混悬复溶，制成软胶囊。
[0029]实施例3:茜草袋泡茶的制备
收取新鲜茜草，阴干，粉碎、过40目筛，24目筛筛选，紫外线灯杀菌，机械装袋，包装，喷印日期，塑封，入库。
【主权项】
1.茜草在制备亚硝酸盐清除剂中的用途。
【专利摘要】本发明涉中药领域，特别涉及一种茜草的制备亚硝酸盐清除剂用途。该茜草亚硝酸盐清除剂对亚硝酸根具有较强的清除能力，可进一步开发为用于长期吸烟（吸烟促使致癌物质烟草特异性N-亚硝酸盐分泌到胆管）或其它亚硝酸盐高摄入人群，降低其癌症发病率，以及针对亚硝酸盐中毒的食品、保健食品或药品，其对亚硝酸根的清除能力远超维生素C。
【IPC分类】A23L2-38, A23L2-39, A23L1-30, A61P39-02, A61K36-74, A23L2-52
【公开号】CN104771464
【申请号】CN201510161849
【发明人】赵岩, 郜玉钢, 何忠梅, 王立岩, 祝洪艳, 蔡恩博, 张连学, 杨鹤, 刘双利, 刘学周
【申请人】吉林农业大学
【公开日】2015年7月15日
【申请日】2015年4月8日