一种商陆活性组分的提取工艺及其含量的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种中药的提取方法，特别涉及一种商陆活性组分的提取工艺，此活 性组分具有护肾的功能，可用于猪或鸡的日常预防治疗。
【背景技术】
[0002] 商陆为商陆科植物商陆（Phytolacca acinosaRoxb.)和垂序商陆 (Phy to I accaAmer i canaL.)的干燥根，味苦性寒，有毒，归肺、脾、肾、大肠经。有逐水消肿，通 利二便，解毒散结的功能，主治水肿胀满，二便不利，痈肿，疮毒，为历版《中华人民共和国药 典》收载品种，主产于湖北、河南。现代药理研宄商陆具有利尿作用、祛痰、免疫调节作用、抗 肿瘤作用、抗溃疡、抗炎、抗菌、抗病毒等作用。商陆的化学成分主要含商陆多糖、商陆皂苷 和氨基酸等，药理实验表明商陆多糖具有显著的抑瘤作用和增强免疫作用；商陆中商陆皂 苷类成分具有一定的镇咳化痰、抗肾炎、调节免疫和抗肿瘤的作用，在临床上用于治疗慢性 气管炎等症并取得了良好效果。
【发明内容】
[0003] 针对目前提取商陆的工艺较少，制剂缺乏，为了扩大商陆的应用和更大限度的利 用商陆中的有效成分商陆总皂苷和商陆总多糖，本发明提供一种运用水蒸汽蒸馏提取技 术，解决其中提取过程中遇到的问题，并使商陆总皂苷和商陆总多糖能最大限度的同时被 利用，还提供商陆活性组分作为猪或鸡护肾类药物在日常预防治疗中应用。
[0004] 本发明涉及了一种具有护肾功能的商陆活性组分的提取方法，其特征在于，其提 取方法包括如下步骤：
[0005] 步骤一、取商陆饮片200~300kg，先加入商陆饮片5~8倍质量的纯化水，在室 温下浸泡1~2h，然后滤过；对残渣加入5~8倍质量的甲醇，加热回流1~2h，趁热过滤； 将两次滤液合并得到商陆滤液；
[0006] 步骤二、将步骤一得到的残渣加入8~10倍质量的纯化水，加热煮沸；通过水蒸气 蒸馏提取2~3次，每次1. 5~2h ;滤过，合并提取液得到商陆提取液；
[0007] 步骤三、将步骤一的商陆滤液和步骤二的商陆提取液合并得到混合溶液，在其中 加入硅油10~30L，对混合溶液进行浓缩，浓缩至150~200L ;用高速离心机将浓缩液离 心，静置1~2h，取离心上层液；在下层离心液中加入50~100L热水，再次用高速离心机 离心，静置1~2h，取离心上层液；所述硅油为甲基硅油、乙基硅油、苯基硅油、甲基苯基硅 油、甲基氯苯基硅油、甲基乙氧基硅油、甲基羟基硅油中的至少一种或其混合物。
[0008] 步骤四、合并两种离心上层液，加入苯甲醇15~50L、甲醇10~20L，搅拌均勾；然 后加水制成260~300L，搅匀，静置12~15小时；当测定其相对密度不小于1. 01，pH值在 5. 0~6. 5范围内时，即得商陆活性组分溶液；其中，经过提取后获得的护肾活性组分中多 糖成分质量含量为50%以上，皂苷类成分质量含量为40%以上。
[0009] 本发明涉及了一种商陆活性组分的含量测定方法，其特征在于：包括多糖成分的 含量测定方法和皂苷类成分的含量测定方法；
[0010] 其中多糖成分的含量测定方法包括如下步骤：
[0011] ⑴待测样品溶液的制备：吸取商陆活性组分溶液〇. lrnL，用纯化水稀释至1~ I. 5mL ;加入浓度为4~5%的苯酷1~I. 5mL，摇勾；再加入苯甲醇与碳酸氢钾水溶液的混 合溶液I. 0~I. 2mL，其中苯甲醇与碳酸氢钾水溶液的体积比为55~68:32~45,碳酸氢 钾水溶液的质量浓度为30~45%，混合均匀；加入浓硫酸4~6mL，充分混合均匀；置于沸 水浴中加热30~50min，冷却至室温，得到待测样品溶液；
[0012] (2)测定波长选择：用紫外分光光度计在100-900nm波长范围内对待测样品进行 扫描，测定其吸收曲线，确定商陆多糖的检测波长为490nm ;
[0013] (3)葡萄糖对照品溶液的制备：精密称取葡萄糖对照品2. 49~2. 60mg，用纯化水 溶解，定容至25mL，配制成质量浓度为0. lmg/mL葡萄糖对照品溶液；
[0014] (4)标准曲线的绘制：精密吸取0. lmg/mL的葡萄糖对照品溶液5mL，分别加入纯化 水通过倍比稀释法稀释8~12个浓度，配制成不同浓度的对照品溶液；再吸取不同浓度的 对照品溶液；分别采用紫外分光光度计在490nm波长进行检测，以测得的吸光值为纵坐标， 以相应葡萄糖对照品溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，得标准曲线线性回归方程；
[0015] (5)待测样品溶液的紫外检测：以随行试剂为空白，吸取待测样品溶液，用紫外分 光光度计在490nm波长下检测。
[0016] (6)待测样品溶液浓度的计算：将步骤（5)中测得的吸光值作为测量值，代入标准 曲线线性回归方程，计算出待测样品中商陆多糖的浓度；
[0017] 皂苷类成分的含量测定方法包括如下步骤：
[0018] (1)待测样品溶液的制备：吸取商陆活性组分溶液lmL，置于具塞试管中；加入 0. 5~0. 8mL香草醛的浓硝酸溶液，其中香草醛的浓硝酸溶液的质量浓度为30~50% ;置 60~70°C水浴上充分混匀后加热10~15min，立即用冰水冷却，加入硫酸溶液5ml，摇匀；
[0019] (2)测定波长的选择：用紫外分光光度计在100-900nm波长范围内对待测样品进 行扫描，测定其吸收曲线确定商陆总阜苷的检测波长为469nm。
[0020] (3)商陆皂苷甲对照品溶液的制备：精密称取商陆皂苷甲对照品27. 50mg，用甲醇 定容至25mL，配制成质量浓度为lmg/mL的对照品溶液，备用；
[0021] (4)标准曲线的绘制：精密吸取lmg/mL的商陆皂苷甲对照品溶液5mL，分别加入纯 化水通过倍比稀释法稀释5~8个浓度，配制成不同浓度的对照品溶液；再吸取不同浓度 的待测样品溶液分别采用紫外分光光度计在469nm波长进行检测，以测得的吸光值为纵坐 标，以相应商陆皂苷甲对照品浓度为横坐标，绘制标准曲线，得标准曲线线性回归方程；
[0022] (5)待测样品的紫外检测：以随行试剂为空白，吸取供试品溶液，用紫外分光光度 计在469nm波长下检测；
[0023] (6)待测样品浓度的计算：将步骤（2)中测得的吸光值作为测量值，代入标准曲线 线性回归方程，计算出待测样品中商陆总皂苷的浓度。
[0024] 进一步地，苯甲醇与碳酸氢钾水溶液的体积比为58:35,碳酸氢钾水溶液的质量浓 度为40%。
[0025] 进一步地，制备的商陆活性组分可口服给药。
[0026] 进一步地，硅油为甲基硅油、乙基硅油、苯基硅油中的至少一种或其混合物。
[0027] 本发明的相对现有技术的改进在于：
[0028] 1、提供了一种具有护肾功能的商陆活性组分的提取方法，其通过采用先采用纯化 水浸泡、热甲醇回流、水蒸气蒸馏提取，对商陆活性组分的提取高效、完全；对比现有技术中 甲醇、水、正丁醇等多次浸泡的方式，剩余残渣中本发明中的商陆活性组分含量少于1 %，从 而节约了生产成本。
[0029] 2、根据现有技术中的文献记载，多是实验室中的小试，即量级为g ;尽管为了达到 本发明的提取效果，通过很多次的反复浸泡提取也能实现，但统计发现，该提取次数之多是 工业规模化操作不可行的，将会浪费大量的人力物力，还有浸泡等操作所需的时间成本。
[0030] 3、在混合溶液中加入了硅油，这是本发明根据工业化生产的改进之处；因为为了 对混合溶液快速、有效浓缩，本发明引入了高速离心的方式；然而这种方式会产生大量泡 沫，难以实现上层液的有效提取，因而通过多方实验，发现加入硅油可以有效解决这一