中药混合物加入100mlLB液体培养基的比例配备发酵培养基，121°C灭菌20min后加入15% (w/w)枯草芽孢杆菌发酵，在37°C培养24小时。其中，所述的LB液体培养基指的是:蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，水100ml ； (3)向发酵液中加入8倍量水，小火提取两次，每次1min ； (4)合并提取液，过滤，浓缩滤液至原体积的10%，制得发酵提取液；(5)包装即得成品。
[0027]实施例3
[0028]一种含蛇床子、艾叶和苦参的发酵中药组合物，各原料的重量份数如下:蛇床子23份、艾叶15份、苦参20份、大黄15份、桑白皮15份、槟榔12份制备而成。其制备方法是:(1)按处方量称取各中药，粉碎过60目筛备用；(2)按每80g中药混合物加入100mlLB液体培养基的比例配备发酵培养基，121°C灭菌20min后加入15% (w/w)枯草芽孢杆菌发酵，在37°C培养24小时。其中，所述的LB液体培养基指的是:蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，水100ml ； (3)向发酵液中加入8倍量水，小火提取两次，每次1min ； (4)合并提取液，过滤，浓缩滤液至原体积的10%，制得发酵提取液；(5)包装即得成品。
[0029]临床试验
[0030]实验1:
[0031]武汉一鲫鱼鱼苗池，面积约2亩。5月初放养鲫鱼鱼苗10万尾，10天后在池塘下风处发现10多条已死和将死的鱼苗。病鱼体色变黑，反应迟钝，病鱼吻端至眼球前端皮肤腐烂为乳白色絮状物，病鱼唇似肿胀，张闭失灵，呼吸困难，头朝上尾朝下，漂浮于下风处。隔日死鱼数量急剧增至上百尾。从鱼苗没有跑马症状，加上死鱼有白头白嘴现象，诊断为鱼白头白嘴病。立即使用本发明实施例1所制得的发酵提取液进行治疗。按照100ml发酵提取液:3亩的比例于每日喂食前在液体料台前高浓度泼洒，一日2次，连用3日。用药第2天死鱼明显减少，至第4日，不再有死鱼，病情基本得到控制，大群恢复正常。
[0032]实验I结果证明，使用本发明实施例1所制得的发酵提取液治疗鱼白头白嘴病疗效确切，可有效控制鱼群死亡数量，进而减少疾病所带来的经济损失。
[0033]实验2:
[0034]天津市蓟县某大口鲶鱼苗育种池，面积约3亩，放养大口鲶鱼苗20万尾。2周后发现鱼群患病，初期症状不明显，用小鱼盘子圉起数尾病鱼会发现大口鲶苗嘴部至眼球部有一道轻轻的“白线”。3-5天后，鱼头和嘴部发白，口不能启闭，行动缓慢，不摄食，随后出现大批死亡鱼苗。根据病鱼白头白嘴表症和爆发性死亡等临床特征，遂诊断为鱼白头白嘴病。立即施予本发明实施例1所制得的发酵提取液，按照每100ml发酵提取液:3亩的比例于每日喂食前在液体料台前高浓度泼洒，一日2次，连续使用3日。用药第2天，鱼苗死亡数量减少到12尾，至第3日，不再出现死鱼，病情基本得到控制。
[0035]实验2结果进一步证实了本发明专利实施例1所制得的发酵提取液治疗鱼白头白嘴病有特效，值得在临床做进一步地推广。
[0036]以上所述，仅为本发明的较佳实例，是说明性的而不是限定性的，可按照所限定的范围列举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改，应属本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种含蛇床子、艾叶和苦参的发酵中药组合物，其特征在于，由如下质量份数的原料制备而成:蛇床子18-23份、艾叶15-20份、苦参15-20份、大黄10-15份、桑白皮15-22份、槟榔10-15份。2.根据权利要求1所述的一种含蛇床子、艾叶和苦参的发酵中药组合物，其特征在于，最佳原料的质量份数如下:蛇床子20份、艾叶18份、苦参15份、大黄10份、桑白皮22份、槟榔15份。3.根据权利要求1或2所述的一种含蛇床子、艾叶和苦参的发酵中药组合物，其特征在于:该发酵中药组合物可以制备成发酵提取液。4.一种制备如权利要求3所述的一种含蛇床子、艾叶和苦参的发酵中药组合物的方法，其特征在于，制备方法是:(I)按处方量称取各中药，粉碎过60目筛备用；(2)将中药混合物加入LB液体培养基中，配备发酵培养基，121°C灭菌20分钟后加入10-20% (w/w)枯草芽孢杆菌发酵。其中，所述的LB液体培养基指的是:蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠1gdK100ml ； (3)向发酵液中加入8-10倍量水，小火提取两次，每次5_20min ； (4)合并提取液，过滤，浓缩滤液至原体积的10-50%，制得发酵提取液；(5)包装即得成品。5.根据权利要求4所述的一种含蛇床子、艾叶和苦参的发酵中药组合物的制备方法，其特征在于??每100mlLB液体培养基中加入50_100g中药混合物配备发酵培养基。6.根据权利要求4所述的一种含蛇床子、艾叶和苦参的发酵中药组合物的制备方法，其特征在于:发酵温度为在34-38°C，培养时间为24-48小时。
【专利摘要】本发明公开了一种含蛇床子、艾叶和苦参的发酵中药组合物。它由蛇床子18-23份、艾叶15-20份、苦参15-20份、大黄10-15份、桑白皮15-22份和槟榔10-15份组成。该发酵中药组合物可以制备成发酵提取液，其制备方法是：(1)按处方量称取各中药，粉碎过60目筛备用；(2)按每50-100g中药混合物加入1000mlLB液体培养基的比例配备发酵培养基，121℃灭菌20分钟后加入10-20％(w/w)枯草芽孢杆菌发酵，在34-38℃培养24-48小时。其中，所述的LB液体培养基指的是：蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化钠10g，水1000ml；(3)向发酵液中加入8-10倍量水，小火提取两次，每次5-20min；(4)合并提取液，过滤，浓缩滤液至原体积的10-50％，制得发酵提取液；(5)包装即得成品。
【IPC分类】A61K36/889, A61P31/04
【公开号】CN104940496
【申请号】CN201510317251
【发明人】曲荟芬, 何志霞, 贾庆红, 王郁, 刘强, 赵光伟, 刘毅斌
【申请人】天农大（天津）生物科技有限公司
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月10日