一种止血材料的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种止血材料。
【背景技术】
[0002] 临床实践的统计结果显示受伤或术后无法控制的出血是造成死亡的主要原因，而 可吸收止血材料在各种外科手术中，可以直接减少机体失血从而有效维持血容量，避免全 身凝血药物使用所带来的不良反应，从而减少输血及手术时间；减少术后渗出、降低并发 症，因此可吸收止血材料的应用与研发就受到各国医学界和产业界的高度重视。目前国内 外已上市的可吸收止血材料有纤维蛋白胶、明胶海绵、氧化纤维素、改性淀粉、微纤维胶原、 壳聚糖及藻酸钙纤维等。上述的止血材料虽然能起到一定的止血作用，但在临床应用上仍 然存在一些问题。例如，纤维蛋白胶在临床手术止血中应用较为广泛，但纤维蛋白胶成分 属于血液制品，存在抗原性和病毒性疾病传播的危险，其应用安全性受到一定的质疑，且成 本较高；明胶海绵的创面组织附着力较差，容易破裂和脱落，对于较大的出血其止血效果 欠佳；而微纤维胶原、胶原海绵等也和纤维蛋白胶、明胶一样属于异种动物蛋白制品，存在 免疫原性和病毒传播的危险；氧化纤维素较疏松，被机体吸收快，但可能导致再出血，且其 产生的高酸性环境会通过一种弥漫性化学机理引起神经损伤；壳聚糖、羧甲基壳聚糖、海藻 酸、改性淀粉等属于天然多糖，在生产上存在批次稳定性差、质控困难等问题。因此，开发安 全性更好，止血效果更佳的止血材料势在必行。
【发明内容】
[0003]本发明的目的提供一种止血材料，即一种使用聚谷氨酸钙制备的止血材料，具有 良好的止血性能，不依赖于机体凝血机制，而且具有优良的生物相容性，在体内完全降解吸 收；另外，生产上易于加工、灭菌及质量控制。
[0004]本发明首先提供聚谷氨酸钙在制备止血材料中的应用，
[0005] -种可吸收止血材料，该可吸收止血材料含有聚谷氨酸钙，
[0006] 上述的止血材料中还添加有医用辅料，所述的辅料优选为丙二醇、丙三醇、山梨 醇、甘露醇、木糖醇、聚乙二醇的一种或几种混合；
[0007]本发明另一个方面提供该可吸收止血材料的制备方法，包括如下步骤：
[0008] 1)将聚谷氨酸钙和辅料分散在水中；
[0009] 2)将步骤1)得到的溶液冷冻干燥，再制成膜材料；
[0010] 3)将步骤2)得到的膜材料灭菌后即得到止血材料。
[0011] 上述步骤⑴中，所述的聚谷氨酸钙和水的质量比优选为1%~12% ;
[0012] 上述步骤3)中，所述的灭菌方式优选环氧乙烷或辐照灭菌。
[0013]本发明的可吸收止血材料在手术的术前、术中、术后的止血和促进创面愈合中的 应用。
[0014]本发明采用的基材聚谷氨酸是一种通过微生物发酵合成获得的多聚氨基酸材料， 结构可控、生物可降解、生物相容性良好，且产品成型工艺简单，质量易于控制；其次，产品 的止血过程不受正常凝血机制影响，对使用抗凝剂的病人、血小板和全血细胞低的病人仍 能发挥止血作用；而且聚谷氨酸具有较好的生物黏附性，有利于控制组织的持续性渗血，止 血能力较强。
【附图说明】
[0015] 图1 :本发明制备的聚谷氨酸钙止血材料的扫描电镜（SEM)照片。
【具体实施方式】
[0016] 本发明制备的材料具有强亲水性且为多孔海绵结构，因此与出血创面接触后，能 快速吸收液体溶胀，形成高黏性水胶体，迅速与创面紧密贴附，形成有效的物理封堵，机械 性封闭血管破口和组织创面，达到快速止血的目的；同时，创面血液的有形成分（如血小 板、红细胞、凝血酶和纤维蛋白等）富集，以及材料中Ca 2+离子的释放都会加速内源性凝血 因子的激活，达到辅助止血作用；材料自身在体内降解成氨基酸被人体吸收。
[0017] 本发明所使用的聚谷氨酸钙，其分子化学式为（(：1。11120 6队0&)|11((：51170 3吣"，其中11:111 =0~18;当n:m = 0时，Ca2+与羧基的摩尔比0. 5 ;n:m = 18时，Ca2+与羧基的摩尔比0. 05。
[0018] 下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述。
[0019] 实施例1
[0020] 称取5克聚谷氨酸钙（n:m = 8,即钙离子与聚谷氨酸羧基的摩尔比为0. 1)和1. 5 克丙三醇，充分溶于l〇〇mL去离子水，得到聚谷氨酸钙/丙三醇混合溶液；将聚谷氨酸钙/ 丙三醇混合溶液倒入聚四氟乙烯模具中，-18°C预冷冻24h，然后冷冻干燥24h，得到厚度 3mm的多孔海绵胚料；采用模压将其压至1mm厚的多孔膜，剪裁至3cmX 5cm规格，密封包 装，T射线灭菌，得到白色的单位面积质量为20mg/cm2的多孔止血材料膜，其扫描电镜照片 如图1所示。
[0021] 实施例2
[0022] 称取10克聚谷氨酸钙（n:m = 3,即钙离子与聚谷氨酸羧基的摩尔比0. 2)，2克丙 三醇和3克甘露醇，充分溶于100mL去离子水，得到聚谷氨酸钙/丙三醇/甘露醇混合溶液； 将聚谷氨酸钙/丙三醇/甘露醇混合溶液倒入聚四氟乙烯模具中，-80°C预冷冻24h，然后 冷冻干燥24h，得到厚度2_的多孔海绵胚料；采用模压将其压至0. 8_厚的多孔膜，剪裁 至3cmX5cm规格，密封包装，y射线灭菌，得到白色的单位面积质量为15mg/cm2的多孔止 血材料膜。
[0023] 实施例3
[0024] 称取10克聚谷氨酸钙（n:m = 18,即钙离子与聚谷氨酸羧基的摩尔比0.05)，2克 丙三醇和3克丙二醇，充分溶于100mL去离子水，得到聚谷氨酸钙/丙三醇/丙二醇混合溶 液；将聚谷氨酸钙/丙三醇/丙二醇混合溶液倒入聚四氟乙烯模具中，_8〇°C预冷冻24h，然 后冷冻干燥24h，得到厚度2. 5_的多孔海绵胚料；采用模压将其压至1_厚的多孔膜，剪 裁至3cmX5cm规格，密封包装，y射线灭菌，得到白色的单位面积质量为24mg/cm 2的多孔 止血材料膜。
[0025] 实施例4
[0026] 聚谷氨酸基止血材料膜的止血性能评价试验。依据文献【0.Murakami a, M. Yokoyamab, , H. Nishidac, Y. Tomizawac, H. Kurosawa. A simple hemostasis model for the quantitative evaluation of hydrogel-based local hemostatic biomaterials on tissue surface. Colloids and Surfaces B:Biointerfaces，2008】建立止血创伤动物模 型：大鼠肝脏出血模型，分别评价比较聚谷氨酸基止血材料膜1 (实施例1制备）、聚谷氨酸 基止血材料膜2 (实施例2制备的）和市售可吸收止血膜（对照组）的止血效果。选择SD 大鼠（体重为200 士 20g) 36只，雄雌各半，随机分为3组，每组12只，雌雄各半。3个组分 别为：聚谷氨酸基止血材料膜1 (实施例1制备）、聚谷氨酸基止血材料膜2 (实施例2制备） 和市售可吸收止血膜（对照组）。全部动物均采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，剂量为30mg/ Kg。开腹，吸干肝脏周围的血清和体液，把石蜡膜和称量好的纱布放置在左叶肝脏下面，纱 布用于吸收被刺伤肝脏流出的血液，石蜡膜用于防止滤纸吸收肝脏流出血液以外的体液； 用12号针头（即18G针头）在右小叶肝背面制造创口，深度约5mm(平行扎两针），把止血 材料放置在出血部位，同时开始计时，用手稍微抬起大鼠的上身，使渗出的血液快速流到纱 布上。当没有血液渗出时，并记录止血时间和出血量，结果列于表1。
[0027] 表1 :大鼠肝损伤止血性能评价试验结果
[0028]
[0029] 结果表明：聚谷氨酸基止血材料膜的止血时间和出血量均明显小于对照组，具有 更好的止血效果。
[0030] 实施例5
[0031] 聚谷氨酸基止血材料膜的止血愈创作用评价试验。选择SD大鼠（体重为200 士 20g) 54只，雄雌各半，随机分为3组，每组18只，雌雄各半。3个组分别为：聚谷氨酸基止血 材料膜1 (实施例1制备）、聚谷氨酸基止血材料膜2 (实施例2制备）和市售可吸收止血 膜（对照组）。全部动物均采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，剂量为30mg/Kg。开腹，用手术 剪将大鼠左叶肝肝缘部分切除，形成长1. 5cm、深0. 2cm的创面，建立大鼠肝脏缺损模型。立 即施加材料止血，3分钟后刀口缝合关腹，碘伏消毒，分组饲养，分别于1、2、3周各处死6只 大鼠，观察动物肝损伤创面愈合情况。实施例1组：试验7天，创面愈合50-60%，少量组织 粘连，有少量凝胶状材料；试验14天，创面愈合70-80%，少量组织粘连，材料已完全降解； 试验21天，创面完全愈合，创面少量粘连，材料已完全降解，观察不到材料的痕迹。实施例 2组：试验7天，创面愈合50-60 %，少量组织粘连，有少量凝胶状材料；试验14天，创面愈 合70-80%，少量组织粘连，材料已完全降解；试验21天，创面完全愈合，少量组织粘连，材 料已完全降解，观察不到材料的痕迹。对照组：试验7天，创面愈合30-40%，有明显组织粘 连，可观察到凝胶状材料，未完全降解；试验14天，创面愈合50-60%，有明显组织粘连，可 观察到凝胶状材料，未完全降解；试验21天，创面愈合80-90%，有明显组织间粘连，材料已 完全降解，观察不到材料的痕迹。
[0032] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 聚谷氨酸钙在制备止血材料中的应用。2. -种可吸收止血材料，其特征在于，所述的可吸收止血材料在制备过程中使用了聚 谷氨酸钙。3. -种可吸收止血材料，其特征在于，所述的可吸收止血材料包含有聚谷氨酸钙。4. 如权利要求3所述的可吸收止血材料，其特征在于，所述的可吸收止血材料添加有 医用辅料。5. 如权利要求4所述的可吸收止血材料，其特征在于，所述的辅料为丙二醇、丙三醇、 山梨醇、甘露醇、木糖醇、聚乙二醇的一种或几种。6. 权利要求4所述的可吸收止血材料的制备方法，包括如下步骤： 1) 将聚谷氨酸钙和辅料分散在水中； 2) 将步骤1)得到的溶液冷冻干燥，再制成膜材料； 3) 将步骤2)得到的膜材料灭菌后即得到止血材料。7. 如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的步骤1)中聚谷氨酸钙和水的质量比 为1%~12%〇8. 如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的步骤3)中的灭菌方式为环氧乙烷灭 菌或辐照灭菌。
【专利摘要】本发明的目的提供一种止血材料，即一种使用聚谷氨酸钙制备的止血材料，具有良好的止血性能，不依赖于机体凝血机制，而且具有优良的生物相容性，在体内完全降解吸收；另外，生产上易于加工、灭菌及质量控制。本发明采用的基材聚谷氨酸是一种通过微生物发酵合成获得的多聚氨基酸材料，结构可控、生物可降解、生物相容性良好，且产品成型工艺简单，质量易于控制；其次，产品的止血过程不受正常凝血机制影响，对使用抗凝剂的病人、血小板和全血细胞低的病人仍能发挥止血作用；而且聚谷氨酸具有较好的生物黏附性，有利于控制组织的持续性渗血，止血能力较强。
【IPC分类】A61L15/64, A61L15/26
【公开号】CN105056280
【申请号】CN201510501972
【发明人】曾戎, 项金荣, 崔海栋
【申请人】青岛卫辽医用生物材料有限公司
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年8月17日