纯化方法两个部分。
[0026]其中，发酵方法的流程包括:摇瓶培养基的制备步骤一试管生物酶菌分离接入摇瓶培养基中进行培养发酵步骤一分液漏斗分离步骤。
[0027]分离纯化方法的流程包括:乙醇溶解步骤一去味及调节pH值步骤一第一次活性炭过滤步骤一第二次活性炭过滤步骤一减压浓缩步骤一过滤除菌步骤一成品。
[0028]发酵方法，具体而言，包括如下步骤:
S1.将摇瓶培养基原料置于烧杯中并利用纯化水进行溶解，溶解之后平均分装至摇瓶，然后每个摇瓶中添加纯马油并调节pH为8-9，灭菌得到摇瓶培养基，其中摇瓶培养基原料按重量份由如下原料组成:葡萄糖28-32重量份、酵母提取物14-16重量份、KH2P040.9-1.4重量份、CaC120.1-0.4重量份、氣化纳1-2重量份、硫酸儀1.5-4重量份、氣氧化钟2_5重量份，纯化水的用量为摇瓶培养基原料重量的4-5倍，纯马油添加量为每个摇瓶装瓶量的28-32%。摇瓶培养基灭菌采用蒸汽灭菌，该蒸汽灭菌步骤为:
a.预热:40分钟内升温至100°C；
b.保温灭菌:20-30分钟内升温至121-123°C，保温30分钟；
c.一次降温:30分钟降温到100C ;
d.二次降温:120分钟降温至30 °C。
[0029]S2.将试管生物酶菌分离接入摇瓶培养基中，用透气棉塞封口，放入恒温培养振荡器中，转速150rpm，培养温度30°C，发酵培养7天，得到发酵粗品。
[0030]S3.将发酵粗品常温放置12h熟成，把摇瓶中的物料转到分液漏斗里面分离，放下下层水层去除盐分和其它营养成分，上层即为发酵马油。
[0031 ] 其中，分离方法包括如下步骤:
S4.将步骤S3所获取的发酵马油经水洗一次，加入乙醇，溶解发酵马油，其中，乙醇的用量为发酵所投入马油原料的0.3倍。
[0032]S5.步骤S4中溶解的发酵马油通过纯化树脂柱去除异味并调节pH至4.5-6.5，收集液体。
[0033]S6.步骤S5中收集的液体，第一次加入活性炭(医药级粉末活性炭)，常温搅拌12h后快速滤纸过滤，再用慢速滤纸过滤收集滤液。
[0034]S7.步骤S6中收集的滤液第二次加入活性炭(医药级粉末活性炭)，常温搅拌12h后先用快速滤纸过滤再用慢速滤纸过滤，再用Ium滤纸过滤，再用0.45um滤纸过滤，再用
0.22um滤纸过滤收集滤液。
[0035]S8.步骤S7中收集的滤液经50°C减压浓缩完全并去除水分。
[0036]S9.用0.22um滤纸过滤除菌，得到发酵马油成品。
[0037]以下通过实施例进一步详细阐述本发明:
实施例1
发酵马油的生产方法依次包括以下步骤: I)称取葡萄糖30g、酵母提取物15g、KH2P04 1.2g、CaCl2 0.3g、氯化钠1.5g、硫酸镁3g、氢氧化钾3g放入烧杯中，加入纯化水246g溶解，分装至摇瓶中，每个摇瓶中装量100g，然后每个摇瓶中添加纯马油30g并调节pH为8-9，灭菌得到摇瓶培养基，此处，调节pH值的试剂为5mol/L氢氧化钾。
[0038]2)将试管生物酶菌种分别接入摇瓶培养基中，用透气棉塞封口，放入恒温培养振荡器中，转速150rpm，培养温度30 °C，发酵培养7天，得到发酵粗品。
[0039]3)常温放置12h熟成，把摇瓶中的物料转业到分液漏斗里面分离放下下层水层去除盐分和其他营养成分，上层即为发酵马油。
[0040]4)发酵马油经水洗一次，加入乙醇60g溶解发酵马油。
[0041]5)步骤4)中溶解的马油通过纯化树脂柱去除异味并调节pH至4.5-6.5，收集液体。
[0042]6)步骤5)中收集的液体，第一次加入活性炭2g常温搅拌12hr后快速滤纸过滤再用慢速滤纸过滤收集滤液。
[0043]7)步骤6)中收集的滤液第二次加入活性炭2g常温搅拌12hr后先用快速滤纸过滤再用慢速滤纸过滤，再用Ium滤纸过滤，再用0.45um过滤再用0.22um过滤收集滤液。使用多次过滤是为了完全去除产品中及其微小活性炭粉末及其他杂志颗粒。
[0044]8)步骤7)中收集的滤液经50摄氏度减压浓缩完全去除水分。
[0045]9)最后用0.22um过滤除菌包装成发酵马油成品，无菌包装中，包装桶和相关的一切设备都要灭菌。
[0046]利用上述方法所制备的发酵马油成品作为原料添加进化妆品即可。
[0047]马油产品在化妆品原料中的用途包括但不仅限于作为添加剂使用。
[0048]添加本发明所述发酵马油成品的化妆品具有更好的防止皮肤老化效果及保湿效果O
[0049]本领域的普通技术人员可以理解，上述实施方式是实现本发明的具体实施例，而在实际应用中，可以在形式上和细节上对其作各种改变，而不偏离本发明的精神和范围。
【主权项】
1.发酵马油的生产方法，其特征在于，该方法包括发酵方法和分离纯化方法，其中，所述发酵方法包括如下步骤: 51.将摇瓶培养基原料置于烧杯中并利用纯化水进行溶解，溶解之后平均分装至摇瓶，然后每个摇瓶中添加纯马油并调节pH为8-9，灭菌得到摇瓶培养基，其中摇瓶培养基原料按重量份由如下原料组成:葡萄糖28-32重量份、酵母提取物14-16重量份、KH2P040.9-1.4重量份、CaC120.1-0.4重量份、氣化纳1-2重量份、硫酸儀1.5-4重量份、氣氧化钟2_5重量份，纯化水的用量为摇瓶培养基原料重量的4-5倍，纯马油添加量为每个摇瓶装瓶量的28-32% ； 52.将试管生物酶菌分离接入摇瓶培养基中，用透气棉塞封口，放入恒温培养振荡器中，转速150rpm，培养温度30 °C，发酵培养7天，得到发酵粗品； 53.将发酵粗品常温放置12h熟成，把摇瓶中的物料转到分液漏斗里面分离，放下下层水层去除盐分和其它营养成分，上层即为发酵马油； 其中，分离方法包括如下步骤: 54.将步骤S3所获取的发酵马油经水洗一次，加入乙醇，溶解发酵马油，其中，乙醇的用量为发酵所投入马油原料的0.3倍； 55.步骤S4中溶解的发酵马油通过纯化树脂柱去除异味并调节pH至4.5-6.5，收集液体； 56.步骤S5中收集的液体，第一次加入活性炭，常温搅拌12h后快速滤纸过滤，再用慢速滤纸过滤收集滤液； 57.步骤S6中收集的滤液第二次加入活性炭，常温搅拌12h后先用快速滤纸过滤再用慢速滤纸过滤，再用Ium滤纸过滤，再用0.45um滤纸过滤，再用0.22um滤纸过滤收集滤液； 58.步骤S7中收集的滤液经50°C减压浓缩完全并去除水分； 59.用0.22um滤纸过滤除菌，得到发酵马油成品。2.根据权利要求1所述的发酵马油的生产方法，其特征在于，步骤SI中，摇瓶培养基灭菌采用蒸汽灭菌，该蒸汽灭菌步骤为: a.预热:40分钟内升温至100°C； b.保温灭菌:20-30分钟内升温至121-123°C，保温30分钟； c.一次降温:30分钟降温到100C ; d.二次降温:120分钟降温至30 °C。3.根据权利要求1所述的发酵马油的生产方法，其特征在于，步骤SI中，摇瓶培养基原料按重量份由如下原料组成: 葡萄糖30重量份、酵母提取物15重量份、KH2P041.2重量份、CaC120.3重量份、氯化钠1.5重量份、硫酸镁3重量份、氢氧化钾3重量份。4.根据权利要求1所述的发酵马油的生产方法，其特征在于，步骤SI中，纯马油添加量为每个摇瓶装瓶量的30%。5.根据权利要求1所述的发酵马油的生产方法，其特征在于，步骤SI中，利用5mol/L氢氧化钾调节pH值。6.根据权利要求1所述的发酵马油的生产方法，其特征在于，步骤S6、步骤S7中活性炭为医药级粉末活性炭。7.根据权利要求1所述的发酵马油的生产方法，其特征在于，步骤S9中，发酵马油成品采用无菌包装。8.根据权利要求1-7任意一项所述生产方法所得发酵马油成品在制备化妆品中的用途。9.根据权利要求1-7任意一项所述生产方法所得发酵马油成品制备得到的化妆品。
【专利摘要】本发明公开了发酵马油的生产方法及其用途，该生产方法包括发酵方法和分离纯化方法，发酵方法包括摇瓶培养基的制备步骤、试管生物酶菌分离接入摇瓶培养基中进行培养发酵步骤、分液漏斗分离步骤，分离方法包括乙醇溶解步骤、去味及调节pH值步骤、第一次活性炭过滤步骤、第二次活性炭过滤步骤、减压浓缩步骤以及过滤除菌步骤，最终得到发酵马油成品，该发酵马油成品的用途包括在化妆品原料中使用。本发明在发酵马油分离提取过程中使用的是纯化水，不使用大量有机溶剂和其他有害原料，减少了对操作人员的伤害；发酵马油的产出率高，产量高，成本低，发酵马油产品质量好，活性高。经检验得到的发酵马油纯度达到95%以上。
【IPC分类】A61K8/92, A61Q19/00, A61L2/07, A61Q19/08
【公开号】CN105193646
【申请号】CN201510692532
【发明人】张文源
【申请人】美嘉乐(上海)生物科技有限公司
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年10月23日