一种鱼用抗菌中草药复方及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于水产养殖领域，特别涉及一种鱼用抗菌（特别是链球菌）中草药复方 及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 细菌病是养殖鱼类的重要疾病，其中，链球菌引起罗非鱼大量死亡，造成巨大经济 损失，防治鱼类细菌病（包括罗非鱼链球菌病）是保障鱼类养殖业健康发展必不可少的措 施。一直以来主要使用化学药物防治包括链球菌病在内的各种细菌病，然而频繁使用化学 药物不仅诱导耐药病原菌株产生，而且药物残留还会引起水产品质量安全问题。中草药低 毒、低残留、副作用小、不易诱导病原菌产生抗药性，并且既含有抗菌成分，能直接杀菌，又 有增强免疫的物质，能改善机体的免疫状态，提高自身抗病能力，具有开发成高效安全绿色 渔药的前景，解决了防治链球菌等各种细菌病过程中耐药菌株产生和化学药物残留问题。
【发明内容】
[0003] 为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种鱼用抗菌中草 药复方。该中草药复方直接抗水产病原菌特别是链球菌（Streptococcus)，尤其适用于罗非 鱼养殖过程中链球菌病的防治。
[0004] 本发明的另一目的在于提供一种上述鱼用抗菌中草药复方的制备方法。
[0005] 本发明的再一目的在于提供一种上述鱼用抗菌中草药复方的应用。
[0006] 本发明的目的通过下述技术方案实现：
[0007] -种鱼用抗菌中草药复方，该中草药复方由以下按重量百分比计的原料药制备 而成：五倍子（Gallachinensis)10 ~20%，西青果（Terminaliachebula)20 ~40%， 石植皮（Punicagranatum)10 ~30%，鸡血藤（Spatholobicaullis)8 ~20%，水翁花 (Cleistocalyxoperculatus)6 ~ 20%〇
[0008] 所述的鱼用抗菌中草药复方的制备方法，包括以下操作步骤：
[0009] (1)将原料药五倍子、西青果、石榴皮、鸡血藤和水翁花，分别干燥后粉碎，过筛，得 到各原料药干粉；
[0010] (2)将步骤（1)所述的各原料药干粉按照上述重量百分比混合，得到鱼用抗菌中 草药复方干粉。
[0011] 步骤⑴所述的干燥是在烘箱中于55~65°C烘干；
[0012] 步骤⑴所述的过筛的目数为200~300目。
[0013] 步骤（2)所得的鱼用抗菌中草药复方干粉采用塑料袋密封，置于干燥处储存。
[0014] 上述的一种鱼用抗菌中草药复方的制备方法，还可以包括以下操作步骤：
[0015] (1)将原料药五倍子、西青果、石榴皮、鸡血藤和水翁花，分别干燥后粉碎，过筛，得 到各原料药干粉；
[0016](2)将步骤⑴所得各原料药干粉按上述重量百分比混合；加水浸泡后，连续煎煮 两次，过滤，合并滤液，得滤液A;
[0017] (3)将步骤（2)所得滤液A煮沸，浓缩，得到鱼用抗菌中草药复方液体制剂。
[0018] 步骤⑴所述的干燥是在烘箱中55~65°C烘干；
[0019] 步骤⑴所述的过筛的目数为40~60目。
[0020] 步骤⑵所述的加水的体积为各原料药干粉混合后的总重量的15~30倍；
[0021 ] 步骤⑵所述的浸泡的温度为60~80°C，浸泡时间为60分钟~120分钟；
[0022] 步骤（2)所述的煎煮两次的第一次煎煮是采用文火煎煮50分钟~60分钟，第二 次煎煮是采用文火煎煮40分钟~45分钟；
[0023] 步骤（2)所述的过滤是先用三层纱布过滤后，再用筛絹过滤。
[0024] 步骤（3)所述的鱼用抗菌中草药复方液体制剂的浓度按照500g原料药制备得到 2升鱼用抗菌中草药复方药液计算。
[0025] 上述的一种鱼用抗菌中草药复方在制备鱼类抗菌的饲料添加剂或饲料中的应用。
[0026] 所述的鱼类优选为罗非鱼；
[0027] 所述的抗菌优选为抗细菌；
[0028] 所述的抗细菌优选为抗链球菌。
[0029] 本发明鱼用抗菌中草药复方不论是干粉还是液体制剂都具有明显抗水产病原菌 尤其是抗链球菌作用。使用时将鱼用抗菌中草药复方干粉或液体制剂按照质量百分含量 2~4%的比例添加到饲料中投喂鱼，投喂量为鱼体重的3~5%。
[0030] 本发明的原理是：该复方中的每一种中草药都具有抗菌功能，如无乳链球菌 (streptococcusagalactiae)、海膝链球菌（Streptococcusiniae)、嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)、温和气单胞菌（Aeromonassobria)等。五倍子因含有縣质、没 食子酸和五没食子酰葡萄糖等成分破坏了细菌体内原生质和酶而起到抗菌作用；西青果为 诃子的干燥幼果，含有鞣质类、没食子酰葡萄糖类、没食子酰的简单酯类化合物、没食子酸 及其乙酯等化合物都有显著抗菌作用；石榴皮中的鞣质、黄酮类化合物是其抗菌的活性组 分；鸡血藤含有异黄酮类（如芒柄花素，芒柄花苷，卡亚宁）及毛蕊异黄酮等有效成分，能 抑制大肠杆菌（Escherichiacoli)和金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus);水翁花 含有挥发油抑制细菌生长。上述成分除了有抗菌作用外，还能增强免疫作用，并且相互之间 具有协同抗菌作用。
[0031] 本发明相对于现有技术，具有如下的优点及效果：
[0032] (1)本发明鱼用抗菌中草药复方具有显著抗水产病原菌特别是链球菌感染鱼的作 用，不会诱导耐药菌株产生，药物在水体和鱼体中易降解无残留，避免了抗生素药物残留造 成的水产品质量安全风险，以及诱导耐药菌株产生的医学风险。
[0033] (2)本发明原料药组合紧凑，生产方法简便，用药成本不高，适合自己配处方自制 药剂。
[0034] (3)该复方能有效抑杀多种水产病原菌，抗链球菌效果特别好，是理想的内服防治 鱼类细菌病尤其是罗非鱼链球菌病的安全绿色产品，该产品在环境和鱼体中易降解，无残 留，能保障水环境和水产品质量安全，同时避免诱导病原菌产生耐药菌株。
【具体实施方式】
[0035] 下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0036] 无乳链球菌（streptococcusagalactiae)在文献" 100种中草药水提物体外抑杀 无乳链球菌的药效研究[J].生态科学，2015, 03:26-30. "中公开；
[0037] 海豚链球菌（Streptococcusiniae)在文献"双重PCR快速鉴别无乳链球菌和海 豚链球菌[J].湖南农业大学学报（自然科学版），2010, 04:449-452. "中公开；
[0038] 嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila)在文献"42种中草药对嗜水气单胞菌的 体外抑菌试验[J].淡水渔业，2011，03:61-65. "中公开；
[0039] 温和气单胞菌（Aeromonassobria)在文献"灭活菌苗免疫的中华倒刺|巴外周血免 疫指标的变化[J].水产学报，2010, 04:626-634. "中公开；
[0040] 创伤弧菌（Vibriovulnificus)在文献"罗非鱼创伤弧菌的分离鉴定和药敏试验 [J].江西农业大学学报，2011，05:965-970. "中公开；
[0041] 迟缓爱德华氏菌（Edwardsiellatarda)在文献"鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕的构建 及制备条件优化[J].水产学报，2012, 11:1754-1762. "中公开；
[0042] 维氏气单胞菌（Aeromonasveronii)在文献"罗非鱼维氏气单胞菌的分离鉴定和 药敏试验[J].水生态学杂志，2011，03:132-136. "中公开。
[0043] 实施例1
[0044] (1)将原料药分别在烘箱中于55°C烘干后粉碎，过40目筛，得到各原料药干粉；
[0045] (2)将步骤（1)所得各原料药干粉按如下重量混合均匀：五倍子70g，西青果 180g，石榴皮150g，鸡血藤50g，水翁花50g，再加7. 5升60°C水浸泡，并保持60°C 2h，接着 加热至沸腾，再文火煎煮50分钟，用3层纱布过滤后，再用筛絹过滤，药渣再加7. 5升水加 热至沸腾，再文火煎煮45分钟，用前法过滤，合并两次滤液，得滤液A;
[0046] (3)将滤液A煮沸，浓缩至2升，为鱼用抗菌中草药复方液体制剂。
[0047] 本实施例的五倍子产自四川，西青果产自云南，石榴皮产自山东，鸡血藤产自广 东，水翁花产自广西，以下各实施例的中草药产地与此相同。
[0048] 实施例2
[0049](1)将原料药分别在烘箱中于60°C烘干后粉碎，过50目筛，得到各原料药干粉；
[0050] (2)将步骤（1)所得各原料药干粉按如下重量混合均匀：五倍子100g，西青果 100g，石榴皮150g，鸡血藤75g，水翁花75g，放入15升70°C水中浸泡，保持70°C100分钟， 接着加热至沸腾，再文火煎煮55分钟，用3层纱布过滤后，再用筛絹过滤，药渣再加15升水 加热至沸腾，再文火煎煮40分钟，用前法过滤，合并两次滤液，得滤液A;
[0051] (3)将滤液A煮沸，浓缩至2升，为鱼用抗菌中草药复方液体制剂。
[0052] 实施例3
[0053] (1)将原料药分别在烘箱中于65°C烘干后粉碎，过60目筛，得到各原料药干粉；
[0054] (2)将步骤⑴所得各原料药干粉按如下重量混合均匀：五倍子80g，西青果 200g，石榴皮150g，鸡血藤40g，水翁花30g，放入10升80°C水中浸泡，保持80°C60分钟，接 着加热至沸腾，再文火煎煮50分钟，用3层纱布过滤后，再用筛絹过滤，药渣再加10升水加 热至沸腾，再文火煎煮45分钟，用前法过滤，合并两次滤液，得滤液A;
[0055] (3)将滤液A煮沸，浓缩至2升，为鱼用抗菌中草药复方液体制剂。
[0056] 实施例4
[0057] (1)将原料药分别在烘箱中于55°C烘干后粉碎，过200目筛，得到各原料药干粉；
[0058] (2)将步骤（1)所得各原料药干粉按如下重量混合均匀：五倍子50g，西青果 2〇〇g，石榴皮50g，鸡血藤100g，水翁花100g，得到鱼用抗菌中草药复方干粉；将该鱼用抗菌 中草药复方干粉用塑料袋以〇. 5kg每袋分装密封，置于干燥处储存。
[0059] 实施例5
[0060] (1)将原料药分别在烘箱中于60°C烘干后粉碎，过250目筛，得到各原料药干粉；
[0061] (2)将步骤（1)所得各原料药干粉按如下重量混合均匀：五倍子100g，西青果 170g，石榴皮100g，鸡血藤70g，水翁花60g，得到鱼用抗菌中草药复方中草药干粉；将该鱼 用抗菌中草药复方干粉用塑料袋以0. 5kg每袋分装密封，置于干燥处储存。
[0062] 实施例6
[0063] (1)将原料药分别在烘箱中于65°C烘干后粉碎，过300目筛，得到各原料药干粉；
[0064