，将1 X IO5个/mL的小鼠B16黑色素细胞接种于含10% (体积分数)小牛血清 的DMEM培养基的培养瓶中，在37°C、5%C02培养箱中培养，每3天用0.化%膜酶消化传代一次。
[0060] 细胞增殖率的测定 待细胞生长到对数期，用0.25%膜酶消化，调整到细胞2 X IO4个/mL,接种于96孔板中， 每孔10化L。置于培养箱中培养2地后，弃上清液，添加待测的中草药提取成分。每一浓度设8 个孔，共设S个浓度，分别为0.0 lmg/ml、0 . Img/ml和Img/ml，对照组不加药物，代之同量维 持液。解育72h。
[0061] 药物作用72h后，每孔加入5g/L MTT溶液10化，4h后弃上清液，每孔加入DMSOlO化 L，振荡IOmin左右，在酶标仪上检测各孔吸光度值，波长为490nm。
[0062] 细胞增殖率=药物组平均吸光度值/对照组平均吸光度值X 100%。
[0063] 统计学方法 采用SPSS 11.0系统软件处理数据，计量资料用(是±s)表示，组间比较采用单因素方 差分析，计数资料采用^检验，P<〇.05为差异有统计学意义。
[0064] 结果 不同浓度下黑色素细胞增殖情况，见表1。
[0065] 表1不同浓度下黑色素细胞增殖情况
皮肤的颜色主要取决于皮肤里所含黑色素细胞的多少，与对照组相比，随着中草药提 取成分的添加，可W显著降低黑色素细胞的增殖情况，因此，采用本发明提供的中药药膏可 W很好的起到美白的效果。
[0066] 实施例7人体实验 仪器 美能达CR-IO型色差仪（日本柯尼卡美能达公司）。
[0067] 产品 本发明实施例5制备的中药药膏。
[0068] 人体试验受试对象及分组 选择自愿受试人190例，年龄18-24岁，皮肤健康，无化妆品过敏史，分为两组，第一组 采用本发明实施例5提供的中药药膏，第二组不采用任何护肤品。
[0069] 受试涂抹方法 受试者左、右前臂臂弯处，连续测试6次，取平均值(先测右臂再测左臂）；使用化妆品前 IcU W及使用1周、2周、3周、4周后。
[0070] 测试指标 采用色差仪测定左右臂色差A L。A L为正值，表示左臂较右臂偏白，A L为负值，表示左 臂较右臂偏黑。
[00川统计学方法 采用SPSS 11.0系统软件处理数据，计量资料用(惡±s)表示，组间比较采用单因素方 差分析，计数资料采用^检验，P<0.05为差异有统计学意义。
[0072] 结果 使用后与使用前相比各组的A L值变化，结果见表2。
[0073] 表2使用后与使用前相比各组的A L值变化
在Lab色度系统中，Lab色度系统表明了颜色在色空间的位置，并加 W量化，使颜色变化 W数值的形式表达，肉眼不能看见的细微变化也可反映出来。在使用的过程中，第一组的A L明显发生了变化，随着使用时间的增加 ，A L值均发生差异性变大。表明配制的中药药膏均 有美白效果，并随着使用时间的增加美白效果越明显。
[0074] 所有上述的首要实施运一知识产权，并没有设定限制其他形式的实施运种新产品 和/或新方法。本领域技术人员将利用运一重要信息，上述内容修改，W实现类似的执行情 况。但是，所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。
[0075] W上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任 何熟悉本专业的技术人员可能利用上述掲示的技术内容加 W变更或改型为等同变化的等 效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对W上实施例所 作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
【主权项】
1. 一种具有美白皮肤功效的中药组合物，其特征在于:原料药包括黄精、白芷、茜草、巴 戟天、桑白皮、白头翁、甘草、鸡血藤、枸杞子、女贞子、白术、知母、升麻、冬凌草、大青叶、云 苔草、马尾连、牛筋草、蒲黄、积雪草和白花蛇舌草。2. 如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于:各原料药的重量分别为黄精25g~35g、 白]E40g~50g、茜草25g~35g、巴戟天20g~30g、桑白皮15g~25g、白头翁20g~30g、甘草25g~ 35g、鸡血藤20g~30g、枸杞子30g~40g、女贞子20g~30g、白术30g~40g、知母15g~25g、升麻10g ~20g、冬凌草25g~35g、大青叶25g~35g、云苔草25g~35g、马尾连15g~25g、牛筋草10g~20g、蒲 黄25g~35g、积雪草25g~35g和白花蛇舌草20g~30g。3. 如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于:各原料药的重量分别为黄精28g~ 32g、白芷43g~47g、茜草28g~32g、巴戟天23g~27g、桑白皮18g~22g、白头翁23g~27g、甘草28g ~32g、鸡血藤23g~27g、枸杞子33g~37g、女贞子23g~27g、白术33g~37g、知母18g~22g、升麻 13g~17g、冬凌草28g~32g、大青叶28g~32g、云苔草28g~32g、马尾连18g~22g、牛筋草13g~ 17g、蒲黄28g~32g、积雪草28g~32g和白花蛇舌草23g~27g。4. 如权利要求1至3所述的中药组合物，其特征在于:各原料药的重量分别为黄精30g、 白]E45g、茜草30g、巴戟天25g、桑白皮20g、白头翁25g、甘草30g、鸡血藤25g、枸杞子35g、女 贞子25g、白术35g、知母20g、升麻15g、冬凌草30g、大青叶30g、云苔草30g、马尾连20g、牛筋 草15g、蒲黄30g、积雪草30g和白花蛇舌草25g。5. 权利要求1至4所述中药组合物的制备方法，其特征在于，包括： 第一步，将所述中草药提取成分的各原料药分别放在高压锅蒸煮杀菌20-40分钟，晾 干，获得无菌原料药； 第二步，将黄精、白J￡、白头翁、甘草、鸡血藤、枸杞子、白术、知母、大青叶、云苔草、牛筋 草和白花蛇舌草按上述重量送入混合机中搅拌混合均匀，获得混合物，将混合物装入渗漉 筒中，每100g混合物加醇浓度为70%~80%的乙醇300ml~500ml，在25°C~35°C的条件下浸泡20 小时~30小时，调节渗漉筒阀门，使乙醇浸泡液慢慢滴出，滴出速度为每分钟2~4mL，放弃前 l〇〇ml，随后开始收集滴出液，收集的液滴的颜色由浓转淡，待收集的液滴无色为止，浓缩， 除去乙醇溶剂，干燥，粉碎，获得第一粉末； 第三步，将余下原料药组分按上述重量送入混合机中搅拌混合均匀，获得混合物，加相 对于混合物4~6倍量的水，煮沸3~5小时，过滤，滤渣再次加入相对于混合物1~2倍量的 水，煮沸2~4小时，过滤，合并滤液，减压浓缩除去水，干燥，粉碎，获得第二粉末； 第四步，将第一粉末和第二粉末混合，采用超微粉碎机进一步粉碎，粉碎成200目的粉 末。
【专利摘要】本发明提供了一种具有美白皮肤功效的中药组合物，其原料药包括黄精、白芷、茜草、巴戟天、桑白皮、白头翁、甘草、鸡血藤、枸杞子、女贞子、白术、知母、升麻、冬凌草、大青叶、云苔草、马尾连、牛筋草、蒲黄、积雪草和白花蛇舌草。该中药组合物药性稳定、药力持久，而且对皮肤作用温和、刺激性小、安全性高、疗效显著。
【IPC分类】A61K8/97, A61K36/899, A61P17/00, A61Q19/02
【公开号】CN105497627
【申请号】CN201510996609
【发明人】刘霞
【申请人】刘霞
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月27日